誘導癌細胞死亡和腫瘤消退的方法

2023-11-05 23:08:22 1

專利名稱：誘導癌細胞死亡和腫瘤消退的方法
技術領域：
本發明描述了治療患有癌症，包括腫瘤和轉移性疾病的個體的新方法。本發明特別提供了治療癌症的方法，包括聯合使用(1)法尼基蛋白轉移酶(「FPT」)抑制劑和(2)其它的Ras信號傳導途徑抑制劑以誘導協同水平的癌細胞死亡(特別是細胞程序死亡)，由此使得能夠採用低劑量治療方案。
背景技術：
本說明書附

圖1是導致細胞增殖的信號傳導途徑的簡化的線性描述圖。該途徑在本文中稱為「Ras信號傳導途徑」，因為Ras是該途徑中的關鍵轉播子，其從上遊元件(例如生長因子受體)接受信號，並將它們傳送到下遊元件上。
現在正在研究導致細胞增殖，以及在某些情況下導致惡性轉化的由生長因子受體引發的信號傳導途徑。許多生長因子受體例如表皮生長因子(EGF)和血小板衍生生長因子(PDGF)的受體以及與EGF受體相關的分子(例如Her-2/Neu/ErbB2)具有內在的酪氨酸激酶活性，這樣的活性是通過配體誘導的受體二聚作用激活的(Heldin，1995)。這導致酪氨酸殘基上的受體發生自磷酸化以及含有Src-同源性2(SH2)域的蛋白結合。兩種這樣的SH2蛋白是Grb2和SHC，它們間接激活與質膜結合的小的GTP-結合蛋白Ras。Ras激活也出現在應答與七種跨膜域G-蛋白偶合受體結合的受體時。(例如，Gutkind，1998)。Ras和其它生長因子受體調控的信號傳導途徑的激活最終導致細胞增殖、分化和轉化所需的細胞骨架和基因表達發生改變(見Campbell等人，1998中的綜述)。
3種人ras基因(Ha-Ras、N-Ras和Ki-Ras)編碼4種蛋白(由於Ki-RasmRNA的可變剪接所致)。在正常環境下，Ras蛋白在活性(結合GTP的)狀態和失活(結合GDP的)狀態之間循環。Ras激活是通過用GTP交換結合的GDP來進行的，這種交換是由鳥嘌呤核苷酸交換因子家族促進的。Ras失活是通過將結合的GTP水解成GDP來進行的。該反應是由GTP酶激活蛋白(GAP)促進的(Trahey和McCormick，1987)。在許多人類癌症中，Ras蛋白由於突變而變成致癌性地激活，這些突變破壞其GTP酶活性，並因此失去調控Ras信號傳導的能力(見Campbell等人，1998中的綜述)。
存在多個候選的Ras效應子，它們可在信號傳導和致癌轉化中作用於Ras的下遊，並包括小GTP酶的RHo家族的成員、磷脂醯肌醇-3激酶(PI3K)和絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶c-Raf-1(見Campbell等人，1998中的綜述)。Raf介導的信號傳導是Ras效應子途徑的最佳特徵。激活的Ras將Raf募集到膜上，Raf在膜上激活。激活的Raf是激酶級聯—促分裂原激活蛋白激酶(MAPK)級聯(見Lowy和Willumsen，1993；Campbell等人，1998中的綜述)。Raf磷酸化和激活MEK1和MEK2(MAPK/ERK激酶)蛋白激酶，MEK1和MEK2蛋白激酶又磷酸化和激活細胞外信號調控激酶ERK1和ERK2(也稱為MAPK1和MAPK2)。與其下遊靶目標ERK1，2不同，MEK1，2蛋白是高度特異性的酶，其唯一的已知底物是ERK1，2蛋白。在激活後，ERK1和ERK2磷酸化(並因此調控)包括核轉錄因子在內的各種靶蛋白，導致最終的細胞應答。附圖1描繪了Ras信號傳導的這種線性途徑。
下述發現表明了這些信號傳導途徑在癌細胞的異常生長中的重要性生長因子受體和Ras途徑組分在癌中經常突變和/或過度表達。例如，Ras在大約30％的人癌中被突變性地激活，這些癌包括高百分比的大部分上皮癌例如肺癌、結腸癌和胰腺癌。此外，多種癌中發生了生長因子受體的過度表達(例如在約30％的人乳腺癌中發生了Her-2/Neu受體的過度表達)。這些觀察已引導人們尋求和開發設計用來阻斷任一信號傳導途徑的個體組分的活性劑。雖然這樣的活性劑有可能用作新的癌症治療劑，但是據信多種信號傳導抑制劑通過阻斷經由細胞周期的細胞進行而以細胞靜止而不是細胞毒害方式起作用。它們與傳統的癌症化療藥物的區別在於具有小小的毒性，但是也具有較弱的抗腫瘤活性。
因此，對於提供新的改善的癌症治療方法仍然有挑戰。例如，為了治療致瘤性癌細胞，非常需要提供能顯著且選擇性地誘導癌細胞死亡，同時將對正常未轉化細胞的可能毒性副作用降至最小的新方法。本發明剛好提供了這樣的治療方法。
發明概述本發明提供了在需要這樣的治療的患者(例如哺乳動物如人)中治療癌症的方法，包括施用有效量的(1)法尼基蛋白轉移酶(FPT)抑制劑和(2)其它的Ras信號傳導途徑抑制劑。本發明方法實現了意料不到的顯著的誘導癌細胞死亡(特別是細胞程序死亡)的作用。這些作用是協同的、高度選擇性的抗轉化細胞(特別是致腫瘤性癌細胞)的作用，由此使得能夠使用低劑量，以將對正常未轉化細胞的可能毒性副作用降至最小。此外，令人驚奇地發現，本發明方法具有長久的、持續的阻斷細胞信號傳導的作用，同時也將對正常未轉化細胞的可能毒性副作用降至最小。無論其大小如何，這些作用都不能從本發明之前的現有技術預測到。另外，利用本發明的令人驚奇的協同且持續、長久的作用，本發明提供了特殊的低劑量方法，這樣能有效地實現癌細胞死亡，同時將對正常未轉化細胞的可能毒性副作用保持在低危險性水平上。本發明方法可特別用於治療各種致腫瘤性癌症，尤其是上皮癌(例如胰腺癌、卵巢癌、前列腺癌、肺癌、乳腺癌、結腸直腸癌和膀胱癌)和黑素瘤。
附圖簡述附圖1Ras信號傳導用圖表示了RAS/MAPK信號傳導途徑的組分。從生長因子受體到ERK激活的線性途徑是第一個所要說明的Ra s介導的途徑。還顯示了通過各種抑制劑，包括FPT抑制劑SCH 66336、MEK抑制劑PD098059和U0126以及非受體酪氨酸激酶抑制劑STI-571的靶向的步驟。
發明詳述本發明提供了聯合使用(1)法尼基蛋白轉移酶(FPT)抑制劑和(2)Ras信號傳導途徑抑制劑來治療癌症的新方法。(1)「法尼基蛋白轉移酶抑制劑」或「FPT抑制劑」或「FTI」在本文中定義為這樣的化合物(i)有效地抑制FPT(但是優選在體外不抑制香葉基香葉基蛋白轉移酶I)；(ii)阻斷是法尼基受體的轉化H-ras形式引起的表型改變(但優選不是通過基因工程加工成香葉基香葉基受體的轉化H-ras形式引起的)；(iii)阻斷細胞內ras法尼基化；和(iv)阻斷異常細胞生長。(2)「Ras信號傳導抑制劑」在本文中定義為阻斷附圖1所示信號傳導途徑中的任何蛋白活性的物質。特別優選的Ras信號傳導途徑抑制劑是「MEK抑制劑」，其在本文中定義為這樣的物質，其阻斷MEK(MAPK/ERK激酶)蛋白(優選抑制MEK1和MEK2)的體外酶活性，並由此阻斷MAPK蛋白的激活，其中阻斷MAPK蛋白的激活是通過阻斷MAPK蛋白的磷酸化來證實的。這可通過用於磷酸化MAPK的Western印跡法來檢測，例如在Dudley等人，Proc Natl Acad Sci.927686-7689(1995)和Favata等人，J Bio Chem.27318623-32(1998)中描述的那些。1.FPT抑制劑作為單一活性劑或者與化療聯合使用的活性劑(參見例如Liu等人，1998)，FPT抑制劑代表阻斷Ras癌蛋白質功能的主要途徑。FPT催化異戊二烯基脂質部分加成到接近Ras蛋白的羧基末端的半胱氨酸殘基上。這是翻譯後加工途徑的第一個步驟，是Ras膜結合與Ras誘導的致癌轉化所必需的。已經報導了多種FPT抑制劑，包括各種肽模擬抑制劑以及其它小分子抑制劑，最有名的是三環類FPT抑制劑，其實例是SCH 66336。FPT抑制劑幹擾Ras蛋白在細胞中的翻譯後加工，並且在多種體外和體內癌模型中表現出抗腫瘤活性(Bishop等人，1995；Liu等人，1998)。SCH 66336的抗腫瘤活性包括抑制各種人腫瘤細胞系在體外的不依賴於貼壁的生長及其作為異種移植在免疫缺陷小鼠中的生長(Liu等人，1998)。人腫瘤細胞系在其對FPT抑制劑的生長影響的敏感性方面顯著不同。敏感性或抗藥性與Ras突變狀態無關。
在幾個轉基因小鼠腫瘤模型(例如MMTV-H-Ras、WAP-H-Ras、TGFα和TGFα/neu)中，通過給藥FPT抑制劑誘導了顯著的腫瘤消退作用。這些消退作用與細胞程序死亡的增加有關(Liu等人，1998；Barrington etal.，1998；Norgaard等人，1999)。FPT抑制劑還可以在培養基中誘導轉化細胞程序死亡。已經報導了對於低血清中的必需生長或懸浮液中的強制生長的細胞程序死亡作用(Hung和Chaung，1998Lebowitz等人，1997；Suzuki等人，1998)。
還已表明給予FPT抑制劑降低了Ha-Ras-轉化Rat1細胞中的MAPK途徑的活性(例如James等人，1994)。這降低了與細胞生長疾病有關的MAPK活性。FPT抑制劑不降低未轉化Rat1細胞中的MAPK活性。
在本文中稱為「SCH 66336」的一種優選的FPT抑制化合物如下 (+)-對映體2.以MEK為靶目標的活性劑已經將MAPK途徑作為開發抗癌治療劑的鈀目標研究過，並且描述了該途徑的特異性抑制劑對腫瘤細胞系的作用(Dudley等人，1995；Favata等人，1998)。特徵確定最完整的MEK抑制劑是PD098059，它是一個小分子，對於任一種底物(ATP或ERK蛋白)以非競爭的方式通過直接結合抑制MEK1和MEK2的活性。這導致MEK1和MEK2磷酸化減少以及MEK底物ERK1和ERK2的激活降低。PD098059治療阻斷Ras轉化細胞的生長因子介導的增殖和不依賴於貼壁的生長(Alessi等人，1995，J Biol Chem.270-27489-27494)。
最近報導了以高於PD098059的親和力與MEK結合的一種新的MEK抑制劑，U0126(Favata等人，1998)。關於MEK抑制劑以及製備MEK抑制劑的方法的更詳細的信息可參見例如國際專利出版物WO99/01421(1999年1月14日)和WO 99/01426(1999年1月14日)。3.以生長因子受體為靶目標的活性劑已經採用了2種主要方法來阻斷生長因子受體信號傳導途徑(i)直接抗該受體的單克隆抗體；(ii)受體酪氨酸激酶活性抑制劑；和(iii)阻斷蛋白表達的反義核酸。抗受體單克隆抗體包括以erbB2受體為靶目標的那些(例如Genentech′s HERCEPTIN/trastuzumab)和以EGF受體為靶目標的那些。特徵確定最完整的抗-EGF受體抗體是嵌合抗體C225(Goldstein等人(1995)，Clin Cancer Res.11311-1318)。HERCEPTIN和C225都已在其中表達其關聯受體的臨床前腫瘤模型中表現出效力。
已經報導了酪氨酸激酶活性的小分子抑制劑，至少有兩種這些化合物已經在人臨床試驗中測試過Sugen′s PDGF受體抑制劑—SU101，其正處於關於神經膠質瘤的III期臨床試驗以及關於其它癌症適應徵的早期階段試驗中，和Pfizer′s EGF受體抑制劑—CP-358，774，其正處於早期臨床試驗中(Moyer等人(1997)，Cancer Res.574838-4848)。4.以非受體酪氨酸激酶為靶目標的活性劑當與法尼基轉移酶抑制劑聯合使用時表現出附加益處的另一類信號傳導抑制劑是非受體酪氨酸激酶抑制劑。象受體酪氨酸激酶一樣，非受體酪氨酸激酶位於Ras信號傳導途徑的上遊，並導致Ras激活。與受體酪氨酸激酶不一樣，非受體酪氨酸激酶不位於細胞膜上，而是位於胞漿中的可溶性蛋白。這些激酶的實例包括src和abl酪氨酸激酶。在患有慢性骨髓性白血病的幾乎所有患者中，abl酪氨酸激酶都由於惡性細胞中的染色體易位導致bcr-abl融合蛋白生成而失去調控(即組成性地激活)。
最近，已經開發了抑制bcr-abl融合蛋白的激酶活性的小分子，並且目前正處於臨床試驗中。這類小分子的一個實例是STI571(CGP57148)—一種2-苯基氨基嘧啶衍生物(參見Buchdunger等人(1996).Cancer Research 56100-104；Druker等人(1996)NatureMedicine 2561-566；Weisberg Griffin(2000)Blood953498-3505)。STI 571具有下述結構 最近的研究令人驚奇地表明，法尼基轉移酶抑制劑SCH 66336與STI571的組合具有增強的抗bcr-abl轉化細胞的活性，大於單獨使用任一種活性劑所觀察到的活性。5.其它信號傳導拮抗劑除了上述方法以外，已經將目標定在Ras信號傳導途徑和其它信號傳導途徑的元件上來開發癌症藥物。聯繫生長因子受體與Ras激活的SH2蛋白(SHC和Grb2)已經成為阻斷SH2域與含有磷酸酪氨酸的蛋白序列結合的肽模擬物質的靶目標。
聯繫Ras與MEK1，2激活的蛋白激酶Raf也已經成為小分子激酶抑制劑與反義手段的靶目標。近來的手段(ISIS-5132)正處於II期臨床試驗(Monia等人，1996)。
其它相關細胞內信號傳導目標包括磷酸脂激酶PI3K(磷脂醯肌醇-3激酶)和蛋白激酶C。
在優選的實施方案中，本發明方法可用於治療致腫瘤癌細胞，這是因為對於癌細胞，其具有顯著的致細胞死亡作用(例如通過細胞程序死亡)(即超過僅僅抑制生長的顯著的致細胞死亡作用)，同時可以以較低劑量施用活性劑(和/或以較低頻率)將對正常未轉化細胞的可能毒性副作用降至最小。此外，本發明提供了治療癌症的新方法，包括提供更長久的、持續更長的阻斷細胞信號傳導的作用，同時將對正常細胞的可能毒性副作用降至最小。
因此，本發明還提供了在癌症患者中誘導協同水平的癌細胞死亡(例如細胞程序死亡)的方法，包括並行或依次施用有效量的(1)FPT抑制劑和(2)Ras信號傳導途徑抑制劑(即足以誘導通過例如下述方法測定的協同水平的癌死亡的量Dengler等人，(1995)AnticancerDrugs.6522-32中描述的propidium iodide螢光測定法)。類似地，本發明提供了殺死癌症患者中癌細胞(如通過Dengler等人，1995的方法測定的)的方法，包括施用有效量的(1)FPT抑制劑和(2)Ras信號傳導途徑抑制劑。
此外，在優選的實施方案中，本發明方法包括在有此需要的患者(例如哺乳動物如人)中治療腫瘤和抑制腫瘤體積(例如通過CAT掃描測定的體積)的方法，包括並行或依次施用足以實現所述目的的量的(1)FPT抑制劑和(2)Ras信號傳導途徑抑制劑。可治療的腫瘤的實例包括上皮癌例如前列腺癌、肺癌(例如肺腺癌)、胰腺癌(例如胰腺癌如外分泌性胰腺癌)、乳腺癌、結腸癌(例如結腸直腸癌如結腸腺癌和結腸腺瘤)、卵巢癌、膀胱癌和肝癌。可治療的其它癌症包括黑素瘤、骨髓性白血病(例如急性骨髓性白血病)、肉瘤、甲狀腺濾泡性癌和脊髓發育不良症候群。
本發明還提供了用於治療癌症(包括誘導癌細胞死亡和腫瘤抑制)的藥物組合物，其中包含FPT抑制劑和Ras信號傳導途徑抑制劑，以及製備這樣的組合物的方法。
除非另有說明，否則在本文中使用的下列術語具有下述含義「生長因子受體抑制劑」阻斷生長因子受體信號傳導性質的物質。如Levitzki和Gazit，1995(Science.2671782-1788)中所述，它們可作為受體酪氨酸激酶活性的直接抑制劑起作用，或者通過抑制配體刺激的受體激酶活性的激活來起作用。
「酪氨酸激酶抑制劑」如Levitzki和Gazit，1995所述，通過與ATP競爭或者通過與酶別構作用來阻斷酪氨酸磷酸化活性的物質。
「蛋白激酶抑制劑」如Levitzki和Gazit，1995所述，阻斷蛋白對絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸殘基的磷酸化活性的物質。
「p185 erbB2/HER2/neu受體抑制劑」或「erbB2受體抑制劑」如Levitzki和Gazit，1995所述，通過抑制受體酪氨酸激酶活性或者阻斷配體刺激受體激酶活性來阻斷erbB2受體的信號傳導性質的物質。
「PDGF受體酪氨酸激酶抑制劑」如Kovalenko，M.，等人(1994).Cancer Res.546106-6114中所述，通過抑制受體酪氨酸激酶活性或通過阻斷PDGF刺激受體激酶活性來阻斷血小板衍生生長因子(PDGF)的信號傳導性質的物質。
「EGF受體酪氨酸激酶抑制劑」如Fry等人(1994)，Science91093-1095中所述，通過抑制受體酪氨酸激酶活性或通過阻斷EGF刺激受體激酶活性來阻斷上皮生長因子(EGF)的信號傳導性質的物質。
「直接抗生長因子受體細胞外域的抗體」如Mendelsohn，J.(1992)J Nat′l Cancer Inst Monogr 13125-131中所述，這樣的抗體通過抑制受體酪氨酸激酶與配體結合和/或阻止配體刺激的受體酪氨酸激酶激活來阻斷生長因子受體的生物活性。
「以p185 erbB2/HER2/neu受體為靶目標的單克隆抗體」或「以erbB2受體為靶目標的單克隆抗體」如Pegram等人，1998中所述，這樣的抗體通過抑制生長因子受體激酶與配體結合和/或阻止配體刺激的生長因子受體激酶激活來阻斷HER2受體的生物活性；還參見Carter等人.(1992)，Proc.Nat′l Acad.Sci.894285-4289。
「以EGF受體為靶目標的單克隆抗體」如Mendelsohn，J.(1992)J Nat』l Cancer Inst Monogr 13125-131中所述，抑制EGF結合和/或EGF刺激的激酶活性的單克隆抗體。
「直接抗生長因子受體或Ras信號途徑中的其它元件的反義分子」如Wang等人，1998或Resnicoff，1998所述，幹擾該途徑中的任何蛋白元件的信使RNA翻譯(以及因此蛋白表達)的修飾的低聚核苷酸。關於反義技術的一般討論參見例如Antisense DNA and RNA，(Cold Spring Harbor Laboratory，D.Melton，ed.，1988)。
「並行」(1)在時間上同時，或(2)在共同的治療方案期間的不同時間；「依次」(1)施用方法的一個組分((a)FPT抑制劑或(b)其它的Ras途徑抑制劑)，然後施用其它組分；施用一個組分後，第二個組分可在基本上施用第一個組分之後立即施用，或者第二個組分可在施用第一個組分之後的有效時間後施用；有效時間是對於施用第一個組分而實現的最大有益效果所給定的時間。
「下遊」在本文中定義為由Ras調控的蛋白活性(在Ras信號傳導途徑內)，其中Ras是經由蛋白蛋白結合直接調控，或者通過Ras-調控的效應子蛋白來間接調控。因此，參見附圖1，「Ras的下遊元件」可以是例如Mek1，2或Erk1，2。
「上遊」在本文中定義為由Ras調控的蛋白活性(在Ras信號傳導途徑內)，其中Ras是經由蛋白蛋白結合直接調控，或者通過調控與ras直接結合併調控Ras活性的另一蛋白來間接調控。因此，「Ras的上遊元件」可以是例如erbB2、PDGF受體、IGF受體或EGF受體。
如本文所述的「細胞死亡」是如Raff，M.(1998).Nature.396119-122中所述的，在生理條件下引起的或者由於急性損傷所致的細胞的細胞器和蛋白的分解和代謝過程消失所引起的細胞死亡。細胞死亡可通過例如Dengler等人，(1995)Anticancer Drugs.6522-32中描述的propidium iodide流動細胞計數法來測定。
如本文所述的「細胞程序死亡」是如Raff，M.(1998).Nature.396119-122中所述的，表現出定型形態改變的細胞死亡形式(程序化細胞死亡)。細胞程序死亡可通過例如Dengler等人，(1995)Anticancer Drugs.6522-32中描述的propidium iodide流動細胞計數法來測定，或者通過Gorczyca，(1993)Cancer Res 531945-51中描述的原位末端脫氧核苷酸轉移酶和切口移位測定(TUNEL分析)來測定。
「協同」或「協同水平」在本文中定義為由兩種組分的組合所獲得的大於單獨使用這兩種組分所實現的作用的加合(組分的量保持不變)的作用。因此，例如術語「引起協同水平的癌細胞死亡的有效量」是指兩種組分的量是這樣的其獲得大於單獨使用這兩種組分所實現的作用的加合癌細胞死亡水平(例如通過Dengler等人，(1995)Anticancer Drugs.6522-32中描述的propidium iodide流動細胞計數法，或者通過Gorczyca，(1993)Cancer Res 531945-51中描述的原位末端脫氧核苷酸轉移酶和切口移位測定(TUNEL分析)來測定的細胞程序死亡形式的細胞死亡)。
「持續作用」在本文中定義為，與單一治療相比，對FPT I和MEK1，2抑制劑的聯合治療表現出的延長的/增強的細胞程序死亡反應。「持續作用」的後果可以通過測定MAPK活性或如上所述的細胞死亡或細胞程序死亡來監測。單一藥物抑制MAPK途徑的有效時間過程是劑量依賴性的。然而，本發明中的實驗表明，MEK1，2抑制劑在治療時或者在治療開始後6小時能最佳地抑制MAPK途徑，而SCH 66336在治療12-18小時後表現出最佳的MAPK途徑抑制作用。據表明，SCH 66336的MAPK抑制作用在治療後持續長達72小時。因此，這兩種藥物的組合可在長時間內，優選在治療開始時或臨開始時至治療後6小時的時間內，並優選在持續到治療後36小時、更優選72小時的時間內帶來對MAPK途徑的「持續」抑制作用(參見例如附圖6)。
術語「殺死癌細胞」是指引起轉化的致腫瘤性癌細胞的癌細胞死亡。
FPT抑制劑的更詳細描述可用作FPT抑制劑的化合物種類包括稠合環的三環苯並環庚二烯並吡啶類(benzocycloheptapyridine)、寡肽、肽模擬化合物、法尼基化肽模擬化合物、羰基哌嗪基化合物、羰基哌啶基化合物、法尼基衍生物和天然產物和衍生物。
是FPT抑制劑的化合物的實例以及涉及這些化合物的文件如下稠合環的三環苯並環庚二烯並吡啶類WO 95/10514；WO95/10515；WO 95/10516；WO 96/30363；WO 96/30018；WO 96/30017；WO 96/30362；WO 96/31111；WO 96/31478；WO 96/31477；WO 96/31505；WO 97/23478；國際專利申請PCT/US97/17314(WO 98/15556)；國際專利申請PCT/US97/15899(WO 98/11092)；國際專利申請PCT/US97/15900(WO 98/11096)；國際專利申請PCT/US97/15801(WO98/11106)；國際專利申請PCT/US97/15902(WO 98/11097)；國際專利申請PCT/US97/15903(WO 98/11098)；國際專利申請PCT/US97/15904；國際專利申請PCT/US97/15905(WO 98/11099)；國際專利申請PCT/US97/15906(WO 98/11100)；國際專利申請PCT/US97/15907(WO 98/11093)；國際專利申請PCT/US97/19976(WO98/11091)；第08/87704 9號U.S.申請；第08/877366號U.S.申請；第08/877399號U.S.申請；第08/877336號U.S.申請；第08/877269號U.S.申請；第08/877050號U.S.申請；第08/877052號U.S.申請；第08/877051號U.S.申請；第08/877498號U.S.申請；第08/877057號U.S.申請；第08/877739號U.S.申請；第08/877677號U.S.申請；第08/877741號U.S.申請；第08/877743號U.S.申請；第08/877457號U.S.申請；第08/877673號U.S.申請；第08/876507號U.S.申請；和第09/216,398號U.S.申請，某些FPT抑制劑是寡肽、尤其是式Cys-Xaa1-Xaa2-Xaa3所示四肽或其衍生物，其中Xaa3代表絲氨酸、蛋氨酸或穀氨醯胺殘基，Xaa1和Xaa2可代表多種不同的胺基酸殘基，但尤其是具有脂族側鏈的胺基酸殘基。其衍生物可具有或不具有3個肽鍵；因此已經發現，將肽鍵-CO-NH-還原成仲胺基，或者將肽鏈中的氮原子用碳原子替換(條件是一些因素例如分子的一般形狀和末端分離大多保留)，獲得了通常比寡肽更穩定，並且如果有活性的話具有更持久活性的化合物。這樣的化合物在本文中稱為肽模擬化合物。
包括式Cys-Xaa1-Xaa2-Xaa3的寡肽(主要是四肽，但是也包括五肽)EPA 461,489；EPA 520,823；EPA 528,486；和WO 95/11917。
肽模擬化合物—尤其是Cys-Xaa-Xaa-Xaa-模擬物EPA535,730；EPA 535,731；EPA 618,221；WO 94/09766；WO 94/10138；WO 94/07966；US 5,326,773；US 5,340,828；US 5,420,245；WO95/20396；US 5,439,918；和WO 95/20396。
法尼基化肽模擬化合物—尤其是法尼基化Cys-Xaa-Xaa-Xaa-模擬物GB-A 2,276,618。
其它肽模擬化合物US 5,352,705；WO 94/00419；WO 95/00497；WO 95/09000；WO 95/09001；WO95/12612；WO 95/25086；EPA 675,112；和FR-A 2,718,149。
法尼基衍生物EPA 534,546；WO 94/19357；WO 95/08546；EPA537,007；和WO 95/13059。
天然產物和衍生物WO 94/18157；US 5,430,055；GB-A2,261,373；GB-A 2,261,374；GB-A 2,261,375；US 5,420,334；US5,436,263。
其它化合物WO 94/26723；WO 95/08542；US 5,420,157；WO95/21815；WO 96/31501；WO 97/16443；WO 97/21701；U.S.5,578,629；U.S.5,627,202；WO 96/39137；WO 97/18813；WO97/27752；WO 97/27852；WO 97/27853；WO 97/27854；WO 97/36587；WO 97/36901；WO 97/36900；WO 97/36898；WO 97/36897；WO 97/36896；WO 97/36892；WO 97/36891；WO 97/36890；WO 97/36889；WO 97/36888；WO 97/36886；WO 97/36881；WO 97/36879；WO 97/36877；WO 97/36876；WO 97/36875；WO 97/36605；WO 97/36593；WO 97/36592；WO 97/36591；WO 97/36585；WO 97/36584；和WO 97/36583。
編碼FPT的α-和β-單位的質粒及其測定的描述WO 94/10184。
還參考第09/217,335號U.S.申請和國際專利申請PCT/US98/26224，它們公開了聯合使用FPT抑制劑和化療劑和/或放療來治療增殖性疾病例如癌症的多種不同方法。
涉及FPT抑制劑化合物的所有上述文件都引入本發明。
Graham在Exp.Opin.Ther.Patents(1995)5(12)1269-1285中給出了關於多種這樣的化合物的綜述。
應當理解，專利說明書中化學式的寬度有可能使得不能將在標題下的所有化合物分類。例如，法尼基衍生物中的一萜烯基鏈可以延長，例如通過一定數目的亞甲基或甚至另一異戊二烯殘基來延長。
式Cys-Xaa1-Xaa2-Xaa3四肽具有氨基末端半胱氨酸殘基。這類四肽形成ras的羧基末端。這樣的四肽能夠與FPT結合併與ras競爭。具有類似結構，但是至少一個四肽的羰基被烴基例如亞甲基代替，並且如上所述被歸為肽模擬化合物的化合物也能夠與FPT結合併與ras競爭，但是通常在體內對酶降解的抗性更強。
FPT抑制劑—示例性化合物下列文件公開了用於本發明的優選的FPT抑制劑。這些文件還公開了使用其中所公開的化合物來抑制異常細胞生長(例如腫瘤)的方法。對於特定文件，其中所定義的基團和式命名僅適用於在該特定文件中描述的化合物。
出版於1995年4月20日的WO 95/10516和出版於1996年10月3日的WO 96/30363公開了式1.0化合物 或其可藥用鹽或溶劑化物，其中a、b、c和d當中有一個代表N或NR9，其中R9是O-、-CH3或-(CH2)nCO2H，其中n是1-3，且a、b、c和d當中其餘符號代表CR1或CR2；或者每個a、b、c和d獨立地選自CR1和CR2；每個R1和每個R2獨立地選自H、滷素、-CF3、-OR10、-COR10、-SR10、-S(O)tR11(其中t是0、1或2)、-SCN、-N(R10)2、-NO2、-OC(O)R10、-CO2R10、-OCO2R11、-CN、-NHC(O)R10、-NHSO2R10、-CONHR10、-CONHCH2CH2OH、NR10COOR11、-SR11C(O)OR11、 -SR11N(R75)2(其中每個R75獨立地選自H和-C(O)OR11)、苯並三唑-1-基氧基、四唑-5-基硫基、取代的四唑-5-基硫基、炔基、鏈烯基或烷基，所述烷基或鏈烯基可任選被滷素、-OR10或CO2R10取代；R3和R4相同或不同，並分別獨立地代表H或R1和R2的任何取代基，或者R3與R4一起代表與苯環稠合的飽和或不飽和C5-C7環；每個R5、R6、R7和R8獨立地代表H、-CF3、-COR10、烷基或芳基，所述烷基或芳基可任選被下列基團取代-OR10、-SR10、-S(O)tR11、-NR10COOR11、-N(R10)2、-NO2、-COR10、-OCOR10、-OCO2R11、-CO2R10或OPO3R10，或者R5、R6、R7和R8當中有一個可以與如下所定義的R40一起代表-(CH2)r-，其中r為1-4，並且-(CH2)r-可以被低級烷基、低級烷氧基、-CF3或芳基取代，或者R5與R6一起代表＝O或＝S，和/或R7與R8一起代表＝O或＝S；R10代表H、烷基、芳基或芳烷基；R11代表烷基或芳基；X代表N、CH或C，其中C可以在碳原子11之間含有由虛線代表的任選的雙鍵；碳原子5與6之間的虛線代表任選的雙鍵，這樣當存在雙鍵時，A和B獨立地代表-R10、滷素、-OR11、-OCO2R11或-OC(O)R10，並且當在碳原子5與6之間不存在任何雙鍵時，每個A和B獨立地代表H2、-(OR11)2、(H和滷素)、兩個滷素、(烷基和H)、(烷基)2、(H和OC(O)R10)、(H和-OR10)、＝O、(芳基和H)、＝NOR10或-O-(CH2)p-O-，其中p是2、3或4；R代表如下所定義的R40、R42、R44或R54；R40代表H、芳基、烷基、環烷基、鏈烯基、炔基或-D，其中-D代表 或 其中R3和R4如上所定義，且W代表O、S或NR10，其中R10如上所定義；所述R40代表環烷基、鏈烯基和炔基，所述基團可任選被1-3個選自下列的基團取代滷素、-CON(R10)2、芳基、-CO2R10、-OR12、-SR12、-N(R10)2、-N(R10)CO2R11、-COR12、-NO2或D，其中所述-D、R10和R11如上所定義，且R12代表R10、-(CH2)mOR10或-(CH2)qCO2R10，其中R10如上所定義，m是1-4，q是0-4；所述鏈烯基和炔基R40分別不在含有雙鍵或三鍵的碳上含有-OH、-SH或-N(R10)2；或者R40代表被選自下列的基團取代的苯基-SO2NH2、-NHSO2CH3、-SO2NHCH3、-SO2CH3、-SOCH3、-SCH3和-NHSO2CF3，其中所述取代基優選位於苯環的對位；或者R40代表 或 R42代表 其中R20、R21和R46分別獨立地選自(1)H；(2)-(CH2)qSC(O)CH3，其中q是1-3；(3)-(CH2)qOSO2CH3，其中q是1-3；(4)-OH；(5)-CS-(CH2)w-(取代的苯基)，其中w是1-3，並且在所述取代的苯基上的取代基與在下文(12)下面描述的關於取代的苯基的取代基相同；(6)-NH2；(7)-NHCBZ；(8)-NHC(O)OR22，其中R22是具有1-5個碳原子的烷基，或者R22代表被1-3個烷基取代的苯基；(9)烷基；(10)-(CH2)k-苯基，其中k是1-6；(11)苯基；(12)取代的苯基，其中所述取代基選自滷素、NO2、-OH、-OCH3、-NH2、-NHR22、-N(R22)2、烷基、-O(CH2)t-苯基(其中t為1-3)和-O(CH2)t-取代的苯基(其中t為1-3)；(13)萘基；(14)取代的萘基，其中取代基與在上文(12)下面描述的苯基的取代基相同；(15)具有5-10個碳原子的橋連多環烴；(16)具有5-7個碳原子的環烷基；(17)雜芳基；(18)羥基烷基；(19)取代的吡啶基或取代的吡啶基N-氧化物，其中所述取代基選自甲基吡啶基、嗎啉基、咪唑基、1-哌啶基、1-(4-甲基哌嗪基)、-S(O)tR11，以及在上文(12)下面描述的苯基的任何取代基，並且所述取代基通過替代鍵合在所述碳上的氫來鍵合在環上； (23)-NHC(O)-(CH2)k-苯基或-NH(O)-(CH2)k-(取代的苯基)，其中所述k如上文(10)下面所定義；(24)哌啶環V 其中R50代表H、烷基、烷基羰基、烷氧基羰基、滷代烷基或-C(O)NH(R10)，其中R10是H或烷基；(25)-NHC(O)CH2C6H5或-NHC(O)CH2-(取代的C6H5)；(26)-NHC(O)OC6H5； (30)-OC(O)-雜芳基(例如吡啶-4-羰基氧基)；(31)-O-烷基(例如-OCH3)；(32)-CF3；(33)-CN；(34)下式所示的雜環烷基 和(35)下式所示的哌啶基， 其中R85是H、烷基或被-OH或-SCH3取代的烷基；或者R20與R21一起形成＝O，並且其餘的R46如上所定義；或者R20、R21和R46當中有兩個一起形成哌啶環 其中R50如上文(24)下面所定義；條件是選擇R46、R20和R21，以使得它們所鍵合的碳原子不鍵合在一個以上的雜原子上；R44代表-NR25R48，其中R25代表雜芳基、N-甲基哌啶基或芳基，且R48代表H或烷基；R54代表式(i)、(ii)、(iii)或(iv)所示的N-氧化雜環基 或 其中R56、R58和R60相同或不同，並獨立地選自H、滷素、-CF3、-OR10、-C(O)R10、-SR10、-S(O)eR11(其中e為1或2)、-N(R10)2、-NO2、-CO2R10、-OCO2R11、-OCOR10、烷基、芳基、鏈烯基和炔基，其中所示烷基可被-OR10、-SR10或-N(R10)2取代，所述鏈烯基可被OR11或SR11取代；或者R54表示式(ia)、(iia)、(iiia)或(iva)所示的N-氧化雜環基； 或 其中Y代表N+-O-，且E代表N；或者R54代表被一個所述N-氧化雜環基(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(ia)、(iia)、(iiia)或(iva)取代的烷基；且Z代表O或S，這樣R的定義可以根據如上文所定義的R5、R6、R7或R8，或者R代表R40、R42、R44或R54。
出版於1997年7月3日的WO 97/23478(引入本發明以作參考)公開了下列化合物或其可藥用鹽 (-)-對映體； (+)-對映體； (+)-對映體； (-)-對映體； (-)-對映體； (+)-對映體； (-)-對映體； (+)-對映體； (-)-對映體； (-)-對映體； (+)-對映體； (-)-對映體； (+)-對映體； (+)-對映體； (-)-對映體； (+)-對映體； (-)-對映體； (+)-對映體； (+)-對映體； (-)-對映體； (+)-對映體； (-)-對映體； (+)-對映體； 和 在本發明方法中用作FPT抑制劑的優選化合物具有下式 即化合物4-[2-[4-[(8-氯-3，10-二溴-6，11-二氫-5H-苯並[5，6]環庚二烯並[1，2-b]吡啶-11-基)-1-哌啶基]-2-氧代乙基]-1-哌啶甲醯胺，優選具有下述結構的其(+)-異構體 還參見U.S.專利5,719,148(公布於1998年2月17日)和5,874,442(公布於1999年2月23日)，二者引入本發明。
U.S.專利申請US SN 09/216,398(引入本發明以作參考)公開了可用於抑制FPT的下式所代表的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物 其中a、b、c和d當中有一個代表N或N+O-，且a、b、c和d當中其餘符號代表CR1或CR2；或者每個a、b、c和d獨立地選自CR1或CR2；當任選的雙鍵(由虛線代表)不存在時，X代表N或CH，當任選的雙鍵存在時，X代表C；碳原子5與6之間的虛線代表任選的雙鍵，這樣當存在雙鍵時，A和B獨立地代表-R15、滷素、-OR16、-OCO2R16或-OC(O)R15，並且當在碳原子5與6之間不存在任何雙鍵時，A和B分別獨立地代表H2、-(OR16)2、H和滷素、兩個滷素、烷基和H、(烷基)2、-H和-OC(O)R15、H和-OR15、＝O、芳基和H、＝NOR15或-O-(CH2)p-O-，其中p是2、3或4；每個R1和每個R2獨立地選自H、滷素、-CF3、-OR15(例如-OCH3)、-COR15、-SR15(例如-SCH3和-SCH2C6H5)、-S(O)tR16(其中t是0、1或2，例如-SOCH3和-SO2CH3)、-N(R15)2、-NO2、-OC(O)R15、-CO2R15、-OCO2R16、-CN、-NR15COOR16、-SR16C(O)OR16(例如-SCH2CO2CH3)、-SR16N(R17)2，其中每個R17獨立地選自H和-C(O)OR16，條件是R16不是-CH2-(例如-S(CH2)2NHC(O)O-叔丁基和-S(CH2)2NH2)，苯並三唑-1-基氧基、四唑-5-基硫基、或取代的四唑-5-基硫基(例如烷基取代的四唑-5-基硫基如1-甲基-四唑-5-基硫基)、炔基、鏈烯基或烷基，所述烷基或鏈烯基可任選被滷素、-OR15或-CO2R15取代；R3和R4相同或不同，並分別獨立地代表H、或R1和R2的任何取代基，或者R3與R4一起代表與苯環(環III)稠合的飽和或不飽和C5-C7環；R5、R6和R7分別獨立地代表H、-CF3、-COR15、烷基或芳基，所述烷基或芳基可任選被下列基團取代-OR15、-SR15、-S(O)tR16、-NR15COOR16、-N(R015)C、-NO2、-COR15、-OCOR15、-OCO2R16、-CO2R15、OPO3R15，或者R5與R6一起代表＝O或＝S；R8選自H、C3-C4烷基(優選支鏈烷基、最優選C4-C7支鏈烷基)、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、環烷基、環烷基烷基、取代的烷基、取代的芳基、取代的芳基烷基、取代的雜芳基、取代的雜芳基烷基、取代的環烷基、取代的環烷基烷基；R8的取代基選自烷基、芳基、芳基烷基、環烷基、-N(R18)2、-OR18、環烷基烷基、滷素、CN、-C(O)N(R18)2、-SO2N(R18)2或-CO2R18；條件是-OR18和-N(R18)2取代基不鍵合於與-C(O)NR18-部分的N鍵合的碳上；每個R18獨立地選自H、烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基或環烷基；R9和R10獨立地選自H、烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、環烷基或-CON(R18)2(其中R18如上所定義)；可被取代的R9和R10可任選被一個或多個(例如1-3個)選自下列的取代基取代烷基(例如甲基、乙基、異丙基等)、環烷基、芳基烷基或雜芳基烷基(即除了R9和/或R10是H時，R9和/或R10可未取代或者被1-3個上述取代基取代)；或者R9和R10與它們所鍵合的碳原子一起形成C3-C6環烷基環；R11和R12獨立地選自H、烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、環烷基、-CON(R18)2-OR18或-N(R18)2；其中R18如上所定義；條件是-OR18和-N(R18)2不鍵合在與氮原子相鄰的碳原子上；並且其中所述可取代的R11和R12可任選被一個或多個(例如1-3個)選自下列的取代基取代烷基(例如甲基、乙基、異丙基等)、環烷基、芳基烷基或雜芳基烷基；或者R11和R12與它們所鍵合的碳原子一起形成C3-C6環烷基環；R13是選自下列的咪唑基環 其中R19選自(1)H、(2)烷基、(3)烷基、(4)芳基、(5)芳基烷基、(6)取代的芳基烷基，其中所述取代基選自滷素(例如F和Cl)或CN，(7)-C(芳基)3(例如-C(苯基)3，即三苯甲基)或(8)環烷基；所述咪唑基環2.0或2.1可任選被一個或兩個取代基取代，並且所述咪唑環4.0可任選被1-3個取代基取代，所述咪唑環4.1可任選被一個取代基取代，其中所述環2.0、2.1、4.0和4.1的任選的取代基鍵合在所述咪唑環的碳原子上，並獨立地選自-NHC(O)R18、-C(R34)2OR35、-OR18、-SR18、F、Cl、Br、烷基、芳基、芳基烷基、環烷基或-N(R18)2；R18如上所定義；每個R34獨立地選自H或烷基(優選-CH3)，優選H；R35選自H、-C(O)OR20或-C(O)NHR20，且R20如上所定義(R20優選為烷基或環烷基，最優選為環戊基或環己基)；Q代表芳基環(例如苯基)、環烷基環(例如環戊基或環己基)或雜芳基環(例如呋喃基、吡咯基、噻吩基、噁唑基或噻唑基)；(-C(R34)2OR35的實例包括-CH2OH、-CH2OC(O)OR20和-CH2OC(O)NHR20)；R14選自 或 R15選自H、烷基、芳基或芳基烷基；R16選自烷基或芳基；R20選自H、烷基、烷氧基、芳基、芳基烷基、環烷基、雜芳基、雜芳基烷基或雜環烷基，條件是當R14是基團5.O或8.0時，R20不是H；當R20不是H時，所述R20可任選被一個或多個(例如1-3個)選自下列的取代基取代滷素、烷基、芳基、-OR18或-N(R18)2，其中每個R18相同或不同，並且其中R18如上所定義，條件是所述任選的取代基不鍵合在與氧原子或氮原子相鄰的碳原子上；R21選自H、烷基、芳基、芳基烷基、環烷基、雜芳基、雜芳基烷基或雜環烷基；當R21不是H時，所述R21可任選被一個或多個(例如1-3個)選自下列的取代基取代滷素、烷基、芳基、-OR18或-N(R18)2，其中每個R18相同或不同，並且其中R18如上所定義，條件是所述任選的取代基不鍵合在與氧原子或氮原子相鄰的碳原子上；n是0-5；對於每個n(即對於每個-C(R32)(R32)-基團)，每個R32和R33獨立地選自H、烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、環烷基、-CON(R18)2、-OR18或-N(R18)2；其中R18如上所定義；並且其中所述可取代的R32和R33可任選被一個或多個(例如1-3個)選自下列的取代基取代烷基(例如甲基、乙基、異丙基等)、環烷基、芳基烷基或雜芳基烷基；或者R32和R33與它們所鍵合的碳原子一起形成C3-C6環烷基環；且R36選自環烷基、雜環烷基或芳基(例如苯基)；且條件是(1)當R14選自基團6.0、7.0、7.1或8.0，且X是N時，則R8選自C3-C10烷基、取代的C3-C10烷基、芳基烷基、取代的芳基烷基、雜芳基烷基、取代的雜芳基烷基、環烷基烷基或取代的環烷基烷基；(2)當R14選自基團6.0、7.0、7.1或8.0，X是N，且R8是H時，則R13(即咪唑環2.0、4.0或4.1)與醯胺部分(即-C(O)NR13基團)之間的烷基鏈被取代，即(a)R9、R10、R11、R12、R32或R33當中至少有一個不是H，和/或(b)R9與R10、和/或R11與R12一起形成環烷基環；(3)當R14是基團5.0，X是N，且R8是H時，則R13(即咪唑環2.0、4.0或4.1)與醯胺部分(即-C(O)NR18基團)之間的烷基鏈被取代，即(a)R9、R10、R11、R12、R32或R33當中至少有一個不是H，和/或(b)R9與R10、和/或R11與R12一起形成環烷基環。
優選的FPT抑制劑包括上述文件(已引入本發明以作參考)中公開的肽和肽模擬化合物以及稠合環三環化合物。更優選的是稠合環三環化合物，最優選的是WO 97/23478中公開的化合物。
在本發明中用作FPT抑制劑的化合物的FPT抑制和抗腫瘤活性可通過本領域已知的方法測定，參見例如在出版於1995年4月20日的WO 95/10516中描述的體外酶測定、基於細胞的測定、細胞基質(Mat)測定和體內抗腫瘤實驗，和在出版於1997年7月3日的WO 97/23478中描述的軟瓊脂測定。使用作為本發明治療中的另外的治療劑的化療和/或放療可任選向本發明的治療方案中加入化療劑和/或放療(除了(1)法尼基蛋白轉移酶(FPT)抑制劑和(2)其它的Ras信號傳導途徑抑制劑的組合以外)。關於化療和/或放療與僅僅FPT抑制劑的聯合使用，可參見Liu，M.，等人.Cancer Res.584947-4956(1998)和U.S.專利申請09/217,335(引入本發明以作參考)。
可用作化療劑的化合物的種類包括烷化劑、抗代謝物、天然產物及其衍生物、激素和甾族化合物(包括合成類似物)和合成的化療劑。下面給出這些種類內的化合物的實例。
烷化劑(包括氮芥類、乙烯亞胺衍生物、磺酸烷基酯類、硝基脲類和三氮烯類)尿嘧啶氮芥、氮芥，環磷醯胺(Cytoxan)、異環磷醯胺、美法侖、苯丁酸氮芥、哌泊溴烷、三亞乙基蜜胺、三亞乙基硫代磷醯胺、白消安、卡氮芥、羅氮芥、鏈脲黴素、達卡巴嗪和替莫唑胺。
抗代謝物(包括葉酸拮抗劑、嘧啶類似物、嘌呤類似物和腺苷脫氨基酶抑制劑)甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、氟尿苷、阿糖孢苷、6-巰基嘌呤、6-硫代鳥嘌呤、磷酸氟達拉濱、噴司他丁和吉西他濱。
天然產物及其衍生物(包括長春花屬生物鹼、抗腫瘤性抗生素、酶、淋巴因子和表鬼臼毒素)長春花鹼、長春新鹼、長春地辛、博萊黴素、更生黴素、柔紅黴素、阿黴素、表阿黴素、依達比星、紫杉醇(紫杉醇作為Taxol市售)、光輝黴素、去氧助間型黴素、絲裂黴素-C、L-天冬醯胺酶、幹擾素(尤其是IFN-α)、依託泊苷和替尼泊苷。
激素和甾族化合物(包括合成類似物)17α-乙炔雌二醇、己烯雌酚、睪酮、強的松、氟甲睪酮、丙酸甲雄烷酮、睪內酯、醋酸甲地孕酮、他莫昔芬、甲潑尼龍、甲睪酮、強的松龍、去炎松、三對甲氧苯基氯乙烯、羥孕酮、氨魯米特、雌莫司汀、醋酸甲羥孕酮、亮丙瑞林、氟他胺、託米芬、醋酸性瑞林。
合成的化療劑(包括無機絡合物例如鉑配位絡合物)順鉑、卡鉑、羥基脲、安吖啶、丙卡巴肼、米託坦、米託蒽醌、左旋咪唑和六甲蜜胺。
安全且有效地施用大部分這些化療劑的方法是本領域技術人員已知的。此外，標準文獻中描述了其給藥。例如，多種化療劑的給藥描述在「Physicians′Desk Reference」(PDR)，例如1996版(MedicalEconomics Company，Montvale，NJ 07645-1742，USA)；該文獻的公開內容引入本發明以作參考。
藥物組合物用於製備本文所述的FPT抑制劑和Ras信號傳導途徑抑制劑的藥物組合物的可藥用載體可以是固體或液體。固體製劑包括粉劑、片劑、分散粒劑、膠囊、扁囊劑和栓劑。粉劑和片劑可包含約5-約70％的活性組分。合適的固體載體是本領域已知的，例如碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、糖和/或乳糖。片劑、粉劑、扁囊劑和膠囊可作為適於口服給藥的固體劑型使用。
為了製備栓劑，首先將低熔點蠟例如脂肪酸甘油酯混合物或椰子油熔化，通過攪拌將活性組分均勻地分散在其中。然後將該熔化的均勻混合物倒入具有適宜大小的模子中，讓其冷卻，並因此固化。
液體製劑包括溶液、懸浮液和乳劑。可提及的實例有非胃腸道注射用的水或水-丙二醇溶液。液體製劑還包括用於鼻內給藥的溶液。
適於吸入的氣霧劑可包括溶液和粉末形式的固體，其可以與可藥用載體例如惰性壓縮氣體聯合使用。
還包括在臨使用前轉化成口服或非胃腸道給藥用液體製劑的固體製劑。這樣的液體形式包括溶液、懸浮液和乳劑。
本文所述的FPT抑制劑和Ras途徑抑制劑還可以透皮給藥。透皮給藥組合物可呈霜劑、洗劑、氣霧劑和/或乳劑的形式，並且可包含在用於此目的的本領域常規基質或貯藥庫型透皮貼劑內。
這些化合物優選口服給藥。
藥物製劑優選呈單位劑型的形式。對於這樣的形式，製劑被細分成含有適當量的活性組分，例如實現預期目的的有效量的活性組分的單位劑量。
依據具體應用，活性化合物在單位劑量的製劑中的量可以在約0.5mg至1000mg、優選約1mg至300mg、更優選5mg至200mg之間改變或調節。
所用的實際劑量可根據患者的需求和所治療病症的嚴重程度而變。特定情境下適當劑量的確定在本領域技術人員的能力範圍內。一般情況下，用低於化合物的最佳劑量的較小劑量開始治療。之後以小的增加量提高劑量直至在這些情境下達到最佳效果。方便起見。可將總的日劑量分成幾份，然後在一天的期間內按照需要分批施用。
可依據臨床醫師(醫生)考慮到諸如患者年齡、身體狀況和體重以及所治療疾病嚴重程度這樣的因素而作的判斷，來調節FPT抑制劑和Ras途徑抑制劑的給藥量和頻率。一般情況下，當FPT抑制劑是稠合環三環苯並環庚二烯並吡啶時，FPT抑制劑(當用作單一治療劑時)的劑量可具有2000mg/天的上限範圍，優選為50-400mg/天。然而，在本發明聯合治療中，FPT抑制劑的優選的低劑量方案是例如以1.4-400mg/天、更優選1.4-350mg/天、甚至更優選3.5-70mg/天的劑量口服給藥，優選採用B.I.D.給藥方案。特別低的劑量範圍可以是1.4-70mg/天。
其它的Ras途徑抑制劑可依據本領域眾所周知的治療方案給藥。參見例如Pegram，M.D.，等人.(1998).J Clin Oncol.162659-2671。對於本領域技術人員顯而易見的是，Ras途徑抑制劑的給藥可依據所治療的疾病和Ras途徑抑制劑對該疾病的已知作用來改變。而且，依據醫師的知識，可根據所觀察到的施用的治療劑(即Ras途徑抑制劑)對患者的作用，以及所觀察到的疾病對施用的治療劑的反應來改變治療方案(例如劑量和給藥時間)。Ras途徑抑制劑(當用作單一治療劑時)的劑量一般可以為5-2000mg/天。然而，在本發明的聯合治療中，其它的Ras途徑抑制劑(例如MEK抑制劑)的優選的低劑量方案是以1-350mg/天、更優選3.5-70mg/天的劑量給藥，優選採用B.I.D.給藥方案。特別低的劑量範圍可以是1-70mg/天。
因此，在治療癌症(例如胰腺癌、肺癌或膀胱癌)的聯合治療的優選實例中，FPT抑制劑可以是如上文所述的SCH66336，其在連續給藥方案中以70mg/天的劑量口服施用，每天分兩次施用；其它的Ras信號傳導途徑抑制劑可以是PD098059(或其類似物)，其在連續給藥方案中以350mg/天的劑量施用，每天分兩次施用。
在治療癌症(例如胰腺癌、肺癌或膀胱癌)的聯合治療的另一優選實例中，FPT抑制劑是如上文所述的SCH 66336，其在連續給藥方案中以70mg/天的劑量口服施用，每天分兩次施用；其它的Ras信號傳導途徑抑制劑可以是U0126(或其類似物)，其在連續給藥方案中以350mg/天的劑量施用，每天分兩次施用。
在本發明方法中，將FPT抑制劑與其它的Ras途徑抑制劑並行或依次給藥。因此，例如Ras途徑抑制劑與FPT抑制劑不用必須同時或基本上同時給藥。同時或基本上同時給藥的優點是醫生眾所周知的。
而且，一般情況下，FPT抑制劑與其它的Ras途徑抑制劑不用必須在同一藥物組合物中給藥，並且由於具有的物理和化學特徵，它們有可能必須通過不同途徑施用。例如FPT抑制劑可以口服給藥以產生並維持其良好的血液水平，而Ras途徑抑制劑可靜脈內給藥。給藥方式和給藥適當性(如果可能的話在同一藥物組合物中)的確定在醫師的能力範圍內。最初的給藥可依據本領域已知的確認的方案來進行，然後醫師可根據所觀察到效果來改變劑量、給藥方式和給藥時間。
FPT抑制劑和其它的Ras途徑抑制劑的特定選擇將取決於臨床醫師的診斷及其對患者病症的判斷和合適的治療方案。
FPT抑制劑和其它的Ras途徑抑制劑可並行(例如同時、基本上同時或在同一治療方案內)或依次給藥，這取決於增殖性疾病的性質、患者的狀況以及與FPT抑制劑聯合施用(即在一個治療方案內)的Ras途徑抑制劑的實際選擇。
如果FPT抑制劑和其它的Ras途徑抑制劑不是同時或基本上同時給藥，則FPT抑制劑與其它的Ras途徑抑制劑的初始給藥順序可能不重要。因此，可首先施用FPT抑制劑，然後施用其它的Ras途徑抑制劑；或者可首先施用其它的Ras途徑抑制劑，然後施用FPT抑制劑。這種交替給藥可在一個治療方案期間反覆進行。在評價了所治療的疾病和患者的狀況之後，醫師可以確定給藥順序以及治療方案期間每種治療劑的重複給藥次數。例如，可首先施用其它的Ras途徑抑制劑，然後繼續通過施用FPT抑制劑來進行治療，然後，如果經確定是有利的話，施用其它的Ras途徑抑制劑，如此這樣直至治療方案完成。
因此，依據其經驗和知識，隨著治療的進行，醫師可根據個體患者的需要調節治療組分(治療劑--即FPT抑制劑、其它的Ras途徑抑制劑)的每一給藥方案。
在判斷於給藥劑量下治療是否有效的過程中，臨床醫師將考慮患者的一般健康狀況以及更明確的徵狀例如疾病相關症狀的減輕、腫瘤生長的抑制、腫瘤的急性收縮或轉移抑制。腫瘤的大小可通過標準方法例如放射實驗如CAT或MRI掃描來測定，並且可使用連續測定來判斷腫瘤生長是否已經被延遲或甚至是逆轉。疾病相關症狀例如疼痛的減輕和整個病症的改善也可用於幫助判斷治療的有效性(當然，如上所述，使用本發明方法的有效治療優選導致協同水平的癌細胞死亡和/或腫瘤消退)。
下面是FPT抑制化合物的膠囊製劑(實施例1-4)的實施例 (+)-對映體實施例1和2膠囊製劑實施例1實施例2％組成mg/膠囊mg/膠囊組成固溶液 100 400.0 84.2二氧化矽NF(1)0.625 2.50.5硬脂酸鎂NF(2)0.125 0.50.1交聯羧甲基纖維素鈉NF 11.000 44.0 9.3Pluronic F68 NF 6.250 25.0 5.3二氧化矽NF(3)0.625 2.50.5硬脂酸鎂NF(4)0.125 0.50.1總共 118.750 475.00膠囊型號 No.4No.0方法(實施例1知2)製備固溶液％組成g/批組成FPT抑制化合物 80 33.3聚維酮NF K29/32 160 66.6二氯甲烷 5000mL 蒸發將晶狀FPT抑制化合物與聚維酮溶解在二氯甲烷中。使用合適的溶劑噴霧乾燥器將該溶液乾燥。然後通過研磨將殘餘物加工成細顆粒。將粉末過30目篩。X-射線分析表明了所得粉末是非晶形的。
將該固溶液、二氧化矽(1)和硬脂酸鎂(2)在合適的混合器中混合10分鐘。使用合適的滾柱式壓縮機將該混合物壓縮，並用與30目篩網適合的研磨機研磨。將交聯羧甲基纖維素鈉、Pluronic F68和二氧化矽(3)加到該研磨的混合物中，並再混合10分鐘。用硬脂酸鎂(4)和相等份數的該混合物製備預混合物。將該預混合物加到上述混合物的剩餘部分中，並混合5分鐘，將混合物裝到硬殼明膠膠囊的殼中。
實施例3和4膠囊製劑實施例3實施例4％組成mg/膠囊mg/膠囊組成固溶液 400 200.0 80.0二氧化矽NF(1)3.75 1.875 0.75硬脂酸鎂NF(2)0.1250.625 0.25交聯羧甲基纖維素鈉NF 40.0020.00 8.0Pluronic F68 NF50.0025.00 10二氧化矽NF(3)3.75 1.875 0.75硬脂酸鎂NF(4)1.25 0.625 0.25總共 500.00 250.00膠囊型號 No.0 No.2方法(實施例3和4)製備固溶液％組成g/批組成FPT抑制化合物 1550聚維酮NF K29/32 1550二氯甲烷140mL 蒸發甲醇60mL 蒸發將晶狀FPT抑制化合物與聚維酮溶解在二氯甲烷與甲醇的混合物中。使用合適的溶劑噴霧乾燥器將該溶液乾燥。然後通過研磨將殘餘物加工成細顆粒。將粉末過30目篩。X-射線分析表明了所得粉末是非晶形的。
將該固溶液、二氧化矽(1)和硬脂酸鎂(2)在合適的混合器中混合10分鐘。使用合適的滾柱式壓縮機將該混合物壓縮，並用與30目篩網適合的研磨機研磨。將交聯羧甲基纖維素鈉、Pluronic F68和二氧化矽(3)加到該研磨的混合物中，並再混合10分鐘。用硬脂酸鎂(4)和相等份數的該混合物製備預混合物。將該預混合物加到上述混合物的剩餘部分中，並混合5分鐘，將混合物裝到硬殼明膠膠囊的殼中。
根據配製製劑的信息還可以參見第08/997168和60/068387號(於1997年12月22日)美國專利申請，二者引入本發明以作參考。
本發明在其藥物組合物方面的範圍不受所提供的實施例的限制。
本文所引用的所有文件(例如出版物和專利申請)都引入本發明以作參考，引入的程度就像每個文件是特定且單獨地引入。
雖然已經結合上文提供的具體實施方案描述了本發明，但是其許多替代形式、改變和變型對於本領域技術人員來說是顯而易見的。所有這樣的替代形式、改變和變型都在本發明實質和範圍內。
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權利要求
1.治療需要此治療的患者癌症的方法，所述治療包括施用(1)FPT抑制劑和(2)酪氨酸激酶抑制劑。
2.權利要求1的方法，其中所述FPT抑制劑是稠合環三環苯並環庚二烯並吡啶化合物。
3.權利要求1的方法，其中所述酪氨酸激酶抑制劑是2-苯基氨基嘧啶衍生物。
4.權利要求1的方法，其中所述FPT抑制劑是以1.4-400mg/天的劑量給藥。
5.權利要求4的方法，其中所述FPT抑制劑是以3.5-70mg/天的劑量給藥。
6.權利要求5的方法，其中所述酪氨酸激酶抑制劑是以3.5-70mg/天的劑量給藥。
7.權利要求6的方法，其中所述FPT抑制劑與酪氨酸激酶抑制劑是同時給藥。
8.權利要求7的方法，其中所述FPT抑制劑與酪氨酸激酶抑制劑是依次給藥。
9.權利要求1的方法，其中所述癌症是肺癌、胰腺癌、結腸癌、卵巢癌、肝癌、骨髓性白血病、黑素瘤、甲狀腺濾泡性癌、膀胱癌、神經膠質瘤、脊髓發育不良症候群、乳腺癌或前列腺癌。
10.權利要求1的方法，其中還包括施用化療劑。
11.權利要求10的方法，其中所述化療劑選自尿嘧啶氮芥、氮芥、環磷醯胺、異環磷醯胺、美法侖、苯丁酸氮芥、哌泊溴烷、三亞乙基蜜胺、三亞乙基硫代磷醯胺、白消安、卡氮芥、羅氮芥、5-氟尿嘧啶、氟尿苷、阿糖孢苷、6-巰基嘌呤、6-硫代鳥嘌呤、磷酸氟達拉濱、噴司他丁、吉西他濱、長春花鹼、長春新鹼、長春地辛、博萊黴素、更生黴素、柔紅黴素、阿黴素、表阿黴素、依達比星、紫杉醇、光輝黴素、去氧助間型黴素、絲裂黴素-C、L-天冬醯胺酶、幹擾素、依託泊苷、替尼泊苷、17α-乙炔雌二醇、己烯雌酚、睪酮、強的松、氟甲睪酮、丙酸甲雄烷酮、睪內酯、醋酸甲地孕酮、他莫昔芬、甲潑尼龍、甲睪酮、強的松龍、去炎松、三對甲氧苯基氯乙烯、羥孕酮、氨魯米特、雌莫司汀、醋酸甲羥孕酮、亮丙瑞林、氟他胺、託米芬、性瑞林、順鉑、卡鉑、羥基脲、安吖啶、丙卡巴肼、米託坦、米託蒽醌、左旋咪唑Navelbene、CPT-11、Anastrozole、來曲唑、Capecitabine、Reloxafine、Droloxafine、替莫唑胺或六甲蜜胺。
12.權利要求1的方法，其中還包括施用放射療法。
13.治療需要此治療的患者癌症的方法，所述治療包括並行或依次施用有效量的(1)FPT抑制劑 (+)-對映體和(2)酪氨酸激酶抑制劑
全文摘要
本發明描述了治療癌症的方法，包括聯合施用(1)法尼基蛋白轉移酶抑制劑和(2)Ras信號傳導途徑抑制劑以誘導癌細胞死亡和腫瘤消退。
文檔編號A61K31/505GK1479630SQ01820103
公開日2004年3月3日 申請日期2001年10月5日 優先權日2000年10月5日
發明者喬治Q·戴利, 喬治Q 戴利 申請人:喬治Q·戴利, 喬治Q 戴利