一種快速高效提取芍藥苷和芍藥內酯苷的方法

2023-12-02 12:05:46 1

專利名稱：一種快速高效提取芍藥苷和芍藥內酯苷的方法
技術領域：
本發明涉及一種快速高效提取芍藥苷和芍藥內酯苷的方法。背景技術：
芍藥的有效成分為芍藥總苷，包括芍藥苷、芍藥內酯苷、苯甲醯芍藥苷、氧化芍藥苷的三十多種單萜苷類。隨著對中藥的研究深入，也越來越注重中藥中有效成分、有效部位的提取分離純化。其中，芍藥苷作為芍藥中的主要成分之一，其在藥材中含量高，純品較易獲得，一直以來作為芍藥及相關製品的質量控制指標，其研究報導相對較多。
近年來，研究表明，芍藥內酯苷作為芍藥中的另一種有效成分，具有鎮痛、鎮靜、抗驚厥、抗炎、抗病原微生物等多種藥理作用，在臨床上被用於抗癲癇、鎮痛、治療類風溼性關節炎等，因而，對芍藥內酯苷的研究日益增多，其高純度單體的製備需求日益增大。
目前，對芍藥內酯苷和芍藥苷的製備已有很多報導，例如申請號為 201110410067. 9的發明申請專利公開了 「一種芍藥苷和白芍苷的製備方法」以牡丹科植物為原料提取後，以大孔樹脂對粗提液進行吸附，以3(Γ75%乙醇水洗脫液濃縮乾燥後得精製提取物，再以加壓色譜柱對其進行分離純化，可獲得純度大於90%的芍藥苷和白芍苷成品。申請號為201010249421. X的發明專利公開了「一種同時製備芍藥內酯苷和芍藥苷的方法」，即以芍藥藥材或提取物為原料，採用柱層析方法進行芍藥苷和芍藥內酯苷的純化，優選後的方法製備芍藥苷和芍藥內酯苷的純度可達91% 97%。申請號為200910100680. 3的發明專利申請公開了 「一種模擬移動床色譜法分離製備芍藥內酯苷的方法」，即採用白芍總苷提取物為原料，應用模擬移動床色譜法分離製備芍藥內酯苷，模擬移動床的固定相採用C18矽膠，流動相採用甲醇或乙腈與水、甲酸、異丙醇的混合溶液，最終可製備純度達90% 以上的芍藥內酯苷，再如申請號為02133298. 3的發明專利公開了一種「芍藥苷和芍藥內酯苷的組合物及其製備方法」以芍藥為原料，通過吸附樹脂精製、氧化鋁柱層析和矽膠柱層析值得芍藥苷和芍藥內酯苷的組合物，其中芍藥苷和芍藥內酯苷在該組合物中的比例為 7:3 9:1。
通過長期研究，對白 芍總苷的提取純化工藝已較為成熟，但對芍藥苷和芍藥內酯苷單體的製備報導較少。文獻中有以反相矽膠模擬移動床色譜、矽膠柱層析及加壓柱層析對二者進行分離製備，但均存在製備工藝流程複雜，柱效低、製備周期長、檢測操作複雜等各種弊端，均難以實現工業化生產。
迄今為止，尚未有一種適合工業化大生產同時快速高效製備高純度芍藥苷和芍藥內酯苷的工藝路線報導。
發明內容
本發明的目的是提供一種純度大於89%、易於實現產業化的芍藥苷和芍藥內酯苷的提取工藝。
本發明採用的技術方案是
一種快速高效提取芍藥苷和芍藥內酯苷的方法，所述方法如下
(I)選取含芍藥苷和芍藥內酯苷的植物原料，以2(Γ70% (ν/ν)乙醇溶液提取廣3 次，提取液合併，濃縮，乾燥，得粗提物；
(2)步驟(I)粗提物上大孔吸附樹脂，上樣結束後先以清水清洗除雜，再以 109Γ40% (ν/ν)乙醇溶液洗脫，洗脫液濃縮，乾燥，得大孔樹脂富集物；所述大孔吸附樹脂為常規非極性或弱極性大孔吸附樹脂；
(3)步驟(2)大孔樹脂富集物採用高速逆流色譜，以正丁醇-乙酸乙酯-水為溶劑體系進行分離，分別收集含有芍藥苷或芍藥內酯苷的流份，濃縮，乾燥，分別得到芍藥苷成品和芍藥內酯苷成品，所得成品中芍藥苷或芍藥內酯苷純度為89°/Γ98%);所述溶劑體系中正丁醇乙酸乙酯水的體積比為廣4 Γ4 :5。
所述植物原料為白芍、赤芍或牡丹的根，以粉末形式進行提取為好。
步驟(I)所述提取為回流提取、超聲提取、索氏提取或微波輔助提取，優選為超聲提取。
所述大孔吸附樹脂優選為下列之一 D101、AB-8、DM130、HPD-450、HPD-620、 HPD-750、HPD-826、ADS-17、ADS-7-2，更優選為 DlOl 或 AB-8。
步驟(3)所述溶劑體系中正丁醇乙酸乙酯水的體積比優選為4 :1 :5或2 :3 :5。
本發明方法可同時製備芍藥苷和芍藥內酯苷，製備工藝簡單，為工業生產放大提供參考依據。
本發明的有益效果主要體現咋
1.應用本發明方法，可以在同一工藝流程中，製備得到芍藥苷和芍藥內酯苷，充分利用藥材資源；
2.應用本發明方法，可以在同一工藝流程中獲得芍藥苷和芍藥內酯苷的富集物， 有效地簡化了後續純化工藝負擔；
3.應用本發明方法，創新性地以高速逆流色譜分離芍藥苷和芍藥內酯苷的富集物，實現了單體純化工藝的自動化和可操作性，可一次性獲得純度大於89%的單體成品；
4.本發明製備工藝方法簡單，精製效率高，耗能低，環保，操作工藝條件易於控制。

圖1為實施例4的高速逆流色譜圖；峰I為芍藥內酯苷，峰2為芍藥苷；
圖2為實施例4的芍藥苷純度圖3為實施例4的芍藥內酯苷 純度圖4為實施例9方法I的高速逆流色譜圖；峰I為芍藥內酯苷，峰2為芍藥苷。
具體實施方式
下面結合具體實施例對本發明進行進一步描述，但本發明的保護範圍並不僅限於此
實施例1 :大孔樹脂靜態吸附性能考察
稱取200g白芍藥材(根部)粉末，用2L 50%乙醇循環超聲提取2次，每次O. 5h， 所用儀器為「弘祥隆」CTXNW-2B超聲循環提取機，超聲頻率59kHz，橫波間隙3秒，攪拌速度950rpm。提取液濾過,合併濾液,減壓濃縮至無醇味，凍幹，備用。
稱取各型號分別精密稱取已處理好(將實驗的9種大孔吸附樹脂分別置於三角瓶中，以無水乙醇浸泡3次，每次24h，除去浸液上層漂浮的雜質後，用蒸餾水衝洗至無醇味， 溼態保存備用。)的8種型號大孔吸附樹脂各lg，置100ml錐形瓶中。精密稱取粗提物粉末各0. 3g，分別用30ml去離子水溶解，加入錐形瓶中，放入恆溫搖床振搖24h，溫度20°C，轉速 200rpm。將吸附後的白芍提取液真空抽濾，濾液適當稀釋，用HPLC法測定芍藥苷和芍藥內酯苷的含量，並計算各型號大孔吸附樹脂的比吸附量。吸附好的樹脂用水洗3次，真空乾燥後,加入10 ml 95%乙醇,放入恆溫搖床振搖24h,溫度20°C,轉速200rpm,進行解吸附。解吸液經適當稀釋後用HPLC法測定芍藥苷和芍藥內酯苷的含量，並計算各型號大孔吸附樹脂的解吸率。公式為
權利要求
1.一種快速高效提取芍藥苷和芍藥內酯苷的方法，所述方法如下(1)選取含芍藥苷和芍藥內酯苷的植物原料，以2(Γ70%乙醇溶液提取f3次，提取液合併，濃縮，乾燥，得粗提物；(2)步驟(I)粗提物上大孔吸附樹脂，上樣結束後先以清水清洗除雜，再以109Γ40%乙醇溶液洗脫，洗脫液濃縮，乾燥，得大孔樹脂富集物；所述大孔吸附樹脂為非極性或弱極性大孔吸附樹脂；(3)步驟(2)大孔樹脂富集物採用高速逆流色譜，以正丁醇-乙酸乙酯-水為溶劑體系進行分離，分別收集含有芍藥苷或芍藥內酯苷的流份，濃縮，乾燥，即得芍藥苷和芍藥內酯苷成品；所述溶劑體系中正丁醇乙酸乙酯水的體積比為廣4 Γ4 :5。
2.如權利要求1所述的方法，其特徵在於所述植物原料為白芍、赤芍或牡丹的根。
3.如權利要求1所述的方法，其特徵在於步驟(I)所述提取為回流提取、超聲提取、索氏提取或微波輔助提取。
4.如權利要求1所述的方法，其特徵在於所述大孔吸附樹脂為下列之一D101、AB-8、 DMl30、HPD-450、HPD-620、HPD-750、HPD-826、ADS-17、ADS-7-2。
5.如權利要求1所述的方法，其特徵在於所述大孔吸附樹脂為DlOl或AB-8。
6.如權利要求1所述的方法，其特徵在於步驟(3)所述溶劑體系中正丁醇乙酸乙酯 水的體積比為4 :1 :5或2 :3 :5。
全文摘要
本發明提供了一種芍藥苷和芍藥內酯苷的高效同時製備方法，其特徵在於該方法為以含有芍藥苷和芍藥內酯苷的藥材為原料，採用醇水混合溶劑進行提取，提取液濃縮；所得提取液用大孔樹脂柱富集，以乙醇水混合溶劑進行洗脫，收集乙醇水洗脫液，濃縮；大孔樹脂富集液採用高速逆流色譜進行分離純化，分別收集含有芍藥苷或芍藥內酯苷的流分，濃縮，乾燥，即可獲得純度89%-98%的芍藥苷和芍藥內酯苷。本發明工藝簡單、純化效率高、製備周期短，可在同一工藝流程中低成本、低能耗得到高純度的芍藥苷和芍藥內酯苷，所用溶劑毒性低、環保，製備效率高。
文檔編號C07H1/08GK103044503SQ20121056994
公開日2013年4月17日 申請日期2012年12月24日 優先權日2012年12月24日
發明者顏繼忠, 楚楚, 李行諾, 童勝強, 陳岑 申請人:浙江工業大學