肝素鈉生產新工藝的製作方法

2023-11-11 17:58:17

專利名稱：肝素鈉生產新工藝的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種肝素鈉的生產工藝，尤其是一種利用生物酶解低溫方法從 豬小腸黏膜中提取肝素鈉的生產新工藝。
背景技術：
肝素鈉是由生物材料中提取出來的天然多糖物質，在臨床使用中受到廣大患 者和醫生的青睞，廣泛用於防治各種心腦血管疾病， 一直是最有效的抗凝血藥物， 特別是對動靜脈血栓、血塞具有獨特療效。肝素鈉廣泛分布於哺乳動物的腸黏膜、 肺、肝中，特別是豬小腸黏膜中含量最高。目前國內生產肝素鈉的方法，主要是 鹽解法和酸解法，這二種方法都是採用豬小腸黏膜為原料，在鹼性條件下通過鹽 解酶解，除去部分蛋白質後，通過三甲胺委銨性強鹼性陽離子交換樹脂吸附及洗 脫，在洗脫液中加以乙醇沉澱即得肝素鈉初級原料出售，其缺點是生產周期長為
48h，反應溫度高為95 100'C，能源消耗大,水解不完全，純度低，收率低，
效價低，產生大量的廢腸渣和廢水，汙染環境。

發明內容
本發明的目的在於為克服現有技術的不足而提供一種利用生物酶解低溫提 取肝素鈉的新工藝，其生產周期短、反應溫度低、純度高、收率高、效價低、無 汙染物排出。
本發明的目的由以下技術方案來實現，其生產工藝包括以下步驟
①酶解
將新鮮豬腸黏膜吸入反應鍋，量取體積，用Na0H調PH至8.5 9.5，溫度在45 50'C，按豬腸黏膜的體積加入3 5%的NaCL、0. 03 0. 036%的鮮胰漿、0. 03~ 0.036%的蛋白酶，攪拌1 2小時，保溫2小時，升溫至70 80'C，停止加溫， 用濾布過濾，濾液吸入吸附罐；
② 樹脂交換吸附
將濾液降溫到50'C以下，量取體積，調ra至8. 5 9. 0，按每1000升濾液 加入8升肝素鈉專用樹脂，攪拌吸附8小時以上，收集肝素鈉專用樹脂，棄去廢 液；測定排放廢液中肝素鈉的含量，要求在1.2以下；
③ 樹脂洗滌
先用自來水及溫水洗滌，然後用4 4.2度的鹽水溶液洗滌肝素鈉專用樹脂 30分鐘，去除樹脂表面雜質；
④ 肝素洗脫
第一次洗脫，用NaCL溶液與肝素鈉專用樹脂體積按l: l的比例混合，再加 入0. 196的生物專用緩衝劑，攪拌均勻，洗脫3小時，洗脫液中NaCL的濃度為18 20度；第二次洗脫，調NaCL溶液至18度以上，然後按1: 1的比例加入肝素鈉 專用樹脂，攪拌均勻，洗脫液中NaCL的濃度為16 18度，將二次洗脫液合併；
(D酒精沉澱；
保證洗脫液的KI值在6.0 6.5範圍內，緩慢加入酒精，攪拌均勻，酒精濃 度為35 40度，沉澱8小時以上，棄去上清液，收集沉澱物，在70 80'C的溫 度下乾燥IO小時以上；
復沉
將乾燥物用純水溶解，水量為乾燥物的10倍，用NaOH調ra至9.0 9.5， 吸入反應罐，用框式壓濾機過濾除去雜質，再用NaOH溶液調HI至6. 0 6. 5， 再緩慢加入酒精，攪拌均勻，使酒精濃度在42 46。範圍內，沉澱8小時以上；
⑦ 脫水乾燥
收集復沉物，離心脫水，裝入搪瓷盤中，在70 80'C溫度下乾燥20小時以 上，即得成品肝素鈉；
⑧ 粉碎、混合和包裝
收集成品肝素鈉進行粉碎，混合4小時，送樣檢測合格後，包裝即可出廠。 所述的蛋白酶是胰蛋白酶，使腸黏膜中肝素充分完全裂解釋放在提取溶液 中；所述的肝素鈉專用樹脂為強鹼性陰離子交換樹脂，強化了其承載能力，微孔數目及活性，提高了肝素鈉的收率、純度、光吸收能力，降低了反應時間；所述 生物專用緩衝液，由膠亞硫酸食品改良劑和水組成，其配比為2: 1，保證在反 應中，小分子蛋白質儘量不與有效的粘多糖反應、結合，而單一的大分子量蛋白 質與從黏膜中分離出來的有效粘多糖分子相結合，從而形成純度髙、效價合理的 肝素；
由於本發明採用生物酶粉替代鹽解法和酶解法中的鮮胰漿，對酶解的反應時 間、溫度和PH值等工藝參數進行了優化，解決了現有技術加工時間長為48小時， 溫度高為95 100'C，提取肝素收率低、工藝操作複雜、廢渣、廢水排放超標等 問題，工藝流程科學合理，酶解反應完全徹底，反應時間縮短為30h，生產能耗 低，反應溫度低為70 80'C，肝素提取收率達90%以上，肝素單位產量高，每億 單位肝素僅需豬小腸1500 1700副，生產成本低，操作簡單方便，自動化控制 程度高，增加經濟效益30%以上，工藝成熟穩定，無廢腸渣和超標廢水排放，符 合國家"節能降耗減排增收"的發展方向。
具體實施例方式
實施例1
① 酶解
將新鮮豬腸黏膜吸入反應鍋，量取體積，用NaOH調ra至8.5 9.5,溫度在 45 50°C,按豬腸黏膜的體積加入3 5%的NaCL、0. 03 0. 036%的鮮胰漿、0. 03 0.036%的胰蛋白酶，攪拌1 2小時，保溫2小時，開溫至70 80'C,停止加溫， 用濾布過濾，濾液吸入吸附罐；
② 樹脂交換吸附
將濾液降溫到50'C以下，量取體積，調HI至8.5 9.0，按每1000升濾液 加入8升強鹼性陰離子交換樹脂，攪拌吸附8小時以上，收集肝素鈉專用樹脂， 棄去廢液；測定排放廢液中肝素鈉的含量，要求在1.2以下；
③ 樹脂洗滌
先用自來水及溫水洗滌，然後用4 4. 2度的鹽水溶液洗滌肝素鈉專用樹脂 30分鐘，去除樹脂表面雜質；(D肝素洗脫
生物專用緩衝劑第一次洗脫用NaCL溶液與肝素鈉專用樹脂體積按1: 1的比 例混合，再加入0. 1%的生物專用緩衝劑，生物專用緩衝劑由膠亞硫酸食品改良 劑和水組成，配比為2: 1，然後攪拌均勻，洗脫3小時，洗脫液中NaCL的濃度 為18 20度；第二次洗脫調NaCL溶液至18度以上，然後按1: 1的比例加入肝 素鈉專用樹脂，攪拌均勻，洗脫液中NaCL的濃度為1S 18度，將二次洗脫液合 並；
⑤酒精沉澱；
保證洗脫液的PH值在6.0 6.5範圍內，緩慢加入酒精，攪拌均勻，酒精濃 度為35 40度，沉澱8小時以上，棄去上清液，收集沉澱物，在70 80。C的溫 度下乾燥IO小時以上；
(D復沉
將乾燥物用純水溶解，水量為乾燥物的10倍，用NaOH調ra至9.0 9.5， 吸入反應罐，用框式壓濾機過濾除去雜質，再用NaOH溶液調PH至6. 0 6. 5， 再緩慢加入酒精，攪拌均勻，使酒精濃度在42 46。範圍內，沉澱8小時以上;
⑦ 收集復沉物，離心脫水，裝入搪瓷盤中，在70 80'C溫度下乾燥20小時 以上，即得成品肝素鈉；
⑧ 粉碎、混合和包裝
收集成品肝素鈉進行粉碎，混合4小時，送樣檢測合格後，包裝即可出廠。
權利要求
1、一種肝素鈉生產新工藝，其特徵在於包括以下步驟①酶解將新鮮豬腸黏膜吸入反應鍋，量取體積，用NaOH調PH至8.5～9.5，溫度在45～50℃，按豬腸黏膜的體積加入3～5％的NaCL、0.03～0.036％的鮮胰漿、0.03～0.036％的蛋白酶，攪拌1～2小時，保溫2小時，升溫至70～80℃，停止加溫，用濾布過濾，濾液吸入吸附罐；②樹脂交換吸附將濾液降溫到50℃以下，量取體積，調PH至8.5～9.0，按每1000升濾液加入8升肝素鈉專用樹脂，攪拌吸附8小時以上，收集肝素鈉專用樹脂，棄去廢液；測定排放廢液中肝素鈉的含量，要求在1.2以下；③樹脂洗滌先用自來水及溫水洗滌，然後用4～4.2度的鹽水溶液洗滌肝素鈉專用樹脂30分鐘，去除樹脂表面雜質；④肝素洗脫第一次洗脫，用NaCL溶液與肝素鈉專用樹脂體積按1∶1的比例混合，再加入0.1％的生物專用緩衝劑，攪拌均勻，洗脫3小時，洗脫液中NaCL的濃度為18～20度；第二次洗脫，調NaCL溶液至18度以上，然後按1∶1的比例加入肝素鈉專用樹脂，攪拌均勻，洗脫液中NaCL的濃度為16～18度，將二次洗脫液合併；⑤酒精沉澱保證洗脫液的PH值在6.0～6.5範圍內，緩慢加入酒精，攪拌均勻，酒精濃度為35～40度，沉澱8小時以上，棄去上清液，收集沉澱物，在70～80℃的溫度下乾燥10小時以上；⑥復沉將乾燥物用純水溶解，水量為乾燥物的10倍，用NaOH調PH至9.0～9.5，吸入反應罐，用框式壓濾機過濾除去雜質，再用NaOH溶液調PH至6.0～6.5，再緩慢加入酒精，攪拌均勻，使酒精濃度在42～46°範圍內，沉澱8小時以上；⑦脫水乾燥收集復沉物，離心脫水，裝入搪瓷盤中，在70～80℃溫度下乾燥20小時以上，即得成品肝素鈉；⑧粉碎、混合和包裝收集成品肝素鈉進行粉碎，混合4小時，送樣檢測合格後，包裝即可出廠。
2、 根據權利要求1所述的肝素鈉生產新工藝，其特徵在於所述的蛋白酶 是胰蛋白酶。
3、 根據權利要求1所述的肝素鈉生產新工藝，其特徵在於；所述的肝素鈉 專用樹脂為強鹼性陰離子交換樹脂。
4、 根據權利要求1所述的肝素鈉生產新工藝，其特徵在於所述生物專用 緩衝液由膠亞硫酸食品改良劑和水組成，其配比為2: 1。
全文摘要
本發明為一種肝素鈉生產新工藝，其包括以下步驟酶解、樹膠交換吸附、樹脂洗滌、肝素洗脫、酒精沉澱、復沉、脫水乾燥、粉碎、混合和包裝。本發明工藝流程成熟、操作方便，無廢腸渣和超標廢水排出，酶解反應完全徹底，反應時間縮短為30小時，生產能耗低，反應溫度低為70-80℃，肝素提取率達90％以上，肝素單位產量高，每億單位肝素僅需豬小腸1700副，生產成本低，每億單位增加經濟效益30％以上，無汙腸渣和超標廢水排放，適合於大規模生產。
文檔編號C12P19/00GK101649336SQ200810045880
公開日2010年2月17日 申請日期2008年8月25日 優先權日2008年8月25日
發明者劉泰山, 胡小翠, 靜 蔡, 蔡天貴, 蔡成良, 蔡承儒 申請人:射洪縣天貴畜產品加工廠