一種樟皮鹼b的製備方法
2023-12-02 04:17:11 1
專利名稱:一種樟皮鹼b的製備方法
技術領域:
本發明屬於天然藥物化學領域,特別是涉及一種樟皮鹼B的製備方法。
背景技術:
樟皮鹼B (Nectandrin B)為木脂素類物質,CAS 號 74683-16-2,分子式 C2tlH24O5,分子量 344. 41,樟皮喊 B 來源於樟科(Lauraceae)紅楠 Machilus thunbergii Sieb. etZucc.的樹皮。研究表明,樟皮鹼B具有免疫抑制作用,對分裂素(刀豆球蛋白A)誘導的人外周血液淋巴細胞增生有抑制作用,其IC50為3. 30 μ g/ml (9. 6 μ Μ) ;5-脂氧化酶抑制劑,治療因花生四烯酸代謝失調引起的疾病如炎症、過敏等;樟皮鹼B還是醛糖還原酶抑制劑。通過文獻檢索,國內尚未見從紅楠的樹皮中製備樟皮鹼B的方法。
發明內容
本發明的目的是提供一種樟皮鹼B的製備方法,工藝簡單、提取率高,整個過程具有安全、無毒等優點。本發明的目的是通過以下技術方案來實現的
a.取紅楠的樹皮粉碎,加入超臨界萃取釜中,95%乙醇溶液為夾帶劑,在萃取壓力20-32MPa、溫度45_60°C的條件下,通入液態CO2萃取50_90min,在壓力7_9MPa,溫度30-40°C解析得萃取物;
b.上述萃取物用甲醇溶解,加少量中性氧化鎂拌樣,揮幹溶劑,幹法上氧化鎂柱,石油醚-丙酮混合溶劑梯度洗脫,收集洗脫液減壓濃縮得粗提物;
c.上述粗提物採用高速逆流色譜分離,紫外檢測器監測,收集目標成分,冷藏結晶,得樟皮鹼B。步驟a中所述CO2流量為3_5ml/g生藥/min,夾帶劑用量為總萃取溶劑的12_18%。步驟b中所述中性氧化鎂為200-300目,石油醚-丙酮體積比為20-5:3。步驟c中所述高速逆流色譜的溶劑系統為正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水組合,比例為4-7:7-9:3-5:3-5,下相為流動相,上相為固定相。本發明的積極效果是
1.採用超臨界CO2萃取,高效無溶劑殘留,對環境無汙染;
2.採用柱層析純化,操作簡單,處理量大;
3.採用高速逆流色譜分離,分離速度快,樣品無損失,溶劑可以循環使用,適合連續製備。
具體實施例方式 下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明。實施例I :
紅楠的樹皮粉碎,取Ikg加入超臨界萃取釜中,通入液態CO2,設置萃取壓力25MPa、溫度45°C,達到上述參數後,調整液態CO2流量為4ml/g生藥/min,95%乙醇溶液為夾帶劑,夾帶劑用量為總萃取溶劑的12%,動態萃取90min,在壓力7MPa、溫度40°C下解析,所得萃取物加甲醇溶解後,加少量中性氧化鎂拌樣,揮幹溶劑,幹法上氧化鎂柱,石油醚-丙酮20: 3、12:3、5:3混合溶劑梯度洗脫,收集洗脫液減壓濃縮得粗提物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按7:9:4:5混合,混合充分分層後,取上相注滿高速逆流色譜柱,同時開轉主機SOOrpm,泵入下相做流動相,待系統平衡後,流速調節為2. 5ml/min,同時用固定相溶解粗提物,由進樣閥進樣,紫外檢測器監測,收集目標流分,連續製備,冷藏流分,得結晶物,經HPLC檢測,純度 98. 2%ο實施例2:
紅楠的樹皮粉碎,取2kg加入超臨界萃取釜中,通入液態CO2,設置萃取壓力20MPa、溫度50°C,達到上述參數後,調整液態CO2流量為3ml/g生藥/min,95%乙醇溶液為夾帶劑,夾帶劑用量為總萃取溶劑的18%,動態萃取50min,在壓力9MPa、溫度35°C下解析,所得萃取物加甲醇溶解後,加少量中性氧化鎂拌樣,揮幹溶劑,幹法上氧化鎂柱,石油醚-丙酮18:3、10:3、5:3混合溶劑梯度洗脫,收集洗脫液減壓濃縮得粗提物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按5:8:3:4混合,混合充分分層後,取上相注滿高速逆流色譜柱,同時開轉主機900rpm,泵 入下相做流動相,待系統平衡後,流速調節為3ml/min,同時用固定相溶解粗提物,由進樣閥進樣,紫外檢測器監測,收集目標流分,連續製備,冷藏流分,得結晶物,經HPLC檢測,純度98. 0%。實施例3:
紅楠的樹皮粉碎,取2kg加入超臨界萃取釜中,通入液態CO2,設置萃取壓力32MPa、溫度60°C,達到上述參數後,調整液態CO2流量為5ml/g生藥/min,95%乙醇溶液為夾帶劑,夾帶劑用量為總萃取溶劑的16%,動態萃取80min,在壓力8MPa、溫度30°C下解析,所得萃取物加甲醇溶解後,加少量中性氧化鎂拌樣,揮幹溶劑,幹法上氧化鎂柱,石油醚-丙酮17: 3、9:3、5:3混合溶劑梯度洗脫,收集洗脫液減壓濃縮得粗提物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按4:7:5:3混合,混合充分分層後,取上相注滿高速逆流色譜柱,同時開轉主機SOOrpm,泵入下相做流動相,待系統平衡後,流速調節為2ml/min,同時用固定相溶解粗提物,由進樣閥進樣,紫外檢測器監測,收集目標流分,連續製備,冷藏流分,得結晶物,經HPLC檢測,純度
98.1%。
權利要求
1.一種樟皮鹼B的製備方法,其特徵在於以下步驟 a.取紅楠的樹皮粉碎,加入超臨界萃取釜中,95%乙醇溶液為夾帶劑,在萃取壓力20-32MPa、溫度45_60°C的條件下,通入液態CO2萃取50_90min,在壓力7_9MPa,溫度30-40°C解析得萃取物; b.上述萃取物用甲醇溶解,加少量中性氧化鎂拌樣,揮幹溶劑,幹法上氧化鎂柱,石油醚-丙酮混合溶劑梯度洗脫,收集洗脫液減壓濃縮得粗提物; c.上述粗提物採用高速逆流色譜分離,紫外檢測器監測,收集目標成分,冷藏結晶,得樟皮鹼B。
2.據權利要求I所述樟皮鹼B的製備方法,其特徵在於步驟a中所述CCV流量為3-5ml/g生藥/min,夾帶劑用量為總萃取溶劑的12-18%。
3.根據權利要求I所述樟皮鹼B的製備方法,其特徵在於步驟b中所述中性氧化鎂為200-300目,石油醚-丙酮體積比為20-5:3。
4.根據權利要求I所述樟皮鹼B的製備方法,其特徵在於步驟c中所述高速逆流色譜的溶劑系統為正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水組合,比例為4-7:7-9:3-5:3-5,下相為流動相, 上相為固定相。
全文摘要
本發明公開了一種樟皮鹼B的製備方法。方法步驟如下a.取紅楠的樹皮粉碎,加入超臨界萃取釜中,乙醇為夾帶劑進行超臨界CO2萃取;b.萃取物採用中性氧化鎂柱層析進行純化,石油醚-丙酮混合溶劑梯度洗脫,收集洗脫液減壓濃縮得粗提物;c.粗提物採用高速逆流色譜分離,紫外檢測器監測,收集目標成分,冷藏結晶,得樟皮鹼B。採用本發明製備樟皮鹼B,工藝簡單、效率高,所得產品含量高,適合工業化生產。
文檔編號C07D307/12GK102827107SQ20121037188
公開日2012年12月19日 申請日期2012年9月29日 優先權日2012年9月29日
發明者劉東鋒, 萬冬梅 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司