一種具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的中藥複方及其應用的製作方法

2023-06-13 22:38:26 1

專利名稱：一種具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的中藥複方及其應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種藥物，具體涉及一種具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的中藥復 方及其應用。
背景技術：
糖尿病是一種全球性的常見病和多發病，已成為繼腫瘤和心血管疾病之後的第三 大疾病。糖尿病合併瘀熱病症是糖尿病主要的並發病症，臨床上常見的有糖尿病性心臟病， 糖尿病性心臟病包括糖尿病特異性心肌病變，與糖尿病有關的心臟微血管病變、大血管病 變、心臟植物神經病變等，同時常伴有非特異性的冠狀動脈粥樣硬化性心臟病和(或)高血 壓心臟病，在患有糖尿病的基礎上，可以統稱為糖尿病性心臟病。糖尿病性心臟病與非糖尿 病人發生的冠狀動脈粥樣硬化性心臟病和心肌病相比，有病情重、矛盾多、治療難度大、預 後差及病死率高的特點。WHO報告，冠心病在糖尿病患者中佔26% 35%，老齡和女性患病 率最高。糖尿病合併高脂血症也是最常見合併疾病之一，目前已明確糖尿病的脂代謝紊亂 是其冠心病、高血壓、心肌梗死、腦卒中等心腦血管併發症發病率的主要危險因素，國內外 每年因糖尿病及糖尿病併發症死亡的人數逐漸攀升，嚴重影響到人們的生活質量。目前治 療糖尿病及其併發症的藥物較多，臨床上使用的西藥，雖具有一定的療效，但多數存在較大 的不良反應，如出現停藥後反彈，患者肝腎損害、橫紋肌融解症等副作用，治標不治本，而中 醫藥在治療糖尿病方面具有其獨特的優勢，具有療效持久，無明顯毒副作用的優點，但目前 針對糖尿病的中藥多偏於單方、驗方，缺乏系統完善的臨床藥效研究，且中藥組方依據各有 不同，治則不統一，且目前針對糖尿病合併瘀熱病症的藥物未見報導，故立足中醫中藥，根 據糖尿病及其瘀熱併發症的發病機制，積極尋找和努力探索治療糖尿病及其瘀熱併發症的 高效無毒的藥物具有重要的意義。

發明內容
發明目的本發明的目的是解決現有技術的不足，提供一種配比科學合理，療效確 切，臨床使用安全，不良反應低的中藥複方。本發明另一個目的是提供該中藥複方在製備治 療糖尿病及其瘀熱併發症藥物中的應用。技術方案為了實現以上目的，本發明採取的技術方案為一種具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的中藥複方，它由下列重量份數的原料組 成生地5 30份、丹參5 30份、丹皮5 15份、黃連2 10份、赤芍5 15份、鬼箭 羽5 30份。作為優選方案，以上所述的具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的中藥複方，它由 下列重量份數的原料組成生地10 30份、丹參10 30份、丹皮5 15份、黃連2 8 份、赤芍5 15份、鬼箭羽10 30份。作為更優的方案，以上所述的具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的中藥複方，它由下列重量份數的原料組成生地10 20份、丹參10 20份、丹皮5 10份、黃連5 8份、赤芍5 10份、鬼箭羽10 20份。作為另一方案，本發明提供的一種具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的中藥復 方，它由下列重量份數的原料組成生地15份、丹參15份、丹皮10份、黃連6份、赤芍10份、 鬼箭羽15份。 作為其它優選方案，以上所述的具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的中藥複方， 也可以在原有配比的基礎上添加具有清熱生津、消腫排膿之功的5 15份的天花粉。本發明提供的中藥組方，根據中醫藥理論和糖尿病及糖尿病瘀熱併發症的發病機 制，以「瘀熱致消」的理論為指導，確立「清熱通絡，涼血化瘀」為治療方法，組方由生地、丹 皮、黃連、丹參、鬼箭羽、赤芍或加味天花粉組成，組方重於清熱通絡，涼血化瘀，藥精而力 專，一藥多效，配伍嚴謹，切合病機，既治療已病，又可未病先防，是防治糖尿病及其糖尿病 瘀熱併發症，如糖尿病合併心臟病，糖尿病合併高脂血症的有效複方。方中生地，性味甘， 寒，歸心、肝、腎經，具有清熱生津，涼血，止血功效，為本方君藥，主清熱生津；丹參，味苦，性 微寒，入心、肝經，具有活血祛瘀，涼血消癰、止痛、養血安神等多種功能，為本方君藥；丹皮， 性味苦辛，寒，歸心、肝、腎經，具有清熱涼血，活血行瘀功效，為本方臣藥；黃連，味苦、性寒， 入心、肝、胃、大腸經，具有清熱燥溼，瀉火解毒的功效，為本方臣藥。赤芍性味苦、微寒，歸 肝經，具有清熱涼血、散瘀止痛之功能；鬼箭羽不但能夠刺激胰島素分泌，還能增加外周組 織對葡萄糖的利用，能夠提高胰島素與受體的親和力，降低血脂，改善血液流變學。天花粉， 性味苦、微甘寒，具清熱生津、消腫排膿之功；以上各位藥配比組成清化瘀熱方，全方清熱通 絡，涼血化瘀，具有養陰、清熱、通絡、化瘀之效，對糖尿病及糖尿病瘀熱併發症具有很好的 療效。本發明提供的具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的中藥複方，可以將各原料藥的 提取物和藥學上可接受的載體製備成口服液、顆粒劑、膠囊劑、片劑、粉針劑或注射劑劑型 藥物。本發明提供的中藥複方的提取物製成膠囊劑時把各原料的提取物和載體玉米澱 粉混合均勻，整粒，然後裝膠囊製成膠囊劑。將本發明提供的中藥複方的各原料的提取物製成口服液時，將各原料的提取物加 蒸餾水溶解，過濾，調節PH值，製成口服液。將本發明提供的中藥複方的各原料的提取物製成片劑時，把各原料和玉米澱粉， 需要時加入潤滑劑硬脂酸鎂，混合均勻，整粒，然後壓片製成片劑。本發明提供的中藥複方的各原料的提取物製成顆粒劑時，把各原料的提取物和稀 釋劑玉米澱粉混合均勻，整粒，乾燥，製成顆粒劑。本發明提供的中藥複方的各原料的提取物製成粉針劑時，把各原料的提取物冷凍 乾燥，殺菌，製成粉針劑。本發明提供的中藥複方的各原料的提取物製成注射液時，取各原料的提取物加入 生理鹽水溶解然後加入活性碳，攪拌均勻，80°C加熱30分鐘，過濾，調節pH值，用垂熔玻璃 漏鬥或其它濾器過濾至澄明，灌裝，在100至115°C滅菌30分鐘製成注射液。本發明提供的中藥複方製劑的製備方法包括以下步驟(1)按重量份數取生地5 30份、丹參5 30份、丹皮5 15份、黃連2 10份、赤芍5 15份、鬼箭羽5 30份，用5 10倍量的水煎煮1 3次，合併煎煮液，過濾，濃 縮，得濃縮液；(2)取步驟(1)得到的濃縮液與藥學上可接受的載體製備成口服液、顆粒劑、膠囊 齊IJ、片劑、粉針劑或注射液劑型的藥物。本發明提供的的具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的中藥複方在製備防治糖尿 病藥物中的應用。作為優選方案，本發明提供的中藥複方在製備防治糖尿病合併瘀熱病症藥物中的 應用。作為優選方案，本發明提供的中藥複方在製備防治糖尿病合併心臟病藥物中的應用。作為另一優選方案，本發明提供的中藥複方在製備防治糖尿病合併高脂血症藥物 中的應用。有益效果本發明提供的中藥複方和現有技術相比具有以下優點1、本發明根據中醫藥理論，採用清熱通絡，涼血化瘀的辨證論治的理論進行中藥 組方配比得到清化瘀熱方，各位中藥複方配比科學合理，本發明提供的中藥複方具有多環 節、多靶點的綜合作用，可以很好清除瘀熱，具有治療瘀熱導致的一系列併發症。實驗結果 表明，本發明提供的中藥複方可糾正糖代謝紊亂，降低血糖，改善胰島B細胞功能，改善胰 島素抵抗；且實驗結果表明本發明提供的中藥複方能夠改善心肌病變，對心肌具有很好的 保護作用；並且本發明提供的中藥複方能有效降低血清總膽固醇、甘油三酯，具有很好抗脂 質過氧化作用。2、本發明提供的中藥複方的提取物可以方便和藥學載體製備成多種劑型，臨床上 服用方便，且實驗結果表明本發明提供的中藥複方，療效可靠，使用安全，長期服用無毒副 作用。
具體實施例方式下面結合具體實施例進一步闡明本發明，應理解這些實施例僅用於說明本發明而 不用於限制本發明的範圍，在閱讀了本發明之後，本領域技術人員對本發明的各種等價形 式的修改均落於本申請所附權利要求所限定的範圍。實施例11、中藥複方的原料藥組成生地15克、丹參15克、丹皮10克、黃連6克、赤芍10克、鬼箭羽15克。2、中藥複方組合物製劑製備方法，包括以下步驟(1)取炙生地15克、丹參15克、丹皮10克、黃連6克、赤芍10克、鬼箭羽15克，用 8倍量的水煎煮2次，第一次1.5小時，第二次1小時，合併煎煮液，過濾，濃縮，得濃縮液，備 用；(2)取步驟⑴得到的濃縮液加水，過濾，調節pH值，製成口服液。(批號001)，本發明提供的中藥複方重在清熱通絡，涼血化瘀，因此得到清化瘀熱複方口服液。實施例21、中藥複方的原料藥組成
生地20克、丹參20克、丹皮10克、黃連8克、赤芍10克、鬼箭羽20克。2、中藥複方組合物製劑製備方法，包括以下步驟 (1)取生地20克、丹參20克、丹皮10克、黃連8克、赤芍10克、鬼箭羽20克，用6 倍量的水煎煮2次，每次1. 5小時，合併煎煮液，過濾，濃縮，得濃縮液，備用；(2)取步驟(1)得到的濃縮液加入玉米澱粉混合均勻，整粒，乾燥，製成清化瘀熱 複方顆粒劑。(批號002)實施例31、中藥複方的原料藥組成生地10克、丹參10克、丹皮5克、黃連3克、赤芍5克、鬼箭羽10克。2、中藥複方組合物製劑製備方法，包括以下步驟(1)取生地10克、丹參10克、丹皮5克、黃連3克、赤芍5克、鬼箭羽10克用8倍 量的水煎煮2次，每次1. 5小時，合併煎煮液，過濾，濃縮，得濃縮液，備用；(2)取步驟(1)得到的濃縮液，冷凍乾燥，殺菌，製成清化瘀熱複方粉針劑。(批號 003)實施例41、中藥複方的原料藥組成生地30克、丹參30克、丹皮15克、黃連10克、赤芍15克、鬼箭羽30克。2、中藥複方組合物製劑製備方法，包括以下步驟(1)取生地30克、丹參30克、丹皮15克、黃連10克、赤芍15克、鬼箭羽30克，用 10倍量的水煎煮2次，每次2小時，合併煎煮液，過濾，濃縮，得濃縮液，備用；(2)取步驟(1)得到的濃縮液和玉米澱粉混合均勻，加入潤滑劑硬脂酸鎂，混合均 勻，整粒，然後壓片製成清化瘀熱複方片劑。(批號004)實施例51、中藥複方的原料藥組成生地20克、丹參20克、丹皮12克、黃連6克、赤芍10克、鬼箭羽15克，天花粉10克。2、中藥複方組合物製劑製備方法，包括以下步驟(1)取生地20克、丹參20克、丹皮12克、黃連6克、赤芍10克、鬼箭羽15克，天花 粉10克，用8倍量的水煎煮2次，每次2小時，合併煎煮液，過濾，濃縮，得濃縮液，備用；(2)取步驟(1)得到的濃縮液和玉米澱粉混合均勻，整粒，然後裝膠囊製成膠囊 齊 。(批號005)實施例6藥理實驗研究1.實驗材料1.1主要試劑與藥物本發明提供的中藥複方浸膏粉，每g浸膏相當於2. 74g生藥，人日用量為97g(生 藥)/60kg體重，批號001。二甲雙胍(格華止，中美上海施貴寶製藥有限公司，0. 85克/ 片，批號0803076)。鏈脲佐菌素美國sigma公司產品(s_0130)，購自上海美濟生物技術有 限公司。枸櫞酸三鈉(Na3C6H5O7. H2O)、枸櫞酸(C6H807. H20)、40%甲醛、25%戊二醛、多聚甲 醛、NaH2PO4 · 2H20、Na2HPO4 · 12H20、NaCl、戊巴比妥鈉。二甲苯、10%福馬林、PBS、乙醇、H2O2、甲醇、復染染液蘇木素或甲基綠等。1. 2實驗動物 清潔級Sprague-Dawley (SD)雄性SPF級大鼠120隻，由南京中醫藥大學實驗動物 中心提供。8周齡，體重180-220克，許可證號scxk20030001。1. 3高糖高脂飼料配方2%膽固醇、4%蔗糖、4%蛋黃粉、10%豬油、80%普通飼料(南京青龍山動物養殖 場提供)。1. 4主要儀器和器材快速血糖儀及同批號血糖試紙強生(中國)醫療器材有限公司，01ympUS-BH2(日 本Olympus公司)光學顯微鏡，透射電子顯微鏡，全自動生化分析儀，(SYSMEX，日本)，全自 動免疫濁度分析儀(美國Beckman Coulter公司)、-20°C冰箱，_70°C冰箱，臺式離心機，液 氮罐，精密電子天平等。2.實驗方法2. 1 2型糖尿病大鼠模型製作實驗前適應性普通飼料飼養一周後隨機分組。除正常對照組大鼠外其他各組大鼠 均餵以高糖高脂飼料，正常對照組大鼠餵以普通飼料。高糖高脂飼料2周餵養後，禁食、水 12h，造模組給予一次性腹腔注射2%鏈脲佐菌素(STZ)溶液30mg/Kg，繼續高糖高脂飼料餵 養1周後測隨機血糖> 16. 7mmol/L判斷為糖尿病成模；正常對照組腹腔注射同劑量檸檬 酸_檸檬酸鈉緩衝液，繼續餵以普通飼料。2. 2動物分組與給藥(1)正常組給予等量蒸餾水；(2)模型組給予等量蒸餾水；(3)中藥複方高劑量組給予中藥複方19. 4g生藥/kg體重；(4)中藥複方中劑量組給予中藥複方9. 7g生藥/kg體重；(5)中藥複方低劑量組給予中藥複方4. 85g生藥/kg體重；(6)陽性對照組給予二甲雙胍0. 14g/kg體重。各組均灌胃給藥，給藥體積為10ml/kg體重，每日1次，固定時間給藥，連續給4周。2. 3血液標本收集所有大鼠給藥前、給藥2周時及給藥4周後清晨空腹留取靜脈血。前兩次採用大鼠眼內毗靜脈取血方式取血，大鼠一次可採血1ml，注入無菌 1.5mlEP管內，迅速高速離心，取上清即刻凍於-20°C冰箱。最後一次取血正血糖高胰島 素鉗夾實驗結束時，摘眼球取血。其中2ml放於不抗凝管中，3000r/min離心lOmin，取血 清，-20°C保存待生化等指標(血糖、血脂等)。2. 3心臟標本收集收集血標本後，所有大鼠行心臟標本留取。打開胸腔，用預冷O.Olmol/1 PBS液心 髒灌流後迅速取出心臟，冰鹽水或預冷的PBS緩衝液中反覆衝洗，剪除包膜、血管及心房組 織，電子天平檢測計算心臟重量與體重比值(HW/BW)。取部分左心室組織置於4%多聚甲 醛-0. lmol/L磷酸緩衝液固定，用於光鏡檢查。取少量心臟組織，置於2. 5%戊二醛液(pH值7. 4)中待透射電鏡檢測。2. 4生化及免疫等指標檢測血糖、血脂用全自動生化分析儀檢測。所有測定嚴格按照試劑盒說明書操作。2. 5心肌組織結構普通光學顯微鏡下觀察組織取材後甲醛固定，經過固定、脫水、透明、浸蠟、石蠟包埋等程序，製成4 μ m厚 切片，每隻大鼠心臟製作10張切片，取1張製作常規HE染色切片，其餘備用。觀察心肌細 胞形態並拍片。2. 5. 1組織脫水、包埋及切片心臟組織用標明實驗組別的拭鏡紙包好後放入乙醇中脫水，每次取出標本時，應 將液體控幹後再放入下一瓶液體中；心臟組織置於80%乙醇IOmin ；95%乙醇10minX3 次；無水乙醇15min X 3次；二甲苯IOmin X 2次。石蠟包埋56-58 °C浸蠟2次，20min和 60min各一次。切片切片厚度3 μ m,置烤箱中，65°C烤片2_3小時，常規HE染色，光鏡觀
察，攝片。2. 5. 2 蘇木素-伊紅(hematoylineosine. HE)染色將組織切片經Harris蘇木素浸染Imin至6min左右，水洗2min，1 %的鹽酸乙醇分 化5-30s，水洗，伊紅染2min，流水快速衝洗、脫水、透明、封片固定。2. 6透射電子顯微鏡下心肌超微結構分析在電子顯微鏡下觀察超薄切片(X5000倍)心肌組織，每張電鏡切片隨機選擇8 個包含心肌組織的視野，觀察心肌組織的變化情況，並攝像。2. 7統計學處理採用SPSS for Windowsl 1. 5統計學軟體包，全部計量資料數據以均值士標準 差(？土S)表示，兩組間及前後比較用t檢驗，多組間比較用方差分析(Oneway-ANOVA)。P
0. 05。具體實驗結果如表1和表2所示。表1治療前各組體重及空腹血糖均衡性檢驗(〒士S) 表2治療前各組血脂譜均衡性檢驗(x±s) 3. 2中藥複方對糖尿病大鼠體重、空腹血糖影響。實驗結果表明，在治療2周後中藥複方高劑量組、中藥複方中劑量組大鼠體重下 降明顯，與治療前比有顯著差異P < 0. 05，與糖尿病模型組體重比有顯著差異，(P < 0. 05)； 治療4周後中藥複方高劑量組大鼠體重進一步下降(ρ < 0. 05)；治療4周後中藥複方各 組、二甲雙胍組心臟重量與體重比值(HW/BW)低於糖尿病模型組(ρ<0.05)；並在治療2周 及4周後中藥複方各劑量組、二甲雙胍組空腹血糖與糖尿病模型組比較均有顯著性差異(ρ < 0. 05)，實驗結果表明本發明提供的中藥複方能顯著降低糖尿病模型大鼠的血糖，與治療 前比較也均有顯著性差異(P < 0. 05)。具體實驗結果如表3和表4所示。表3中藥複方對糖尿病大鼠體重、HW/BW的影響(〒士s) 注與糖尿病模型組比較，ρ < 0. 05 ；Δ與治療前比較，ρ <0. 05。表4中藥複方對糖尿病大鼠空腹血糖影響(I 士s) 注與糖尿病模型組比較，ρ < 0. 05 ；Δ與治療前比較，ρ <0. 05。3. 3中藥複方對糖尿病大鼠葡萄糖利用率(GIR)變化的影響。實驗結果表明，本發明提供的中藥複方在治療後2周及4周後，中藥複方高劑量 組、中藥複方中劑量組、中藥複方低劑量組及二甲雙胍組胰島素抵抗指數均下降，與治療前 比較差異有顯著性(P < 0. 05)，與糖尿病模型組比有顯著性差異(P < 0. 05)；治療4周後 中藥複方高劑量組、中藥複方中劑量組、中藥複方低劑量組及二甲雙胍組葡萄糖利用率與 糖尿病模型組比，有顯著性差異(P <0.05)，說明中藥複方能夠改善胰島素抵抗，增加糖尿 病大鼠葡萄糖利用率。具體實驗結果如表5所示。表5中藥複方對糖尿病大鼠胰島素抵抗指數、葡萄糖利用率(GIR)的影響(〒士s) 注與正常對照組比較，ρ <0.05 與糖尿病組比較，ρ <0.05 ；Δ與治療前比 較，ρ < 0. 053. 4中藥複方對糖尿病大鼠血脂變化影響。實驗結果表明，在治療2周、4周後中藥複方各組、二甲雙胍組的總膽固醇下降與 治療前比，均有顯著性差異(P <0.05)，與糖尿病模型組比也有顯著性差異(ρ <0.05)；治 療2周、4周後中藥複方各組及二甲雙胍組大鼠甘油三酯均顯著下降，與糖尿病模型組比有 顯著性差異(P <0.05)；治療4周後中藥複方各組及二甲雙胍組LDL-C均下降，與糖尿病 組比有顯著性差異(P < 0. 05)，且在治療4周後，中藥複方各劑量組大鼠的高密度脂蛋白 (HDL-C)具有增加趨勢，說明本發明提供的中藥複方具有明顯的降低糖尿病模型大鼠總膽 固醇和甘油三酯的含量，具有很好的降低糖尿病模型大鼠血脂的作用，具體實驗結果如表6 和表7所示。表6中藥複方對糖尿病大鼠血脂影響。(I 士 s) 注與糖尿病模型組比較，ρ < 0. 05 ；Δ與治療前比較，ρ <0. 05。表7中藥複方對糖尿病大鼠血脂影響(7士s) 注與糖尿病組比較，ρ < 0. 05 ；Δ與治療前比較，ρ <0. 05。3. 5中藥複方對糖尿病心肌病大鼠心肌病理組織學的影響光鏡下HE染色可見正常對照組大鼠心肌細胞排列整齊緻密，結構清晰，細胞間質 較少，可見少量成纖維細胞。糖尿病模型組大鼠心肌細胞排列紊亂、心肌細胞肥大、扭曲，細 胞間隙增大，間質及血管周圍細胞外基質積聚和膠原成分增多、間質纖維化明顯；中藥複方 各治療組光鏡下HE染色結果表明心肌纖維排列稍紊亂，心肌細胞正常，間質無明顯淋巴細 胞浸潤。3. 6中藥複方對糖尿病大鼠心肌超微結構的影響電鏡可見正常對照組大鼠心肌細胞排列整齊，密集，細胞連接清晰，細胞核呈卵圓 形，胞漿內可見大量的結構正常的線粒體和糖原，糖尿病模型大鼠心肌細胞線粒體腫脹、擴 張，肌絲溶解、斷裂，閏盤間歇顯著擴大，核腫脹、染色質邊集，中藥複方各治療組的大鼠心 肌細胞排列整齊，密集，細胞連接清晰，明顯較糖尿病模型組及二甲雙胍組好轉。說明本發 明提供的中藥複方能夠明顯減輕心肌病變，對糖尿病大鼠心肌具有保護作用。實施例7中藥複方對2型糖尿病大鼠心肌細胞凋亡的影響1實驗材料1.1主要試劑與藥物中藥複方浸膏粉，每g浸膏相當於2.74g生藥，人日用量為97g (生藥)/60kg體重， 由實施例3製備得到的批號003。二甲雙胍(格華止，中美上海施貴寶製藥有限公司，0. 85克/片，批號0803076)鏈脲佐菌素(str印tozotocin，STZ)美國sigma公司產品(s-0130)，購自上海美 濟生物技術有限公司。TUNEL細胞凋亡原位檢測試劑盒(石蠟切片)二甲苯、10 %福馬林、PBS、乙醇、H202、甲醇、復染染液蘇木素或甲基綠等、蓋玻 片、載玻片、染色缸等。
1.2實驗動物清潔級Sprague-Dawley (SD)雄性SPF級大鼠120隻，由南京中醫藥大學實驗動物 中心提供。8周齡，體重180-220克，許可證號SCxk20030001。實驗地點為南京中醫藥大學 動物實驗中心(D8)，室溫18 28°C，相對溼度50%，分籠飼養，普通飼料，5隻/籠。1.3主要儀器和器材
01ympus-BH2 (日本Olympus公司)光學顯微鏡。快速血糖儀及同批號血糖試紙強生(中國)醫療器材有限公司。全自動生化分析儀，SYSMEX，日本。全自動免疫濁度分析儀，美國Beckman Coulter 公司。-20°C冰箱、-70°C冰箱、臺式離心機、液氮罐、精密電子天平、電子秤、手提式高壓蒸氣 消毒器等。2實驗方法2. 1高脂飼料配方2%膽固醇、4%蔗糖、4%蛋黃粉、10%豬油、80%普通飼料(南京青龍山動物養殖 場提供)。2. 2 2型糖尿病大鼠模型製作實驗前適應性普通飼料飼養一周後隨機分組。除正常對照組大鼠外其他各組大鼠 均餵以高糖高脂飼料，正常對照組大鼠餵以普通飼料。高糖高脂飼料2周餵養後，禁食、水 12h，造模組給予一次性腹腔注射2%鏈脲佐菌素(STZ)溶液30mg/Kg，繼續高糖高脂飼料餵 養1周後測隨機血糖> 16. 7mmol/L判斷為糖尿病成模；正常對照組腹腔注射同劑量檸檬 酸_檸檬酸鈉緩衝液，繼續餵以普通飼料。2. 3動物分組與給藥(1)正常組給予等量蒸餾水；(2)模型組給予等量蒸餾水；(3)中藥複方高劑量組給予中藥複方19. 4g生藥/kg體重；(4)中藥複方中劑量組給予中藥複方9. 7g生藥/kg體重；(5)中藥複方低劑量組給予中藥複方4. 85g生藥/kg體重；(6)陽性對照組給予二甲雙胍0. 14g/kg體重。各組均灌胃給藥，給藥體積為10ml/kg體重，每日1次，固定時間給藥，連續給4周。2. 4原位末端酶標記法(TUNEL)技術測定心肌細胞情況按試劑盒說明書進行操作；計算凋亡指數。心肌細胞核(圓形或橢圓形位於心肌 細胞中央)，每個標本隨機選取10個高倍視野(X400倍)，分別計數凋亡細胞核(黃色) 和正常細胞核(藍色)，以凋亡細胞核與正常細胞核的比值平均值作為凋亡指數。結果判斷心肌細胞核(圓形或橢圓形位於心肌細胞中央)，每個標本隨機選取10 個高倍視野(X400)，分別計數凋亡細胞核(黃色)和正常細胞核(藍色)，以凋亡細胞核 與正常細胞核的比值平均值作為凋亡指數。2. 6統計方法採用SPSS for Windowsl 1. 5統計學軟體包，全部計量資料數據以均值士標準差 表示，二組間及前後比較用t檢驗，多組間比較用方差分析。P <0.05為差異有統計學意義。3實驗結果心肌細胞凋亡觀察結果糖尿病模型組陽性染色細胞數最多，正常對照組陽性染 色細 胞數目最少，兩組比較有統計學意義(P <0.01)，二甲雙胍組、中藥複方高劑量組與中 藥複方中劑量組陽性染色細胞數較糖尿病組明顯減少，有統計學意義(P < 0. 05)，且實驗 結果表明中藥複方高劑量組比陽性對照藥二甲雙胍具有更好的保護心肌作用，具體實驗結 果如表8所示。表8中藥複方對對糖尿病心肌病大鼠心肌細胞凋亡指數的影響(又士S) 注與正常對照組比較，ρ < 0. 05 ；#與糖尿病心肌病模型組比較，ρ < 0. 05。本發明根據中醫藥理論，採用「瘀熱致消」的辨證論治的理論進行配比組方得到清 化瘀熱複方，通過以上實驗結果表明，本發明提供的中藥複方具有多環節、多靶點的綜合作 用，能夠有效清除瘀熱，具有治療瘀熱導致的一系列糖尿病併發症的作用，以上實驗結果表 明，本發明提供的中藥複方，能夠糾正糖尿病患者的糖代謝紊亂，具有降低血糖和血脂，改 善胰島素抵抗，增加胰島素敏感性，且能夠顯著減輕糖尿病心肌病大鼠心臟重量與體重比 值、明顯減輕心肌病理組織學異常和心肌超微結構異常，能夠顯著改善2型糖尿病模型大 鼠的心肌病變，對心肌具有保護作用。本發明提供的中藥複方能夠用於防治糖尿病及其糖尿病瘀熱併發症，如糖尿病合 並心臟病，糖尿病合併高脂血症。且臨床實驗結果表明本發明提供的中藥複方長期使用無 不良反應，因此有望開發成為新一代防治糖尿病及其糖尿病瘀熱併發症的藥物。以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對於本技術領域的普通技術人 員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應 視為本發明的保護範圍。
權利要求
一種具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的中藥複方，其特徵在於，它由下列重量份數的原料組成生地5～30份、丹參5～30份、丹皮5～15份、黃連2～10份、赤芍5～15份、鬼箭羽5～30份。
2.根據權利要求1所述的具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的中藥複方，其特徵在 於，它由下列重量份數的原料組成生地10 30份、丹參10 30份、丹皮5 15份、黃連 2 8份、赤芍5 15份、鬼箭羽10 30份。
3.根據權利要求2所述的具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的中藥複方，其特徵在 於，它由下列重量份數的原料組成生地10 20份、丹參10 20份、丹皮5 10份、黃連 5 8份、赤芍5 10份、鬼箭羽10 20份。
4.根據權利要求3所述的具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的中藥複方，其特徵在 於，它由下列重量份數的原料組成生地15份、丹參15份、丹皮10份、黃連6份、赤芍10份、 鬼箭羽15份。
5.權利要求1至4任一項所述的具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的中藥複方，其特 徵在於，將各原料提取物和藥學上可接受的載體製備成口服液、顆粒劑、膠囊劑、片劑、粉針 劑或注射液劑型的藥物。
6.權利要求1至4任一項所述的具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的中藥複方在製備 防治糖尿病藥物中的應用。
7.權利要求1至4任一項所述的具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的中藥複方在製備 防治糖尿病合併瘀熱病症藥物中的應用。
8.權利要求1至4任一項所述的具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的中藥複方在製備 防治糖尿病合併心臟病藥物中的應用。
9.權利要求1至4任一項所述的具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的中藥複方在製備 防治糖尿病合併高脂血症藥物中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種具有治療糖尿病合併瘀熱病症作用的清化瘀熱中藥複方及其應用。該中藥複方由下列重量份數的原料組成生地5～30份、丹參5～30份、丹皮5～15份、黃連2～10份、赤芍5～15份、鬼箭羽5～30份。本發明提供的中藥複方，根據中醫藥理論，採用辨證論治的理論進行中藥配比組方，實驗結果表明，本發明提供的中藥複方具有多環節、多靶點的綜合作用，可糾正糖代謝紊亂，降低血糖，改善胰島B細胞功能和改善胰島素抵抗功能；且實驗結果表明本發明提供的中藥複方能夠改善心肌病變，對心肌具有很好的保護作用；並且具有降低血清總膽固醇、甘油三酯和抗脂質過氧化作用。因此，本發明提供的中藥複方有望開發成為新一代防治糖尿病及其糖尿病瘀熱併發症的藥物。
文檔編號A61P9/00GK101843763SQ20101019297
公開日2010年9月29日 申請日期2010年6月7日 優先權日2010年6月7日
發明者周仲瑛, 周學平, 洪兵, 王旭, 顧震宇 申請人:南京中醫藥大學