雙聯雙重定位式胞內疫苗的製作方法
2023-12-04 18:59:51 1
專利名稱：雙聯雙重定位式胞內疫苗的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種能將消滅T4細胞內的愛滋病毒(HIV)的阻遏蛋白及其它核苷與非核苷類似物等藥物準確定位於T4細胞，並將其轉運到人體淋巴細胞T4細胞的細胞質與細胞核內的抗愛滋病(AIDS)的雙聯雙重定位式胞內疫苗。
經計算機檢索，還沒發現國內外目前有這種新型疫苗。
本發明的目的，是為了克服目前治療愛滋病的兩大基本方法的重大缺陷而設計的。這兩大基本方法，一是藥物治療法，例如「雞尾酒療法」，另一個則是疫苗法，例如，目前研製的各類抗愛滋病疫苗。
對於目前的疫苗法來說，它們只能作用於被感染的T4細胞的外部的病毒，或通過識別被感染的T4細胞來消滅愛滋病毒，但卻因為愛滋病毒的gp120表面抗原的迅速多變而失效。而對於藥物療法來說，雖然目前聯合應用藥物來治療愛滋病，已取得重大療效，但由於它們不能殺死全部隱藏在T4細胞內的愛滋病毒，以及愛滋病毒對藥物產生了抗藥性，特別由於它們是一種非定位作用於T4細胞，而是作用於全身的、需要大量口服的藥物，不僅有嚴重的副作用，而且因服用藥量過大而價格昂貴，因而很難使廣大的愛滋病患者得以使用，從而獲得治療。
為了克服上述兩類治療愛滋病方法的缺陷，本專利獨創性地設計了一種抗愛滋病的雙聯雙重定位式胞內疫苗。它不僅可以將抗愛滋病的藥物，例如，抗逆轉錄病毒的AZT(疊氮胸腺嘧啶核苷)，以及可阻遏病毒逆轉錄酶的藥物，專一地、定位地作用於T4細胞的細胞質內(其中包括未感染的T4細胞而起到預防感染的作用)，而且還可以將它們定位地作用於T4細胞核內，已被整合在宿主DNA上的愛滋病毒的DNA中的可轉錄病毒逆轉錄酶的基因上，使抗體蛋白，例如，能夠阻遏可產生病毒RnaseH，這種部分逆轉酶的基因的抗體蛋白，可稱為抗體蛋白I號，使其永久不能再轉錄複製這種逆轉錄酶，從而達到徹底殺死愛滋病毒的目的。
其它的抗體蛋白藥物，例如可阻遏tat的基因，使其失去促使病毒mRNA產生的功能，可稱為抗體II號，也同樣具有這樣的效應。
這種新型疫苗的基本特徵在於它是由兩種疫苗混合而成的，一種是負責將抗愛滋病毒的藥物轉運至T4細胞的細胞質之中，可稱為A型疫苗；另一種是可將能阻遏愛滋病毒DNA轉錄複製逆轉錄酶的基因的抗體蛋白，例如抗體I號或抗體II號，轉運到T4細胞核內的疫苗，可稱為B型疫苗。因此，就稱它們為「混合型雙聯疫苗」。其中，由於B型疫苗必須將抗體，例如抗體I號或II號轉運至T4細胞核內，它不僅得與可轉運至細胞質內的轉讓蛋白相結合，而且還得與能帶領它們進入T4細胞核的核定位順序的胺基酸短肽，這一轉運蛋白相結合，因此稱它為「雙重疫苗」。這就是本專利稱為「雙聯雙重定位式胞內疫苗」的根本原因。
A型疫苗的製作，是將可作用於T4細胞質內愛滋病毒的逆轉錄酸酶及其輔酶的藥物與gp120蛋白的相結合，以達到將它們轉運至T4細胞質內的目的。眾所周知，gp120蛋白是愛滋病毒自身所攜帶的外殼蛋白的一種。它可以有針對性地、專一地定位作用於T4細胞，而將愛滋病毒的RNA及其逆轉錄酶和其它輔酶帶入T細胞的細胞質之中。
A型疫苗採用gp120蛋白作為一種針對T細胞的轉運蛋白，實質上是一種「以其人之道，還治其人之身」的辦法，或者說「以毒攻毒」的辦法，即利用gp120蛋白可攜帶病毒的其它蛋白酶和RPNA進入T4細胞的細胞質內的特性，而將抗愛滋病毒逆轉錄酶的藥物也同樣應用gp120轉運到T4細胞質內。當然，其間可能還需要一種變構酶或輔酶的幫助，才得使它們相結合，但這從技術上來說，並不是特別困難的問題。
因此，這種A型疫苗實質上是一種兩區性分子，可被裂為二個區段一個區段是gp120蛋白，可與T細胞的表面受體相結合，而將第二區段的抗病毒逆錄酶藥物轉運到T4細胞質內。這種兩區性分子與白喉毒素很相似。實際上也是受白喉毒素蛋白構成的啟發而設計的。由於愛滋病毒的逆轉錄酶是穩定的，不象gp120蛋白那樣迅速多變，因此，抗逆轉錄酶藥物一旦進入T4細胞質內抗逆轉錄酶的藥物(可以是一種，也可以是多種藥物的聯合)，就能立即消滅存在於T4細胞質內的全部愛滋病毒的逆轉錄酶及其輔酶。與此同時，這種約物也可以提前進入未受感染的T4細胞內，從而達到預防感染的目的。因此這種疫苗可以達到百分之百消滅T4細胞質內愛滋病毒的目的。
但是，為了更徹底地消滅已整合到T4細胞DNA上的愛滋病毒，使其沒有機會再度複製，因此，還必須使用另一種抗愛滋病毒疫苗B型疫苗。
B型疫苗實質上是一種三區性分子。它的第一區段仍然是gp120蛋白，它的第二區段則是可阻遏病毒DNA逆轉錄基因的抗體蛋白，例如抗體蛋白I號。它的第三區段分子，則是一個與抗體蛋白相連接的核定位順序。此順序含有5個連續的帶正電荷的殘基—脯—賴—賴—賴—精—賴—纈。這一短肽順序的指令可使抗體蛋白I號或II號進入T4細胞核內，因而能與產生病毒逆轉錄酶的基因相結合，以制止愛滋病毒再次進行自我複製(《生物化學》[美]LVBER STRYER 北京大學出版社1992年P71)，從而達到從根本上消滅愛滋病毒的目地。
由以上述兩種疫苗，即A型疫苗與B型疫苗聯合作用，就可以全面消滅患者體內的愛滋病毒，因而達到徹底治療愛滋病的目的。
與此同時，又由於本疫苗專一性強，只針對T4細胞，並可採用小劑量針劑疫苗注射的方式來對患者進行治療，不僅具有用藥量小，沒有毒性副作用的特點，而且價格更便宜，可為廣大患者所使用。因此，它必然具有極為廣闊的商業應用價值，從而具有極大的實用性。
還需要特別聲明的是，「雙聯雙重定位式胞內疫苗」，如果攜帶抗癌藥物及其它抗病毒的藥物，也可以用於癌症及其它種種病毒引發的人類疾病的治療，其中B型雙重疫苗還可以攜帶阻遏有缺陷基因或激活抗病毒與抗癌基因的藥物，因此，本專利持有者保留為治療上述疾病，而使用類似的「雙聯雙重定位式胞內疫苗」的一切專利所屬權。
還需要說明的是，無論是A型疫苗或者是B型疫苗，其中每種疫苗都是由多種同類疫苗混合而成的，所以，A型疫苗之中包含有AI型疫苗，AII型疫苗……。這是因為在混合式的A型疫苗中，每一種疫苗都只能由一個gP120轉運蛋白攜帶一個抗愛滋病毒的一種藥物。同樣如此，在多種混合式的B型疫苗中，其中每一種B型疫苗也只能由一個gp120轉運蛋白和一個核定位順序短肽指令共同攜帶一種藥物，例如抗體I號。但為了徹底消滅愛滋病毒，就必須在每種疫苗中，都聯合使用多種藥物，以便達到百分之百地消滅愛滋病毒的最佳效果，因此，每種疫苗都必須將各自攜帶一種藥物的多種型號的同種疫苗混合使用。
權利要求
1.一種抗愛滋病(AIDS)的雙聯雙重定位式胞內疫苗。其特徵為它將連結著可阻遏愛滋病毒(HIV)的藥物，例如，抗體I號、抗體II號，抗逆轉錄酶的AZT(疊氮胸腺嘧啶核苷)，齊多夫定(Zidovudine)，等等核苷與非核苷類似物的兩種疫苗A型疫苗與B型疫苗，通過它們所連結的特殊的轉運蛋白，分別將這些藥物轉運至淋巴細胞T4細胞的細胞質與細胲核內，其中，A型疫苗所攜帶的藥物被轉運至T4細胞的細胞質內，而B型疫苗所攜帶的藥物，被轉運至T4細胞的細胞核內，其中A型疫苗所攜帶的藥物，可直接消滅已感染愛滋病病毒的T4細胞的細胞質內的病毒逆轉錄酶及其輔酶，使病毒不能生長；而B型疫苗所攜帶的藥物，例如抗體I號或抗體II號，可直接阻遏已整合到宿主T4細胞DNA中的病毒DNA的tat基因等等，或是其它可轉錄部分病毒逆轉錄酶RNaseH基因，使它們失去轉錄病毒的逆轉錄酶的功能，永久性地阻止病毒的再複製，從而達到徹底根治愛滋病的目的。由於需要同時使用A型和B型疫苗，所以稱它們為「雙聯疫苗」；又由於所使用的B型疫苗需要連結兩種轉運蛋白，才能將其所攜帶的藥物轉運至T4細胞的細胞核內，所以稱B型疫苗為「雙重疫苗」；再由於上述「雙聯雙重疫苗」可專一性地定位作用於T4細胞的細胞質與細胞核內，因此又總稱它們為「雙聯雙重定位式胞內疫苗」，其中胞內所指的是細胞質內和細胞核內。
2.根據權利1所述，本專利創造性地設計了A型疫苗。其特徵為它是根據愛滋病毒外殼的gp120蛋白可與T4細胞的表面受體相結合，而將病毒的RNA，逆轉錄酶及其輔酶，專一針對T4細胞，定位式地轉運至T4細胞質內的原理，根據「以毒攻毒」的原則而設計的。它也同樣利用gp120蛋白，將抗病毒逆轉錄酶及其輔酶的藥物，例如，AZT、齊多夫定，等等，轉運至T4細胞的細胞質中，直接消滅病毒的逆轉錄酶及其輔酶，使病毒不能長生。由於病毒的逆轉錄酶十分穩定，不象gp120蛋白那樣迅速多變，又由於它是被gp120蛋白直接轉運至T4細胞的細胞內的，而不象口服這種抗逆轉錄酶藥物那樣，廣泛作用於全身細胞，同時口服藥物自身也會因在T4細胞外與其它人體代謝物發生反應而受到損失，因此，既有高效消滅病毒逆轉錄酶的作用，又有因其有專一針對T4細胞的特性而具有用量小的特點。因此A型疫苗是一種兩區性分子，可被裂解為二個區段一個是gp120蛋白，可與T4細胞表面的受體結合，並將第二區段所攜帶的藥物轉運至T4細胞質內。
3.根據權利1所述，本專利創造性地設計了B型疫苗。其特徵為它是一種三區性分子，第一區段為gp120蛋白；第二區段為可阻遏T4細胞核內的、已整合到宿主DNA上的病毒DNA的有關可轉錄病毒逆轉錄酶的基因，例如tat基因，或是可轉錄部分逆轉錄酶RNaseH基因的藥物，例如抗體I號或抗體II號；第三區段則為一核定位順序，它結合在抗愛滋病毒的藥物，例如抗體I號或抗體II號上，此順序含有S個連續的帶正電荷的殘基—脯—賴—賴—賴—精—賴—纈。這一短肽順序的指令可使抗體I號或抗體II號蛋白進入T4細胞核內。其中第一區段的gpho蛋白的作用，是將第二和第三區段的分子轉運主T4細胞的細胞質內。由於它含有兩個轉運蛋白，以使將藥物從T4細胞外轉運至T4細胞內後，再連續轉運至T4細胞核內，所以稱它為雙重疫苗，它與A型疫苗合稱為「雙聯雙重定位式胞內疫苗。」
4.根據權利1所述，本專利為A型疫苗和B型疫苗創造性地設計了所攜帶的藥物。其特徵為其中，為A型疫苗設計的藥物，可直接與T4細胞質內愛滋病毒的逆轉錄酶及其輔酶相結合，從而使其失去活性，例如AZT、齊多夫定，等等；而為B型疫苗所設計的藥物，可阻遏已整合到宿主DNA的病毒DNA的可轉錄部分逆轉錄酶RNasiH的基因的阻遏蛋白抗體I號，以及可阻遏病毒tat基因的抗體II號，其它還有可阻遏病毒的gag、pol、enu和sor基因的抗體III號，抗體四號……等等。由於這些阻遏蛋白，抗體I號、II號……，可因能夠阻遏這些病毒基因，使其失活，因而可永久性地使愛滋病毒失去在T4細胞中再複製的功能，因此，它與A型疫苗聯合作用，就可徹底消滅存在於T4細胞的細胞質與細胞核內的一切愛滋病毒。
5.根據權利1所述，本專利創造性地設計了混合式的A型疫苗與混合式的B型疫苗。其特徵為由於無論A型或B型疫苗的每一種轉運蛋白，例如A型疫苗的gp120或是B型疫苗的核定位順序短肽指令，—輔—賴—賴—賴—精—賴—纈與gP120的組合，每次使用時，都只能攜帶一種藥物，例如，B型疫苗的一組gp120蛋白與核定位順序短肽的組合只可攜帶一個抗體I號分子，可稱為BI型疫苗。如果需要多種B型疫苗所攜帶的藥物，例如抗體I號、II號、III號……等等，同時進入T4細胞的核內，以加強阻遏病毒DNA基因的作用，就得將分別攜帶著抗體I號、II號、III號……的多種B型疫苗混合起來使用，其中多種B型疫苗各自攜帶一種藥物，例如，BI型疫苗攜帶抗體I號、BII型疫苗攜帶抗體BI型II號……等等。對於A型疫苗也是如此每種A型疫苗分別只能攜帶一種藥物，並為此可將它們分為稱AI型疫苗，AII型疫苗……等等。同時也將它們混合使用，並與已混合在一起的BI型疫苗、BII型疫苗……的混合式B型疫苗聯合起來，共同應用。
6.根據權利1所述，本專利創造性設計了抗愛滋病毒的注射式針劑「雙聯雙重定位式胞內疫苗」。其特徵為，將「雙聯雙重定位式胞內疫苗」作為液體型的針劑，封於玻璃管內，並保存在能使疫苗存活的溫度的冰箱中，由於本疫苗如權利2所述，具有專一性強，只定位式作用T4細胞，不廣泛作用全身細胞的功能，因此具有用藥量小，無副作用，價格更便宜的優點，可為廣大患者使用，具有極強的實用性。又由於它只針對愛滋病毒的逆轉錄酶及其輔酶在T4細胞中的發生阻遏反應，所以當它進入未感染的T4細胞內，不但不會對T4細胞起破壞作用，因為健康的T4細胞中不含有逆轉錄酶及其輔酶，而且還可以起到使健康的T4細胞能夠予防感染愛滋病毒的作用。
7.根據權利1所述，本專利所創造設計的雙聯雙重定位式胞內疫苗，還可以用於治療癌症及其它患基因缺陷症患者，以及被其它病毒感染患者的疾病。其特徵為只需將A型疫苗或B型疫苗所攜帶的藥物，更換為可阻遏癌症患者的原癌基因，或可激活癌症患者的抗癌基因的藥物，或是可阻遏被病毒感染的患者細胞的宿主DNA中所整合的病毒基因，及其細胞質中病毒的致病因子，例如病毒逆轉錄酶等等，還有可阻遏基因病症患者的有缺陷基因的藥物，就可以治癒這些病症，並且可專一性地，定位式地作用於這些患病的人體細胞。因此，本專利持有者保留一切使用按本專利所設計的「雙聯雙重定位式胞內疫苗」的方式，將上述各種藥物用於治療以上所述人體各類特定細胞疾病的專利所有權。
全文摘要
本專利涉及一種抗愛滋病毒的「雙聯雙重定位式胞內疫苗」。它是由A、B兩種型號的疫苗共同組成的。本疫苗因採用了兩種特殊的轉運蛋白，因而可以把能夠阻遏愛滋病毒(HIV)的逆轉錄酶及其輔酶，以及能夠阻遏已整合到宿主T4細胞DNA中的愛滋病毒DNA的tat等基因的藥物，轉運到人體淋巴細胞T4細胞的細胞質與細胞核內，從而徹底消滅愛滋病毒，治癒愛滋病。本疫苗採用針劑注射方式，具有用藥量小、無任何副作用的特點。
文檔編號A61P31/18GK1433812SQ02100099
公開日2003年8月6日 申請日期2002年1月24日 優先權日2002年1月24日
發明者白濤 申請人:白濤