結合cd22的人抗體及其用途的製作方法

2023-05-08 03:20:11 2

專利名稱：：結合cd22的人抗體及其用途的製作方法結合CD22的人抗體及其用途本申請為2007年11月30日提交的、發明名稱為「結合⑶22的人抗體及其用途」的PCT申請PCT/US2007/086152的分案申請，所述PCT申請進入中國國家階段的日期為2009年7月27日，申請號為200780050465.6。
背景技術：
：CD22是唾液酸黏附素家族的細胞表面I型的糖蛋白。除其他名稱外，CD22在本領域內又稱為BL-CAM、B3、Leu-14、以及Lyb_8。CD22最初由抗體抗-S-HCL-l(Schwarting,R等人(1985)Blood65:974-983)、HD39(Dorken，B.等人(1986)J.1mmunol.136:4470-4479)、以及RFB4(Campana，D.等人(1985)J.1mmunol.134:1524-1530)進行表徵。已確定CD22是結合含a2，6-連接的唾液酸的配體的類凝集素黏附分子，以及B細胞抗原受體(BCR)信號的調節物。從結構上來說，CD22具有多個剪切變體，但是在人中最主要的形式是包含七個免疫球蛋白樣結構域的細胞外區。已經表明⑶22由B淋巴細胞特異地表達，並作為B淋巴細胞活化的負性調節物在功能上是重要的(由Nitschke,L.(2005)Curr.0pin.Tmmuno1.17:290-297以及Tedder,T.F.等人(2005)Adv.1mmunol.88:1-50綜述)。在使用表達不與a2，6_連接的唾液酸配體相互作用的突變的CD22分子的基因靶向性小鼠的研究中，已確定某些功能(諸如細胞表面⑶22的表達、IgM及MHCII類在成熟B細胞上的表達、邊緣區B細胞群體的維持、最佳的B細胞抗原受體誘導的增殖、以及B細胞更新速率(turnoverrate))受⑶22配體結合調控，然而其他功能(諸如⑶22磷酸化、BCR連接後⑶22對鈣動員的負性調節、SHP-1向⑶22的募集、以及B細胞的遷移)不需要配體的參與(Poe，J.C.等人(2004)Nat.1mmunol.5:1078-1087)。⑶22被認為是抑制性共受體，通過設定阻止B細胞的過度刺激的信號閾值而下調BCR信號。通過細胞質的ITIM(基於免疫受體酪氨酸的抑制性基序)磷酸化，隨後通過酪氨酸磷酸酶SHP-1或者脂質磷酸酶SHIIP的募集，使這種抑制性共受體發生活化(由Nitschke,L.(2005)Curr.0pin.1mmunol.17:290-297綜述)。此外，已發現CD22在控制CD19/CD21-Src-家族蛋白酪氨酸激酶(PTK)擴增途徑的調節襻中起核心作用，該擴增途徑調節基本的信號閾值，並在BCR連接後強化Src-家族激酶的活化(由Tedder，T.F.等人(2005)Adv.1mmunol.88:1-50綜述)。大約60%至80%的B細胞惡性腫瘤表達⑶22，由此使其成為被動免疫療法的潛在靶標(參見例如，Cesano，A.和Gayko,U.(2003)Semin.0ncol.30:253-257)。而且，已建議將經CD22靶向的B細胞活性的選擇性調諧作為治療自身免疫病的一種手段(參見例如，請參考Steinfeld,S.D.和Youinou,P.(2006)Expert.0pin.Biol.Ther.6:943-949)已對一種人源化抗-⑶22單克隆抗體,依帕珠單抗(epratuzumab)進行說明(Coleman,M.等人(2003)Clin.CancerRes.9:3991S_3994S)。然而，仍需要額外的抗-CD22反應物。概沭本公開提供了分離的單克隆抗體，特別是人單克隆抗體，這些抗體與人CD22相結合併且表現出多種所希望的特性。這些特性包括結合至⑶22的高親和力、內化進入⑶22+細胞的能力、介導抗體依賴性細胞毒作用(ADCC)的能力、促進由B細胞受體(BCR)刺激誘導的Ramos細胞的細胞死亡、和/或當與細胞毒素綴合時抑制表達CD22的細胞在體內的生長。本發明的抗體可被用於，例如，治療CD22+的B細胞惡性腫瘤和/或治療不同的炎症或自身免疫病症。在一方面，本公開涉及分離的人單克隆抗體、或該抗體的抗原結合部分，其中該抗體與人CD22相結合併表現出以下特性中至少一種特性:(a)內化進入CD22+細胞；(b)表現出針對⑶22+細胞的抗體依賴性細胞毒作用(ADCC)；(c)促進由B細胞受體(BCR)刺激而誘導的Ramos細胞的細胞死亡；以及(d)當綴合至細胞毒素時抑制⑶22-表達細胞在體內的生長。在另一個優選實施方案中，該抗體表現出特性(a)、(b)、(c)、以及(d)中至少兩種特性。在又一個優選實施方案中，該抗體表現出具有特性(a)、(b)、(C)、以及(d)中三種特性。在另一個實施方案中，該抗體表現出具有特性(a)、(b)、(c)、以及(d)全部四種特性。在某些實施方案中，該抗體對Ramos細胞沒有直接的抗增殖作用。在某些實施方案中，該抗體不誘導Ramos細胞中的鈣運轉。在某些實施方案中，該抗體在Ramos細胞上不介導依賴於補體的細胞毒性(CDC)。優選地，該抗體以高親和力結合人⑶22，如以！父川^或更小的^或者以丄父川為或更小的KD、或者以！父川^或更小的^或者以IXKTkiM或更小的KD、或者以7X10_nM或更小的Kd。在另一方面，本公開涉及分離的人單克隆抗體，或其抗原結合部分，其中該抗體與參考抗體(referenceantibody)交叉競爭而結合到⑶22上,其中該參考抗體包括:(a)重鏈可變區，其包括SEQIDNO:31的胺基酸序列，以及輕鏈可變區，其包括SEQIDNO:35的胺基酸序列；或(b)重鏈可變區，其包括SEQIDNO:32或61的胺基酸序列，以及輕鏈可變區，其包括SEQIDNO:36的胺基酸序列；或(c)重鏈可變區，其包括SEQIDNO:33的胺基酸序列，以及輕鏈可變區，其包括SEQIDNO:37或38的胺基酸序列；或(d)重鏈可變區，其包括SEQIDNO:34的胺基酸序列，以及輕鏈可變區,其包括SEQIDNO:39或40的胺基酸序列；或(e)重鏈可變區，其包括SEQIDNO:81的胺基酸序列，以及輕鏈可變區,其包括SEQIDNO:84或85的胺基酸序列；或(f)重鏈可變區，其包括SEQIDNO:82或83的胺基酸序列，以及輕鏈可變區，其包括SEQIDNO:86的胺基酸序列；其中該抗體特異地結合人⑶22。在又一方面，本發明涉及分離的單克隆抗體、或該抗體的抗原結合部分，其包括重鏈可變區，該重鏈可變區是人Vh7-4.1基因、人Vh4-34基因、人Vh5-51基因、或人Vh1_69基因的產物或衍生於所述基因，其中該抗體特異地結合人CD22。在又一方面，本發明涉及分離的單克隆抗體、或該抗體的抗原結合部分，其包括輕鏈可變區，該輕鏈可變區是人VA2b2基因、人VkL6基因、人VkA27基因、人VkAlO基因，或人L18基因的產物或衍生於所述基因，其中該抗體特異地結合人CD22。在又另一方面，本發明涉及分離的抗體，或其抗原結合部分，其包括:(a)重鏈可變區，該重鏈可變區是人Vh7_4.1基因的產物或衍生於所述基因，以及輕鏈可變區，該輕鏈可變區是人VA2b2基因的產物或衍生於所述基因；或者(b)重鏈可變區，該重鏈可變區是人VH4_34基因的產物或衍生於所述基因，以及輕鏈可變區，該輕鏈可變區是人VkL6基因的產物或衍生於所述基因；或者(c)重鏈可變區，該重鏈可變區是人VH5_51基因的產物或衍生於所述基因，以及輕鏈可變區，該輕鏈可變區是人VkA27或AlO基因的產物或衍生於所述基因；(d)重鏈可變區，該重鏈可變區是人VH1_69基因的產物或衍生於所述基因，以及輕鏈可變區，該輕鏈可變區是人VkL6基因的產物或衍生於所述基因；或者(e)重鏈可變區，該重鏈可變區是人VH1_69基因的產物或衍生於所述基因，以及輕鏈可變區，該輕鏈可變區是人VkL18或A27基因的產物或衍生於所述基因；其中該抗體特異地結合人⑶22。在另一方面，本公開提供了分離的單克隆抗體、或其抗原結合部分，其包括:重鏈可變區，該重鏈可變區包括⑶R1、⑶R2、以及⑶R3序列；以及輕鏈可變區，該輕鏈可變區包括⑶R1、⑶R2、以及⑶R3序列，其中:(a)該重鏈可變區⑶R3序列包括胺基酸序列，該胺基酸序列選自:SEQIDNO:9-12以及69-71的胺基酸序列，以及它們的保守性修飾；(b)該輕鏈可變區CDR3序列包括胺基酸序列，該胺基酸序列選自:胺基酸序列SEQIDNO:25-30,78-80,以及它們的保守性修飾；以及(C)該抗體結合至人⑶22上。在優選的實施方案中，這一抗體也具有以下特徵中的一個或多個特徵:內化進入CD22+細胞，介導ADCC活力和/或促進由BCR刺激而誘導的Ramos細胞的細胞死亡，和/或當綴合至細胞毒素時抑制表達CD22細胞在體內的生長。優選地，重鏈可變區CDR2序列包括選自以下的胺基酸序列:SEQIDNO:5_8、60、66-68的胺基酸序列，以及它們的保守性修飾；並且輕鏈可變區CDR2序列包括選自以下的胺基酸序列:SEQIDNO:19-24,75-77的胺基酸序列，以及它們的保守性修飾；優選地，重鏈可變區CDRl序列包括選自以下的胺基酸序列:SEQIDNO:1_4、63_65的胺基酸序列，以及它們的保守性修飾；輕鏈可變區CDRl序列包括選自以下的胺基酸序列:SEQIDN0:13-18、72-74的胺基酸序列，以及它們的保守性修飾。優選的組合包括:(a)重鏈可變區CDRl，其包括SEQIDNO:1；(b)重鏈可變區CDR2，其包括SEQIDNO:5；(c)重鏈可變區CDR3，其包括SEQIDNO:9；(d)輕鏈可變區CDRl，其包括SEQIDNO:13；(e)輕鏈可變區CDR2，其包括SEQIDNO:19;以及(f)輕鏈可變區CDR3，其包括SEQIDNO:25。另一種優選的組合包括:(a)重鏈可變區CDRl，其包括SEQIDNO:2；(b)重鏈可變區CDR2，其包括SEQIDNO:6或60;(c)重鏈可變區CDR3，其包括SEQIDNO:10；(d)輕鏈可變區CDRl，其包括SEQIDNO:14；(e)輕鏈可變區CDR2，其包括SEQIDNO:20;以及(f)輕鏈可變區CDR3，其包括SEQIDNO:26。另一種優選的組合包括:(a)重鏈可變區CDRl，其包括SEQIDNO:3；(b)重鏈可變區CDR2，其包括SEQIDNO:7；(c)重鏈可變區CDR3，其包括SEQIDNO:11；(d)輕鏈可變區CDRl，其包括SEQIDNO:15或16;(e)輕鏈可變區CDR2，其包括SEQIDNO:21或22;(f)輕鏈可變區CDR3，其包括SEQIDNO:27或28。另一種優選的組合包括:(a)重鏈可變區CDRl，其包括SEQIDNO:4；(b)重鏈可變區CDR2，其包括SEQIDNO:8；(c)重鏈可變區CDR3，其包括SEQIDNO:12；(d)輕鏈可變區CDRl，其包括SEQIDNO:17或18;(e)輕鏈可變區CDR2，其包括SEQIDNO:23或24;(f)輕鏈可變區CDR3，其包括SEQIDNO:29或30。另一種優選的組合包括:(a)重鏈可變區CDRl，其包括SEQIDNO:63；(b)重鏈可變區CDR2，其包括SEQIDNO:66；(c)重鏈可變區CDR3，其包括SEQIDNO:69；(d)輕鏈可變區CDRl，其包括SEQIDNO:72或73;(e)輕鏈可變區CDR2，其包括SEQIDNO:75或76;以及(f)輕鏈可變區CDR3，其包括SEQIDNO:78或79。另一種優選的組合包括:(a)重鏈可變區CDRl，其包括SEQIDNO:64或65；(b)重鏈可變區CDR2，其包括SEQIDNO:67或68；(c)重鏈可變區CDR3，其包括SEQIDNO:70或71;(d)輕鏈可變區CDRl，其包括SEQIDNO:74；(e)輕鏈可變區CDR2，其包括SEQIDNO:77;以及；(f)輕鏈可變區CDR3，其包括SEQIDNO:80。本公開的其他優選抗體，或這些抗體的抗原結合部分包括:(a)重鏈可變區，其包括選自以下的胺基酸序列:SEQIDNO:31_34、61以及81-83;以及(b)輕鏈可變區，其包括選自以下的胺基酸序列:SEQIDNO:35-40以及84_86；其中該抗體特異地結合人⑶22。一種優選的組合包括:(a)重鏈可變區，其包括SEQIDNO:31的胺基酸序列；以及(b)輕鏈可變區，其包括SEQIDNO:35的胺基酸序列。另一種優選的組合包括:(a)重鏈可變區，其包括SEQIDNO:32或61的胺基酸序列；以及(b)輕鏈可變區，其包括SEQIDNO:36的胺基酸序列。另一種優選的組合包括:(a)重鏈可變區，其包括SEQIDNO:33的胺基酸序列；以及(b)輕鏈可變區，其包括SEQIDNO:37或38的胺基酸序列。另一種優選的組合包括:(a)重鏈可變區，其包括SEQIDNO:34的胺基酸序列；以及(b)輕鏈可變區，其包括SEQIDNO:39或40的胺基酸序列。另一種優選的組合包括:(a)重鏈可變區，其包括SEQIDNO:81的胺基酸序列；以及(b)輕鏈可變區，其包括SEQIDNO:84或85的胺基酸序列。另一種優選的組合包括:(a)重鏈可變區，其包括SEQIDNO:82或83的胺基酸序列；以及(b)輕鏈可變區，其包括SEQIDNO:86的胺基酸序列。在本公開的另一方面，提供了多種抗體、或它們的抗原結合部分，它們與上述抗體中的任何抗體競爭而結合在⑶22上。例如，本公開的抗體可以是全長抗體，例如IgGl或IgG4同種型。可選地，這些抗體可以是抗體片段，例如Fab、Fab』或Fab』2片段，或單鏈抗體。本公開還提供了免疫綴合物(immunoconjugate),其包括連接至治療劑(例如細胞毒素或放射性同位素)的本公開的抗體、或其抗原結合部分。在特別優選的實施方案中，本發明提供了免疫綴合物，其包含連接至化合物「細胞毒素A」(例如，經硫醇鍵合)的本公開的抗體，或其抗原結合部分。本公開還提供了雙特異性分子，其包含本公開的抗體，或其抗原結合部分，它們連接至第二功能部分，該部分具有不同於所述抗體，或其抗原結合部分的結合特異性。還提供了包含本公開的抗體、或其抗原結合部分、或免疫綴合物、或雙特異性分子以及可藥用的載體的組合物。本公開還包括編碼本公開的抗體、或這些抗體的抗原結合部分的核酸分子，以及包括此類核酸的表達載體以及包括此類表達載體的宿主細胞。還提供了使用包括此類表達載體的宿主細胞製備抗-CD22抗體的多種方法，並且可包括的步驟有(i)在宿主細胞中表達抗體以及Qi)從宿主細胞中分離該抗體。本公開的另一方面涉及抑制表達⑶22的腫瘤細胞的生長的方法。方法包括用本發明的抗體，或其抗原結合部分與表達CD22的腫瘤細胞相接觸，這樣使表達CD22的腫瘤細胞的生長受到抑制。該腫瘤細胞可以是，例如，B細胞淋巴瘤，諸如非霍奇金淋巴瘤。在一些實施方案中，抗體，或其抗原結合部分被綴合至治療劑上，諸如細胞毒素。本公開的另一方面涉及治療受試者的炎症或自身免疫病症的方法。方法包括向受試者施用本發明的抗體，或其抗原結合部分，這樣使受試者的炎症或者自體免疫病症得到治療。自身免疫病症可以是，例如，系統性紅斑狼瘡或類風溼性關節炎。本公開還提供了以高親和性力特異地結合⑶22的分離的抗-⑶22抗體-配偶體分子綴合物，尤其是包含人單克隆抗體的那些綴合物。此類抗體-配偶體分子綴合物中的某些綴合物能被內化進入表達CD22的細胞中並且能介導抗體依賴性細胞毒作用。本公開也提供利用在此披露的抗-CD22抗體-配偶體分子綴合物治療癌症，例如B細胞淋巴瘤，如非霍奇金淋巴瘤的方法。在另一方面，本發明提供了治療受試者的炎症或自身免疫病症的方法。方法包括向受試者施用本發明的抗體，或其抗原結合部分，這樣使受試者的炎症或自身免疫病症得到治療。優選的自身免疫病症的非限制性實例包括系統性紅斑狼瘡以及類風溼性關節炎。自身免疫病症的其他實例包括炎症性腸病(包括潰瘍性結腸炎以及克隆病)、I型糖尿病、多發性硬化、乾燥症候群、自身免疫性甲狀腺炎(包括格雷夫斯病以及橋本甲狀腺炎)、銀屑病以及腎小球腎炎。還提供了包含本公開的與配偶體分子相綴合的抗體、或其抗原結合部分的組合物。可以有利地與如在此披露的抗體配偶體分子綴合物中的抗體相綴合的配偶體分子包括但不限於:作為藥物的分子、毒素、標記分子(例如放射性同位素)、蛋白質、以及治療劑。還在此披露了包含抗體-配偶體分子綴合物以及可藥用的載體的組合物。在一方面，此類抗體-配偶體分子綴合物通過化學接頭被綴合。在某些實施例中，該接頭是肽基接頭，且在此被描述為(L4)p-F-(Ll)m。其它接頭包括肼和二硫化物接頭，在此分別被描述為(L4)P-H-(Ll)m或(L4)p-J-(Ll)m。除了被附著在配偶體上的接頭之外，本發明還提供了可剪切的連接臂，這些連接臂適於附著至基本上任何分子種類。另一方面，本發明涉及抑制表達⑶22的腫瘤細胞的生長的方法。該方法包括將表達CD22的腫瘤細胞與本公開的抗體-配偶體分子綴合物相接觸,這樣使CD22-腫瘤細胞的生長受到抑制。在優選的實施方案中，該配偶體分子是治療劑，例如細胞毒素。尤其優選的表達CD22的腫瘤細胞是B細胞淋巴瘤，例如非霍奇金淋巴瘤。其他類型的表達CD22的腫瘤細胞包括伯基特淋巴瘤以及B細胞慢性淋巴細胞白血病。在又其他實施方案中，表達⑶22的腫瘤細胞來自選自以下的癌症:伯基特淋巴瘤以及B細胞慢性淋巴細胞白血病。在另一方面，本發明涉及治療受試者癌症的方法。該方法包括向受試者施用本公開的抗體-配偶體分子綴合物，這樣使受試者的癌症得到治療。在優選的實施方案中，該配偶體分子是治療劑，例如細胞毒素。尤其優選的用於治療的癌症是B細胞淋巴瘤，例如非霍奇金淋巴瘤。其他類型的癌症包括伯基特淋巴瘤以及B細胞慢性淋巴細胞白血病。參照下文的非限制性的詳細說明與實施例，本公開的其他特徵與優點將變得很清楚。在本申請全文中引用的所有參考文獻的內容、Genbank登錄號、專利、以及已公開的專利申請的內容都明確地通過引用併入本文。附圖簡要說明圖1A示出了12C5人單克隆抗體的重鏈可變區的核苷酸序列(SEQIDNO:41)、以及胺基酸序列(SEQIDNO:31)o描繪了CDR1(SEQIDNO:1)、CDR2(SEQIDN0:5)、以及CDR3(SEQIDNO:9)區，並指明了V、D、以及J的種系來源。圖1B示出了12C5人單克隆抗體的入輕鏈可變區的核苷酸序列(SEQIDNO:45)、以及胺基酸序列(SEQIDNO:35)描繪了CDRl(SEQIDNO:13)、CDR2(SEQIDNO:19)、以及CDR3(SEQIDNO:25)區，並指明了V與J的種系來源。圖2A示出了19A3人單克隆抗體的重鏈可變區的核苷酸序列(SEQIDNO:42)、以及胺基酸序列(SEQIDNO:32)，以及⑶22.1重組抗體的重鏈可變區的核苷酸序列以及胺基酸序列。19A3的重鏈可變區的序列與CD22.1的重鏈可變區的序列相同。描繪了CDRl(SEQIDNO:2)、CDR2(SEQIDNO:6)、以及CDR3(SEQIDNO:10)區，並指明了V、D、以及J的種系來源。圖2B示出了19A3人單克隆抗體的k輕鏈可變區的核苷酸序列(SEQIDNO:46)、以及胺基酸序列(SEQIDNO:36)，以及CD22.1重組人單克隆抗體的k輕鏈可變區的核苷酸序列以及胺基酸序列。⑶22.1和⑶22.2的K輕鏈可變區的序列與19A3的k輕鏈可變區的序列相同。描繪了CDRl(SEQIDNO:14)、CDR2(SEQIDNO:20)、以及CDR3(SEQIDNO:26)區，並指明了V與J的種系來源。圖2C示出了⑶22.2重組人單克隆抗體的重鏈可變區的核苷酸序列(SEQIDNO:62)、以及胺基酸序列(SEQIDNO:61)。描繪了CDRl(SEQIDNO:2)、CDR2(SEQIDNO:60)、以及CDR3(SEQIDNO:10)區，並指明了V與J的種系來源。圖3A示出了16F7人單克隆抗體的重鏈可變區的核苷酸序列(SEQIDNO:43)、以及胺基酸序列(SEQIDNO:33)描繪了CDRl(SEQIDNO:3)、CDR2(SEQIDN0:7)、以及CDR3(SEQIDNO:11)區，並指明了V、D、以及J的種系來源。圖3B示出了16F7人單克隆抗體的VK.1k輕鏈可變區的核苷酸序列(SEQIDNO:47)、以及胺基酸序列(SEQIDNO:37)描繪了CDRl(SEQIDNO:15)、CDR2(SEQIDNO:21)、以及CDR3(SEQIDNO:27)區，並指明了V、以及J的種系來源。圖3C示出了16F7人單克隆抗體的VK.2K輕鏈可變區的核苷酸序列(SEQIDNO:48)、以及胺基酸序列(SEQIDNO:38)描繪了CDRl(SEQIDNO:16)、CDR2(SEQIDNO:22)、以及CDR3(SEQIDNO:28)區，並指明了V與J的種系來源。圖4A示出了23C6人單克隆抗體的重鏈可變區的核苷酸序列(SEQIDNO:44)、以及胺基酸序列(SEQIDNO:34)描繪了CDRl(SEQIDNO:4)、CDR2(SEQIDNO:8)、以及CDR3(SEQIDNO:12)區，並指明了V、D、以及J的種系來源。圖4B示出了23C6人單克隆抗體的VK.1k輕鏈可變區的核苷酸序列(SEQIDNO:49)、以及胺基酸序列(SEQIDNO:39)描繪了CDRl(SEQIDNO:17)、CDR2(SEQIDNO:23)、以及CDR3(SEQIDNO:29)區，並指明了V與J的種系來源。圖4C示出了23C6人單克隆抗體的VK.2K輕鏈可變區的核苷酸序列(SEQIDNO:50)、以及胺基酸序列(SEQIDNO:40)描繪了CDRl(SEQIDNO:18)、CDR2(SEQIDNO:24)、以及CDR3(SEQIDNO:30)區，並指明了V與J的種系來源。圖5A示出了12C5的重鏈可變區的胺基酸序列(SEQIDNO:31)與人種系VH7_4.1胺基酸序列(SEQIDNO:51)的比對。圖5B示出了12C5的輕鏈可變區的胺基酸序列(SEQIDNO:35)與人種系￥入2匕2胺基酸序列(SEQIDNO:55)的比對。圖6A示出了19A3/CD22.1的重鏈可變區的胺基酸序列(SEQIDNO:32)與人種系VH4_34胺基酸序列(SEQIDNO:52)的比對。圖6B示出了19A3/CD22.1/CD22.2的輕鏈可變區的胺基酸序列(SEQIDNO:36)與人種系VkL6胺基酸序列(SEQIDNO:56)的比對。圖6C示出了CD22.2的重鏈可變區的胺基酸序列(SEQIDNO:61)與人種系乂^^鬥胺基酸序列(SEQIDNO:52)的比對。圖7A示出了16F7的重鏈可變區的胺基酸序列(SEQIDNO:33)與人種系VH5_51胺基酸序列(SEQIDNO:53)的比對。圖7B示出了16F7的Vk.1輕鏈可變區的胺基酸序列(SEQIDNO:37)與人種系VK27胺基酸序列(SEQIDNO:57)的比對。圖7C示出了16F7的VK.2輕鏈可變區的胺基酸序列(SEQIDNO:38)與人種系VkAlO胺基酸序列(SEQIDNO:57)的比對。圖8A示出了23C6的重鏈可變區的胺基酸序列(SEQIDNO:34)與人種系VH1_69胺基酸序列(SEQIDNO:54)的比對。圖8B示出了23C6的Vk.1輕鏈可變區的胺基酸序列(SEQIDNO:39)和23C6的Vk.2輕鏈可變區的胺基酸序列(SEQIDNO:40)與人種系VKL6胺基酸序列(SEQIDNO:56)的比對。圖9是條形圖，示出了抗-CD22人抗體12C5、19A3、16F7、以及23C6的內化進入Raji細胞。圖1OA是示出了抗-CD22人抗體12C5、19A3、16F7、以及23C6針對Daudi細胞的ADCC活性(由裂解百分數所測量)的圖。圖1OB是示出了抗-CD22人抗體12C5、19A3、16F7、以及23C6針對Raji細胞的ADCC活性(由裂解百分數所測量)的圖。圖11是示出了固定的抗-0)22人抗體1205、1943、167、以及2306對80刺激的Ramos細胞的作用的條形圖，由細胞死亡百分數所測量。圖12是曲線圖，該圖顯示與19A3親本人抗體相比，由抗-⑶22重組人抗體⑶22.1及CD22.2與CD22ECD的結合。圖13是曲線圖，該圖顯示了由抗-⑶22重組人抗體⑶22.1及⑶22.2與在CHO細胞表面上所表達的⑶22的結合。圖14是曲線圖，該圖顯示了由抗-⑶22重組人抗體⑶22.1及⑶22.2與在Raji細胞表面上所表達的⑶22的結合。圖15是條形圖，該圖顯示由抗-CD22抗體12C5、19A3、16F7、以及23C6，以及由重組人抗體⑶22.1及⑶22.2與⑶22E⑶氨基末端結構域I及2的結合。圖16顯示在SCID小鼠中，抗體-藥物綴合物⑶22.1-細胞毒素A及⑶22.2_細胞毒素A對Raji細胞腫瘤大小的體內作用。圖17A顯示4G6人抗體的核苷酸序列(SEQIDNO:87)與胺基酸序列(SEQIDNO:81)。描繪了CDRl(SEQIDNO:63)、CDR2(SEQIDNO:66)、以及CDR3(SEQIDNO:69)區，並指明了V、D、以及J的種系來源。圖17B示出了4G6人單克隆抗體的VkIk輕鏈可變區的核苷酸序列(SEQIDNO:90)與胺基酸序列(SEQIDNO:84)描繪了CDRl(SEQIDNO:72)、CDR2(SEQIDNO:75)、以及CDR3(SEQIDNO:78)區，並指明了V與J的種系來源。圖17C示出了4G6人單克隆抗體的VK2k輕鏈可變區的核苷酸序列(SEQIDNO:91)、以及胺基酸序列(SEQIDNO:85)描繪了CDRl(SEQIDNO:73)、CDR2(SEQIDNO:76)、以及CDR3(SEQIDNO:79)區，並指明了V與J的種系來源。圖18A示出了21F6人單克隆抗體的乂!^重鏈可變區的核苷酸序列(SEQIDNO:88)與胺基酸序列(SEQIDNO:82)描繪了CDRl(SEQIDNO:64)、CDR2(SEQIDNO:67)、以及CDR3(SEQIDNO:70)區，並指明了V、D、以及J的種系來源。圖18B示出了21F6人單克隆抗體的乂#重鏈可變區的核苷酸序列(SEQIDNO:89)與胺基酸序歹Ij(SEQIDNO:83)描繪了CDRl(SEQIDNO:65)、CDR2(SEQIDNO:68)、以及⑶R3(SEQIDNO:71)區，並指明了V、D、以及J的種系來源。圖18C示出了21F6人單克隆抗體的k輕鏈可變區的核苷酸序列(SEQIDNO:92)與胺基酸序列(SEQIDNO:86)描繪了CDRl(SEQIDNO:74)、CDR2(SEQIDNO:77)、以及CDR3(SEQIDNO:80)區，並指明了V與J的種系來源。圖19A示出了4G6的重鏈可變區的胺基酸序列(SEQIDNO:81)與人種系VH1_69胺基酸序列(SEQIDNO:54)的比對。圖19B示出了4G6的VkIk輕鏈可變區的胺基酸序列(SEQIDNO:84)與人種系VkL18胺基酸序列(SEQIDNO:93)的比對。圖19C示出了4G6的Vk2k輕鏈可變區的胺基酸序列(SEQIDNO:85)與人種系VkA27胺基酸序列(SEQIDNO:57)的比對。圖20A示出了21F6的VhI重鏈可變區的胺基酸序列(SEQIDNO:82)與人種系VH4_34胺基酸序列(SEQIDNO:52)的比對。圖20B示出了21F6的VH2重鏈可變區的胺基酸序列(SEQIDNO:83)與人種系VH4_34胺基酸序列(SEQIDNO:52)的比對。圖20C示出了21F6的k輕鏈可變區的胺基酸序列(SEQIDNO:86)與人種系VkL6胺基酸序列(SEQIDNO:56)的比對。圖21是曲線圖，該圖顯示了由抗-⑶22人抗體4G6與在CHO細胞表面表達的⑶22的結合。圖22是曲線圖，該圖顯示了由抗-⑶22人抗體21F6與在CHO細胞表面表達的⑶22的結合。圖23是曲線圖，該圖顯示了由抗-⑶22人抗體21F6與在Raii細胞表面表達的CD22的結合。本公開的詳細說明本公開涉及分離的單克隆抗體，尤其是以高親和力與人CD22特異性結合的人單克隆抗體。在某些實施方案中，本公開的抗體衍生於特定的重鏈及輕鏈種系序列和/或包含特定的結構特徵，諸如包括特定胺基酸序列的CDR區。本公開提供分離的抗體、免疫配偶體分子綴合物、雙特異性分子、親和體(affibody)、結構域抗體、納米抗體、以及unibody,製備所述分子的方法，以及包括所述分子及藥物載體的藥物組合物。本發明還涉及使用這些分子的方法，諸如檢測CD22，以及在與CD22表達有關的或者涉及B細胞調控的疾病或病症中調節B細胞活性，所述疾病或病症諸如CD22+腫瘤以及炎症或者自身免疫病症。本公開還提供了使用本發明的抗-CD22抗體抑制CD22+腫瘤細胞的生長(例如，治療B細胞淋巴瘤)的方法。另外，本公開提供了使用本公開的抗-CD22抗體治療炎症或自身免疫病症的方法。為了使本發明可以更容易地得到理解，首先對一些術語進行了定義。其他定義在整個詳細說明中給出。術語「CD22」、「BL-CAM」、「B3」、「Leu-14」、以及「Lyb_8」可以互換地使用，並包括⑶22的變體、同工型(isoform)、以及物種同源物。因此，本公開的人抗體在某些情況下可以與來自除人之外的其他物種的CD22進行交叉反應。在某些實施方案中，這些抗體可以對人CD22具有完全特異性，並可能不顯示物種或其他類型的非人交叉反應性。示例性的人CD22的完全胺基酸序列具有Genbank登錄號NP_001762(SEQIDNO:59)。人⑶22序列可與SEQIDNO:59的人⑶22不同，其不同之處在於具有，例如，保守性突變或者在非保守區的突變，並且該⑶22具有與SEQIDNO:59的人⑶22基本上相同的生物學功能。例如，人CD22的生物功能是在CD22的細胞外結構域具有表位，所述表位與本公開的抗體特異地結合，或者人CD22的生物功能是調節BCR信號。特定的人⑶22序列與SEQIDNO:59的人⑶22在胺基酸序列上通常會有至少90%的同一性，並且含有這樣的胺基酸殘基，當與其他物種(例如鼠類)的CD22胺基酸序列進行比較時，這些胺基酸殘基鑑定該胺基酸序列是人的。在某些情況下，人CD22可與SEQIDNO:59的⑶22在胺基酸序列上具有至少95%、或甚至至少96%、97%、98%、或99%的同一性。在某些實施方案中，與SEQIDNO:59的⑶22相比，人⑶22序列將展示出將不超過10個胺基酸差異。在某些實施方案中，與SEQIDNO:59的⑶22相比，人⑶22可展示出不超過5個、或甚至不超過4個、3個、2個、或I個胺基酸差異。按照在此的說明可以確定同一性百分數。術語「免疫應答」是指例如，淋巴細胞、抗原呈遞細胞、吞噬細胞、粒細胞、以及由以上細胞或肝臟產生的可溶性大分子(包括抗體、細胞因子、以及補體)的作用，這些作用導致對侵入性病原體、被病原體感染的細胞或組織、癌性細胞、或者，在自身免疫或病理性炎症情況下的正常人細胞或組織的選擇性損害、破壞或從人體中清除。「信號轉導途徑」是指在多種信號轉導分子之間的生物化學關係，這些信號轉導分子在信號從細胞的一部分傳遞至細胞的另一部分中發揮作用。在此使用的術語「細胞表面受體」包括，例如，能夠接受信號並將這種信號傳遞穿過細胞的質膜的分子及分子的複合物。本公開的「細胞表面受體」的實例是CD22蛋白質。在此使用的術語「抗體」包括完整的抗體及其任何抗原結合片段(即「抗原結合部分」)或其單鏈。「抗體」是指至少包括通過二硫鍵相連接的兩條重鏈(H鏈)以及兩條輕鏈(L鏈)或其抗原結合部分的糖蛋白。每一條重鏈都包括重鏈可變區(在此縮寫為Vh)以及重鏈恆定區組成。該重鏈恆定區包含三個結構域Ch1、Ch2以及Ch3。每一條輕鏈都包括輕鏈可變區(在此縮寫為VJ與輕鏈恆定區。該輕鏈恆定區包括一個結構域，Q。VH與VL區域還可再細分出被稱為互補決定區(CDR)的高變區，其間散布更為保守的被稱為構架區(FR)的區域。每個VH以及VL均由三個CDR以及四個FR構成，按照以下順序從氨基端至羧基端排布:FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。重鏈以及輕鏈的可變區包含與抗原相互作用的結合結構域。抗體的恆定區可以介導免疫球蛋白與宿主的組織或因子的結合，包括免疫系統的各種細胞(如效應細胞)及經典補體系統的第一組分(Clq)。在此使用的術語抗體的「抗原結合部分」(或簡稱為「抗體部分」)是指保留了與抗原(例如CD22)特異性結合的能力的、抗體的一個或多個片段。已經證實抗體的抗原結合功能可以由全長抗體的片段來實現。術語抗體的「抗原結合部分」所涵蓋的結合性片段的實例包括:(i)Fab片段，即由VL、VH、Cl與ChI結構域構成的單價片段；(ii)F(ab,)2片段，即包括在鉸鏈區由二硫鍵連接的兩個Fab片段的二價片段；(iii)Fab』片段:它實質上是帶有一部分絞鏈區的Fab片段(參見FundamentalImmunology(Paul編著，3.sup.rded.1993)；(iv)由Vh與ChI結構域構成的Fd片段；(V)由抗體的單臂的\與Vh結構域構成的Fv片段；(vi)由Vh結構域構成的dAb片段(Ward等人，(1989)Nature341:544-546)；(vii)分離的互補決定區(CDR);以及(viii)納米抗體，即包含單個可變結構域和兩個恆定結構域的重鏈可變區。此外，雖然Fv片段的兩個結構域\與乂11是由分離的基因編碼的，但是可以使用重組方法通過合成接頭將它們連接起來，使它們能夠形成單蛋白鏈，其中\與Vh區域配對形成單價分子(已知為單鏈Fv(scFv);參見如Bird等人(1988)Science242:423~426以及Huston等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sc1.USA85:5879_5883)。術語抗體的「抗原結合部分」也旨在涵蓋這類單鏈抗體。這些抗體片段可通過本領域技術人員已知的常規方法獲得，並且可以篩選這些片段以獲得能夠以與完整抗體相同的方式應用的片段。在此使用的簡寫「VK」是指K輕鏈的可變結構域，而在此使用的「VA」是指λ輕鏈的可變結構域。在此使用的縮寫是指免疫球蛋白輕鏈的可變結構域並因此包含Vk與^輕鏈二者。在此使用的「分離的抗體」意指這樣的抗體，它基本上不含有其他的具有不同抗原特異性的抗體(例如，特異性結合CD22的分離的抗體是基本上不含有特異性結合除CD22之外的抗原的抗體)。然而，特異性結合CD22的分離的抗體對於其他抗原，例如來自其他物種的CD22分子可具有交叉反應性。此外，分離的抗體可基本上不含有其他細胞材料和/或化學物。在此使用的術語「單克隆抗體」或「單克隆抗體組合物」是指具有單一分子組成的抗體分子的製品。單克隆抗體組合物展示出單一的針對特定表位的結合特異性和親和性。在此使用的術語「人抗體」旨在包括這樣一類抗體:它的可變區中的構架區與CDR區均來自人種系免疫球蛋白序列。此外，如果該抗體包含恆定區，則該恆定區也來自人種系免疫球蛋白序列。本公開的人抗體可以包含不是由人種系免疫球蛋白序列所編碼的胺基酸殘基(例如，由體外隨機誘變或位點-特異性誘變引入的突變或通過體內體細胞突變引入的突變)。然而，此處使用的術語「人抗體」並不旨在包括這樣的抗體:在該抗體中來自另一哺乳動物物種(如小鼠)的種系的CDR序列被移植到人構架區序列上。術語「人單克隆抗體」是指顯示出單一結合特異性的抗體，該抗體所具有的可變區中構架區與CDR區均來自人種系免疫球蛋白序列。在一個實施方案中，人單克隆抗體由雜交瘤產生，該雜交瘤包括來自轉基因非人動物的B細胞，所述轉基因動物例如小鼠，具有包含與永生化細胞融合的人重鏈轉基因與輕鏈轉基因的基因組。在此使用的術語「重組人抗體」包括通過重組方法製備、表達、產生或分離的所有人抗體，例如:(a)從對於人免疫球蛋白基因來說是轉基因或轉染色體的動物(如小鼠)中分離的抗體或從製備自上述轉基因動物的雜交瘤中分離的抗體(下文將進一步說明)；(b)從被轉化而能表達人抗體的宿主細胞(如轉染瘤)分離的抗體；(C)從重組的組合人抗體文庫分離的抗體；以及(d)通過任何涉及將人類免疫球蛋白基因序列剪接至其他DNA序列的其他方法製備、表達、產生或分離的抗體。這類重組人抗體具有如下可變區，在該可變區中構架區與⑶R區來源於人種系免疫球蛋白序列。然而，在某些實施方案中，這類重組人抗體可以經歷體外誘變(或者當使用含有人Ig序列的轉基因動物時，體內體細胞誘變)，這樣一來，該重組抗體的Vh與\區域的胺基酸序列是這樣的序列，其儘管來源於人種系Vh與\序列並與人種系Vh與\序列相關，但是並不天然存在於體內人抗體種系庫之中。此處使用的「同種型」是指由重鏈恆定區基因所編碼的抗體類型(例如IgM或IgGl)。短語「識別抗原的抗體」與「對抗原具有特異性的抗體」在本文中可以與術語「特異性結合抗原的抗體」互換使用。術語「人抗體衍生物」是指人抗體的任何經修飾的形式，例如，該抗體與另一種物質或抗體的綴合物。術語「人源化抗體」旨在指以下抗體，其中來自另一哺乳動物物種(如小鼠)的種系的CDR序列被移植到人構架區序列上。可以在人構架區序列中進行額外的構架區修飾。術語「嵌合抗體」是意指以下抗體，其中可變區序列來自一物種而恆定區序列來自另一物種，例如其中可變區序列來自小鼠抗體而恆定區序列來自人抗體的抗體。術語「抗體模擬物」意指能模仿抗體結合到抗原上的能力的分子，但其不局限於天然抗體結構。此類抗體模擬物的實例包括但不限於親和體、DARPin、Anticalin、Avimer、以及Versabody，所有這些抗體模擬物在模擬傳統抗體結合時均採用結合結構，它們都產生自不同的作用機理並通過這些不同的機理髮揮作用。在此使用的術語「配偶體分子」是指在抗體-配偶體分子綴合物中與抗體綴合的實體。配偶體分子的實例包括藥物、毒素、標記分子(包括但不限於肽及小分子標記物，例如螢光染料標記物，以及單原子標記物，例如放射性同位素)、蛋白質以及治療劑。在此使用的「特異地結合人⑶22」的抗體意指這樣的抗體，它結合人⑶22(並且可能是來自一種或多種非人物種的CD22)，但基本上不結合非CD22蛋白。在某些實施方案中，本公開的抗體特異地結合SEQIDNO:59的人⑶22或其變體。優選地，該抗體以IXICT7M或更小的Kd結合人⑶22，更優選為IXICT8M或更小，更優選為5XICT9M或更小，更優選為IXIO^9M或更小，甚至優選為5XΙΟ,Μ或更少，甚至更優選為7Χ10_ηΜ或更小。在此使用的術語「基本上不結合」蛋白質或細胞是指不結合或不以高親和力結合蛋白或細胞，即，以IX10_6Μ或更大，更優選為1Χ10_5Μ或更大，更優選為IX10_4M或更大，更優選為1Χ10_3Μ或更大，甚至更優選為IX10_2Μ或更大的Kd結合蛋白質或細胞。在此使用的術語「Kass。。」或「Ka」意指特定的抗體-抗原相互作用的結合速率，其中在此使用的術語「Kdis」或「Kd」意指特定的抗體-抗原相互作用的解離速率。此處使用的術語「KD」意指解離常數，它是由1與1之比(即Kd/Ka)得到，並被表示為摩爾濃度(M)。抗體的Kd值可以用本領域確立的方法測定。確定抗體Kd值的優選的方法是通過使用表面等離振子共振，優選使用諸如;Biaeore系統的生物傳感器系統。在此使用的術語針對IgG抗體的「高親和力」是指對於靶抗原而言，抗體具有的Kd值為1父101或更小，更優選為5父101或更小，甚至更優選為ixio_8m或更小，甚至更優選為5xio_9m或更小並且甚至更優選為Ixio_9m或更小。然而，對於其他抗體同種型而言，「高親和力」結合可以發生變化。例如，「高親和力」結合IgM同種型是指抗體具有的KD值為10_6M或更小，更優選為10_7M或更小，甚至更優選為10_8M或更小。在此使用的術語「受試者」包括任何人或非人動物。術語「非人動物」包括所有脊椎動物，例如哺乳動物及非哺乳動物，例如非人靈長類動物、綿羊、犬、貓、馬、牛、雞、兩棲動物、爬行動物等等。符號無論是用作為鍵或以垂直於鍵的方式顯示，都說明顯示部分所在點與分子、固相載體等的其餘部分進行連接。除非另有說明，術語「烷基」其本身或者作為另一個取代基的部分，是指直鏈、或支鏈、或環烴基，或其組合，其具有指定數目的碳原子數(即C1-Cltl是指I至10個碳)，可以是完全飽和的、單不飽和的或多不飽和的，並可以包括二價和多價基。飽和烴基基團的實例包括但不限於以下基團，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、異丁基、仲丁基、環己基、(環己基)甲基、環丙基甲基、以及(例如)正戊基、正己基、正庚基、正辛基的同源物或異構體、等等。不飽和烷基基團是具有一個或多個雙鍵或三鍵的基團。不飽和烷基基團的實例包括但不限於乙烯基、2-丙烯基、丁烯基、2-異戊烯基、2-(丁間二烯基)、2，4-戊二烯基、3-(1，4-戊二烯基)、乙炔基、1-丙炔基和3-丙炔基、3-丁炔基，以及更高級同源物及異構體。除非另有說明，術語「烷基」也指包括以下更詳細定義的那些烷基的衍生物，例如「雜烷基」。烷基基團(它們限於是烴基團)被稱為「同系烷基(homoalkyl)」。術語「亞烷基」其本身或作為了另一個取代基的部分是指衍生於烷的二價基團，例如但不局限於-CH2CH2CH2CH2-,並且還包括以下描述為「雜亞烷基」的那些基團。通常，烷基(或亞烷基)基團應含有I至24個碳原子，本發明中優選的那些基團應含有10個或更少的碳原子。「低級烷基」或者「低級亞烷基」為短鏈烷基或者亞烷基基團，一般具有8個或更少的碳原子。除非另有說明，術語「雜烷基」其本身或者與另一個術語連用是指穩定的直鏈或支鏈、或環烴基，或其組合，由所說明數目的碳原予和至少一個雜原子組成，所述雜原子選自O、N、S1、及S，其中氮、碳及硫原子可任選地被氧化，並且該氮雜原子可任選地被季銨化。一個或多個雜原子O、N、S、及Si可位於雜烷基基團的任何內部位置，或可位於烷基基團與該分子的其餘部分相連接的位置。實例包括但不限於:-CH2-CH2-0-CH3、-CH2-CH2-NH-CH3>-CH2-CH2-N(CH3)-CH3>-CH2-S-CH2-CH3'-CH2-CH2-S(O)-CH3>-CH2-CH2-S(0)2-CH3>-CH=CH-O-CH3、-Si(CH3)3>-CH2-CH=N-OCH3、及-CH=CH-N(CH3)-CH3。高達兩個雜原子可是連續的，例如，-CH2-NH-OCH3以及-CH2-O-Si(CH3)3。類似地，術語「雜亞烷基」其本身或者作為另一個取代基的部分，是指衍生於雜烷基的二價基，例如但不局限於，-CH2-CH2-S-CH2-CH2-以及-CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-。對於雜亞烷基基團，雜原子也可佔據鏈末端的任一端或兩端(例如，亞烷氧基、亞烷二氧基、亞烷基氨基、亞烷基二氨基等)。術語「雜烷基」以及「雜亞燒基」包括聚(乙二醇)及其衍生物(參見例如，ShearwaterPolymersCatalog,2001)。此外，對於亞烷基以及雜亞烷基連接基團而言，連接基團的化學式的書寫方向不表明連接基團的方向。例如，式-C(O)2R』-同時代表-C(O)2R』-以及-R』C(O)2-.與術語「烷基」或「雜烷基」連用的術語「低級的」是指具有I至6個碳原子的部分。術語「烷氧基」、「烷基氨基」、「烷基磺醯基」、及「烷硫基」(或硫代烷氧基)以它們的常規意義使用，並且是指那些通過氧原子、氨基、SO2基團或硫原子分別附著至該分子剩餘部分的那些烷基基團。術語「芳基磺醯基」是指通過SO2基團附著至分子剩餘部分的芳基分子，且術語「硫氫基」是指SH基團。一般而言，「醯基取代基」也選自以上給出的組。在此用到的術語「醯基取代基」指附著至羰基碳並使其化合價飽和的基團，該羰基碳直接或間接地附著至本發明的合物的多環核上。除非另有說明，術語「環烷基」以及「雜環烷基」其本身或者與其他術語連用，分別指環式的取代的或者未取代的「烷基」以及取代的或未取代的「雜烷基」。另外，對於雜環烷基，雜原子可佔據雜環與分子殘餘部分相連接的位置。環烷基的實例包括但不限於環戊基、環己基、1-環己烯基、3-環己烯基、環庚基等。雜環烷基的實例包括但不限於1_(1，2，5，6-四氫吡啶基)、1_哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-嗎啉基、3-嗎啉基、四氫呋喃-2-基、四氫呋喃-3-基、四氫噻吩-2-基、四氫噻吩-3-基、1-哌嗪基、2-哌嗪基等。環結構的雜原子和碳原子可以任選地被氧化。除非另有說明，術語「齒」或「齒素」其本身或另一個取代基的部分，是指氟、氯、溴、或碘原子。此外，術語如「齒烷基」是指包括單齒烷基及聚齒烷基。例如，術語「齒(C1-C4)烷基」是指包括但不局限於，三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、4-氯丁基、3-溴丙基等。除非另有說明，術語「芳基」是指取代的或未取代的多未飽和的、芳香的、烴取代基，這些取代基可以是單環或稠合在一起或者共價連接的多環(優選I至3個環)。術語「雜芳基」是指芳基基團(或環)，其包含I至4個選自N、O、及S的雜原子，其中氮、碳及硫原子任選地被氧化，且一個或多個氮原子任選地被季銨化。雜芳基基團可通過雜原子附著至該分子的殘餘部分。芳基和雜芳基基團的非限制性實例包括苯基、1-萘基、2-萘基、4-聯苯基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、批嗪基、2-唑基、4-唑基、2-苯基-4-5惡唑基、5-唑基、3-異％唑基、4-異唑基、5-異g唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-苯並噻唑基、嘌呤基、2-苯並咪唑基、5-吲哚基、1-異喹啉基、5-異喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔啉基、3-喹啉基、以及6-喹啉基。以上提到的芳基和雜芳基環體系中每個體系的取代基均選自以下描述的可接受的取代基。「芳基」及「雜芳基」也包括這樣的環狀體系，其中一個或多個非芳香性的環狀體系被稠合或者另外結合至芳基或雜芳基繫上。簡言之,術語「芳基」,當與其他術語(如芳氧基、芳基硫氧基(arylthioxy)、芳燒基)組合使用時，同時包括以上已定義的芳基和雜芳基環。因此，術語「芳烷基」意指包括那些基團，其中芳基基團被附著至烷基基團(例如，苄基、苯乙基、吡啶基甲基等)，包括那些烷基基團，其中碳原子(例如，亞甲基基團)已被，例如氧原子(如苯氧基甲基、2-吡啶基氧基甲基、3-(1_萘氧基)丙基等)置換。以上術語(例如「烷基」、「雜烷基」、「芳基」和「雜芳基」)中每個術語均包括所示基團的取代和未取代形式。以下提供每一類型基團的優選取代基。燒基、以及雜燒基基團(包括經常提到的那些基團，例如亞燒基、鏈稀基、雜亞燒基、雜鏈稀基、塊基、環燒基、雜環燒基、環鏈稀基、以及雜環鏈稀基)的取代基通常分別被稱為「烷基取代基」和「雜烷基取代基」，且它們可以是多個基團中一個或多個基團，這些基團選自但不限於，:_0R，、=O、=NR'=N-OR'-NR，R」、_SR』、_滷素、-SiR』R」R」，、_0C(O)R，、-C(0)R，、-CO2RJ、-CONRjR」、-OC(0)NR，R」、-NR」C(0)R，、-NR，-C(0)NR」R」，、-NR」C(0)2R，、-NR-C(NR，η」，)=NR」」、-NR-C(NR，R」)=NR」，、_S(0)R，、_S(0)2R，、_S(0)2NR，R，，、_NRS02R』、-CN以及-NO2，其數量從0至(2m』+1)，其中111』是此類基團中的碳原子總數。R』、R」、R」』以及R」」每一個均優選地獨立地指氫、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的芳基(例如取代有I至3個齒素的芳基)、取代或未取代的燒基、燒氧基或硫燒氧基基團、或芳烷基基團。當本發明的化合物包括多於一個R基團時，例如，當多於一個的這些基團存在時，每個R基團獨立地選擇，如對每個R』、R」、R」』以及R」」基團選擇一樣。當R』和R」與同一個氮原子相連時，它們可以與氮原子相結合以形成5、6或7元環。例如，-NR』R」是指包括但不局限於，1-吡咯烷基以及4-嗎啉基。從以上取代基的討論中，本領域的技術人員會明白朮語「烷基」意思是包括含有結合至除氫基團以外的基團(例如滷烷基(如-CF3及-CH2CF3)、以及醯基(如-C(O)CH3>-C(O)CF3>-C(O)CH2OCH3等))的碳原子的基團。與描述烷基基團的取代基類似，芳基取代基和雜芳基取代基通常分別被稱為「芳基取代基」和「雜芳基取代基」，且這些基團是變化的，並選自例如:滷素、-0R』、=O、=NR』、=N-0R，、-NR，R，，、-SR，、-滷素、-SiR，R，，R，，，、-OC(O)R，、-C(O)R，、-C02R，、-CONR，R」、-OC(O)NR，R，，、-NR，，C(0)R，、-NR，_C(0)NR」R，」、_NR」C(0)2R，、-NR_C(NR，R」)=NRj^-S(0)R\-S(0)2R』、-S(0)2NR』R，，、-NRSO2R，、-CN以及-N02、-R，、-N3'-CH(Ph)2、氟(C1-C4)烷氧基、以及氟(C1-C4)烷基，其數量從O到芳環體系上開放化合價(openvalence)的總數；且其中R』、R」、R」』以及R」」優選地獨立地選自:氫、(C1-C8)烷基和雜烷基、未取代的芳基和雜芳基、(未取代的芳基)_(C1-C4)烷基、以及(未取代的芳基)氧基-(C1-C4)烷基。當本發明的化合物包括多於一個R基團時，例如，當多於一個的這些基團存在時，每個R基團均獨立地進行選擇，如同對每個R』、R」、R」』、以及R」」進行選擇一樣。在芳基或雜芳基環相鄰原子上的芳基取代基中的兩個可任選地被具有式為-T-C(O)_(CRR』)q-u-的取代基代替，其中，T和U獨立地為-NR-、_0_、-CRR』-或單鍵，並且q為從O到3的整數。可選地，在芳基或雜芳基環的相鄰原子上的取代基中的兩個取代基可任選地被式-A-(CH2)r_B-的取代基所替換，其中A和B獨立地為-CRR』-、-0-、-NR-、-S-、-S(O)-、-S(O)2_、-S(O)2NR』_、或單鍵，並且r是從I至4的整數。如此形成的該新環的單鍵中的一個可能可任選地被雙鍵取代。可選地，在芳基或雜芳基環的相鄰原子上的取代基中的兩個可任選地被式-(CRR』)S-X-(CR」R」』)d-的取代基所替換，其中s和d獨立地為從O至3的整數，並且X是-O-、-NR』-、-S-、-S(O)、-S(O)2-、或-S(O)2NR,_。取代基R、1』、1」以及1」』優選地獨立地選自氫或取代的或未取代的(C1-C6)烷基。在此使用的術語「二磷酸酯」包括但不局限於包含兩個磷酸基團的磷酸的酯。術語「三磷酸酯」包括但不局限於包含三個磷酸基團的磷酸的酯。例如，具有二磷酸酯或三磷酸酯的具體藥物包括:三磷酸酯在此使用的術語「雜原子」包括氧(O)、氮(N)、硫(S)、以及矽(Si)。符號「R」是一個通用縮寫，它表示一個取代基基團，該基團是選自:取代或未取代的烷基、取代或未取代的雜烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、以及取代或未取代的雜環基基團。在以下各分部中進一步詳細地說明了本公開的不同方面。杭-CD22杭體本公開的抗體的特徵為抗體的特定的功能特徵或特性。例如，抗體特異地結合人⑶22。優選地，本發明的抗體以高親和力結合人⑶22，例如其中Kd為1X10_7M或更低。本公開的抗-⑶22抗體優選地顯示以下特徵中的一種或多種特徵:(a)內化進入CD22+細胞；(b)針對⑶22+細胞表現出抗體依賴性細胞毒作用(ADCC)；(c)促進由B細胞受體(BCR)刺激誘導的Ramos細胞的細胞死亡；以及(d)當綴合至細胞毒素時抑制表達⑶22的細胞在體內的生長。在優選的實施方案中，該抗體表現出特性(a)、(b)、(C)以及(d)中至少兩種特性。在又另一個優選實施方案中，該抗體表現出具有特性(a)、(b)、(c)以及(d)中三種特性。在另一個優選實施方案中，該抗體表現出具有特性(a)、(b)、(C)以及(d)全部四種特性。當本發明的抗-CD22抗體表現出某些功能特性時，在某些實施方案中，抗體的另一個特徵是它們不表現出其他特殊的功能特性。例如，在某些實施方案中，該抗體對Ramos細胞沒有直接的抗增殖作用。在其他實施方案中，該抗體不誘導Ramos細胞中的鈣運轉。在又某些實施方案中，該抗體在Ramos細胞上不介導依賴於補體的細胞毒性(CDC)。值得注意的是，已報導一種人源抗-⑶22抗體，epratuzumab,缺乏直接的抗增殖作用以及針對非霍奇金淋巴細胞系的CDC活性，但該抗體的確通過其他手段介導對該細胞系的細胞毒性作用(參見Carnahan,J.等人(2006)Mol.1mmunol.44:1331-1341)。優選地，本發明的抗體以IX10_7M或更少的Kd與人⑶22相結合，以IX10_8M或更少的Kd與人⑶22相結合，以5X10_9M或更少的Kd與人⑶22相結合，以3X10_9M或更少的Kd與人⑶22相結合，以IX10_9M或更少的Kd與人⑶22相結合，以5XΙΟ,Μ或更少的Kd與人⑶22相結合，或以IXIO^10M的Kd與人⑶22相結合，或以7X10_ηΜ或更少的Kd與人⑶22相結合。本領域已知評價該抗體與人⑶22相結合的親和力的標準測定，包括例如，用重組CD22進行ELISA和BIAcore分析(參見實施例3)。實例也提供了評價抗體內化(實施例4)、ADCC活性(實施例5)、促進由BCR刺激誘導的細胞死亡(實施例7)、抗體直接的抗增殖作用(實施例8)、誘導鈣運轉(實施例6)、以及CDC活性(實施例9)，以及抗體-藥物免疫綴合物在體內對實體瘤細胞增殖的抗增殖作用(實施例10)的適宜測定的詳細說明。單克降杭體12C5、9A3、CD22.1、CD22.2、16F7、23C6、4G6、以及21F6本發明優選的抗體是人單克隆抗體12C5、19A3、16F7、23C6、4G6、W&21F6，以及重組人單克隆抗體⑶22.1、⑶22.2，這些抗體中所有抗體均如實施例1和2中所述被分離並且在結構上進行表徵。12C5、19A3、CD22.1、CD22.2、16F7、23C6、4G6和21F6的Vh胺基酸序列分別在SEQIDNO:31、32、61、33、34、81、82和83中顯示，其中19A3以及CD22.1的重鏈相同且與SEQIDNO:32相對應，並且21F6的Vh重鏈與SEQIDNO:82或83相對應。12C5、19A3、CD22.1、CD22.2、16F7、23C6、4G6、以及21F6的'胺基酸序列分別在SEQIDNO:35、36、37、38、39、40、84、85、以86中顯示，其中19A3、CD22.1及CD22.2的κ輕鏈相同且與SEQIDNO:36相對應，16F7的κ輕鏈與SEQIDNO:37或38相對應，23C6的κ輕鏈與SEQIDNO:39或40相對應，且4G6的κ輕鏈與SEQIDNO:84或85相對應。如果這些抗體中每一種抗體均能結合⑶22，則可將Vh和\序列進行「混合併匹配」，以產生本公開的其他抗-CD22結合分子。可以使用上述以及實施例中所述的結合測定(例如ELISA或流式細胞術)對此類「混合併匹配」的抗體的⑶22結合進行檢測。優選地，當Vh和\鏈被混合併且匹配時，來自特定VH/VL對的Vh序列被結構上相似的Vh序列代替。類似地，優選地來自特定VH/VL對的\序列被結構上相似的\序列代替。因此，在一個方面，本公開提供了分離的單克隆抗體，或其抗原結合部分，包括:(a)重鏈可變區，其包含選自以下的胺基酸序列:SEQIDNO:31_34、61、以及81-83;以及(b)輕鏈可變區，其包含選自以下的胺基酸序列:SEQIDNO:35-40以及84_86；其中該抗體特異地結合⑶22，優選人⑶22。優選的重鏈及輕鏈組合，包括:(a)重鏈可變區，其包括SEQIDNO:31的胺基酸序列，以及輕鏈可變區，其包括SEQIDNO:35的胺基酸序列；或(b)重鏈可變區，其包括SEQIDNO:32或61的胺基酸序列，以及輕鏈可變區，其包括SEQIDNO:36的胺基酸序列；或(c)重鏈可變區，其包括SEQIDNO:33的胺基酸序列，以及輕鏈可變區，其包括SEQIDNO:37或38的胺基酸序列；或(d)重鏈可變區，其包括SEQIDNO:34的胺基酸序列，以及輕鏈可變區，其包括SEQIDNO:39或40的胺基酸序列；或(e)重鏈可變區，其包括SEQIDNO:81的胺基酸序列，以及輕鏈可變區，其包括SEQIDNO:84或85的胺基酸序列；或(f)重鏈可變區，其包括SEQIDNO:82或83的胺基酸序列，以及輕鏈可變區，其包括SEQIDNO:86的胺基酸序列。在另一方面，本公開提供了包括12C5、19A3、CD22.1、CD22.2、16F7、23C6、4G6、21F6的重鏈及輕鏈⑶R1、⑶R2、以及⑶R3，或其組合的抗體。12C5、19A3、CD22.1、CD22.2、16F7、23C6、4G6和21F6的VhCDRl的胺基酸序列分別示於SEQIDNO:1-4以及63-65中(其中19A3、CD22.1以及CD22.2的Vh序列的CDRl相同並示於SEQIDNO:2中，並且21F6的VhI和VH2序列的⑶Rl相同並分別示於SEQIDNO:64及65中。12C5、19A3、CD22.1、16F7、23C6、CD22.2、4G6和21F6的VhCDR2的胺基酸序列分別示於SEQIDNO:5-8、60、以及66-68中(其中19A3以及CD22.1的Vh序列的CDR2相同並示於SEQIDNO:6中，CD22.2的Vh序列的CDR2示於SEQIDNO:60中，並且21F6的VhI和Vh2序列的CDR2示於SEQIDNO:67及68中)。12C5、19A3、CD22.1、CD22.2、16F7、23C6、4G6和21F6的VhCDR3的胺基酸序列分別示於SEQIDNO:9-12以及69-71中(其中19A3、CD22.1以及CD22.2的Vh序列的CDR3相同並示於SEQIDNO:10中，並且21F6的VhI和VH2序列的CDR3示於SEQIDNO:70及71中)。12C5、19A3、CD22.1、CD22.2、16F7、23C6、4G6和21F6的VlCDRl的胺基酸序列分別示於SEQIDNO:13-18以及72-74中(其中19A3、CD22.1以及CD22.2的Vk序列的CDRl相同，並示於SEQIDNO:14中，16F7的Vk.1和Vk.2序列的CDRl示於SEQIDNO:15和16中，23C6的Vk.1和Vk.2序列的CDRl示於SEQIDNO:17及18中，並且4G6的Vk.1和Vk.2序列的CDRl示於SEQIDNO:72及73中)。12C5、19A3、CD22.1、CD22.2、16F7、23C6、4G6和21F6的VLCDR2的胺基酸序列分別示於SEQIDNO:19-24以及75-77中(其中19A3、CD22.1以及CD22.2的Vk序列的CDR2相同，並示於SEQIDNO:20中，16F7的Vk.1和Vk.2序列的CDR2示於SEQIDNO:21及22中，23C6的Vk.1和Vk.2序列的CDR2示於SEQIDNO:23及24中，並且4G6的Vk.1和Vk.2序列的CDR2示於SEQIDNO:75及76中)。12C5、19A3、CD22.1、CD22.2、16F7、23C6、4G6和21F6的VLCDR3的胺基酸序列分別示於SEQIDNO:25-30以及78-80中(其中19A3、CD22.1以及CD22.2的Vk序列的CDR3相同，並示於SEQIDNO:26中，16F7的Vk.1和Vk.2序列的CDR3示於SEQIDNOs:27及28中，23C6的Vk.1和Vk.2序列的CDR3在SEQIDNO:29及30中顯示，，並且4G6的Vk.1和Vk.2序列的CDR3示於SEQIDNOs:78及79中)。CDR區用Kabat系統進行說明(Kabat,E.A.,等人(1991).SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第五版，U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIHPublicationN0.91-3242)。考慮到在這些抗體中每一種抗體均能夠結合⑶22、並且抗原結合特異性主要由CDRl、CDR2、及CDR3區提供，因此VhCDRl、CDR2、及CDR3序列以及VlCDRl、CDR2、及CDR3序列可以被「混合併匹配」(即，來自不同抗體的CDR可以被混合併匹配，儘管每種抗體均必須含有Vh⑶R1XDR2、及⑶R3，以及Vl⑶R1XDR2、以及⑶R3)，以產生本公開的其他抗-⑶22結合分子。可以使用以上及實施例中說明的結合測定(例如，ELISA、Biaeire分析)檢測CD22與此類「混合併匹配」的抗體的結合。優選地，當VhCDR序列被混合併匹配時，來自特定Vh序列的⑶R1XDR2和/或⑶R3序列被結構上相似的一個或多個⑶R序列代替。類似地，當\⑶R序列被混合併匹配時，來自特定\序列的⑶RlXDR2和/或⑶R3序列可優選地被結構上相似的一個或多個CDR序列代替。對於本領域普通技術人員顯而易見的是，對於12C5、19A3、CD22.1、CD22.2、16F7、23C6、4G6以及21F6的單克隆抗體CDRl而言，可以通過將一個或多個Vh和/或\⑶R區序列替換為結構上相似的來源於本公開的⑶R序列的序列，來產生新的Vh和\序列。因此，在另一方面，本公開提供了分離的單克隆抗體，或其抗原結合部分，包括:(a)重鏈可變區CDR1，其包含選自以下的胺基酸序列:SEQIDN0:l_4以及63-65；(b)重鏈可變區CDR2，其包含選自以下的胺基酸序列:SEQIDNO:5_8、60以及66-68;以及(C)重鏈可變區⑶R3，其包含選自以下的胺基酸序列:SEQIDNO:9_12以及69-71。⑷輕鏈可變區CDR1，其包含選自以下的胺基酸序列:SEQIDN0:13_18以及72-74；(e)輕鏈可變區CDR2，其包含選自以下的胺基酸序列:SEQIDN0:19_24以及75-77;以及(f)輕鏈可變區CDR3，其包含選自以下的胺基酸序列:SEQIDNO:25-30以及78-80；其中該抗體特異地結合⑶22，優選人⑶22。在優選的實施方案中，該抗體包括:(a)重鏈可變區CDRl，其包含SEQIDNO:1；(b)重鏈可變區CDR2，其包含SEQIDNO:5；(c)重鏈可變區CDR3，其包含SEQIDNO:9；(d)輕鏈可變區CDRl，其包含SEQIDNO:13；(e)輕鏈可變區CDR2，其包含SEQIDNO:19;以及(f)輕鏈可變區CDR3，其包含SEQIDNO:25。在另一優選的實施方案中，該抗體包括:(a)重鏈可變區CDRl，其包含SEQIDNO:2；(b)重鏈可變區CDR2，其包含SEQIDNO:6或60;(c)重鏈可變區CDR3，其包含SEQIDNO:10；(d)輕鏈可變區CDRl，其包含SEQIDNO:14；(e)輕鏈可變區CDR2，其包含SEQIDNO:20;以及(f)輕鏈可變區CDR3，其包含SEQIDNO:26。在另一優選的實施方案中，該抗體包括:(a)重鏈可變區CDRl，其包含SEQIDNO:3；(b)重鏈可變區CDR2，其包含SEQIDNO:7；(c)重鏈可變區CDR3，其包含SEQIDNO:11；(d)輕鏈可變區CDRl，其包含SEQIDNO:15或16;(e)輕鏈可變區CDR2，其包含SEQIDNO:21或22;以及(f)輕鏈可變區CDR3，其包含SEQIDNO:27或28。在另一優選的實施方案中，該抗體包括:(a)重鏈可變區CDRl，其包含SEQIDNO:4；(b)重鏈可變區CDR2，其包含SEQIDNO:8；(c)重鏈可變區CDR3，其包含SEQIDNO:12；(d)輕鏈可變區CDRl，其包含SEQIDNO:17或18;(e)輕鏈可變區CDR2，其包含SEQIDNO:23或24;以及(f)輕鏈可變區CDR3，其包含SEQIDNO:29或30。在另一優選的實施方案中，該抗體包括:(a)重鏈可變區CDRl，其包含SEQIDNO:63；(b)重鏈可變區CDR2，其包含SEQIDNO:66；(c)重鏈可變區CDR3，其包含SEQIDNO:69；(d)輕鏈可變區CDRl，其包含SEQIDNO:72或73;(e)輕鏈可變區CDR2，其包含SEQIDNO:75或76;以及(f)輕鏈可變區CDR3，其包含SEQIDNO:78或79。在另一優選的實施方案中，該抗體包括:(a)重鏈可變區⑶Rl，其包含SEQIDNO:64或65(b)重鏈可變區⑶R2，其包含SEQIDNO:67或68(C)重鏈可變區⑶R3，其包含SEQIDNO:70或71(d)輕鏈可變區⑶Rl，其包含SEQIDNO:74；(e)輕鏈可變區⑶R2，其包含SEQIDNO:77;以及(f)輕鏈可變區⑶R3，其包含SEQIDNO:80ο在本領域中熟知的是，獨立於一個或多個⑶Rl和/或⑶R2結構域的⑶R3結構域單獨地能夠確定抗體對關聯抗原的結合特異性，並且能夠可預測地而產生多種抗體，這些抗體具有基於共同的⑶R3序列的相同的結合特異性。參見例如，Klimka等人，BritishJ.0fCancer83(2):252-260(2000)(描述了僅使用鼠類抗CD30抗體Ki_4的重鏈可變結構域CDR3來產生人源化抗CD30抗體)；Beiboer等人，J.Mol.Biol.296:833-849(2000)(描述了僅使用親本鼠類M0C-31抗EGP-2抗體的重鏈CDR3序列重組上皮糖蛋白-2(EGP-2)抗體)；Rader等人，Proc.Natl.Acad.Sc1.U.S.A.95:8910-8915(1998)(描述了使用鼠類抗整聯蛋白ανβ3抗體LM609的重鏈和輕鏈可變CDR3結構域產生一系列人源化抗整聯蛋白ανβ3抗體，其中每一個抗體成員在CDR3結構域之外的序列均不相同並均能與親本鼠類抗體結合至相同的表位，並且其親和力與親本鼠類抗體一樣高或比親本鼠類抗體更高)；Barbas等人，J.Am.Chem.Soc.116:2161-2162(1994)(披露了CDR3結構域對抗原結合的貢獻最大)；Barbas等人，Proc.Natl.Acad.Sc1.U.S.A.92:2529-2533(1995)(描述了將三個針對人胎盤DNA的Fab(S1-1、S1-40及S1-32)的重鏈CDR3序列移植至抗破傷風類毒素Fab的重鏈上，由此替換存在的重鏈CDR3，並證實CDR3結構域單獨就能夠賦予結合特異性);Ditzel等人，J.1mmunol.157:739-749(1996)(描述了移植研究，其中僅將親本多特異性FabLNA3的重鏈⑶R3轉移到結合單特異性IgG破傷風類毒素的Fabp313抗體的重鏈上，就足以保留親本Fab的結合特異性);Berezov等人，BIAjournal8ScientificRevieW8(2001)(描述了基於抗HER2單克隆抗體的CDR3的肽模擬物)；Igarashi等人，J.Biochem(Tokyo)117:452_7(1995)(描述了對應於抗磷脂醯絲氨酸抗體的CDR3結構域的一種12個胺基酸的合成多肽)！Bourgeois`等人,J.Virol72:807-10(1998)(顯示來源於抗呼吸道合胞病毒(RSV)抗體的重鏈CDR3結構域的單個肽能夠在體外中和所述病毒)；Levi等人，Proc.Natl.Acad.Sc1.U.S.A.90:4374-8(1993)(描述了基於鼠類抗HIV抗體的重鏈CDR3結構域的肽);Polymenis和Stoller，J.1mmunol.152:5218-5329(1994)(描述了通過移植結合Z-DNA的抗體的重鏈Q)R3區使之能夠結合scFv)；以及Xu和Davis,Immunity13:37-45(2000)(描述了重鏈CDR3的多樣性足以使在其他部分上相同的IgM分子在多種半抗原和蛋白抗原之間得到區分)。還參見美國專利號6，951，646;6，914，128;6，090，382；6，818，216;6，156，313;6，827，925;5，833，943;5，762，905以及5，760，185，描述了由單一CDR結構域定義的已獲得專利的抗體。這些參考文獻中每一篇的全文均通過引用併入本文。因此，本公開提供包括來自人或非人動物的抗體的一或多個重鏈和/或輕鏈CDR3結構域的單克隆抗體，其中該單克隆抗體能特異地結合CD22。在某些方面，本公開提供單克隆抗體，其包含來自於非人抗體(例如小鼠或大鼠抗體)的一個或多個重鏈和/或輕鏈CDR3結構域，其中該單克隆抗體能夠特異地結合CD22。在一些實施方案中，包括來自非人抗體的一個或多個重鏈和/或輕鏈CDR3結構域的此類創新的抗體對相應的親本非人抗體而言:(a)能夠與其競爭而進行結合；(b)保留功能特性；(C)與其結合至相同的表位；和/或(d)與其具有相似的結合親和力。在其他方面中，本公開提供了單克隆抗體，其包含來自人抗體(例如，從非人的動物獲得的人抗體)的一個或多個重鏈和/或輕鏈CDR3結構域，其中該人抗體能特異地結合CD22。在其他方面中，本公開提供了單克隆抗體，其包含來自第一人抗體(例如，從非人的動物獲得的人抗體)的一個或多個重鏈和/或輕鏈CDR3結構域，其中該第一人抗體能特異地結合CD22，並且其中來自該第一人抗體的CDR3結構域替換了人抗體中的CDR3結構域(該人抗體缺乏對CD22的結合特異性)，以產生能特異地結合至CD22的第二人抗體。在一些實施方案中，包含來自第一人抗體的一個或多個重鏈和/或輕鏈CDR3結構域的此類創新的抗體對相應的親本第一人抗體而言:(a)能夠與其競爭而結合；(b)保留其功能特性；(c)與其結合至相同的表位；和/或(d)與其具有相似的結合親和力。具有特定種系序列的抗體在某些實施方案中，本公開的抗體包括來自特定的種系重鏈免疫球蛋白基因的重鏈可變區和/或來自特定的種系輕鏈免疫球蛋白基因的輕鏈可變區。例如，在一個優選的實施方案中，本公開提供分離的單克隆抗體、或該抗體的抗原結合部分，包括重鏈可變區，該重鏈可變區是人Vh7-4.1基因、人Vh4-34基因、人Vh5-51基因、或人VHl-69基因的產物或衍生於所述基因，其中該抗體特異地結合人CD22。在另一個優選的實施方案中，本公開提供了分離的單克隆抗體、或該抗體的抗原結合部分，包括輕鏈可變區，該輕鏈可變區是人VA2b2基因、人VkL6基因、人VkA27基因、人\AlO基因、或人VkL18基因的產物或衍生於所述基因，其中該抗體特異地結合人CD22。在又一個優選的實施方案中，本公開提供了分離的單克隆抗體，或其抗原結合部分，其中該抗體包括重鏈可變區(其是人％7-4.1基因的產物或衍生於所述基因)，並包括輕鏈可變區(它是人Va2b2基因的產物或衍生於所述基因)，其中該抗體特異地結合CD22，優選人CD22。在又一個優選的實施方案中，本公開提供了分離的單克隆抗體，或其抗原結合部分，其中該抗體包括重鏈可變區(它是人％4-34基因的產物或衍生於所述基因)，並包括輕鏈可變區(它是人\L6基因的產物或衍生於所述基因)，其中該抗體特異地結合CD22，優選人CD22。在又一個優選的實施方案中，本公開提供了分離的單克隆抗體，或其抗原結合部分，其中該抗體包括重鏈可變區(它是人Vh5-51基因的產物或衍生於所述基因)，並包括輕鏈可變區(它是人\A27或AlO基因的產物或衍生於所述基因)，其中該抗體特異地結合CD22，優選人CD22。在又一個優選的實施方案中，本公開提供了分離的單克隆抗體，或其抗原結合部分，其中該抗體包括重鏈可變區(它是人Vh1-69基因的產物或衍生於所述基因)，並包括輕鏈可變區(它是人\L6基因的產物或衍生於所述基因)，其中該抗體特異地結合CD22，優選人CD22。在又一個優選的實施方案中，本公開提供了分離的單克隆抗體，或其抗原結合部分，其中該抗體包括重鏈可變區(它是人Vh1-69基因的產物或衍生於所述基因)，並包括輕鏈可變區(它是人\A27或L18基因的產物或衍生於所述基因)，其中該抗體特異地結合CD22，優選人CD22。此類抗體也可具有以上詳細說明的一種或多種功能特徵，例如內化進入CD22+細胞，針對CD22+細胞的ADCC活性和/或促進由BCR刺激細胞毒素誘導的Ramos細胞的細胞死亡。分別具有乂^-丄l&VA2b2的Vh及八的抗體的實例是12C5抗體。分別具有乂^^鬥及VkL6的Vh及\的抗體的實例是19A3抗體。分別具有VH4_34及VkL6的Vh及\的抗體的另一個實例是⑶22.1抗體。分別具有Vh4-34及VkL6的Vh及\的抗體的另一個實例是CD22.2抗體，其中Vh鏈包括N57Q突變。分別具有Vh4_34及VkL6種系的Vh及Vl的抗體的另一個實例是21F6抗體。分別具有Vh5-51及VkA27或AlO的Vh及\的抗體的實例是16F7抗體。分別具有Vh1-69及VkL6的Vh及\的抗體的實例是23C6抗體。分別具有Vh1-69及VkA27或L18的Vh及Vl的抗體的實例是4G6抗體。如在此所用，如果抗體的可變區由使用人種系免疫球蛋白基因的系統獲得，則該人抗體包含重鏈或輕鏈可變區，它是特定種系序列的「產物「或者「衍生於」該特定種系序列。此類系統包括用所感興趣的抗原對攜帶人免疫球蛋白基因的轉基因小鼠進行免疫，或者用所感興趣的抗原對在噬菌體上進行展示的人免疫球蛋白基因文庫進行篩選。人抗體是人種系免疫球蛋白序列的「產物」或「衍生於」該序列，其鑑定是通過對人抗體的胺基酸序列與人種系免疫球蛋白的胺基酸序列進行比較，並選擇在序列上最接近(即最大百分數同一性)人抗體的序列的人種系免疫球蛋白序列來進行的。作為特定的人種系免疫球蛋白序列的「產物」或「衍生於」該序列的人抗體，與該種系序列相比，可能含有胺基酸差異，這是由於例如，天然發生的體細胞突變或故意引入的定點突變。但是，經選擇的人抗體通常與由人種系免疫球蛋白基因進行編碼的胺基酸序列在胺基酸序列上具有至少90%的同一性，並且當與其他物種(例如，鼠類種系序列)的種系免疫球蛋白胺基酸序列進行比較時，含有將該人抗體鑑定為人的胺基酸殘基。在某些情況中，人抗體與由該種系免疫球蛋白基因進行編碼的胺基酸序列在胺基酸序列上可具有至少95%、或甚至至少96%、97%、98%，或99%的同一性。通常，與由人種系免疫球蛋白基因所編碼的胺基酸序列相比，衍生於特定的人種系序列的人抗體將展示不超過10個胺基酸差異。在某些情況中，與由種系免疫球蛋白基因進行編碼的胺基酸序列相比，該人抗體可展示不超過5個，或甚至不超過4個、3個、2個，或I個的胺基酸差異。同源杭體在又一個實施方案中，本公開的抗體包括重鏈及輕鏈可變區，所述可變區包括與在此說明的優選抗體的胺基酸序列同源的胺基酸序列，並且其中該抗體保留了本公開的抗-CD22抗體的所希望的功能特性。例如，本公開提供了分離的單克隆抗體，或其抗原結合部分，包括重鏈可變區及輕鏈可變區，其中:(a)該重鏈可變區包括胺基酸序列，該胺基酸序列與選自以下胺基酸序列具有至少80%的同源性:SEQIDNO:31-34、61、以及81-83;(b)該輕鏈可變區包括胺基酸序列，該胺基酸序列與選自以下的胺基酸序列具有至少80%的同源性:SEQIDNO:35-40，以及84-86；(C)該抗體特異地結合至人⑶22上。額外地或可選地，該抗體可具有以下功能特性中的一種或多種特性:(a)以IX10_7M或更少的Kd與人⑶22相結合；(b)內化進入⑶22+細胞；(c)在⑶22+細胞上表現ADCC活性；(d)促進由(例如)BCR刺激誘導的Ramos細胞的細胞死亡；和/或(e)當與細胞毒素綴合時抑制體內表達CD22的細胞的生長。在不同的實施方案中，該抗體可以是，例如人抗體、人源化抗體或嵌合抗體。在其他實施方案中，V1^P/或'胺基酸序列可以與以上給出的序列具有85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%的同源性。具有與以上給出的序列的Vh與Vl區具有高同源性(即，80%或更大)的乂11與'區的抗體，可以通過以下方式獲得:對編碼SEQIDNO:41-44、62、或87-89、或SEQIDNO:45-50或90-92的核酸分子進行誘變(例如，定點誘變或PCR介導的誘變)，接著使用在此說明的功能測定針對保留的功能(即，以上所給出的功能)檢測編碼出的被改變的抗體。如在此所用，在兩個胺基酸序列之間的百分比同源性等同於在這兩個序列之間的百分比同一性。在這兩個序列之間的百分比同一性是這些序列共有的相同位置的數目的函數(即，％同源性=相同位置的#/位置的總#X100)，考慮空位(gap)的數目以及每個空位的長度，它們需要被引入以用於這兩條序列的優化比對。如在以下非限制性的實例中所述，使用數學算法能完成序列的比較及在兩個序列之間的百分比同一性的確定。使用E.Meyers及W.Miller(Comput.Appl.Biosc1.,4:11-17(1988))的算法可以確定兩條胺基酸序列之間的百分比同一性，該算法已經被併入至ALIGN程序(版本2.0)中，該算法使用了PAM120權重殘基表(weightresiduetable)、空位長度罰分(gaplengthpenalty)12以及空位罰分4。此外，使用Needleman及Wunsch(J.Mol.Biol.48:444-453(1970))算法能確定兩條胺基酸序列之間的百分比同一性，該算法已被併入至GCG軟體包的GAP程序中(可在WWW.gcg.com獲得),該算法使用了Blossum62矩陣或PAM250矩陣，以及空位權重16、14、12、10、8、6、或4以及長度權重1、2、3、4、5或6。額外地或可選地，本公開的蛋白序列能進一步作為「查詢序列」來使用，對公開資料庫進行檢索，從而例如鑑定相關的序列。使用Altschul，等人(1990)J.Mol.Biol.215:403-10的XBLAST程序(版本2.0)能進行此類檢索。通過XBLAST程序，記分=50，字長=3可進行BLAST蛋白檢索，以獲得與本公開的抗體分子同源的胺基酸序列。為獲得用於比較目的的空位比對，如Altschul等人((1997)NucleicAcidsRes.25(17):3389-3402所述可利用GappedBLAST。當利用BLAST及GappedBLAST程序時，各個程序(如XBLAST及NBLAST)的默認參數是有用的。參見WWW.ncb1.nlm.nih.gov。具有保守性修飾的抗體在某些實施方案中，本公開的抗體包含重鏈可變區(其包含⑶R1XDR2及⑶R3序列)，以及輕鏈可變區(其包含⑶R1XDR2及⑶R3序列)，其中這些⑶R序列中一個或多個序列包括基於在此說明的優選抗體(例如，12C5、19A3、CD22.1、CD22.2、16F7、23C6、4G6以及21F6)的特定的胺基酸序列，或它們的保守性修飾，並且其中這些抗體保留了本公開的抗-CD22抗體的所希望的功能特性。在本領域中所理解的是，可以進行某些保守性序列修飾，這些保守性序列修飾不會去除抗原結合。參見例如，Brummell等人(1993)Biochem32:1180-8((描述了對沙門氏菌屬(Salmonella)特異的抗體的⑶R3重鏈結構域的突變分析；deWildt等人(1997)Prot.Eng.10:835-41(描述了對抗-UAl抗體的突變研究)；Komissarov等人(1997)J.Biol.Chem.272:26864-26870(表明在HCDR3中間的突變導致親和力的消失或減退)；Hall等人(1992)J.1mmunol.149:1605-12(描述在⑶R3區的單個胺基酸的改變使結合活性消失)；Kelley和O，Connell(1993)Biochem.32:6862-35(描述了Tyr殘基在抗原結合中的貢獻)；Adib-Conquy等人(1998)Int.1mmunol.10:341-6(描述了疏水性對結合的影響)、以及Beers等人(2000)Clin.Can.Res.6:2835-43(描述了HCDR3胺基酸突變體)。因此，本公開提供了分離的單克隆抗體，或其抗原結合部分，其包含含有⑶R1、⑶R2、以及⑶R3序列的重鏈可變區以及含有⑶R1、⑶R2、以及⑶R3序列的輕鏈可變區，其中:(a)重鏈可變區⑶R3序列包括選自以下的胺基酸序列:胺基酸序列SEQIDNO:9-12,69-71,以及它們的保守性修飾；(b)輕鏈可變區⑶R3序列包括選自以下的胺基酸序列:胺基酸序列SEQIDNO:25-30,79-80,以及它們的保守性修飾；以及(c)該抗體特異地結合至人⑶22上。另外地或可選地，該抗體可具有以下功能特性中的一種或多種特性:(a)以1X10_7M或更少的Kd與人⑶22相結合；(b)內化進入⑶22+細胞；(c)在⑶22+細胞上表現ADCC活性；和/或(d)促進由BCR刺激誘導的Ramos細胞的細胞死亡；和/或(e)當與細胞毒素綴合時抑制體內表達CD22的細胞的生長。在優選的實施方案中，重鏈可變區CDR2序列包括選自以下的胺基酸序列:胺基酸序列SEQIDNo:5-8、60、66-68，以及它們的保守性修飾；並且輕鏈可變區CDR2序列包括選自以下的胺基酸序列:胺基酸序列SEQIDNos:19-24,75-77,以及它們的保守性修飾。在另一個優選的實施方案中，重鏈可變區CDRl序列包括選自以下的胺基酸序列:胺基酸序列SEQIDNo=1-4,63-65,以及它們的保守性修飾；並且輕鏈可變區⑶Rl序列包括選自以下的胺基酸序列:胺基酸序列SEQIDNo:13-18,72-74,以及它們的保守性修飾。在不同的實施方案中，該抗體可以是例如人抗體、人源化抗體或嵌合抗體。如在此所使用的術語「保守性序列修飾」意指不會顯著影響或改變含有胺基酸序列的抗體的結合特性的胺基酸修飾。此類保守性修飾包括胺基酸的置換、添加、以及缺失。通過本領域已知的標準技術(例如定點誘變及PCR介導的誘變)可將修飾引入本公開的抗體中。保守性胺基酸置換是如下的置換，其中胺基酸殘基被具有相似側鏈的胺基酸殘基替換。已經在本領域中定義了具有相似側鏈的胺基酸殘基的家族。這些家族包括具有鹼性側鏈的胺基酸(如賴氨酸、精氨酸、組氨酸)，具有酸性側鏈的胺基酸(如天冬氨酸、穀氨酸)，具有不帶電荷的極性側鏈的胺基酸(如甘氨酸、天冬醯胺、穀氨醯胺、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、色氨酸)，具有非極性側鏈的胺基酸(如丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸)，具有支鏈側鏈的胺基酸(如蘇氨酸、纈氨酸、異亮氨酸)，以及具有芳香側鏈的胺基酸(如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、組氨酸)。因此，在本公開的抗體的CDR區中的一個或多個胺基酸殘基可以被來自相同側鏈家族的其他胺基酸殘基替代，並且使用在此說明的功能測定可以針對保留功能(即，以上給出的功能)檢測被改變的抗體。結合至與抗-CD22抗體相同的表位的抗體在另一個實施方案中，本公開提供了下述抗體，所述抗體如本公開的抗-CD22單克隆抗體中的任何抗體所識別的一樣結合至人⑶22的相同表位(即，這些抗體有能力與本公開的單克隆抗體中的任何抗體進行交叉競爭而與CD22相結合)。在優選的實施方案中，用於交叉競爭研究的參照抗體可以是單克隆抗體12C5(具有的Vh與'序列分別示於SEQIDNO:31及35)，或單克隆抗體19A3或單克隆抗體⑶22.1或單克隆抗體⑶22.2(具有的Vh與\序列分別示於SEQIDNO:32/61及36)或單克隆抗體16F7(具有的Vh與\序列分別示於SEQIDNO:33及37/38)或單克隆抗體23C6(具有的Vh與\序列分別示於SEQIDNO:34及39/40)，或單克隆抗體4G6(具有的Vh與Vl序列分別示於SEQIDN0:81及84/85)或單克隆抗體21F6(具有的Vh與\序列分別示於SEQIDNO:82/83及86)。根據此類交叉競爭的抗體與12C5、19A3、CD22.1、CD22.2、16F7、23C6、4G6及21F6在標準CD22結合測定中進行交叉競爭的能力，能夠鑑定此類交叉競爭的抗體。例如，可採用標準ELISA測定，其中將重組的⑶22固定在板上，這些抗體之一被進行螢光標記，並評價未標記抗體與標記抗體競爭結合的能力。額外地或可選地，可以使用BIAcore分析來評價抗體的交叉競爭的能力，如實例3所述(與12C5、19A3、CD22.1、CD22.2、16F7、23C6、4G6及21F6的表位定組(epitopegrouping)有關)。例如，測試抗體對12C5、19A3、CD22.1、CD22.2、16F7、23C6、4G6以及21F6與人CD22結合的抑制能力說明測試抗體可以與12C5、19A3、CD22.1、CD22.2、16F7、23C6、4G6以及21F6競爭而結合人CD22,並因此與如12C5、19A3、CD22.1、CD22.2、16F7、23C6、4G6以及21F6所識別的一樣結合至人CD22的相同表位。如實例3的詳細說明，抗體12C5、19A3、CD22.1、CD22.2、16F7、23C6、4G6以及21F6，每一個結合至⑶22上的不同表位並因此屬於不同的表位群(epitopegroup)。在一個優選的實施方案中，結合至12C5、19A3、CD22.1、CD22.2、16F7、23C6、4G6以及21F6上相同表位的抗體是人單克隆抗體。如實施例所述，可以對此類人單克隆抗體進行製備並分離。工程化並修飾的抗體還可以通過下述方式製備本公開的抗體:使用具有一個或多個在此披露的Vh和/或\序列的抗體作為起始材料，工程化修飾的抗體，這種修飾的抗體可以具有與起始抗體不同的特性。可以通過改變一個或兩個可變區(即V1^P/或')中的一個或多個殘基來對抗體進行工程化改造，例如可以改變一個或多個CDR區和/或一個或多個構架區中的殘基。額外地或可選地，可以通過改變恆定區中的殘基來對抗體進行工程化改造，例如以改變該抗體的一種或多種效應子功能。在某些實施方式中，可以使用CDR移植以對抗體的可變區進行工程化。抗體和靶抗原主要通過位於六個重鏈及輕鏈互補決定區(CDR)中的胺基酸殘基進行相互作用。因為這一原因，CDR中的胺基酸序列在各個抗體之間比在CDR之外的序列更具有多樣性。因為CDR序列負責大部分抗體-抗原相互作用，故可以通過構建包含被移植到構架序列(來自具有不同性質的不同抗體)上的來自特定天然存在抗體的CDR序列的表達載體，來表達模擬該特定天然存在抗體的性質的重組抗體(參見例如,Riechmann,L.等人(1998)Nature332:323-327Jones,P.等人(1986)Nature321:522-525；Queen,C.等人(1989)Proc.Natl.Acad.See.U.S.A.86:10029-10033；ffinter的美國專利號5，225，539，以及Queen等人的美國專利號5，530，101;5，585，089;5，693，762及6，180，370)。因此，本公開的另-個實施方案涉及分離的單克隆抗體，或其抗原結合部分，包括包含⑶R1、⑶R2、以及⑶R3序列的重鏈可變區，該⑶R1、⑶R2、以及⑶R3序列分別包含選自以下的胺基酸序列:SEQIDNO:1-4及63-65，SEQIDNO:5-8、60、及66-68，以及SEQIDNO:9-12及69-71;並且包括包含CDR1、CDR2、以及CDR3序列的輕鏈可變區，該CDR1、CDR2、以及⑶R3序列、該⑶R1XDR2、以及⑶R3序列分別包含選自以下的胺基酸序列:SEQIDNO:13-18及72-74，SEQIDNO:19-24及75-77，以及SEQIDNO:25-30以及78-80。因此，此類抗體含有單克隆抗體12C5、19A3、CD22.1、CD22.2、16F7、23C6、4G6以及21F6的Vh及Vl⑶R序列，但仍有可能含有不同於這些抗體的構架序列。此類構架序列可以從包括種系抗體基因序列的公共DNA資料庫或已公開的文獻獲得。例如，人重鏈及輕鏈可變區基因的種系DNA序列可以在「VBase」人種系序列資料庫中找到(可在網際網路WWW.mrc-cpe.cam.ac.uk/vbase獲得)，並且在以下文獻中找至丨J:Kabat,E.A.,等人(1991)SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第五版，U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIHPublicationN0.91-3242；Tomlinson,1.M.,等人(1992)"TheRepertoireofHumanGermlineVhSequencesRevealsaboutFiftyGroupsofVhSegmentswithDifferentHypervariableLoops"J.Mol.Biol.227:776-798;以及Cox，J.P.L.等人(1994)"ADirectoryofHumanGerm-lineVhSegmentsRevealsaStrongBiasintheirUsage"Eur.J.1mmunol.24:827-836;這些文獻的每一篇內容均明確地通過引用併入本文。作為另一個實例，針對人重鏈及輕鏈可變區基因的種系DNA序列可以在Genbank資料庫中找到。例如，在HCo7HuMAb小鼠中發現的以下重鏈種系序列及其Genbank登錄號是可獲得的:1-69(NG_0010109、NT_024637及BC070333)，3-33(NG_0010109及NT_024637)、以及3-7(NG_0010109及NT_024637)。作為另一個實例，在HCol2HuMAb小鼠中發現的以下重鏈種系序列及其Genbank登錄號是可獲得的:1_69(NG_0010109、NT_024637及BC070333)，5-51(NG_0010109以及NT_024637)，4-34(NG_0010109及NT_024637)，3-30.3(CAJ556644)、以及3-23(AJ406678)。可以使用本領域中眾所周知的一種被稱為GappedBLAST的序列相似性檢索方法(Altschul等人(1997)NucleicAcidsResearch翌:3389-3402),將抗體蛋白質序列與彙編的蛋白質序列資料庫進行比較。BLAST是啟發式算法，其中抗體序列與資料庫序列之間的具有統計學顯著的比對有可能包括比對字符的高得分區段對(HSP)。其得分不能通過延伸或修剪加以提高的區段對被稱為命中物(hit)。簡言之，可翻譯VBASE源的核苷酸序列(http://vbase.mrc-cpe.cam.ac.uk/vbasel/list2.php),並且保留FRl至FR3構架區之間的區域(包括FRl和FR3區)。這些資料庫序列具有平均長度98個殘基。蛋白全長上完全匹配的重複序列被剔除。蛋白質BLAST檢索採用程序blastp、以及預設標準參數，但關閉低複雜度過濾器並使用BL0SUM62的替代矩陣和用於最高5個命中物的過濾器，從而產生序列匹配。核苷酸序列按全部六種讀框翻譯，在資料庫序列的匹配區段中不具有終止密碼子的讀框被視為潛在的命中物。這反過來採用BLAST程序tblastx進行確認，該程序按全部六種讀框翻譯抗體序列，並且將這些翻譯物與按全部六種讀框動態翻譯的VBASE核苷酸序列進行比較。同一性是在抗體序列與蛋白質資料庫之間在序列全長上的確切的胺基酸匹配。陽性(positives)(同一性+替代匹配)是不相同的，而是由BL0SUM62替代矩陣所引導的胺基酸替代。如果抗體序列以一樣的同一性匹配資料庫序列中的兩條序列，則具有最大陽性的命中物將被確定為匹配序列命中物。在本公開的抗體中使用的優選構架序列是結構上與由本公開的已選擇的抗體所使用的構架序列相似的構架序列，例如與由本公開優選的單克隆抗體所使用的Vh7-4.1(SEQIDNO:51)、VH4-34(SEQIDNO:52)、VH5_51(SEQIDNO:53)、或VH1_69(SEQIDNO:54)構架序列和/或Va2b2(SEQIDNO:55)、VkL6(SEQIDNO:56)、VkA27(SEQIDNO:57)、VkAlO(SEQIDNO:58)、或VkL18(SEQIDNO:93)構架序列。這些VhCDRl、⑶R2、及⑶R3序列，以及Vk⑶RlXDR2、及⑶R3序列可以被移植至多個構架區上，這些構架區具有與從中衍生出該構架序列的種系免疫球蛋白基因中所發現的序列相同的序列，或者這些CDR序列可以被移植至構架區上，這些構架區與這些種系序列相比含有一個或多個突變。例如，已發現在某些情況下對構架區內的殘基進行突變有益處，以保持或增強該抗體的抗原結合能力(例如參見，Queen等人的美國專利號5，530，101;5，585，089;5，693，762及6，180，370)。另一種類型的可變區修飾是在V1^P/或'⑶R1XDR2和/或⑶R3區中對胺基酸殘基進行突變，由此改善所感興趣的抗體的一種或多種結合特性(例如親和力)。可以進行定向誘變或PCR介導的誘變來引入一種或多種突變，並且對抗體結合、或其他所感興趣的功能特性的作用可以在體內或體外測定中進行評估，正如在此所說明並在實施例中所提供。優選引入保守性修飾(如以上所討論)。這些突變可能是胺基酸置換、添加或缺失，但優選是置換。此外，通常在CDR區中對不超過一個、兩個、三個、四個或五個殘基進行改變。因此，在另一實施方案中，本公開提供了分離的抗-CD22單克隆抗體，或它們的抗原結合部分，包括重鏈可變區，該重鏈可變區包括:(a)VHCDRl區，其包含選自以下的胺基酸序列:SEQIDNO:1-4或63-65，或與SEQIDNO:1-4或63-65相比具有一個、兩個、三個、四個或五個胺基酸置換、缺失、或添加的胺基酸序列；(b)VH⑶R2區，其包含選自以下的胺基酸序列:SEQIDNO:5-8、60或66-68，或SEQIDNO:5_8、60或66-68相比具有一個、兩個、三個、四個或五個胺基酸置換、缺失、或添加的胺基酸序列；(C)VHCDR3區，其包含選自以下的胺基酸序列:SEQIDNO:9-12或69-71，或與SEQIDNO:9_12或69-71相比具有一個、兩個、三個、四個或五個胺基酸置換、缺失、或添加的胺基酸序列；(d)VfDRl區，其包含選自以下的胺基酸序列:SEQIDNO:13-18或72-74，或與SEQIDNO:13-18或72-74相比具有一個、兩個、三個、四個或五個胺基酸置換、缺失、或添加的胺基酸序列；(e)\CDR2區，其包含選自以下的胺基酸序列:SEQIDNO:19-24或75-77，或與SEQIDNO:19-24或75-77相比具有一個、兩個、三個、四個或五個胺基酸置換、缺失、或添加的胺基酸序列；以及(f)\CDR3區，其包含選自以下的胺基酸序列:SEQIDNO:25-30或78-80，或與SEQIDNO:25-30或78-80相比具有一個、兩個、三個、四個或五個胺基酸置換、缺失、或添加的胺基酸序列。本公開的工程化抗體包括以下抗體:其中在Vh和/或'內已經對構架殘基進行了修飾，從而例如改進抗體的特性。通常對此類構架進行修飾，以降低抗體的免疫原性。例如，一個方法是將一個或多個構架殘基「突變回(backmutate)」相應的種系序列。更具體，已經經歷了體細胞突變的抗體可能包含與從中衍生出抗體的種系序列不同的構架殘基。此類殘基可以通過將該抗體構架序列與從中衍生出該抗體的種系序列進行比較而被鑑定。例如,對於12C5VX區而言,構架區胺基酸第40及68位(使用Kabat編號系統)與種系不同。通過進行以下L40Q及R68K置換中的一個或兩個置換，這些位置中的一個或兩個位置可以被突變回種系序列。此外，對於19A3及CD22.1Vh區而言，構架區胺基酸第27位(使用Kabat編號系統)與種系不同。通過進行以下R27G置換，這一位置可以被突變回種系序列。此外，對於⑶22.2VH區而言，構架區胺基酸第27及57位(使用Kabat編號系統)與種系不同。通過進行以下R27G及Q57N置換，這一位置可以被突變回種系序列。此外,對於16F7VH區而言,構架區胺基酸第28位(使用Kabat編號系統)與種系不同。通過進行以下N28S置換，這一位置可以被突變回種系序列。此外,對於16F7VK.2區而言,構架區胺基酸第85位(使用Kabat編號系統)與種系不同。通過進行以下A85T置換，這一位置可以被突變回種系序列。此外，對於23C6VH區而言，構架區胺基酸第14、79及88位(使用Kabat編號系統)與種系不同。通過進行以下T14P、V79A及A88S置換中的一個、兩個或全部三個置換,這些位置中的一個、兩個或全部三個位置可以被突變回種系序列。此外，對於4G6Vh區而言，構架區胺基酸位置P、D、F、D、T、Y及F(使用Kabat編號系統)與種系不同。通過進行以下PA；DG；NS；FY；DE；TS；YR；FS中的一個、兩個、三個、四個、五個、六個或全部七個置換，這一位置可以被突變回種系序列。需輸入RE:KABAT編號。此外,對於4G6VK1區而言,構架區胺基酸位置T及D(使用Kabat編號系統)與種系不同。通過進行以下TK及DE置換中的一個或兩個置換，這些位置可以被突變回種系序列。此外,對於21F6Vh1區而言,構架區胺基酸位置S及I(使用Kabat編號系統)與種系不同。通過進行以下SP及IV置換，這些位置可以被突變回種系序列。此外，對於21F6VH2區而言，構架區胺基酸位置S及M(使用Kabat編號系統)與種系不同。通過進行以下SP及MV置換，這些位置可以被突變回種系序列。另一種類型的構架修飾涉及在構架區內，或甚至在一個或多個CDR區內，對一個或多個殘基進行突變，以去除T細胞表位，由此降低該抗體的潛在的免疫原性。這一方法也被稱為「去免疫(deimmunization)」,並且在Carr等人的美國專利公開號2003/0153043中有更詳細的說明。除了在構架區或⑶R區內進行的修飾之外，或可選地，還可以對本公開的抗體進行工程化，以在Fe區內包含修飾，通常以改變該抗體的一種或多種功能特性，例如血清半衰期、補體固定、Fe受體結合、和/或抗原依賴的細胞的細胞毒性作用。此外，本公開的抗體可以被化學修飾(例如，可以將一個或多個化學物部分附著至該抗體)或被修飾以改變其糖基化作用，以便再次改變該抗體的一種或多種功能特性。以下對這些實施方案中的每一個均進行另外詳細的說明。Fe區中的殘基的編號是Kabat的EU索引號。在一個實施方案中，對CHl的鉸鏈區進行修飾，這樣使鉸鏈區中的半胱氨酸殘基的數目發生變化(例如，增加或減少)。在Bodmer等人的US專利號5，677，425中更說明了這一方法。CHl的鉸鏈區中的半胱氨酸殘基的數目發生變化，例如，便於組裝輕鏈及重鏈或者增大或減小該抗體的穩定性。在另一個實施方案中，對抗體的Fe鉸鏈區進行突變以減小該抗體的生物半衰期。更具體地，將一個或多個胺基酸突變引入Fe鉸鏈片段的CH2-CH3結構域的界面區，這樣使相對於天然Fe鉸鏈結構域的葡萄球菌A蛋白(StaphylococcylproteinA,SpA)結合而言，該抗體削弱了SpA的結合。Ward等人的US專利號6，165，745更詳細地說明了這一方法。在另一個實施方案中，對該抗體進行修飾以增大其生物半衰期。不同的方法是可能的。例如，如Ward的美國專利號6，277，375所述，引入以下T252L、T254S、T256F突變中的一種或多種突變。可選地，為增大生物半衰期，該抗體可以在CHl或CL區中發生變化以包含從IgG的Fe區的CH2結構域的兩個環獲得的補救受體(salvagereceptor)結合表位,如Presta等人的美國專利號5，869，046及6，121，022所述。在又其他的實施方案中，通過用不同的胺基酸殘基替換至少一個胺基酸殘基來改變Fe區，而改變該抗體的一種或多種效應子功能。例如，選自胺基酸殘基234、235、236、237、297、318、320及322的一個或多個胺基酸可以被不同的胺基酸殘基所替換，這樣使該抗體對於效應物配體具有已改變的親和力，但保留該親本抗體的抗原結合能力。例如，親和力被改變的效應物配體可以是Fe受體或補體的Cl成分。Winter等人的美國專利號5，624，821和5，648，260更詳細說明了這一方法。在另一個實例中，選自胺基酸殘基329、331及322的一個或多個胺基酸可以被不同的胺基酸殘基所替換，這樣使該抗體具有已改變的Clq結合和/或降低或已消除的依賴於補體的細胞毒性(OTC)。Idusogie等人的美國專利號6，194，551更詳細說明了這一方法。在另一個實例中，改變胺基酸位置231及239中的一個或多個胺基酸，由此改變抗體的固定補體的能力。Bodmer等人的PCT公開文件W094/29351中進一步說明了這一方法。在又一個實例中，為了提高該抗體介導抗體依賴性細胞毒作用(ADCC)的能力和/或提高該抗體對FeY受體的親和性，通過在下列位置修飾一個或多個胺基酸，對Fe區進行了修飾:238、239、248、249、252、254、255、256、258、265、267、268、269、270、272、276、278、280、283、285、286、289、290、292、293、294、295、296、298、301、303、305、307、309、312、315、320、322、324、326、327、329、330、331、333、334、335、337、338、340、360、373、376、378、382、388、389、398、414、416、419、430、434、435、437、438或439。Presta的PCT公開文件W000/42072中進一步詳細地說明了這一方法。此外，在人IgGl上已做出針對FeYR1、FcyRII,FcyRIII及FcRn的結合位點的圖譜，並描述了具有改善的結合的變體(參見Shields,R.L.等人(2001)J.Biol.Chem.276:6591-6604)。在位置256、290、298、333、334及339處的特定突變顯示出改善對FeYRIII的結合。另外，下列組合突變顯示出改善FeYRIII的結合:T256A/S298A、S298A/E333A、S298A/K224A及S298A/E333A/K334A。.在再另一個實施方案中，對抗體的糖基化作用進行了修飾。例如，可以製備去糖基化(aglycoslated)的抗體(即，該抗體缺乏糖基化)。可以改變糖基化作用，以(例如)增加該抗體對抗原的親和性。例如，通過在該抗體序列中改變一個或多個糖基化的位點可以實現此類糖類修飾。例如，可以進行一個或多個胺基酸的置換，這導致去除一個或多個可變區構架糖基化位點，由此在那個位點處消除糖基化作用。這種去糖基化作用可能提高該抗體對抗原的親和力。Co等人的美國專利號5，714，350及6，350，861進一步詳細地說明了這一方法。下述文獻還詳細描述了另外多種改變糖基化的方法=Hanai等人的美國專利7，214，775、Presta的美國專利號6，737，056、Presta的美國公開號20070020260、Dickey等人的PCT發明者D·J·金,A·維特,H·N·勒布朗,R·西奧利斯,A·馬蘇德,M·亞馬那卡,K·D·岑斯,S·R·德威金斯,T·斯普勞爾,C·拉奧-納伊克,D·帕斯莫爾,K·託伊,D·M·塔那馬奇申請人:梅達雷克斯公司