一種檢測陰道中念珠菌的方法
2023-11-09 15:24:37
專利名稱：一種檢測陰道中念珠菌的方法
技術領域：
本發明涉及一種檢測真菌的方法，尤其涉及一種檢測陰道中念珠菌的方法。
背景技術：
人類生殖器的皮膚和黏膜被念珠菌感染並出現臨床症狀稱為生殖器念珠菌病，包括念珠菌性陰道炎和龜頭炎。念珠菌性陰道炎的診斷是根據病人自訴症狀、醫師體查症狀和實驗室檢測。念珠菌性陰道炎的實驗室檢測方法有直接鏡檢(檢出率低於50％)、染色檢測(檢出率低於80％)、培養(檢出率接近100％，時間長)、分子生物學檢測(未成熟)和乳膠凝集試驗(液相，靈敏度低)，用抗體致敏的乳膠與念珠菌細胞壁上的多種可溶性抗原反應(檢出率低於72％)。這些檢測方法有的檢出率較低或技術未成熟，沒有什麼實用價值；而有的檢出率雖然很高，如培養檢測法，但檢測時間很長，需24～72小時，且操作過程很麻煩；還有的檢測試劑不易保存，如凝集試驗，它採用液相抗體，不顯色，不利於肉眼觀察。
發明內容
本發明的目的就是為了克服上述現有技術存在的缺陷而提供一種快速、簡便、檢出率較高的檢測陰道中念珠菌的方法。
本發明的目的可以通過以下技術方案來實現一種檢測陰道中念珠菌的方法，其特徵在於，包括以下工藝步驟第一步，製備液相抗體，用念珠菌免疫動物獲得血清，經純化得到抗體，並配製在生理鹽水溶液中；第二步，製備陰性對照，用未免疫的正常動物血清，配製在生理鹽水溶液中；第三步，固相化，將第一步、第二步製得的液相抗體溶液和陰性對照溶液，在常溫下加入含聚乙二醇介質的溶液固化劑，並將液相抗體和陰性對照固化在凝集試驗卡片或玻片上；第四步，檢測，在常溫條件下滴加含念珠菌的樣本到上述凝集試驗卡片或玻片上，5分鐘內固相抗體被液化，再經過5分鐘出現肉眼可見的、顯色的凝集反應。
與現有技術相比，本發明為一種可逆固相抗體快速凝集檢測法，其對陰道中念珠菌的檢出率達91％，比直接鏡檢和染色檢出率高；比培養方法(需24-72小時)大大節省時間；比乳膠凝集更易觀察、靈敏度高，而且固相抗體穩定性好，保存期長，有利於醫療實踐。如轉化成商品，並積極推廣應用，有很大的潛在市場，可產生明顯的效益。
具體實施例方式
下面結合實施例，對本發明作進一步說明。
一種檢測陰道中念珠菌的方法，它包括試劑準備及真菌檢測兩個階段，第一階段為試劑準備階段，首先檢測人員用念珠菌免疫動物獲得血清，經純化得到抗體，並配製在生理鹽水溶液中製得液相抗體，然後用未免疫的正常動物血清，配製在生理鹽水溶液中製得陰性對照，再將上述製得的液相抗體溶液和陰性對照溶液，在常溫下加入含聚乙二醇介質的溶液固化劑，並將液相抗體和陰性對照固化在凝集試驗卡片或玻片上；第二階段為真菌檢測階段，首先檢測人員使用專用的無菌棉拭子取病人陰道分泌物，然後用配套的緩衝液混勻5分鐘得樣本，並滴加在上述含固相抗體和陰性對照的凝集試驗卡片上，常溫條件下5分鐘內固相抗體被液化，再經5分鐘，在反應的凝集試驗卡片上出現肉眼可見的、顯色的凝集顆粒。
採用本發明檢測陰道中念珠菌，不需任何試驗設備和器材，整個試驗方法簡便、敏感性高，檢測過程只需15分鐘。
權利要求
1.一種檢測陰道中念珠菌的方法，其特徵在於，包括以下工藝步驟第一步，製備液相抗體，用念珠菌免疫動物獲得血清，經純化得到抗體，並配製在生理鹽水溶液中；第二步，製備陰性對照，用未免疫的正常動物血清，配製在生理鹽水溶液中；第三步，固相化，將第一步、第二步製得的液相抗體溶液和陰性對照溶液，在常溫下加入含聚乙二醇介質的溶液固化劑，並將液相抗體和陰性對照固化在凝集試驗卡片或玻片上；第四步，檢測，在常溫條件下滴加含念珠菌的樣本到上述凝集試驗卡片或玻片上，5分鐘內固相抗體被液化，再經過5分鐘出現肉眼可見的、顯色的凝集反應。
全文摘要
本發明涉及一種檢測陰道中念珠菌的方法，包括製備液相抗體和陰性對照、將液相抗體陰性對照固相化、進行真菌檢測等工藝步驟，與現有技術相比，本發明具有快速簡便、檢出率高、易於觀察等優點。
文檔編號G01N33/571GK1427259SQ01139149
公開日2003年7月2日 申請日期2001年12月21日 優先權日2001年12月21日
發明者葉元康 申請人:上海耶華科技有限公司