丹酚酸b結構修飾產物在製藥中的應用的製作方法

2023-04-30 21:33:31 8

專利名稱：丹酚酸b結構修飾產物在製藥中的應用的製作方法
丹酚酸B結構修飾產物在製藥中的應用技術領域：
本發明涉及藥物化學合成及應用技術領域，尤其涉及新化合物——丹酚 酸B結構修飾產物在製藥中的應用。背景技術：
丹參始載於《神農本草經》，被列為上品，是我國傳統醫學中常用藥之一， 具有祛瘀止痛、活血通經、清心除煩的功效，具有悠久的臨床應用史。丹參 具有擴張血管、降血脂及抗動脈粥樣硬化、抑制血小板凝聚及抗血栓形成、 保護心肌、增加冠脈流量、抗菌消炎、抗腫瘤等作用，有著廣泛的藥用前景。 丹酚酸B為丹參中有效成分之一。丹酚酸B3-Benzofurancarboxylic acid， 4-〔(1E)-3-[(1R)-卜caxboxy- 2-(3， 4-dihydroxyphenyl) ethoxy] --3-oxo-l-propenyl〕 _2_ (3，4- dihydroxy -phenyl)-2，3-dihydro-7-hydroxy-, 3-[(IR)-I- caxboxy -2_ (3， 4 -dihy- droxyphenyl) ethyl] ester， (2S，3S)-，C36H3Q016，其分子結構式為丹酚酸B是目前研究較多的丹酚酸之一，其對心、腦、肝等器官均有重要藥理作用。丹酚酸B具有很強的抗氧化作用，是目前己知的抗氧化作用最強的天然產物之一。動物實驗研究表明-
(1) 丹酚酸B能減輕缺血再灌注損傷模型動物的心肌缺血程度，減小心肌梗死範圍，減少LDH、 CPK從胞體的溢出，降低缺血心肌組織中MDA的含量，提高S0D的活性，對抗氧自由基對心肌細胞的損害作用，保護心肌細胞，對心臟微血管內皮細胞具有延遲保護作用。
(2) 丹酚酸B對大鼠和小鼠腦缺血和缺血再灌注引起的腦損傷具有保護作用，可縮小缺血區面積，減少腦組織中MDA的含量，緩解由於腦缺血引起的行為學障礙，對腦缺血引起的記憶功能障礙有顯著的改善作用。
(3) 丹酚酸B還具有抗動脈粥樣硬化、抗肝纖維化、抗衰老、抗腫瘤的作用。
但是，動物實驗研究也表明在大鼠靜脈注射丹酚酸B後，其在體內分布很快，腎臟中的藥物濃度最高，很難通過血腦屏障，消除快，半衰期短。因此，丹酚酸B的藥效和生物利用度就受到影響。
為了提高丹酚酸B的藥效和生物利用度，華東理工大學通過對丹酚酸B結構上的修飾，提出新的化合物——丹酚酸B結構修飾產物，並已就丹酚酸B結構修飾產物及其製備方法向中國知識產權局申請了專利，專利申請號為200710044685. X, 200710044683. 0。

發明內容
本發明的目的在於提供丹酚酸B結構修飾產物的新用途，即在製藥中的新應用；
實際上，本發明涉及丹酚酸B結構修飾產物在製備抗心肌缺血藥物中的應
用；
涉及丹酚酸B結構修飾產物在製備保護心肌缺血再灌注心臟微血管內皮細胞藥物中的應用；
涉及丹酚酸B結構修飾產物在製備抗腦缺血藥物中的應用；涉及丹酚酸B結構修飾產物在製備抗動脈粥樣硬化藥物中的應用； 涉及丹酚酸B結構修飾產物在製備抗血栓藥物中的應用 涉及丹酚酸B結構修飾產物在製備抗衰老藥物中的應用 涉及丹酚酸B結構修飾產物在製備抗腫瘤藥物中的應用 還涉及丹酚酸B結構修飾產物在製備抗肝損傷和肝纖維化藥物中的應用。 為實現以上目的，本發明採用的丹酚酸B結構修飾產物，其化學結構式為:
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其中，R為烷基、烯基、芳基、環垸基、雙環垸基等，特別是
formula see original document page 5formula see original document page 6可選的、所述的丹酚酸B結構修飾產物在製備抗心肌缺血藥物中的應用。 可選的、所述的丹酚酸.B結構修飾產物在製備保護心肌缺血再灌注心臟
微血管內皮細胞藥物中的應用。
可選的、所述的丹酚酸B結構修飾產物在製備抗腦缺血藥物中的應用。 可選的、所述的丹酚酸B結構修飾產物在製備抗動脈粥樣硬化藥物中的應用。
可選的、所述的丹酚酸B結構修飾產物在製備抗血栓藥物中的應用。 可選的、所述的丹酚酸B結構修飾產物在製備抗衰老藥物中的應用。 可選的、所述的丹酚酸B結構修飾產物在製備抗腫瘤藥物中的應用。可選的、所述的丹酚酸B結構修飾產物在製備抗肝損傷和肝纖維化藥物
中的應用。
可選的、所述的丹酚酸B結構修飾產物在製藥中的應用，劑型包括片劑、 膠囊、粉針劑、輸液和滴丸等劑型。
所述丹酚酸B結構修飾產物的一種合成方法為在有機溶劑中，溫度0
IO(TC，壓力O. 1 30MPa，反應時間1 500小時，原料丹酚酸B與催化劑的 質量比為1:0.01 1:100，在反應器皿中持續的通入氫氣，氫氣的濃度為l 100%，所述有機溶劑選自甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、乙酸乙酯、四氫呋 喃、丙酮，所述的催化劑選自鈀炭(Pd/C)催化劑、鈀氧化鋁(Pd/Al203) 催化劑、釕碳催化劑、氯化鈀催化劑和Pd/Ti02加氫催化劑。
所述丹酚酸B結構修飾產物的另一種合成方法為在有機溶劑中，-5°C 至回流溫度下，原料丹酚酸B與一元醇反應O. 1 50小時，原料丹酚酸B與 一元醇的摩爾比為1: 1 90，所述的有機溶劑選自乙醇、正丙醇、異丙醇、 乙酸乙酯、四氫呋喃、丙酮。
本發明的積極效果是
(1 )對已知的新化合物——丹酚酸B結構修飾產物發掘了新的醫療用途， 開拓了一個新的應用領域。
(2) 明確了丹酚酸B結構修飾產物在製藥上的應用範圍由丹酚酸B結 構修飾產物製得的藥物可顯著抑制血清中CK、 LDH的升高，顯著降低MDA水 平，提高S0D活性，具有抗氧化、清除氧自由基作用，顯著改善心肌缺血的 狀況，使心肌梗塞的病情顯著減輕，可顯著延長血栓形成的時間。
(3) 使製備比丹酚酸B的藥理活性和生物利用度更高的新藥成為可能。
具體實施方式
以下通過實施例對本發明丹酚酸B結構修飾產物在製藥中的應用作進一 步的說明，提供兩個實施例，但本發明不限於以下的實施例。
實施例1 雙氫丹酚酸B對冠狀動脈結紮所致心肌缺血的保護作用Wistar大鼠50隻，雌雄各半，體重220 250g，隨機分為三組第一組 為缺血模型組，第二組為丹酚酸B組，第三組為雙氫丹酚酸B組，給藥劑量 均為靜脈注射50mg/kg;測定手術前以及結紮30分鐘後的II導心電圖，觀察 心電圖ST段及T波變化。
除缺血模型組外，另兩組於冠狀動脈結紮30分鐘後按劑量給藥一次，4 小時後再給藥一次，24小時後腹靜脈取血，測血清LDH、 CK、 MDA、 SOD;同 時摘取大鼠心臟，用生理鹽水洗盡殘血，用濾紙吸乾，稱重，冷凍後將左心 室均勻橫切成5份，置於1%TTC液(氯化三苯基四氮唑)中染色15分鐘(溫 度37°C±0.5°C);取出後切下未被染色的心肌梗死區，用濾紙吸乾，稱重， 除以左心室或全心重得到梗塞範圍佔左心室和全心重的百分率。
實驗結果-
各組心電圖ST段抬高明顯，T波高尖明顯，說明心肌缺血造模成功。
表l心臟梗塞範圍佔左心室和全心重的百分率
缺血模型組丹酚酸B組雙氫丹酚酸B組
(n=9)(n=9)(n=10)
梗塞區重/左心室重(％)36. 08±9. 3822. 56±8. 41"20. 06±5. 61"
梗塞區重/全心重(％)27. 72±7. 7516. 97±6. 57"14. 87±4. 14"
注與模型組比較，▲ <.01
表2大鼠冠狀動脈結紮後血清酶學指標
血清酶缺血模型組(n二9)丹酚酸B組 (n=9)雙氫丹酚酸B組 (n二10)
LDH (U/L)5638. 85±862. 984609. 38 ±601. 50"4477. 21 ±568. 37"
CK (U/ml)1.92±0. 621. 32±0. 43A0. 92±0. 34"*
SOD (U/ml)165. 75±17. 44185. 40±8. 96"202. 05 ±15. 36" ★
MDA (腦l/ml)4. 65±1. 023. 30±0. 73"3. 14±0. 80"
注與模型組比較， <0.05， ▲ <.01，與丹酚酸B組比較， <0.05。 結論
1、 雙氫丹酚酸B可顯著改善大鼠冠狀動脈結紮所致心肌缺血，使梗塞區 範圍顯著減小(p<0.01)。
2、 雙氫丹酚酸B可顯著抑制血清CK、 LDH的升高(p<0.01)，提示其對 心肌有保護作用。
3、 雙氫丹酚酸B可顯著降低MDA水平(P<0.01)，提高S0D活性(p< 0. 01),提示雙氫丹酚酸B對因缺血引起的心肌組織損傷的保護作用是與其抗 氧化、清除氧自由基作用有關。
實施例2雙氫丹酚酸B對大鼠血栓形成的影響
Wistar大鼠30隻，雌雄各半，體重180 220g，隨機分為三組第一組 為空白對照組，第二組為丹酚酸B組，第三組為雙氫丹酚酸B組，給藥的劑 量均為靜脈注射50mg/kg;第一組靜脈注射同體積的蒸餾水，另兩組給藥3.5 小時後再給藥一次，共給藥兩次；於末次給藥2小時後麻醉，大鼠仰臥位固 定，分離頸總動脈，置於BT87-3型實驗性體內血栓形成測定儀的刺激電極和 溫度探頭鉤上，溫度探頭測得遠端動脈血管溫度驟降時報警，計時器記錄從 刺激開始到動脈血管溫度驟降所需的時間(s)，作為動脈血栓形成的時間。
實驗結果
表3對大鼠體內血栓形成的影響'
空白對照組丹酚酸B組雙氫丹酚酸B組
(n=10)(n二10)(n=10)
血栓形成時間(s)774. 50±65. 19905. 80±148. 73A1040. 30±140. 30"*
時間延長率(％)_16.9534. 32
注與空白對照組比較， <0.05， "p<0,01，
與丹酚酸B組比較，*p<0.05。
9結論
雙氫丹酚酸B可顯著延長大鼠體內血栓形成的時間(p<0.01)。
實施例3丹酚酸B乙酯對冠狀動脈結紮所致心肌缺血的保護作用 Wistar大鼠，雌雄各半，體重180 240g，隨機分為兩組第一組為缺 血模型組，第二組為丹酚酸B乙酯組，給藥劑量為灌胃100mg/kg;測定手術
前以及結紮30分鐘後的n導心電圖，觀察心電圖ST段及T波變化。
於冠狀動脈結紮30分鐘後按劑量給藥一次，4小時後再給藥一次，24小 時後摘取大鼠心臟，用生理鹽水洗盡殘血，用濾紙吸乾，稱重，冷凍後將左 心室均勻橫切成5份，置於1%TTC液(氯化三苯基四氮唑)中染色15分鐘(溫 度37°C±0.5°C);取出後切下未被染色的心肌梗死區，用濾紙吸乾，稱重， 除以左心室或全心重得到梗塞範圍佔左心室和全心重的百分率。
實驗結果
各組心電圖ST段抬高明顯，T波高尖明顯，說明心肌缺血造模成功。
表4心臟梗塞範圍佔左心室和全心重的百分率
梗塞區重/左心室重(％)梗塞區重/全心重(％)
缺血模型組(n=3)38. 68±7. 2028. 84±4. 92
丹酚酸B乙酯組(n二3)26. 87±10. 3919. 66±8. 69
結論:
丹酚酸B乙酯可顯著改善大鼠冠狀動脈結紮所致心肌缺血，使梗塞區範 圍顯著減小。
10
權利要求
1、丹酚酸B結構修飾產物在製備抗心肌缺血藥物中的應用。
2、 丹酚酸B結構修飾產物在製備保護心肌缺血再灌注心臟微血管內皮細胞藥物中的應用。
3、 丹酚酸B結構修飾產物在製備抗腦缺血藥物中的應用。
4、 丹酚酸B結構修飾產物在製備抗動脈粥樣硬化藥物中的應用。
5、 丹酚酸B結構修飾產物在製備抗血栓藥物中的應用。
6、 丹酚酸B結構修飾產物在製備抗衰老藥物中的應用。
7、 丹酚酸B結構修飾產物在製備抗腫瘤藥物中的應用。
8、 丹酚酸B結構修飾產物在製備抗肝損傷和肝纖維化藥物中的應用。
9、 根據權利要求1至8所述的丹酚酸B結構修飾產物在製藥中的應用， 其特徵在於，丹酚酸B結構修飾產物的劑型包括片劑、膠囊、粉針劑、輸液 和滴丸等劑型。
全文摘要
本發明涉及丹酚酸B結構修飾產物在製藥中新用途。丹酚酸B結構修飾產物能顯著抑制血清中CK、LDH的升高，可顯著降低MDA水平，提高SOD活性，具有抗氧化、清除氧自由基作用，可改善心肌缺血的狀況，使心肌梗塞的病情明顯減輕；可顯著延長血栓形成的時間；能在製備抗心肌缺血藥物、保護心肌缺血再灌注心臟微血管內皮細胞藥物、抗腦缺血藥物、抗動脈粥樣硬化藥物、抗血栓藥物以及在製備抗衰老藥物、抗腫瘤藥物、抗肝損傷和肝纖維化藥物中得到應用。本發明的優點是明確了丹酚酸B結構修飾產物在製藥中的應用範圍，使製備比丹酚酸B的藥理活性和生物利用度更高的新藥成為可能。
文檔編號A61K31/343GK101627988SQ200810040769
公開日2010年1月20日 申請日期2008年7月18日 優先權日2008年7月18日
發明者俊 侯, 倪力軍, 張立國, 王曉影, 程曉亮, 郭美蘭 申請人:華東理工大學