一種積雪草苷酸水解製備積雪草酸的方法

2023-12-03 09:59:46

專利名稱：一種積雪草苷酸水解製備積雪草酸的方法
技術領域：
本發明涉及一種積雪草苷酸水解製備積雪草酸的方法。
背景技術：
積雪草Cewfe〃aos/a"ca (L. ) Urban為傘形科積雪草屬植物，在許多國 家和地區傳統醫藥領域中的應用有悠久的歷史，我國中醫中藥對積雪草的內服 和外用已有兩千年的歷史。積雪草味苦、辛，性寒，無毒，歸肝、脾、腎、胃 經。古藥典記載主要用於治療溼熱黃疸、中暑腹瀉、砂淋血淋、癰腫瘡毒、跌 打損傷等病症。現代藥理學研究和應用表明，積雪草可用於治療抑鬱症、皮膚 創傷、胃潰瘍、傳染性肝炎、皮膚病和流行性腦脊髓膜炎等。
積雪草的藥理作用同它的化學成分是密不可分的。積雪草的化學成分十分 複雜，其主要成分有三萜類、多炔烯烴類、黃酮類和揮髮油類等。此外，積雪 草中還含有氯原酸、內消旋肌醇、黃酮醇、脂肪酸、天胡荽鹼、甾醇、蠟、葉 綠素、烴類、木脂素類、糖、鞣質和多元酚類等成分。積雪草的化學成分中， 三萜類皂苷及其皂苷元是研究的最早、生物學活性研究較深入的一大類組分， 其中積雪草酸及其衍生物是最主要的活性成分之一。
積雪草苷(Asiaticoside或Madecassol， CAS No.:16830國15-2)，分子式為 C48H78019，分子量為959.12，外觀為白色精細粉末,口感微苦，熔點230 233。C, 積雪草苷在水中極微溶解，溶於乙醇和吡啶。積雪草酸(Asiatic acid, CAS No.:464-92-6)是白色針狀結晶，無臭，味苦，分子式為C3。H4805，分子量為488.70， 熔點300 305。C，積雪草酸不溶於水，溶於乙醇。積雪草苷和積雪草酸結構上屬 於烏蘇垸型的五環三萜類，其結構式分別如下
3積雪草苷的結構式
積雪草酸的結構式
積雪草酸的藥理作用十分廣泛，常用來治療燒傷或慢性潰瘍，治療肺結核 或麻風病造成的皮膚變形，還對心血管疾病及肝中毒等具有一定的療效。近期的研究顯示，積雪草酸還具有抗抑鬱、抗纖維化、抗菌、抗腫瘤和抗氧化等功 效。資料表明，積雪草酸是積雪草苷在胃腸道內代謝的活性形式，給藥時直接 使用積雪草酸來代替積雪草苷，則無須經過胃腸道細菌的代謝，使活性作用更 直接，從而可以克服積雪草苷給藥劑量難以控制的問題。而且，從積雪草酸出
發，通過半合成可以製備出一系列積雪草酸衍生物，如專利CN1168662、 CN1238755、 CN1248918等所述，獲得了部分積雪草酸A環、或E環17位羧基 上的衍生物，發現這些產品具有新的生物活性，可以用於保護肝、治療痴呆等 方面，從而有效地提高積雪草酸的生物利用度，為積雪草相關新藥的開發提供 了廣闊的前景。因此，積雪草酸的生產製備對更好地利用積雪草資源具有重要 的意義。
目前，積雪草酸製備方法主要是從積雪草原草中直接提取，經過繁瑣的萃 取、層析等分離純化過程而獲得，較為費時費力，而且消耗大量溶劑。資料表 明，積雪草中的積雪草酸含量並不高，從積雪草中直接獲得的積雪草酸的量相 對較少，而積雪草苷的含量大大高於積雪草酸，且積雪草苷的分離純化方法比 較成熟，相對簡單，此外積雪草苷較易水解，因此從積雪草苷出發進行水解而 獲得積雪草酸是一種有效的途徑。
本發明擬在含有機溶劑的無機酸水溶液中水解積雪草苷結合結晶工藝製備 積雪草酸。本發明積雪草酸產品收率和純度高，產品可用作原料藥或積雪草酸 衍生物的製備；同時該方法工藝過程簡單、所需投資少、易於實現工業化。

發明內容
本發明的目的是提供一種積雪草苷酸水解製備積雪草酸的方法。 方法的步驟如下
1) 在有機溶劑I、水和無機酸的混合溶液中加入積雪草苷原料，在45 9(TC 下水解1~24 h;
2) 水解液減壓濃縮除去有機溶劑I，沉澱後過濾，得沉澱物；
3) 沉澱物晾乾後加入有機溶劑II溶解、過濾，濾液加入水結晶，經過濾後 得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得積雪草酸產品。
其中步驟1)中的有機溶劑I為甲醇或乙醇，有機溶劑I、水和無機酸的混合 溶液中有機溶劑I的體積百分比為10 90%;步驟l)中的無機酸為鹽酸或硫酸， 有機溶劑I、水和無機酸的混合溶液中無機酸的濃度為0.1-2.0 N;步驟l)中的 水解溫度為55 80。C、水解時間為2~15h;步驟3)中的有機溶劑II為甲醇或乙醇， 有機溶劑II的用量為10 50mL/g沉澱物(經晾乾後稱量)；步驟3)中的水的用量為有機溶劑II體積的6~12倍。
步驟l)中有機溶劑I的作用是增加積雪草苷原料的溶解度，積雪草苷原料加 入到有機溶劑I、水和無機酸的混合溶液中宜形成均相溶液，若有沉澱，需要過 濾掉。
水解反應和水解液減壓濃縮除去有機溶劑I過程中產生沉澱屬於正常現象。 本發明積雪草酸產品收率和純度高(積雪草酸質量含量^90%)，產品可用
作原料藥或積雪草酸衍生物的製備；同時該方法工藝過程簡單、所需投資少、
易於實現工業化。


附圖是積雪草苷酸水解製備積雪草酸的工藝流程簡圖。
具體實施例方式
本發明所使用的積雪草苷原料採用專利"一種溶劑結晶法製備高純度積雪 草苷的工藝"(發明人呂秀陽，鄭興芳；申請號200810162211.X;申請日2008 年11月27日)中的實施例18的方法製備，具體過程如下取100g積雪草總苷 原料加入燒杯中，加入500 mL 二甲基甲醯胺，溶解後過濾得到積雪草總苷溶液； 積雪草總苷溶液中加入3500 mL乙酸乙酯於室溫下進行結晶，12h後經過濾得到 固形物，固形物經真空乾燥後得積雪草苷產品。重複10次上述過程，共得到280 g積雪草苷產品，經HPLC檢測，積雪草苷的質量含量為91.0%。
積雪草苷和積雪草酸含量採用高效液相色譜法(HPLC)測定，採用外標法 定量。採用AgilentllOO液相色譜分析系統，分析條件如下Eclipse XDB—C18 反相柱(<D4.6mm x250mm， 5|am， Agilent);採用梯度洗脫，流速0.6mL/min; 柱溫為35'C;檢測波長210nm。
表1 HPLC法測定積雪草苷和積雪草酸的流動相梯度
時間(min)乙腈 水 醋酸水溶液(0.3%)
010855
385535
4555355
5510855
以下用實施例對本發明的工藝方法作進一步的說明。本發明的保護範圍不 受實施例的限制，本發明的保護範圍由權利要求書決定。
實施例中收率的計算公式如下
6收率-積雪草酸產品的量x產品中積雪草酸的質量含量/積雪草酸產品的理論產量 積雪草酸產品的理論產量^積雪草苷原料的量x積雪草苷的質量含量
x488.7/959.12
實施例1
在2L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入甲醇、水和硫酸的混合溶液1000 mL，其中甲醇的體積百分比為10%，硫酸的當量濃度為O.l N;三口燒瓶放入 7(TC的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入5g積雪草苷原料，水解15h;水解 液減壓濃縮除去甲醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得2.0 g;收 集晾乾後的沉澱物加入20mL甲醇溶解、過濾，濾液加入120mL水結晶，經過 濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得1.0g積雪草酸產品，產品經HPLC分 析積雪草酸的質量含量85.2%,收率36.8%。 實施例2
在2L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入甲醇、水和鹽酸的混合溶液1000 mL，其中甲醇的體積百分比為20%，鹽酸的當量濃度為0.5 N;三口燒瓶放入 65'C的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入6g積雪草苷原料，水解10h;水解 液減壓濃縮除去甲醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得2.5 g;收 集晾乾後的沉澱物加入50 mL乙醇溶解、過濾，濾液加入350mL水結晶，經 過濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得1.6g積雪草酸產品，產品經HPLC 分析積雪草酸的質量含量卯.1%，收率51.8%。 實施例3
在2L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入甲醇、水和硫酸的混合溶液1000 mL，其中甲醇的體積百分比為30%，硫酸的當量濃度為1 N;三口燒瓶放入60°C 的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入8g積雪草苷原料，水解8h;水解液減 壓濃縮除去甲醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得3.6 g;收集晾 幹後的沉澱物加入108mL甲醇溶解、過濾，濾液加入864mL水結晶，經過濾 後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得2.2g積雪草酸產品，產品經HPLC分析 積雪草酸的質量含量91.4%，收率54.2%。 實施例4
在2L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入甲醇、水和鹽酸的混合溶液1000 mL，其中甲醇的體積百分比為40%，鹽酸的當量濃度為1.5 N;三口燒瓶放入 60'C的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入10g積雪草苷原料，水解6h;水解 液減壓濃縮除去甲醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得4.7 g;收
7集晾乾後的沉澱物加入188rnL乙醇溶解、過濾，濾液加入1692mL水結晶，經 過濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得3.0g積雪草酸產品，產品經HPLC 分析積雪草酸的質量含量90.3%，收率58.4%。 實施例5
在2L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入甲醇、水和硫酸的混合溶液1000 mL，其中甲醇的體積百分比為50%，硫酸的當量濃度為2N;三口燒瓶放入55°C 的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入12g積雪草苷原料，水解9h;水解液減 壓濃縮除去甲醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得5.7 g;收集晾 幹後的沉澱物加入285 mL甲醇溶解、過濾，濾液加入2850mL水結晶，經過濾 後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得3.6g積雪草酸產品，產品經HPLC分析 積雪草酸的質量含量92.3%，收率59.7%。 實施例6
在2L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入甲醇、水和鹽酸的混合溶液1000 mL，其中甲醇的體積百分比為60%,鹽酸的當量濃度為2N;三口燒瓶放入55°C 的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入14g積雪草苷原料，水解10h;水解液 減壓濃縮除去甲醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得7.0 g;收集 晾乾後的沉澱物加入70mL乙醇溶解、過濾，濾液加入770mL水結晶，經過濾 後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得4.0g積雪草酸產品，產品經HPLC分析 積雪草酸的質量含量90.5%,收率55.8%。 實施例7
在2L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入甲醇、水和硫酸的混合溶液1000 mL，其中甲醇的體積百分比為70%，硫酸的當量濃度為1.6 N;三口燒瓶放入 5(TC的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入16g積雪草苷原料，水解18h;水 解液減壓濃縮除去甲醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得8.2 g; 收集晾乾後的沉澱物加入164mL甲醇溶解、過濾，濾液加入1968mL水結晶， 經過濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得4.5 g積雪草酸產品，產品經HPLC 分析積雪草酸的質量含量91.3%，收率55.4%。 實施例8
在2 L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入甲醇、水和鹽酸的混合溶液1000 mL，其中甲醇的體積百分比為80%，鹽酸的當量濃度為1.2 N;三口燒瓶放入 5(TC的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入18g積雪草苷原料，水解20h;水 解液減壓濃縮除去甲醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得9.3 g;收集晾乾後的沉澱物加入279mL乙醇溶解、過濾，濾液加入1674mL水結晶， 經過濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得5.1 g積雪草酸產品，產品經HPLC 分析積雪草酸的質量含量90.2%，收率55.1%。 實施例9
在2L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入甲醇、水和硫酸的混合溶液1000 mL，其中甲醇的體積百分比為90%，硫酸的當量濃度為0.8 N;三口燒瓶放入 45'C的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入20g積雪草苷原料，水解24h;水 解液減壓濃縮除去甲醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得10.8 g; 收集晾乾後的沉澱物加入432mL甲醇溶解、過濾，濾液加入3024mL水結晶， 經過濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得5.4 g積雪草酸產品，產品經HPLC 分析積雪草酸的質量含量89.3%，收率52%。 實施例10
在2L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入甲醇、水和硫酸的混合溶液1000 mL，其中甲醇的體積百分比為20%，硫酸的當量濃度為0.6 N;三口燒瓶放入 7(TC的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入8g積雪草苷原料，水解5h;水解 液減壓濃縮除去甲醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得3.5 g;收 集晾乾後的沉澱物加入175mL乙醇溶解、過濾，濾液加入1400mL水結晶，經 過濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得2.3§積雪草酸產品，產品經HPLC 分析積雪草酸的質量含量93.0%，收率57.7%。 實施例11
在2 L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入甲醇、水和硫酸的混合溶液1000 mL，其中甲醇的體積百分比為40%，硫酸的當量濃度為0.2 N;三口燒瓶放入 65'C的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入10g積雪草苷原料，水解6h;水解 液減壓濃縮除去甲醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得4.9 g;收 集晾乾後的沉澱物加入49mL甲醇溶解、過濾，濾液加入441mL水結晶，經過 濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得3.3 g積雪草酸產品，產品經HPLC分 析積雪草酸的質量含量91.5%，收率65.1%。 實施例12
在2L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入甲醇、水和硫酸的混合溶液1000 mL，其中甲醇的體積百分比為60%，硫酸的當量濃度為0.4 N;三口燒瓶放入 6(TC的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入12g積雪草苷原料，水解7h;水解 液減壓濃縮除去甲醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得6.0 g;收集晾乾後的沉澱物加入120mL乙醇溶解、過濾，濾液加入1200mL水結晶，經 過濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得3.9g積雪草酸產品，產品經HPLC 分析積雪草酸的質量含量92.6%，收率64.9%。 實施例13
在2L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入甲醇、水和硫酸的混合溶液1000 mL，其中甲醇的體積百分比為80%，硫酸的當量濃度為1 N;三口燒瓶放入60。C 的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入16g積雪草苷原料，水解8h;水解液減 壓濃縮除去甲醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得8.3 g;收集晾 幹後的沉澱物加入249mL甲醇溶解、過濾，濾液加入2739mL水結晶，經過濾 後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得5.1g積雪草酸產品，產品經HPLC分析 積雪草酸的質量含量91.4%，收率62.8%。 實施例14
在2L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入乙醇、水和硫酸的混合溶液1000 mL，其中乙醇的體積百分比為10%，硫酸的當量濃度為O.l N;三口燒瓶放入 9(TC的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入5g積雪草苷原料，水解12h;水解 液減壓濃縮除去乙醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得1.8 g;收 集晾乾後的沉澱物加入72mL乙醇溶解、過濾，濾液加入864mL水結晶，經過 濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得0.9g積雪草酸產品，產品經HPLC分 析積雪草酸的質量含量86.5%,收率33.6%。 實施例15
在2L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入乙醇、水和鹽酸的混合溶液1000 mL，其中乙醇的體積百分比為20%，鹽酸的當量濃度為0.5 N;三口燒瓶放入 8(TC的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入6g積雪草苷原料，水解4h;水解 液減壓濃縮除去乙醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得2.4 g;收 集晾乾後的沉澱物加入120mL甲醇溶解、過濾，濾液加入720mL水結晶，經 過濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得1.8g積雪草酸產品，產品經HPLC 分析積雪草酸的質量含量90.4%，收率58.5%。 實施例16
在2 L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入乙醇、水和硫酸的混合溶液1000 mL，其中乙醇的體積百分比為30%，硫酸的當量濃度為1 N;三口燒瓶放入75°C 的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入8g積雪草苷原料，水解3h;水解液減 壓濃縮除去乙醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得3.5 g;收集晾乾後的沉澱物加入35mL乙醇溶解、過濾，濾液加入245mL水結晶，經過濾後 得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得2.7g積雪草酸產品，產品經HPLC分析積 雪草酸的質量含量91.4%，收率66.5%。 實施例17
在2 L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入乙醇、水和鹽酸的混合溶液1000 mL，其中乙醇的體積百分比為40%，鹽酸的當量濃度為1.5 N;三口燒瓶放入 7(TC的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入10g積雪草苷原料，水解4h;水解 液減壓濃縮除去乙醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得4.5 g;收 集晾乾後的沉澱物加入90mL甲醇溶解、過濾，濾液加入720mL水結晶，經過 濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得3.38積雪草酸產品，產品經HPLC分 析積雪草酸的質量含量92.2%，收率65.6%。 實施例18
在2L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入乙醇、水和硫酸的混合溶液1000 mL,其中乙醇的體積百分比為50X，硫酸的當量濃度為2N;三口燒瓶放入65°C 的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入12g積雪草苷原料，水解5h;水解液減 壓濃縮除去乙醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得5.6 g;收集晾 幹後的沉澱物加入168mL乙醇溶解、過濾，濾液加入1512mL水結晶，經過濾 後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得3.6g積雪草酸產品，產品經HPLC分析 積雪草酸的質量含量92.3%，收率59.7%。 實施例19
在2L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入乙醇、水和鹽酸的混合溶液1000 mL,其中乙醇的體積百分比為60%,鹽酸的當量濃度為2N;三口燒瓶放入60°C 的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入14g積雪草苷原料，水解7h;水解液減 壓濃縮除去乙醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得6.9 g;收集晾 幹後的沉澱物加入276mL甲醇溶解、過濾，濾液加入2760mL水結晶，經過濾 後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得4.2§積雪草酸產品，產品經HPLC分析 積雪草酸的質量含量91.4%，收率59.1%。 實施例20
在2L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入乙醇、水和硫酸的混合溶液1000 mL，其中乙醇的體積百分比為70°%，硫酸的當量濃度為1.6 N;三口燒瓶放入 55'C的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入16g積雪草苷原料，水解10h;水 解液減壓濃縮除去乙醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得8.1g;
ii收集晾乾後的沉澱物加入405 mL乙醇溶解、過濾，濾液加入4455mL水結晶， 經過濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得4.5 g積雪草酸產品，產品經HPLC 分析積雪草酸的質量含量91.0%，收率55.2%。 實施例21
在2 L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入乙醇、水和鹽酸的混合溶液1000 mL，其中乙醇的體積百分比為80%，鹽酸的當量濃度為1.2 N;三口燒瓶放入 5(TC的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入18g積雪草苷原料，水解18h;水 解液減壓濃縮除去乙醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得9.1 g; 收集晾乾後的沉澱物加入91 mL甲醇溶解、過濾，濾液加入1092 mL水結晶， 經過濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得5.5 g積雪草酸產品，產品經HPLC 分析積雪草酸的質量含量90.1%，收率59.4%。 實施例22
在2L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入乙醇、水和硫酸的混合溶液1000 mL,其中乙醇的體積百分比為90%,硫酸的當量濃度為0.8 N;三口燒瓶放入 45'C的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入20g積雪草苷原料，水解24h;水 解液減壓濃縮除去乙醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得10.9g; 收集晾乾後的沉澱物加入218mL乙醇溶解、過濾，濾液加入1526mL水結晶， 經過濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得5.7 g積雪草酸產品，產品經HPLC 分析積雪草酸的質量含量83.7%，收率51.4%。 實施例23
在2 L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入乙醇、水和硫酸的混合溶液1000 mL，其中乙醇的體積百分比為20%，硫酸的當量濃度為0.6 N;三口燒瓶放入 8(TC的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入8g積雪草苷原料，水解3h;水解 液減壓濃縮除去乙醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得3.4 g;收 集晾乾後的沉澱物加入102mL甲醇溶解、過濾，濾液加入816mL水結晶，經 過濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得2.6g積雪草酸產品，產品經HPLC 分析積雪草酸的質量含量92.8%,收率65.0%。 實施例24
在2 L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入乙醇、水和硫酸的混合溶液1000 mL，其中乙醇的體積百分比為40%，硫酸的當量濃度為0.2 N;三口燒瓶放入 7(TC的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入10g積雪草苷原料，水解14h;水 解液減壓濃縮除去乙醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得4.8g;收集晾乾後的沉澱物加入192mL乙醇溶解、過濾，濾液加入1728mL水結晶， 經過濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得3.0 g積雪草酸產品，產品經HPLC 分析積雪草酸的質量含量91.2%，收率59.0%。 實施例25
在2 L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入乙醇、水和硫酸的混合溶液1000 mL，其中乙醇的體積百分比為60%，硫酸的當量濃度為0.4 N;三口燒瓶放入 65"C的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入12g積雪草苷原料，水解10h;水 解液減壓濃縮除去乙醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得5.8 g; 收集晾乾後的沉澱物加入290mL甲醇溶解、過濾，濾液加入2900mL水結晶， 經過濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得3.3 g積雪草酸產品，產品經HPLC 分析積雪草酸的質量含量92.0%，收率54.6%。 實施例26
在2 L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入乙醇、水和硫酸的混合溶液1000 mL，其中乙醇的體積百分比為80%，硫酸的當量濃度為1N;三口燒瓶放入55。C 的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入16g積雪草苷原料，水解15h;水解液 減壓濃縮除去乙醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得8.3 g;收集 晾乾後的沉澱物加入166mL乙醇溶解、過濾，濾液加入1826mL水結晶，經過 濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得4.8g積雪草酸產品，產品經HPLC分 析積雪草酸的質量含量91.8%，收率59.4%。 實施例27
在2 L帶攪拌和水冷凝管的三口燒瓶中加入乙醇、水和硫酸的混合溶液1000 mL，其中乙醇的體積百分比為10%，硫酸的當量濃度為2N;三口燒瓶放入9(TC 的恆溫水浴中，開攪拌和冷凝水，加入5g積雪草苷原料，水解lh;水解液減 壓濃縮除去乙醇，沉澱後過濾，得沉澱物，沉澱物晾乾後稱重得1.9 g;收集晾 幹後的沉澱物加入76mL甲醇溶解、過濾，濾液加入912mL水結晶，經過濾後 得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得l.lg積雪草酸產品，產品經HPLC分析積 雪草酸的質量含量87.6%，收率41.6%。
1權利要求
1. 一種積雪草苷酸水解製備積雪草酸的方法，其特徵在於，方法的步驟如下1)在有機溶劑I、水和無機酸的混合溶液中加入積雪草苷原料，在45～90℃下水解1～24h；2)水解液減壓濃縮除去有機溶劑I，沉澱後過濾，得沉澱物；3)沉澱物晾乾後加入有機溶劑II溶解、過濾，濾液加入水結晶，經過濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得積雪草酸產品。
2. 根據權利要求1所述的一種積雪草苷酸水解製備積雪草酸的方法，其特 徵在於步驟l)中的有機溶劑I為甲醇或乙醇。
3. 根據權利要求1所述的一種積雪草苷酸水解製備積雪草酸的方法，其特 徵在於步驟l)有機溶劑I、水和無機酸的混合溶液中的有機溶劑I的體積百分比 為10 90% 。
4. 根據權利要求1所述的一種積雪草苷酸水解製備積雪草酸的方法，其特 徵在於步驟l)中的無機酸為鹽酸或硫酸。
5. 根據權利要求1所述的一種積雪草苷酸水解製備積雪草酸的方法，其特 徵在於步驟l)有機溶劑I、水和無機酸的混合溶液中無機酸的濃度為0.1-2.0 N。
6. 根據權利要求1所述的一種積雪草苷酸水解製備積雪草酸的方法，其特 徵在於步驟l)中的水解溫度為55~80°C。
7. 根據權利要求1所述的一種積雪草苷酸水解製備積雪草酸的方法，其特 徵在於步驟l)中的水解時間為2~15h。
8. 根據權利要求1所述的一種積雪草苷酸水解製備積雪草酸的方法，其特 徵在於步驟3)中的有機溶劑II為甲醇或乙醇。
9. 根據權利要求1所述的一種積雪草苷酸水解製備積雪草酸的方法，其特 徵在於步驟3)中有機溶劑II的用量為10~50mL/g沉澱物。
10. 根據權利要求1所述的一種積雪草苷酸水解製備積雪草酸的方法，其 特徵在於步驟3)中水的用量為有機溶劑II體積的6 12倍。
全文摘要
本發明公開了一種積雪草苷酸水解製備積雪草酸的方法。方法的步驟如下1)在有機溶劑I、水和無機酸的混合溶液中加入積雪草苷原料，在45～90℃下水解1～24h；2)水解液減壓濃縮除去有機溶劑I，沉澱後過濾，得沉澱物；3)沉澱物晾乾後加入有機溶劑II溶解、過濾，濾液加入水結晶，經過濾後得結晶物，結晶物再經真空乾燥後得積雪草酸產品。本發明積雪草酸產品收率和純度高，產品可用作原料藥或積雪草酸衍生物的製備；同時該方法工藝過程簡單、所需投資少、易於實現工業化。
文檔編號A61K36/23GK101429225SQ20081016317
公開日2009年5月13日 申請日期2008年12月18日 優先權日2008年12月18日
發明者呂秀陽, 音 李, 賈廣韜 申請人:浙江大學