改進的n4螯合劑綴合物的製作方法

2023-04-23 09:12:06 2

專利名稱：：改進的n4螯合劑綴合物的製作方法改進的N4螯合劑綴合物發明領域本發明涉及改進的具有生物靶向分子的四胺螯合劑綴合物，該綴合物適於與放射性金屬99mTc形成金屬絡合物。該放射性金屬絡合物可用作""Tc放射性藥物。也提供了藥盒和前體。發明背景US5489425(DowChemical)公開了各種開鏈和大環官能化四胺螯合劑，其可用於絡合金屬，特別是放射性和非放射性銠絡合物，尤其是1G5Rh或1DlmRh放射性金屬絡合物。所公開的具體四胺包括formulaseeoriginaldocumentpage6已經描述了可用於與單克隆抗體或其片段綴合的雙官能螯合劑，供治療或診斷用。US5489425公開了(實施例21、22a和23)抗體-放射性金屬絡合螯合劑綴合物的製備方法先形成^Rh金屬絡合物，再與抗體反應，最後進行純化。US5489425沒有公開非絡合的抗體-螯合劑綴合物，即沒有配位的放射性金屬。US5489425沒有教導如何區別這樣的抗體綴合反應中螯合劑的側鏈胺(pendantamine)與四個胺。US5489425聲稱雙官能螯合劑"也可用於絡合鎝和錸，，，但沒有公開如何進行，也沒有公開任何實際的鎝絡合物。US$650134公開了一系列螯合劑的促生長素抑制素肽-螯合劑綴合物。實施例1描述了6-(對異硫氰酸基千基)-l，4,8,ll-四氮雜十一烷與奧曲肽(octreotide)的綴合。EP1181936Al公開了四胺螯合劑的鈴蟾肽(即十四肽)綴合物(是用雙官能螯合劑BBN-1和BBN-2製備的)及其99mTc絡合物B跳2BBN-1其中Boc=叔丁氧羰基保護基。據說99mTc絡合物能夠從鼠體內經腎臟和泌尿系統快速清除。然而，EP1181936Al對BBN-1或BBN-2的合成並未提供任何說明或參考，僅僅提供了將它們與鈴蟾肽N-端綴合的步驟。Nock等[Eur.丄Nucl.Med.,1Q(2),247-258(2003)]也已介紹了將BBN-2與鈴蟾肽綴合併用99mTc標記，得到潛在的腫瘤造影用放射性藥物。與現有的鈴蟾肽-螯合物綴合物相比，據說99mTc絡合物能得到改進的親水性，因此有望促進經腎臟和泌尿系統的排洩。Maina等介紹了將BBN-1與奧曲肽綴合併用99mTc標記，得到潛在的腫瘤造影用放射性藥物，用於人類患者[Eur.J.Nucl.Med.,2^(9),1211-1219(2003)]。上述BBN-l或BBN-2的出版物都未能提供BBN-1或BBN-2的任何合成方法。
發明內容本發明提供了具有生物靶向部分並通過連接基團連接的四胺螯合劑綴合物及其鎝絡合物，它們用作放射性藥物。連接基團是使得螯合劑在橋頭位置單官能化並且提供柔韌性和芳基缺乏，使親脂性和空間體積最小化。提供了螯合劑的合適保護形式，使其可以與各種各樣的耙向分子綴合，而不幹擾與四胺螯合劑的胺氮反應。描述了官能化螯合劑的合成以及雙官能螯合物前體。描述了包含本發明的鎝金屬絡合物的放射性藥物組合物，以及用於製備這類放射性藥物的非放射性藥盒。發明詳述在第一個實施方案中，本發明提供下式(I)的陽離子""Tc鎝絡合其中X為-NR-、-C02-、-CO國、-NR(C=S)-、-NR(C=0)-、-CONR國或Q基團；每個Y獨立地為D-胺基酸、丄-胺基酸、-CH2-、-(^120012-或-OCH2CH20-或X基團；Z為合成生物靶向部分；(CH2)n-X-(Y)m-Zn為1-8的整悽史；m為0-30的整數；R為H、Cw烷基、C^烷氧基烷基、CM羥基烷基或C,4氟代烷基；Q為formulaseeoriginaldocumentpage9A為抗衡離子；前提條件是XL(Y)m鏈中的原子缺乏鍵，其中一個雜原子直接與另一個雜原子鍵合。鎝放射性同位素可以是適於PET造影的Y-發射體(例如""Tc)或正電子發射體(例如94mTc)。優選的鎝放射性同位素是99mTc或94mTc，最優選""Tc。X優選為-CONR-、-NR(C-O)-或Q基團。X最優選為-CONR-或-NR(C=0)-，其中特別優選-CONH-和-NH0X3)-。選擇式I的連接基團-(CH2VX-(Y)m-,使得義-(Y)m鏈中的原子缺乏鍵，其中一個雜原子直接與另一個雜原子鍵合，其中術語"雜原子"是指非碳原子，例如氮、氧或硫。這意味著鏈中缺乏O-O、N-N或O-N等鍵。人們認為，式I的連接基團-(CH2)n-X-(Y)m-的作用是將鎝絡合物與體內生物靶向部分(z)的活性結合部位間隔開。這有助於確保相對龐大的鎝絡合物在空間上不會阻礙與體內活性部位的結合。亞烷基-(CH2)n-的優勢是與綴合的生物靶向部分(Z)沒有明顯的氫鍵相互作用，使得連接基不會包裹在Z上。優選的亞烷基的n=1-6，最優選2-4,其中特別優選2。本發明的連接基團缺乏芳環。這有助於儘量降低鎝絡合物+連接基團的親脂性，該連接基團與綴合物的生物耙向部分(z)結合。連接基團(以及鎝絡合物)的空間體積和分子量也要最小化，同時保持鍵的柔韌性。連接基團的特性也可用於改變造影劑的生物分布。因此，例如將醚基團引入-(Y)m-將有助於使血漿蛋白結合最小化。當-(Y)m-包括聚乙二醇(PEG)結構單元或1-10個胺基酸殘基的肽鏈時，連接基團可起到在體內改變造影劑的藥代動力學和血液清除率的作用。這類"生物改性劑，，連接基團有助於將鎝造影劑從背景組織(例如肌肉或肝臟)和/或從血液中清除出去，因而得到更好的診斷影像，因為降低了背景幹擾。生物改性劑連接基團也可用於促進特定的排洩途徑，例如通過腎臟，而不是肝臟。或者，它們可延長血液滯留時間，允許更多造影劑在體內靶部位蓄積。當-(Y)f包含胺基酸殘基肽鏈時，這些胺基酸殘基優選選自甘氨酸、賴氨酸、天冬氨酸、穀氨酸或絲氨酸。肽鏈中胺基酸的數量優選為1-10，最優選l-3。當-(Y)m-包含PEG部分時，它優選包含式(-0(^20"120-、的基團，其中w為3-25的整數。整數w優選為6-22。一個特別優選的含PEG的-(Y)m-基團是衍生自單分散性PEG樣結構聚合的單元，即下式IV的17-氨基-5-氧代-6-氮雜-3,9,12，15-四氧雜十七烷酸0o(IV)其中p為1-10的整數。術語"氟代烷基"是指具有至少一個氟取代基的烷基，即該術語包括從一氟代烷基(例如-CH2F)至全氟代烷基(例如CF3)的基團。-(Y)m-基團優選包括二乙醇酸部分、馬來醯亞胺部分、戊二酸、琥珀酸、基於聚乙二醇的單元或式IV的PEG樣單元。術語"合成"是指該術語的常規含義，即人造的，而不是從天然來源(例如哺乳動物體內)分離得到的。這類化合物的優勢是可以完全控制它們的製備和雜質分布型。因此，單克隆抗體及其片段未落入本發明權利要求書的範圍。術語"生物靶向部分"是指3-100聚體肽或肽類似物，其寸以是線狀肽或環狀肽或其組合；或酶底物、酶拮抗劑或酶抑制劑；合成受體-結合化合物；寡核苷酸或寡DNA或寡RNA片段。術語"環肽"是指兩個末端胺基酸通過共價鍵連接在一起的5-15個胺基酸的序列，該共價鍵可以是肽鍵或二硫鍵或合成非肽鍵(例如硫醚鍵、磷酸二酯鍵、二曱矽醚鍵或尿烷鍵)。術語"胺基酸"是指丄-胺基酸、D-胺基酸、胺基酸類似物或胺基酸模擬物，它們可以任選是旋光純的(即為單一對映體，因此為手性的)或為對映體的混合物。優選的本發明胺基酸是旋光純的。術語"胺基酸模擬物"是指天然存在胺基酸的合成類似物，它們是等構物，即經設計以模擬天然化合物的空間和電子結構。這類等構物是本領域技術人員眾所周知的，包括但不限於縮肽類、逆-倒位肽類(retro-inversopeptides),硫代醯胺類、環烷烴類或1,5-二取代的四峻[參見M.Goodman,Biopolymers，24,137,(1985)]。用於本發明的合適肽包括-促生長素抑制素、奧曲肽和類似物。-與ST受體結合的肽，其中ST是指由大腸桿菌(5.co/Z)和其它^(敬生物產生的熱穩定毒素；-層粘連蛋白片段，例如YIGSR、PDSGR、IKVAV、LRE和KCQAGTFALRGDPQG，-輩巴向白細胞累積部位的N-曱醯基肽，-血小板因子4(PF4)及其片段，-含有RGD(Arg-Gly-Asp)的肽，其可以例如耙向血管生成[R.Pasqualini等，NatBiotechnol.1997年6月;15(6):542-6];[E.Ruoslahti,KidneyInt.1997年5月；51(5):1413-7]。-062-抗纖溶酶、纖連蛋白或j3-酪蛋白的肽片段、血纖蛋白原或凝血栓蛋白。(X2-抗纖溶酶、纖連蛋白、(3-酪蛋白、血纖蛋白原和凝血栓蛋白的胺基酸序列可在以下文獻中找到a2-抗纖溶酶前體[M.Tone等，J.Biochem,巡，1033,(1987)];|3-酪蛋白[L.Hansson等，Gene,IiS，193,(1994)];纖連蛋白[A.Gutman等，FEBSLett,202,145,(1996)];凝血栓蛋白-1前體[V.Dixit等，Proc.Natl.Acad.Sci.,USA，Sl，5449,(1986)];R.F.Doolittle,Ann.Rev.Biochem.,51,195,(1984);-作為血管緊張素的底物或抑制劑的肽，所述血管緊張素例如血管緊張素IIAsp國Arg-Val-Tyr誦Ile誦His曙Pro畫Phe(E.C.Jorgensen等，丄MMC/復,1979,第22巻，9,1038-1044)[Sar，Ile]血管緊張素II:Sar-Arg-Val畫Tyr國Ile-His-Pro-Ile(R.K.Turker等，Sd證，1972,ill,簡)。誦血管緊張素I:Asp畫Arg-Val畫Tyr-Ile隱His-Pro-Phe畫His-Leu。優選本發明的肽包括抗纖溶酶或血管緊張素II肽。抗纖溶酶肽包括取自以下的N端的胺基酸序列(i)012-抗纖溶酶，即NH2-Asn-Gln-Glu-Gln-Val-Ser-Pro-Leu-Thr-Leu-Thr-Leu-Leu-Lys-OH或其變異體，其中一個或多個胺基酸已經替換、添加或去除，例如NH2-Asn-Gln-Glu-Gln-Val-Ser-Pro-Leu-Thr-Leu-Thr-Leu-Leu-Lys-Gly-OH，NH2-Asn-Gln-Glu-Ala-Val-Ser-Pro-Leu-Thr-Leu-Thr-Leu-Leu-Lys-Gly-OH,NH2-Asn-Gln-Glu-Gln-Val-Gly-OH;或(ii)酪蛋白即Ac-Leu-Gly-Pro-Gly畫Gln-Ser醫Lys-Val-Ile-Gly。本發明的合成肽可通過常規固相合成而得到，參見P.Lloyd-Williams,F.Albericio和E.Girald;C72em,'ca/，praac/^to5^威w'so/屍e/f/6fes_Prc^ez>w,CRCPress,1997。合適的酶底物、酶拮抗劑或酶抑制劑包括葡萄糖和葡萄糖類似物(例如氟代脫氧葡萄糖)；脂肪酸或彈性蛋白酶，血管緊張素II或金屬蛋白酶抑制劑。優選的非肽血管緊張素II拮抗劑是氯沙坦。合適的合成受體-結合化合物包括雌二醇、雌激素、黃體激素、黃體酮和其它甾體激素；多巴胺D-1或D-2受體的配體，或多巴胺轉運蛋白，例如託品烷；和5-羥色胺受體的配體。生物耙向部分(Z)的優選分子量小於5000,最優選小於4000,理想的是小於3000。它的優勢在於本發明四胺鎝絡合物的改進的生物特性可影響式I綴合物鎝絡合物體內總體分布，尤其是清除率。當n為3,X包括直接與(CH2)n基團鍵合的氮原子時，則選擇Z為合成的，分子量小於4000。優選的生物靶向部分是3-20聚體肽或酶底物、酶拮抗劑或酶抑制劑。抗衡離子(A-)代表等摩爾量存在的陰離子，因此可與式I的Tc(V)二氧代鎝絡合物上的正電荷平衡。陰離子(A)適宜帶一個電荷或多個電荷，只要是電荷平衡量。陰離子適宜來自無機酸或有機酸。合適的陰離子的實例包括卣素離子(例如氯離子或溴離子)、硫酸根、硝酸根、檸檬酸根、乙酸根、磷酸根和硼酸根。優選的陰離子是氯離子。式I的鎝絡合物的優勢在於它們在絡合物形成後是穩定的，並包含一個優先將鎝與生物耙向部分結合的活性螯合配體(avidcheland)。因此，鎝絡合物在體內不會經歷與生物大分子或竟爭性配體的螯合轉移反應(transchelationreaction)。鎝絡合物體積小且結構緊密，可用於對綴合的生物靶向部分(Z)具有最小的空間影響。永久性的陽離子變化和Tc(V)二氧代核心意味著絡合物也是親水性的，因此在胞內不會分布到其它區室中，所以在體內可從背景器官和組織中更快地清除出去，例如從血流中清除出去。按照下面第二個實施方案所述，可通過將合適來源的鎝與式II螯合劑綴合物反應而製備式I的鎝絡合物。在第二個實施方案中，本發明提供下式II的螯合劑綴合物:formulaseeoriginaldocumentpage14其中X、Y、Z、n和m如上定義；QLQS獨立地為Q基團，其中Q為H或氨基保護基。螫合劑綴合物可用於製備第一個實施方案中的式I鎝絡合物。術語"保護基"是指這樣的基團它能抑制或阻止不需要的化學反應，但又具有足夠的反應性，能夠在不修飾分子的其餘部分的足夠溫和的條件下從所述官能團上切割下來。脫保護後，得到想要的產物。氨基保護基是本領域技術人員眾所周知的，適宜選自Boc(其中Boc為叔丁氧羰基)、Fmoc(其中Fmoc為芴基曱氧基羰基)、三氟乙醯基、烯丙氧基羰基、Dde[即l-(4，4-二曱基-2,6-二氧代亞環己基)乙基]或Npys(即3-硝基-2-吡啶亞磺醯基)。在某些情況下，保護基的性質可以是QVQ2或Q5/Q6基團，即在相連胺氮原子上沒有NH鍵。更多的保護基的用途參見"ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis",TheorodoraW.Greene和PeterG.M.Wuts,(JohnWiley&Sons,1991)。優選的氨基保護基是Boc和Fmoc,最優選Boc。當採用Boc時，Q'和Q6均為H,而Q2、Q3、Q4和Q5各自為叔丁氧羰基。在式II中，在與鎝絡合之前的合成化學反應過程中，氨基保護基主要用於保護四胺螯合劑的胺官能團。儘管生物靶向基團(Z)易於與伯胺和/或仲胺發生反應，但是這些保護基也可用於與鎝絡合之前防止在螯合劑胺與z之間發生不需要的化學反應。優選的式II綴合物具有至少一個未保護的胺氮(即03或Q"之一為H,或者QV(^或Q5/Q6同時為H)。一個或多個游離胺基意味著綴合物更易溶於水性介質，這樣的介質是製備式I鎝絡合物的優選溶劑。游離胺基也意味著與鎝的絡合反應更快速，因為絡合不依賴於先前保護基的脫除，所述保護基也會阻止金屬絡合。當綴合的生物靶向基團(Z)不容易與胺發生進一步反應時，使用完全脫保護形式的式II綴合物(即Q'-QS各自為H)是很方便的，特別優選式II的螯合劑綴合物。完全脫保護形式優選用於絡合反應，以得到式I的鎝絡合物。在合適的pH下，使合適的氧化態放射性金屬的溶液與式II螯合劑綴合物發生反應，可製備本發明的式I鎝絡合物。溶液可任選含有與鎝微弱絡合的配體(例如葡萄糖酸鹽或檸檬酸鹽)，即通過配體交換或螯合轉移來製備鎝絡合物。這樣的條件常用於防止不需要的副反應(例如鎝離子水解)，但是對本發明的螯合劑並不重要，因為它們與鎝快速絡合。儘管放射性同位素是""Tc,但是通常原料是來自"Mo發生器的高鎝酸鈉。在Tc(VII)氧化態下，鎝以""Tc-高鎝酸鹽形式存在，該鹽相對來說不活潑。因此，較低氧化態Tc(I)-Tc(V)的鎝絡合物的製備通常需要添加合適的藥學上可接受的還原劑，例如連二亞硫酸鈉、亞硫酸氬鈉、抗壞血酸、曱脒基亞磺酸、亞錫離子、Fe(II)或Cu(I),以促進絡合。藥學上可接受的還原劑優選為亞錫鹽，最優選氯化亞錫、氟化亞錫或酒石酸亞錫。按照下面第五個實施方案所述，使生物耙向分子(Z)與式III的雙官能螯合劑綴合，可製備式II螯合劑綴合物。在第三個實施方案中，本發明提供放射性藥物，所述藥物包含第一個實施方案中的鎝絡合物(其中A為藥學上可接受的抗衡離子)以及適於人體給藥形式的生物相容性載體。短語"適於人體給藥形式"是指無菌、無熱原、不含產生毒性或副作用的化合物的組合物，並且所述組合物配製成生物相容的pH(約pH4.0-10.5)。這類組合物不含可能在體內引起栓子的顆粒，並且將其配製成當與生物流體(例如血液)接觸時不會產生沉澱。這類組合物也含有生物相容性賦形劑，優選等滲賦形劑。"生物相容性載體"是放射性藥物懸浮或優選溶於其中的流體，尤其是液體，使得組合物是生理上耐受的，即可以給予哺乳動物體內，而沒有毒性或過度不適。生物相容性載體適宜為注射用載體液體，例如無菌、無熱原的注射用水；水溶液，例如鹽水(其可容易達到平衡，使得注射用終產物是等滲而不是低滲的)；一種或多種張力調節物質的水溶液(例如具有生物相容性抗衡離子的血漿陽離子鹽)，糖(例如葡萄糖或蔗糖)，糖醇(例如山梨醇或甘露醇)，醇類(例如甘油)或其它非離子型多元醇物質(例如聚乙二醇、丙二醇等)。術語"藥學上可接受的抗衡離子"是指當給予哺乳動物體內時不產生毒性或副作用、並且與藥物組合物的其它成分具有化學和/或毒理學相容性的陰離子(即負電性離子)。本發明的鎝放射性藥物的化學相容性，是指陰離子不能有效地與四胺螯合劑竟爭鎝。合適的這類陰離子包括但不限於囟素離子(例如氯離子、碘離子和溴離子)；Cw烷基磺酸根(例如曱磺酸根或乙磺酸根)；芳基磺酸根(例如苯磺酸根或曱苯磺酸根)；C,.2烷基膦酸根；二(C,.2)烷基磷酸根(例如二曱基磷酸根、二乙基磷酸根或二甘油磷酸根)；芳基膦酸根；芳基磷酸根；烷基芳基膦酸根；烷基芳基磷酸根；Cw烷基羧酸根(例如乙酸根、丙酸根、穀氨酸根或甘油酸根)；芳基羧酸根(例如苯曱酸根)等。優選的藥學上可接受的抗衡離子為氯離子、氟離子、乙酸根、酒石酸根、氫氧根和磷酸根。這類放射性藥物適於裝在容器中，所述容器是密封的，適於用皮下針頭(例如crimped-onseptumsealclosure(隔片密封閉合裝置》單次或多次刺扎，同時保持絕對無菌。這類容器可裝有單次或多次患者劑量。優選的多劑量容器包:fe—個整裝瓶(例如體積10-30cm3),其中裝有多次患者劑量，因此在不同的時間間隔，在製劑的有效期內，可以抽取單次患者劑量灌裝到臨床級注射器中，以適合臨床情況。預灌裝注射器被設計成裝有單次人用劑量，因此優選是適於臨床使用的一次性注射器或其它注射器。預灌裝注射器可任選和注射器防護罩一起提供，以保護操作人員免遭放射性。合適的這類放射性藥物的注射器防護罩是本領域已知的，優選包含鉛或鴒。優選的本發明放射性藥物包含鎝放射性同位素99mTc或94mTc,最優選99mTc。當鎝同位素是99mTc時，適於診斷造影用放射性藥物的放射性含量範圍為180-1500MBq99mTc,這取決於體內造影的部位、攝取量和目標/本底比。本發明的鎝放射性藥物可通過下述各方法來製備(i)無菌製備技術，其中按照上述第二個實施方案，在無菌室環境下製備鎝絡合物；(ii)最終滅菌，其中不用無菌製備技術來製備鎝絡合物，然後在最後的步驟進行滅菌(例如通過Y輻射或高壓滅菌)；(ui)藥盒方法，其中凍幹的無菌非放射性藥盒製劑包含式II螯合劑綴合物和藥學上可接受的還原劑以及其它任選的賦形劑，使其與來自""Tc發生器的無菌""Tc-高鎝酸鹽發生反應。優選方法(iii),用於該方法的藥盒在下面第四個實施方案中有描述。在第四個實施方案中，本發明提供非放射性藥盒，用於上述放射性藥物組合物的製備，所述組合物包含式(n)的綴合物以及生物相容性還原劑。設計這類藥盒，以得到適於人用的無菌放射性藥物產品，例如通過直接注射到血流中。配體綴合物及其優選方面在以上第二個實施方案中有描述。對於99mTc，藥盒優選為凍幹藥盒，將其用來自99mTc放射性同位素發生器的無菌""Tc-高鎝酸鹽(Tc(V)重建，得到無需進一步操作的適於人用的溶液。合適的藥盒包括容器(例如隔片密封瓶(septum-sealedvial))，其中裝有呈游離石威或酸式鹽形式的螯合劑綴合物以及生物相容性還原劑(例如連二亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、抗壞血酸、曱眯基亞磺酸、亞錫離子、Fe(II)或Cu(I)。生物相容性還原劑優選為亞錫鹽，例如氯化亞錫或酒石酸亞錫。或者，藥盒可任選裝有非放射性金屬絡合物，所述絡合物中一旦加入鎝時，會經歷金屬轉移作用(即金屬交換)，得到所需產物。非放射性藥盒可任選還包括額外的成分，例如轉移螯合劑、輻射防護劑、抗微生物防腐劑、pH調節劑或填充劑。"轉移螯合劑"是這樣的化合物它與鎝快速反應，形成弱絡合物，再被螯合劑置換。這使還原型水解鎝(RHT)的形成風險最小化，因為高鎝酸鹽快速還原與鎝絡合竟爭。合適的這類轉移螯合劑是帶有生物相容性陽離子的弱有機酸(即有機酸的pKa範圍為3-7)的鹽。術語"生物相容性陽離子，，是指帶正電荷的抗衡離子，它可與電離的帶負電荷的陰離子基團成鹽，其中所述帶正電荷的抗衡離子也是無毒的，因而適於給予哺乳動物體內，尤其適於人用。合適的生物相容性陽離子的實例包括鈉或鉀等鹼金屬；4丐和鎂等鹼土金屬；和銨離子。優選的生物相容性陽離子是鈉和鉀，最優選鈉。合適的這類弱有機酸是乙酸、檸檬酸、酒石酸、葡糖酸、葡庚糖酸、苯曱酸、苯酚或膦酸。因此，合適的鹽為乙酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、葡糖酸鹽、葡庚糖酸鹽、苯曱酸鹽、苯酚鹽或膦酸鹽。優選的這類鹽為酒石酸鹽、葡糖酸鹽、葡庚糖酸、苯甲酸鹽或膦酸鹽，最優選膦酸鹽，最最優選二膦酸鹽。優選的這類轉移螯合劑是MDP鹽，即亞曱基二磷酸與生物相容性陽離子的鹽。術語"輻射防護劑"是指這樣的化合物它抑制降解反應，例如氧化還原過程(redoxprocess),即通過捕獲高活性自由基，例如水的輻解所產生的含氧自由基。本發明的輻射防護劑適宜選自抗壞血酸、對氨基苯曱酸(即4-氨基苯曱酸)、龍膽酸(即2,5-二羥基苯曱酸)及其與如上所述的生物相容性陽離子的鹽。術語"抗微生物防腐劑"是指抑制細菌、酵母或黴菌等潛在有害微生物的生長的試劑。抗微生物防腐劑也可表現出某些殺菌特性，這取決於劑量大小。本發明的抗微生物防腐劑的主要作用是在放射性藥物組合物重建後(即在放射性診斷用產品中)抑制這些微生物的生長。然而，抗孩1生物防腐劑也4壬選用於在重建之前、在本發明的非放射性藥盒的一種或多種成分中抑制潛在有害微生物的生長。合適的抗微生物防腐劑包括對幾基苯曱酸酯類，即對羥基苯曱酸曱酯、對羥基苯曱酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯或對羥基苯曱酸丁酯或其混合物；苯曱醇；苯酚；曱酚；溴化十六烷基三曱銨和硫柳汞。優選的抗微生物防腐劑是對羥基苯甲酸酯類。術語"pH調節劑"是指用於確保給予人或哺乳動物的重建藥盒的pH在可接受限度內(約pH4.0-10.5)的化合物或化合物的混合物。合適的這類pH調節劑包括藥學上可接受的緩沖劑，例如W-三(羥曱基)氨基甘氨酸、磷酸鹽或TRIS[即三(羥曱基)氨基曱烷];以及藥學上可接受的44,例如碳酸鈉、石友酸氫鈉或其混合物。當綴合物以酸式鹽形式使用時，可任選提供裝在單獨小瓶或容器中的pH調節劑，使得藥盒的使用者可調節pH,作為多步驟程序中的組成部分。術語"填充劑"是指藥學上可接受的增量劑，其可在生產和凍幹過程中有助於材料的處理。合適的這類填充劑包括無機鹽(例如氯化鈉)和水溶性糖或糖醇(例如蔗糖、麥芽糖、甘露醇或海藻糖)。在第五個實施方案中，本發明提供下式m的化合物formulaseeoriginaldocumentpage19其中Q^QS和n如上式I和n中定義;E是適於與第一個實施方案中的生物靶向部分(Z)綴合的官能團；前提條件是(i)當11=3時，Q'-Q6中的至少一個為氨基保護基；(ii)當n=3或5時，E不為OH。式m化合物是"雙官能螯合劑"，即帶有一個或多個官能團(E)的螯合劑。官能團E適於與生物靶向部分(Z)綴合。合適的這類官能團(E)包括胺、硫氰酸酯、馬來醯亞胺和活性酯。E優選不包括未活化的羥基(-OH)。術語"活性酯"是指羧酸的酯衍生物，它可以是良好的離去基團，因而使其更容易與生物靶向部分上存在的親核試劑(例如胺)發生反應。合適的活性酯的實例是N-羥基琥珀醯亞胺(NHS)、五氟苯酚、五氟苯硫酚、對硝基苯酚、羥基苯並三唑和PyBOP(即六氟磷酸O-苯並三唑-l-基-氧基三吡咯烷基轔)。優選的活性酯是N-羥基琥珀醯亞胺或五氟苯酚酯。E優選為伯胺(-NH2)、-C〇2M、-NCS、-NCO、馬來醯亞胺或丙烯醯胺，其中M為H、陽離子、保護基或活性酯。E最優選為-NH2、-C02M或馬來醯亞胺，理想的是-NH2或-C02M。使式III化合物與生物靶向分子(Z)上合適的相應官能團反應，生成所需的式II綴合物。生物靶向分子上的這類合適官能團包括羧基(用於與胺官能化雙官能螯合劑形成醯胺鍵)；氨基(用於與羧基官能化雙官能螯合劑或活性酯官能化雙官能螯合劑形成醯胺鍵)；卣素、曱磺醯氧基和曱苯磺醯氧基(用於胺官能化雙官能螯合劑的N-烷基化)和巰基(用於與馬來醯亞胺官能化雙官能螯合劑進行反應)。當E為與生物靶向分子(Z)的氨基反應的基團(例如活性酯)時，顯然可能會與螯合劑的胺發生不需要的副反應。對於這類E基團，優選選擇式III中的QL(^為氮保護基，使得四胺螯合劑的4個氮原子都被保護起來。當E為氨基時，與生物靶向分子(Z)的反應僅在E胺上發生，而不在四胺螯合劑的胺氮原子上發生，這一點顯然很重要。因此，在這種情況下，式III中的Q^(/優選為氮保護基。氮保護基及其優選實例如以上笫二個實施方案所述。式III化合物可按流程1和2所述來製備。流程1提供羧基-官能化的N-保護的四胺螯合劑的一個靈活的合成路線，該路線可適合式III中的不同n值。帶有-(012)5011橋頭取代基的Boc-保護的四胺類似物的合成參見Turpin等，J.Lab.Comp.Radiopharm.,41,379-393(2002)。流程2提供胺-官能化的N-保護的四胺螯合劑的一個靈活的合成路線，該路線可適合不同n值。可以按照Nock等[Eur.J.Nucl.Med.，10(2),247-258(2003)]和Maina等[Eur.J.Nucl.Med.,2Q(9),1211-1219(2003)]所描述的類似方法，進行生物靶向肽的綴合反應。流程1:化合物1的合成formulaseeoriginaldocumentpage22化合物1其中BOC=叔丁氧羰基保護基IBX=l-羥基-l，2-苯並石輿雜氧雜環戊烯-3(lH)-酮-l-氧化物NHS=N-羥基琥珀醯亞胺Bz=節基formulaseeoriginaldocumentpage23下面的非限制性實例用於說明本發明。實施例1提供化合物1的合成，化合物1是本發明的羧基-官能化N-保護的四胺螯合劑。實施例2提供化合物2的合成，化合物2是本發明的胺-官能化N-保護的四胺螯合劑。實施例3提供化合物3的合成，化合物3是化合物1與胺(卡胺)綴合的化合物。實施例4描述化合物6的合成，舉例說明化合物2與羧酸活性酯的綴合。實施例5描述化合物4的合成，化合物4是本發明的螯合劑與氯沙坦(losaratan)衍生物的綴合物。實施例6提供包含PEG連接基團的氯沙坦(losartan)螯合劑綴合物的合成。實施例7描述化合物8的合成，化合物8是本發明的螯合劑的血管緊張素肽綴合物。實施例8描述本發明的幾種螯合劑的""Tc放射性標記。實施例9描述本發明的不同99mTc絡合物的親脂(logP)值的測定法，表明絡合物相對親水。實施例10描述本發明的幾種99mTc絡合物的生物分布結果，表明中等肝臟背景和高的泌尿系統清除率。實施例11提供化合物1的較高產量合成。實施例12提供綴合有活性酯的本發明受保護的四胺螯合劑(化合物9)的合成。實施例1:化合物1的合成步驟(a):『2-(芳氣基)乙基l丙二酸二乙酯按照Ramalingam等，r"ra/je^o",57,2875-2894(1995)的改進方法製備標題化合物。因此，在氬氣氛下，將鈉(l.20g)溶於無水乙醇(25ml)中。加入丙二酸二乙酯(14.00g)，將混合物回流30分鐘。加入卡基溴乙基醚(10g),將混合物回流攪拌16小時。旋轉蒸發除去乙醇，殘餘物在乙醚(100ml)和水(50ml)之間分配。乙醚層用水(3x50ml)洗滌，經硫酸鈉乾燥。旋轉蒸發除去乙醚，殘餘物真空蒸餾。棄去在40-55°C蒸餾的部分(未反應的丙二酸二乙酯)。產物在140-150。C(lmm)餾出，[lit.bp138-140。C(lmm)]。產量為12.60g無色油狀物。'HNMR(270MHz,CDC13,25°C，IMS)S=7.28.(m5HCH5),4.47(s,2H,CH2-Ph),4.16(m,4H,COOCH2)，3.58(t,1H,CH),3.50(t'2H,0-C//2-CH2),2.21(t,2H,0-CH2-C&)，1.20(t,6H,CO0CH2-C迅).13CNMR(67.5MHz,CDC13，250C,麗)5=169.20(CO),138.10，128.60，127.80(芳族),73.00(CH2Ph),67.30(0-CH2-CH2),61.70(COOCH2)，49.10(CH),28》0(0-CHrCH2),14.10(COOCH2CH3).歩驟(b):N,N'-雙(2-氨基乙基)-2-(2-苄氯基-乙基〗丙二醯胺將[2-(千氧基)乙基]丙二酸二乙酯(4.00g)加入到乙二胺(30ml)中，所得溶液在室溫下攪拌2天。旋轉蒸發除去過量乙二胺，殘餘物經高真空度乾燥2天，得到黃色油狀物(4.28g)，靜置結晶。經NMR譜檢測，產物仍含有痕量乙二胺。lHNMR(270MHz,CDC13,25。C,TMS)S=7.74(brt,2H，CO-卿，7.32(m,5H，C6H5),4.46(s，2H，CH2-Ph),3.50(t,2H,OC&-CH2-),3.33(t1H,CH),3.23(m,4H,CO-NH-卿，2.74(t,4H,C迅-卿2.18(q,2H,0-CH2-Cifr)1.55(brs4H,NH2).'3CNMR(67.5MHz,CDC13，25°C,TMS)5=171.10(CO),138.20,128.30,127.70(芳族),73.00(CH2-Ph),67.80(0-CH2-CH2),51.40(CH),42.40(CO-NH-CH2)，41.20(CH2-NH2)，31.卯(0-CH2-CH2-).步驟(c):^『雙(2-氨基-乙基)-2-(2-爺氣基乙基)-1,3-二氨基丙烷將N,N'-雙(2-氨基乙基)J-(2-千氧基-乙基)丙二醯胺p.S0g)溶於THF(20ml)中，將燒瓶浸入冰浴中。燒瓶用氬氣吹掃，通過注射器加入THF硼烷絡合物(80ml，1MTHF溶液)。讓反應混合物升至室溫，在40。C攪拌2天，回流1小時。滴加曱醇(50ml)，將溶液在4CTC攪拌過夜。用旋轉蒸發器除去溶劑，殘餘物溶於曱醇(20ml)中。加入氫氧化鈉(10g/15ml水)，將曱醇蒸發掉。由此分離得到的無色油狀物用CH2C12(3x50ml)萃取。溶液經Na2S04乾燥。除去溶劑，得到3.40g無色油狀物。lHNMR(270MHz,CDC13,25°C,TMS)5=7.34(m,5H,C6H5),4.49(s,2H,CH2-Ph),3.55(t,2H,OC&-CH2-),2.76(t,4H,N-CH2),2.63(m,8H,N-CH2),1.84(m,1H,CH),1.58(ra,2H，CH-C私-CH2-0),1.41(brs,6H，NH).UCNMR(67.5MHz,CDC13,25。C,TMS)5=138.60,128.30,127.60(芳族),72.80(CH2-Ph),68.70(0-CH2-CH2),53.50(N-CH2),52.80(N-CH2)，41.60(N-CH2)36.40(CH),31.30(CH-CH2-CH2-O).MS-EI:295[M+H]+,(計算值295.2).歩驟(d):N,N'-雙(2-叔丁氣羰基氨基-乙基V2-(2-苄氣基乙基)-l,3-二(叔丁氣羰基氨基)丙烷將N,N'-雙(2-氨基乙基)-2-(2-千氧基-乙基)-l,3-二氨基丙烷(3.30g)溶於CH2C12(100ml)和三乙胺(5.40g)中，加入二碳酸叔丁酯(10.30g)。反應混合物在室溫下攪拌2天。混合物用水(100ml)、檸檬酸溶液(100ml，10%的水溶液)和水(2x100ml)洗滌。有機層經Na2S04乾燥，旋轉蒸發除去溶劑，得到黃色油狀物，在高真空度下乾燥至恆重。粗產物(7.70g)在矽膠柱上純化(250g，230-400目，CH2C12，CHA-E^O1:1),得到6.10g(78.3%,透明油狀物)。'HNMR(270MHz,CDC13,25。C,TMS)5=7.32(m,5H,CsH5),5.12(brd,2H,NH),4,47(s,2H,CH2-Ph),3.49(t,2H'OCHrCHr),3.24(br,12H，N-CH2),2.14(br,1H,CH),1.59(m,2H,CH-C/7rCH2-。)1.45(s'18H,t-Bu),1.42(s,18H,t隱Bu).13CNMR(67.5MHz,CDC13,25。C,TMS)S=155.90(NH-CO),138.20,128.30127.60,127.50(芳族),79.卯,78.90(CMe3)，72.80(CHrPh),68,00(0-CH2-CH2),50.00(br，N-CH2)，46.卯(br,N-CH，)，39.20(N-CH2),34.40(br,CH)，29.80(CH-CH2-CHrO),28.30(t-Bu).MS-EI:695[M+H]+,(計算值695.5)歩驟(e):N,N'-雙(2-叔丁氧羰基氨基-乙基)-2-(2-羥乙基)-l,3-二(叔丁氣羰基氨基)丙烷將N,N'-雙(2-叔丁氧羰基氨基-乙基)-2-(2-千氧基-乙基)-l，3-二(叔丁氧羰基氨基)丙烷(3.16g)溶於無水乙醇(100ml)中，加入披鈀活性炭(l.OOg,無水，10%)。將混合物在Parr氫化裝置(35psi)中氫化2天。濾出催化劑，用乙醇(3x20ml)洗滌。旋轉蒸發除去乙醇，得到無色油狀物，在高真空度下乾燥至恆重(2.67g,97.1%)。'HNMR(270MHz,CDC13,25°C,TMS)5=5.25(brd,2H,NH),3.69(t,2H,OC私-CHrO,3.28(br,12H,N-CH2),2.71(br,OH)'2.23(br,1H,CH)'1.56(肩峰，m,2H,CH-Cft-CH2-0)1.48(s,18H,t-Bu),1.44(s,18H,t-Bu).l3CNMR(67.5MHz,CDC13,25°C，TMS)S=156.10(NHCO),80.00,79.20(CMe3),59.60(0-CH2-CH2),49.90(br,N-CH2),47.00(br,N-CH2),39.34(N-CH2)，33.80(CH),32.30(CH-CH"CH2-0),28.30(t-Bu).MS-EI:605[M+H]+,(計算值605.4).步驟ffl:凡^-雙(2-叔丁氧羰基氨基-乙基)-2-(2-羧基甲基)-l,3-二(叔丁氣羰基氨基)丙烷(化合物1)採用Mazitschek等[j"g.C72，.M.仏4059-4061(2Q02)]的方法。因此，將N,N'國雙(2-叔丁氧羰基氨基腸乙基)-2-(2-羥乙基)-l,3國二(叔丁氧羰基氨基)丙烷(2.60g)溶於DMSO(15ml)中，加入1-羥基-1，2-苯並碘雜氧雜環戊烯-3(lH)-酮-l-氧化物(IBX,3.50g)。混合物在室溫下攪拌1小時，再加入N-羥基琥珀醯亞胺(2.50g)。反應混合物在室溫下攪拌2天。加入氫氧化鈉溶液(2M,40ml),將混合物在室溫下攪拌4小時。將溶液浸入水浴中，用2M鹽酸酸化至pH2。水層用乙醚(4xl00ml)萃取，合併的乙醚萃取液用水PxSOml)洗滌。乙醚層經Na^S04乾燥，旋轉蒸發除去溶劑，得到黃色固體殘餘物，其中含有產物和2-亞碘醯基苯曱酸。從氯仿-己烷(l:3)(80ml)結晶除去大部分亞碘醯基苯曱酸(2.1g)。蒸發氯仿-己烷母液，得到黃色油狀物(3g)，上樣到矽膠柱(300g,CH2C12-Et20,1:1)上。剩餘亞碘醯基苯曱酸用乙醚洗脫。產物用乙醚-曱醇(9:l)洗脫。合併含有產物的流分，除去溶劑，得到淺黃色油狀物(1.5g)。將其在矽膠柱上再次進行色譜純化(50g,Et20)。產物用乙醚-乙酸(95:5)洗脫。合併含有產物的流分，旋轉蒸發除去溶劑，得到油狀物，在高真空度下乾燥。產量為1.10g(41.3%)。'HNMR(270MHz'CDC3,25°C，TMS)5=7.61(brs,1H，COOH),5.19(brd，2H,卿，3.22(br,12H,N-CH2),2.47(brm,1H,CH),2.26(br，2H,CH偶-COOH),1.41(s，18H,t-Bu)，1.37(s,認，t-Bu).13CNMR(67.5固z,CDC13，25°C,TMS)5=175.90(COOH),156.10(NHCO),80.40,79.10(CMe3)，49.50(N-CH2),46.80(N-CH2),39.00(N-CH2)，34.70(CH-CHrCOOH),34.20(CH-CH2-COOH),28.30,28.20(t-Bu).MS-EI:619[M+H]+,(計算值619.4).實施例2:(8-氨基-2爿叔丁氣羰基-(2-叔羰基氨基-乙基)-氨基l-甲基卜辛基)-(2-叔丁氣羰基#^-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(化合物2)的合成步驟(a):2-(6-氯-己氣基)四氫吡喃將6-氯己醇(6.85g,10mmol)和對曱苯磺酸(500mg)溶於無水乙醚(75ml)中,在冰浴中冷卻至0-5。C。滴加二氫吡喃(4.3g，10mmol)的無水乙醚(25ml)溶液，同時持續攪拌30分鐘。滴加完成後，除去冷卻浴，繼續攪拌16小時。溶液用水(50mlx2)萃取，乾燥(MgSCg,過濾，減壓蒸發除去溶劑，得到淺黃色油狀物。該油狀物經13CNMR語顯示足夠純，無需純化就可用於後續反應。產量10.1g(91%)。"CNMR(CDC13):519.7(CH2),25.5(CHz),25.6(CH2),26.7(CHz)，29.6(CHa),30.8(CH2)，32.6(CH2),45.0(CH2C1),62.3(OCH2),67.4(OCHz),98.8(OCHO).'HNMR(CDC13):51.30-1.71(14H,m,CH2x7),3.24-3,32(1H3.41-3.48(3H,mCH和CH2),3.60-3.67(1H,m，CH),3.72-3.82(1H,bm,CH)，4.44-4.49(1H,OCHO).步驟(b):2-[6-(四氫-吡喃-2-基氣基)-己基l-丙二酸二乙酯在乾燥氮氣氛下，將少量鈉(U3g,49mmol)溶於無水乙醇(100ml)中，同時持續攪拌。一次性加入丙二酸二乙酯(8.0g,50mmol),將溶液在60。C加熱1小時。一次性加入2-(6-氯-己氧基)-四氫吡喃(9.3g，42.2mmo1),溫度上升至75-80。C並在此水平保持24小時。冷卻後，過濾除去無機固體，從濾液中蒸發溶劑。將殘餘物溶於CH2C12(50ml)中，用水(30mlx2)萃取，乾燥(MgS04),過濾，除去揮發物，得到淺黃色油狀物。該油狀物進行矽膠色譜，用石油醚(petether)40:60/乙醚(200:40)作為洗脫液。洗脫的所需產物的rf=0.15,經分離得到無色油狀物。產量8.7g,(60。/。)。13CNMR(CDCI3):514.0(CH3x2),19.6(CH2),25.5(CH2)，27.2(CH2),28.6(CH2),29.0(CH2)，29.6((CH2)，30.0(CH2)，30.8(CH2)，52.0(CH),61.2(OCH2x2)，62.2(OCH2),67.4(OCH2),98.8(OCHO),169.4(C=0x2).'HNMR(CDC13):5U0-1.25(14H,m,CH3x2,CH2x4),1.36-1.50(6H,bm,CH2x3),1.70-1.81(2H,bm,CH2),3.17-3.28(2H,m,CH2),3,56-3.66(1H,m,CH),3.70-3.80(1H,m,OCH),4.04-4.16(4H,m,OCH2x2),4.03-4.08(1H，m,OCHO).歩驟(c):N,N'-雙-(2-氨基-乙基)-2-『6-(四氫-敗喃-2-基氣基)-己基l-丙二醯胺將2-[6-(四氫-吡喃-2-基氧基)-己基]-丙二酸二乙酯(5.1g,14.8mmol)溶於1,2-二氨基乙烷(10g,167mmol)中，在室溫下攪拌16小時。真空除去揮發物(40-50。C,0.01mmHg)，得到淺綠色粘稠殘餘物，將其進行柱色譜，用CH2Cl2/MeOH/NH4OH(50:50:5)洗脫。洗脫的標題化合物的rf=0.2，經收集得到淺綠色粘稠油狀物，靜置時固化。(產量3.9g，7P/0)。13CNMR(CDC13):519.8(CH2),25.5(CH2),26.0(CH2)，27.5(CH2),29.2(CHz),29.7(CH2),30.8(CH2)，31.9(CH2)，41.0(NCH2x2)，41.9(NCH2x2)，54.6(CH),位.5(OCH，),67.5(OCH2),98.9(OCHO)，171.6(C-Ox2).NMR(CDC13):SU5-1.28(6H,bs,CH2x3),1.39-1.44(6H,CH2x3),1.69-1.74(4H，bm,CH2x2),2,64(4H，bs，NH2x2),2.734H,t,J-6Hz,CH2x2),3.08-3.29(6Hn%CH2x3),3.35-3.41(1H,mCH)3.55-3.63(IH，m,CH)，3.70-3.78(1H，m,CH)，4.43(1H,HJ=4Hz,OCHO)，7.78(2H,bt,J=5Hz>OCNHx2)IR(薄膜)cm'1:-3417，3082,2936,2862，1663，1558,1439,1354,1323,1261,1200,1189，1076，1026,956,卯7,867,810.歩驟(d):N,N'-雙(2-氨基乙基)-2-(6-羥基-己基)-丙二醯胺將N,N'-雙(2-氨基乙基)-2-[6-(四氫-吡喃-2-基氧基)-己基]-丙二醯胺(3.9g，10.6mmol)、對曱苯磺酸一水合物(8.5g,3mmol)和乙醇(50ml)在70-75。C回流加熱16小時。冷卻後，滴加濃氫氧化銨(.880)，直到pH穩定為9。經硅藻土過濾除去析出的白色固體，濾餅用乙醇(30ml)洗滌。減壓除去乙醇(15mmHg,40。C),得到半固體蠟。該殘餘物進行矽膠色譜，用CH2Cl2/MeOH/NH4OH(100:50:10)洗脫，標題化合物的^=0.2。收集該產物，與乙醇(100mlx3)共蒸發，除去殘餘水分。得到淡綠色粘稠殘餘物，靜置時固化。(產量2.1g,69。/。)。13CNMR(CD3OD):525.4(CH，),27.3(CH2)，28.9(CH2),30.4(CH2),32.2(CH2),40.6(NCH2x2)，41.7(NCH2x2),5i.l(CH),61.6(CH卿，171.7(C=0x2).'HNMR(CD3OD):S1.28-1.38(6H,bs,CH2x3)，1.46-1.55(2H,bm,CH2),1.79-1.87(2H'bm,CH2),2.73(4H,t'J=6Hz'H2NCH2x2),3.13(1Ht,J=7Hz,CH),3.27(4H,dt,J-6and2Hz,HNCH2x2),3.53(2Ht,J=7HzOCH2).IR(薄膜)cm.':-3364,2932,28(52,2527，1663,1558,1462,1327'1223,1192,1034.質譜(Fabs)m/e:C3H29N403(M+H)的計算值289,實測值289。步驟(e):(2-叔丁氣羰基氨基-乙基-2-H叔丁氣羰基-(2-叔丁氣羰基氨基-乙基V氨基l-甲基V8-羥基-辛基)-碳酸叔丁酯在乾燥氮氣氛下，通過注射器將純淨曱硼烷-二曱硫加合物(15ml，150mmol)滴加到N，N'-雙(2-氨基乙基)-2-(6-羥基己基)丙二醯胺(2.1g，7.3mmol)和二嚼烷(50ml)的攪拌混合物中。完成加入後，將混合物在回流下在ll(TC緩慢加熱5天。在此期間，生成一些白色固體。冷卻後，減壓除去揮發物，得到白色固體，向其中滴加曱醇(50ml)，得到無色溶液。溶液在回流下加熱3小時，冷卻，加入濃HC1(5ml),在回流下在70-75。C繼續加熱48小時。除去溶劑，得到綠色粘稠殘餘物，將其與甲醇(100mlx3)共蒸發，得到淺綠色固體。該固體再溶於無水曱醇和無水碳酸鉀(4.0g,30mmol)中，再加入二碳酸二叔丁酯(7.0g,32mmo1)。混合物在室溫下攪拌48小時。通過硅藻土過濾除去無機固體，從濾液中蒸發掉溶劑，得到粘稠殘餘物。該殘餘物與水(50ml)混合，用CH2C12(50mlx3)萃取。合併有機部分，乾燥(MgS04)，過濾並蒸發溶劑，得到淺黃色殘餘物。注意:此時用"CNMR監測反應很方便。殘餘物進行矽膠色譜，用CH2Cl2/MeOH(95:5)作為洗脫液。洗脫的標題化合物的rf=0.41,分離出無色粘稠油狀物(產量2.5&52%)。13CNMR(CDC13):525.6(CH2),26.4(CH2)，28.4(CH3x12),29.8(CH2x2)，32.6(CH2),36.5(極寬峰，CH),39.2(NCH2x2,相鄰CH),46.9(寬單蜂，HNCH2x2),50.0(寬單蜂,NCH2x2),62.4(HOCH2),79.0(OCx2),79.9(OCx2)，156.4(寬單蜂C=0x4)'HNMR(CDC13):51.05-1.18(8H，bs,CH2x4),1.27(18h,s,CH3x6,叔丁基),1.31(18H,s,CH3x6,叔丁基)，1.41(2H,m,CH2),1.81(1Hbs,CH),2.63(1H,bs,OH),2.98(4H,bs,NCH2x2),3.11(8H,bs,NCH2x4),3.44隅t,J=8Hz，CH20),5.2(2H,bs,NHx2)IR(薄膜)crrf1:3350,2976,2931,2859,1674，1516,1455,1418,1393,1260,1250,1165,1069,965,871,775。質譜(Fabs)m/e:C33H65N409(M+H)的計算值:661,實測值661。歩驟ffl:甲苯-4-磺酸84叔丁氡羰基-(2-叔丁氣羰基氨基-乙基-氨基1-7-{「叔丁氣羰基-(2-叔丁氣羰基氨基-乙基)-氨基l-甲基}-辛酯在室溫下，將(2-叔丁氧羰基氨基-乙基-2-{[叔丁氧羰基-(2-叔丁氧羰基氨基乙基)氨基]-曱基卜8-羥基辛基)-碳酸叔丁酯(2.52g,3.82mmo1)、對曱苯磺醯氯(1.0g,5.2mmo1)、三乙胺(1.3g,12.8mmol)和CH2C12(30ml)進行攪拌，同時緩慢蒸發溶劑。用碳NMR監測反應，3天後，殘留極少量原料。用CH2Cl2將反應體積補充到30ml,用水(50mlx3)萃取，乾燥(MgSCg，過濾並蒸發溶劑，得到褐色殘餘物。該殘餘物進行矽膠色譜，用CH2Cl2/MeOH(100:5)作為洗脫液。洗脫下來的第一化合物為未反應的曱苯磺醯氯，其^=0.95。洗脫下來的標題化合物的1>=0.2,將其分離出來，為淺黃色粘稠油狀物。產量(1.20g,39%)。13CNMR(CDC13):S21.7(CH3甲笨磺醯基)，25.3(CH2),26.3(CH2),28.5(CH3x12),28.8(CH2),29.5(CH2),29.9(CH2),36.5(CH極寬峰)，39.4(NCH2x2),47.0(寬峰，NCH2x2),50.5(寬峰,NCH2x2),70.6(TsOCH2),79.1(OCx2),80.0(OCx2),127.9(CHx2),129.9(CHx2),133.2(C),144.7(C-STs)，156.1(寬峰，C=Ox4)。)HNMR(CDC13):S1■16(8H,bs,CH2x4),1.35(18&s,CH3x6),1.39s,CH3x6),1.88(1&bs,CH),2.38(3H,s,CH3曱苯磺醯基)，3.10-3.12(4Hbs,NCH2x2)，3.19(8H,bs,NCH2x4),3.93(2H,t,J=7Hz,CH2OTs),5.0(IH，bs,NH),5.08(1H,bs,NH),7.29(2H,d,J=8Hz,CHx2,Ar)，7.72(2H,d,J=8HzCHx2,Ar)IR(薄膜)cur':3360,2974，2932,2862,1693,1516,1479,1418,1391,1366,1250,1177,1069,959,816,775。質i普(Fabs)m/e:C40H71N4OS(M+H)的計算值815,實測值815。歩驟(g):(8-疊氮基-2-U叔丁氣羰基-(2-叔羰基氨基-乙基)-氨基l-曱基)-辛基>(2-叔丁氧羰基氨基-乙基V氨基曱酸叔丁酯將曱苯-4-磺酸8-[叔丁氧基羰基-(2-叔丁氧羰基氨基乙基-氨基]-7-U叔丁氧羰基-(2-叔丁氧羰基氨基乙基)氨基]曱基卜辛酯(U05g,1.36mmo1)、疊氮化鈉(350mg,5.4mmol)和曱醇(10ml)在70-75。C回流加熱16小時。冷卻後，在室溫下減壓除去甲醇，直到殘留約l-2ml。該殘餘物用水(25ml)稀釋，用CH2C12(25mlx4)萃取。合併有機萃取液，乾燥(MgSCg，過濾，在室溫下使揮發物蒸發(注意疊氮化物具有潛在爆炸性，該步驟應在安全罩後面進行)，得到淺黃色粘稠殘餘物，是純淨狀態的所需化合物。(產量820mg,88%)。l3CNMR(CDCU):S26.3(CH2)，26.5(CH2),28.3(CH3x12),28.7(CH2),29.6(CH2)，29.8(CH2),36.8(寬峰，CH)，39.3(NCH2x2)，46.9(寬峰，NCH2x2),50.0(寬峰,NCH2x2),51.3(CH2N3),79.0(OCx2),79.8(OCx2)，156.0(OOx4).'HNMR(CDC13):51.16(8H,bs,CH2x4),1.29(,sCH3x6)，1.33(18H,s,CH3x6),1.47(2H，bt,J=6,5HzCH2相鄰CH),1.86(1H,bs,CH),2.95-3.05(4H,bs,:NCH2x2),3.05-3.20(IOH，bs，NCH2x4和CH2N3),5.09(2H，bs,NHx2)IR(薄膜)on-1:-3350,2974,2932,2860,2097(強帶N3)，1694,1520,1470,1418,1391,線1250,1167，1069,870,777.歩驟0i):(8-氨基-2-{『叔丁氣羰基-(2-叔羰基氨基-乙基)-氨基l-曱基卜辛基)-(2-叔丁氧羰基氨基-乙基)-氨基曱酸叔丁酯(化合物2)在30個大氣壓下，在室溫下，將(8-疊氮基-2-{[叔丁氧羰基-(2-叔羰基氨基-乙基)-氨基]-曱基}-辛基)-(2-叔丁氧羰基氨基-乙基)-氨基曱酸叔丁酯(820mg,1.20mmo1)、10。/。披鈀碳(100mg)和曱醇(10ml)用氫氣處理16小時。通過硅藻土過濾除去固體，濾餅用甲醇(50ml)洗滌。從濾液中除去揮發物，得到粘稠油狀物，為純淨狀態的所需物質。(產量700mg,89%)。"CNMR(CDC13):526.4(CH2)，26.6(CH2),28,4(CH3x12),32.9(CH2x2),36.8(寬峰'CH).39.2(NCH2x2),41.8(H2NCH2),46.9(寬峰，NCH2x2)'49.8(寬峰'NCH2x2),78.9(OCx2),79.7(OCx2),156.0(COx4).tHNMR(CDC13):51.08(8H,bs，CH2x4),1.23(18H,s,CH3x6)，1.27(20H,bs,CH3x6和CH2),1.77(1H,bs，CH),2.40(2H,bs，NH2),2.50(2H,t,J=7Hz，CH2NH2),2.97(4H,bm,NCH2x2),3,00-3.16(8H，bm,NCH2x4),5.21(1H,bs，NH),5.30(IH，bs,NH).IR(薄膜)cmT1:-3360,1693,1520,1459,1418,1392，1367,1250,1170,1068，964,922,871,775,733.質謙(Fabs)m/e:C^H^NsOs(M+H)的計算值660,實測值660。實施例3:化合物3的合成步驟(a):化合物l與苄胺偶聯在一個(50ml)圓底燒瓶中，將化合物1(61.8mg,O.lmmol)的CH2C12(5ml)用千胺(10.7mmo1)、二苯基次膦醯氯(25.9mg)和二異丙醯胺(29mg0.22mmol)在20。C處理18小時。再將反應物用CH2C12(20ml)稀釋，用1N鹽酸(5ml)和飽和碳酸鉀水溶液(5ml)洗滌。分離CH2C12層，乾燥(Na2S04)和真空濃縮，得到膠狀物(50mg)。粗產物進行矽膠色譜，用乙酸乙酯/石油梯度(各100ml,50%、70%和90%)洗脫。收集少量快速流出的雜質，緊接著是主要流分。和13CNMR語在CDC13中進行。這表明主要流分是所需的純化合物。歩驟(b〗Boc保護基的脫保護將步驟(a)的產物(27.8mg,0.039mmol)的CH2C12(0.5ml)用三氟乙酸(0.5ml)處理，讓反應物在室溫下靜置3小時。再將反應混合物真空濃縮成膠狀物，以除去過量的酸，並稱重(53mg)。和13CNMR(CDC1。表明Boc基團已經完全脫除。將稱重的化合物2樣品溶於水中，得到10mM的TFA鹽溶液，用於放射性標記實驗。實施例4:化合物6的合成歩驟(a):(8-苯甲醯基氨基-2-{「叔丁氣羰基-(2-叔羰基氨基-乙基)-氨基l-曱基l-辛基)-(2-叔丁氣羰基氨基-乙基)-氨基曱酸叔丁酯將苯曱酸2,5-二氧代-吡咯烷-l-基酯(20mg,0.091mmol)的無水(^2(312—次性加入到化合物2(50mg，0.08mmol)的CH2C12(lml)溶液中，將所得溶液在室溫下攪拌16小時。反應物用CH2C12(10ml)稀釋，用水(15mlx2)萃取，乾燥(MgS04),過濾，旋轉蒸發除去溶劑。剩下的殘餘物用矽膠色譜法純化，用CH2CV曱醇94:6(rf=0.23)作為洗脫液，得到無色粘稠油狀物。(產量25mg,41。/c))。13CNMR(CDC13):526.4(CH2),26.8(CH2)，28.5(CH3x12),29.6(CH2x2),29.7(CH2),29.9(CH2),36.6(寬峰,CH)，39.4(NCH2x2),40.0(0=CNCH2x2),47.0(寬峰，NCH2x2),49.8(NCH2x2),79.7(OCx2),80.0(OCx2),127.0(ArCHx2)，128.5(ArCHx2),131.3(ArCH)，134.9(ArC),156.1(00x4)，167.6(ArC=0)。'HNMR(CDC13):51.28(8H,bs,CH2x4),1.38(18H,s,CH3x6),1.42(20H,bs，CH3x6和CH2),1.95(1H,bs,CH),3.1(4H,bs，NCH2x2)3.22(8H,bs,NCH2x4),3.42(2H,bq，,J=6Hz,01^-苯曱醯基),5.08(2H,bs,NHx2),6.18(1H,bs,HN-苯曱醯基)，7.38-7.45(3H,m,ArCHx3),7.74(2H,bd,J=7Hz，ArCHx2),IR(薄膜)cm.1:3350,2976,2932,2859,1693(寬峰)，1652,1520,1419，1391，1367,1251，1166,732質譜(Fabs)m/e:C40H7。N5O9(M+H)的計算值764，實測值764。歩驟(b):Boc保護基的脫保護將步驟(a)的Boc四胺苯曱醯胺(42mg,0.056mmol)的CH2C12(0.5ml)用三氟乙酸(0.5ml)處理，讓反應物在室溫下靜置3小時。再將反應物真空濃縮，以除去過量酸，得到膠狀物。預期重量(45mg)，實測重量(45.7mg)。和13CNMR(。0300)表明Boc基團已經完全脫除，它含有所需化合物。將稱重的化合物溶於水中，得到10mM的TFA鹽溶液(56pmol/5.6ml)，用於放射性標記。實施例5:化合物4的合成所有反應均在人工氮氣發生器(bubblerapparatus)中進行。步驟(a):氯沙坦與三苯甲基衍生化固體支持物的連接將氯沙坦(MSD,0.236g,0.558mmol)和三乙胺(Fluka,0.233ml,1.67mmol)力。入到三苯曱基氯樹月旨(Novabiochem,susbstitution1.24mmol/g,0.300g)的DMF(5ml)懸浮液中。4天後，排乾樹脂並洗滌。裂解一份樹脂(二氯曱烷/TFA/三異丙基矽烷，92.5:5.0:2.5,15min)。HPLC分析(柱子PhenomenexLunaC18(2)3pm4.6x50mm,溶劑A-水/0.1。/oTFA,B=乙腈/0.1%TFA;梯度10-40%B,10min;流速2.0ml/min,UV檢測214nm和254nm)，得到一個對應於氯沙坦的峰,其^為6.7分鐘。樹脂用二氯曱烷/曱醇/二異丙基乙胺溶液(17:2:1,20ml,l小時)處理，用二氯曱烷洗滌並乾燥。歩驟(b):用疊氮基置換羥基將二苯氧基磷醯疊氮(Aldrich,0.481ml,2.23mmol)和DBU(0.611ml,4.09mmol)加入到步驟(a)的連接樹脂的氯沙坦(0.372mmol)的THF(10ml)懸浮液中。讓反應物過夜。如步驟(a)所述，裂解一份樹脂。經LC-MS分析(柱子PhenomenexLunaCI8(2)3pm50x4.60mm,溶劑A"Jc/0.1%TFA，B=乙腈/0.1%TFA;梯度20-80%B，lOmin;流速lml/min,UV檢測214nrn,ESI-MS)，得到一個峰，^為7.3分鐘，對應於該結構的m/z為448.1(MH+)。歩驟(c):將疊氮基團還原成胺向步驟(b)的樹脂的THF(4ml)的懸浮液中，加入氯化錫(II)(Acros,0.141g,0.744mmol)、苯硫酚(Fluka,0.304ml,2.976mmol)和三乙胺(Fluka,0.311ml,2.23mmol)。1.5小時後，如a)所述裂解一份樹脂。LC畫MS分析(柱子PhenomenexLunaCI8(2)350x4.60mm,溶劑A"jc/0.1%TFA,B二乙腈/O.P/oTFA;梯度20-80%B,10mm;流速lml/min,UV檢測214nm,ESI-MS),在1.9分鐘得到一個峰，其m/z422.2(MH+),正如所預期的胺。步驟(d):氯沙坦-Leu-四胺螯合劑(化合物4)用標準偶聯劑(HATU和DIEA)和標準Fmoc-裂解方案(20。/。旅咬/DMF),將Fmoc畫Leu-OH(Novabiochem,0.030g,0.084mmol)與一份步驟(c)的結合樹脂的氨基-氯沙坦(0.042mmol)的DMF偶聯。用標準Kaiser試驗檢查偶聯是否完成。再用同樣的偶聯劑(HATU和DIEA)的DMF,將化合物1(0.026g,0.042mmol)偶聯到樹脂上。4小時後，裂解產物，在同一步驟(二氯曱烷/TFA/三異丙基矽烷，47.5:50:2.5溶液，1小時)中除去樹脂和Boc基團。過濾溶液，濃縮並通過製備型HPLC純化(柱子PhenomenexLunaCI8(2)5pm21.2x250mm,溶劑A"JC/0.1%TFA,B-乙腈/0.1。/oTFA;梯度20-40%B,60min;流速10.0ml/min,UV檢測214nm),凍幹後得到5mg產物。LC-MS分析(柱子PhenomenexLunaCI8(2)350x4.60mm,溶劑A=水/0.1%TFA，B二乙腈/O.P/。TFA;梯度10-80%B,10min;流速0.3ml/min,UV檢測214nm和254nm,ESI-MS)^5.1分鐘，m/z735.4(MH+》證實其結構。實施例6:化合物5的合成按照實施例4所述，在固體支持物上合成該化合物。用標準偶聯劑(HATU和D正A)和標準Fmoc-裂解方案(20。/。哌啶/DMF)，將Fmoc-Leu-OH(Novabiochem,0.033g,0.092mmol)和Fmoc誦氨基PEG二乙醇酸(Polypure,0.049mg,0.092mmol)相繼與一份實施例4(c)的連接樹脂的氨基-氯沙坦(0.046mmol)的DMF偶聯。用標準Kaiser試驗檢查偶聯是否完成。再用同樣的偶聯劑(HATU和DIEA)的DMF，將化合物1(0.029g,0.046mmol)偶聯到樹脂上。讓反應物過夜，再將產物從樹脂上裂解，在同一步驟(二氯曱烷/TFA/三異丙基矽烷,47.5:50:2.5溶液，1小時)中除去Boc基團。過濾溶液，濃縮並用製備型HPLC純化(柱子PhenomenexLunaC18(2)5pm21.2x250mm,溶劑A"Jc/0.1%HCOOH,B=乙腈/0.1%HCOOH;梯度10-40。/oB,60min;流速10.0ml/min,UV檢測214nrn)，凍幹後得到3.5mg產物。LC-MS分析(柱子PhenomenexLunaCI8(2)350x4.60mm,溶劑A=7jc/0.1%HCOOH，B^乙腈/0.1o/oHCOOH;梯度10-40o/oB，10min;流速0.3ml/min,UV檢測214nm和254nm,ESI誦MS)^4.7分鐘，m/z1025.4(MH+))證實其結構。實施例7:化合物8的合成步驟(a):N-Boc-N-fFmocNH-CH，CH2l-Gly-OH的合成將lgN-[FmocNH-CH2CH2]-Gly-OtBu.HCl(Fluka09660)用20ml50。/。三氟乙酸(TFA)的二氯曱烷(含有0.5ml三異丙基矽烷)處理60min。真空蒸發所得混合物，殘餘物再溶於20ml50%四氬吹喃/水中。加入2.6g叔丁氧羰基酐和1.2mlW-曱基嗎啉，將所得混合物撹拌4天。然後真空蒸發四氫呋喃，將殘餘物再溶於二氯甲烷中。有機層用水洗滌，用MgSC^乾燥。真空蒸發二氯曱烷，殘餘物再溶於5ml二曱基曱醯胺中。二甲基甲醯胺溶液用400ml60%乙腈/水稀釋，再泵入製備型RP-HPLC柱中進行純化(30-80%B,40min,其中A=H2O/0.1%TFA，B=CH3CN/0.1%TFA,流速50ml/min,在PhenomenexLunalOfiC18(2)250x50mm柱上)，得到450mg純產物。產物用分析型HPLC分析(梯度20-70%B,10min，其中A=H2O/0.1%TFA，B=CH3CN/0.1%TFA;流速0.3ml/min;柱子PhenomenexLuna3pCI8(2)50x2mm;檢測UV214nm;產物保留時間8.66min)。產物用電噴霧質譜法進一步表徵(MH+計算值441.2;MH+實測值440.8)。步艱"b):N-((CHA-麗COCH,-四胺)-Gly-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Ile-OH(化合物8)的合成在AppliedBiosystems433A肽合成儀上，從O.lmmolFmoc-Ile-Wang樹脂開始，合成血管緊張素II的肽類似物。過量的lmmol預先活化的胺基酸[用六氟磷酸O-苯並三唑-l-基-N,N,N',N'-四曱基脲輸(HBTU)]用於偶聯步驟，加到精氨酸上。將123mgN-Boc-N-[FmocNH-CH2CH2]-Gly-OH、114mg六氟磷酸7\4(二曱氨基)畫1//-1，2,3-三唑並[4,5-Z)]吡啶-l-基亞甲基]-A^-曱銨/Z-氧化物(HATU)和60nLN-曱基嗎啉溶於二曱基曱醯胺中，攪拌5min,然後在氮氣發生器中加入到樹脂中。2小時後除去試劑，樹脂用二曱基甲醯胺和二氯曱烷洗滌。樹脂用20%哌啶/二曱基曱醯胺(3x10ml)處理，再用二曱基曱醯胺洗滌。將23mg化合物l、14mgHATU和7.5pLN-曱基嗎啉溶於二曱基曱醯胺中長達10min,加入到樹脂中。4小時後除去試劑，樹脂用二曱基曱醯胺和二氯曱烷洗滌。在10ml三氟乙酸(含有2.5%三異丙基矽烷和2.5%水)中，同時脫除側鏈保護基並從樹脂上裂解肽達90分鐘。真空除去三氟乙酸，將乙醚加入到殘餘物中，沉澱的產物用乙醚洗滌並風乾。用製備型RP畫HPLC純化(0國30%B,40min,其中A=H2O/0.1%TFA,B=CH3CN/0.1%TFA,流速10ml/min,在PhenomenexLuna10pC18(2)250x21.20mm柱上)產物，得到32mg純的螯合物-肽綴合物。產物通過分析型HPLC分析(梯度，5-50%B,20min，其中A=H2O/0.1%TFA，B=CH3CN/0.1%TFA;流速1ml/min;柱子，PhenomenexLunaCI8(2)50x2mm;檢測，UV214nm;產物保留時間5.22min)。產物用電噴霧質譜法進一步表徵(MH+計算值，1197.8;MH+實測值1197.8)。實施例8:化合物3-7的""Tc放射性標記製備含有下列成分的凍幹藥盒("ChelakitAplus"):tableseeoriginaldocumentpage39將2S50|iig待標記化合物(溶於25-50溶劑)依次加入到CHELAKIT-Aplus、發生器洗出液(generatoreluate)(""Tc047鹽水,l.Oml)中。將溶液混合，讓其在室溫下放置20-30分鐘。在室溫下，在pH9,給化合物3和化合物6用鎝進行標記，得到高產量的相應陽離子99mTc絡合物(RCP>90%)。四胺絡合物用HPLC純化(流動相0.1%TFA/水，0.1%TFA/乙腈；XTERRARP183.5^im4.6x150mm柱)，在50mM磷酸緩衝液中，在37。C穩定2小時(2小時後經HPLC,RCP〉95%)。實施例9:""Tc絡合物親脂性(LogP)的測定實施例8的99mTc絡合物的辛醇-水分配係數(LogP)測定如下在離心管中，將10pL實施例8的經HPLC純化的99mTc絡合物與l-辛醇(2ml)和50mM磷酸緩沖液(pH=7.4,2.0ml)混合在一起。將該管在室溫下渦旋振蕩1分鐘，然後高速離心60min。將兩相各0.1ml樣品移入其它試管中，小心避免兩相間交叉汙染，然後在WallacWizzardy計數器上計數。測定重複3次。分配係數P計算如下P=(辛醇中的cpm-背景cpm)/(水中的cpm-背景cpm)。通常最終分配係數值用logP表示。結果見表1:表l:鎝絡合物四胺化合物的LogP值化合物編號的LogP(辛醇/50mM99mTc絡合物磷酸緩衝液)3<-24+0.6-0.16-1.87<國2實施例10:""Tc絡合物的生物分布按照實施例8,製備化合物4、5和7的99mTc絡合物。在正常雄性Wistar大鼠(180-220g)中，注射(p丄)試驗品後，在兩個預定時間點(2分鐘和120分鐘)進行實驗。動物用氟烷(6%氧)麻醉，注射0.1ml(500MBq/ml)試驗品(TestItem),處死，解剖，測定樣品的放射性。結果見表l:表l:""Tc絡合物的生物分布tableseeoriginaldocumentpage41實施例11:化合物1的替代製備方法將實施例1步驟(e)的N，N'-雙(2-叔丁氧羰基氨基-乙基)-2-(2-羥乙基)-l,3-二(叔丁氧羰基氨基)丙烷溶於四氯化碳(14ml)和乙腈(14ml)中。加入水(21ml),得到兩相混合物，再加入高碘酸鈉(4.5g,21mmo1)和氯化釕水合物(35mg,0.026mmo1)。所得深褐色溶液在室溫下攪拌1小時，再用CH2C12(40ml)稀釋。分離有機層，水相用更多CH2C12(40mlx3)萃取。合併所有有機萃取液，乾燥(MgSO》，過濾，減壓蒸發揮發物，得到化合物1的鈉鹽，為黑色粘稠殘餘物，無需進一步純化就可使用(4.15g,96%)。l3CNMR(CDC13):3C28_2(xl2)(CH3)，34.1(CH2),34.4(CH),38.6(x2)(NCH2),46.8(x2)(NCH2),49.3(x2)(NCH2),79.0(x2)(OC),肌2(x2)(OC),155.9(x4)(C=0),175.4(COOH).'HNMR(CDC13):SH1.29(l膽,s,CH3x6),1.35(18H，s'CH3x6),2.19(1H，br,CH)，2.40(2H,br,CH2)，3.05-3.23(12H,br'NCH2x6)>5.10-5.24(2H,br，NHx2)質譜(ESI)m/e:(M+Na)C29H540'。N4Na的計算值641.3738，實測值641.3787。實施例12:化合物9的製備將1,3-二環己基碳二亞胺(DCC;2.16g,10.5mmol)—次性加入到化合物1(4.15g,6.90mmol)和N-羥基琥珀醯亞胺(1.81g，15.7mmol)的無水THF(30ml)的攪拌溶液中。所得混合物在室溫下攪拌16小時，過濾除去沉澱的DCU(1,3-二環己基脲)。從濾液中蒸發揮發物，得到蠟狀殘餘物，向其中加入無水乙醚(50ml)，沉澱更多DCU,並用過濾除去。乙醚溶液用水(25mlx2)洗滌，乾燥(MgS04)，過濾並減壓蒸發溶劑，得到蠟狀固體。該固體用矽膠色譜法純化，用CH2cy乙醚混合物(l:l)洗脫，直到除去未反應的DCC。洗脫液換成乙醚，分離得到所需產物(rf=0.4,DCM/Et201:1)，為無色固體(2.7g,57%)。mp66-68。C。'3CNMR(CDC13):Sc25.6(x2)(CH2)，28.4(x12)(CH3),31.8(CH2),35.2(CH),39.3(x2)(NCH2),47.1(x2)(NCH2),49.1(x2)(NCH2)，79.9(x2)(OC),80.5(x2)(OC),156.1(x4)(C=0),167.7(C=0),169.1(x2)(C=0).'HNMR(CDC13):SH1.35(18H,s，CH3x6)，1.41(18H,s,CH3x6),2.52(3H,brs,CH&CH2),2.77(4H,s,CH2x2),3.10-3.35(12H'brs,NCH2x6),5.08(2H,brsNHx2)質譜(ESI)m/e:(M+Na)C33H54N5012Na的計算值738.3896,實測值738.3893。權利要求1.一種下式(I)的鎝絡合物其中X為-NR-、-CO2-、-CO-、-NR(C＝S)-、-NR(C＝O)-、-CONR-或Q基團；每個Y獨立地為D-胺基酸、L-胺基酸、-CH2-、-CH2OCH2-或-OCH2CH2O-或X基團；Z為合成生物靶向部分；n為1-8的整數；m為0-30的整數；R為H、C1-4烷基、C2-4烷氧基烷基、C1-4羥基烷基或C1-4氟代烷基；Q為A為抗衡離子；前提條件是X1-(Y)m鏈中的原子缺乏鍵，其中一個雜原子直接與另一個雜原子鍵合。2.權利要求1的鎝絡合物，其中所述鎝放射性同位素是99mTc或94mTc。3.權利要求1或2的鎝絡合物，其中n為1-6,X為-CONR-或-NR(C=0)-。4.權利要求3的鎝絡合物，其中X為-CONH-或-NH(C-O)-。5.權利要求1-4中任一項的鎝絡合物，其中-(Y)m-包括式(-OCH2CH20-)J々PEG基團，其中w為3-25的整數。6.權利要求5的鎝絡合物，其中w為6-22。7.權利要求1-4中任一項的鎝絡合物，其中-(Y)z包含1-10個胺基酸。8.權利要求7的鎝絡合物，其中所述胺基酸獨立選自甘氨酸、賴氨酸、天冬氨酸、穀氨酸或絲氨酸。9.權利要求1-8中任一項的鎝絡合物，其中Z選自(i)3-30聚體肽；(ii)酶底物、酶拮抗劑或酶抑制劑。10.—種螯合劑綴合物，所述螯合劑綴合物用於製備權利要求1-9中任一項的鎝絡合物，所述綴合物為下式II:其中X、Y、Z、n和m如權利要求1中定義；QLQ4蟲立地為Q基團，其中Q為H或氨基保護基。11.權利要求10的螯合劑綴合物，其中Q'-QS都為H。12.權利要求10的螫合劑綴合物，其中Qi和(^都為H，Q2、Q3、Q4和Q5各自為叔丁氧羰基。formulaseeoriginaldocumentpage313.—种放射性藥物，所迷藥物包含適於人體給藥形式的權利要求1-9中任一項的式I鎝絡合物以及生物相容性載體，其中所述式I鎝絡合物中的A為藥學上可接受的抗衡離子。14.權利要求13的放射性藥物，其中所述鎝放射性同位素是""Tc或94mTc。15.—種藥盒，所述藥盒用於製備權利要求13或14的放射性藥物，所述藥盒包括(i)權利要求10-12中任一項的螯合劑綴合物；(ii)生物相容性還原劑。16.權利要求15的藥盒，其中所述生物相容性還原劑包括亞錫離子。17.權利要求15或16的藥盒，其中QL(/都為H。18.權利要求15-17中任一項的藥盒，其中Z如權利要求9中定義。19.一種下式III的化合物formulaseeoriginaldocumentpage4其中QJ-(^和n如權利要求10中定義;E為適於與權利要求1-9中任一項的生物耙向部分Z綴合的官能(CH2)n-E前提條件是a.當11=3時，QLQS中的至少一個為氨基保護基;b.當n=3或5時，E不為OH。20.權利要求19的化合物，其中E為-NH2、-C02M、-NCS、-NCO、馬來醯亞胺或丙烯醯胺，其中M為H、陽離子、保護基或活性酯。21.權利要求20的化合物，其中E為-NH2或-C02M。22.權利要求19-21中任一項的化合物，其中n為1-6。全文摘要本發明提供了具有生物靶向部分並通過連接基團連接的四胺螯合劑綴合物及其鎝絡合物，它們用作放射性藥物。連接基團是使得螯合劑在橋頭位置單官能化並且提供柔韌性和芳基缺乏，使親脂性和空間體積最小化。提供了螯合劑的保護形式，使其可以與各種各樣的靶向分子綴合，而不幹擾與四胺螯合劑的胺氮反應。描述了官能化螯合劑的合成以及雙官能螯合物前體。描述了包含本發明的鎝金屬絡合物的放射性藥物組合物，以及用於製備這類放射性藥物的非放射性藥盒。文檔編號A61K103/10GK101128219SQ200580029736公開日2008年2月20日申請日期2005年7月19日優先權日2004年7月19日發明者A·E·斯託裡,H·沃茲沃思,N·A·鮑威爾,P·鄧坎森申請人:通用電氣健康護理有限公司