治療、診斷或檢測癌症的amigo-2抑制劑的製作方法

2024-01-20 17:50:15

專利名稱：：治療、診斷或檢測癌症的amigo-2抑制劑的製作方法治療、診斷或檢測癌症的AMIGO-2抑制劑發明領域本發明總體上涉及腫瘤學領域。更具體地說，本發明涉及治療癌症的方法，治療癌症的組合和診斷和/或檢測癌症的方法和組合物。
背景技術：
：癌症是美國的第二死因。雖然利用"癌症"描述許多不同類型的癌症，即乳腺癌、前列腺癌；肺癌、結腸癌、胰腺癌，但各類型癌症的區別既在於表型水平也在於遺傳學水平。當一種或多種基因的表達因突變而失調並且細胞生長不再受控制上，則發生癌症特徵性的不受調節生長。通常將基因分成兩類，癌基因和腫瘤抑制基因。癌基因是只有在特定條件下其功能為促進細胞生長的基因。當癌基因產生突變，隨後失控，其促進所有條件下的生長。然而，現已發現癌症要真正成功，該癌症還必須在腫瘤抑制基因中獲得突變。腫瘤抑制基因的正常功能是終止細胞生長。腫瘤抑制(基因)的例子包括p53、p16、p21和APC，所有這些在正常起作用時可終止細胞不受控地分化和生長。當腫瘤抑制(基因)突變或喪失，則對細胞生長的制動作用也喪失，從而細胞可不受限制地生長。AMIGO-2(也稱為Alivin1和DEGA)是AMIGO(兩性黴素(amphoterin)-誘導基因和ORF)家族的一員(Kuja-Panula等，JCB160:963,2003)。AMIGO家族參與細胞運動性，家族成員具有同嗜性和異嗜性相互作用。AMIGO-2還抑制凋亡，促進神經元存活(Ono等，JNeurosci235887，2003)。AMIGO-2在胃癌中上調(Rabenau等，Oncogene235056，2004)，穩定抑制AMIGO-2可抑制腫瘤細胞染色體穩定性、遷移和生長。然而，目前為止，AMIGO-2在癌症和其它疾病及病症中的作用尚未完全闡明。因此，需要堅定能調節AMIGO-2的組合物和方法。本發明涉及這些以及其它重要的需要。發明概述在一些方面，本發明提供包含AMIGO-2調節劑和一種或多種藥學上可接受的載體的組合物。在一方面，本發明的特徵在於包含AMIG0-2抑制劑和一種或多種藥學上可接受的載體的組合物，其中所述AMIG0-2抑制劑是分離的雙鏈RNA(dsRNA);含有選自SEQEDNO:7-16所構成組的序列中至少10個連續核苷酸的分離寡核苷酸；結合選自下組的AMIG02-結構域中表位的抗體信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域和Ig結構域；小分子；模擬物；可溶性受體；或引誘物。在另一方面，本發明的特徵在於特異性結合AMIGO-2多肽表位的純化抗體，其中所述表位位於信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域或Ig結構域中。在還有另一方面，本發明的特徵在於產生特異性結合AMIGO-2多肽表位的抗體的分離細胞，其中所述表位位於信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域或Ig結構域中。在另一方面，本發明的特徵在於產生特異性結合AMIGO-2多肽表位的抗體的雜交瘤，其中所述表位位於信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域或Ig結構域中。在還有另一方面，本發明的特徵在於產生特異性結合AMIGO-2多肽表位的抗體的非人轉基因動物，其中所述表位位於信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域或Ig結構域中。在另一方面，本發明的特徵在於SEQIDNO:2所示多肽的攜帶表位的分離片段，其中所述片段包含選自SEQIDNO:3-6和25-62所構成組的一種或多種表位。在還有另一方面，本發明的特徵在於編碼SEQIDNO:2所示多肽的攜帶表位的分離片段的多核苷酸，其中所述片段包含選自SEQIDNO:3-6和25-62所構成組的一種或多種表位。在還有另一方面，本發明的特徵在於用SEQIDNO:2所示多肽的攜帶表位的片段免疫對象而獲得的純化AMIGO-2抗體，其中所述片段包含選自SEQIDNO:3-6和25-62所構成組的一種或多種表位。在另一方面，本發明的特徵在於包含第一核苷酸鏈和第二核苷酸鏈的分離dsRNA分子，所述第一核苷酸鏈包含SEQIDNO:17-24所示某序列的至少19個連續核苷酸，所述第二核苷酸鏈包含與所述第一鏈基本上互補的序列，其中所述dsRNA分子長度短於3769個核苷酸。在還有另一方面，本發明的特徵在於包含第一核苷酸鏈和第二核苷酸鏈的分離dsRNA分子，所述第一核苷酸鏈包含SEQIDNO:17-24所示某序列的至少19個連續核苷酸，所述第二核苷酸鏈包含與所述第一鏈完全互補的序列，其中所述dsRNA分子長度短於3769個核苷酸。在另一方面，本發明的特徵在於包含SEQIDNO:7-16所示某序列的至少IO個連續核苷酸的分離核酸。在另一方面，本發明的特徵在於治療有此需要的患者的癌症或癌症症狀的方法，包括將治療有效量的AMIGO-2抑制劑給予患者，其中所述抑制劑是分離的雙鏈RNA(dsRNA);含有選自SEQIDNO:7-16所構成組的序列中至少10個連續核苷酸的分離寡核苷酸；結合選自下組的AMIG02-結構域中表位的抗體信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域和Ig結構域；小分子；模擬物；可溶性受體；或引誘物。在還有另一方面，本發明的特徵在於調節患者的AMIGO-2活性的方法，該方法包括將有效調節AMIGO-2活性用量的AMIGO-2抑制劑給予患者。在還有另一方面，本發明的特徵在於鑑定對AMIGO-2治療敏感的患者的方法，包括(a)檢測樣品中是否存在AMIGO-2表達的證據，其中樣品中存在AMIGO-2表達的證據表明患者是AMOGI-2治療的候選者，而樣品中不存在AMIGO-2表達的證據表明患者不是AMOGI-2治療的候選者，(b)如果患者是AMOGI-2治療的候選者，則將治療有效量的包含AMIGO-2抑制劑的組合物給予患者，和(c)如果患者不是AMOGI-2治療的候選者，則將傳統癌症治療劑給予患者。在另一方面，本發明的特徵在於抑制癌細胞生長的方法，包括使癌細胞與有效抑制細胞生長相比於對照至少20%的用量的AMIGO-2抑制劑接觸。在另一方面，本發明的特徵在於抑制有此需要的患者中癌細胞表型的方法，該方法包括將治療有效量的AMIGO-2抑制劑給予該患者。在另一方面，本發明的特徵在於抑制癌細胞生長的方法，該方法包括將調節AMIGO-2的一種或多種下遊標記物的化合物給予具有癌症的患者，所述癌症包含一種或多種表達AMIGO-2的細胞。AMIGO-2的一種或多種下遊標記物可以是c-MYC、c-Jun、FosLl和胞外信號調節激酶(ERK)。在一些實施方式中，調節一種或多種下遊標記物可以是抑制一種或多種下遊標記物的表達，例如抑制蛋白質或mRNA表達。在一些實施方式中，調節還可包括抑制AMIGO-2的一種或多種下遊標記物的活性。在一些實施方式中，調節ERK包括調節ERK的磷酸化。在一些實施方式中，調節ERK包括調節ERK激酶針對一種或多種ERK底物的活性。在還有另一方面，本發明的特徵在於檢測患者的腫瘤的方法，包括將包含與顯像劑相連的AMIGO-2抑制劑的組合物給予該患者並檢測該顯像劑在患者中的定位。在另一方面，本發明的特徵在於抑制患者中兩種或多種細胞相互作用的方法，包括將治療有效量的AMIGO-2抑制劑給予該患者。在另一方面，本發明的特徵在於在細胞中表達AMIGO-2抗體的方法，其中所述AMIGO-2抗體特異性結合包含選自SEQIDNO:3-6和25-62所構成組的序列的表位。該方法包括在細胞中表達編碼AMIGO-2抗體的核酸。在另一方面，本發明的特徵在於鑑定癌症抑制劑的方法，其中所述癌症的特徵在於AMIGO-2相比於對照過度表達。該方法包括使表達AMIGO-2的細胞與候選化合物接觸並測定AMIGO-2活性是否得到調節，其中所述AMIGO-2活性得到調節是癌症抑制劑的標誌。在另一方面，本發明的特徵在於鑑定癌症抑制劑的方法，其中所述癌症的特徵在於AMIGO-2相比於對照過度表達。該方法包括使表達AMIGO-2的細胞與候選化合物和AMIGO-2配體接觸並測定AMIGO-2下遊標記物的活性是否得到調節，其中所述下遊標記物得到調節是癌症抑制劑的標誌。在另一方面，本發明的特徵在於測定患者對AMIGO-2抑制劑敏感性的方法，包括檢測患者的癌症樣品中AMIGO-2差別表達的證據，其中AMIGO-2差別表達的證據是患者對AMIGO-2抑制劑敏感性的標誌。在另一方面，本發明的特徵在於從樣品中純化AMIGO-2蛋白的方法，包括(a)提供包含抗-AMIGO-2抗體的親和基質，所述抗體結合於固體支持物上，(b)使樣品與親和基質接觸以形成親和基質-AMIGO-2蛋白複合體，(c)將該親和基質AMIGO-2蛋白複合體與其餘樣品分離，和(d)從該親和基質上釋放AMIGO-2蛋白。在另一方面，本發明的特徵在於將細胞毒劑或診斷劑遞送至一種或多種表達AMIGO-2的細胞的方法。該方法包括(a)提供與抗-AMIGO-2抗體或其片段偶聯的細胞毒劑或診斷劑，和(b)使細胞與該抗體-試劑或片段-試劑偶聯物接觸。在另一方面，本發明的特徵在於測定候選AMIGO-2抑制劑效力的方法，包括使表達AMIGO-2的細胞與候選AMIGO-2抑制劑接觸並測定下遊AMIGO-2標記物的水平或活性是否降低，其中所述下遊標記物的水平或活性降低表明候選AMIGO-2抑制劑是有效的抗癌症藥物。在還有另一方面，本發明的特徵在於測定候選AMIGO-2抑制劑效力的方法，包括使表達AMIGO-2的細胞與候選AMIGO-2抑制劑接觸並測定PARP1切割是否增加，其中PARP1增加表明候選AMIGO-2抑制劑是有效的抗癌症藥物。在還有另一方面，本發明的特徵在於測定某種癌症是否為AMIGO-2相關癌症的方法，包括比較癌症和對照細胞中的AMIGO-2表達，其中與對照相比，癌細胞中AMIGO-2表達上調表明該癌症是AMIGO-2相關癌症。在還有另一方面，本發明的特徵在於測定某種癌症是否為AMIGO-2相關癌症的方法，包括使癌症樣品和對照樣品與AMIGO-2抑制劑接觸，並比較癌症樣品和對照樣品中AMIGO-2下遊標記物的水平或活性，其中與對照樣品相比，癌症樣品中AMIGO-2下遊標記物的水平或活性降低表明該癌症是AMIGO-2相關癌症。在另一方面，本發明的特徵在於測定某種癌症是否為AMIGO-2相關癌症的方法，包括使癌症樣品和對照樣品與AMIGO-2抑制劑接觸，並比較癌症樣品和對照樣品中的PARPl切割情況，其中與對照樣品相比，癌症樣品中PARPl切割增加表明該癌症是AMIGO-2相關癌症。在還有另一方面，本發明的特徵在於治療癌症患者的方法，包括測定某種癌症是否為AMIGO-2相關癌症，如果該患者具有AMIGO-2相關癌症則將包含AMIGO-2抑制劑的組合物給予該患者，如果該患者不具有AMIGO-2相關癌症則將傳統癌症治療劑給予該患者。在另一方面，本發明的特徵在於治療癌症患者的方法，包括比較患者癌症樣品中的AMIGO-2表達與對照樣品中的AMIGO-2表達，並(l)如果與對照樣品相比，該癌症樣品中AMIGO-2表達上調則用包含AMIGO-2抑制劑的組合物治療該患者，和(2)如果與對照樣品相比，該癌症樣品中AMIGO-2表達未變或下調則進行二級試驗。在另一方面，本發明的特徵在於診斷患者中癌症的方法，包括檢驗候選癌細胞中的AMIGO-2定位，其中當定位於細胞膜的AMIGO-2與定位於不包括細胞膜的癌細胞其它區域的AMIGO-2之比至少為2:1時，該患者診斷為具有AMIGO-2相關癌症。在另一方面，本發明的特徵在於檢測包含表達AMIGO-2的細胞的樣品中AMIGO-2活性調節情況的方法。該方法包括(a)使樣品與AMIGO-2抑制劑接觸足以調節AMIGO-2活性的時間，(b)用抗-AMIGO-2抗體免疫沉澱AMIGO-2，和(c)利用磷酸-絲氨酸/蘇氨酸抗體比較樣品與對照中AMIGO-2絲氨酸/蘇氨酸磷酸化情況。與對照相比，樣品中AMIGO-2的絲氨酸/蘇氨酸磷酸化情況改變表明AMIGO-2活性得到調節。在另一方面，本發明的特徵在於檢測包含表達AMIGO-2的細胞的樣品中AMIGO-2活性調節情況的方法。該方法包括(a)使樣品中的AMIGO-2過度表達足以調節AMIGO-2活性的時間，(b)用抗-AMIGO-2抗體免疫沉澱AMIGO-2，和(c)利用磷酸-絲氨酸/蘇氨酸抗體比較樣品與對照中AMIGO-2絲氨酸/蘇氨酸磷酸化情況。與對照相比，樣品中AMIGO-2的絲氨酸/蘇氨酸磷酸化情況改變表明AMIGO-2活性得到調節。在還有另一方面，本發明的特徵在於檢測包含表達AMIGO-2的細胞的樣品中AMIGO-2活性調節情況的方法。該方法包括(a)使樣品與AMIGO-2抑制劑接觸足以調節AMIGO-2活性的時間，(b)用抗-磷酸-絲氨酸/蘇氨酸抗體免疫沉澱AMIGO-2，和(c)利用抗AMIGO-2抗體比較樣品與對照中磷酸化AMIGO-2的水平。與對照相比，樣品中磷酸化AMIGO-2的水平改變表明AMIGO-2活性得到調節。在另一方面，本發明的特徵在於檢測包含表達AMIGO-2的細胞的樣品中AMIGO-2活性調節情況的方法。該方法包括(a)使樣品中的AMIGO-2過度表達足以調節AMIGO-2活性的時間，(b)用抗-磷酸-絲氨酸/蘇氨酸抗體免疫沉澱AMIGO-2，和(c)利用抗AMIGO-2抗體比較樣品與對照中磷酸化AMIGO-2的水平。與對照相比，樣品中磷酸化AMIGO-2的水平改變表明AMIGO-2活性得到調節。在另一方面，本發明的特徵在於鑑定AMIGO-2調節劑的方法，包括比較有和沒有候選化合物存在下，包含表達AMIGO-2的一種或多種細胞的樣品中AMIGO-2的磷酸化，其中與沒有候選化合物存在下樣品中AMIGO-2的磷酸化相比，有候選化合物存在下樣品中AMIGO-2的磷酸化得到調節表明該候選化合物是AMIGO-2調節劑。發明詳述中將說明本發明的這些和其它方面。附圖簡述圖1A和1B描述了用AffymetrixGeneChip(人基因組U133+2.0陣列(HumanGenomeU133Plus2.0Array),艾飛麥特利克斯公司(Affymetrix,Inc.))寡核苷酸陣列(圖lA)和內部合成的cDNA微陣列(圖IB)產生的基因表達數據o圖2圖示了正常組織和結腸、乳腺和前列腺組織樣品中相對AMIGO-2mRNA水平。圖》圖示了從癌性和正常組織分離的AMIGO-2mRNA的寡核苷酸陣列數據(人基因組U133+2.0陣列，艾飛麥特利克斯公司)。正常和癌性組織類型沿x軸表示。縱軸上的各斑點表示一位患者的組織樣品，各斑點在縱軸上的高度(線性)表示探針組的相對表達水平。實心圓圈表示表達水平處於線性檢測範圍內的樣品。空心圓圈表示樣品中基因表達的上限，此處基因低於探針組的檢測界限。空心正方形表示樣品中基因表達的下限，此處探針組飽和。圖4描述了圖3所示的圖示，但y-軸為log2值。正常和癌性組織類型沿水平軸表示。癌組織的名稱前有"c"，正常組織的名稱前為"n"。"ns"表示未指定的組織亞型。圖5描述了顯示從6種不同細胞系分離的AMIGO-2蛋白的蛋白質印跡分析。相對半-定量RT-PCRCt水平表示於毗鄰4種細胞系的名稱的括號中。圖6圖示了給予siRNA後SW620細胞中的AMIGO-2mRNA水平。y-軸是相對比例，數值是任意的。UT=未轉染的；Eg5=靶向Eg5沃關基因)的siRNA;陰性對照=與任何己知基因不同源的siRNA序列；C315-1.2到C315-4.3是一組AMIGO-2siRNA。圖7A圖示了給予siRNA後Colo320細胞中的AMIGO-2mRNA水平。y-軸是相對比例，數值是任意的。Eg5=靶向Eg5(無關基因)的siRNA;陰性對照=與任何已知基因不同源的siRNA序列；C315-1.2和C315-4.3是AMIGO-2特異性siRNA。圖7B圖示了給予siRNA後HCT116細胞中的AMIGO-2mRNA水平。y-軸是相對比例，數值是任意的。Eg5=靶向Eg5(無關基因)的siRNA;陰性對照=與任何已知基因不同源的siRNA序列；C315-1.2和C315-4.3是AMIGO-2特異性siRNA。圖8A圖示了AMGO-2特異性siRNA對SW620細胞死亡的作用。"Pos.對照"是耙向Eg5的Eg5siRNA。"陰性對照"是與任何已知基因不同源的siRNA序列。y-軸檢測與死細胞數目成比例的發光水平。圖8B圖示了AMIGO-2特異性siRNA對MRC9細胞死亡的作用。"Pos.對照"是靶向Eg5的Eg5siRNA。"陰性對照"是與任何已知基因不同源的siRNA序列。y-軸檢測與死細胞數目成比例的發光水平。圖9描述了顯示AMIGO-2特異性siRNA對AGS細胞中AMIGO-2、PARP、M30和微管蛋白表達和加工的作用的一組蛋白質印跡。"Pos.對照"表示用Eg5siRNA轉染的細胞的裂解液。"陰性對照"表示用與任何已知基因不同源的siRNA序列轉染的細胞的裂解液。圖10A描述了顯示AMIGO-2特異性siRNA對SW620細胞中AMIGO-2、ERK、c-Myc和微管蛋白表達和加工的作用的一組蛋白質印跡。pERK是磷酸化的ERK蛋白。"陰性對照"如圖9所示。圖10A圖示了AMIGO-2特異性siRNA對SW620細胞中c-MYCmRNA水平的作用。"Pos.對照"是靶向Eg5的Eg5siRNA。"陰性對照"是與任何已知基因不同源的siRNA序列。y-軸檢測通過qPCR測定的mRNA的相對表達水平。圖11描述了顯示AMIGO-2特異性siRNA對AGS細胞中AMIGO-2、ERK、c-Myc、細胞周期蛋白Dl和微管蛋白表達和加工的作用的一組蛋白質印跡。pERK是磷酸化的ERK蛋白。標有"抗-有絲分裂基因"的泳道表示用Eg5siRNA轉染的細胞的裂解液。"陰性對照"表示用與任何已知基因不同源的siRNA序列轉染的細胞的裂解液。圖12A-12C描述了調節AMIGO-2對cJun表達的作用。圖12A是顯示cJun在用AMIGO-2siRNA轉染的細胞中下調的一組蛋白質印跡。"UT"表示未轉染的對照樣品；"DharmNeg"是與任何己知基因不同源的陰性對照siRNA序列；C315-1.3si是AMIGO-2特異性siRNA。圖12B是顯示cJun表達在用AMIGO-2轉染的細胞中上調的一組蛋白質印跡。圖12C是顯示使AGS細胞與激動劑抗-AMIGO-2抗體MAB2080接觸後cJun上調的蛋白質印跡。"ISO"表示同種型對照。圖13描述了顯示AMIGO-2敲除對AGS和SW620細胞中細胞周期蛋白Bl和cFos表達的作用的一組蛋白質印跡。"UT"表示未轉染的對照樣品；"DharmNeg"是與任何已知基因不同源的陰性對照siRNA序列；C315-1.3si和C315-4.3si是AMIGO-2特異性siRNA。圖14A-C描述了調節AMIGO-2對cMyc表達的作用。圖14A和14B是顯示使SW620(圖14A)和AGS(圖14B)細胞與AMIGO-2siRNAC315-1.3si和C315-4.3si接觸後c-Myc下調的一組蛋白質印跡。"UT"是未轉染的細胞培養液。"Neg"表示用與任何己知基因不同源的siRNA序列轉染的樣品。"Eg5"表示用靶向Eg5的siRNA轉染的樣品。圖14C表示使SW620細胞和AGS細胞與抗-AMIG0-2抗體MAB2080接觸後cMyc在細胞中上調的蛋白質印跡。圖15A-15B描述了利用AMIGO-2調節劑一致下調(圖15A)和上調(圖15B)的基因。圖16描述了顯示AMIGO-2-特異性抗體MAB2080(A)對SW620細胞的全細胞裂解液中cJUN、cFosLl和微管蛋白表達的作用的一組蛋白質印跡(上兩幅圖)。下圖中一系列蛋白質印跡描述了與細胞中總ERK相比，MAB2080(A)對ERK磷酸化(pERK)的作用。T或"同種型對照"表示用非特異性小鼠IgG處理SW620細胞。詳述本申請的發明人發現AMIG0-2在包括肺癌和結腸癌在內的幾種癌症中過度表達，而在正常組織中表達有限。令人意外地，抑制AMIGO-2抑制了癌細胞存活。此外，現已發現抑制AMIGO-2能調節包括，例如細胞周期蛋白D1、細胞周期蛋白B1、c-Myc、cJcun、FosLl、VEGF、尿激酶或ERK在內的下遊標記物水平。因此，本發明提供治療、診斷和使癌症成像的方法和組合物，特別是治療診斷和使AMIGO-2相關癌症成像，以及治療AMIGO-2表達異常相關的其它疾病和病症。本申請提供了本發明的這些和其它方面。定義本文件採用了各種定義。大多數詞語具有本領域技術人員所賦予那些詞語的意義。在下文或本文件它處專門定義的詞語總體上具有本發明範圍內提供的意義，與本領域技術人員通常理解的一樣。除非另有表述，實施本發明可採用本領域技術範圍內的常規化學、生物化學、分子生物學、免疫學和藥學方法。參考文獻中充分解釋了這些技術。參見，例如Remington'sPharmaceuticalSciences(雷明頓藥物科學)，第18版(伊斯頓，賓夕法尼州，馬克出版公司(MackPublishingCompany),1990)，MethodsInEnzymology(酶學方法)(S.Colowick禾BN.Kaplan編，學術出版社公司(AcademicPress,Inc))和HandbookofExperimentalImmunology(實驗免疫學手冊)，第I-IV巻(D.M.Weir和C.C.Blackwell編，1986，布萊克威爾科學出版公司(BlackwellScientificPublications))禾BSambrook等，MolecularCloning:ALaboratoryManual(分子克隆實驗室手冊)(第2版，1989)。除非文中另有表述，本文所用的單數形式"一個"、"一種"和"該"包括複數形式。因此，例如"一個抗體"包括兩個或多個這種抗體的混合物。本文所用的術語"約"指某數值的+/-30%、+/-20%、+/-10%或+/-5%。本文所用的術語"AMIGO-2"(也稱為Alivinl(ALIl)禾卩DEGA)指具有Ig樣結構域2的黏著分子。AMIGO-2的核苷酸序列見SEQIDNO:l(GenBank登錄號NM—181847)，AMIGO-2的胺基酸序列見SEQIDNO:2(GenBank登錄號NMj81847)。該術語"AMIGO-2"還包括核酸和胺基酸同源物。在一些實施方式中，這種AMIGO-2核酸和胺基酸保留了投入AMIGO-2核酸或胺基酸的一種或多種活性。術語"多肽"和"蛋白質"可互換使用，指任何長度的胺基酸聚合形式，其可包含編碼和非編碼的胺基酸，化學或生物化學修飾或衍生的胺基酸和具有修飾的肽主鏈的多肽。該術語包括融合蛋白，包括但不限於具有異源胺基酸序列的融合蛋白；具有異源和同源前導序列的融合蛋白，含或不含N-末端甲硫氨酸殘基；免疫學標記的蛋白質；等等。術語"個體"、"對象"、"宿主"和"患者"可互換使用，指需要診斷、治療或診治的任何對象，尤其是人。其它對象可包括牛、狗、貓、豚鼠、家兔、大鼠、小鼠、馬等。在一些實施方式中，所述對象是人。本文所用的"癌症"指原發癌或轉移癌。術語"癌細胞"指轉化的細胞。可以從癌症患者分離這些細胞，或者這些細胞可以是體外轉化成癌性的細胞。癌細胞可以衍生自許多類型的樣品，包括任何組織或細胞培養系。在一些實施方式中，癌細胞是過度增生性，腫瘤細胞或贅生物。在一些實施方式中，從肺組織、膀胱組織、腎組織、結腸組織、乳腺組織、子宮組織、卵巢組織或胰腺組織分離癌細胞。在一些實施方式中，癌細胞取自公眾可得的已有細胞系。在一些實施方式中，從先前存在的患者樣品或含癌細胞的文庫分離癌細胞。在一些實施方式中，分離癌細胞，然後植入不同的宿主，例如異種移植。在一些實施方式中，移植癌細胞，用於SCID小鼠模型。在一些實施方式中，癌症是肺癌或結腸癌。在一些實施方式中，癌症是除胃癌以外的癌症。本文所用的術語"轉化的"指其後代可穩定遺傳的細胞特性的任何改變。在一些實施方式中，"轉化的"指正常細胞向癌性細胞改變，例如能導致腫瘤的改變。在一些實施方式中，轉化細胞是無限增殖的。許多因素可導致轉化，包括某受體在缺乏受體磷酸化下的過度表達，病毒感染、癌基因和/或腫瘤抑制基因的突變，和/或改變細胞的生長和/或無限增殖特性的任何其它技術。"癌性表型"通常指作為癌細胞特徵的各種生物學現象，這些現象可因癌症類型而有所不同。通常由，例如細胞生長或增殖(例如，不受控的生長或增殖)，細胞周期的調節，細胞運動性，細胞-細胞相互作用或轉移等等中的異常現象來鑑定癌性表型。本文所用的術語"轉移"指某癌症從其起源，例如從原發癌症擴展到遠端部位。轉移部位包括但不限於骨、淋巴結、肺、肝和腦。本文所用的術語"血管發生"指患者體內產生血管。本文所用的術語"臨床終末點"指表明癌症的可檢測現象。臨床終末點包括但不限於首次轉移的時間、後繼轉移的時間、轉移的大小和/或數量、腫瘤的大小和/或數量、腫瘤的定位、腫瘤的侵襲性、生活質量、疼痛等等。本領域技術人員能確定並檢測臨床終末點。本領域技術人員己知檢測臨床終末點的方法。本文所用的術語"樣品"指患者的生物學材料。本發明檢驗的樣品不限於任何特定類型。樣品包括但不限於單細胞、多細胞、組織、腫瘤、生物學液體、生物學分子或任何前述的上清液或提取物。例子包括取出用於生物活檢的組織，切除期間取出的組織，血液，尿液，淋巴組織，腦脊液，粘液和糞便樣品。所用的樣品根據試驗形式、檢測方法和待檢驗的腫瘤、組織、細胞或提取物的性質而有所不同。本領域熟知製備樣品的方法，不難採用這些方法獲得與所用方法相容的樣品。本文所用的術語"生物學分子"包括但不限於多肽、核酸和糖。本文所用的術語"調節"指細胞內、外或其表面上的基因、蛋白質或任何分子的質量或數量的改變。所述改變可以是分子表達或水平的增加或降低。術語"調節"還包括改變生物學功能/活性的質量或數量，所述生物學功能/活性包括但不限於細胞信號傳導活性、細胞周期調節、激酶活性、絲氨酸/蘇氨酸激酶活性、細胞-細胞相互作用活性、影響多倍性的活性、染色體穩定性、致瘤性、細胞運動性、轉移性、癌細胞存活、癌細胞生長、增殖、通過細胞周期進展、不依賴於貼壁的生長、AMIGO-2蛋白定位於細胞膜、細胞-細胞相互作用,包括在AMIGO-2與AMIGO-l(GenBank登錄號NM_020703，胺基酸序列見SEQIDNO:63)或AMIGO-3(GenBank登錄號NM—198722，胺基酸序列見SEQIDNO:64)中一種或兩種之間的相互作用、細胞質磷酸化AMIGO-2蛋白的水平、血管發生、神經元長出(neuronaloutgrowth)或細胞死亡。本文所用的術語"調節劑"指能調節一種或多種癌症相關的生理學或生物化學事件的組合物。在一些實施方式中，所述調節劑抑制一種或多種癌症相關的生物學活性。在一些實施方式中，所述調節劑是小分子、抗體、模擬物、引誘物或寡核苷酸。在一些實施方式中，所述調節劑通過阻斷配體結合或通過競爭配體結合位點而起作用。在一些實施方式中，所述調節劑不依賴於配體結合而起作用。在一些實施方式中，所述調節劑不競爭配體結合位點。在一些實施方式中，所述調節劑阻斷涉及癌症的基因產物表達。在一些實施方式中，所述調節劑阻斷涉及癌症的兩種或更多種生物分子的物理相互作用。在一些實施方式中，本發明調節劑抑制選自下組的一種或多種AMIGO-2活性細胞信號傳導活性、細胞周期調節、激酶活性、絲氨酸/蘇氨酸激酶活性、細胞-細胞相互作用活性、影響多倍性的活性、染色體穩定性、致瘤性、細胞運動性、轉移性、癌細胞存活、癌細胞生長、增殖、通過細胞周期進展、不依賴於貼壁的生長、AMIGO-2蛋白定位於細胞膜、細胞-細胞相互作用(包括在AMIGO-2與AMIGO-l或AMIGO-3中一種或兩種之間的相互作用)、細胞質磷酸化AMIGO-2蛋白的水平、血管發生、神經元長出。在一些實施方式中，所述AMIGO-2調節劑抑制AMIGO-2表達。在一些實施方式中，所述調節劑抑制分裂細胞發展成細胞周期的G2/M期。"基因產物"是基因表達或產生的生物聚合產物。基因產物可以是，例如未剪接的RNA、mRNA、剪接變體mRNA、多肽、翻譯後修飾的多肽、剪接變體多肽等。該術語還包括利用RNA基因產物(即，RNA的cDNA)作為模板產生的生物聚合產物。基因產物可用酶方法、重組方法、化學方法或在該基因的天然細胞內產生。在一些實施方式中，如果基因產物是蛋白性的，其顯示生物學活性。在一些實施方式中，如果基因產物是核酸，可將其翻譯成顯示生物學活性的蛋白性基因產物。本文所用的"調節AMIGO-2活性"指，例如某物質與AMIGO-2多核苷酸序列或多肽相互作用，抑制AMIGO-2轉錄和/或翻譯(例如通過反義或siRNA與AMIGO-2基因或AMIGO-2基因表達產物相互作用，通過調節促進AMIGO-2表達的轉錄因子)等而導致AMIGO-2活性增加或降低。例如，調節AMIGO-2活性指生物學活性增加或生物學活性降低。調節AMIGO-2活性也指增加或降低一種或多種AMIGO-2表型。可通過(包括但不限於)評估AMIGO-2多肽水平，或通過評估AMIGO-2轉錄水平來評估AMIGO-2活性。還可通過檢測AMIGO-2下遊標記物水平、檢測染色體穩定性、檢測激酶活性、檢測致瘤性、檢測轉移、檢測AMIGO-2信號傳導、檢測AMIGO-2介導的細胞黏著、檢測AMIGO-2介導的癌細胞凋亡、檢測ERK磷酸化、檢測癌細胞生長、檢測腫瘤形成、檢測細胞周期蛋白產生、檢測細胞增殖、檢測癌細胞生長、檢測不依賴與貼壁的生長、檢測細胞周期調節、檢測神經元指導(neuronalguidance)、檢測癌細胞運動性、檢測AMIGO-2蛋白定位於細胞膜、檢測細胞-細胞相互作用(包括在AMIGO-2與AMIGO-l或AMIGO-3中一種或兩種之間的相互作用)、檢測細胞質磷酸化AMIGO-2蛋白的水平、檢測血管發生和檢測細胞死亡等來比較AMIGO-2活性。在一些實施方式中，尤其感興趣的是抑制AMIGO-2活性。本文所用的術語"抑制"指活性或數量的減少、降低、失活或下調。例如，就本發明而言，AMIGO-2調節劑可抑制一種或多種致瘤性；癌細胞運動性；細胞黏附；轉移性；癌細胞存活；激酶活性；增殖；不依賴於貼壁的生長；癌細胞運動性；AMIGO-2蛋白定位於細胞膜；在AMIGO-2與AMIGO-l或AMIGO-3中一種或兩種之間的相互作用；神經元指導；細胞質磷酸化AMIGO-2蛋白的水平；磷酸化ERK的水平和血管發生。與對照相比，這些活性的抑制可以是至少25%、至少50%、至少75%、至少80%、至少卯％、至少95%、至少97%、至少98%、至少99%或100°/。。本領域技術人員能檢測AMIGO-2調節情況；示範性試驗的非限制性例子見下文。因此，本文所用的術語"抑制AMIGO-2"指一種或多種AMIGO-2-介導的生物學活性的減少、降低、失活或下調。"AMIGO-2生物學活性"的抑制指，例如以下活性的減少、降低、失活或下調致瘤性；癌細胞運動性；細胞黏附;轉移性；癌細胞存活；激酶活性；增殖；不依賴於貼壁的生長；癌細胞運動性；AMIGO-2蛋白定位於細胞膜；在AMIGO-2與AMIGO-l或AMIGO-3中一種或兩種之間的相互作用；神經元指導；細胞質磷酸化AMIGO-2蛋白的水平；磷酸化ERK的水平；或血管發生。與對照相比，這些活性的抑制可以是至少25%、至少50%、至少75%、至少80%、至少卯％、至少95%、至少97%、至少98%、至少99%或100%。在一些實施方式中，尤其感興趣的是調節AMIGO-2活性從而能活化或導致AMIGO活性增加。AMIGO-2調節劑可抑制一種或多種多倍性和細胞死亡(活性)。與對照相比，AMIGO-2活性的活化、上調或增加可以是至少125%、至少150%、至少200%、至少250%、至少300%、至少500%。例如，與對照相比，增加細胞死亡率200%的AMIGO-2調節劑將細胞死亡率提高兩倍。本文所用的術語"在癌細胞中有差別地表達"和"在癌細胞中有差別地表達的多核苷酸"可互換使用，指與細胞類型相同的非癌性細胞相比，代表或對應於在癌性細胞中有差別地表達的基因的多核苷酸，例如，發現mRNA水平差異有至少約25%、至少約50%-約75%、至少約90%、至少約1.5倍、至少約2倍、至少約5倍、至少約10倍或至少約50倍或更高(例如，較高或較低)。該比較可以在組織中進行，例如如果採用在組織的細胞類型之間有一定區分程度的原位雜交或另一試驗方法。還可以在從組織來源取出的細胞之間，或在原位細胞與從組織來源取出的第二細胞之間進行比較。在一些實施方式中，與正常細胞相比，所述基因在癌基因中上調。如果AMIGO-2相關癌症的至少一種症狀緩解、終止、減緩或阻止則該癌症受到"抑制"。如本文所用，如果AMIGO-2相關癌症的復發或轉移降低、減緩、延遲或阻止則也"抑制"了該癌症。本文所用的短語"抑制AMIGO-2介導的細胞黏著"指有AMIGO-2調節劑存在下，細胞-細胞黏著的降低、減少或消除，其中至少一種細胞有差別地表達AMIGO-2。就此而言，與沒有AMIGO-2調節劑存在時AMIGO-2介導的細胞黏著相比，AMIGO-2調節劑可將AMIGO-2介導的細胞黏著降低至少25%、至少50%、至少75%、至少85%、至少90%、至少95%，最多達100%。可通過檢測，例如通過標記感興趣的細胞，將它們與黏著於基板的一群未標記細胞溫育，並作清洗以分開黏著和未黏著的細胞群來比較AMIGO-2介導的細胞黏著。以此方式可通過檢測保留於基板上的標記量來確定細胞黏著。試驗系統的例子包括但不限於用螢光標記物，例如鈣螢光素AM、CFMDA(5-氯甲基螢光素二乙酸酯)、5(6)-CFDA-SE[5-(和-6)-羧基螢光素二乙酸酯，琥珀醯亞胺酯]作標記並用螢光平板讀數計或通過流式細胞術檢測螢光。本文所用的短語"抑制癌細胞生長"指有AMIGO-2調節劑存在下降低、減少或消除癌細胞生長，其中所述細胞表達AMIGO-2。在一些實施方式中，與其它正常細胞相比和/或與其它癌細胞相比，這些細胞有差別地表達AMIGO-2。就此而言，與沒有AMIGO-2調節劑存在下的癌細胞生長相比，AMIGO-2調節劑可將細胞生長降低至少25%、至少50%、至少75%、至少85%、至少卯％、至少95%，最多達100。/。。可採用，例如MTT試驗(例如，英傑公司(Invitrogen)的Vybrant②MTT細胞增殖檢驗試劑盒)；BrdU摻入(例如，英傑公司的絕對-SSBIP試驗)；檢測胞內ATP水平(例如，利用帕金埃爾默公司(PerkTnElmer)的ATPLiteTM-M，l，OOO檢驗試劑盒或生景公司(BioVision)的ATP細胞活力檢驗試劑盒)；DiOcl8試驗，一種膜透過性染料(英傑公司)；葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性試驗(例如，英傑公司的Vibrant細胞毒性試驗)；或檢測細胞LDH活性來比較癌細胞生長。本文所用的短語"抑制腫瘤形成"指有AMIGO-2調節劑存在下降低、減少或消除腫瘤形成，其中所述腫瘤包含有差別地表達AMIGO-2的細胞。就此而言，與沒有AMIGO-2調節劑存在下的腫瘤形成相比，AMIGO-2調節劑可將腫瘤形成降低至少25%、至少50°/。、至少75%、至少85%、至少90%、至少95%，最多達100%。可採用，例如細胞試驗(例如軟瓊脂中的菌落形成)；通常依賴於將感興趣細胞注射入動物的腫瘤形成體內模型(例如，無胸腺小鼠或大鼠，受輻射的小鼠或大鼠，接種入免疫特惠區，如腦、頰囊或眼，接種同系動物)和在限定時間後監測(腫瘤)塊大小來比較腫瘤形成。本文所用的短語"抑制細胞周期蛋白Dl"指降低、減少或消除AMIGO-2介導的細胞周期蛋白產生。就此而言，與沒有AMIGO-2調節劑存在下的AMIGO-2介導細胞周期蛋白產生相比，抑制性物質可將AMIGO-2介導的細胞周期蛋白產生降低至少25%、至少50%、至少75%、至少85%、至少卯％、至少95%，最多達100%。可通過以下方式比較細胞周期蛋白產生通過RT-PCR或northern印跡檢測，例如細胞周期蛋白mRNA水平；通過免疫印跡、免疫沉澱或ELISA檢測細胞周期蛋白的多肽水平；或採用功能試驗，包括利用例如靶向CDK、p21WAFl、p27KIP-1的抗體進行免疫共沉澱試驗以檢測與細胞周期蛋白調節劑，如細胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)形成複合體的細胞周期蛋白水平；和通過放射性標記與免疫沉澱分析或FRET復發，例如分子裝置公司(MolecularDevices)的CDK2/細胞周期蛋白A檢驗試劑盒來檢測CDK導致的細胞周期蛋白的磷酸化情況。本文所用的短語"抑制細胞周期蛋白Bl"指降低、減少或消除AMIGO-2介導的細胞周期蛋白產生。就此而言，與沒有AMIGO-2調節劑存在下的AMIGO-2介導細胞周期蛋白產生相比，抑制性物質可將AMIGO-2介導的細胞周期蛋白產生降低至少25%、至少50%、至少75%、至少85%、至少卯％、至少95%，最多達100%。可按照所述細胞周期蛋白D1所述的方法比較細胞周期蛋白產生。本文所用的短語"抑制FosLl"指降低、減少或消除AMIGO-2介導的FosLl產生。就此而言，與沒有AMIGO-2調節劑存在下的AMIGO-2介導FosLl產生相比，抑制性物質可將AMIGO-2介導的FosLl產生降低至少25%、至少50%、至少75%、至少85%、至少卯％、至少95%，最多達100%。可通過RT-PCR或northern印跡檢測，例如FosLlmRNA水平；或通過免疫印跡、免疫沉澱、ELISA或免疫組織化學方法檢測FosLl多肽水平來比較FosLl產生。檢測FosLl表達(例如，mRNA或蛋白質表達)的合適方法的例子見本實施例，例如Matsuo等(2000)NatureGenet24:184-187和Sahin等(2005)Pancreas30(2):158-167中也有描述。本文所用的"抑制c-Myc"指降低、減少或消除AMIGO-2介導的c-Myc產生。就此而言，與沒有AMIGO-2調節劑存在下的AMIGO-2介導c-Myc產生相比，抑制性物質可將AMIGO-2介導的c-Myc產生降低至少25°/。、至少50%、至少75%、至少85%、至少90%、至少95%，最多達100%。可通過RT-PCR或northern印跡檢測，例如c-MycmRNA水平；或通過免疫印跡、免疫沉澱、ELISA或免疫組織化學方法檢測c-Myc多肽水平來比較c-Myc產生。或者，可"功能性地"檢測c-Myc，例如通過c-Myc轉錄因子促進靶基因轉錄的能力。所述靶基因可以是內源性基因或者可以是外源性轉基因(g卩，報導基因)。可採用本文所述的任何方法檢測靶基因mRNA或蛋白質的表達。在一些例子中，所述報導基因可以是具有可檢測活性的酶(例如，螢光素酶、氯黴素乙醯基轉移酶、鹼性磷酸酶或辣根過氧化物酶)或可檢測的蛋白質(例如，綠色螢光蛋白或紅色螢光蛋白)。檢測c-Myc表達(例如，mRNA或蛋白質表達)的合適方法的例子是本領域已知的，詳見本實施例。監測報導基因表達，特別是上述酶或可檢測的報導基因的方法是本領域熟知的，描述於，例如Cziepluch等(1993)Oncogene8(10):2833-8。本文所用的"抑制c-Jun"指降低、減少或消除AMIGO-2介導的c-Jun產生。就此而言，與沒有AMIGO-2調節劑存在下的AMIGO-2介導c-Jun產生相比，抑制性物質可將AMIGO-2介導的c-Jun產生降低至少25%、至少50%、至少75%、至少85%、至少卯％、至少95%，最多達100%。可通過RT-PCR或northern印跡檢測，例如c-MycmRNA水平；或通過免疫印跡、免疫沉澱、ELISA或免疫組織化學方法檢測c-Jun多肽水平來比較c-Jun產生。或者，可"功能性地"檢測c-Jun，例如通過c-Jun轉錄因子促進靶基因轉錄的能力。所述靶基因可以是內源性基因或者可以是外源性轉基因(S卩，報導基因)。可採用本文所述的任何方法檢測靶基因mRNA或蛋白質的表達。檢測c-Jun表達(例如，mRNA或蛋白質表達)的合適方法的例子是本領域己知的，詳見本實施例，例如Kharbanda等(1991)Biochemistry30:7947-7952和Kayahara等(2005)MolCellBiol25(9):3784-3792中也有描述。監測報導基因表達，特別是上述酶或可檢測的報導基因的方法是本領域熟知的，上文有所描述。本文所用的短語"抑制ERK磷酸化"指降低、減少或消除AMIGO-2介導的ERK磷酸化。就此而言，與沒有AMIGO-2調節劑存在下的AMIGO-2介導ERK磷酸化相比，抑制性物質可將AMIGO-2介導的ERK磷酸化降低至少25%、至少50%、至少75%、至少85%、至少90°/。、至少95%,最多達100%。可採用本領域技術人員已知的磷酸化試驗評估ERK磷酸化的比較。儘管不局限於任何特定的理論或作用機制，因為ERK的磷酸化通常導致其活化，但在一些實施方式中，該短語"抑制ERK磷酸化"也可指減少、降低或消除AMIGO-2介導的磷酸化ERK所致的一種或多種ERK底物磷酸化。ERK底物包括但不限於IEX-1、ELK1、樁蛋白、Bcl-2、S0S或SP1。監測ERK對其底物的激酶活性的方法是本領域已知的，描述於，例如Mediant等(1999)BBRC254:454-461;Chemiack等(1994)JBiolChem269:4717-4720;Cano等(1995)JCellSci108:3599-3609;Garcia等(2004)EMBOJ21:5151-5163和Tamura等(2004)FEBSLett569:249-255。本文所用的短語"抑制癌細胞存活"指降低或減少表達AMIGO-2的癌細胞的存活率。在一些實施方式中，術語"抑制癌細胞存活率"指影響表達AMIGO-2的癌細胞的凋亡。在一些實施方式中，與其它正常細胞和/或癌細胞相比，這些癌細胞有差別地表達AMIGO-2。就此而言，與沒有AMIGO-2調節劑存在下或正常細胞中的癌細胞存活率相比，抑制性物質可將表達AMIGO-2的癌細胞存活率降低至少25%、至少50%、至少75%、至少85%、至少90%、至少95%,最多達100%。本文所用的短語"抑制AMGO-2信號傳導"指降低、減少或消除AMIGO-2對包含AMIGO-2的細胞信號傳導級聯的下遊成員的作用。包含AMIGO-2的細胞信號傳導級聯包括介導細胞生長和存活的途徑。在一些實施方式中，介導細胞生長和存活的這些途徑是活化的生長因子途徑，例如EGFR途徑或(3-聯蛋白途徑的下遊。在一些實施方式中，所述途徑是導致p-聯蛋白穩定的突變p-聯蛋白途徑，等等。在一些實施方式中，抑制AMIGO-2信號傳導上調一種或多種下遊標記物。在一些實施方式中，抑制AMIGO-2信號傳導下調一種或多種下遊標記物。可通過檢測細胞信號傳導途徑的下遊成員的多肽或多核苷酸水平來測定AMIG0-2信號傳導的抑制情況。本領域技術人員能檢測AMIGO-2多肽和/或多核苷酸水平。本領域技術人員還能檢測AMIGO-2下遊標記物的水平。本文所用的短語"抑制細胞-細胞相互作用"指降低或消除表達AMIGO-2的兩個或多個細胞之間的相互作用。在一些實施方式中，細胞之間的相互作用導致細胞信號傳導。可通過本領域已知的許多方法檢測細胞-細胞相互作用，包括但不限於觀察共同培養、預先標記的細胞之間的膜交換，例如用不同的螢光膜染料，包括西格瑪公司(Sigma)的PKH26和PKH67作標記。本文所用的短語"抑制增殖"指降低或消除AMIGO-2介導的增殖，其可通過本領域技術人員已知的許多方法檢測。細胞增殖試驗包括但不限於MTT試驗(例如，英傑公司的Vybrant⑧MTT細胞增殖檢驗試劑盒)；BrdU慘入試驗(例如，英傑公司的絕對-SSBIP試驗)；檢測胞內ATP水平(試驗的商品化形式包括帕金埃爾默公司的ATPLiteTM-M，1,000檢驗試劑盒或生景公司的ATP細胞活力檢驗試劑盒)；DiOcl8試驗，一種膜透過性染料(英傑公司)；葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性試驗(例如，英傑公司的Vibrant細胞毒性試驗)；檢測細胞LDH活性；3H-胸苷摻入和細胞滴度Glo試驗(普羅美加公司(Promega))。本文所用的短語"抑制血管發生"指降低或消除AMIGO-2介導的血管發生。可通過本領域技術人員已知的方法檢測血管發生，包括但不限於細胞增殖試驗、細胞遷移試驗、細胞分化試驗、器官培養(離體)試驗、雞絨毛膜尿囊膜(CAM)試驗、角膜血管發生試驗、基質膠活塞試驗(Matrigelplugassay)和在SCID小鼠、裸鼠或C57BL小鼠中進行的腫瘤體積試驗。細胞遷移試驗包括但不限於盲-孔趨化室(blind-wellchemotaxischamber),例如改進的博伊登室(modifiedBoydenCharmber)和吞噬動力學軌跡試驗(Phagokinetictrackassay)。細胞分化試驗包括但不限於在膠原、纖維蛋白凝塊或基質膠中形成管道，然後進行電子顯微術。器官培養(離體)試驗包括但不限於大鼠主動脈環試驗(rataorticringassay)和雞主動脈弓試斷chickaorticarchassay)。本文所用的短語"抑制通過細胞周期進展"指減緩或停止細胞分裂。可通過溴脫氧尿苷(BRDU)摻入來檢驗細胞周期進展。這些試驗通過將BRDU摻入新合成的DNA來鑑定經歷DNA合成的細胞群。然後可利用抗-BRDU抗體(Hoshino等，1986,JCancer38，369;Campana等，1988，JImmunolMeth107,79)或通過其它方式檢測新合成的DNA。還可通過磷酸-組蛋白H3染色檢驗細胞增殖，從而通過組蛋白H3的磷酸化鑑定經歷有絲分裂的細胞群。利用對組蛋白H3的絲氨酸IO殘基的磷酸化形式具有特異性的抗體檢測組蛋白H3在絲氨酸10處的磷酸化(Chadlee，DN1995，JBiolChem270:20098-105)。還可利用[3司-胸苷摻入檢測細胞增殖(Chen，J，1996，Oncogene13:1395-403;Jeoung，J，1995，JBiolChem270:18367-73)。該i式驗能定量表徵S-期DNA合成。在該試驗中，合成DNA的細胞將[SH]-胸苷摻入新合成的DNA。然後可通過標準技術檢測慘入情況，例如用閃爍計數儀(例如，貝克曼LS3800液相閃爍計數儀)計數放射性同位素。另一增殖試驗利用購自生物源國際公司(BiosourceInternational)的染料阿爾瑪藍(AlamarBlue)，該染料在紅細胞中還原時發出螢光，從而能間接檢測細胞數目(Voytik-HarbmSL等，1998，InVitroCellDevBiolAnim34:239-46)。還有另一種增殖試驗，即MTS試驗依據工業化學品的體外細胞毒性評估，其利用可溶性四唑鐺鹽，MTS。MTS試驗可以商品化購得，包括普羅美加細胞滴度96⑧水性非放射性細胞增殖試驗(目錄號G5421)。還可通過軟瓊脂中的菌落形成來檢驗細胞增殖(Sambrook等，MolecularCloning(分子克隆)，冷泉港，(1989))。還可通過檢測ATP水平作為代謝活性細胞的指示劑來檢驗細胞增殖。這些試驗司商品化購得，包括普羅美加公司的細胞滴度-GloTM。還可通過流式細胞術檢驗細胞周期增殖(GrayJW等(1986)IntJRadiatBiolRelatStudPhysChemMed49:237-55)。可用碘化丙啶染色細胞，用流式細胞計評估從而檢測在細胞周期不同階段的細胞累積。本文所用的"AMIGO-2下遊標記物"是與在正常或健康組織中的表達水平相比，顯示在癌組織或癌細胞中表達水平改變的基因或活性，或者是有AMIGO-2調節劑存在時改變的特性。在一些實施方式中，當用本發明AMIGO-2調節劑幹擾AMIGO-2時，所述下遊標記物顯示表達水平改變。AMIGO-2下遊標記物包括但不限於細胞周期蛋白D1、細胞周期蛋白B1、c-Myc、VEGF、尿激酶、cJcun、FosLl或ERK。在一些實施方式中，切割PARP1是AMIGO-2活性的下遊標記。本文所用的短語"增加癌細胞凋亡"指在有AMIGO-2調節劑存在下增加表達AMIGO-2的癌細胞凋亡。就此而言，與沒有AMIGO-2調節劑存在下的癌細胞凋亡相比，AMIGO-2調節劑能將癌細胞凋亡增加至少25%、至少50%、至少75%、至少85%、至少90%、至少95%，最多100°/。。在一些實施方式中，與其它正常細胞相比和/或與其它癌細胞相比，癌細胞有差別地表達AMIGO-2。可通過檢測，例如DNA斷裂、胱冬酶活性、線粒體膜電勢喪失、活性氧中間體(ROS)產量增加、胞內酸化、染色質凝聚、細胞表面的磷脂醯絲氨酸(PS)水平和細胞膜滲透性增加來比較癌細胞凋亡。例如，可採用TUNEL試驗(末端脫氧核苷酸轉移酶dUTP切口末端標記)檢測DNA斷裂。該試驗的商品化形式可廣泛獲得，例如英傑公司的APO-BrdUTUNEL檢驗試劑盒、BD生物科學法瑪金公司(BDBiosciencesPharmmgen)的APO-DIRECTTM試劑盒和ApoAlertDNA斷裂檢驗試劑盒(克隆技術公司(Clontech),Takara生物公司(TakaraBioCompany))。可通過特定胱冬酶的特異性發螢光、生色和發光底物監測胱冬酶活性。至少胱冬酶l、2、3、6、7、8和9有商品化的檢驗試劑盒可用(參見，例如英傑公司、凱米康公司(Chemicon)、卡爾生物化學公司(CalBiochem)、生物源公司公司、生景公司)。可用能有差別地累積在健康活性線粒體上的螢光染料檢測線粒體膜電勢的喪失。一種非限制性例子是英傑公司的米圖特拉克紅系統(MitoTrackerRedsystem)。可用螢光染料檢測活性氧中間體(ROS)的產量，包括，例如英傑公司的H2DCFDA。可用螢光或生色染料檢測胞內酸化情況。可用螢光染料檢測染色質凝聚，包括，例如Hoechst33342。可檢測細胞表面的磷脂醯絲氨酸(PS)水平。例如，膜聯蛋白V對PS具有高親和力。許多可商品化購得的試驗適於監測標記膜聯蛋白V與細胞表面的結合。可利用能進入凋亡細胞但不進入壞死細胞的染料，例如英傑公司的螢光染料YO-PRO-I檢測細胞膜滲透性。本文所用的術語"上調"指增加、活化或刺激某活性或數量。本文所用的術語"N-末端"指某蛋白質的前10個胺基酸。本文所用的術語"C-末端"指某蛋白質的後IO個胺基酸。本文所用的術語"結構域"指生物分子中對該生物分子的已知或猜測的功能作出貢獻的結構部分。結構域可與其區域或部分共生，除該區域的全部或部分外，還可摻入生物分子中不同於特定區域的一部分。本文所用的術語"胞外域"指分子中在細胞以外或外部的部分。就本發明而言，N-末端胞外域指存在於分子N-末端並恰好在第一跨膜區之前的胞外域。對於(1M)區之間，例如TM2禾tl3之間的胞外域，胞外域指在AMIGO-2的第二和第三跨膜區之間並在細胞膜外的AMIGO-2部分。本文所用的術語"配體結合域"指保留AMIGO-2的相應天然序列的至少一種定性結合活性的受體中任何部分或區域。術語"區域"指生物分子的一級結構中物理上連續的部分。就蛋白質而言，區域定義為該蛋白質的胺基酸序列的連續部分。在一些實施方式中，"區域"與生物分子的功能相關。本文所用的術語"片段"指生物分子的一級結構中物理上連續的部分。就蛋白質而言，部分定義為該蛋白質的胺基酸序列的連續部分，其指至少3-5個胺基酸、至少8-10個胺基酸、至少11-15個胺基酸、至少17-24個胺基酸、至少25-30個胺基酸和至少30-45個胺基酸。就寡核苷酸而言，部分定義為該寡核苷酸的核酸序列的連續部分，其指至少9-15個核苷酸、至少18-30個核苷酸、至少33-45個核苷酸、至少48-72個核苷酸、至少75-卯個核苷酸和至少90-130個核苷酸。在一些實施方式中，生物分子的片段具有生物學活性。就本發明而言，AMIGO-2多肽片段不包含SEQIDNO:2所示完整的AMIGO-2多肽序列。在一些實施方式中，AMIGO-2片段保留了AMIGO-2的一種或多種活性。本文所用的短語"AMIGO-2相關細胞/腫瘤/樣品"等指與非癌性和/或非轉移細胞、樣品、腫瘤或其它病狀相比，特徵在於有差別地表達AMIGO-2的細胞、樣品、腫瘤或其它病狀。在一些實施方式中，與非轉移性細胞、樣品、腫瘤或其它病狀相比，AMIGO-2-相關細胞、樣品、腫瘤或其它病狀的特徵在於AMIGO-2表達增加。本文所用的術語"抗體"指對於靶蛋白或其片段具有特異性的單克隆抗體和多克隆抗體、單鏈抗體、嵌合抗體、雙功能/雙特異性抗體、人源化抗體、人抗體和互補決定區(CDR)-嫁接抗體，還包括抗體片段，包括Fab、Fab，、F(ab)2、scFv、Fv、駱鴕體(camelbody)或微抗體(microantibody)。術語"抗體"還包括體內治療性抗體基因轉移。本文所用的術語"單克隆抗體"指來自於基本同源的抗體群的抗體，艮口，組成該群的各抗體是一樣的，除了少量存在天然突變外。單克隆抗體是高度特異的，直接針對單一抗原位點。另外，與包含針對不同決定子(表位)的不同抗體的多克隆抗體製品相反，各單克隆抗體只針對抗原上的單一決定子。除了其特異性外，單克隆抗體的優點還在於可以人工合成，從而不會被其它抗體汙染。修飾語"單克隆"表示抗體的特徵是來自於基本同源的抗體群，不應理解為需要通過任何特定的方法製備抗體。例如，本發明所用的單克隆抗體可通過Kohler等Nature,256:495(1975)首先描述的方法或通過重組DNA方法(參見美國專利號4,816,567)製備。例如，還可採用Clackson等，Nature,352:624-628(1991)和Marks等，J.Mol.Biol.，222:581-597(1991)描述的技術從噬菌體抗體庫中分離"單克隆抗體"。本文的單克隆抗體專門包括"嵌合"抗體，其中重鏈和/或輕鏈的一部分與衍生自特定物種或屬於另一抗體類型或亞類的抗體的相應序列一致或同源，而鏈的其餘部分與衍生自另一物種或屬於另一抗體類型或亞類的抗體的相應序列一致或同源，以及這種抗體的片段，只要它們形式所需的生物學活性(美國專利號4,816,567;和Morrison等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,81:6851-6855(1984))。本文的感興趣嵌合抗體包括含有衍生自非人靈長類(如，古猴(OldWorldMonkey)、猿等)的可變區抗原結合序列和人恆定區序列的"靈長類化"的抗體。"抗體片段"包含完整抗體的一部分，在一些實施方式中包含其抗原結合區或可變區。抗體片段的例子包括Fab、Fab'、F(ab')2和Fv片段；雙抗體(diabody);線性抗體(Zapata等，ProteinEng.8(10):1057-1062[1995]);單鏈抗體分子；和抗體片段形成的多特異性抗體。"完整"的抗體是包含抗原結合可變區以及輕鏈恆定區(QJ和重鏈恆定區Cm、Ch2和Ch3的抗體。恆定區可以是天然序列恆定區(如人天然序列恆定區)或其胺基酸序列變體。在一些實施方式中，完整抗體具有一種或多種效應功能。抗體"效應功能"是指抗體的Fc區(天然序列Fc區或胺基酸序列變體Fc區)所具有的那些生物學活性。抗體效應功能的例子包括Clq結合；補體依賴的細胞毒性；Fc受體結合；抗體依賴的細胞介導的細胞毒性(ADCC);吞噬作用；細胞表面受體(如，B細胞受體；BCR)的下調等。"抗體依賴的細胞介導的細胞毒性"或"ADCC"指某種形式的細胞毒性，其中分泌的Ig結合到某種細胞毒性細胞(如，天然殺傷(NK)細胞、中性粒細胞和巨噬細胞)表面的Fc受體(FcR)上，使這些細胞毒性效應細胞與攜帶抗原的靶細胞特異性結合，隨後用細胞毒素殺傷靶細胞。抗體"武裝"細胞毒性細胞，這是發揮這種殺傷作用所必須的。介導ADCC的初級細胞，NK細胞只表達FcyRin，而單核細胞表達FcyRI、FcyRII和FcyRIII。Ravetch和Kinet，Annu.Rev.Immunol.9:457-92(1991)第464頁的表3中總結了造血細胞的FcR表達。為了評估感興趣分子的ADCC活性，可以進行體外ADCC試驗，如美國專利號5,500,362或5，821，337所描述的。可用於這種試驗的效應細胞包括外周血單個核細胞(PBMC)和天然殺傷(NK)細胞。另外，可以體內評估感興趣分子的ADCC活性，例如在動物模型中，如Clynes等，(USA)95:652-656(1998)所描述的。"人效應細胞"是表達一種或多種FcR並且執行效應功能的白細胞。在一些實施方式中，這些細胞至少表達FcyRni，並執行ADCC效應功能。能介導ADCC的人白細胞的例子包括外周血單個核細胞(PBMC)、天然殺傷(NK)細胞、單核細胞、細胞毒性T細胞和中性粒細胞。可從其天然資源，例如從本文所述的血液或PBMC中分離效應細胞。術語"Fc受體"或"FcR"用於描述可結合抗體Fc區的受體。在一些實施方式中，FcR是天然序列人FcR。另外，在一些實施方式中，FcR是能結合IgG抗體的受體(y受體)，包括FcyRI、FcyRII和FqRin亞類的受體，其中包括這些受體的等位基因變體和其它剪接形式。FcYRII受體包括FcyRIIA("活化受體")和FqRIIB("抑制受體")，胺基酸序列相似，區別主要在其胞漿區。活化受體FcyRIIA在其胞槳區含有免疫受體酪氨酸活化基序(ITAM)。抑制受體FcYRIIB在其胞漿區含有免疫受體酪氨酸抑制基序(ITIM)。(參見綜述M，見Daron，Annu.Rev.Immunol.15:203-234(1997))。FcR的綜述見Ravetch和Kinet，Annu.Rev.Immunol9:457-92(1991);Capel等，Immunomethods4:25陽34(1994);以及deHaas等，J.Lab.Clin.Med.126:330-41(1995)。其它FcR，包括未來可能鑑定的那些，都屬於本文術語"FcR"。該術語還包括新生兒受體，FcRn，它負責母體IgG向胎兒轉運(Guyer等，J.Immunol.117:587(1976)和Kim等，J.Immunol.24:249(1994))。"補體依賴的細胞毒性"或"CDC"指有補體存在下分子溶解耙標的能力。通過補體系統的第一組分(Clq)與能與同源抗原形成複合物的分子(如抗體)結合啟動補體活化途徑。為評估補體活化，可進行CDC試驗，如Gazzano-Santoro等，J.Immunol.Methods202:163(1996)所述。本文所用的術語"表位"指多肽的抗原決定子。在一些實施方式中，表位可包含該表位獨特空間構象的3個或更多個胺基酸。在一些實施方式中，表位可以是線性或構象表位。表位通常包含至少4個、至少6個、至少8個、至少10個和至少12個這種胺基酸。更常見是包含至少8-10個這種胺基酸。本領域已知測定胺基酸空間構象的方法，包括，例如x-射線晶體學和2-維核磁共振。短語"互補決定區"指一起決定天然免疫球蛋白結合位點中天然Fv區的結合親和力和特異性的胺基酸序列。參見，例如Chothia等，JMolBiol196:901-917(1987)，Kabat等，美國健康與人類服務部(USDeptofHealthandHumanServices)NIH出版號91-3242(1991)。短語"恆定區"指抗體分子中賦予效應功能的那部分。在本發明中，人恆定區取代了小鼠恆定區。目標人源化抗體的恆定區衍生自人免疫球蛋白。重鏈恆定區可選自5種同種型a、S、s、Y和n。使抗體人源化的一種方法包括比對非人重鏈和輕鏈序列與人重鏈和輕鏈序列，依據該比對結果選擇並用人框架區替換非人框架區，分子建模來預測人源化序列的構象以及與親代抗體的構象作比較。在該方法後對CDR區中幹擾CDR結構的殘基進行反覆回突變，直至人源化序列模型的預測構象近似親代非人抗體的非人CDR的構象。還可衍生這些人源化抗體以促進攝取和清除，例如通過Ashwell受體。參見，例如通過引用納入本文的美國專利號5,530,101和5,585,089。可利用各種抗體/免疫球蛋白框架或支架，只要得到的多肽包含至少一個靶蛋白特異性結合區。這些框架或支架包括人免疫球蛋白的5種主要同種型或它們的片段(例如本文它處公開的)，包括其它動物的免疫球蛋白，優選具有人源化部分。在這點上，尤其感興趣的是單一重鏈抗體，例如在駱駝中鑑定的那些。本領域技術人員不斷發現和開發新型框架、支架和片段。利用可將本發明CDR嫁接於其上的非免疫球蛋白支架，可產生基於抗體的非免疫球蛋白。可利用已知或其它非免疫球蛋白框架和支架，只要它們包含靶標的特異性結合區。本文將這些化合物稱為"包含靶標特異性結合區的多肽"。已知的非免疫球蛋白框架或支架包括但不限於Adnectins(纖連蛋白)(化合物療劑公司(CompoundTherapeutics,Inc),沃爾瑟姆，麻薩諸塞州)、錨蛋白(分子伴侶公司(MolecularPartnersAG)，蘇黎世，瑞士)、結構域抗體(domainantibody)(多門提斯有限公司(Domantis，Ltd),劍橋，麻薩諸塞州和阿比耐克斯公司(Ablynxnv)(茨維納德(Zwijnaarde)，比利時))、脂籠蛋白(安提卡林(Anticalin))(拜恩斯蛋白實驗室公司(PiensProteolabAG)，弗萊興(Freising)，德國)、小模塊免疫藥物(smallmodularimmuno-pharmaceuticals)(特魯賓醫藥公司(TrubionPharmaceuticalsInc)，西雅圖，華盛頓州)、麥克西體(maxybody)(阿維迪亞公司(Avidia,Inc)(芒廷維尤(MountainView),加利福尼亞州))、A蛋白(親和體公司(AffibodyAG)，瑞典)和親和蛋白(affilin)(y-晶體蛋白或泛素)(希爾蛋白質股份有限公司(ScilProteinsGmbH)，哈雷(Halle)，德國)。(iii)麥克西體/高親合性聚合體(Avimer)-阿維迪亞公司高親合性聚合體衍生自含有天然A-結構域的蛋白，例如LRP-1。這些結構域在其本質上用於蛋白質-蛋白質相互作用，在人類中，250種以上的蛋白質在結構上基於A-結構域。高親合性聚合體由通過胺基酸接頭相連的許多不同"A-結構域"單體(2-10)構成。可採用，例如美國專利公布20040175756、20050053973、20050048512和20060008844所述的方法產生能結合靶抗原的高親合性聚合體。術語"拮抗劑"以廣義使用，包括部分或完全阻斷、抑制或中和本文所述腫瘤細胞抗原的生物學活性的任何分子。同樣，術語"激動劑"也以廣義使用，包括可模擬本文所述腫瘤細胞抗原的生物學活性的任何分子。合適的激動劑或拮抗劑分子尤其包括激動劑或拮抗劑抗體或抗體片段、腫瘤細胞抗原的片段或胺基酸序列變體、肽、反義寡核苷酸、小有機分子等。鑑定腫瘤細胞抗原的激動劑或拮抗劑的方法包括使表達感興趣抗原的腫瘤細胞與候選激動劑或拮抗劑分子接觸，檢測與腫瘤細胞抗原正常相關的一種或多種生物學活性的可檢測變化。拮抗劑還可以是通過合理設計或通過噬菌體展示產生的肽(參見，例如1998年8月13日公布的W098/35036)。在一個實施方式中，備選分子是根據抗體的CDR設計的"CDR模擬物"或抗體類似物。雖然這種肽本身是拮抗性的，但該肽任選與細胞毒劑融合以增加或增強該肽的拮抗特性。本文所用的術語"寡核苷酸"指一系列相連的核苷酸殘基。寡核苷酸包括但不限於反義和siRNA寡核苷酸。寡核苷酸包含DNA序列的一部分，其具有至少約io個核苷酸和最多約500個核苷酸。在一些實施方式中，寡核苷酸包含約10個核苷酸-約50個核苷酸，約15個核苷酸-約30個核苷酸，約20個核苷酸-約25個核苷酸。寡核苷酸可以是化學合成的，其還可用作探針。在一些實施方式中，寡核苷酸是單鏈的。在一些實施方式中，寡核苷酸包含的至少一部分是雙鏈。在一些實施方式中，寡核苷酸是反義寡核苷酸(ASO)。在一些實施方式中，寡核苷酸是RNA幹擾寡核苷酸(RNAi寡核苷酸)。本文所用的術語"反義寡核苷酸"指具有AMIG0-2多核苷酸序列的互補核苷酸序列的未修飾或修飾核酸，所述AMIG0-2多核苷酸序列包含與AMIGO-2的轉錄或翻譯相關的多核苷酸序列(例如，AMIGO-2多核苷酸的啟動子)，其中所述反義寡核苷酸能與AMIGO-2多核苷酸序列雜交。尤其感興趣的是能在體外或體內抑制AMIGO-2多肽的編碼多核苷酸轉錄和/或翻譯的反義寡核苷酸。本文所用的術語"siRNA寡核苷酸"、"RNAi寡核苷酸"、"短幹擾RNA"或"siRNA"可互換使用，指通過轉錄後基因剪接而起作用的寡核苷酸，也稱為RNA幹擾(RNAi)。這些術語指能實施RNA幹擾"RNAi"的雙鏈核酸分子(參見Kreutzer等，WO00/44895;ZemickaGoetz等，WO01/36646;Fire，WO99/32619;Mello和Fire,WO01/29058)。siRNA分子通常是RNA分子，但也包括化學修飾的核苷酸和非核苷酸。通過將siRNA瞬時轉移入細胞進行siRNA基因靶向實驗(通過經典方法，例如脂質體-介導的轉染、電穿孔或微量注射進行)。siRNA分子是21-到23-核苷酸RNA，含有特徵性的2-到3-核苷酸3'突出端類似於正常啟動RNAi的長雙鏈RNA(dsRNA)的RNA酶III加工產物。本文所用的術語"引誘受體"指包含能結合AMIGO-2配體的多肽、模擬物或其它大分子的至少一部分的受體。本文所用的術語"治療有效量"表示藥物的用量，當將治療有效量的藥物給予個體時，可產生醫學作用，即觀察到該個體中一種或多種臨床終末點、癌細胞的生長和/或存活或癌細胞的轉移發生降低或逆轉。與將不含活性成分的組合物給予類似情況的個體時觀察到的作用相比，治療有效量一般通過它們具有的療效確定。對於某對象的精確有效量取決於該對象的體形和健康狀況、病症的性質和程度以及選擇給予的治療劑和治療劑組合。然而，常規實驗可確定給定狀況的有效量，臨床醫師也可作出判斷。本文所用的術語"組合"或"聯用"指聯合給予本發明的AMIGO-2調節劑和其它治療方案。本文所用的術語"敏感的"指AMIGO-2治療是可接受的治療方法的患者，即，可能起陽性反應的患者。在一些實施方式中，與對AMIGO-2治療不敏感的那些患者相比，對AMIGO-2治療敏感的癌症患者表達高水平的AMIGO-2。在一些實施方式中，不是AMIGO-2治療的優良候選對象的癌症患者包括腫瘤樣品的癌細胞中缺乏AMIGO-2或其水平較低的癌症患者。在一些實施方式中，相比於AMIGO-2定位於癌細胞的其它區域，較高比例的AMIGO-2定位於細胞膜的患者表明相比於非細胞膜定位的AMIGO國2，這些患者對AMIGO-2治療的敏感性高於細胞膜定位的AMIGO-2比例較低的那些患者。在一些實施方式中，定位於細胞膜的AMIG0-2與定位於不包括細胞膜的癌細胞其它區域的AMIGO-2之比至少為2:1表明該患者具有AMIGO-2相關癌症，並對AMIGO-2治療敏感。在一些實施方式中，定位於細胞膜的AMIGO-2與定位於不包括細胞膜的癌細胞其它區域的AMIGO-2之比至少為3:1表明該患者具有AMIGO-2相關癌症，並對AMIGO-2治療敏感。本文所用的術語"檢測"表示建立、發現或確認某活性(例如基因表達)或生物分子(例如多肽)的證據。"天然序列"多肽是具有與衍生自自然界的多肽相同的胺基酸序列的多肽。這些天然序列多肽可以從自然界分離或可通過重組或合成方法產生。因此，天然序列多肽可具有天然人多肽、鼠科多肽或任何其它哺乳動物多肽的胺基酸序列。術語"胺基酸序列變體"指所具有的胺基酸序列在一定程度上不同於天然序列多肽的多肽。胺基酸序列變體通常與天然配體的至少一個受體結合區或與天然受體的至少一個配體結合區或其多個配體結合區有至少約70%、至少約80%同源性或至少約90%同源性。胺基酸序列變體在天然胺基酸序列的胺基酸序列內的某些位置具有取代、缺失和/或插入。本文所用的短語"同源核苷酸序列"或"同源胺基酸序列"或它們的改變形式指特徵在於在核苷酸水平或胺基酸水平上具有至少一定百分比的同源性的序列，該短語可與"序列相同性"互換使用。同源核苷酸序列包括編碼蛋白質同種型的那些序列。這些同種型可因，例如RNA的另路剪接而在同一生物的不同組織中表達。或者，可由不同基因編碼同種型。同源核苷酸序列包括編碼除人以外的物種(包括但不限於哺乳動物)的蛋白質的核苷酸序列。同源核苷酸序列還包括但不限於本文所示核苷酸序列的天然等位基因改變和突變。同源胺基酸序列包括含有不超過50(例如，不超過1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、15、20、25、30、35、40或50)個保守性胺基酸取代的那些胺基酸序列，這些多肽保留天然多肽的至少25%(例如，至少25%、至少30°/。、至少35%、至少40%、至少50%、至少55%、至少60%、至少70%、至少80%、至少卯％、至少95%、至少98%、至少99%、至少99.5%或100%或更高)結合能力和/或活性。保守性取代通常包括下組內的取代甘氨酸和丙氨酸；纈氨酸、異亮氨酸和亮氨酸；天冬氨酸和穀氨酸；天冬醯胺、穀氨醯胺、絲氨酸和蘇氨酸；賴氨酸、組氨酸和精氨酸；以及苯丙氨酸和酪氨酸。同源胺基酸序列可包括缺乏1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20個胺基酸區段(由兩個或更多個胺基酸構成)或不連續的單一胺基酸的胺基酸序列缺失變體。在一些實施方式中，同源胺基酸序列可含有一個或多個(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、20個以上)胺基酸插入。在一些實施方式中，同源胺基酸序列可含有保守性取代、插入和/或缺失。例如，可通過採用Smith和Waterman算法(AdvApplMath,1981，2，482-489)的Gap程序(威斯康星序列分析包(WisconsinS叫uenceAnalysisPackage),用於UNIX的8版，遺傳學計算機組(GeneticsComputerGroup),大學研究園區(UniversityResearchPark),麥迪遜，威斯康星州)，利用默認設置測定同源性或相同性百分比。在一些實施方式中，探針和耙標之間的同源性在約50%-約60%之間。在一些實施方式中，核酸具有與SEQIDNO:l或其一部分約70%、約80%、約85°/。、約90%、約92%、約94°/。、約95%、約97%、約98%、約99%和約100%同源的核苷酸。在一些實施方式中，同源物具有與SEQIDNO:l相同的活性。在一些實施方式中，同源物與SEQIDNO:l共有相同的表達分布。同源性還可以是多肽水平上的。在一些實施方式中，多肽與SEQIDNO:2或其一部分約60%、約70%、約80%、約85%、約90%、約92%、約94°/。、約95%、約97%、約98°/。、約99%和約100°/。同源。在一些實施方式中，同源物具有與SEQIDNO:2相同的活性。在一些實施方式中，同源物與SEQIDNO:2共有相同的表達分布。本文所用的術語"探針"指長度不同的核酸序列。在一些實施方式中，探針包含至少約10個，最多約6,000個核苷酸。在一些實施方式中，探針包含至少12、至少14、至少16、至少18、至少20、至少25、至少50或至少75個連續核苷酸。探針可用於檢測相同、相似或互補的核酸序列。較長的探針通常小天然或重組來源獲得，其對靶序列高度特異且與靶標的雜交遠慢於寡聚物。探針可以是單鏈或雙鏈的，其設計成在PCR、基於膜的雜交、原位雜交(ISH)、螢光原位雜交(FISH)或ELISA-樣技術中具有特異性。本文所用的術語"混合"指將一種或多種化合物、細胞、分子等組合在同一區域中的過程。這可在，例如試管、培養皿或能混合一種或多種化合物、細胞或分子的任何容器中進行。本文所用的術語"分離的"指多核苷酸、多肽、抗體或宿主細胞所處環境不同於該多核苷酸、多肽或抗體天然所處的環境。本領域技術人員熟知分離細胞的方法。分離的多核苷酸、多肽或抗體通常基本上是純的。本文所用的術語"基本上純的"指從其天然環境中取出的化合物(例如，多核苷酸或多肽或抗體)，其至少60%、至少75%和至少90%不含天然與其相連的其它組分。本文所用的術語"結合"表示兩個或多個生物分子或化合物之間的物理或化學相互作用。結合包括離子、非離子、氫鍵、範德華力、疏水相互作用等。結合可以是直接的，或者通過或因另一生物分子或化合物的作用而間接結合。直接結合指不通過或不因另一分子或化合物的作用，而是沒有其它實質性化學中間體即可發生的相互作用。本文所用的術語"接觸"表示直接或間接地將一個分子帶至第二分子的物理鄰近範圍內。所述分子可以是許多緩衝劑、氧、溶液等。"接觸"包括，例如將多核苷酸置於含有核酸分子的燒杯、微量滴定板、細胞培養燒瓶或微陣列等中。接觸還包括，例如將抗體置於含有多肽的燒杯、微量滴定板、細胞培養燒瓶或微陣列等中。接觸可在體內、離體或體外發生。本文所用的短語"嚴格雜交條件"或"嚴格條件"指探針、引物或寡核苷酸與其靶序列雜交但儘可能少地與其它序列雜交的條件。嚴格條件依賴於序列，並且在不同環境中有區別。較長的序列在較高溫度下特異性雜交其合適的互補序列。通常選擇的嚴格條件比確定離子強度和pH下特定序列的解鏈溫度(TJ約低5'C。Tm是50%與靶序列互補的探針與該靶序列雜交平衡時的溫度(確定的離子強度、pH和核酸濃度下)。由於靶序列通常過量存在，在Tm下，平衡時有50%的探針與它們的互補序列雜交。嚴格條件通常是鹽濃度低於約1.0M鈉離子，通常是約0.01-1.0M鈉離子(或其它鹽)，pH7.0-8.3，對於短探針、引物或寡核苷酸(例如10-50個核苷酸)，溫度至少約30'C，對於較長的探針、引物或寡核苷酸，溫度至少約60'C。還可加入去穩定劑，例如甲醯胺以獲得嚴格條件。本文所用的術語"中等嚴格條件"指探針、引物或寡核苷酸與其靶序列雜交但也與少量其它序列雜交的條件。中等嚴格條件依賴於序列，並且在不同環境中有區別。本領域技術人員熟知中等條件，其描述於Maniatis等(MolecularCloning:ALaboratoryManual(分子克隆實驗室手冊)，冷泉港實驗室，第2版(1989年12月))，等等。本文所述的核酸組合物可用於，例如，製備多肽，用作檢測生物學樣品(例如，人細胞提取物)中的mRNA或從這種樣品產生的cDNA的探針，產生額外拷貝的多核苷酸序列，產生核酶或寡核苷酸(單鏈和雙鏈)，用作單鏈DNA探針或形成三鏈的寡核苷酸(triple-strandformingoligonucleotide)。本文所述的探針可用於，例如測定樣品中是否存在本文提供的多核苷酸。這些多肽可用於產生癌症相關多肽的特異性抗體，進而可用於本文詳細討論的診斷方法、預後方法等。多肽還可用作治療幹預的靶標，如本文詳細討論的。本發明抗體還可用於，例如純化、檢測和靶向本發明多肽，包括在體外和體內診斷和治療方法中。例如，這些抗體可用於免疫測定來定性和定量檢測生物學樣品中本發明多肽的水平。參見，例如Harlow等，Antibodies:ALaboratoryManual(抗體實驗室手冊)，(冷泉港實驗室出版社，第2版，1988)。下文詳細描述了這些和其它應用。本文所用的術語"顯像劑"指與本發明抗體、小分子或探針相連的組合物，其可用本領域技術人員已知的技術檢測。本文所用的術語"基因表達的證據"指基因表達的任何可檢測的標記。.術語"藥學上可接受的載體"指給予治療劑，例如抗體或多肽、基因和其它治療劑的載體。該術語指本身不誘導對接受組合物的個體有害的抗體產生並且可以給予而不產生過度毒性的任何藥物載體。合適的載體可以是大的、代謝緩慢的大分子，例如蛋白質、多糖、聚乳酸、聚乙醇酸、多聚胺基酸、胺基酸共聚物、脂質聚集物和滅活的病毒顆粒。本領域技術人員熟知這些載體。治療組合物中藥學上可接受的載體可包括液體，例如水、鹽水、甘油和乙醇。這些載體中也可存在輔助物質，例如潤溼劑或乳化劑、pH緩衝物質等。本發明方法和組合物可治療的癌症的具體例子包括但不限於AMIGO-2相關癌症。與非癌性細胞相比，本文所用的"AMIGO-2相關癌症"指特徵在於有差別地表達AMIGO-2的細胞的癌症。本發明還適用於AMIGO-2在以下方面起作用的任何腫瘤細胞類型染色體穩定性、激酶活性、致瘤性、轉移性、信號傳導、細胞黏著、凋亡、底物磷酸化、細胞生長、腫瘤形成、細胞周期蛋白產生、細胞增殖、細胞周期調節、癌細胞生長、癌細胞存活、依賴於貼壁的生長和血管發生、細胞遷移、細胞-細胞相互作用等。在一些實施方式中，所述癌症是肺癌、膀胱癌、腎癌、結腸癌、乳腺癌、子宮癌、卵巢癌或胰腺癌，或癌症轉移。在一些實施方式中，所述癌症是肺癌或結腸癌。在一些實施方式中，所述癌症是除胃癌以外的癌症。在一些實施方式中，與對照相比，這些癌症顯示AMIGO-2表達有至少約25%、至少約50%、至少約75%、至少約100%、至少約150%、至少約200%或至少約300%不同。本發明提供用於治療、抑制和控制AMIGO-2過度表達相關疾病和病症以及治療、抑制和控制這些疾病和病症的症狀的方法和組合物。本發明的一些實施方式涉及方法和組合物，包括治療、抑制或控制癌症的組合物，包括但不限於癌症轉移、癌細胞存活、癌細胞增殖、癌細胞生長、細胞周期調節、血管發生和癌細胞侵襲性。本發明還提供包括將其它活性成分與本發明AMIGO-2調節劑組合的方法。在一些實施方式中，這些方法還包括將一種或多種常規癌症療劑給予患者。在一些實施方式中，本發明方法還包括用化療、放療或外科手術中的一種或多種治療患者。本發明還提供治療、抑制和控制對目前的或標準癌症治療，例如外科手術、化療、放療、激素療法和生物療法部分或完全難治的癌症或其它過度增生性細胞病症或疾病的方法和組合物。本發明還提供利用本發明AMIGO-2調節劑，特別是AMIGO-2抗體診斷癌症和/或預測癌症進展的診斷和/或顯像方法。在一些實施方式中，本發明方法提供顯像和定位腫瘤和/或轉移的方法和診斷及預後方法。在一些實施方式中，本發明方法提供評估AMIGO-2-相關治療的適當性和/或效力的方法。AMIGO-2調節劑本發明提供AMIGO-2調節劑來治療、診斷、檢測或顯像癌症。AMIGO-2調節劑還可用於製備治療癌症的藥物。在一些實施方式中，AMIGO-2調節劑是AMIGO-2抑制劑。在一些實施方式中，AMIGO-2調節劑是核苷酸、小分子、模擬物、引誘物或抗體。在一些實施方式中AMIGO-2調節劑是分離雙鏈RNA(dsRNA);含有選自SEQIDNO:7-16所構成組的序列中至少10個連續核苷酸的分離寡核苷酸；結合選自下組的AMIGO-2結構域中表位的抗體信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域和Ig結構域；小分子；模擬物；可溶性受體；或引誘物。在一些實施方式中，結合AMIGO-2結構域中表位的抗體不與除AMIGO-2以外的多肽特異性結合。例如，在一些實施方式中，抗體片段不與AMIGO-l或AMIGO-3特異性結合。在一些實施方式中，與對照相比，AMIGO-2調節劑可將AMIGO-2活性抑制至少25%、50%、75%、80%、卯％、95%、97%、98%、99%或100%。在一些實施方式中，與對照相比，AMIGO-2調節劑將LIV-l表達抑制至少25%、50%、75%、80%、卯％、95%、97%、98%、99%或100%。抗體在一些實施方式中，AMIGO-2調節劑是單克隆抗體、多克隆抗體、嵌合抗體、人抗體、人源化抗體、單鏈抗體或Fab片段。可以，例如酶放射性同位素或螢光團標記抗體或Fab片段。在一些實施方式中，抗體或Fab片段不與除AMIGO-2以外的多肽特異性結合。例如，在一些實施方式中，抗體或Fab片段不與AMIGO-l或AMIGO-3特異性結合。在一些實施方式中，抗體或Fab片段對AMIGO-2以外的多肽的結合親和力小於約1X105Ka。在，些實施方式中，AMIGO-2調節劑是以至少1XlSKa的結合親和力結合AMIGO-2多肽的單克隆抗體。本發明還提供競爭性抑制某抗體與本發明表位結合的抗體，所述競爭性抑制通過本領域已知的採用，例如免疫試驗來測定競爭性結合的任何方法測定。在一些實施方式中，該抗體將與表位的結合競爭性抑制至少95%、至少90°/。、至少85%、至少80°/。、至少75%、至少70%、至少60%或至少50%。在一些實施方式中，抗體是人源化抗體。可通過各種方法獲得人源化抗體，所述方法包括，例如(l)將非人互補決定區(CDR)嫁接到人框架區和恆定區上(本領域稱為"人源化"的方法)，或者(2)移植完整的非人可變區，但通過替代表面殘基用人-樣表面"掩蓋"它們(本領域稱為"鑲面(veneering)"的方法)。在本發明中，人源化抗體包括"人源化"和"鑲面"的抗體。類似地，可將人免疫球蛋白基因座引入內源性免疫球蛋白基因被部分或完全滅活的轉基因動物，例如小鼠來製造人抗體。激發後，觀察到人抗體產生，在所有方面，包括基因重排、裝配和抗體譜均類似於在人中所見。該方法描述於，例如美國專利號5,545,807;5,545,806;5,569,825;5,625,126;5，633，425;5,661,016和以下科學出版物中Marks等，Bio/Technology10，779-783(1992);Lonberg等，Nature368856-859(1994);Morrison,Nature368，812-13(1994);Fishwild等，NatureBiotechnology14，845-51(1996);Neuberger，NatureBiotechnology14，826(1996);Lonberg禾口Huszar,Intern.Rev.Immunol.1365-93(1995);Jones等，Nature321:522-525(1986);Morrison等，Proc.Natl.Acad.Sci,U.S.A.，81:6851-6855(1984);Morrison禾卩Oi，Adv.Immunol.,44:65-92(1988);Verhoeyer等，Science239:1534-1536(1988);Padlan，Molec.Immun.28:489-498(1991);Padlan，Molec.Immunol.31(3):169-217(1994);和Kettleborough,C.A.等，ProteinEng.4(7):773-83(1991)，各篇文獻通過引用納入本文。'本發明抗體可通過不同機制起作用。在一些實施方式中，抗體觸發依賴抗體的細胞毒性(ADCC)，一種對抗體所耙向的細胞的裂解攻擊。在一些實施方式中，抗體具有多種治療功能，包括例如，抗原結合，誘導凋亡和依賴補體的細胞毒性(CDC)。在一些實施方式中，抗體與毒素或放射性核素偶聯。在一些實施方式中，本發明抗體可用作AMIGO-2拮抗劑。例如，在一些實施方式中，本發明提供部分或完全乾擾受體/配體與本發明多肽相互作用的抗體。在一些實施方式中，本發明抗體結合本文公開的表位或其一部分。在一些實施方式中，與沒有抗體存在下的活性相比，提供的抗體能將配體活性或受體活性調節至少95%、至少90%、至少85%、至少80%、至少75%、至少70%、至少60%或至少50%。在一些實施方式中，本發明提供中和抗體。中和抗體結合感染性物質，例如病毒或細菌，如癌症相關病毒或細菌(如JC多瘤病毒、EB病毒或幽門螺桿菌(/fe/z'co6a"w/^/oW))。在一些實施方式中，中和抗體能有效用作受體拮抗劑，即，抑制配體介導受體活化的所有或部分生物學活性。在一些實施方式中，可將抗體指定為生物學活性(包括本文公開的本發明肽特定生物學活性)的激動劑、拮抗劑或反向激動劑。在一些實施方式中，抗體抑制選自下組的一種或多種AMIGO-2活性染色體穩定性、激酶活性、致瘤性、轉移性、信號傳導、細胞黏著、細胞凋亡、底物磷酸化、癌細胞生長、腫瘤形成、細胞周期蛋白產生、細胞增殖、通過細胞周期的進展(例如，進展至細胞周期的G2/M期)、依賴貼壁的生長、AMIGO-2蛋白定位於細胞膜、AMIGO-2與AMIGO-l或AMIGO-3中一種或兩種之間的相互作用和血管發生，等等。在一些實施方式中，AMIGO-2抗體抑制生長和存活途徑，例如活化EGFR和突變|3連環蛋白介導的那些途徑。在一些實施方式中，AMIGO-2抗體抑制(例如，抑制mRNA或蛋白質表達)細胞周期蛋白Dl、細胞周期蛋白Bl、c-Myc、c-Jun、FosLl、胞外信號調節激酶(ERK)、血管內皮生長因子(VEGF)、尿激酶和聚ADP核糖聚合酶1(PARP1)中的一種或多種。調節VEGF和尿激酶還表明Amigo-2在血管發生中的作用。在一些實施方式中，AMIGO-2抗體調節癌細胞運動性並影響癌症轉移。在一些實施方式中，AMIGO-2抗體調節立即早期基因和包含立即早期基因的途徑。例如，AMIGO-2抗體調節cFosLl、E2Fl、ELKl、JNK、MEKK、SAPK1p38、細胞周期D、c-Jun、c-fos、c-myc、JE、KC、junB和BTG2中的一種或多種以及相關途徑。本發明抗體可單獨使用或可與其它組合物聯用。這些抗體還可與異源多肽在N-或C-末端重組融合或化學偶聯於(包括共價和非共價偶聯)多肽或其它組合物。例如，本發明抗體可重組融合或偶聯於可用作檢測試驗標記的分子和效應分子，例如異源多肽、藥物、放射性核素或毒素。參見，例如PCT公布WO92/08495;WO91/14438;WO89/12624;美國專利號5,314,995和EP396,387。除嵌合和人源化抗體外，完全人抗體可衍生自具有人免疫球蛋白基因的轉基因小鼠(參見，例如美國專利號6，075，181;6,091,001和6,114,598，所有均通過引用納入本文)，或衍生自人免疫球蛋白基因的噬菌體展示文庫(參見，例如McCafferty等，Nature,348:552-554(19卯)；Clackson等，Nature,352:624-628(1991);和Marks等，J.Mol.Biol.，222:581-597(1991))。在一些實施方式中，可通過scFv-噬菌體展示文庫產生和鑑定抗體。可從商業來源，例如魔弗希斯公司(Morphosys)獲得抗體噬菌體展示技術。可採用Kohler等((1975)Nature256495-496)的方法獲取改進方法製備單克隆抗體。通常用含有抗原的溶液免疫小鼠。可通過在鹽水，一些實施方式中在佐劑，例如完全弗氏佐劑中混合或乳化含抗原的溶液，然後胃腸外注射該混合物或乳液來進行免疫。可用本領域己知的任何免疫方法獲得本發明的單克隆抗體。免疫動物後，取出脾臟(任選取出幾個大的淋巴結)，解離成單細胞。可將細胞懸液施加於包被了感興趣抗原的平板或孔上來篩選脾細胞。表達抗原特異性的膜結合免疫球蛋白的B細胞與平板結合而不會洗去。然後誘導得到的B細胞或所有解離的脾細胞與骨髓瘤細胞融合以形成雜交瘤，在選擇性培養基中培養。通過連續或有限稀釋接種得到的細胞，檢驗特異性結合感興趣抗原(不結合無關抗原)的抗體產生。然後體外(例如，在組織培養瓶或中空纖維反應器中)或體內(作為小鼠的腹水)培養選擇的分泌單克隆抗體(mAb)的雜交瘤。作為用雜交瘤表達的備選方法，可以用諸如CHO或骨髓瘤細胞系等細胞系產生抗體，如各自通過引用納入本文的美國專利號5,545,403;5,545,405和5,998,144所述。簡言之，用分別能表達輕鏈和重鏈的載體轉染細胞系。通過在不同的載體上轉染兩種蛋白質，可產生嵌合抗體。Immunol.147:8;Banchereau等，(1991)Clin.Immunol.Spectrum3:8;和Banchereau等，(1991)Science251:70;均通過引用納入本文。還可採用本領域己知的技術產生人抗體，包括噬菌體展示文庫(Hoogenboom和Winter,JMolBiol,227:381(1991);Marks等，JMolBiol，222:581(1991))。還可採用Cole等和Boerner等的技術製備人單克隆抗體(Cole等，MonoclonalAntibodiesandCancerTherapy(單克隆抗體和癌症治療)，ARL公司(AlanR.Liss)，第77頁(1985)和Boerner等，J.Immunol.,147(1):8695(1991))。可通過各種方法獲得人源化抗體，所述方法包括，例如(l)將非人互補決定區(CDR)嫁接到人框架區和恆定區上(本領域稱為"人源化"的方法)，或者(2)移植完整的非人可變區，但通過替代表面殘基用人-樣表面"掩蓋"它們(本領域稱為"鑲面"的方法)。在本發明中，人源化抗體包括"人源化"和"鑲面"的抗體。類似地，可將人免疫球蛋白基因座引入內源性免疫球蛋白基因被部分或完全滅活的轉基因動物，例如小鼠來製造人抗體。激發後，觀察到人抗體產生，在所有方面，包括基因重排、裝配和抗體譜均類似於在人中所見。該方法描述於，例如美國專利號5,545,807;5,545,806;5,569,825;5,625,126;5,633,425;5,661，016和以下科學出版物中Marks等，Bio/Technology10，779-783(1992);Lonberg等，Nature368856-859(1994);Morrison,Nature368,812-13(1994);Fishwild等，NatureBiotechnology14，845-51(1996);Neuberger，NatureBiotechnology14，826(1996);Lonberg和Huszar，Intern.Rev.Immunol.1365-93(1995);Jones等，Nature321:522-525(1986);Morrison等，Proc.Natl.Acad.Sci,U.S.A.,81:6851-6855(1984);Morrison禾BOi，Adv.Immunol.,44:65-92(1988);Verhoeyer等，Science239:1534-1536(1988);Padlan，Molec.Immun.28:489-498(1991);Padlan，Molec.Immunol.31(3):169-217(1994);和Kettleborough，C.A.等，ProteinEng.4(7):773-83(1991),各篇文獻通過引用納入本文。可利用商業來源，例如魔弗希斯公司(Martinsned/Planegg，德國)，在篩選試驗中鑑定完全人源化的抗體。可利用經工程改造而含有人免疫球蛋白基因座的轉基因動物產生人抗體。例如，WO98/24893公開了具有人IgG基因座的轉基因動物，其中所述動物因內源性重鏈和輕鏈基因座滅活而不產生內源性功能免疫球蛋白。WO91/10741還公開了能對免疫原產生免疫應答的轉基因非靈長類哺乳動物宿主，其中抗體具有靈長類恆定區和/或可變區，其中編碼內源性免疫球蛋白的基因座被取代或滅活。WO96/30498公開了利用Cre/Lox系統修飾哺乳動物的免疫球蛋白基因座，例如替代所有或部分恆定區或可變區以形成修飾的抗體分子。WO94/02602公開了具有滅活的內源性Ig基因座和功能性人Ig基因座的非人哺乳動物宿主。美國專利號5,939,598公開了製備轉基因小鼠的方法，該小鼠缺乏內源性重鏈，表達含一個或多個異基因恆定區的外源性免疫球蛋白基因座。還可採用通過引用納入本文的美國專利號5,766,886所述的人工程改造技術產生本發明抗體。利用上述轉基因動物可產生免疫應答，從而能在先額抗原性分子，可從動物中取出產生抗體的細胞並用於產生分泌人單克隆抗體的雜交瘤。本領域已知免疫方案、佐劑等，可用於免疫，例如WO96/33735所述的轉基因小鼠。可檢驗單克隆抗體抑制或中和相應蛋白質的生物學活性或生理學作用的能力。可通過Fang等(2005)，NatBiotechnol23，584-590所述的體內治療性抗體基因轉移將本發明抗體給予對象。例如，可產生重組載體以遞送多順反子表達盒，所述重組載體在Mab重鏈和輕鏈編碼序列之間含有介導多肽的酶不依賴性共翻譯自身切割的肽。表達產生化學計量量的兩種Mab鏈。在一些實施方式中，介導酶不依賴性共翻譯自身切割的肽是口蹄疫衍生的2A肽。抗體片段適用於本發明方法，只要它們保留全長抗體的所需親和力。因此，抗-AMIGO-2抗體的片段保留結合AMIGO-2的能力。這些片段的特徵在於類似於相應的全長抗-AMIGO-2抗體的特性。即這些片段特異性結合表達於人細胞表面的人AMIGO-2抗原。在一些實施方式中，這些抗體特異性結合AMIGO-2胞外域中的一種或多種表位。在一些實施方式中，這些抗體調節一種或多種AMIGO-2相關生物學活性。在一些實施方式中，這些抗體抑制激酶活性、致瘤性、轉移性、AMIGO-2信號傳導、AMIGO-2介導細胞黏著、癌細胞凋亡、ERK磷酸化、細胞生長、腫瘤形成、細胞周期蛋白產生、細胞增殖、通過細胞周期進展、不依賴貼壁的生長、AMIGO-2蛋白定位於細胞膜、AMIGO-2與AMIGO-l或AMIGO-3中一種或兩種相互作用和血管發生，等等中的一種或多種。在一些實施方式中，這些抗體是特異性結合選自下組的AMIGO-2結構域中一種或多種AMIGO-2表位的單克隆抗體或Fab片段信號肽結構域、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域和Ig結構域。信號肽結構域大致是SEQIDNO:2的胺基酸1-33;LRR-N-末端(LRR-NT)結構域大致是SEQIDNO:2的胺基酸41-60;LRR1結構域大致是SEQIDNO:2的胺基酸69-92;LRR2結構域大致是胺基酸94-116;LRR3結構域大致是胺基酸118-140;LRR4結構域大致是胺基酸142-164;LRR5結構域大致是167-191;LRR6結構域大致是胺基酸193-216;LRR-C-末端(LRR-CT)結構域大致是胺基酸222-282;IgV-組結構域大致是293-388;AMIGO-2的Ig結構域在V-組結構域，大致是胺基酸303-365。在一些實施方式中，這些抗體是特異性結合AMIGO-2的信號肽中一個或多個表位的單克隆抗體。在一個實施方式中，所述抗體不與非AMIGO-2表位的表位特異性結合。例如，在一個實施方式中，所述抗體不與AMIGO-2表位或AMIGO-3表位特異性結合。在一些實施方式中，AMIGO-2調節劑是特異性結合AMIGO-2的LRRNT結構域的一種或多種表位的單克隆抗體或Fab片段。在一些實施方式中，AMIGO-2調節劑是特異性結合AMIGO-2的LRR1結構域的一種或多種表位的單克隆抗體或Fab片段。在一些實施方式中，所述LRR1表位選自SEQIDNO:30或SEQIDNO:57。在一些實施方式中，AMIGO-2調節劑是特異性結合AMIGO-2的LKR2結構域的一種或多種表位的單克隆抗體或Fab片段。在一些實施方式中，所述LRR2表位選自SEQIDNO:32、SEQIDNO:39或SEQIDNO:61。在一些實施方式中，AMIGO-2調節劑是特異性結合AMIGO-2的LRR3結構域的一種或多種表位的單克隆抗體或Fab片段。在一些實施方式中，所述LRR3表位選自SEQIDNO:29、SEQIDNO:39、SEQIDNO:40、SEQIDNO:56或SEQIDNO:58。在一些實施方式中，AMIGO-2調節劑是特異性結合AMIGO-2的LRR4結構域的一種或多種表位的單克隆抗體或Fab片段。在一些實施方式中，所述LRR4表位選自SEQIDNO:26、SEQIDNO:35或SEQIDNO:45。在一些實施方式中，AMIGO-2調節劑是特異性結合AMIGO-2的LRR5結構域的一種或多種表位的單克隆抗體或Fab片段。在一些實施方式中，所述LRR5表位選自SEQIDNO:25、SEQIDNO:27、SEQIDNO:36或SEQIDNO:53。在一些實施方式中，AMIGO-2調節劑是特異性結合AMIGO-2的LRR6結構域的一種或多種表位的單克隆抗體或Fab片段。在一些實施方式中，所述LRR6表位選自SEQIDNO:31、SEQIDNO:33、SEQIDNO:41、SEQIDNO:46、SEQIDNO:47或SEQIDNO:62。在一些實施方式中，AMIGO-2調節劑是特異性結合AMIGO-2的LRRCT結構域的一種或多種表位的單克隆抗體或Fab片段。在一些實施方式中，所述LRRCT表位選自SEQIDNO:28、SEQIDNO:34、SEQIDNO:37、SEQIDNO:38、SEQIDNO:44、SEQIDNO:49、SEQIDNO:50、SEQIDNO:51、SEQIDNO:52、SEQIDNO:54、SEQIDNO:59、SEQIDNO:60或SEQIDNO:62。在一些實施方式中，AMIGO-2調節劑是特異性結合AMIGO-2的IgV-組結構域的一種或多種表位的單克隆抗體或Fab片段。在一些實施方式中，AMIGO-2調節劑是特異性結合AMIGO-2的Ig結構域的一種或多種表位的單克隆抗體或Fab片段。在一些實施方式中，AMIGO-2調節劑是特異性結合AMIGO-2的胞外域(ECD)的一種或多種表位的單克隆抗體或Fab片段。在一些實施方式中，AMIGO-2調節劑是特異性結合基本上由SEQIDNO:3所構成序列的一種或多種表位的單克隆抗體或Fab片段。本發明的合適抗體可識別線性或構象表位，或它們的組合。在一些實施方式中，本發明抗體結合選自SEQIDNO:3-6或SEQIDNO:25-62的AMIGO-2中抗原性區域的表位。在一些實施方式中，AMIGO-2調節劑是特異性結合基本上由SEQIDNO:3所構成序列的一種或多種表位的單克隆抗體或Fab片段。在一些實施方式中，抗體對具有SEQIDNO:3所示序列的表位有特異性。應該知道這些肽不一定精確地表示一種表位的圖譜，而是還可包含不具有免疫原性的AMIGO-2序列。本領域技術人員熟知預測本發明抗體可結合的潛在表位的方法，包括但不限於Kyte-Doolittle分析(Kyte，J.和Dolittle，R.F.，J.Mol.Biol.(1982)157:105-132)、Hopp和Woods分析(Hopp，T.P.禾口Woods,K.R.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA(1981)78:3824-3828;Hopp，T丄和Woods,K.R.，Mol.Immunol.(1983)20:483-489;Hopp，T丄，J.Immunol.Methods(1986)88:1-18.)、Jameson-Wolf分析(Jameson,B.A.和Wolf,H.，Comput.Appl.Biosci.(1988)4:181-186.)和Emini分析(Emini，E.A.，Schlief，W.A.，Colonno，R丄和Wimmer，E.，Virology(1985)140:13-20)。在一些實施方式中，通過測定理論胞外域鑑定潛在的表位。可採用諸如TMpred(參見K.Hofmann禾口W.Stoffel(1993)TMbase-Adatabaseofmembranespanningproteinssegments(TM基礎-一種跨膜蛋白質區段的資料庫)Biol.Chem.Hoppe-Seyler374,166)或TMHMM(A.Krogh，B.Larsson，G.vonHeijne和E.L.L.Sonnhammer.，PredictingtransmembraneproteintopologywithahiddenMarkovmodel:Applicationtocompletegenomes(用隱馬爾禾鬥夫模型預測跨膜蛋白質拓撲學完整基因組的應用).JournalofMolecularBiology,305(3):567-580，2001年1月)的分析算法作出這種預測。可採用其它算法，例如SignalP3.0(Bednsten等，(2004)JMolBiol.2004年7月16日；340(4):783-95)預測信號肽的存在並預測那些肽在何處從全長蛋白質上切下。蛋白質的胞外部分可用作抗體相互作用的靶標。如果1)抗體顯示閾值水平的結合活性，和/或2)它們不與已知的相關多肽分子明顯交叉反應，則將這些抗體定義為"特異性結合"。本領域技術人員不難測定抗體的結合親和力，例如可通過Scatchard分析(Scatchard，Ann.NYAcad.Sci.51:660-672，1949)。在一些實施方式中，對於靶癌症相關多肽，本發明抗體結合它們的靶表位或模擬引誘物比結合AMIGO家族的其它已知成員(例如，AMIGO-1和AMIGO-3)高至少1.5-倍、2-倍、5-倍、10-倍、100-倍、103-倍、104-倍、105-倍、106-倍或更高。在一些實施方式中，這些抗體的結合親和力為1(^M或不到、10々M或不到、10-9M或不到或亞納摩爾(subnanomolar)的親和力(0.9、0.8、0.7、0.6、0.5、0.4、0.3、0.2、0.1nM或更低)。在一些實施方式中，這些抗體對AMIGO-2的結合親和力是至少1x1(^Ka。在一些實施方式中，這些抗體對AMIGO-2的結合親和力是至少5x106Ka、至少lxl7Ka、至少2xl7Ka、至少1x108Ka或更高。還可借鑑本發明多肽的結合親和力描述或說明本發明抗體。在一些實施方式中，結合親和力包括低於5x1(T2M、1(T2M、5xl(T3M、l(T3M、5x10-4M、10-4M、5x10-5M、10-5M、5x10-6M、l(T6M、5xl(T7M、10-7M、5xlO—8M、10-8M、5xl(T9M、10—9M、5xl(T10M、10-10M、5x10-11M、10-11M、5x10-12M、10-12M、5xl(T13M、10-13M、5x10-14M、1(T14M、5xlCT15M、or10—"M過更低的Kd。在一些實施方式中，採用標準蛋白質印跡分析(Ausubel等，CurrentProtocolsinMolecularBiology(最新分子生物學方法)，1994)，本發明抗體不結合巳知的相關多肽分子，例如如果它們結合AMIGO-2多肽則不結合已知的相關多肽。已知的相關多肽的例子包括但不限於'AMIGO家族的其它成員(例如，AMIGO-1和AMIGO-3)。在一些實施方式中，本發明抗體結合AMIGO-2的直向同源物、同源物、側向同源物或變體，或它們的組合和亞組合(subcombination)。在一些實施方式中，本發明抗體結合AMIGO-2的直向同源物。在一些實施方式中，本發明抗體結合AMIGO-2同源物。AMIGO-2的同源物指已知的AMIGO-2-相關蛋白質，包括AMIGO-1和AMIGO-3。在一些實施方式中，本發明抗體結合AMIGO-2的側向同源物。在一些實施方式中，本發明抗體結合AMIGO-2的變體。在一些實施方式中，本發明抗體不結合AMIGO-2的直向同源物、同源物、側向同源物或變體，或它們的組合和亞組合。在一些實施方式中，可用已知的相關多肽篩選抗體以分離特異性結合AMIGO-2多肽的抗體群。例如，在合適的緩衝條件下，使人AMIGO-2多肽的特異性抗體流過包含粘附在不可溶基質上的AMIGO蛋白質(除AMIGO-2外)的柱子。這種篩選能分離與緊密相關的多肽不具交叉反應性的多克隆和單克隆抗體(Antibodies:ALaboratoryManual(抗體實驗室手冊)，Harlow和Lane(編)，冷泉港實驗室出版社，1988;CurrentProtocolsinImmunology(最新免疫學方法)，Cooligan等(編)，國家衛生研究院，約翰威利父子公司(JohnWileyandSons,Inc.),1995)。本領域熟知如何篩選和分離特定抗體(參見，FundamentalImmunology(基礎免疫學)，Paul(編)，雷文出版社(RavenPress),1993;Getzoff等，Adv.inImmunol.43:1-98，1988;MonoclonalAntibodies:PrinciplesandPractice(單克隆抗體原理和實踐)，Goding，J.W.(編)，學術出版社有限公司(AcademicPressLtd.),1996;Benjamin等，Ann.Rev.Immunol.2:67-101，1984)。這些試驗的代表性例子包括並行免疫電泳(concurrentimmunoelectrophoresis)、放射免疫測定(RIA)、放射免疫沉澱、酶聯免疫吸附測定(ELISA)、斑點印跡或蛋白質印跡、抑制或競爭試驗和夾心試驗。在一些實施方式中，本發明抗體不與選自SEQIDNO:63(AMIGO-l)或SEQIDNO:64(AMIGO-3)的序列內的表位特異性結合。在一些實施方式中，這些抗體或Fab片段不與AMIGO-1或AMIGO-3交叉反應。本發明還提供靶蛋白特異性的SMIP或結合區免疫球蛋白融合蛋白。這些構建物是包含與實施抗體效應功能所需的免疫球蛋白結構域融合的抗原結合結構域的單鏈多肽。參見，例如WO03/041600;美國專利公布20030133939和美國專利公布20030118592。在一些實施方式中，本發明抗體是中和抗體。在一些實施方式中，這些抗體是尋靶抗體。在一些實施方式中，這些抗體在結合靶標後被內在化。在一些實施方式中，這些抗體在結合靶標後未被內在化，而是維持在表面。在一些實施方式中，這些中和抗體不具有任何效應功能。或者，中和抗體可具有效應功能。63可以篩選本發明抗體在結合所研究的腫瘤細胞抗原後被快速內在化的能力，或在結合後維持在表面的能力。在一些實施方式中，例如，在一些類型的免疫偶聯物構建中，如果內在化是釋放毒素部分所需，則抗體能被內在化可能是理想的。或者，如果將抗體用於促進ADCC或CDC，則該抗體最好維持在細胞表面。可採用篩選方法區分這些性能類型。例如，在冰上(含0.1%疊氮化鈉以阻斷內在化)或37。C(不含疊氮化鈉)，將細胞與濃度約1pg/mL的人IgG(對照抗體)或本發明抗體之一溫育3小時的情形下，可利用攜帶腫瘤細胞抗原的細胞。然後用冷的染色緩衝液(PBS+1%BSA+0.1%疊氮化鈉)洗滌細胞，在冰上用山羊抗-人IgG-FITC染色30分鐘。用FACSCalibur記錄幾何平均螢光強度(MFI)。如果在冰上有疊氮化鈉存在下與本發明抗體溫育的細胞與37t沒有疊氮化鈉存在下的細胞之間未觀察到MFI有差異，則懷疑該抗體維持與細胞表面結合，而不是被內在化。然而，如果當細胞在37'C沒有疊氮化鈉存在下溫育時發現表面可染色抗體減少，則懷疑該抗體能內在化。抗體偶聯物在一些實施方式中，本發明抗體是偶聯的。在一些實施方式中，偶聯的抗體可用於癌症治療、癌症診斷或癌細胞顯像。對於診斷應用，通常用可檢測部分標記抗體。通常可將許多可用的標記物分成以下類別(a)放射性核素，例如下文所述那些。例如，可採用CurrentProtocolsinImmunology(最新免疫學方法)，第1和2巻，Coligen等編，WI公司(Wiley-Interscience)，紐約，紐約州，出版(1991)中所述的技術以放射性同位素標記抗體，可採用閃爍計數法檢測放射性。(b)可利用螢光標記物，例如稀土螯合劑(銪螯合劑)或螢光及其衍生物，羅丹明及其衍生物、丹醯、麗絲胺(Lissamine)、藻紅蛋白和德克薩斯紅(TexasRed)。例如，可採用"最新免疫學方法"(同上)中所述的技術將螢光標記物偶聯於抗體。可利用螢光計定量測定螢光。(c)可利用各種酶-底物標記物，美國專利號4,275,149總結了其中一些。酶通常催化生色底物的化學改變，從而可用各種技術檢測。例如，酶可催化底物的顏色改變，從而可透過分光光度法檢測。或者，酶可改變底物的螢光或化學發光。上文描述了定量測定螢光變化的技術。可通過化學反應電激發化學發光底物，然後可檢測(例如利用化學冷光測量計(chemiluminometer))發出的光或者將能量遞送至螢光接受體。酶標記物的例子包括螢光素酶(例如，螢火蟲螢光素酶和細菌螢光素酶；美國專利號4,737,456)、螢光素、2,3-二氫酞嗪二酮類(dihydr叩hthalazinediones)、蘋果酸脫氫酶、過氧化物酶，例如辣根過氧化物酶(HRPO)、鹼性磷酸酶、(3-半乳糖苷酶、葡萄糖澱粉酶、溶菌酶、糖氧化酶(例如，葡萄糖氧化酶、半乳糖氧化酶和葡萄糖-6-磷酸脫氫酶)、雜環氧化酶(例如，尿酸酶和黃嘌呤氧化酶)、乳酸過氧化物酶、微過氧化物酶，等等。O'Sullivan等，MethodsforthePreparationofEnzyme-AntibodyConjugatesforuseinEnzymeImmunoassay(製備用於酶免疫測定的酶-抗體偶聯物的方法)，刊於MethodsinEnzym(酶學方法).(J.Langone和H.VanVunakis編)，學術出版社，紐約，73:147-166(1981)中描述了將酶與抗體偶聯的技術。這些抗體還可用於體內診斷試驗。在一些實施方式中，可用放射性核素標記這些抗體，從而可採用免疫閃爍照相術(immunoscintiography)定位腫瘤。為方便起見，可利用試劑盒，即預定量試劑與實施診斷試驗的使用說明書的包裝組合來提供本發明抗體。如果用酶標記抗體，該試劑盒可裝有底物和酶所需的輔因子(例如，提供可檢測生色團或螢光團的底物前體)。此外，可裝有其它添加劑，例如穩定劑、緩衝劑(例如，封閉緩衝劑或裂解緩衝劑)等。可大幅度地改變各種試劑的相對量，從而提供的試劑溶液濃度能實質性優化試驗靈敏度。特別是，諸試劑可作為乾粉提供，通常是凍幹的並包含賦形劑，從而在溶解後能提供濃度合適的試劑溶液。在一些實施方式中，抗體與一種或多種美登素(maytansine)分子偶聯(例如，每個抗體分子約1-約IO個美登素分子)。可以將美登素，例如轉化為May-SS-Me，其可還原為May-SH3並與修飾的抗體反應(Chari等，CancerResearch52:127-131(1992))以產生美登素-抗體免疫偶聯物。在一些實施方式中，所述偶聯物可以是高度強效的美登素衍生物DMl(N2'-脫乙基^2，-(3-巰基-1-氧代丙基)-美登素)(參見，例如2002年12月12日公布的WO02/098883),其IC50約為10-11M(綜述可參見Payne(2003)CancerCell3:207-212)，或DM4(N2'-脫乙醯基-N2'(4-甲基-4-巰基-l-氧代戊基)-美登素)(參見，例如2004年12月2日公布的WO2004/103272)。在一些實施方式中，所述抗體偶聯物包含與一個或多個刺孢黴素(calicheamicin)分子偶聯的抗腫瘤細胞抗原抗體。亞-皮摩爾濃度的抗體刺孢黴素家族能導致雙鏈DNA斷裂。可用的刺孢黴素結構類似物包括但不限於yll、a21、a31、N-乙醯基-ylI、PSAG和011(Hinman等，CancerResearch53:3336-3342(1993)和Lode等，CancerResearch58:2925-2928(1998))。還可參見美國專利號5,714,586;5,712,374;5,264,586禾n5,773,001，這些專利通過引用專門納入本文。在一些實施方式中，所述抗體偶聯於前藥，所述前藥能通過許多癌症中過度產生的酶而釋放其活性形式。例如，可用阿黴素的前藥形式製備抗體偶聯物，其中纖溶酶將活性組分從該偶聯物中釋放。纖溶酶已知在許多癌性組織中過度產生(參見Decy等，(2004)FASEBJournal18(3):565-567)。在一些實施方式中，這些抗體偶聯於酶促活性毒素及其片段。在一些實施方式中，所述毒素包括但不限於白喉A鏈、白喉毒素的非結合活性片段、外毒素A鏈(來自銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa))、假單胞菌內毒素、蓖麻毒蛋白A鏈、相思豆毒蛋白A鏈、蒴蓮根毒素A鏈、a-抑酶、油桐蛋白、石竹素蛋白、美洲商陸蛋白(Phytolacaamericanaprotein)(PAPI、PAPII和PAP-S)、核糖核酸酶(RNA酶)、脫氧核糖核酸酶(DNA酶)、商陸抗病毒蛋白、苦瓜素抑制齊lj(momordicacharantiainhibitor)、瀉果素、巴豆毒蛋白、肥皂草抑制劑(sapaonariaofficinalisinhibitor),白樹毒素、米託潔林、局限曲菌素、酚黴素、新黴素和單端孢菌毒素(tricothecene)。參見，例如1993年10月28日公布的WO93/21232。在一些實施方式中，毒素固有的免疫原性低，其作用機制(例如，細胞毒性機制與細胞抑制機制)能降低癌細胞對該毒素耐受的機會。在一些實施方式中，可在本發明抗體與免疫調節劑之間形成偶聯物。例如，在一些實施方式中，可用免疫刺激性寡核苷酸。這些分子能激發抗原特異性抗體應答的高效免疫原(參見Datta等，(2003)AnnN.Y.Acad.Sci1002:105-lll)。其它免疫刺激性化合物包括幹細胞生長因子，如"Sl因子"，淋巴毒素，如腫瘤壞死因子(TNF)，造血因子，如白介素，集落刺激因子(CSF)，如粒細胞集落刺激因子(G-CSF)或粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)，幹擾素(IFN)，如幹擾素a或Y，紅細胞生成素和血小板生成素。一些實施方式提供放射性偶聯的抗體。在一些實施方式中，可利用32P、33P、47Sc、59Fe、64Cu、67Cu、75Se、77As、89Sr、90Y、"Mo、105Rh、109Pd、125I、131I、142Pr、143Pr、149Pm、153Sm、161Th、166Ho、169Er、177Lu、186Re、188Re、189Re、194Ir、198Au、199Au、211Pb、212Pb、213Bi、58Co、67Ga、80mBr、99mTc、103mRh、109Pt、161Ho、189mOs、192Ir、152Dy、211At、212Bi、223Ra、219Rn、215Po、211Bi、225Ac、221Fr、217At、213Bi、255Fm及其組合和亞組合來製備這些抗體。在一些實施方式中，硼、釓或鈾原子與這些抗體偶聯。在一些實施方式中，硼原子是"B,釓原子是^Gd，鈾原子是23511。在一些實施方式中，放射性核素偶聯物包含能量在20到10,000keV之間的放放射性核素。放射性核素可以是能量低於1000keV的Auger發射體、能量在20到5000keV之間的P發射體或者能量在2000到10,000keV之間的a或"a"發射體。在一些實施方式中，提供的診斷性放射偶聯物所含的放射性核素是"、P-或正電子發射同位素。在一些實施方式中，放射性核素的能量在20到10,000keV之間。在一些實施方式中，放射性核素選自18F、51Mn、52mMn、52Fe、55Co、62Cu、64Cu、68Ga、72As、75Br、76Br、82mRb、83Sr、89Zr、94mTc、51Cr、"Co、58Co、59Fe、67Ga、75Se、97Ru、99mTc、114mIn、123I、125I、13Li和197Hg。、在一些實施方式中，本發明抗體偶聯於作為光活化劑或造影劑。光活化化合物包括如發色團或染料等化合物。造影劑可以是，例如，順磁性離子，其中所述離子包括選自下組的金屬鉻(ni)、鎂(n)、鐵(m)、鐵(n)、鈷(n)、鎳(n)、銅(n)、釹(in)、釤(ni)、鐿(in)、釓(ni)、釩(n)、鋱(in)、鏑(III)、鈥(III)和鉺(III)。造影劑還可以是用於x射線技術或計算機斷層掃描術的不透射線的化合物，如碘、銥、鋇、鎵和鉈化合物。不透射線的化合物可選自鋇、泛影酸、乙碘油、枸櫞酸鎵、碘卡明酸、碘卡酸、碘達酸、膽影酸、碘撒酸、碘磺拉胺(iogulamide)、碘海索、碘帕醇、碘番酸、碘普西酸、碘西法酸、碘絲酸、碘碸葡胺、碘琥酸(iosemeticadd)、碘酞硫、碘得酸(iotetricacid)、碘拉酸、碘託酸、碘克沙酸、羥泛影酸、碘泊酸鹽、葡甲胺、甲泛葡胺、甲泛影鈉、丙碘酮和氯化亞鉈。在一些實施方式中，診斷性免疫偶聯物可含有超聲增強劑，如與本發明抗體偶聯的充氣脂質體。診斷性免疫偶聯物可用於各種方法，包括但不限於腫瘤或癌診斷和檢測的手術中、內窺鏡或血管內方法。在一些實施方式中，抗體偶聯物可利用各種雙功能蛋白偶聯劑來製備，例如N-琥珀醯亞胺基-3-(2-吡啶二巰基)丙酸酯(SPDP)、琥珀醯亞胺基-4-(>1-馬來醯亞胺苄甲基)環己烷-l-羰化物、亞氨基硫垸(iminothiolane)(IT)、亞氨酸酯的雙功能衍生物(如己二亞氨鹽酸二甲酯(dimethyladipimidateHCL))、活性酯類(如辛二酸二琥珀醯亞胺)、醛(如戊二醛)、雙-疊氮化合物(如雙(對-疊氮基苯甲醯)己二胺(bis(p-azidobenzoyl)hexanediamine))、二重氮鹽(bis-diazonium)衍生物(如雙-(對-二重氮苯甲醯)-乙二胺(bis-(p-diazoniumbenzoy1)-ethylenediamine))、二異氰酸酯(如亞苄基2,6-二異氰酸酯)以及雙活性氟化合物1，5-二氟-2,4-二硝基苯)。例如，蓖麻毒蛋白免疫毒素可按照Vitetta等，Science238:1098(1987)描述的方法製備。碳-14標記的1-異硫氰酸根合苄基-3-甲基二亞乙基三胺戊酸(isothiocyanatobenzyl-3-methyldiethylenetriaminepentaaceticacid)(MX-DTPA)是將放射性核苷酸偶聯於抗體的示範性螯合劑。參見W094/11026。接頭可以是促使細胞毒性藥物在細胞中釋放的"可切割接頭"。例如，可用酸不穩定的接頭、肽酶敏感性接頭、二甲基接頭或含二硫鍵的接頭(Chari等，CancerResearch52:127-131(1992))。試劑還可以通過碳水化合物部分連接於本發明抗體。在一些實施方式中，可通過，例如重組技術或肽合成製備包含本發明抗體和細胞毒性劑的融合蛋白。在一些實施方式中，將包含偶聯於細胞毒性劑的抗腫瘤抗原抗體的這種免疫偶聯物給予患者。在一些實施方式中，免疫偶聯物和/或其所結合的腫瘤細胞抗原蛋白被細胞內在化，從而增加了免疫偶聯物殺傷與之結合的癌細胞的療效。在一些實施方式中，細胞毒性劑靶向或幹擾癌細胞的核酸。這種細胞毒性劑的例子包括美登醇68(maytansinoid)、刺孢黴素、核糖核酸酶和DNA核酸內切酶。在一些實施方式中，這些抗體可以偶聯於"受體"(如鏈黴親和素)，從而可用於腫瘤預靶向(tumorpretargeting)，其中先將抗體-受體偶聯物給予患者，然後利用清除劑從循環中去除未結合的偶聯物，再給予偶聯於細胞毒性劑(如放射核苷酸)的配體(例如，親和素)。在一些實施方式中，這些抗體可偶聯於在靶細胞溶酶體內釋放的細胞毒性分子。例如，藥物單甲基奧瑞斯他汀E(monomethylauristatinE)(MMAE)可經纈氨酸-瓜氨酸連接鍵偶聯，該連接鍵在抗體偶聯物內在化後可被蛋白水解性溶酶體酶，組織蛋白酶B切割(參見，例如2003年4月13日公布的WO03/026577)。在一些實施方式中，可以利用含有腙官能團作為可切割部分的酸不穩定接頭將MMAE連接於抗體(參見，例如2002年11月11日公布的WO02/088172)。抗體依賴的酶介導前藥治療(ADEPT)在一些實施方式中，本發明抗體還可以通過將抗體偶聯於前藥活化酶而用於ADEPT,所述酶可將前藥(例如，肽醯基化療劑，參見WO81/01145)轉化成活性抗癌藥物。參見，例如WO88/07378和美國專利號4975278。在一些實施方式中，ADEPT可用的免疫偶聯物中的酶組分包括能以將前藥轉化成具有更高活性的細胞毒性形式的方式作用於前藥的任何酶。可用於ADEPT中的酶包括但不限於用於將含磷酸(基團)的前藥轉化成游離藥物的鹼性磷酸酶；用於將含硫酸(基團)的前藥轉化成游離藥物的芳基硫酸酯酶；用於將非毒性的5-氟半胱氨酸轉化成抗癌藥物5-氟尿嘧啶的半胱氨酸脫氨酶；用於將含肽的前藥轉化成游離藥物的蛋白酶，如沙雷氏菌蛋白酶、嗜熱菌蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶、羧肽酶和組織蛋白酶(如組織蛋白酶B和L);用於轉化含D胺基酸取代基的前藥的D-丙氨醯羧肽酶；用於將糖基化前藥轉化成游離藥物的碳水化合物鏈切割酶如p-半乳糖苷酶和神經醯胺酶；用於將P-內醯胺衍生的藥物轉化成游離藥物的p-內醯胺酶；和用於將在氨基氮處分別用苯氧乙醯基或苯乙醯基衍生的藥物轉化成游離藥物的青黴素醯胺酶，如青黴素V醯胺酶或青黴素G醯胺酶。在一些實施方式中，本領域中也稱為"抗體酶"的具有酶活性的抗體可用於將本發明前藥轉化成游離的活性藥物(參見，例如Massey，Nature328:457-458(1987))。抗體-抗體酶偶聯物可按照本文所述方法製備，從而能將抗體酶轉移給腫瘤細胞群。_在一些實施方式中，ADEPT酶可通過本領域熟知的技術，例如利用上述異雙功能交聯劑共價結合於抗體。在一些實施方式中，可採用本領域熟知的重組DNA技術構建融合蛋白，其中融合蛋白至少包含連接於本發明酶的至少功能活性部分的本發明抗體的抗原結合區(參見，例如Neuberger等，Nature,312:604-608(1984)。在一些實施方式中，可通過檢測與未處理對照培養物相比，經處理靶細胞培養物的活力來鑑定以細胞抑制方式而非細胞毒性方式起作用的抗體。可採用本領域已知的方法檢測活力，如CellTiter-Blue⑧細胞活力試驗或Ceimter-Glo⑧發光細胞活力試驗(普羅美加公司(Promega)，編號分別為G8080和G5750)。在一些實施方式中，與對照培養物相比，如果通過上述方式檢測到處理導致細胞數下降而沒有細胞死亡的證據，則抗體可認為是細胞抑制性的。在一些實施方式中，可採用本領域已知的試驗來進行體外篩選試驗以鑑定可促進ADCC的抗體。一種示範性試驗是體外ADCC試驗。為製備51-Cr標記的靶細胞，在組織培養板上培養腫瘤細胞系，用PBS配製的10mM無菌EDTA收穫細胞。用細胞培養基洗滌解離的細胞兩次。37。C用200pCi的Cr-51(新英格蘭核製品公司(NewEnglandNuclear)/杜邦公司(DuPont))標記細胞(5xl06)1小時，期間偶爾攪拌。用細胞培養基洗滌標記的細胞三次，然後重懸至濃度為lxlS細胞/mL。不調理或調理細胞，然後在PBMC試驗中將細胞與100ng/ml和125ng/ml的測試抗體共孵育，在NK試驗中將細胞與20ng/mL和1ng/mL的測試抗體共孵育。利用肝素從正常健康供者採集血液，用等體積的磷酸緩衝鹽水(PBS)稀釋來製備外周血單核的細胞。然後按照生產商的使用說明書，將血液疊加到淋巴細胞分離液(LYMPHOCYTESEPARATIONMEDIUM(LSM:OrganonTeknika))上並離心。從LSM-血漿界面收集單核的細胞，PBS洗滌三次。將效應細胞懸浮在細胞培養基中，終濃度為lxl(^細胞/mL。經LSM純化後，按照廠家的使用說明書，利用NK細胞分離試劑盒和磁柱(米爾特尼耶生物技術公司(MiltenyiBiotech))通過負篩選從PBMC中分離天然殺傷細胞(NK)。收集分離的NK細胞，洗滌並重懸到細胞培養基內，濃度為2xlS細胞/mL。通過流式細胞術分析確定NK細胞的身份。沿微量滴定板的各行用細胞培養基兩倍連續稀釋效應細胞(PBMC或NK)以製備不同效應細胞:靶細胞之比(終體積為100pL)。效應細胞的濃度範圍為PBMC是1.0xl07/mL到2.0x104/mL，NK是2.0xl0VmL到3.9xl0VmL。效應細胞滴定後，向滴定板的各孔中加入lOOpL濃度為lxlS細胞/ml的Cr51-標記的靶細胞(調理或未調理)。從而對於PBMC，初始效應細胞:靶細胞之比為100:1，對於NK,初始效應細胞:靶細胞之比為20:1。所有試驗一式兩份進行，各滴定板都包含自發裂解(無效應細胞)和完全裂解(靶細胞加100pL1%十二烷基硫酸鈉，1N氫氧化鈉)對照。37'c溫育滴定板18小時，然後利用上清液收穫系統(斯卡特隆儀器公司(SkatronInstrument,Inc.))收穫細胞培養上清液，用Minaxi自動y5000系列y計數儀(帕卡德公司(Packard))計數1分鐘。然後利用以下公式將結果表示為細胞毒性百分比％細胞毒性(樣品cpm-自發裂解)/(完全裂解-自發裂解)xlOO。為鑑定能促進CDC的抗體，技術人員可以實施本領域已知的試驗。一種示範性試驗是體外CDC試驗。在體外，在沒有或有不同濃度的測試抗體存在下，通過共同溫育表達腫瘤細胞抗原的細胞與人(或其它來源的)的含補體血清來檢測CDC活性。然後利用ALAMARBLUE⑧定量測定活細胞來檢測細胞毒性(Gazzano-Santoro等，J.Immunol.Methods202163-171(1997))。所進行的對照試驗不用抗體，和使用抗體但用的是熱滅活血清和/或使用不表達所研究腫瘤細胞抗原的細胞。另外，可用腫瘤抗原或衍生自腫瘤抗原的肽包被紅細胞，然後通過觀察紅細胞裂解檢驗CDC(參見，例如Karjalainen禾卩Mantyjarvi,ActaPatholMicrobiolScand[C].1981/10;89(5):315-9)。為選擇能誘導細胞死亡的抗體，可以評估與對照相比，膜完整性的喪失，如PI、臺盼藍或7AAD攝取試驗所示。一種示範性試驗是用表達腫瘤抗原的細胞進行的PI攝取試驗。按照該試驗，用添加10%熱滅活FBS(Hyclone)和2mML-穀氨醯胺的Dulbecco改進的Eagle培養基(D-DMEM):HamF-12(50:50)培養表達腫瘤細胞抗原的細胞。(因此，該試驗可在沒有補體和免疫效應細胞存在下進行)。以3X10"皿的接種密度將腫瘤細胞接種到100x20mm培養皿中，使細胞貼壁培養過夜。然後除去培養基，或者更換單獨的新鮮培養基，或者更換含10昭/mL合適單克隆抗體的培養基。每次處理後，用PBS洗滌細胞單層，然後通過胰蛋白酶消化分離細胞。4'C以1200rpm離心細胞5分鐘，細胞團重懸到3mL冰冷卻的Ca"+結合緩衝液(10mMHepes，pH7.4，140mMNaCl，2.5mMCaCb)中，然後分裝入35mm帶過濾蓋子的12X75管內(每管lmL，每個處理組3管)，從而去除細胞團±央。然後在管內加入PI(IOpg/mL)。用FACSCANTM流式細胞儀和FACSCONVERTCellQuest軟體(BD公司(BectonDickinson))分析樣品。通過PI攝取測定到能誘導統計學顯著水平的細胞死亡的的抗體可選為細胞死亡誘導抗體。還可利用"F-膜聯蛋白為PET造影劑在體內篩選這些抗體的凋亡活性。在該方法中，用"F放射性標記膜聯蛋白V，在所研究的抗體給予測試動物後給予。凋亡過程中最早發生的事件之一是磷脂醯絲氨酸從細胞膜的內側外翻到細胞外表面，在此處磷脂醯絲氨酸可接近膜聯蛋白。然後對動物進行PET造影(參見Yagle等，JNuclMed.2005年4月;46(4):658-66)。還可以處死動物，取出各器官或腫瘤並按標準方法分析凋亡標記。雖然在一些實施方式中，癌症的特徵在於基因表達產物的過度表達，但本申請還提供一種治療不視作過度表達腫瘤抗原的癌症的方法。為測定癌症中的腫瘤抗原表達，可進行各種診斷/預後試驗。在一些實施方式中，可通過IHC分析基因表達產物過度表達。對腫瘤生物活檢的石蠟包埋組織切片進行IHC試驗，參照以下腫瘤抗原蛋白染色強度標準0分未見染色或者在不到10%的腫瘤細胞中觀察到膜染色。l+分在10%以上的腫瘤細胞中檢測到微弱的/幾乎不可覺察的膜染色。染色只發生在細胞膜的一部分上。2+分在10%以上的腫瘤細胞中觀察到弱到中度的完整膜染色。3+分在10%以上的腫瘤細胞中觀察到中度到強的完整膜染色。在一些實施方式中，腫瘤抗原過度表達評估中為0或1+分的那些腫瘤可表徵為沒有過度表達腫瘤抗原，而那些2+或3+的腫瘤則表徵為過度表達腫瘤抗原。在一些實施方式中，與正常細胞相比，癌細胞中AMIGO-2未顯著上調，而且癌細胞和正常細胞對AMIGO-2表達的依賴性不同。在一些實施方式中，調節AMIGO-2可影響腫瘤-基質相互作用。在一些實施方式中，抑制AMIGO-2可調節腫瘤-基質相互作用。或者，可用甲醛固定、石蠟包埋的腫瘤組織進行FISH分析，如INFORM(由亞利桑那州維塔納公司(Ventana)銷售)或PATHVISION(瓦西斯公司(Vysis)，伊利諾州)以測定腫瘤中腫瘤抗原過度表達的程度(如果存在)。此外，例如可將抗體共價偶聯於聚合物來進行化學修飾以增加它們的循環半衰期。各抗體分子可連接於一個或多個(S卩，1、2、3、4、5或更多個)聚合物分子。在一些實施方式中，聚合物分子通過接頭分子連接於抗體。聚合物通常可以是合成或天然聚合物，例如任選取代的直鏈或支鏈聚亞垸基、聚鏈烯或聚氧化烯聚合物或支鏈或無支鏈的多糖，例如同-或雜多糖。在一些實施方式中，聚合物是聚氧乙烯多元醇和聚乙二醇(PEG)。PEG在室溫下可溶於水，其通式為R(0-CH2-CH2)nO-R，其中R可以是氫或保護基團，例如烷基或烷醇基團。在一些實施方式中，所述保護基團具有1-8個碳。在一些實施方式中，所述保護基團是甲基。符號n是1-1,000或2-500之間的正整數。在一些實施方式中，PEG的平均分子量在1000-40,000之間、2000-20,000之間或3,000-12,000之間。在一些實施方式中，PEG具有至少一個羥基。在一些實施方式中，所述羥基是末端羥基。在一些實施方式中，該羥基經活化與抑制劑上的游離氨基反應。然而，應該知道可改變反應基團的類型和數量以獲得共價偶聯的PEG/本發明抗體。美國專利號4,766,106;4,179,337;4,495,285和4,609,546公開了聚合物以及將它們連接於肽的方法，各專利通過引用納入本文。安全性研究可檢驗本發明抗體的安全性和毒理學特徵。這類研究的指南可見通過引用納入本文的USDACBER部門，"PointstoConsiderintheManufacture1X/LJk量llg丄T丄V11V^iHillJL1V/WWV=2X"表示上調2-倍；"%LE.5X"和"<=2x"表示下調2-倍)。兩組晶片證明結腸癌中AMIGO-2上調。用內部晶片進行的實驗表明AMIGO-2在乳腺癌和前列腺癌中也上調。用艾飛麥特利克斯實驗未觀察到在這些組織中上調。還採用反轉錄偶聯的聚合酶鏈式反應(RT-PCR)檢測正常和癌組織樣品中的相對AMIGO-2mRNA水平(圖2)。通過半定量RT-PCR(GeneAmp，應用生物系統公司(AppliedBiosystems)，福斯特城，加利福尼亞州)比較一組正常組織與結腸、乳腺和前列腺LCM(雷射捕捉切割)切割樣品組(每組8位患90者)。測試的兩組引物得到相似的結果(名為"ABTP508/509"的引物組的數據見圖2)。在測試的正常組織中，乳腺和肺顯示相對表達最高。與正常結腸相比，結腸癌顯示上調5-倍以上，與正常乳腺相比，上調數倍。利用人基因組U133+2.0陣列(艾飛麥特利克斯公司)對癌性和正常組織中AMIG0-2mRNA表達的寡核苷酸陣列分析的圖示見圖3和4。正常和癌性組織類型沿水平軸顯示。在圖4中，用"c"標記癌性組織(例如，"c一乳腺—導管(cj)reast—duct)"代表乳腺癌組織樣品)，用"n"標記正常組織。組織類型還標記有相關的組織類型和亞型，如果已知的話。例如，"c—乳腺_導管"是定位於乳腺導管的乳腺癌的癌組織。如果在手術切除時不清楚亞型或者亞型未知，那麼標記"ns"代表"非特異性的"。圖3和4的垂直軸上各點代表一位患者的一個組織樣品，各點在垂直軸上的高度(線性)表示探針組的相對表達水平。圖3表示線性分析，而圖4的數據以log2比例表示。實心圈代表表達水平在線性檢測範圍內的樣品。空心圈代表樣品中基因表達的上限，即基因低於探針組的檢測限以下之處。空心方塊代表樣品中基因表達的下限，即探針組飽和之處。進行分析前，通過在大量不同樣品組中分析其組成型探針的特性來校正各探針組。這種校正檢測了各探針的相對靈敏度和探針之間的探針組反應是線性的強度範圍。該範圍以下的強度稱為"未檢出"，而該範圍以上的強度稱為"飽和的"。由於樣品間的雜交和標記效率存在差異，因此各陣列在校正後還要進行標準化。就基因表達而言，這導致該範圍的上下限隨樣品而有所不同。實施例2:免疫組織化學方法揭示AMIGO-2在結腸癌和肺癌中表達使組織切片脫石蠟，用亞利桑那州圖森市維塔納醫學系統公司(VentanaMedicalSystems,Inc.,Tucson,AZ)的維塔納發現儀器(VentanaDiscoveryinstrument)進行抗原回收。進行標準細胞條件化，然後將細胞與第一抗體溫育60分鐘。利用10pg/ml的加利福尼亞州艾莫利維爾市希龍公司(Chiron，Emeryville,CA)的家兔抗-人AMIGO-2抗體和加利福尼亞州艾莫利維爾市希龍公司的家兔IgG預採血對照(Prebleedcontrol)。依次利用維塔納醫學系統公司的維塔納通用第二試劑和維塔納醫學系統公司的維塔納DABMap試劑盒檢測。利用維塔納醫學系統公司的維塔納蘇木精和靛青試劑復染，切片在分等級酒精中脫水，在二甲苯中清潔，用合成的固定介質蓋上蓋玻片。染色表明腫瘤細胞和腫瘤基質中表達AMIGO-2。觀察到圍繞腫瘤的基質組織中表達的AMIGO-2與腫瘤自身中的表達相當或更高，從而表明AMIGO-2對於支持腫瘤生長所需的血管形成可能至關重要。實施例3:不同細胞系中AMIGO-2蛋白水平不同從不同細胞系的細胞團製備蛋白質裂解液，用市售可得的AMIGO-2抗體(明尼蘇達州明尼阿波利斯RD系統公司(R&DSystems,Inc.)的MAB2080，)免疫沉澱該裂解液，該抗體特異性識別AMIGO-2，而不識別AMIGO-l或AMIGO-3蛋白。細胞系包括人胃癌細胞系(AGS)、兩種結腸癌細胞系(SW620和HT29)、兩種結腸直腸細胞系(Colo320和HCT116)和胚胎細胞系(293-CMVII)(圖5)。通過丙烯醯胺凝膠電泳分開免疫沉澱捕捉的蛋白質，然後利用內部製備的抗-AMIGO-2抗體進行蛋白質印跡分析(圖5)。在結腸和胃細胞系中觀察到兩個條帶(約63kD和約卯kD)。分子量較高的產物可能是糖基化、磷酸化或多聚形式的AMIGO-2。測定相對半定量RT-PCRCt水平，將其標註在圖5中4種細胞系名稱旁的括號內。Ct值表明經一定輪次PCR後的檢測閾值。Ct值較高表明要檢測cDNA需要較多輪PCR，因此表明mRNA水平較低。測試的所有細胞系對AMIGO-2mRNA呈陽性，但檢測蛋白質的能力隨mRNA數量減少而降低。圖5表明結腸癌細胞系中表達的AMIGO-2水平顯著。實施例4:功能試驗測試了一組siRNA在SW620細胞(表達AMIGO-2的結腸癌細胞系)中敲減AMIGO-2mRNA的能力(圖6)。圖6中測試的siRNA序列見表3。圖6所示AMIGO-2siRNA均將AMIGO-2mRNA水平降低一定程度，但siRNAC315-1.3和C315-4.3看來降低mRNA水平最有效。雖然蛋白質印跡分析在Colo320和HCT116細胞中未能檢測到AMIGO-2蛋白水平(見圖5)，但AMIGO-2特異性siRNAC315-1.3和C315-4.3降低了這些細胞系中的AMIGO-2mRNA水平，這與Colo320和HCT116細胞中的陽性mRNA表達一致。通過幾種方法測試AMIGO-2敲減的功能後果。利用市售可得的試劑盒(ToxiLight,康布萊科斯公司(CambrexCorporation),東盧瑟福，新澤西州)評估在結腸癌細胞系SW620中進行AMIGO-2敲減後的細胞死亡程度。雖然在未感染和陰性對照樣品中觀察到極少的細胞死亡，但敲減陽性對照基因和AMIGO-2(通過兩種不同的siRNA試劑)顯示明顯的毒性(圖8A)。也檢測了AMIGO-2敲減在MRC9細胞中的功能後果。雖然在用陰性對照siRNA處理的細胞中檢測到的細胞死亡量較低，但在用CHIR314-1.5SIsiRNA處理的MRC9細胞中觀察到顯著且可重現的細胞死亡量(圖8B)。還通過檢測siRNACHIR315-1.3SI和CHIR315-4.3SI在胃癌細胞系AGS中對PARP切割和M30表達的作用而測試了AMIGO-2敲減的功能後果。PARP切割和M30產生表明作為凋亡介體的胱冬酶活化。用siRNA溫育細胞48小時，然後通過蛋白質印跡分析細胞裂解液的AMIGO-2、PRAP、M30和微管蛋白的表達。陽性對照和siRNA處理樣品中PARP切割和M30表達均增加，從而表明這些細胞系中凋亡增加(圖9)。與預計的一樣，與各siRNA接觸後，AMIGO-2蛋白水平降低(圖9，上圖)。還檢測了結腸癌細胞系SW620中siRNACHIR315-1.3SI和CHIR315-4.3SI對PARP切割禾口M30表達的作用。將SW620細胞與AMIGO-2特異性siRNA(或對照RNA)溫育72小時，通過上述蛋白質印跡分析細胞裂解液。檢測用CHIR315-1.3SI處理的SW620細胞中的PARP切割，表明siRNA處理導致這些這些細胞中發生凋亡。還採用其它試驗檢驗AMIGO-2敲減在各種細胞系中的功能後果，所述細胞系包括AGS、SW620、HT29、A549和Colo320癌細胞系；184B5和HMEC非致瘤性乳腺上皮細胞系；和MRC9正常人肺成纖維細胞系。利用兩種不同的AMIGO-2siRNA，即C315-1.3si和C315-4.3si進行實驗。也在所有實驗中證實了AMIGO-2敲減。這些實驗的結果如下所示。採用亞-GlDNA試驗(Sub-GlDNAassay),用流式細胞術檢測細胞死亡。用AMIGO-2siRNA轉染後，檢測到在AGS、SW620、A549和Colo320癌細胞系中細胞死亡增加，在HT29中有一定程度(增加)，但在184E5或HMEC細胞中未增加。MRC9細胞沒有數據報導。還採用凋亡試驗，通過檢測PARP切割和/或M30產生檢測細胞死亡。用AMIGO-2siRNAC315-lsi和C315-4si轉染後，檢測到在AGS和SW620癌細胞系中細胞死亡增加，但在A549細胞中未增加。HT29、Colo320、184B5、HMEC或MRC9細胞系沒有數據報導。按照生產商的使用說明書，還採用1\)^1^8111@試驗(康布萊科斯公司，東盧瑟福，新澤西州)檢測細胞死亡。將細胞接種在96-孔碟中，其密度在1天後可達到約80-95%匯合。用OptiMEMTM將寡核苷酸稀釋至2^M。然後將寡核苷酸-OptiMEMTM加入遞送載體，選擇以優化用於該試驗中的特定細胞類型。然後用含血漿的細胞培養基進一步稀釋寡聚/遞送載體混合物。siRNA寡核苷酸終濃度是50nM。如上所述製備寡核苷酸。37'C轉染細胞約4小時至過夜，用新鮮培養基替換轉染混合物。胰蛋白酶處理轉染的細胞，在48或72小時計數維持與平板結合的總細胞。用AMIGO-2siRNA轉染後，檢測到在SW620和A549癌細胞系中細胞死亡增加，但在MRC9細胞中未增加。AGS、HT29、Colo320、184B5或HMEC細胞系沒有數據報導。採用細胞滴度發光(ATP檢測；普羅美加公司)試驗檢測依賴貼壁的細胞生長。24小時時，將細胞以3000-5000個細胞/孔接種在96-孔板上。按照生產商的使用說明書，在各時間點(轉染後24小時、48小時、72小時、96小時、120小時)裂解細胞並採用細胞滴度發光試驗檢驗。細胞滴度發光試驗的結果提供與相對細胞數成比例的螢光。在AGS、SW620、HT29、Colo320、A549和MRC9細胞中觀察到依賴貼壁的細胞生長降低，但在184B5或HMEC細胞中未觀察到。採用軟瓊脂試驗檢測不依賴貼壁的細胞生長。軟瓊脂試驗的實施首先用多聚-HEMA包被非組織培養處理的平板以防細胞與平板相連。利用胰蛋白酶收集未轉染的細胞，用培養基洗滌兩次。用血球計數器計數細胞，將細胞重懸在培養基中達10"個細胞/ml。將50pl試樣置於多聚HEMA包被的96-孔板中並轉染。轉染一天後，胰蛋白酶處理細胞，重懸並計數。將細胞稀釋至約500個細胞/100pl/孔，轉移至深孔區(deepwellblock)(最大體積=1ml/孔，一式三份，按照標準布局)。將細胞接種在兩塊平板中用於試驗的康寧7007號超低粘附U-平板(Corning#7007UltraLowAdherentU-plate)和用於接種效率檢測的康寧3799號平板。用微波爐加熱約1分鐘來融化SeaplaqueGTG瓊脂糖3%。完全融化時，將約10ml倒入預熱的50ml聚丙烯試管中(Falcon#35-2070)，在60。C加熱塊中溫育至少10分鐘。將約18.6ml完全培養基加入50ml聚丙烯試管，在水浴中以約37"C溫育。用MultimekTM移液器將瓊脂糖分散於96孔板中的細胞。將約18.6ml熱培養基倒入10ml瓊脂糖中，小心翻轉以充分混合。約4'C溫育平板20-30分鐘以使瓊脂糖快速固化。瓊脂糖固化後，將100pl完全培養基加在細胞上。為檢測第0天接種效率，加入約25nl/孔阿爾瑪藍，37'C溫育過夜。18-24小時後，用TECAN平板讀數計在530ex/590em閱讀平板。37°C，溫育試驗平板7天，然後用阿爾瑪藍(25nl/孔)顯色。在SW620、A549和MRC9細胞中觀察到不依賴貼壁的細胞生長降低。AGS、HT29或Colo320細胞沒有數據報導。該試驗不適於測試MRC9、184B5和HMEC細胞，因為該類型的正常細胞通常不以不依賴於貼壁的方式生長。利用AMIGO-2調節劑能抑制癌細胞系中菌落形成表明AMIGO-2在轉移表型的產生和/或維持中至關重要。在SW620和AGS細胞中測試了通過C315-1.3si禾BC315-4.3sisiRNA敲減AMIGO-2對功能相關下遊標記的影響。將這些細胞與siRNA溫育48小時，然後通過蛋白質印跡分析細胞裂解液。利用抗-AMIGO-2抗體RBAd70(希龍公司，艾莫利維爾，加利福尼亞州)檢測AMIGO-2蛋白。利用微管蛋白作為加樣對照。兩種siRNA均在SW620和AGS細胞中導致AMIGO-2蛋白水平降低(圖10A和11)。在SW620細胞中，C314-1.3si看來比C315-4.3si更有效地降低AMIGO-2蛋白水平(圖10A)。還利用C315-1.3si和C315-4.3sisiRNA檢測了SW620細胞中AMIGO-2敲減對c-mycmRNA95水平的作用。將細胞與siRNA溫育72小時，然後分離並製備mRNA用於分析。陽性對照siRNA和兩種AMIGO-2特異性siRNA均降低cMycmRNA，表明AMIGO-2影響c-myc在轉錄水平的表達(圖IOB)。兩種siRNA還降低了兩種細胞系中的磷酸化ERK，但在SW620細胞中，C315-1.3si看來比C315-4.3si更能降低磷酸化(分別見圖10和11)。兩種siRNA還降低了兩種細胞系中的C-myc、cFosLl和cJun(見圖11、12A、14A和14B)。用兩種AMIGO-2-特異性siRNA轉染的AGS細胞中細胞周期蛋白Dl表達也降低(圖11)。用C315-1.3si轉染的SW620和AGS細胞中細胞周期蛋白Bl和cFosll水平也降低(圖13)。蛋白質印跡(圖16)檢測到接觸抗AMIGO-2抗體MAB2080(用作AMIGO-2激動劑)的SW620細胞顯示cMyc(圖14C)、cJun(圖2C)、FosLl和磷酸-ERK上調。接觸MAB2080的AGS細胞還顯示cMyc(圖14C)和cJun(圖12C)上調。此夕卜，用AMIGO-2穩定轉染的Rati細胞顯示cJun表達上調(圖12B)。AMIGO-2對c-Myc、細胞周期蛋白B1、cFosll和cJun表達的表觀作用提示AMIGO-2參與調節立即早期基因。這些觀察結果和AMIGO-2下調對細胞周期蛋白基因表達的作用(見上文)支持了AMIGO-2在細胞周期調節中起作用。進行艾飛麥特利克斯實驗以檢測AMIGO-2siRNA對基因表達的作用(圖15A和15B)。這些結果證實cFosLl和細胞周期蛋白Bl的下調與AMIGO-2下調相關，這與AMIGO-2在細胞生長和存活中的作用一致。實施例5:AMIGO-2抑制血管生成AMIGO-2敲減抑制參與血管生成的尿激酶和VEGF表達。現已在正常血管中觀察到AMIGO-2表達，從而支持了該基因在血管生成中起作用(參見上文實施例2)。參與神經元指導和運動性的許多基因，例如AMIGO-2也參與血管生成。實施例6:AMIGO-2抗體表1:靶向AMIGO-2多肽的抗體tableseeoriginaldocumentpage97實施例7:AMIGO-2反義寡核苷酸表2:耙向AMIGO-2的反義RNAtableseeoriginaldocumentpage97實施例9:AMIGO-2表位tableseeoriginaldocumentpage98實施例10:正常組織中的AMIGO-2表達製備正常組織切片，用上述家兔抗-AMIGO-2或對照、預採血抗體染色。染色表明AMIGO-2在各種正常人組織中表達，包括腎上腺、乳腺、子宮頸、肺、腎臟、肝臟、卵巢、胰腺、前列腺、骨骼肌、皮膚、脾臟、睪丸、結腸和子宮，特別是在肺、子宮頸、心臟和肝臟的基質細胞亞組(例如，血管和巨噬細胞)中。艾飛麥特利克斯實驗(見上文)測定到這些組織中的AMIGO-2蛋白表達水平與相應的mRNA表達水平相關，表明AMIGO-2在正常組織，特別是增殖性組織(例如，睪丸、皮膚、卵巢、脾臟和結腸)中廣泛表達。雖然參考具體實施方式描述了本發明，但本領域技術人員應該知道可作出各種改變並可取代各種等價形式而不脫離本發明的真實構思和範圍。此外，可對本發明的目的、構思和範圍作出許多改進以適應特定的情形、材料、物質、方法、方法步驟或步驟的組成。所有這樣的改進應屬於本發明的範圍。權利要求1.一種治療有此需要的患者的癌症或癌症症狀的方法，包括將治療有效量的AMIGO-2抑制劑給予該患者，所述AMIGO-2抑制劑選自下組(a)結合選自下組的AMIGO-2結構域中的表位的抗體信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域和Ig結構域；(b)包含選自SEQIDNO7-16所示某序列的至少10個連續核苷酸的分離寡核苷酸；(c)分離的雙鏈RNA(dsRNA)；(d)小分子；(e)模擬物；(f)可溶性受體；和(g)引誘物。2.如權利要求l所述的方法，其特徵在於，與對照相比，所述AMIGO-2抑制劑將AMIGO-2表達抑制至少20%。3.如權利要求l所述的方法，其特徵在於，與對照相比，所述AMIGO-2抑制劑導致至少20%癌細胞死亡。4.如權利要求l所述的方法，其特徵在於，所述AMIGO-2抑制劑是單克隆抗體、多克隆抗體、嵌合抗體、人抗體、人源化抗體、單鏈抗體或Fab片段。5.如權利要求87所述的方法，其特徵在於，所述抗體或Fab片段結合AMIGO-2的ECD中一個或多個表位。6.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合基本上由SEQIDNO:2或SEQIDNO:3構成的序列中的一個或多個表位。7.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的LRRNT結構域中一個或多個表位。8.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的LRRl結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:30和SEQIDNO:57構成的組。9.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的LRR2結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:32、SEQIDNO:39和SEQIDNO:61構成的組。10.如權利要求l所述的方法，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的LRR3結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:29、SEQIDNO:39、SEQIDNO:40、SEQIDNO:56和SEQIDNO:58構成的組。11.如權利要求l所述的方法，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的LRR4結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:26、SEQIDNO:35禾口SEQIDNO:45構成的組。12.如權利要求l所述的方法，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的LRR5結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:25、SEQIDNO:27、SEQIDNO:36和SEQIDNO:53構成的組。13.如權利要求l所述的方法，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的LRR6結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:31、SEQIDNO:33、SEQIDNO:41、SEQIDNO:46、SEQIDNO:47和SEQIDNO:62構成的組。14.如權利要求l所述的方法，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的LRRCT結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:28、SEQIDNO:34、SEQIDNO:37、SEQIDNO:38、SEQIDNO:44、SEQIDNO:49、SEQIDNO:50、SEQIDNO:51、SEQIDNO:52、SEQIDNO:54、SEQIDNO:59、SEQIDNO:60和SEQIDNO:62構成的組。15.如權利要求l所述的方法，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的IgV-組結構域中一個或多個表位。16.如權利要求l所述的方法，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的Ig結構域中一個或多個表位。17.如權利要求l所述的方法，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的ECD中一個或多個表位。18.如權利要求l所述的方法，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合選自由SEQIDNO:3-6和25-62構成的組的一個或多個表位。19.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述患者具有或易患肺癌、膀胱癌、腎癌、結腸癌、乳腺癌、子宮癌、卵巢癌或胰腺癌。20.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述癌症是肺癌或結腸癌。21.如權利要求4所述的方法，其特徵在於，所述抗體或Fab片段抑制選自以下的AMIGO-2活性染色體穩定性、致瘤性、細胞增殖、細胞周期調節、癌細胞運動性、細胞黏著、腫瘤形成、轉移性、AMIGO-2信號傳導、癌細胞存活、細胞周期蛋白產生、激酶活性、底物磷酸化、不依賴於貼壁的生長、AMIGO-2蛋白定位於細胞膜、AMIGO-2與AMIGO-l或AMIGO-3中一種或兩種之間的相互作用、細胞質磷酸化AMIGO-2蛋白的水平、腫瘤和基質組織之間的相互作用和血管發生。22.如權利要求4所述的方法，其特徵在於，所述抗體作了標記。23.如權利要求22所述的方法，其特徵在於，所述標記是酶、放射性同位素、毒素或螢光團。24.如權利要求4所述的方法，其特徵在於，所述抗體對除AMIGO-2以外的多肽的結合親和力小於約lxl05Ka。25.如權利要求l所述的方法，其特徵在於，所述AMIGO-2抑制劑是包含第一核苷酸鏈和第二核苷酸鏈的dsRNA分子，所述第一核苷酸鏈包含SEQIDNO:17-24所示某序列的至少19個連續核苷酸，所述第二核苷酸鏈包含與所述第一鏈基本上互補的序列，其中所述dsRNA分子長度短於3769個核苷酸。26.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述AMIGO-2抑制劑是包含SEQIDNO:7-16所示某序列的至少10個連續核苷酸的分離核酸。27.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，還包括用化療、放療或外科手術中的一種或多種治療患者。28.如權利要求l所述的方法，其特徵在於，所述癌症症狀選自下組久咳、氣喘惡化、體重減輕、過度疲勞、疼痛、咳血、尿中帶血、食欲不振、大量出汗、發熱、高血壓、貧血、腹瀉、便秘、血便、黃疸、頭暈、虛弱、寒顫、肌肉痙攣、深靜脈血栓、腹脹、胃氣脹、月經不調、結腸轉移、肺轉移、膀胱轉移、腎轉移、乳腺轉移、子宮轉移、卵巢轉移和胰腺轉移。29.—種調節患者AMIGO-2活性的方法，該方法包括將足以調節AMIGO-2活性用量的AMIGO-2抑制劑給予該患者，所述AMIGO-2抑制劑選自下組(a)特異性結合選自下組的AMIGO-2結構域中的表位的抗體信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域和Ig結構域；(b)包含選自SEQIDNO:7-16所示某序列的至少IO個連續核苷酸的分離寡核苷酸；(c)分離的雙鏈RNA(dsRNA);(d)小分子；(e)模擬物；(f)可溶性受體；和(g)引誘物。30.如權利要求29所述的方法，其特徵在於，所述AMIGO-2活性選自下組染色體穩定性、致瘤性、細胞增殖、細胞周期調節、癌細胞運動性、細胞黏著、腫瘤形成、轉移性、AMIGO-2信號傳導、AMIGO-2下遊標記的調節、癌細胞存活、細胞周期蛋白產生、激酶活性、底物磷酸化、不依賴於貼壁的生長、AMIGO-2蛋白定位於細胞膜、AMIGO-2與AMIGO-l或AMIGO-3中一種或兩種之間的相互作用、細胞質磷酸化AMIGO-2蛋白的水平、腫瘤和基質組織之間的相互作用和血管發生。31.如權利要求29所述的方法，其特徵在於，所述AMIGO-2抑制劑是單克隆抗體、多克隆抗體、嵌合抗體、人抗體、人源化抗體、單鏈抗體或Fab片段。32.—種鑑定對AMIGO-2治療敏感的患者的方法，包括(a)檢測所述樣品中是否存在AMIGO-2表達的證據，其中所述樣品中存在AMIGO-2表達的證據表明患者是AMOGI-2治療的候選者，而所述樣品中不存在AMIGO-2表達的證據表明患者不是AMOGI-2治療的候選者；(b)如果患者是AMOGI-2治療的候選者，則將治療有效量選自下組的抑制劑給予該患者(1)結合選自下組的AMIGO-2結構域中的表位的抗體:信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域和Ig結構域；(2)包含選自SEQIDNO:7-16所示某序列的至少IO個連續核苷酸的分離寡核苷酸；(3)分離的雙鏈RNA(dsRNA);(4)小分子；(5)模擬物；(6)可溶性受體；和(7)引誘物；和(c)如果該患者不是AMOGI-2治療的候選者，則將傳統癌症治療劑給予該患者。33.如權利要求32所述的方法，其特徵在於，與對照相比，AMIGO-2表達至少增加20%。34.如權利要求32所述的方法，其特徵在於，通過檢測AMIGO-2RNA水平來檢測AMIGO-2表達的證據。35.如權利要求32所述的方法，其特徵在於，通過檢測AMIGO-2多肽水平來檢測AMIGO-2表達的證據。36.如權利要求32所述的方法，其特徵在於，所述患者具有或易患肺癌、膀胱癌、腎癌、結腸癌、乳腺癌、子宮癌、卵巢癌或胰腺癌中的一種或多種。37.—種抑制癌細胞生長的方法，包括使癌細胞與相比對照以至少20%抑制細胞生長用量的AMIGO-2抑制劑接觸，所述AMIGO-2抑制劑選自下組(a)結合選自下組的AMIGO-2結構域中的表位的抗體信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域和Ig結構域；(b)包含選自SEQIDNO:7-16所示某序列的至少10個連續核苷酸的分離寡核苷酸；(c)分離的雙鏈RNA(dsRNA);(d)小分子；(e)模擬物；(f)可溶性受體；和(g)引誘物。38.如權利要求37所述的方法，其特徵在於，所述癌細胞在癌症患者體內或衍生自癌症患者。39.如權利要求37所述的方法，其特徵在於，所述AMIGO-2抑制劑是單克隆抗體、多克隆抗體、嵌合抗體、人抗體、人源化抗體、單鏈抗體或Fab片段。40.—種抑制有此需要的患者中癌細胞表型的方法，所述方法包括將治療有效量的AMIGO-2抑制劑給予所述患者，所述AMIGO-2抑制劑選自下組(a)結合選自下組的AMIGO-2結構域中的表位的抗體信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域和Ig結構域；(b)包含選自SEQIDNO:7-16所示某序列的至少10個連續核苷酸的分離寡核苷酸；(c)分離的雙鏈RNA(dsRNA);(d)小分子；(e)模擬物；①可溶性受體；和(g)引誘物。41.如權利要求40所述的方法，其特徵在於，所述癌細胞表型是膠原中的細胞運動性、致瘤性、以不依賴於貼壁的方式生長的能力、細胞存活能力或細胞黏著能力中的一種或多種。42.如權利要求40所述的方法，其特徵在於，所述癌細胞選自肺癌、膀胱癌、腎癌、結腸癌、乳腺癌、子宮癌、卵巢癌或胰腺癌細胞。43.—種抑制癌細胞生長的方法,該方法包括將調節一種或多種AMIGO-2下遊標記的化合物給予具有包含一種或多種表達AMIGO-2的細胞的癌症的患44.如權利要求43所述的方法，其特徵在於，所述一種或多種AMIGO-2的下遊標記選自c-MYC、c-Jun、FosLl和胞外信號調節激酶(ERK)。45.如權利要求44所述的方法，其特徵在於，所述ERK是磷酸化ERK。46.—種檢測患者的腫瘤的方法，包括將包含連接於顯像劑的AMIGO-2抑制劑的組合物給予患者並檢測該顯像劑在患者中的定位，其中所述抑制劑選自(a)結合選自下組的AMIGO-2結構域中的表位的抗體信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域和Ig結構域；(b)包含選自SEQIDNO:7-16所示某序列的至少10個連續核苷酸的分離寡核苷酸；(c)分離的雙鏈RNA(dsRNA);(d)小分子；(e)模擬物；(f)可溶性受體；和(g)引誘物。47.如權利要求46所述的方法。其特徵在於，所述組合物包含偶聯於顯像劑的AMIGO-2抗體。48.如權利要求47所述的方法，其特徵在於所述顯像劑是18F、43K、52Fe、57Co、67Cu、67Ga、77Br、87MSr、86Y、90Y、"MTc、mIn、123I、125I、127Cs、129Cs、131I、132I、197Hg、2。3pb或2。6Bi。49.一種鑑定癌症抑制劑的方法，其中所述癌症的特徵在於AMIGO-2相比於對照過度表達，所述方法包括使表達AMIGO-2的細胞與候選化合物接觸並測定AMIGO-2活性是否得到調節，其中所述AMIGO-2活性得到調節是癌症抑制劑的標誌。50.如權利要求49所述的方法，其特徵在於，所述候選化合物調節癌細胞中而不是非癌細胞中的AMIGO-2活性。51.—種鑑定癌症抑制劑的方法，其中所述癌症的特徵在於AMIGO-2相比於對照過度表達，所述方法包括使表達AMIGO-2的細胞與候選化合物和AMIGO-2配體接觸並測定AMIGO-2下遊標記物的活性是否得到調節，其中所述下遊標記物得到調節是癌症抑制劑的標誌。52.如權利要求51所述的方法，其特徵在於，所述下遊標記物選自細胞周期蛋白D1、細胞周期蛋白B1、c-Myc、c-Jun、FosLl、胞外信號調節激酶(ERK)、血管內皮生長因子(VEGF)、尿激酶和聚ADP核糖聚合酶1(PARP1)。53.如權利要求51所述的方法，其特徵在於，所述下遊標記物的活性是ERK磷酸化降低或ERK表達降低。54.如權利要求51所述的方法，其特徵在於，所述下遊標記物的活性是PARP1切割增加。55.如權利要求51所述的方法，其特徵在於，所述候選化合物和AMIGO-2配體誘導調節癌細胞而不是非癌細胞中AMIGO-2的下遊標記物。56.—種將細胞毒性劑或診斷劑遞送至一種或多種表達AMIGO-2的細胞的方法，所述方法包括(a)提供與純化抗體偶聯的細胞毒劑或診斷劑，所述抗體特異性結合AMIGO-2多肽的表位，其中所述表位位於選自下組的結構域中信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域和Ig結構域；和(b)使該細胞與該抗體-試劑或片段-試劑偶聯物接觸。57.—種治療癌症患者的方法，包括將患者癌症樣品的AMIGO-2表達與對照樣品的AMIGO-2表達進行比較，和(1)如果與對照樣品相比，該癌症樣品的AMIGO-2表達上調則用包含選自下組的抑制劑的組合物治療該患者(a)結合選自下組的AMIGO-2結構域中的表位的抗體:信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域和Ig結構域；(b)包含選自SEQIDNO:7-16所示某序列的至少10個連續核苷酸的分離寡核苷酸；(c)分離的雙鏈RNA(dsRNA);(d)小分子；(e)模擬物；(f)可溶性受體；和(g)引誘物；和(2)如果與對照樣品相比，該癌症樣品中AMIGO-2表達未變或下調則進行二級試驗。58.如權利要求57所述的方法，其特徵在於，所述二級試驗包括比較有和沒有抑制劑存在下，癌症樣品中AMIGO-2下遊標記物的水平或活性，其中(1)如果與沒有AMIGO-2抑制劑存在下癌症樣品中的AMIGO-2下遊標記物的水平或活性相比，有AMIGO-2抑制劑存在下癌症樣品中的AMIGO-2下遊標記物的水平或活性降低，則用包含選自下組的抑制劑的組合物治療該患者(a)結合選自下組的AMIGO-2結構域中的表位的抗體:信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域和Ig結構域；(b)包含選自SEQIDNO:7-16所示某序列的至少IO個連續核苷酸的分離寡核苷酸；(c)分離的雙鏈RNA(dsRNA);(d)小分子；(e)模擬物；①可溶性受體；和(g)引誘物；或(2)如果與沒有AMIGO-2抑制劑存在下癌症樣品中的AMIGO-2下遊標記物的水平或活性相比，有AMIGO-2抑制劑存在下癌症樣品中的AMIGO-2下遊標記物的水平或活性不變或降低，則用常規癌症治療劑治療該患者。59.如權利要求57所述的方法，其特徵在於，所述AMIGO-2下遊標記物選自細胞周期蛋白Dl、細胞周期蛋白Bl、c-Myc、c-Jun、FosLl、VEGF、尿激酶和ERK。60.如權利要求57所述的方法，其特徵在於，所述下遊標記物的活性是ERK磷酸化或ERK表達。61.如權利要求57所述的方法，其特徵在於，所述下遊AMIGO-2標記物的活性降低。62.如權利要求57所述的方法，其特徵在於，所述二級試驗包括比較有和沒有抑制劑存在下，癌症樣品中的PARP1切割，其中(a)如果與沒有AMIG0-2抑制劑存在下癌症樣品中的PARP1切割相比，有AMIGO-2抑制劑存在下癌症樣品中的PARP1切割增加，則用包含選自下組的抑制劑的組合物治療該患者(1)結合選自下組的AMIGO-2結構域中的表位的抗體:信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域和Ig結構域；(2)包含選自SEQIDNO:7-16所示某序列的至少10個連續核苷酸的分離寡核苷酸；(3)分離的雙鏈RNA(dsRNA);(4)小分子；(5)模擬物；(6)可溶性受體；和(7)引誘物；或(b)如果與沒有AMIGO-2抑制劑存在下癌症樣品中的PARP1切割相比，有AMIGO-2抑制劑存在下癌症樣品中的PARP1切割增加或不變，則用常規癌症治療劑治療該患者。63.—種診斷患者中癌症的方法，包括檢驗候選癌細胞中的AMIGO-2定位，其中當定位於細胞膜的AMIGO-2與定位於不包括細胞膜的癌細胞其它區域的AMIGO-2之比至少為2:1時，該患者診斷為具有AMIGO-2相關癌症。64.如權利要求63所述的方法，其特徵在於，定位於細胞膜的AMIGO-2與定位於不包括細胞膜的癌細胞其它區域的AMIGO-2之比至少為3:1。65.如權利要求63所述的方法，其特徵在於，還包括當患者診斷為具有AMIGO-2相關癌症時，將含有選自下組的抑制劑的組合物給予該患者(a)結合選自下組的AMIGO-2結構域中的表位的抗體信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域和Ig結構域；(b)包含選自SEQIDNO:7-16所示某序列的至少IO個連續核苷酸的分離寡核苷酸；(c)分離的雙鏈RNA(dsRNA);(d)小分子；(e)模擬物；(f)可溶性受體；和(g)引誘物。66.—種鑑定AMIGO-2調節劑的方法，包括比較有和沒有候選化合物存在下，包含表達AMIGO-2的一種或多種細胞的樣品中AMIGO-2的磷酸化，其中與沒有候選化合物存在下樣品中AMIGO-2的磷酸化相比，有候選化合物存在下樣品中AMIGO-2的磷酸化得到調節表明該候選化合物是AMIGO-2調節劑。67.如權利要求66所述的方法，其特徵在於，利用免疫沉澱抗體從樣品中分離AMIGO-2。68.如權利要求67所述的方法，其特徵在於，所述免疫沉澱抗體是特異性結合AMIGO-2多肽表位的抗體，其中所述表位位於選自下組的結構域中信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域和Ig結構域。69.如權利要求66所述的方法，其特徵在於，所述AMIGO-2磷酸化是絲氨酸/蘇氨酸磷酸化。70.如權利要求66所述的方法，其特徵在於，利用磷酸絲氨酸/蘇氨酸抗體測定所述AMIGO-2磷酸化。71.如權利要求67所述的方法，其特徵在於，所述免疫沉澱抗體是磷酸絲氨酸/蘇氨酸抗體。72.—種包含AMIGO-2抑制劑的一種或多種藥學上可接受的載體的組合物，其中所述AMIGO-2抑制劑選自下組(a)結合選自下組的AMIGO-2結構域中的表位的抗體信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域和Ig結構域；(b)包含選自SEQIDNO:7-16所示某序列的至少IO個連續核苷酸的分離寡核苷酸；(c)分離的雙鏈RNA(dsRNA);(d)小分子；(e)模擬物；(f)可溶性受體；和(g)引誘物。73.如權利要求72所述的組合物，其特徵在於，所述組合物抑制至少一種選自以下的AMIGO-2活性染色體穩定性、致瘤性、細胞增殖、細胞周期調節、癌細胞運動性、細胞黏著、腫瘤形成、轉移性、AMIGO-2信號傳導、癌細胞存活、細胞周期蛋白產生、激酶活性、底物磷酸化、不依賴於貼壁的生長、AMIGO-2蛋白定位於細胞膜、AMIGO-2與AMIGO-l或AMIGO-3中一種或兩種之間的相互作用、細胞質磷酸化AMIGO-2蛋白的水平、腫瘤和基質組織之間的相互作用和血管發生。74.如權利要求72所述的組合物，其特徵在於，所述組合物在癌細胞而不在非癌細胞中誘導至少一種細胞表型。75.如權利要求72所述的組合物，其特徵在於，所述組合物抑制癌細胞存活，抑制AMIGO-2的細胞質磷酸化，抑制血管發生或細胞增殖、絲氨酸/蘇氨酸激酶活性，抑制Erk磷酸化，抑制cJun、cMyc或FosLl表達，或抑制分裂細胞進展至細胞周期的G2/M期。76.如權利要求72所述的組合物，其特徵在於，所述組合物是無菌可注射劑。77.如權利要求72所述的組合物，其特徵在於，所述AMIGO-2抑制劑抑制AMIGO-2翻譯或誘導AMIGO-2mRNA降解。78.如權利要求72所述的組合物，其特徵在於，所述AMIGO-2抑制劑是單克隆抗體、多克隆抗體、嵌合抗體、人抗體、人源化抗體、單鏈抗體或Fab片段。79.如權利要求78所述的組合物，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的LRRNT結構域中一個或多個表位。80.如權利要求78所述的組合物，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的LRR1結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:30和SEQIDNO:57構成的組。81.如權利要求78所述的組合物，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的LRR2結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:32、SEQIDNO:39和SEQIDNO:61構成的組。82.如權利要求78所述的組合物，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的LRR3結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:29、SEQIDNO:39、SEQIDNO:40、SEQIDNO:56和SEQIDNO:58構成的組。83.如權利要求78所述的組合物，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的LRR4結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:26、SEQIDNO:35和SEQIDNO:45構成的組。84.如權利要求78所述的組合物，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的LRR5結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:25、SEQIDNO:27、SEQIDNO:36和SEQIDNO:53構成的組。85.如權利要求78所述的組合物，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的LRR6結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:31、SEQIDNO:33、SEQIDNO:41、SEQIDNO:46、SEQIDNO:47和SEQIDNO:62構成的組。86.如權利要求78所述的組合物，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的LRRCT結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:28、SEQIDNO:34、SEQIDNO:37、SEQIDNO:38、SEQIDNO:44、SEQIDNO:49、SEQIDNO:50、SEQIDNO:51、SEQIDNO:52、SEQIDNO:54、SEQIDNO:59、SEQIDNO:60和SEQIDNO:62構成的組。87.如權利要求78所述的組合物，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的IgV-組結構域中一個或多個表位。88.如權利要求78所述的組合物，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的Ig結構域中一個或多個表位。89.如權利要求78所述的組合物，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合AMIGO-2的胞外域(ECD)中一個或多個表位。90.如權利要求78所述的組合物，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合基本上由選自SEQIDNO:3-6和25-62的序列構成的序列中的一個或多個表位。91.如權利要求78所述的組合物，其特徵在於，所述抗體或Fab片段特異性結合基本上由SEQIDNO:2或SEQIDNO:3構成的序列中的一個或多個表位。92.如權利要求78所述的組合物，其特徵在於，所述抗體或Fab片段結合AMIGO-2的親和力至少為lxl08Ka。93.如權利要求72所述的組合物，其特徵在於，所述AMGO-2活性選自染色體穩定性、致瘤性、細胞增殖、細胞周期調節、癌細胞運動性、細胞黏著、腫瘤形成、轉移性、AMIGO-2信號傳導、癌細胞存活、細胞周期蛋白產生、激酶活性、底物磷酸化、不依賴於貼壁的生長、AMIGO-2蛋白定位於細胞膜、AMIGO-2與AMIGO-l或AMIGO-3中一種或兩種之間的相互作用、細胞質磷酸化AMIGO-2蛋白的水平、腫瘤和基質組織之間的相互作用和血管發生。94.如權利要求72所述的組合物，其特徵在於，所述抗體或Fab片段抑制癌細胞存活、AMIGO-2的細胞質磷酸化或ERK磷酸化。95.如權利要求72所述的組合物，其特徵在於，所述組合物抑制cJun、cMyc或FosLl表達。96.如權利要求72所述的組合物，其特徵在於，所述組合物抑制分裂細胞進展至細胞周期的G2/M期。97.如權利要求72所述的組合物，其特徵在於，所述AMIGO-2抑制劑是包含第一核苷酸鏈和第二核苷酸鏈的dsRNA分子，所述第一核苷酸鏈包含SEQIDNO:17-24所示某序列的至少19個連續核苷酸，所述第二核苷酸鏈包含與所述第一鏈基本上互補的序列，其中所述dsRNA分子長度短於3769個核苷酸。98.如權利要求97所述的組合物，其特徵在於，與對照相比，所述dsRNA將AMIGO-2翻譯抑制至少20%。99.一種特異性結合AMIGO-2多肽的表位的純化抗體，其特徵在於，所述表位位於選自下組的結構域中信號肽、LRRNT結構域、LRR1結構域、LRR2結構域、LRR3結構域、LRR4結構域、LRR5結構域、LRR6結構域、LRRCT結構域、IgV-組結構域和Ig結構域。100.如權利要求99所述的純化抗體，其特徵在於，所述抗體特異性結合AMIGO-2的LRR1結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:30和SEQIDNO:57構成的組。101.如權利要求99所述的純化抗體，其特徵在於，所述抗體特異性結合AMIGO-2的LRR2結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:32、SEQIDNO:39和SEQIDNO:61構成的組。102.如權利要求99所述的純化抗體，其特徵在於，所述抗體特異性結合AMIGO-2的LRR3結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:29、SEQIDNO:39、SEQIDNO:40、SEQIDNO:56和SEQIDNO:58構成的組。103.如權利要求99所述的純化抗體，其特徵在於，所述抗體特異性結合AMIGO-2的LRR4結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:26、SEQIDNO:35和SEQIDNO:45構成的組。104.如權利要求99所述的純化抗體，其特徵在於，所述抗體特異性結合AMIGO-2的LRR5結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:25、SEQIDNO:27、SEQIDNO:36和SEQIDNO:53構成的組。105.如權利要求99所述的純化抗體，其特徵在於，所述抗體特異性結合AMIGO-2的LRR6結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:31、SEQIDNO:33、SEQIDNO:41、SEQIDN0:46、SEQIDNO:47和SEQIDNO:62構成的組。106.如權利要求99所述的組合物，其特徵在於，所述抗體特異性結合AMIGO-2的LRRCT結構域中一個或多個表位，所述表位選自SEQIDNO:28、SEQIDNO:34、SEQIDNO:37、SEQIDNO:38、SEQIDNO:44、SEQIDNO:49、SEQIDNO:50、SEQIDNO:51、SEQIDNO:52、SEQIDNO:54、SEQIDNO:59、SEQIDNO:60和SEQIDNO:62構成的組。107.如權利要求99所述的純化抗體，其特徵在於，所述抗體特異性結合選自SEQIDNO:25-62的一個或多個表位。108.如權利要求119所述的純化抗體，其特徵在於，所述抗體特異性結合基本上由SEQIDNO:2或SEQIDNO:3構成的序列中的一個或多個表位。109.如權利要求99所述的純化抗體，其特徵在於，所述抗體抑制選自下組的AMIGO-2活性染色體穩定性、致瘤性、細胞增殖、細胞周期調節、癌細胞運動性、細胞黏著、腫瘤形成、轉移性、AMIGO-2信號傳導、癌細胞存活、細胞周期蛋白產生、激酶活性、底物磷酸化、不依賴於貼壁的生長、AMIGO-2蛋白定位於細胞膜、AMIGO-2與AMIGO-l或AMIGO-3中一種或兩種之間的相互作用、細胞質磷酸化AMIGO-2蛋白的水平、腫瘤和基質組織之間的相互作用和血管發生。110.—種特異性結合AMGO-2多肽的一個或多個表位的純化抗體，其中所述表位包含選自SEQIDNO:3-6和25-62構成的組的序列。111.一種產生權利要求99所述抗體的分離細胞。112.—種產生權利要求99所述抗體的雜交瘤。113.—種產生權利要求99所述抗體的非人轉基因動物。114.一種SEQIDNO:2所示多肽的攜帶表位的分離片段，所述片段包含選自SEQIDNO:3-6和25-62構成的組的一個或多個表位。115.如權利要求114所述攜帶表位的片段，其特徵在於，所述片段包含SEQIDNO:2的約6-20個毗連胺基酸。116.如權利要求114所述攜帶表位的片段，其特徵在於，所述片段包含SEQIDNO:2的至少21個毗連胺基酸和SEQIDNO:2的少於522個毗連胺基酸。117.—種編碼如權利要求114所述攜帶表位的分離片段的多核苷酸。118.—種純化的AMIGO-2抗體，其通過用權利要求114所述攜帶表位的片段免疫對象獲得。119.一種分離的dsRNA分子，其包含第一核苷酸鏈和第二核苷酸鏈，所述第一核苷酸鏈包含SEQIDNO:17-24所示某序列的至少19個連續核苷酸，所述第二核苷酸鏈包含與所述第一鏈基本上互補的序列，其中所述dsRNA分子長度短於3769個核苷酸。120.如權利要求119所述的分離的dsRNA分子，其特徵在於，所述第二核苷酸鏈包含與所述第一核苷酸鏈完全互補的序列，其中所述dsRNA分子長度短於3769個核苷酸。121.—種包含SEQIDNO:7-16所示某序列的至少IO個連續核苷酸的分離核酸。全文摘要本發明提供治療癌症的方法，治療癌症的組合物及診斷和/或檢測癌症的方法和組合物，等等。具體地說，本發明提供治療、診斷和檢測AMIGO-2過度表達相關癌症的組合物和方法。文檔編號C07K14/435GK101583621SQ200780027447公開日2009年11月18日申請日期2007年7月19日優先權日2006年7月20日發明者A·法尼迪,G·餘,M·J·加納塔普,V·佔申請人:諾華有限公司