具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器及其製備方法與流程
2023-05-15 04:15:36 1
本發明屬於高分子材料、納米材料、生物電子器件等領域，特別是涉及一種用電沉積方法構建的具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器及其製備方法。
背景技術：
碳點(carbondots,cds)是指粒徑小於10nm具有光致發光性能的碳納米粒子。碳點作為一種新型的螢光量子點，與傳統的量子點相比，具有無毒性、生物相容性好等優點[journalofmaterialschemistry,2012,22(46):24230-24253]。近年來，由於碳點的光致發光性、光穩定性、發光強度可以調節等性能，其被廣泛應用於檢測金屬離子、有機小分子、陰離子以及生物分子等。其作用原理可以概括為，被測物質與碳點發生反應，改變了碳點表面的電子空穴分布，從而發生了螢光碳點的螢光強度的猝滅或者增強，這樣就實現了對被測物質的定量或者定性的分析。例如：碳點檢測金屬離子fe3+，利用螢光碳點作為螢光探針，與fe3+作用，碳點與三價鐵離子之間產生了一種穩定的非螢光物質，導致了靜態的螢光猝滅，從而實現對fe3+的檢測。[分析化學,2016,44(5):804-808.]
目前，已有一些關於碳點檢測應用方面的研究，例如jiang等人探索了以碳點製備電化學檢測器對人體中的多巴胺進行檢測[journalofcolloid&interfacescience,2015,452:199-202]，du等人探索了碳點的螢光特性製備螢光探針對尿液中的碘進行選擇性的檢測[microchimicaacta,2013,180(5):453-460]。上述研究表明碳點在電化學檢測和螢光檢測方面的巨大潛力以及廣闊的應用前景，值得我們進一步的研究和探索。然而，上述的檢測應用都只單獨地利用了碳點的螢光特性進行檢測或者利用了碳點的電化學性能進行檢測，檢測方法均存在一定的不足，例如檢測特異性不高，檢測抗幹擾性不佳等。因此，尋找一種能夠綜合利用碳點特性的高效檢測手段仍然是需要人們努力解決的技術問題。
殼聚糖是甲殼素脫乙醯基的產物，廣泛存在於昆蟲、甲殼類動物的外殼中。它具有良好的生物相容性、生物可降解性、無毒、來源廣泛且價格低廉等優點，被廣泛應用於生物醫學等領域。同時，殼聚糖可以作為合成碳點的碳源，採用殼聚糖水溶液微波原位法合成碳點/殼聚糖納米複合生物材料，不僅綠色環保，又方便快捷，同時有利於進一步構建碳點/殼聚糖複合材料檢測器。殼聚糖是一種被廣泛研究的具有電刺激響應性，能夠在外加電信號激發下進行電沉積的生物大分子，它還是一種具有ph響應性和成膜性能的氨基多糖。在ph降低時，殼聚糖的氨基能夠被質子化，使它成為可以溶解的陽離子聚電解質；而當ph升高時，殼聚糖的氨基去質子化變成不能溶解的狀態。更重要的是，殼聚糖的這種溶解-不溶解狀態轉變發生在ph＝6～7的範圍[biofabrication,2010,2(2):022002]，而這種ph範圍特別適合一些生物技術方面的應用。
利用殼聚糖這種獨特的ph響應性，可以通過電化學反應在電極表面產生局部的ph梯度，將溶液中的殼聚糖分子鏈質子化，使溶液中的碳點/殼聚糖納米複合生物材料共沉積到電極表面，通過殼聚糖對陰極電信號刺激響應，形成與電極緊密結合併保持原有性質的穩定的薄膜，即通過電沉積的方法構建碳點/殼聚糖複合材料檢測器。這種利用電沉積技術構建檢測器的方法具有反應條件溫和、簡單、快速等優點。同時，所構建的碳點/殼聚糖檢測器具有更好的檢測特異性，檢測方法多樣，既可以通過電化學方法進行檢測，也可以利用碳點的螢光性能來進行檢測，從而可以同時達到電化學檢測和螢光檢測的雙功能檢測的目的，從而能夠更好的實現對一些物質(例如：抗壞血酸)的檢測。
技術實現要素：
本發明要解決的技術問題是：提供一種用電沉積方法構建的具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器及其製備方法，該碳點/殼聚糖檢測器是採用電沉積方法構建得到的，該檢測器能夠同時實現電化學檢測和螢光檢測，是一種具有雙檢測功能的檢測器，可以對一些物質(例如：抗壞血酸)同時進行電化學和螢光雙功能檢測。
本發明為解決上述技術問題提供的技術方案是：一種用電沉積方法構建的具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器，其特徵在於：該碳點/殼聚糖檢測器採用電沉積的方法構建，以碳點/殼聚糖複合物作為電沉積液，採用陰極電沉積技術在金屬電極上電沉積碳點/殼聚糖電沉積層，然後在碳點/殼聚糖電沉積層中滴加入三價鐵離子，構建成一種具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器。
一種用電沉積方法構建的具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器的製備方法，其特徵在於，它包括如下步驟：
1)碳點/殼聚糖複合物電沉積液的製備：取固體殼聚糖粉末2～3g，加入盛有100ml～150ml蒸餾水的燒杯中，磁力攪拌10～12小時使殼聚糖溶解，攪拌過程中加入0.1m～0.5m的鹽酸溶液調整殼聚糖溶液ph，控制殼聚糖溶液ph在5.5～5.7之間，攪拌結束得到質量濃度為2～3g/ml的殼聚糖溶液；取20～50ml殼聚糖溶液置於微波爐中進行微波處理，8～10分鐘後取出微波產物，加入30～50ml蒸餾水，室溫下磁力攪拌8～12小時使微波產物充分溶解後，放入高速離心機中離心10～20分鐘，離心速度為8000～10000轉/分鐘，離心後取上層清液得到碳點/殼聚糖複合物；
2)碳點/殼聚糖的電沉積及檢測器的構建：取步驟1)製備的碳點/殼聚糖複合物3～6ml超聲分散5～10分鐘除去碳點/殼聚糖複合物分散液中的氣泡，將碳點/殼聚糖複合物作為電沉積液，以鈦片為陰極，鉑片為陽極，用細砂紙對鈦片和鉑片的表面不平整處進行打磨處理，確保其表面平整光滑，再將陰陽電極同時浸入到上述步驟1)製備的碳點/殼聚糖複合物電沉積液中，插入液面下1～2釐米，採用高精度可編程直流電源施加恆定電壓1.0～1.25v進行碳點/殼聚糖的電沉積，電沉積時間為2～6分鐘，電沉積完成後將陰極鈦片取出，此時鈦片上沉積有碳點/殼聚糖電沉積層，用蒸餾水小心衝洗鈦片2～5次，並利用紫外燈或螢光顯微鏡觀察沉積在鈦片上碳點/殼聚糖電沉積層的螢光；
用移液槍吸取50～100μl摩爾濃度為0.1m～0.5m的三氯化鐵溶液，小心滴加在鈦片的碳點/殼聚糖電沉積層上，使三氯化鐵溶液均勻覆蓋碳點/殼聚糖電沉積層，然後將鈦片平整置於載玻片上，在20～30℃下，自然乾燥40～60分鐘，得到具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器，並利用紫外燈或螢光顯微鏡觀察碳點/殼聚糖檢測器表面的螢光。
具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器的應用，其特徵在於將構建的碳點/殼聚糖檢測器用於對一些物質(例如：抗壞血酸)的雙功能檢測：將具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器為工作電極，採用三電極體系，利用電化學工作站對目標檢測物(例如：抗壞血酸)進行電化學檢測；隨後將電化學檢測後的碳點/殼聚糖檢測器取出，利用紫外燈、螢光顯微鏡或螢光分光光度計等觀察其螢光性能，通過檢測前後螢光的變化達到螢光檢測的目的，從而同時實現碳點/殼聚糖檢測器的電化學檢測和螢光檢測雙檢測功能。
本發明基於碳點/殼聚糖複合生物材料的電沉積技術和碳點本身特有的螢光特性，開展碳點/殼聚糖納米複合生物材料在檢測方面的應用研究。本發明的創新點在於將碳點和殼聚糖共沉積到金屬電極上利用電沉積技術構建了一種具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器，採用電化學檢測和螢光檢測兩種功能模式對一些物質進行檢測。本發明構建的碳點/殼聚糖檢測器具有更好的檢測特異性、檢測方便多樣的特點。此外，本發明採用的檢測器構建方法(電沉積方法)具有操作簡單、製備條件溫和(室溫水溶液體系)、快速高效和不使用有機溶劑的特點，且使用生物無毒性的螢光碳點，這將有利於推廣此類螢光碳點納米複合材料在檢測器、生物傳感器等領域的應用。
本發明的碳點/殼聚糖檢測器採用電沉積方法進行製備，即對碳點/殼聚糖複合材料在金屬電極上進行陰極電沉積。殼聚糖具有良好的生物相容性、生物可降解性、無毒、來源廣泛且價格低廉等優點，還具有ph刺激響應性的特點。利用殼聚糖的ph刺激響應性，可以通過創造一定的ph梯度在金屬電極上進行碳點/殼聚糖的共沉積，即通過電化學反應在電極表面產生局部的ph梯度，將溶液中的殼聚糖分子鏈質子化，使溶液中的碳點與殼聚糖共沉積到電極表面。同時，電極表面的碳點/殼聚糖電沉積層保留了碳點良好的螢光特性，為進一步構建碳點/殼聚糖的雙功能檢測檢測器提供了有利條件。
本發明通過在電極上沉積的碳點/殼聚糖電沉積層加入三價鐵離子，這是因為三價鐵離子會使得碳點的螢光猝滅，若加入還原性物質還原三價鐵離子，則碳點的螢光可以重新出現。由於三價鐵離子的這一特性，我們在碳點/殼聚糖電沉積層加入三價鐵離子構建碳點/殼聚糖檢測器。將所構建的碳點/殼聚糖檢測器作為工作電極，採用三電極體系，並利用電化學工作站對一些物質進行電化學檢測，例如在檢測體系中加入抗壞血酸後，對體系的循環伏安曲線進行檢測，達到電化學檢測抗壞血酸的目的；與此同時，由於抗壞血酸將三價鐵離子還原，因而碳點的螢光重新出現，再利用紫外燈、螢光顯微鏡或螢光分光光度計等觀察螢光性能，通過檢測前後螢光的變化達到螢光檢測的目的，從而同時實現碳點/殼聚糖檢測器的電化學檢測和螢光檢測雙檢測功能。
本發明的一種用電沉積方法構建的具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器，其在檢測、生物傳感器等領域具有良好的應用價值。
本發明的有益效果是：
1)本發明利用電沉積方法構建碳點/殼聚糖檢測器，該方法製備過程方便，操作簡單，易於控制；反應時間短，反應效率高，所用生物原料安全無毒，綠色環保；儀器設備簡單，成本低廉等。
2)本發明構建的碳點/殼聚糖檢測器，先用微波法製備碳點/殼聚糖複合物，再以其為電沉積液進行電沉積。殼聚糖具有良好的生物相容性、無毒性以及可生物降解性。另外，殼聚糖還具有來源廣、可再生、成本低等特點。因此，殼聚糖的這些優良特性都十分有利於其在檢測器、生物傳感器領域的應用。
3)本發明採用電沉積法構建碳點/殼聚糖檢測器，具有操作簡單，製備條件溫和，設備安全等優點，在電沉積過程中，以碳點/殼聚糖複合物為電沉積液，整個電沉積過程安全可控，在2～6分鐘之內就可以在鈦片上沉積碳點/殼聚糖電沉積層，並且由於碳點的作用，提高了電化學檢測的靈敏性。
4)本發明所構建的碳點/殼聚糖檢測器，不僅可以通過循環伏安法對一些物質(例如：抗壞血酸)進行電化學檢測，與此同時碳點/殼聚糖檢測器又保留有碳點的螢光特性，可以利用螢光性能變化進行螢光檢測。由於同時具備電化學檢測和螢光檢測兩種檢測功能，利用雙檢測功能對被檢測物質進行檢測比單一的檢測更為準確，通過電化學檢測與螢光檢測結果的綜合分析，使檢測具有更好的特異性。
附圖說明
圖1是本發明實施例1沉積有碳點/殼聚糖電沉積層的鈦片電極在365nm紫外燈下的螢光照片。
圖2是本發明實施例1所構建的碳點/殼聚糖檢測器對抗壞血酸的循環伏安曲線(a：對照鈦片電極對抗壞血酸的循環伏安曲線，b：碳點/殼聚糖檢測器對抗壞血酸的循環伏安曲線)。
圖3是本發明實施例1所構建的碳點/殼聚糖檢測器加入抗壞血酸前後在365nm紫外燈下的螢光照片。(a：加入抗壞血酸前的螢光照片，b：加入抗壞血酸後的螢光照片)。
具體實施方式
下面結合附圖和實施例對本發明作進一步的描述，當然下述實施例不應理解為對本發明的限制。
本發明提供一種用電沉積方法構建的具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器的方法，下面結合具體實施例對本發明作進一步說明，但不限定本發明。
實施例1
一種用電沉積方法構建的具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器的方法，它包括如下步驟：
1)碳點/殼聚糖複合物電沉積液的製備：取2g殼聚糖粉末，加入盛有100ml蒸餾水的燒杯中，磁力攪拌10小時使殼聚糖溶解，攪拌過程中加入0.1m的鹽酸溶液調整殼聚糖溶液ph，控制殼聚糖溶液ph在5.5，攪拌結束得到質量濃度為2g/ml的殼聚糖溶液。取20殼聚糖溶液置於微波爐中進行微波處理，8分鐘後取出微波產物，加入30ml蒸餾水，室溫下磁力攪拌8小時使微波產物充分溶解在蒸餾水中後，放入高速離心機中離心20分鐘，離心速度為8000轉/分鐘，離心後取上層清液得到碳點/殼聚糖複合物；
2)碳點/殼聚糖的電沉積及檢測器的構建：取步驟1)製備的碳點/殼聚糖複合物3ml超聲分散5分鐘除去碳點/殼聚糖複合物分散液中的氣泡，將碳點/殼聚糖複合物作為電沉積液，以鈦片為陰極，鉑片為陽極，電沉積開始前用細砂紙將鈦片和鉑片小心打磨乾淨，確保其表面平整光滑，採用高精度可編程直流電源進行電沉積，將陰陽電極同時浸入所配置的電沉積液中，插入液面下1釐米，採用高精度可編程直流電源施加恆定電壓1.0v，電沉積時間為2分鐘，電沉積完成後將陰極鈦片小心取下，此時，鈦片上沉積有碳點/殼聚糖電沉積層，用蒸餾水小心衝洗2次，洗去粘附在電沉積層的電沉積液，除去電沉積層的表面氣泡。將沉積有碳點/殼聚糖電沉積層的鈦片電極置於365nm紫外燈下觀察其螢光強度。
用移液槍吸取50μl摩爾濃度為0.1m的三氯化鐵溶液小心滴加在鈦片上的碳點/殼聚糖電沉積層上，均勻覆蓋碳點/殼聚糖電沉積層，然後將鈦片平整置於載玻片上，在20℃下，自然乾燥60分鐘，得到具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器，在365nm紫外燈下觀察其螢光強度。
碳點/殼聚糖檢測器的雙功能檢測(應用)：採用chi電化學工作站進行電化學循環伏安測試；取步驟2)中所構建的碳點/殼聚糖檢測器為工作電極，以鉑絲電極為對電極，以甘汞電極為參比電極，以質量體積比0.9％的氯化鈉溶液為緩衝溶液，加入100μl摩爾濃度為0.1m的抗壞血酸溶液，做循環伏安法電化學測試，起始電壓設為-0.6v，最高電壓設為1.0v，終止電壓與起始電壓保持一致，從而利用電化學工作站對抗壞血酸進行電化學檢測。隨後將電化學檢測後的碳點/殼聚糖檢測器取出，在365nm紫外燈下觀察其螢光變化。
圖1是本發明實施例1沉積有碳點/殼聚糖電沉積層的鈦片電極在365nm紫外燈下的螢光照片。從圖1可以發現，鈦片上的碳點/殼聚糖電沉積層在365nm紫外光激發條件下，能夠發出十分明顯的藍色螢光，這說明該碳點/殼聚糖電沉積層不僅保留了殼聚糖的成膜性能和ph刺激響應性能，而且還具有碳點的螢光性能。
圖2是本發明實施例1所構建的碳點/殼聚糖檢測器對抗壞血酸的循環伏安曲線(a：對照鈦片電極對抗壞血酸的循環伏安曲線，b：碳點/殼聚糖檢測器對抗壞血酸的循環伏安曲線)。具體測試步驟是：採用chi電化學工作站做電化學循環伏安測試，取未沉積碳點/殼聚糖電沉積層的對照鈦片電極為工作電極，以鉑絲電極為對電極，以甘汞電極為參比電極，以質量體積比0.9％的氯化鈉溶液為緩衝溶液，加入100μl摩爾濃度為0.1m的抗壞血酸溶液，做循環伏安法電化學測試，起始電壓設為-0.6v，最高電壓設為1.0v，終止電壓與起始電壓保持一致，得到圖2a；取步驟2)中所構建的碳點/殼聚糖檢測器為工作電極，以鉑絲電極為對電極，以甘汞電極為參比電極，以質量體積比0.9％的氯化鈉溶液為緩衝溶液，加入100μl摩爾濃度為0.1m的抗壞血酸溶液，做循環伏安法電化學測試，起始電壓設為-0.6v，最高電壓設為1.0v，終止電壓與起始電壓保持一致，得到圖2b。通過這兩條曲線的對比，我們可以得出如下結論：由於加入的抗壞血酸將檢測器中的三價鐵離子還原，圖2b中出現了明顯的氧化還原峰，達到了電化學檢測抗壞血酸的目的，通過與對照鈦片電極循環伏安曲線的對比，說明我們所構建的碳點/殼聚糖檢測器可以用於電化學檢測抗壞血酸。
圖3是本發明實施例1所構建的碳點/殼聚糖檢測器加入抗壞血酸前後在365nm紫外燈下的螢光照片。(a：檢測器加入抗壞血酸前的螢光照片，b：檢測器加入抗壞血酸後的螢光照片)圖片結果顯示：1)根據圖3a可知，加入三氯化鐵後，由於碳點和三氯化鐵離子的作用，使碳點發生螢光猝滅，所以檢測器在365nm紫外光激發下無螢光；3)根據圖3b可知，加入抗壞血酸後，由於抗壞血酸將檢測器中的三價鐵離子還原，碳點的螢光恢復，所以檢測器在365nm紫外光激發下具有十分明顯的藍色螢光；根據加入抗壞血酸前後檢測器的螢光變化可知我們所構建的碳點/殼聚糖檢測器不僅可以電化學檢測抗壞血酸，同時可以螢光檢測抗壞血酸，即我們構建了一種具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器。
實施例2
一種用電沉積方法構建的具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器的方法，它包括如下步驟：
1)碳點/殼聚糖複合物電沉積液的製備：取固體殼聚糖粉末3g，加入盛有150ml蒸餾水的燒杯中，磁力攪拌11小時使殼聚糖溶解，攪拌過程中加入0.3m的鹽酸溶液調整殼聚糖溶液ph，控制殼聚糖溶液ph在5.6之間，攪拌結束得到質量濃度為2g/ml的殼聚糖溶液。取30ml殼聚糖溶液置於微波爐中進行微波處理，9分鐘後取出微波產物，加入40ml蒸餾水，室溫下磁力攪拌10小時使微波產物充分溶解在蒸餾水中後，放入高速離心機中離心15分鐘，離心速度為9000轉/分鐘，離心後取上層清液得到碳點/殼聚糖複合物；
2)碳點/殼聚糖的電沉積及檢測器的構建：取步驟1)製備的碳點/殼聚糖複合物4ml超聲分散8分鐘除去碳點/殼聚糖複合物分散液中的氣泡，將碳點/殼聚糖複合物作為電沉積液，以鈦片為陰極，鉑片為陽極，電沉積開始前用細砂紙將鈦片和鉑片小心打磨乾淨，確保其表面平整光滑，採用高精度可編程直流電源進行電沉積，將陰陽電極同時浸入所配置的電沉積液中，插入液面下1釐米，採用高精度可編程直流電源施加恆定電壓1.1v，電沉積時間為4分鐘，電沉積完成後將陰極鈦片小心取下，此時，鈦片上沉積有碳點/殼聚糖電沉積層，用蒸餾水小心衝洗3次，洗去粘附在電沉積層的電沉積液，除去電沉積層的表面氣泡。將沉積有碳點/殼聚糖電沉積層的鈦片電極置於370nm紫外燈下觀察其螢光強度。
用移液槍吸取80μl摩爾濃度為0.3m的三氯化鐵溶液小心滴加在鈦片上的碳點/殼聚糖電沉積層上，均勻覆蓋碳點/殼聚糖電沉積層，然後將鈦片平整置於載玻片上，在30℃下，自然乾燥40分鐘，得到具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器，在370nm紫外燈下觀察其螢光強度。
碳點/殼聚糖檢測器的雙功能檢測：採用chi電化學工作站進行電化學循環伏安測試；取步驟2)中所構建的碳點/殼聚糖檢測器為工作電極，以鉑絲電極為對電極，以甘汞電極為參比電極，以質量體積比1％的氯化鈉溶液為緩衝溶液，加入100μl摩爾濃度為0.2m的抗壞血酸溶液，做循環伏安法電化學測試，起始電壓設為-0.8v，最高電壓設為1.0v，終止電壓與起始電壓保持一致，從而利用電化學工作站對抗壞血酸進行電化學檢測。隨後將電化學檢測後的碳點/殼聚糖檢測器取出，在370nm紫外燈下觀察其螢光變化。
採用實施例1的方法，說我們所構建的碳點/殼聚糖檢測器不僅可以電化學檢測抗壞血酸，同時可以螢光檢測抗壞血酸，即我們構建了一種具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器。
實施例3
一種用電沉積方法構建的具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器的方法，它包括如下步驟：
1)碳點/殼聚糖複合物電沉積液的製備：取固體殼聚糖粉末3g，加入盛有100ml蒸餾水的燒杯中，磁力攪拌12小時使殼聚糖溶解，攪拌過程中加入0.5m的鹽酸溶液調整殼聚糖溶液ph，控制殼聚糖溶液ph在5.7，攪拌結束得到質量濃度為3g/ml的殼聚糖溶液。取50ml殼聚糖溶液置於微波爐中進行微波處理，10分鐘後取出微波產物，加入50ml蒸餾水，室溫下磁力攪拌12小時使微波產物充分溶解在蒸餾水中後，放入高速離心機中離心10分鐘，離心速度為10000轉/分鐘，離心後取上層清液得到碳點/殼聚糖複合物；
2)碳點/殼聚糖的電沉積及檢測器的構建：取步驟1)製備的碳點/殼聚糖複合物6ml超聲分散10分鐘除去碳點/殼聚糖複合物分散液中的氣泡，將碳點/殼聚糖複合物作為電沉積液，以鈦片為陰極，鉑片為陽極，電沉積開始前用細砂紙將鈦片和鉑片小心打磨乾淨，確保其表面平整光滑，採用高精度可編程直流電源進行電沉積，將陰陽電極同時浸入所配置的電沉積液中，插入液面下2釐米，採用高精度可編程直流電源施加恆定電壓1.25v，電沉積時間為6分鐘，電沉積完成後將陰極鈦片小心取下，此時，鈦片上沉積有碳點/殼聚糖電沉積層，用蒸餾水小心衝洗5次，洗去粘附在電沉積層的電沉積液，除去電沉積層的表面氣泡，將沉積有碳點/殼聚糖電沉積層的鈦片電極置於375nm紫外燈下觀察其螢光強度。
用移液槍吸取100μl摩爾濃度為0.5m的三氯化鐵溶液小心滴加在鈦片上的碳點/殼聚糖電沉積層上，均勻覆蓋碳點/殼聚糖電沉積層，然後將鈦片平整置於載玻片上，在25℃下，自然乾燥50分鐘，構建得到碳點/殼聚糖檢測器，在375nm紫外燈下觀察其螢光強度。
碳點/殼聚糖檢測器的雙功能檢測：採用chi電化學工作站進行電化學循環伏安測試；取步驟2)中所構建的碳點/殼聚糖檢測器為工作電極，以鉑絲電極為對電極，以甘汞電極為參比電極，以質量體積比1.2％的氯化鈉溶液為緩衝溶液，加入100μl摩爾濃度為0.3m的抗壞血酸溶液，做循環伏安法電化學測試，起始電壓設為-0.6v，最高電壓設為0.8v，終止電壓與起始電壓保持一致，從而利用電化學工作站對抗壞血酸進行電化學檢測。隨後將電化學檢測後的碳點/殼聚糖檢測器取出，在375nm紫外燈下觀察其檢測前後的螢光變化。
採用實施例1的方法，說我們所構建的碳點/殼聚糖檢測器不僅可以電化學檢測抗壞血酸，同時可以螢光檢測抗壞血酸，即我們構建了一種具有雙檢測功能的碳點/殼聚糖檢測器。
需要說明的是，本領域的普通技術人員應當理解，可以對本發明的技術方案進行修改或是等同替換，而不脫離本發明技術方案的宗旨和範圍，其均應涵蓋在本發明的權利要求範圍當中。