一種不可萃取多酚的製備方法

2023-12-05 16:26:21 1

一種不可萃取多酚的製備方法【專利摘要】本發明涉及一種不可萃取多酚的製備方法，屬於食品深加工【
技術領域：
】。包括下述步驟：將果蔬打漿後與質量濃度為50%-60%乙醇按照1g:2-6ml比例混勻，然後超聲萃取，離心分離後收集果蔬殘渣；向果蔬殘渣中加2.3-2.9mol/L的NaOH溶液，加熱至40-45℃浸泡30-40min後進行超聲萃取，然後離心分離、收集上清液，得不可萃取多酚粗提液；不可萃取多酚粗提液用丁醇萃取，得不可萃取多酚萃取液；將不可萃取多酚萃取液用大孔樹脂純化、乾燥，得不可萃取多酚凍乾粉。本發明具備具有操作步驟簡單、工藝條件要求低、安全性較高、生產成本低、收率高的優點；所獲得的不可萃取多酚純度高。【專利說明】一種不可萃取多酚的製備方法【
技術領域：
】[0001]本發明涉及一種不可萃取多酚的製備方法，屬於食品深加工【
技術領域：
】。技術背景[0002]多酚的萃取分離方法很多，由於其組成複雜，聚合度不同，以及原料結構性質的差異等諸多因素影響，到目前沒有一種方法完全適於所有多酚的萃取。常用的萃取溶劑有甲醇、乙醇、丙酮、乙酸、丁醇、丁醇、水等。目前對果蔬中多酚的研究主要集中在可萃取多酌.(extractable/solublepolyphenols),而很少關注不可萃取多酌.(non-extractable/insolublepolyphenols),在大多文獻包括外文文獻中有關總多酹含量的概念也僅僅是指可萃取部分，而忽略了不可萃取部分，實際上總多酚含量是指可萃取多酚與不可萃取多酚的總和，這正是目前從事活性成分提取的科研工作者所忽視的。Arranz等指出不可萃取多酹主要指一些水合丹寧酸(hydrolyzabletannins)以及與纖維或蛋白結合的原花青素(proanthocyanindins),這需要通過化學或酶處理方法將多酹從細胞壁上分離出來。[0003]實際上有關不可萃取多酚早在1973年就有研究，但由於缺乏合適的分析研究方法，一直沒有引起人們的注意。從2007年,西班牙Saura-Calixto領導的研究小組開始關注並研究不可萃取多酚，以穀類、蔬菜、豆類、水果、堅果為實驗材料，研究表明這些材料中含有大量的不可萃取多酚，其含量遠遠超過可萃取多酚，其中蘋果、桃子及油桃中不可萃取的多酚含量是可萃取多酚的5倍以上。Madhujith等採用鹼水解的方式研究了大麥中可萃取和不可萃取多酚的含量及其抗氧化性，結果表明不可萃取多酚的含量遠遠高於可萃取多酚，相應的不可萃取多酚的抗氧化性也明顯高於可萃取多酚。Kristl等研究指出，李子中的不可萃取多酚含量也遠遠高於可萃取多酚，在抗氧化作用中的貢獻也遠遠大於可萃取部分。[0004]目前從果蔬中提取不可萃取多酚是採用硫酸進行加熱水解的方法。雖然有文獻提出可以用NaOH進行鹼水解的方法來提取不可萃取多酚；但是不可萃取多酚的收率和純度仍有待提聞。【
發明內容】[0005]本發明的目的在於提供一種不可萃取多酚的製備方法；採用該方法提取的不可萃取多酚純度和收率都明顯提高。[0006]本發明的技術方案:一種不可萃取多酚的製備方法，包括下述步驟:(1)將果蔬打漿後與質量濃度為50%-60%乙醇按照lg:2-6ml比例混勻，然後超聲萃取，離心分離後收集果蔬殘渣；(2)向果蔬殘渣中加2.3-2.9mol/L的NaOH溶液，加熱至40_45°C浸泡30_40min後進行超聲萃取，然後離心分離、收集上清液，得不可萃取多酚粗提液；果蔬殘渣與NaOH水溶液的比例為Ig:5-30ml；(3)不可萃取多酚粗提液用丁醇萃取，得不可萃取多酚萃取液；(4)將不可萃取多酚萃取液用大孔樹脂純化、乾燥，得不可萃取多酚凍乾粉。[0007]步驟(I)和(2)中，超聲萃取條件功率為200-500W，時間0.5_2h;離心條件:轉速3000-5000r/min，時間10_20min。[0008]所用果蔬為含有多酚的水果和蔬菜。[0009]上述不可萃取多酚的製備方法，優選的，步驟(3)採用下述方式完成:將不可萃取多酚粗提液與等體積的丁醇混合，加熱至40°C-50°C，靜置，待分層後收集下層液，濃縮至原體積的1/3-1/5，過濾，收集濾液，得不可萃取多酚萃取液。[0010]上述不可萃取多酚的製備方法，優選的，步驟(4)採用下述方法完成:首先，將不可萃取多酚萃取液用大孔樹脂吸附；上樣濃度為2-5.0mg/ml，上樣流速為1.5-3m/min，上樣體積為4_6倍柱體積；然後，用蒸餾水洗去樹脂表面的雜物；再用質量濃度60%-90%的乙醇水溶液進行洗脫並收集洗脫液；洗脫速率為1.5-3ml/min，洗脫體積為3_5倍柱體積；最後，將洗脫液濃縮到原體積的1/3-1/5、過濾、將濾液冷凍乾燥，得不可萃取多酚凍乾粉。[0011]上述不可萃取多酚的製備方法，優選的，在進行步驟(2)之前，將果蔬殘渣在50-60°C條件下烘乾，粉碎。[0012]上述不可萃取多酚的製備方法，優選的，所述大孔樹脂為HPD-100C。[0013]有益效果:1.與硫酸加熱水解提取不可萃取多酚的方法相比較，本發明具備具有操作步驟簡單、工藝條件要求低、安全性較高、生產成本低、收率高的優點；2.所獲得的不可萃取多酚純度高。具體實施方案[0014]實施例1選擇新鮮、成熟的藍莓為原料，剔除黴爛果、病蟲果及雜質並在清水中除去泥沙及漂浮物。將浙幹水後的藍莓粉碎打漿，然後按照1:2.5(g/ml)的比例加入質量濃度50%乙醇水溶液，200W超聲萃取2h，3000r/min離心20min。重複提取兩次。[0015]過濾後將獲得的果渣45°C烘乾，然後粉碎至60目。向果渣中按照1:10(g/mL)的料液比例加入2.5mol/L的NaOH溶液，將混合漿液在45°C條件下、200W超聲萃取2h。然後3000r/min離心20min，過濾取上清液，即為不可萃取多酚粗提液。[0016]按照1:1的體積比向上述不可萃取多酚粗提液中加入丁醇，40°C加熱混勻，靜置分層，收集下層分離液；重複萃取3次，合併下層分離液；然後濃縮至原體積的1/5，過濾，收集濾液。[0017]選用HPD-1OOC大孔樹脂在常溫常壓下對濾液進行吸附提純，調整上樣液的濃度為2.5mg/ml,上樣速度和流出速度均為3ml/min,體積為4倍柱體積。吸附完成後，先用蒸餾水對吸附柱進行衝，洗直到流出液無色；然後使用60%的乙醇溶液進行解吸洗脫，洗脫流速為3ml/min，洗脫體積為3倍柱體積。解吸完成後收集洗脫液進行濃縮，濃縮至原體積的30%，再過濾，將濾液冷凍乾燥成粉，即為粉狀不可萃取多酚。用Folin-C1calteu法在765nm處測定多酚含量，測得其收率為41mg/g，純度為47%。[0018]實施例2選擇新鮮、成熟的藍莓為原料，剔除黴爛果、病蟲果及雜質並在清水中除去泥沙及漂浮物。將浙幹水後的藍莓粉碎打漿，然後按照1:6(g/ml)的比例加入質量濃度60%乙醇水溶液；500W超聲萃取lh,5000r/min離心lOmin。重複提取兩次。[0019]過濾後將獲得的果渣放烘箱中40°C烘乾，然後粉碎至80目。向果渣中按照1:30(g/mL)的料液比例加入2.9mol/L的NaOH水溶液，將混合漿液在40°C條件下、500W超聲萃取0.5h。然後5000r/min離心lOmin，過濾、取上清液，即為不可萃取多酚粗提液。[0020]按照1:1的體積比向上述不可萃取多酚粗提液中加入丁醇，40°C加熱混勻，靜置分層，收集下層分離液；重複萃取3次，合併下層分離液；然後濃縮至原體積的1/3，過濾，收集濾液。[0021]選用HPD-1OOC大孔樹脂在常溫常壓下對濾液進行吸附提純，調整上樣液的濃度為5.0mg/ml,上樣速度和流出速度均為5ml/3min,體積為6倍柱體積。吸附完成後，先用蒸餾水對吸附柱進行衝，洗直到流出液無色；然後使用質量濃度80%的乙醇溶液進行解吸洗脫，洗脫流速為5ml/3min，洗脫體積為5倍柱體積。解吸完成後收集洗脫液進行濃縮，濃縮至原體積的20%，再過濾，將濾液冷凍乾燥成粉，即為粉狀不可萃取多酚。使用Folin-C1calteu法在765nm條件下測定多酚含量，測得其收率為48mg/g，純度為46%。[0022]實施例3選擇新鮮、成熟的藍莓為原料，剔除黴爛果、病蟲果及雜質並在清水中除去泥沙及漂浮物。將浙幹水後的藍莓粉碎打漿，然後按照1:4(g/ml)的比例加入質量濃度50%乙醇水溶液，400W超聲萃取lh,4000r/min離心15min。重複提取兩次。[0023]過濾後將獲得的果渣40°C烘乾，然後粉碎至100目。向果渣中按照1:20(g/mL)的料液比例加入2.3mol/L的NaOH溶液，將混合漿液在45°C條件下、500W超聲萃取2h。然後4000r/min離心15min，過濾取上清液，即為不可萃取多酚粗提液。[0024]按照1:1的體積比向上述不可萃取多酚粗提液中加入丁醇，40°C加熱混勻，靜置分層，收集下層分離液；重複萃取3次，合併下層分離液；然後濃縮至原體積的1/5，過濾，收集濾液。[0025]選用HPD-1OOC大孔樹脂在常溫常壓下對濾液進行吸附提純，調整上樣液的濃度為4.0mg/ml,上樣速度和流出速度均為5ml/3min,體積為5倍柱體積。吸附完成後，先用蒸餾水對吸附柱進行衝，洗直到流出液無色；然後使用70%的乙醇溶液進行解吸洗脫，洗脫流速為5ml/3min，洗脫體積為5倍柱體積。解吸完成後收集洗脫液進行濃縮，濃縮至原體積的30%，再過濾，將濾液冷凍乾燥成粉，即為粉狀不可萃取多酚。使用Folin-C1calteu法在765nm條件下測定多酚含量，測得其收率為53mg/g，純度為49%。[0026]實施例4選擇新鮮、成熟的藍莓為原料，剔除黴爛果、病蟲果及雜質並在清水中除去泥沙及漂浮物。將浙幹水後的藍莓粉碎打漿，然後按照1:6(g/ml)的比例加入質量濃度60%乙醇水溶液；500W超聲萃取lh,5000r/min離心lOmin。重複提取兩次。[0027]過濾後將獲得的果渣放烘箱中45°C烘乾，然後粉碎至80目。向果渣中按照1:5(g/mL)的料液比例加入2.8mol/L的NaOH水溶液，將混合漿液在45°C條件下、500W超聲萃取0.5h。然後5000r/min離心lOmin,過濾、取上清液，即為不可萃按照1:1的體積比向上述不可萃取多酚粗提液中加入丁醇，40°C加熱混勻，靜置分層，收集下層分離液；重複萃取3次，合併下層分離液；然後濃縮至原體積的1/3，過濾，收集濾液。[0028]選用HPD-1OOC大孔樹脂在常溫常壓下對濾液進行吸附提純，調整上樣液的濃度為5.0mg/ml,上樣速度和流出速度均為5ml/3min,體積為6倍柱體積。吸附完成後，先用蒸餾水對吸附柱進行衝，洗直到流出液無色；然後使用80%的乙醇溶液進行解吸洗脫，洗脫流速為5ml/3min，洗脫體積為5倍柱體積。解吸完成後收集洗脫液進行濃縮，濃縮至原體積的20%，再過濾，將濾液冷凍乾燥成粉，即為粉狀不可萃取多酚。使用Folin-C1calteu法在765nm條件下測定多酚含量，測得其收率為47mg/g，純度為49%。【權利要求】1.一種不可萃取多酚的製備方法，其特徵在於，包括下述步驟:(1)將果蔬打漿後與質量濃度為50%-60%乙醇按照lg:2-6ml比例混勻，然後超聲萃取，離心分離後收集果蔬殘渣；(2)向果蔬殘渣中加2.3-2.9mol/L的NaOH溶液，加熱至40_45°C浸泡30_40min後進行超聲萃取，然後離心分離、收集上清液，得不可萃取多酚粗提液；果蔬殘渣與NaOH水溶液的比例為Ig:5-30ml；(3)不可萃取多酚粗提液用丁醇萃取，得不可萃取多酚萃取液；(4)將不可萃取多酚萃取液用大孔樹脂純化、乾燥，得不可萃取多酚凍乾粉。2.根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於，步驟(I)和(2)中，超聲萃取條件功率為200-500W，時間0.5-2h;離心條件:轉速3000_5000r/min，時間10_20min。3.根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於，步驟(3)採用下述方式完成:將不可萃取多酚粗提液與等體積的丁醇混合，加熱至40°C-50°C，靜置，待分層後收集下層液，濃縮至原體積的1/3-1/5，過濾，收集濾液，得不可萃取多酚萃取液。4.根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於，步驟(4)採用下述方法完成:首先，將不可萃取多酚萃取液用大孔樹脂吸附；上樣濃度為2-5.0mg/ml，上樣流速為1.5-3m/min，上樣體積為4_6倍柱體積；然後，用蒸餾水洗去樹脂表面的雜物；再用質量濃度60%-90%的乙醇水溶液進行洗脫並收集洗脫液；洗脫速率為1.5-3ml/min，洗脫體積為3_5倍柱體積；最後，將洗脫液濃縮到原體積的1/3-1/5、過濾、將濾液冷凍乾燥，得不可萃取多酚凍乾粉。5.根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於，在進行步驟(2)之前，將果蔬殘渣在50-60°C條件下烘乾，粉碎。6.根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於，所述大孔樹脂為HPD-100C。【文檔編號】C07G99/00GK104513282SQ201310458972【公開日】2015年4月15日申請日期:2013年10月7日優先權日:2013年10月7日【發明者】賈傳龍申請人:賈傳龍