用於非空腹的ldl膽固醇檢測的體系和方法

2023-12-10 07:48:17 2

用於非空腹的ldl膽固醇檢測的體系和方法
【專利摘要】在一個實施方案中，用於測試全血中膽固醇-相關的血液分析物的測試條包括紅細胞分離層，其中當施加至所述測試條的血樣向下流經所述紅細胞分離層時，所述紅細胞分離層從所述血樣分離紅細胞。測試條還包括從紅細胞分離層接收血樣的反應層，反應層包括POE-POP-POE嵌段共聚物、表面活性劑和反射率變化反應物，POE-POP-POE嵌段共聚物基本上僅溶解非-LDL膽固醇分析物，非-LDL膽固醇分析物與反射率變化反應物反應以改變血樣的反射率。
【專利說明】用於非空腹的LDL膽固醇檢測的體系和方法
【背景技術】
[0001]低密度脂蛋白(LDL)膽固醇的檢測在健康，特別是心血管健康中是重要的健康度量。希望具有用於LDL的快速的現場檢測體系，其不需要實驗室或其他設施。以該方式，健康專業人員可在取樣之後立即告知病患，而不必為了從實驗室返回的測試結果等待數日。以該方式，病患的病歷和狀況將被即刻記憶在其腦海中，並因此對病患的健康產生更好的結果和分析。
[0002]目前有5種已知的方法在臨床化學分析儀上以溼法化學用於定量低密度脂蛋白(LDL)膽固醇。所述方法中的4種是兩步反應，其中第一反應物與所有的非-LDL(HDL和VLDL)反應而產生無色的產物。一旦第一步反應完成，利用在預設時間下加入另一試劑來定量剩餘的LDL。這些方法與測試條技術不相容，這是因為不能在所需的關鍵時刻可靠地引入多種試劑。由Kyowa-Medex製造的最後一種方法據稱具有這樣的方法,其中通過糖化合物(環糊精)掩蔽HDL和VLDL，而LDL選擇性地與特定的表面活性劑和酶膠體化。最重要地，該方法據稱在一個反應中進行，這與測試條化學互補。

【發明內容】

[0003]在一個實施方案中，用於測量全血中膽固醇-相關的血液分析物的測試條包括紅細胞分離層，其中當施加至所述測試條的血樣向下流經所述紅細胞分離層時，所述紅細胞分離層從所述血樣分離紅細胞。測試條還包括從紅細胞分離層接收血樣的反應層，反應層包括P0E-P0P-P0E嵌段共聚物、表面活性劑和反射率變化反應物，P0E-P0P-P0E嵌段共聚物基本上僅溶解非-LDL膽固醇分析物，非-LDL膽固醇分析物與反射率變化反應物反應以改變血樣的反射率。可選地，測試條包括鋪展層，其定位於紅細胞分離層的頂部。在一個可選方案中，P0E-P0P-P0E嵌段共聚物選自以下組中:Pluronics L101:MW3800，P0E7-P0P54-P0E7 ；Pluronics L121:MW4400, P0E5-P0P68-P0E5 ；Pluronics P123:MW5750,POE20-POP70-POE20 ;和 Pluronics F127:MW12600 ；POE106-POP70-POE106? 可選地，表面活性劑是Triton-X。測試條還可包括與紅細胞分離層相鄰的第二血液分離層，第二血液分離層從血樣分離另外的紅細胞。任選地，第二血液分離層還包含硫酸葡聚糖。可選地，硫酸葡聚糖的分子量為10K-1000K之間。可選地，可以相似的量使用氯化鎂(或鎂離子)。在另一可選方案中，硫酸葡聚糖的分子量為50K-750K之間之間。任選地，硫酸葡聚糖的分子量為500K。可選地，P0E-P0P-P0E 嵌段共聚物是 Pluronics P123:MW5750, POE20-POP70-POE200 任選地，POe20-POP70-POe20嵌段共聚物與Triton-X之比為10份POE2q-POP7q-POE2q嵌段共聚物比I份Triton-X。在一個可選方案中，Triton-X的濃度為至少0.01%。在另一個可選方案中，Triton-X為至少0.1%。在又一個可選方案中，P0E-P0P-P0E嵌段共聚物的濃度為至少1%。任選地，P0E-P0P-P0E嵌段共聚 物的濃度為至少2%。可選地，P0E-P0P-P0E嵌段共聚物的濃度為至少3%。任選地，反應層的pH為至少5.4。可選地，反應層的pH為至少6.8。在另一個可選方案中，反應層的pH為至少7.4。任選地，反應層的pH為6.8。可選地，血液分離層包括浸潰有菜豆(Phaselous vulgaris) (PHA-P)凝集素的D_23硼娃酸鹽玻璃纖維。[0004]在一個實施方案中，使用幹相測試條測定全血樣品中非-LDL膽固醇的濃度的方法包括使全血樣品接觸測試條的血液分離層。所述方法還包括從全血樣品分離血細胞，產生血漿，並使血漿流經血液分離層至測試層。所述方法還包括使非-LDL部分優先於LDL部分反應，並在測試層中產生基本上正比於樣品中非-LDL部分的濃度的顏色。所述方法還包括測試所產生的顏色。
[0005]在另一個實施方案中，用於測定全血樣品中LDL膽固醇的濃度的測試條包括具有至少兩個堆疊物的測試基體(條)，至少兩個堆疊物的第一堆疊物用於總膽固醇，並且至少兩個堆疊物的第二堆疊物用於非-LDL。第一堆疊物中包含有產生正比於樣品中的總膽固醇量的比色響應的試劑。第二堆疊物中包含有產生正比於樣品中的非-LDL膽固醇的量的比色響應的試劑。測試條構造為可通過測試計讀取，測試計從第二堆疊物得到非-LDL膽固醇值，並從第一堆疊物得到的總膽固醇值減去非-LDL膽固醇值以得到樣品中的LDL膽固醇值。
[0006]在另一個實施方案中，用於測定全血樣品中的LDL膽固醇濃度的測試條和測試計的組合包括測試條。測試條包括測試基體(條)，其具有至少兩個堆疊物，至少兩個堆疊物的第一堆疊物用於總膽固醇，並且至少兩個堆疊物的第二堆疊物用於非-LDL。第一堆疊物中包含有產生正比於樣品中的總膽固醇量的比色響應的試劑。第二堆疊物中包含有試劑以產生正比於樣品中的非-LDL膽固醇的量的比色響應的試劑。該組合包括測試計，其構造為讀取測試條。測試計構造為從第二堆疊物得到非-LDL膽固醇值，並從第一堆疊物得到的總膽固醇值減去肖_ -LDL膽固醇值而得到樣品中的LDL膽固醇值。
[0007]在另一個實施方案中，從提供血樣的人對象測試LDL膽固醇的方法包括提供幹測試條和在幹測試條處接收血樣。所述方法包括在幹測試條的第一層中從血樣分離紅細胞，以及在反應層中使血樣中的非-LDL膽固醇反應。所述方法包括產生正比於非-LDL膽固醇的顏色變化，以及測試該顏色變化以測定血樣中的非-LDL膽固醇量。所述方法包括從血樣中的總膽固醇量減去非-LDL膽固醇量而得到此血樣的LDL膽固醇量。任選地，血樣來自於未經禁食的個體，並且所得的LDL膽固醇量比Friedwald公式更精確。可選地，用以確定非-LDL膽固醇的曲線斜率在0.90-1.10之間。任選地，VLDL膽固醇不作為LDL膽固醇測定。可選地，反應層包括P0E-P0P-P0E嵌段共聚物、表面活性劑和反射率變化反應物，其中反應包括基本上僅溶解非-LDL膽固醇分析物，非-LDL膽固醇分析物與反射率變化反應物反應以改變血樣的反射率。可選地，P0E-P0P-P0E嵌段共聚物選自以下組中=PluronicsL101:MW3800，P0E7-P0P54-P0E7 ；Pluronics L121:MW4400, P0E5-P0P68-P0E5 ；PluronicsP123:MW5750，POE2q-POP7q-POE2q ;和 Pluronics F127:MW12600 ;P0E1(l6-P0P7(l-P0E1(l6。在一個可選方案中，表面活性劑是Triton-X。任選地，所述方法包括將血樣用鋪展層鋪展，所述鋪展層定位於為第一層的頂部。在一個可選方案中，所述方法還包括在總膽固醇反應層使血樣反應，所述總膽固醇反應層被定位以接收來自鋪展層的部分血樣；產生正比於總膽固醇的顏色變化；和測試顏色變化以確定血樣中的總膽固醇量。任選地，測試條包括與紅細胞分離層相鄰的第二血液分離層，第二血液分離層從血樣分離另外的紅細胞，其中第二血液分離層還包含硫酸葡聚糖。可選地，第一層包含浸潰有菜豆(PHA-P)凝集素的D-23硼矽酸鹽玻璃纖維。【專利附圖】

【附圖說明】
[0008]圖1a和Ib顯示了在臨床化學分析儀(例如Roche Cobas Integra400+)上對於利用Pluronics L121和Triton X-100的兩個試劑體系收集的反應動力學數據以驗證對於非-LDL膽固醇的選擇性；
[0009]圖2a和2b顯示了在具有和不具有Triton X和Pluronics P123的基於試劑的體系中反應的HDL和LDL部分(動力學)的對比；
[0010]圖3a顯示對於反射率％(%R)和試驗測試(P123和Triton-X)而言的反應動力學；
[0011]圖3b顯示使用圖3a的Kubelka-Munk公式的％R圖的線性；
[0012]圖4a_4b顯示對於使用兩個不同血液供體測試的條的K/S而言的動力學圖，條件I是使用Triton X-100的對照，而條件2是包含P123和Trition X-100的試驗測試條；
[0013]圖5a_5h顯示了使用P123和Triton X-100的測試圖，其僅顯示出與多種分析物的相關性；
[0014]圖6顯示P123和Triton X-100的混合物的非溶血性質；
[0015]圖7顯示目前的Polymer Technology Systems, Inc.(PTS)的對照測試，其反應層包含 2% 的 P123 和 0.1% 的 Triton X-100 ;和
[0016]圖8a_8d顯示對於多種的硫酸葡聚糖組合的濃度測試。
【具體實施方式】
[0017]特定術語在本文中僅出於便利使用，並且不作為對於非-空腹的LDL測試條的實施方案的限制。在附圖中，相同的附圖標記用於指示多個附圖中的相同要素。
[0018]詞語「右」、「左」、「前」和「後」指示附圖中標記的方向。詞語「向內」和「向外」分別是朝向和遠離非空腹的LDL測試條及其指示部分的幾何中心的方向。術語包括以上特別述及的詞語、其衍生詞和相似意義的詞語。附圖是按比例的。
[0019]在不同的視角下並特別參照如下描繪的各附圖，相似的附圖標記指示相似或相應的部分。
[0020]簡言之，已產生非空腹的LDL測試，其中使所有的非-LDL反應並測試，然後將其從總膽固醇量中減去，以確定LDL濃度。該測試基於提供溶解所有的膽固醇而非-LDL的化學品以用於測試。在一些實施方案中，該化學品包括Triton X-100和Pluronics P123。在一些實施方案中，包括初始不完全的沉澱步驟以改進所得LDL的去除。在一些實施方案中，提供此初始的不完全沉澱，並為了增強Triton X-100和Pluronics P123的選擇性，此初始的不完全沉澱包括另外加入硫酸葡聚糖/Mg+2，其帶來10%以內的測試偏差。測試是指非空腹的，因為該測試足夠特異而使其精確性不會受到乳糜微粒存在的不利影響。在該實施方案中，在不使用標準超速離心下測試分離脂蛋白密度類別的能力是獨特的，這是由於除了 LDL之外的密度不同的脂蛋白顆粒的選擇性溶解。
[0021]如上所述，希望有直接的LDL測試技術，其不依賴於從總膽固醇的預測性計算。由於希望有這樣的測試， 申請人:分析了 Kyowa-Medex的專利。Kyowa-Medex專利(US6, 794, 157B1)的作者Hirochi Sugiuchi描述了聚氧乙烯-聚氧丙烯(P0E-P0P)三嵌段共聚物一Pluronics L121作為關鍵組分用於在基於兩個試劑的水性體系(「溼法化學」)直接測試LDL,其適用於Roche的臨床化學分析儀,例如Integra917, Modula P和CobasIntegra400+o溼法化學體系根據幹測試條體系而顯著變化，因為在溼法化學體系中，反應物可在特定時間下加入，並因此可精細地控制時機。此外，在溼法化學體系中，相對於幹測試條，所有反應物傾向於移動並具有活性，由於降解和其他移動問題，這要求更高濃度的反應物。對該組分的研究證實對於它對LDL本身不具有選擇性。該專利簡單地提及使用多種助表面活性劑(其一個實例是使用Emulgen L40)、a -磺化環糊精和酶，這使得初步認為它們在反應中起相對次要的作用。但是，對於在如Sugiuchi的兩個試劑形式中的LDL選擇性，在未成功篩選Pluronics L121後，開始明白這些添加劑比之前想像的更關鍵。此外，發現Emulgen L40 (由Kao Corporation生產)不是市售可得的；並且我們相信Kyowa-Medex對於該助表面活性劑具有專有權。本 申請人:已重複且徹底測試美國專利6，794，157B1中概述的方法；但是，相信專有的方法和反應物未公開或不是公眾可得的。
[0022]在如上所述地對所涵蓋的許多表面活性劑、酶和糖化合物進行深入研究和篩選嘗試之後，開始明白Kyowa-Medex專利是不易於重現的。一些專有方法是例外性的，其阻礙了產生另一成功的單步驟的LDL測試。但是，在臨床化學分析儀上觀察基於兩種試劑的體系中，已知不區別測試條脂蛋白的一些Pluronics L121和Triton X-100的組合產生有趣的結果。
[0023]在嘗試鑑定對LDL的選擇測試中(其導致幹測試條)，進行更基礎的方法以完全理解L121和Triton X-100的作用。初始採用相似的基於兩個試劑(「溼法化學」)方法。如從以下的反應動力學可見(圖1a和Ib ;在臨床化學分析儀上收集數據)，HDL (趨勢線100)以比LDL部分(趨勢線110)以更快的速率反應。在這些圖中，在點120添加樣品。該結果是非常不可預期的，因為Triton X-100傳統上被用作常規表面活性劑以溶解所有的脂蛋白，並主要用作總膽固醇測試中所選擇的表面活性劑。因此，已知溶解所有脂蛋白的化合物與被認為僅溶解LDL的化合物的組合實際上產生溶解所有非-LDL的結果。圖1a(HDL)和圖1b(LDL)顯示與酶/MAOS N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3，5-二甲基苯胺/4AAP (pH6.8)的鈉鹽溶液組合而得到最終的表面活性劑溶液0.25%TX100/0.5%L121的TX100/L121溶液的吸光率對時間的圖。然後該試劑在標記120處與樣品組合，並在設定的時間間隔下進行測試，直至反應結束。應注意，所使用的Triton-X的量比常規用以溶解所有脂蛋白的量少得多。簡言之，在按照美國專利6，794，157B1重複LDL測試，並實現直接的LDL測試的嘗試中，得到非常不同的結果。按照表I中列出的專利實施例，作者採用0.2%Pluronic L121和0.l%Emulgen911以實現高的LDL對HDL的選擇性。但是，在我們的實驗室中重複相同的濃度時，我們發現高的HDL對LDL的選擇性，這與美國專利6，794，157B1的主張相反。滴定不同的Emulgen911和L121的組合僅給出相同的選擇性(高HDL:LDL)，並且有時相反無選擇性。該選擇性的逆轉促進了使用TX-100和其他的辛基酚和壬基酚的測試。
[0024]初始時認為這將導致可僅反應LDL的測試。但相反地,測試結果顯示反應所有組分而非-LDL的測試的可能性。雖然這與初始希望的反應相反，但是已確定使所有的非-LDL反應，並從已知的總膽固醇值減去該值的測試。雖然不是直接的，但是該方法仍然比Friedwald公式具有多個益處。Friedwald公式最大的不足在於VLDL預計假定為三甘油酯濃度的1/5。對於許多人來說並不如此，並且Friedwald公式通常低估對於未經禁食的個體的LDL。這些問題將通過測試非-LDL (HDL+VLDL+CM)解決，其給出與直接LDL測試相同的LDL 值。[0025]當用Triton X-100溶解時，Pluronics L121證實了出人意料的HDL選擇性。因此，總結出Triton X-100和POEx-POPy-POEx的組合可得到對於HDL和對所有的非-LDL的高特異性。嘗試不同的Pluixmics系列以嘗試提高該選擇性被認為是值得的試驗。在一些實施方案中，任選使用不同的Pluronics,其包括但不限於:
[0026]? Pluronics LlOl:MW3800, P0E7-P0P54-P0E7 ;
[0027]? Pluronics L121:MW4400, P0E5-P0P68-P0E5 ；
[0028]? Pluronics P123:MW5750, POE2q-POP7q-POE20 ;
[0029]? Pluronics F127:MWl2600, POEiq6-POP7q-POE106。
[0030]通過組合在MOPS緩衝劑中的0.7ku的膽固醇酯酶、0.5ku的膽固醇氧化酶、12ku的辣根過氧化物酶與0.58mM4-氨基安替比林和2.9mM MAOS、其後是以下濃度的Pluronics (P123)和Triton X-100混合物來製備試劑。該試劑在自動化的臨床化學分析儀(即Roche的Cobas Integra400+)上測試以確定選擇性。下表顯示其選擇性。在P123:Triton X-100為10:1時觀察到~15:1HDL:LDL的最高選擇性。圖2a和2b中所示的是在與圖1a和Ib條件相似且終表面活性劑濃縮物由0.01%P123/0.0005%TX100組成下反應的HDL和LDL部分的對比。第28次循環，標記22表示在加入樣品後約2分鐘的反應，其表示對於測試條讀數器如Cardiochek測試可能的時間限制。圖2a顯示P123與TritonX-100的組合，其顯示HDL趨勢線205、LDL趨勢線215和VLDL趨勢線210。圖2b顯示僅有P123而無Triton X-100的條件，其顯示HDL趨勢線240、LDL趨勢線250和VLDL趨勢線245。這清楚地表明對HDL的選擇性超過LDL。
[0031]表1:P123和Triton X-100的選擇性和濃度
[0032]
【權利要求】
1.用於測試全血中的膽固醇相關的血液分析物的測試條，所述測試條包括: 紅細胞分離層，其中當施加至所述測試條的血樣向下流經所述紅細胞分離層時，所述紅細胞分離層從所述血樣分離紅細胞；和 反應層，其中所述反應層從所述紅細胞分離層接收所述血樣，所述反應層包括POE-POP-POE嵌段共聚物、表面活性劑和反射率變化反應物，所述P0E-P0P-P0E嵌段共聚物基本上僅溶解非-LDL膽固醇分析物，所述非-LDL膽固醇分析物與所述反射率變化反應物反應以改變所述血樣的反射率。
2.權利要求1的測試條，其還包括鋪展層，所述鋪展層定位於所述紅細胞分離層的頂部。
3.權利要求1的測試條，其中所述P0E-P0P-P0E嵌段共聚物選自以下組中:PluronicsL101:MW3800，P0E7-P0P54-P0E7 ；Pluronics L121:MW4400, P0E5-P0P68-P0E5 ；PluronicsP123:MW5750, POE20-POP70-POE20 ;和 Pluronics F127:MW12600 ;P0E1(l6-P0P7(l-P0E1(l6。
4.權利要求3的測試條，其中所述表面活性劑是Triton-X。
5.權利要求4的測試條，其還包括與所述紅細胞分離層相鄰的第二血液分離層，所述第二血液分離層從所述血樣分離另外的紅細胞。
6.權利要求5的測試條，其中所述第二血液分離層還包含硫酸葡聚糖。
7.權利要求6的測試條，其中所述硫酸葡聚糖的分子量為10K-1000K。
8.權利要求6的測試條，其中所述硫酸葡聚糖的分子量為50K-750K。`
9.權利要求6的測試條，其中所述硫酸葡聚糖的分子量為500K。
10.權利要求4的測試條，其中所述P0E-P0P-P0E嵌段共聚物是PluronicsP123:MW5750 ;POE2c1-POP7c1-POE20。
11.權利要求10的測試條，其中POE2q-POP7q-POE2q嵌段共聚物與Triton-X之比為10份 POE2q-POP7q-POE2q 嵌段共聚物比 I 份 Triton-X。
12.權利要求11的測試條，其中所述Triton-X的濃度為至少0.01%。
13.權利要求11的測試條，其中所述Triton-X為至少0.1%。
14.權利要求11的測試條，其中所述P0E-P0P-P0E嵌段共聚物的濃度為至少1%。
15.權利要求11的測試條，其中所述P0E-P0P-P0E嵌段共聚物的濃度為至少2%。
16.權利要求11的測試條，其中所述P0E-P0P-P0E嵌段共聚物的濃度為至少3%。
17.權利要求11的測試條，其中所述反應層的pH為至少5.4。
18.權利要求11的測試條，其中所述反應層的pH為至少6.8。
19.權利要求11的測試條，其中所述反應層的pH為至少7.4。
20.權利要求11的測試條，其中所述反應層的pH為6.8。
21.權利要求1的測試條，其中所述血液分離層包括浸潰有菜豆(PHA-P)凝集素的D-23硼矽酸鹽玻璃纖維。
22.使用幹相測試條測定全血樣品中的非-LDL膽固醇的濃度的方法，所述方法包括: 使所述全血樣品接觸所述測試條的血液分離層； 從所述全血樣品分離血細胞,產生血漿； 使所述血漿流經所述血液分離層至測試層； 使非-LDL部分優先於LDL部分反應；在所述測試層中產生基本上正比於所述樣品中非-LDL部分的濃度的顏色；和 測量所產生的顏色。
23.用於測定全血樣品中LDL膽固醇的濃度的測試條，其包括: 測試基體(條)，其具有至少兩個堆疊物，所述至少兩個堆疊物的第一堆疊物用於總膽固醇，並且所述至少兩個堆疊物的第二堆疊物用於非-LDL ； 所述第一堆疊物中包含產生正比於所述樣品中總膽固醇量的比色響應的試劑；和所述第二堆疊物中包含產生正比於所述樣品中非-LDL膽固醇量的比色響應的試劑，所述測試條構造為能通過測試計讀取，所述測試計從所述第二堆疊物獲得非-LDL膽固醇值，並將所述非-LDL膽固醇值從由所述第一堆疊物獲得的總膽固醇值中減去，以得到所述樣品中的LDL膽固醇值。
24.用於測定全血樣品中的LDL膽固醇濃度的測試條和測試計的組合，其包括: 測試條，其包括: 測試基體(條)，其具有至少兩個堆疊物，所述至少兩個堆疊物的第一堆疊物用於總膽固醇，並且所述至少兩個堆疊物的第二堆疊物用於非-LDL ； 所述第一堆疊物中包含產生正比於所述樣品中總膽固醇量的比色響應的試劑；和所述第二堆疊物中包含產生正比於所述樣品中非-LDL膽固醇量的比色響應的試劑；測試計，其構造為能讀取所述測試條，所述測試計從所述第二堆疊物獲得非-LDL膽固醇值，並將所述非-LDL膽固醇值從由所述第一堆疊物獲得的總膽固醇值中減去，以得到所述樣品中的LDL膽固醇值。
25.從提供血樣的人對象測量LDL膽固醇的方法，所述方法包括: 提供幹測試條； 在所述幹測試條處接收所述血樣； 在所述幹測試條的第一層中從所述血樣分離紅細胞； 在反應層中使所述血樣中的非-LDL膽固醇反應； 產生正比於所述非-LDL膽固醇的顏色變化； 測量所述顏色變化以測定所述血樣中的非-LDL膽固醇量；和 將所述非-LDL膽固醇量從所述血樣中的總膽固醇量中減去，以得到所述血樣中的LDL膽固醇量。
26.權利要求25的方法，其中所述血樣來自於未經禁食的個體,並且所得的LDL膽固醇量比Friedwald公式更精確。
27.權利要求26的方法，其中LDL膽固醇的最終斜率為0.90-1.10。
28.權利要求26的方法，其中VLDL膽固醇不作為LDL膽固醇測定。
29.權利要求25的方法，其中所述反應層包括POE-POP-POE嵌段共聚物、表面活性劑和反射率變化反應物，其中所述反應包括基本上僅溶解來自非-LDL分析物的膽固醇,所述來自非-LDL分析物的膽固醇與所述反射率變化反應物反應以改變所述血樣的反射率。
30.權利要求29的方法，其中所述P0E-P0P-P0E嵌段共聚物選自以下組中:PluronicsL101:MW3800, P0E7-P0P54-P0E7 ；Pluronics L121:MW4400, P0E5-P0P68-P0E5 ；PluronicsP123:MW5750, POE20-POP70-POE20 ;和 Pluronics F127:MW12600 ;P0E1(l6-P0P7(l-P0E1(l6。
31.權利要求29的方法，其中所述表面活性劑是Triton-X。
32.權利要求25的方法，其還包括: 將所述血樣用鋪展層鋪展，所述鋪展層定位於所述第一層的頂部。
33.權利要求32的方法，其還包括: 使所述血樣在總膽固醇反應層中反應，所述總膽固醇反應層被定位以接收來自所述鋪展層的部分血樣； 產生正比於總膽固醇的顏色變化；和 測試顏色變化以確定所述血樣中的總膽固醇量。
34.權利要求25的方法，其中所述測試條包括與所述紅細胞分離層相鄰的第二血液分離層，所述第二血液分離層從所述血樣分離另外的紅細胞，其中所述第二血液分離層還包含硫酸葡聚糖。
35.權利要求25的方法，其中所述第一層包含浸潰有菜豆(PHA-P)凝集素的D-23硼矽酸鹽 玻璃纖維。
【文檔編號】G01N33/92GK103562726SQ201380000791
【公開日】2014年2月5日 申請日期:2013年5月1日 優先權日:2012年5月4日
【發明者】T·瑞利, A·帕特瓦爾丹, F·拉杜卡 申請人:聚合物技術系統公司