孕酮受體拮抗劑的製作方法

2023-08-01 07:09:11 3

專利名稱：：孕酮受體拮抗劑的製作方法孕酮受體拮抗劑本發明涉及通式I的孕酮受體拮抗劑、包含它們的藥物(藥物組合物)和它們在製備藥物中的用途formulaseeoriginaldocumentpage6式I其中Rl可以是氫原子並且R2可以是羥基，或者Rl和R2可以一起為氧代基團。本發明尤其涉及下列孕酮受體拮抗劑、包含它們的藥物和它們在製備藥物中的用途--1lP-[4-(l,2-二羥基乙基)苯基]-20，20,21，21,21-五氟-17-羥基-19-去甲_17a-孕-4，9-二烯-3-酮及其個體差向異構體-11P-[4-[(l及)-l，2-二羥基乙基]苯基]-20，20，21，21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮和-11卩-[4-[(15>1，2-二羥基乙基]苯基]-20，20，21,21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮和-20,20，21，21，21-五氟-17-羥基-11卩-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-1701-孕-4，9-二烯-3-酮。本發明的優選化合物是20，20，21，21,21-五氟-17-羥基-lip-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮。具有抗促孕(antigestagenic)活性的化合物(競爭性孕酮受體拮抗劑)最先於1982年被發現(RU486;EP57115)並自此得到了極為充分的描述。WO98/34947和Fuhrmann等人，J.Med.Chem.43，5010-5016(2000)公開了不同於本發明的物質並具有氟化的17a側鏈的具有抗促孕活性的甾體。WO98/34947中公開的化合物種類允許在甾核的11位具有各種不同的取代基但沒有達到二取代烷基苯基的程度。EP57115允許在甾核的11位具有一系列取代基但要求這些取代基包含氮、磷或矽原子。因此，沒有提出在甾核的17位包含含氟取代基並且在甾核的11位包含二取代垸基苯基取代基的甾體可能具有期望的性質。本文請求保護的物質是WO98/34947中所請求保護的物質的至少部分代謝物。本發明的目的是提供新型競爭性孕酮受體拮抗劑、包含它們的藥物和因此產生治療婦科疾病的替代方法。通過合成11卩-[4-(1，2-二羥基乙基)苯基]-20，20,21，21,21-五氟-17-羥基-19-去甲-1701-孕-4，9-二烯-3-酮和20,20，21，21，21-五氟-17-羥基-11卩-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮已經實現了所述目的。通過在ChiracelOD-H柱上用己垸/乙醇90:10(v/v)作為流動相進行色譜分離，或者通過從手性結構實體如(/)-或(5)-l-(4-溴苯基)-l，2-乙二醇開始，可以具體製備11(3-[4-(l，2-二羥基乙基)苯基]-20,20，21，21,21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮的差向異構體。因此，本發明的化合物是已通過化學方法製備的有利化合物。適宜地，本發明提供基本上不含其異構體的本發明的二羥基化合物，也就是說其中至少90%、更適宜至少95%、優選至少98%並且最優選100%不含相應的異構體。由於本發明的化合物要用於藥物組合物，因此最好是以分離的形式提供，例如作為固體，適宜作為基本上純的固體如基本上不含其它甾類化合物或其它生物學活性劑。通式I的物質是有價值的藥用活性成分。它們可以特別用於製備用於治療肌瘤或子宮內膜異位症、用於女性避孕、用於性交後節育、用於引發月經、用於誘導分娩、用於激素替代療法、用於治療與痛經相關的症狀、用於治療激素失調和用於治療激素依賴性腫瘤例如孕酮受體陽性乳癌的藥物製劑。已經在大鼠流產試驗中並通過測定家兔的McPhail指數鑑定了它們作為孕酮受體拮抗劑的功效。通式I的物質在人肝微粒體(HLM)內顯示比WO98/34947公開的孕酮受體拮抗劑11|3-(4-乙醯基苯基)-20，20,21,21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-1701-孕_4,9-二烯-3-酮更高的代謝穩定性。這指示本發明的化合物具有提高的口服生物利用度，從而它們可以用於適合口服給藥的藥物組合物。本發明的藥物(藥物組合物)可以適合全身或局部給藥。一般優選使所述藥物適合全身給藥，例如通過注射或通過口服給藥。如果考慮可注射的形式，可以通過本領域已知用於配製甾體的常規方法製備這些形式。如果考慮可口服給藥的形式，也可以通過製藥領域己知用於配製甾體的常規方法製備這些形式。因此，優選的藥物形式包含式1的化合物和藥學可接受的載體。本發明的藥物組合物可以以適合全身或局部給藥的形式提供，其中可全身給藥的形式一般是最適宜的。所述可全身給藥的形式可以適合通過注射給藥，例如作為無菌形式如乳劑。所述可全身給藥的形式可以適合口服給藥而且這樣的形式一般是最合適的。這樣的形式一般是包含預定量的本發明化合物的單位劑型。合適的形式包括片劑、膠囊、散劑、顆粒形式的等，其中片劑一般是優選的。這樣的劑型可以以常規方法製備，並且所述藥學可接受的載體可以是任何合適的載體，尤其是已知可用於配製甾類藥.物的載體。所述單位劑型可以包含0.01-100mg所請求保護的物質。下列實施例用於例示本發明，絕非意指限制。實施例1:1lp-[4-(l，2-二羥基乙基)苯基-20，20，21，21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-l7a-孕-4，9-二烯-3-酮的合成a)1lp-(4-乙烯基苯基)-5-羥基-5a-雌-9-烯-3，17-二酮3-(2，2-二甲基丙烷-1，3-二基)縮酮在惰性氣體下將3.3g鎂屑置於14ml無水四氫呋喃中並添加一滴1,2-溴乙垸。在反應開始後，緩慢滴加25g4-溴苯乙烯的137ml無水四氫呋喃溶液，使得內部溫度保持在40-45°C的範圍內。隨後將反應混合物攪拌一8小時，直到鎂完全反應為止。然後將2.26g氯化銅(I)添加到混合物中。緩慢滴加8.5g5，10-環氧-5a，10a-雌-9(ll)-烯-3，17-二酮3-(2,2-二甲基丙垸-1，3-二基)縮酮(關於製備，參考7^ra/z^/ra"26，2069-2072(1985))的137ml無水四氫呋喃溶液。將反應混合物在室溫下攪拌一小時，然後倒入飽和氯化銨水溶液中。將水相用乙酸乙酯萃取並將有機相合併，用飽和氯化鈉水溶液洗滌並用硫酸鈉乾燥。將產物過濾並在真空下濃縮。進行矽膠上的柱色譜法(用己烷/乙酸乙酯混合物)，得到6.76g標題化合物，為無色泡沫。'H-NMR(300MHz，CDC13):5=7.30d(/=9Hz，2H，芳基)；7.18d(聲9Hz，2H,芳基)；6.66dd07=17Hz+11Hz，1H，乙烯基)；5.70dbr(/=17Hz,1H，乙烯基)；5.20dbr(/=11Hz，1H,乙烯基)；4.44s(1H，5-0H);4.29dbr07=6.5Hz,1H,H國ll);3.53m(2H,3-縮酮);3.51m07=11.4Hz，1H，3-縮酮);3.42m07=11.4Hz，1H，3-縮酮)；1.05s(3H，3-縮酮)；0.85s(3H,3-縮酮)；0.49s(3H，H-18)。b)1lp-(4-乙烯基苯基)-20，20,21，21，21-五氟-5，17-二羥基-19-去甲-5(1,1701-孕-9-烯-3-酮2,2-二甲基丙烷-1,3-二基縮酮在-78。C，將6.76ga)製備的化合物的140ml無水甲苯溶液添加到27.9g濃縮五氟碘乙烷的140ml無水甲苯溶液中。在該溫度下添加66.3ml1.5摩爾溶液的甲基鋰/溴化鋰絡合物的乙醚溶液。隨後將反應混合物在0°C攪拌一小時。然後將其倒入飽和氯化銨水溶液中。將產物用乙酸乙酯萃取，用飽和氯化鈉水溶液洗滌，用硫酸鈉乾燥並在真空下濃縮。對所得粗產物進行矽膠上的色譜法(用己烷/乙酸乙酯混合物)，得到3.73mg標題化合物，為白色泡沫。'H-NMR(300MHz,CDC13):S=7.30d(/=9Hz,2H，芳基)；7.17d(/=9Hz，2H，芳基)；6.67dd07=17Hz+11Hz,1H，乙烯基)；5.71dbr(/=17Hz，1H，乙烯基)；5,20dbr(*/=11Hz，1H,乙烯基)；4.45s(1H，5畫0H);4.31dbr(7=6.5Hz,1H，H-ll);3.53m(2H，3-縮酮)；3.51m(/=11.4Hz，1H,3-縮酮);3.42m(/=11.4Hz,1H，3-縮酮)；1.05s(3H，3-縮酮);0.85s(3H,3-縮酮)；0.54s(3H，H-18)。9c)11(3-[4-(1，2-二羥基乙基)苯基]-20，20,21，21,21-五氟-5，17-二羥基-19-去甲-5a,17a-孕-9-烯-3-酮2，2-二甲基丙烷-1,3-二基縮酮將1.68ml磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀的緩衝水溶液(pH7.00)和206mg三甲胺N-氧化物添加到1g按照實施例1b)製備的化合物的8.4ml四氫呋喃溶液中。在0°C滴加4.3ml250mg四氧化鋨的50ml丁醇溶液。將反應混合物在室溫下攪拌三小時，然後倒入飽和硫代硫酸鈉水溶液中。將產物用乙酸乙酯萃取，用飽和氯化鈉水溶液洗滌，用硫酸鈉乾燥並在真空下濃縮。對所得粗產物進行矽膠上的色譜法(用己垸/乙酸乙酯混合物)，得到860mg標題化合物，為白色泡沫。獲得苯乙醇的差向異構體的混合物。'H-NMR(300MHz,CDC13):S=7.25d07=9Hz,2H，芳基)；7.20d(/=9Hz,2H，芳基)；4.78m(1H，CHOH);4.44s(1H，5-OH);4.32dbr(J=6.5Hz,1H，H-l1);3.73m(IH，CH2OH);3.65m(1H,CH2OH);3.54m(2H，3-縮酮);3.52m07=11.0Hz，1H，3-縮酮)；3.44m(聲ll.OHz，1H,3-縮酮)；1.04s(3H,3-縮酮)；0.87s(3H，3-縮酮)；0.51s(3H，H-18)。d)1lp-[4-(l,2-二羥基乙基)苯基]-20，20，21，21,21-五氟-17-羥基-19-去甲一17a-孕-4，9—二烯-3-酮將200mg實施例1c)所述的化合物在3ml甲醇中與141pl半濃縮的硫酸水溶液在室溫下攪拌一小時。然後將混合物倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中並用乙酸乙酯萃取。將有機相用飽和氯化鈉水溶液洗滌，用硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。進行矽膠上的柱色譜法(用己垸/乙酸乙酯混合物)，得到78mg標題化合物，為無色泡沫。獲得苯乙醇的差向異構體的混合物。，H畫NMR(300MHz,CDC13):5=7.25d(/=9Hz,2H，芳基)；7.15d(/=9Hz,2H,芳基)；5.77s(1H，H-4);4.74m(1H，CHOH);4.42dbr(/=7Hz,1H,H國ll);3.69m(1H，CH2OH);3.59m(1H,CH2OH);0.56s(3H,H-18)。實施例2:1lp-4-(l及)-l，2-二羥基乙基苯基-20，20，21，21，21-五氟-17陽羥基-19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮的合成a)(及)-l-(4-溴苯基)-l,2-乙二醇將17.0g碳酸鉀和40.4g鐵氰化鉀溶於190ml正丁醇和l卯ml水的混合物中。然後添加30mg鋨酸鉀和300mg(DHQD)2PHAL並將溶液冷卻到0°C。然後在0°C添加7.5g4-溴苯乙烯並將混合物攪拌過夜。通過添加30g亞硫酸鈉對其進行後處理。用300ml乙酸乙酯萃取反應溶液。將有機相用硫酸鈉千燥並濃縮，得到7.3g白色固體。收率7.3g=理論值的82.1%'H-NMR(300MHz,CDC13):S=7.50d(7=9Hz，2H，芳基)；7.25dC/=9Hz,2H,芳基)；4.80dd07=4.4Hz+3.6Hz，IH);3.70m(2H);2.50sbr(2H，OH)。產物的NMR數據與文獻(T.Barlow，A.Dipple，i飢7bjc/co/.1998，7厶44-53)中所述的NMR數據一致。b)(R)-4-(4-溴苯基)-2，2-二甲基-l，3-二氧戊環將3.5g實施例2a)所述的二醇懸浮於100ml丙酮中。添加30ml2，2誦二甲氧基丙烷和0.3ml濃硫酸。在2小時後，將100ml飽和碳酸氫鈉溶液添加到及應混合物中並將產物用3X50ml乙酸乙酯萃取。將有機相用硫酸鈉乾燥並在真空下濃縮,得到3.7g白色固體。圖1顯示(及)-4-(4-溴苯基)-2,2-二甲基-l,3-二氧戊環的CD譜。收率3.7g=理論值的58.8%^-NMR(400MHz，CDC13):S=7.48d(/=9Hz，2H,芳基)；7.25d(聲9Hz，2H，芳基)；5.04dd(7=9Hz+8.2Hz,1H)4.30dd(/=9Hz+8.2Hz，1H);3.16ddC/=9Hz+9Hz，1H);1.53s(3H);1.48s(3H)。c)20,20，21，21，21-五氟-17-羥基-5，10a-環氧-19-去甲-5a，17a-孕-9(ll)-烯-3-酮2,2-二甲基丙垸-1，3-二基縮酮在-70。C，將50g5，10-環氧-5a,10a-雌-9(ll)-烯-3，17-二酮3-(2，2-二甲基丙烷-l,3-二基)縮酮(關於製備，參考7^ra/Wraw丄成26,2069-2072(1985))添加到在500ml無水甲苯中的116g濃縮五氟碘乙烷中。在同一溫度下添加2卯ml1.5摩爾溶液的甲基鋰/溴化鋰絡合物的乙醚溶液。隨後將反應混合物在0°C攪拌一小時。然後將其添加到飽和氯化銨水溶液中並用乙酸乙酯萃取。將有機相用飽和氯化鈉水溶液洗滌，用硫酸鈉乾燥並在真空下濃縮。將粗產物溶於200ml丙酮中，並添加450ml水。將沉澱出來的產物濾出並在真空下乾燥。收率61.6g(理論值的93。/。)^-NMR(500MHz，CDC13):S=6.04brd(/=2.5Hz，1H,乙烯基)；3,60d(7=11.31H);3.46d(J-11.3Hz);3.39dd(/=11.3Hz+9.5Hz，1H);2.51dbr(7=10.6Hz，1H);1.06s(3H);0.93s(3H);0.85s卿。d)11(3-{4-[(4及)-2，2-二甲基-1，3-二氧戊環-4-基]苯基}-20，20，21，21，21-五氟-5，17-二羥基-19-去甲-5a，17a-孕-9-烯-3-酮2,2-二甲基丙烷-1,3-二基縮酮12將387mg鎂屑懸浮於3mlTHF中，並在攪拌下添加50pl二溴乙烷。在65°C，將4.35g實施例2b)所述的縮酮的16mlTHF溶液緩慢添加到所述懸浮液中。將所得溶液冷卻到0°C。添加21.5mgCuCl和2.75g實施例2c)製備的化合物的11mlTHF溶液。將反應混合物在20°C攪拌2小時，然後添加28ml10n/。NH4Cl溶液。將反應混合物用20mlMTB醚萃取。將有機相濃縮並通過在120g矽膠上的色譜法純化所得固體(5.9g)，使用己烷/乙酸乙酯作為流動相，得到3,2g產物，為白色固體。收率3.2g=理論值的85%'H-NMR(600MHz,CDC13):S=7.23d(/=9Hz,2H，芳基)；7.20d(/=9Hz，2H,芳基)；5.03dd(>9Hz+8.4Hz，1H);4.46s(1H,OH);4.33dbr07=6.5Hz，1H);4.27dd(/=9Hz+8.4Hz，1H);3.68dd(/=9Hz+9Hz，1H);1.56s(3H);1.49s(3H);1.07s(3H);0.86s(3H);0.50s(3H)。e)11卩-[4-[(1及)-1,2-二羥基乙基]苯基]-20，20，21，21,21-五氟-17-羥基-19-去甲_17a-孕-4，9-二烯-3-酮formulaseeoriginaldocumentpage13將2.5g實施例2d)所述的化合物溶於20mlTHF，添加2.5ml半濃縮硫酸水溶液並將反應混合物在20°C攪拌三小時。然後將其倒入60ml飽和碳酸氫鈉水溶液中並用乙酸乙酯萃取。通過矽膠上的柱色譜法(用二氯甲垸/丙酮混合物)純化，得到1.2g標題化合物，為無色泡沫。圖2顯示1lP-[4-[(l"-l，2-二羥基乙基]苯基]-20，20,21，21,21-五氟-17-羥基-19-去甲-1701_孕_4，9-二烯-3-酮的CD譜。收率1.2g=理論值的61.2%H-NMR(300MHz，CDC13):5=7.25d(J=9Hz，2H，芳基)；7.15d(>9Hz,2H，芳基)；5.77s(1H,H-4);4.74m(1H,CHOH);4.42dbr(7=7Hz，1H，H-ll);3,69m(1H，CH2OH);3.59m(1H，CH2OH);0.56s(3H，H-18)。實施例3a:20，20，21，21，21-五氟-17-羥基-11-[4-(羥基乙醯基)苯基-19-去甲-i7a-孕-4，9-二烯-3-酮的合成a)20,20，21,21,21-五氟-lip-[4-(羥基乙醯基)苯基]-5,17-二羥基-19-去甲-501,17(1-孕-9-烯-3-酮2，2-二甲基丙烷-1，3-二基縮酮在室溫下，將283叔丁基過氧化氫滴加到3.6mg三氧化鉻的7ml二氯甲垸溶液中。然後滴加450mg實施例1c)製備的化合物的7ml二氯甲烷溶液。將混合物在室溫下攪拌三小時。通過添加二甲硫終止反應。將混合物用飽和氯化鈉水溶液洗滌，用硫酸鈉乾燥並在真空下濃縮。對所得粗產物進行矽膠上的色譜法(用己垸/乙酸乙酯混合物)，得到87mg標題化合物，為白色泡沫。^-NMR(300MHz,CDC13):S=7.83d(J=9Hz，2H,芳基)；7.37d(>9Hz，2H，芳基)；4.84m(2H，CH2OH);4.37dbr(/=6.5Hz，1H,H隱ll);3.53m(2H3-縮酮)；3.47m(/=l1.0Hz，1H，3匿縮酮)；3.42m07=11.0Hz,1H，3畫縮酮);1.04s(3H，3-縮酮)；0.85s(3H，3-縮酮)；0.49s(3H，H-18)。b)20,20，21,21，21-五氟-17-羥基-11卩-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-17(1-孕-4，9-二烯-3-酮與實施例1d)所述的方法類似，使87mg3a)所述的化合物在1.4ml甲醇中與62pl半濃縮的硫酸水溶液反應，得到25mg標題化合物，為無色泡沫。'H-僱R(300MHz,CDC13):5=7.86d(J=9Hz，2H,芳基)；7.34d(/=9Hz,2H,芳基)；5,81s(1H，H-4);4.85dbr(>/=5Hz,2H，CH2OH);4.50dbr(>7Hz,1H,H-l1);3.50tbr(/=5Hz，1H，OH);0.57s(3H，H-18)。實施例3b:20，20，21，21，21-五氟-17-羥基-1^-4-(羥基乙醯基)苯基卜19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮的備選合成a)[[2-(4-溴苯基)-1，3-二氧戊環-2-基]甲氧基](1，1-二甲基乙萄二甲基矽院將73.5g2-(4-溴苯基)-l，3-二氧戊環-2-甲醇溶於800mliV，iV-二甲基甲醯胺中。添加38.6g咪唑和51.3g叔丁基二甲基氯矽垸。將其在23"C攪拌12小時。然後，將反應混合物倒入碳酸氫鈉的飽和水溶液中。將其再攪拌30min。然後將它用乙酸乙酯萃取兩次。將合併的有機層用鹽水洗滌並用硫酸鈉乾燥。將粗產物通過柱色譜法純化。獲得103.21g產物(理論值的97.5%)。'H國NMR(300MHz,CDC13):S=7.45d(/=9Hz，2H，芳基)；7.37d(/=9Hz，2H，芳基)；4.08m(2H，縮酮)；3.84m(2H，縮酮)，0.83s(9H,叔丁基-Si);-0.05s(6H,Me-Si)。b)lip-[4-[2-[[[(l，l-二甲基乙基)二甲基甲矽垸基]氧基]甲基]-l，3-二氧戊環-2-基〗苯基]-20，20，21，21，21-五氟-5，17-二羥基-19-去甲-5a,17a-孕-9-烯-3-酮2，2-二甲基丙垸-1，3-二基縮酮15formulaseeoriginaldocumentpage16將0.3ml二溴乙烷添加到6.22g鎂屑的80mlTHF懸浮液中。然後，緩慢添加95.5g3ba)的900mlTHF溶液。將溫度保持在低於50°C。然後，將其在50°C攪拌1h。然後，將反應混合物冷卻到0°C並添加400mgCuCl。在繼續再攪拌10分鐘後，在0°C添加20g2c)所述的化合物的200mlTHF溶液。將混合物在0。C攪拌2小時，然後使其溫熱到23。C。在23。C繼續再攪拌12小時。然後將反應混合物倒入氯化銨的飽和溶液中。將其再攪拌30分鐘，然後將其用乙酸乙酯萃取3次。將合併的有機層用鹽水洗滌並用硫酸鈉乾燥。將粗產物通過柱色譜法純化。獲得31g產物(理論值的97。/。)。!H-NMR(300MHz，CDC13):S=7.40d07=9Hz，2H,芳基)；7.20d(/=9Hz,2H,芳基)；4,49s(1H，OH);4.36dbr(/=6.5Hz，1H);4.12m(2H，縮酮),3,90(2H,縮酮)，3.79m(4H,縮酮)；3.50m(2H),1.09s(3H);0,94s(3H);O.卯(9H,叔丁基-Si)，0.57s(3H);0.00(6H，Me-Si)。c)20，20,21，21，21-五氟-5,17-二羥基-ll卩-[4-[2-(羥甲基)-l,3-二氧戊環陽2畫基]苯基]-19-去甲-5a，17a-孕-9-烯-3-酮2，2-二甲基丙垸-1，3-二基縮酮formulaseeoriginaldocumentpage16將四丁基氟化銨(0.6ml1摩爾溶液的THF溶液)添加到470mg化合物3bb)的5mlTHF溶液中。將其在23°C攪拌2小時。然後，將反應混合物倒入氯化銨的飽和溶液中。將其再攪拌30分鐘，然後將其用乙酸乙酯萃取。將有機層用鹽水洗滌並用硫酸鈉乾燥。將粗產物通過柱色譜法純化。獲得318mg產物(理論值的80%)。"H-畫R(300MHz,CDC13):5=7.34d(/=9Hz,2H，芳基)；7.18d(J=9Hz，2H，芳基);4.44s(1H，OH);4.30dbr(/=6.5Hz，1H，H-l1);4.10m(2H，縮酮)，3,88m(2H，縮酮)；3.70m(4H,縮酮)，3,50m(2H);1.02s(3H);0.88s(3H);0.50s(3H)。dot)來自3bb的20,20,21,21，21-五氟-17-羥基-11|3-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮將15ml半濃縮的硫酸水溶液添加到15g實施例3bb所述的化合物的150mlTHF溶液中。將它在23°C攪拌2.5小時。然後，將反應混合物倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中。將其再攪拌30分鐘，然後用乙酸乙酯萃取。將有機層用鹽水洗滌並用硫酸鈉乾燥。將粗產物通過柱色譜法純化。獲得7,99g產物(理論值的80%)。鄰)來自3bc的20,20,21,21，21-五氟-17-羥基-lip-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮使300mg3bc和半濃縮的硫酸水溶液在THF中與實施例3da所述的程序類似地進行反應，獲得198mg(理論值的85%)產物。17實施例4:雌性大鼠的流產試驗在常規飼養和餵養條件下，在交配後5-7天，在妊娠大鼠(每組6隻大鼠)上試驗本發明的孕酮受體拮抗劑的抗促孕作用。在成功交配後，將妊娠動物(在妊娠第l天=dlpx.，在陰道塗片中存在精子)隨機分成治療組和對照組。然後從第5天至第7天(d5-d7px.)，每天給每隻動物皮下注射1.5mg/kg受試物(實施例1的11p-[4-(l，2-二羥基乙基)苯基]-20，20，21,21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮或實施例3的20，20，21,21，21-五氟-17-羥基-11|3-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-1701-孕_4,9-二烯-3-酮)或1.0ml/kg載體(苯甲酸苄酯/蓖麻油1+4[v/v])。在第9天(d9p.c.)進行屍檢。檢查子宮中存在的植入位置作為抗促孕作用的參數。將在第9天(d9px.)完全不存在植入位置以及存在病理性、出血性或其它異常植入位置評價為流產。流產試驗的結果示於表l。表l:流產試驗的結果tableseeoriginaldocumentpage18實施例5:測定家兔的McPhail指數在常規飼養和餵養條件下，對35天大的家兔試驗本發明的孕酮受體拮抗劑的抗促孕功效。作為準備手段，從第1天至第4天用5.0ng/kg/d17|3-雌二醇皮下治療動物。為了測定抗促孕功效，從第7天至第10天，用0.2mg/kg/d孕酮和3mg/kg/d受試物(實施例1的1lp-[4-(l，2-二羥基乙基)苯基]-20,20，21，21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮或實施例3的20,20,21，21，21-五氟-17-羥基-ll!3-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮)同時皮下治療動物。所用的載體是比率為l+4(v/v)的苯甲酸苄酯和蓖麻油的混合物。在開始治療後第ll天進行屍檢。取出子宮並固定供組織學。通過光學顯微鏡測定McPhail指數(腺樣分化(glandulardifferentiation)的程度)(評價1=無腺樣分化；4=最大腺樣分化)，作為抗促孕功效的參數(抑制由孕酮引起的腺樣分化)。所得的McPhail指數示於表2。表2:McPhail指數tableseeoriginaldocumentpage19實施例6a:1lp-4-(l，2-二羥基乙基)苯基-20，20，21，21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮和20，20，21，21，21-五氟-17-羥基-11卩-4-(羥基乙醯基)苯基-19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮在人肝微粒體(HLM)內的代謝穩定性使用人肝微粒體(HLM)評價通式I的物質的代謝穩定性。使用振蕩浴，將HLM和NADPH生成系統(雙份)在37。C溫育。按照下表新鮮製備溫育混合物(由輔因子溶液、磷酸鉀緩衝液和微粒體製劑組成)。tableseeoriginaldocumentpage19^L育體積為0.25ml。將溫育混合物在37。C預溫育三分鐘。通過添加受試物(最終濃度50pM)開始反應。在60分鐘的溫育時間後，通過添加250^甲醇終止反應，然後將混合物離心以使蛋白質成丸。將樣品保存在-18。C供後續RP-HPLC分析。根據RP-HPLC分析，在上清液中回收了約70。/。所用的lip-[4-(l,2-二羥基乙基)苯基]-20,20,21，21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮和約80%所用的20,20，21，21，21-五氟-17-羥基-11|3-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮。實施例6b:1lp-(4-乙醯基苯基)-20，20，21，21，21-五氟-17-羥基-19-去甲"7a-孕-4，9-二烯-3-酮在人肝微粒體(HLM)內的代謝穩定性使用人肝微粒體(HLM)評價通式I的物質的代謝穩定性。使用振蕩浴，將HLM和NADPH生成系統(雙份)在3/C溫育。按照下表新鮮製備溫育混合物(由輔因子溶液、磷酸鉀緩衝液和微粒體製劑組成)。緩衝液磷酸鉀，100mM，pH7.4緩衝液中的重建系統NADP1.2mM葡糖-6-磷酸8.0mM葡糖-6-磷酸脫氫酶1.4單位/mlMgCl25.0mMKC138.0mM蛋白質濃度(HLM)0.4mg/ml溫育體積為0.25ml。將溫育混合物在3/C預溫育三分鐘。通過添加受試物(最終濃度IOpM)開始反應。在60分鐘的溫育時間後，通過添加250nl甲醇終止反應，然後將混合物離心以使蛋白質成丸。將樣品保存在-18°(:供後續RP-HPLC分析。根據RP-HPLC分析，在上清液中回收了60。/。所用的lip-(4-乙醯基苯基)-20，20,21,21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮。20實施例7:11-4-(1，2-二羥基乙基)苯基-20，20，21，21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-17(1-孕-4，9-二烯-3-酮和20，20，21，21，21-五氟-17-羥基-11卩-[4-(羥基乙醯基沐基卜19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮在具有人孕酮A或孕酮B受體和MTV-LUC報導基因構建體的人神經母細胞瘤細胞(SK-N-MC細胞)的穩定轉染子中的抗促孕作用將用質粒穩定轉染的、表達人孕酮受體B(pRChPR-B-neo)或人孕酮受體A(pRChPR-A-neo)和報導基因構建體(pMMTV-LUC)的SK-N-MC細胞(人神經母細胞瘤細胞)，在不存在(陰性對照)或存在遞增量的lip-[4-(l,2-二羥基乙基)苯基]-20，20,21，21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮或20,20，21，21，21-五氟-17-羥基-llj3-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮(0.01nmo1/1、0.1nmo1/1、1nmo1/1、10nmo1/1、100nmol/l禾口lHmol/l)的情況下溫育24小時，以測定激動功效。用合成促孕激素普美孕酮(0.01nmo1/1、0.1nmo1/1、1nmo1/1、10證o1/1、100nmol/l和lnmol/l)處理細胞，作為報導基因誘導的陽性對照。為了測定拮抗活性，用O.lnmol/l普美孕酮並且另外用遞增量的lip-[4-(l,2-二羥基乙基)苯基]-20，20，21，21,21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮或20,20,21,21，21-五氟-17-羥基-11卩-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-1701-孕-4，9-二烯-3-酮(0.01nmo1/1、0.1nmo1/1、1nmo1/1、10nmo1/1、100證ol/l和lnmol/l)處理細胞。用遞增量的孕酮受體拮抗劑lip-(4-乙醯基苯基)-20,20,21，21，21-五氟-17-羥基-19-去甲一17a-孕-4,9畫二烯-3-酮(1pmo1/1、0.01nmo1/1、0.1nmo1/1、1nmo1/1、10nmo1/1和100nmol/l)溫育細胞，作為抑制報導基因轉錄的陽性對照。測定細胞溶解產物中的LUC報導基因(LUC二螢光素酶)的活性並將其測量為RLU(相對光單位)。將所有測得值表示為功效百分比(相對LUC活性為均值加/減標準偏差(n-3次實驗))和EC5Q或IC5c濃度。a)激動活性11j3-[4-(l，2-二羥基乙基)苯基]-20,20，21，21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-1701-孕-4,9-二烯-3-酮和20,20，21，21,21-五氟-17-羥基-11卩-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮都沒有顯示對PR-A或PR-B的LUC活性誘導(與普美孕酮陽性對照相反，普美孕酮誘導報導基因，為劑量的函數)。表213顯示兩種受試物和普美孕酮的激動活性。表3:11p-[4-(l,2-二羥基乙基)苯基]-20，20，21，21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮或20,20，21，21，21-五氟-17-羥基-11|3-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮的激動活性_tableseeoriginaldocumentpage22b)拮抗活性1lP-[4-(l，2-二羥基乙基)苯基]-20,20，21,21，21-五氟-17-羥基-19-去甲一1701_孕_4,9-二烯-3-酮和20，20，21,21，21-五氟-17-羥基-11卩-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮均顯示對由0.1nmol/l普美孕酮對兩種孕酮受體亞型誘導的LUC活性(100。/。)的劑量依賴性抑制。表4顯示兩種受試物與11(3-(4-乙醯基苯基)-20,20，21,21,21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮相比的激動活性。表4:11J3-[4-(l,2-二羥基乙基)苯基]-20，20，21，21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮或20,20，21,21，21-五氟-17-羥基-ll!3-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮的拮抗活性tableseeoriginaldocumentpage22-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮tableseeoriginaldocumentpage23這些數據顯示，11|3-[4-(1,2-二羥基乙基)苯基]-20，20,21，21,21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮和20,20,21，21，21-五氟-17-羥基-11|3-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-1701-孕-4,9-二烯-3-酮是穩定表達孕酮受體A或孕酮受體B的SK-N-MC細胞中的兩種孕酮受體亞型的純拮抗劑。兩種化合物均未顯示出對一種孕酮受體亞型的任何選擇性。然而，11(H4-(l，2-二羥基乙基)苯基]-20,20,21，21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a國孕-4，9-二烯-3-酮對於孕酮受體的效力比11|3-(4-乙醯基苯基)-20，20，21，21,21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮低約130倍。20，20，21,21，21-五氟-17-羥基-11卩-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮比11p-(4-乙醯基苯基)-20，20，21,21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮弱約13倍。穩定轉染的細胞系表達大約500fin(毫微微摩爾)PR-A或PR-B。權利要求1.通式I的孕酮受體拮抗劑式I其中R1可以是氫原子並且R2可以是羥基，或者R1和R2可以一起為氧代基團。2.1lp-[4-(l，2-二羥基乙基)苯基]-20,20，21，21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮。3.11卩-[4-[(1/)-1，2-二羥基乙基]苯基]-20，20,21，21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮。4.11卩-[4-[(15)-1,2-二羥基乙基]苯基]-20，20，21,21，21-五氟-17-羥基-19-去甲_17a-孕-4,9-二烯-3-酮。5.20，20，21,21,21-五氟-17-羥基-11&-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-1701-孕-4，9-二烯-3-酮。6.藥物，其包含權利要求1的孕酮受體拮抗劑。7.權利要求6的藥物，其包含11J3-[4-(l，2-二羥基乙基)苯基]-20，20,21,21;21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮。l.通式I的孕酮受體拮抗劑:8.權利要求7的藥物，其包含11(3-[4-[(li)-l，2-二羥基乙基]苯基]-20，20，21,21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮。9.權利要求7的藥物，其包含1lp-[4-[(15)-l,2-二羥基乙基]苯基〗-20，20,21，21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮。10.權利要求6的藥物，其包含20,20，21，21，21-五氟-17-羥基-11P-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮。11.權利要求1的孕酮受體拮抗劑用於製備用於治療子宮內膜異位症、肌瘤或激素依賴性腫瘤尤其是乳癌的藥物和用於女性避孕的藥物製劑的用途。12.權利要求11的用途，其包括1^-[4-(1，2-二羥基乙基)苯基]-17卩-羥基-17a-(l,l,2，2,2-五氟乙基)雌-4，9-二烯-3-酮。13.權利要求12的用途，其包括11|3-[4-[(1及)-1,2-二羥基乙基]苯基]-20,20，21,21,21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮。14.權利要求12的用途，其包括11卩-[4-[(LS)-l，2-二羥基乙基]苯基]-20，20，21，21，21-五氟-17-羥基-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮。15.權利要求11的用途，其包括20，20,21，21,21-五氟-17-羥基-llp-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-17a-孕-4，9-二烯-3-酮。16.11J3-(4-乙烯基苯基)-20，20，21，21,21-五氟-5，17-二羥基-19-去甲-5a,17a-孕-9-烯-3-酮2,2-二甲基丙垸-1，3-二基縮酮，其作為製備所述通式I的孕酮受體拮抗劑的中間體。17.11卩-[4-(1,2-二羥基乙基)苯基]-20，20，21,21，21-五氟-5，17-二羥基-19-去甲-5(1,1701-孕-9-烯-3-酮2,2-二甲基丙垸-1，3-二基縮酮，其作為製備所述通式I的孕酮受體拮抗劑的中間體。18.20，20,21，21,21-五氟-17-羥基-5,10a-環氧-19-去甲-5a,17a-孕-9(11)-烯-3-酮2,2-二甲基丙烷-1,3-二基縮酮，其作為製備所述通式I的孕酮受體拮抗劑的中間體。19.11卩-{4-[(4/)-2，2-二甲基-1，3-二氧戊環-4-基]苯基}-20,20,21，21，21-五氟-5,17-二羥基-19-去甲-5a，17a-孕-9-烯-3-酮2，2-二甲基丙垸-1,3-二基縮酮，其作為製備所述通式I的孕酮受體拮抗劑的中間體。20.11卩-[4-[2-[[[(1,1-二甲基乙基)二甲基甲矽烷基]氧基]甲基]-1，3-二氧戊環-2-基]苯基]-20，20,21，21,21-五氟-5,17-二羥基-l9-去甲-5a，17a-孕-9-烯-3-酮2，2-二甲基丙烷-1，3-二基縮酮，其作為製備孕酮受體拮抗劑20,20,21，21，21-五氟-17-羥基-11{-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-17&-孕-4,9-二烯-3-酮的中間體。21.20，20，21，21，21-五氟-5,17-二羥基-11卩-[4-[2-(羥甲基)-1,3-二氧戊環-2-基]苯基]-19-去甲-5a,17a-孕-9-烯-3-酮2，2-二甲基丙垸-1，3-二基縮酮，其作為製備孕酮受體拮抗劑20，20,21，21,21-五氟-17-羥基-lli-[4-(羥基乙醯基)苯基]-19-去甲-17a-孕-4,9-二烯-3-酮的中間體。22.權利要求1-7中任一項的化合物，其為分離的形式，優選為固體形式。23.權利要求3或4中任一項的化合物，其基本上不含權利要求3或4的另一化合物。24.權利要求6-10中任一項的藥物，其適合口服給藥，優選作為單位劑型。25.權利要求6-10或11中任一項的藥物，其包含0.01mg-100mg權利要求1的化合物。全文摘要本發明涉及通式I的孕酮受體拮抗劑，其中R1可以是氫原子並且R2可以是羥基，或者R1和R2可以一起為氧代基團。文檔編號C07J1/00GK101541823SQ200780042476公開日2009年9月23日申請日期2007年11月14日優先權日2006年11月15日發明者A·克利夫,A·施密特,A·羅特曼,C·莫勒,G·加爾克,M·布魯德尼-克勒佩爾,M·舒爾策-摩斯高,O·彼得羅夫,R·哈賽爾曼,S·普呂斯,U·富爾曼申請人:拜耳先靈醫藥股份有限公司