一種用於治療耳聾耳鳴的響鈴草提取物、製備方法及應用的製作方法
2023-11-08 03:22:17 2
專利名稱：一種用於治療耳聾耳鳴的響鈴草提取物、製備方法及應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種用於治療耳聾耳鳴的中藥提取物，更具體的說涉及一種用於治療耳聾耳鳴的響鈴草提取物、製備方法及應用。
背景技術：
響鈴草是四川省廣安地區民間草藥，藥用歷史悠久，性味微酸、寒，歸肺、肝、腎經，主要用於治療耳聾耳鳴，腎虛及療毒惡瘡等，療效確切；經我們鑑定響鈴草為豆科豬屎豆屬植物假地藍的全草或帶根全草。主產於雲南、四川、貴州等地。響鈴草始載於《滇南本草》「斂肺氣，止咳，消痰，定喘。」《滇南本草圖說》「治石淋內結，搗爛敷瘡。」《本草便方》「補中益氣，療耳鳴，頭目眩暈，崩淋。又瀉火清熱，平肝風，消腫痛。」《分類草藥性》「(治)耳聾腎虛，補脾腎。」《四川中藥志》「補中益氣，治耳聾耳鳴，頭目眩暈，腎虧遺精及婦女幹血疥。」中藥辭海第二卷中記載其功效主要為養肝滋腎，止咳平喘，利水通淋， 調經；主治頭暈目眩，耳聾耳鳴，腎炎，肝炎，支氣管炎，哮喘，膀耽炎，扁桃體炎，腮腺炎，淋巴結炎，月經不調，白帶，療毒，惡瘡。民間臨床大量應用治療耳聾耳鳴，腎虛及療毒惡瘡等。現代對響鈴草末見研究報導，有關於同屬植物豬屎豆的研究資料顯示該屬植物主要含有生物鹼和黃酮類成分，有-定的抗腫瘤活性。耳聾耳鳴是常見病和多發病，患者中57. 7% 分布於老年人群，近年來，兒童及青少年耳聾，尤其兒童因病毒感染及氨基糖普類抗生素的應用，使發病率更有增加的趨勢，自身免疫性耳聾亦受到國內外醫學界的重視。耳聾耳鳴為-類多發的疑難病，耳聾耳鳴藥物治療歷來是世界醫學界的難題。中醫有「腎主耳」，「腎虛則耳聾」的理論，以補腎填精，活血通竅，延緩衰老為治則進行藥物預防和治療是-條可行的途徑。因此，治療耳聾耳鳴的中藥新藥具有標本兼治的優勢和特點。但是，治療耳聾的中西藥物極少，幾無新藥上市，滿足不了臨床患者的需求，因此耳聾耳鳴藥物的開發具有現實性和前瞻性產品投放市場後，可獲得重大的經濟效益和社會效益。響鈴草養肝滋腎等作用， 在民間廣泛應用治療各種原因引起的耳聾耳鳴以及療毒惡瘡等己有上百年歷史，有極其顯著的療效141，起到標本兼治之功，據筆者初步統計，在報導的治療耳聾耳鳴的單方驗方中含有響鈴草的達50%之多，且有多是以單味藥響鈴草來治療，但大多是煎湯服用，未形成有服用方便、療效確切、有市場競爭力的產品。
發明內容
為解決上述問題本發明提供了一種用於治療耳聾耳鳴的響鈴草提取物的製備方法，包括以下步驟
1)將響鈴草藥材粉碎，用藥材3倍體積石油醚或汽油回流3次，過濾得到響鈴草的固體殘渣，揮去有固體殘渣的有機溶劑，得到脫脂響鈴草；
2)將脫脂響鈴草加入乙醇提取溶劑浸泡超聲預處理，乙醇提取溶劑溫浸提取3次；
3)過濾合併步驟2)中溫浸提取液，回收至無乙醇，靜置冷卻，離心除去固體雜質，得到響鈴草提取液；4)將響鈴草提取液上聚醯胺柱進行分離純化，得到用於治療耳聾耳鳴的響鈴草提取物。步驟2)所述超聲提取的條件為頻率20KHz 25HKz，每次10秒，間隔10秒，超聲總時長20分鐘。步驟2)所述的溫浸條件為提取溫度55 65°C，固液比為1 2，乙醇濃度為40 60%。步驟4)所述的聚醯胺柱分離條件為聚醯胺柱黃酮最大吸附量為20. 15mg/g,上樣流速3BV/h，乙醇洗脫的濃度依次為30%、40%、50%。上述方法製備得到用於治療耳聾耳鳴的響鈴草提取物，其中，響鈴草提取物含有黃酮類、黃酮醇類、二氫黃酮類、二氫黃酮醇類、異黃酮類、花色素類等黃酮化合物及其與糖類形成的苷。所述的用於治療耳聾耳鳴的響鈴草提取物在製備治療耳聾耳鳴藥物中的應用。本發明的有益技術效果是藥理實驗證明本發明提供的治療耳聾耳鳴的響鈴草提取物能抑制硫酸慶大黴素進一步造成的聽力下降，能預防慶大黴素注射後引起的動物聽力下降作用；在臨床運用中，對於輕度耳聾的有效率為100%，對於中、重度耳聾的有效率也高於 50%O
具體實施例方式實施例1響鈴草提取物的製備
將響鈴草乾燥粉碎過10目篩，每份稱取乾燥的響鈴草10 g，加入-定量的提取溶劑，進行超聲波預處理。超聲波處理條件為頻率20KHZ 25KHZ，功率100W，每次10s，間隔10s， 超聲波輸出總時間20 min。超聲波處理後，以-定體積濃度的乙醇為溶劑進行溫浸提取。以乙醇濃度、固液比、提取溫度、提取時間、提取次數為考察因素，做單因素試驗。根據單因素試驗結果，選擇乙醇濃度、提取時間、提取溫度3個因素，進行L9(34)的正交試驗，對響鈴草總黃酮提取條件進行優化。選取乙醇濃度30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%，固液比 1:30，提取時間 2 h，提取溫度60°C，提取次數1次進行提取。隨著乙醇濃度的升高，總黃酮提取率也逐漸增大，當乙醇濃度達到50%時，提取率達到最大，為1.78%，隨著乙醇濃度的繼續增加，提取率開始下降，如表1所示。表1乙醇濃度對總黃酮轉移率的影響
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所以，選擇正交試驗中乙醇濃度的3個水平為40%，50%，60%。選取固液比1:2，1:3，1:4，1:5，1:6 (g/mL)，乙醇濃度50%，提取時間2 h，提取溫度60°C，提取次數1次進行提取。隨著固液比的增加，提取率變化不大。如果固液比過大，會給後續的過濾、濃縮等工作帶來不便，從節約溶劑的角度考慮，確定固液比為l:2(g/ mL) ο選取提取時間0. 5、1、1.5、2、2. 5、3 h，乙醇濃度50%，固液比1 2 (g/mL)，提取溫度60°C，提取次數1次進行提取，如表2所示。表2提取固液比對總黃酮轉移率的影響
權利要求
1.一種用於治療耳聾耳鳴的響鈴草提取物的製備方法，其特徵在於包括以下步驟1)將響鈴草藥材粉碎，用藥材3倍體積石油醚或汽油回流3次，過濾得到響鈴草的固體殘渣，揮去有固體殘渣的有機溶劑，得到脫脂響鈴草；2)將脫脂響鈴草加入乙醇提取溶劑浸泡超聲預處理，乙醇提取溶劑溫浸提取3次；3)過濾合併步驟2)中溫浸提取液，回收至無乙醇，靜置冷卻，離心除去固體雜質，得到響鈴草提取液；4)將響鈴草提取液上聚醯胺柱進行分離純化，得到用於治療耳聾耳鳴的響鈴草提取物。
2.根據權利要求1所述的用於治療耳聾耳鳴的響鈴草提取物的製備方法，其特徵在於步驟2)所述超聲提取的條件為頻率20KHz 25HKz，每次10秒，間隔10秒，超聲總時長20分鐘。
3.根據權利要求1所述的用於治療耳聾耳鳴的響鈴草提取物的製備方法，其特徵在於步驟2)所述的溫浸條件為提取溫度55 65°C，固液比為1:2，乙醇濃度為40 60%。
4.根據權利要求1所述的用於治療耳聾耳鳴的響鈴草提取物的製備方法，其特徵在於步驟4)所述的聚醯胺柱分離條件為聚醯胺柱黃酮最大吸附量為20. 15mg/g,上樣流速!3BV/h，乙醇洗脫的濃度依次為30%、40%、50%。
5.一種用於治療耳聾耳鳴的響鈴草提取物，其特徵在於採用權利要求1、2、3、4所述方法製備得到用於治療耳聾耳鳴的響鈴草提取物，其中，響鈴草提取物含有黃酮類、黃酮醇類、二氫黃酮類、二氫黃酮醇類、異黃酮類、花色素類等黃酮化合物及其與糖類形成的苷。
6.根據權利要求1-5之一所述的用於治療耳聾耳鳴的響鈴草提取物在製備治療耳聾耳鳴藥物中的應用。
全文摘要
本發明提供了一種用於治療耳聾耳鳴的響鈴草提取物、製備方法及應用；藥理實驗證明本發明提供的治療耳聾耳鳴的響鈴草提取物能抑制硫酸慶大黴素進一步造成的聽力下降，能預防慶大黴素注射後引起的動物聽力下降作用；在臨床運用中，對於輕度耳聾的有效率為100%，對於中、重度耳聾的有效率也高於50%。
文檔編號A61K36/48GK102335226SQ201110328268
公開日2012年2月1日 申請日期2011年10月26日 優先權日2011年10月26日
發明者劉筱琴, 唐倩, 張雪, 曾雪, 楊元娟, 楊宗發, 楊憲, 楊水平, 陳竹 申請人:重慶醫藥高等專科學校