具有提升的水溶解度的含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物及其製備方法，以...的製作方法

2023-06-18 05:17:41

專利名稱：具有提升的水溶解度的含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物及其製備方法，以 ...的製作方法
技術領域：
本發明涉及具有提升的水溶解度的含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物。更詳細地，涉及通過將水溶解度低的雷帕黴素增容成高分子納米粒子而提升水溶解度的含雷帕黴素的注射劑型組合物及其製備方法，以及用於與放射線療法聯用的抗癌組合物。
背景技術：
雷帕黴素(分子式=C51H79NO13,分子量914. 2)也被稱為西羅莫司(siroIimus),其作為大環內酯類化合物，由於具有免疫抑制活性，從而被商品化為器官移植患者的移植排斥抑制劑(雷帕黴素(R apamune))。此外，雷帕黴素除了可以抑制器官移植的排斥，還可用於治療肺炎(pulmonary inflammation)、全身性紅斑狼瘡(systemic lupuserythematosis)、牛皮癖等免疫炎症皮膚疾病(immunoinf lamma tory skin disorders)、免疫炎症腸道疾病(immunoinflammatory bowe I disorders)、眼部炎症(ocularinflammation)、再狹窄(restenosis)、風溼性關節炎(rheumatoid arthritis)等。最近，有關於雷帕黴素不僅具有免疫抑制劑的功能，還具有作為哺乳動物雷帕黴素革巴蛋白(mTOR :mammalian target of rapamycin)的抑制劑，誘導細胞死亡(apoptosis),破壞癌細胞的抗癌劑功能的報導。但是，由於雷帕黴素對於水的溶解度非常低(iiyg/mL)，因此存在經口給藥時，吸收率非常低，個體間的生物利用度的變化非常嚴重的缺點。已被介紹的含雷帕黴素的劑型有雷帕黴素片劑。上述片劑含有蔗糖、乳糖、聚乙二醇8000、硫酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮(Povidone)、泊洛沙姆188、單油酸甘油酯等賦形劑。此外，雷帕黴素經口溶液劑中含有Phosal 50PG (卵磷脂、丙二醇、單甘油酯、雙甘油酯、乙醇、大豆脂肪酸、抗壞血酸棕櫚酸酯)與聚山梨醇酯80，含有I. 5^2. 5%的乙醇。但是，上述雷帕黴素經口溶液劑對人進行經口給藥時，生物利用度(absolutebioavailability)約為14%左右，將雷帕黴素片劑經口給藥時與將雷帕黴素溶液劑經口給藥時相比，顯示出相對要高約25%的生物利用度。但是，兩種製劑的生物利用度均在20%以下，其原因在於雷帕黴素對水的低溶解度。因此，利用多種增容技術，進行了各種製劑化雷帕黴素的嘗試。美國第5，559，121號專利中公開了一種膠囊製劑組合物，該膠囊製劑包含一種溶液，該溶液為，在含表面活性劑聚山梨醇酯80、N，N- 二甲基乙醯胺，以及卵磷脂或磷脂中的一種的混合溶液中溶有雷帕黴素的溶液。美國第5，616，588號專利中公開了一種注射用水溶液組合物,該組合物為,雷帕黴素以0. f4mg/mL的濃度溶解在丙二醇水溶液中，並且不含有非離子性表面活性劑。但是，現有的雷帕黴素注射用水溶液的情況下，因水溶液的穩定性降低，存在需要在很快的時間內進行給藥的缺點。目前沒有以商業化進行銷售的注射劑型。另一方面，韓國第0160957號專利公開了一種用於抑制器官或組織移植排斥的組合物，該組合物含有雷帕黴素，雷帕黴素的含量為對抑制哺乳類的器官或組織的移植排斥有效的量。但是，該專利中公開了將雷帕黴素與橄欖油等油，乙醇、丙二醇及聚乙二醇、聚氧乙烯蓖麻油、聚山梨醇酯80等表面活性劑一起使用的情況。另一方面，美國第6，322, 805號與6，616, 941號專利中公開了一種利用兩親性嵌段共聚物的高分子膠束，該兩親性嵌段共聚物是採用作為能夠使難容性藥物增溶的技術，將作為親水性嵌段的聚乙二醇(A)與作為疏水性嵌段的聚乳酸(B)結合為A-B型的雙嵌段。但是，沒有公開利用上述高分子膠束對雷帕黴素進行增溶的具體實例。

發明內容
要解決的技術問題本發明用於解決如上所述的現有技術中存在的問題，以提供一種不含有有機溶 齊U、活體適合性優異，並且僅使用生物可降解的高分子而能夠進行靜脈注射、皮下/肌肉注射的含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物，以及其製備方法和用於與放射性療法聯用的抗癌組合物作為技術問題。技術方案為了解決上述技術問題，本發明提供一種含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物。其特徵為，所述含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物包含i)由親水性嵌段(A)與疏水性嵌段(B)構成的A-B型雙嵌段共聚物；ii )末端至少含有一個羧基的聚乳酸或其衍生物的鹼金屬鹽；以及iii)作為活性成分的雷帕黴素；在此，所述A-B型雙嵌段共聚物與聚乳酸或其衍生物的鹼金屬鹽所形成的膠束的內部包封有雷帕黴素。另一方面，本發明提供一種含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物的製備方法，所述含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物的製備方法包括下列步驟(a)將(i)由親水性嵌段(A)與疏水性嵌段(B)構成的A-B型雙嵌段共聚物、(ii)末端至少含有一個羧基的聚乳酸或其衍生物的鹼金屬鹽、以及(iii)作為活性成分的雷帕黴素在有機溶劑中進行增容；(b)從上述步驟(a)的產物中去除有機溶劑；以及(C)在上述步驟(b)的產物中加入水性介質。再一方面，本發明提供一種用於與放射性療法聯用的抗癌組合物，所述用於與放射性療法聯用的抗癌組合物包含(i)由親水性嵌段(A)與疏水性嵌段(B)構成的A-B型雙嵌段共聚物；(ii)末端至少含有一個羧基的聚乳酸或其衍生物的鹼金屬鹽；以及(iii)作為活性成分的雷帕黴素。在此，所述A-B型雙嵌段共聚物與聚乳酸或其衍生物的鹼金屬鹽所形成的納米粒子的內部包封有雷帕黴素。發明效果上述注射劑型組合物可提供乾燥後在水溶液中重構時，雷帕黴素的溶解度為0. lmg/mL以上的注射液。根據本發明，雷帕黴素的溶解度可以為0. lmg/mL以上，不含有有機溶劑，活體適合性優異，並且僅使用生物可降解的高分子，從而能夠獲得能夠進行靜脈注射、皮下/肌肉注射的雷帕黴素注射劑組合物，並且將本發明的組合物與放射線療法聯用，可期待顯著提高抗癌功效的效果。本發明的含雷帕黴素注射劑型組合物可以根據協同作用來使放射線照射效果最大化，從而能夠減少放射線治療時引起的毒性。此外，雷帕黴素作為不僅對放射線有增敏作用，而且具有免疫抑制作用等有力的藥理活性的藥物，是具有嚴重副作用的藥物之一，此夕卜，由於不溶於水，需要使用增溶劑進行製劑化。目前，用於注射劑的增溶劑為表面活性劑，大部分具有過敏反應等毒性，但本發明的含雷帕黴素注射劑型組合物不僅不會引起增溶劑的毒性，而且使雷帕黴素的用量最小化，從而減少副作用，同時能夠最大程度地發揮放射線的增敏作用。


圖I為根據製備例I的D，L-PLA-COONa的NMR光譜。 圖2為根據製備例2的mPEG-PLA的NMR光譜。圖3為表示實驗例I獲得的含雷帕黴素的高分子納米粒子的體內動態評價的圖表。
圖4為表示實驗例2獲得的含雷帕黴素的高分子納米粒子組合物的放射線增敏作用實驗結果的圖表。圖5為表示實驗例3獲得的含雷帕黴素的高分子納米粒子在試管內的抗癌活性實驗的結果的圖表。圖6為表示實驗例4獲得的含雷帕黴素的高分子納米粒子的體內動態實驗結果的圖表。圖7為表示實驗例5獲得的含雷帕黴素的高分子納米粒子在動物模型中的抗癌功效實驗結果的圖表。圖8為表示實驗例6獲得的含雷帕黴素的高分子納米粒子在動物模型中的放射線增敏作用實驗結果的圖表。
具體實施例方式下面，對本發明進行更詳細的說明。本發明中的術語「雷帕黴素」包括雷帕黴素、其衍生物或類似物，以及它們在製藥上允許的鹽。雷帕黴素的衍生物或類似物具體包括苯甲醯雷帕黴素、依維莫司、替西羅莫司、吡美莫司、白歐利莫斯(bi olimus)等，但不限於這些。此外，術語「納米粒子」為粒徑在納米級的粒子的總稱的概念，包括膠束、混合膠束、納米囊或納米球等，其大小不局限於這些，例如可以具有f500nm的粒徑。本發明的所述兩親性雙嵌段共聚物(i)為由親水性嵌段(A)與疏水性嵌段(B)構成的A-B型雙嵌段共聚物，所述親水性嵌段(A)為聚乙二醇，所述疏水性嵌段(B)為聚乳酸或其衍生物。所述親水性嵌段(A)的聚乙二醇可以是聚乙二醇、甲氧基聚乙二醇等，但不限於這些。具體為甲氧基聚乙二醇。所述親水性嵌段(A)的數均分子量優選為50(T20000道爾頓，更優選為100(Tl0000道爾頓，最優選為100(T5000道爾頓。親水性嵌段(A)的數均分子量不足500道爾頓時，則親水性部分與疏水性部分相比要小，從而有可能使本發明的組合物不溶於水，如果超過20000道爾頓時，則親水性部分太大，從而難以形成膠束。此外，以雙嵌段共聚物整體100重量％為基準，所述雙嵌段共聚物內的親水性嵌段(A)的含量優選為4(T70重量％，更優選為5(T65重量％，這樣有利於能夠穩定維持兩親性雙嵌段共聚物的膠束。上述疏水性嵌段(B)的聚乳酸或其衍生物例如可以為選自聚乳酸、聚丙交酯、聚乙交酯、聚扁桃酸、聚己內酯、聚二氧六環-2-酮、聚胺基酸、聚原酸酯、聚酸酐及它們的共聚物中的一種以上。更具體地，可以是聚乳酸、聚丙交酯、聚乙交酯、聚扁桃酸、聚己內酯或聚二氧六環-2-酮。根據本發明的一個具體例，所述疏水性嵌段(B )的聚乳酸或其衍生物可以為選自聚乳酸、聚丙交酯、聚己內酯、乳酸與扁桃酸的共聚物、乳酸與乙醇酸的共聚物、乳酸與己內酯的共聚物及乳酸與1，4_ 二氧六環-2酮的共聚物中的一種以上。所述疏水性嵌段(B)的數均分子量優選為50(Tl0000道爾頓，更優選為50(T5000道爾頓。疏水性嵌段(B)的數均分子量不足500道爾頓時，則親水性部分大，有可能存在不形成膠束的問題，如果超過10000道爾頓時，則疏水性部分變大，有可能存在組合物不在水中增溶的問題。此外，以雙嵌段共聚物整體100重量％為基準，所述兩親性雙嵌段共聚物內的疏水性嵌段(B)的含 量優選為3(T60重量％，更優選為35 50重量％，這樣有利於能夠穩定維持兩親性雙嵌段共 聚物的膠束。
本發明的末端至少含有一個羧基的聚乳酸或其衍生物的鹼金屬鹽具有使含有藥物的膠束內芯的內部變硬，從而提高藥物的包封率的作用。所述末端至少含有一個羧基的聚乳酸或其衍生物可以使用選自聚乳酸、聚丙交酯、聚乙交酯、聚扁桃酸、聚己內酯、聚酸酐及它們的共聚物中的一種以上。更具體地，所述聚乳酸或其衍生物為聚丙交酯、聚乙交酯、聚己內酯或它們的共聚物。根據本發明的一個優選具體例，所述聚乳酸或其衍生物可以為選自聚乳酸、乳酸與扁桃酸的共聚物、乳酸與乙醇酸的共聚物，以及乳酸與己內酯的共聚物中的一種以上。本發明的聚乳酸或其衍生物的鹼金屬鹽是指如上所述的聚乳酸或其衍生物的末端羧酸陰離子與鹼金屬離子通過離子結合而結合的形態。所述鹼金屬優選為選自鈉、鉀及鋰中的一種以上的I價金屬，更優選為鈉。此外，對於所述聚乳酸或其衍生物的鹼金屬鹽，與鹼金屬離子進行離子結合的羧基相反側末端可以取代為選自羥基、乙醯氧基、苯甲醯氧基、癸醯氧基、棕櫚醯氧基以及烷氧基中的一種以上。具體地，本發明的末端至少含有一個羧基的聚乳酸鹼金屬鹽可由下述化學式I表示化學式I
權利要求
1.一種含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物，其特徵在於，所述含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物包含 i)由親水性嵌段(A)與疏水性嵌段(B)構成的A-B型雙嵌段共聚物； ii)末端至少含有一個羧基的聚乳酸或其衍生物的鹼金屬鹽；以及 iii)作為活性成分的雷帕黴素； 在此，所述A-B型雙嵌段共聚物與聚乳酸或其衍生物的鹼金屬鹽所形成的膠束的內部包封有雷帕黴素。
2.根據權利要求I所述的含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物，其特徵在 於，所述雙嵌段共聚物的親水性嵌段(A)的數均分子量為50(T20000道爾頓、所述疏水性嵌段(B)的數均分子量為50(Tl0000道爾頓，以雙嵌段共聚物整體100重量％為基準，雙嵌段共聚物內的親水性嵌段(A)的含量為4(T70重量％。
3.根據權利要求I所述的含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物，其特徵在於，所述親水性嵌段(A)為聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇，所述疏水性嵌段(B)選自聚乳酸、聚丙交酯、聚乙交酯、聚扁桃酸、聚己內酯、聚二氧六環-2-酮、聚胺基酸、聚原酸酯、聚酸酐及它們的共聚物中的一種以上。
4.根據權利要求I所述的含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物，其特徵在於，末端至少含有一個羧基的聚乳酸或其衍生物選自聚乳酸、聚丙交酯、聚乙交酯、聚扁桃酸、聚己內酯、聚酸酐及它們的共聚物中的一種以上，其數均分子量為50(T2500道爾頓。
5.根據權利要求I所述的含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物，其特徵在於，所述鹼金屬選自鈉、鉀及鋰中的一種以上的I價金屬。
6.根據權利要求I所述的雷帕黴素高分子納米粒子注射劑型組合物，其特徵在於，還包含2價或3價的金屬離子。
7.根據權利要求6所述的含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物，其特徵在於，所述2價或3價的金屬離子選自鈣、鎂、鋇、鉻、鐵、錳、鎳、銅、鋅及鋁的金屬的2價或3價陽離子。
8.根據權利要求I所述的含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物，其特徵在於，A-B型雙嵌段共聚物與末端至少含有一個羧基的聚乳酸或其衍生物的鹼金屬鹽的重量比為9:1 3:7。
9.根據權利要求I所述的含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物，其特徵在於，雷帕黴素的濃度重構為0. f25mg/mL。
10.一種含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物的製備方法，所述含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物的製備方法包括下列步驟 a)將i)由親水性嵌段(A)與疏水性嵌段(B)構成的A-B型雙嵌段共聚物、ii)末端至少含有一個羧基的聚乳酸或其衍生物的鹼金屬鹽，以及iii)作為活性成分的雷帕黴素在有機溶劑中進行增容； b)從上述步驟a)的產物中去除有機溶劑；以及 c)在上述步驟b)的產物中加入水性介質。
11.根據權利要求10所述的含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物的製備方法，其特徵在於，在所述步驟c)之後，還包括在其產物中添加2價或3價金屬離子的步驟(C-1)。
12.一種用於與放射性療法聯用的抗癌組合物，所述用於與放射性療法聯用的抗癌組合物包含 i)由親水性嵌段(A)與疏水性嵌段(B)構成的A-B型雙嵌段共聚物； ii)末端至少含有一個羧基的聚乳酸或其衍生物的鹼金屬鹽；以及 iii)作為活性成分的雷帕黴素； 在此，所述A-B型雙嵌段共聚物與聚乳酸或其衍生物的鹼金屬鹽所形成的納米粒子的內部包封有雷帕黴素。
13.根據權利要求12所述的用於與放射性療法聯用的抗癌組合物，其特徵在於，還包含2價或3價的金屬離子。
14.根據權利要求12所述的用於與放射性療法聯用的抗癌組合物，其特徵在於，在放射性照射前I分鐘 7天前給藥。
15.根據權利要求12所述的用於與放射性療法聯用的抗癌組合物，其特徵在於，其用於經過4 12周的期間、每周並行實施f 5次化學療法與放射線療法的聯用療法。
16.—種哺乳動物癌細胞的放射線治療方法，其特徵在於，對哺乳動物的癌細胞進行放射線照射時，在照射前或照射後，給藥權利要求I至權利要求9中任意一項的含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物，從而增進對哺乳動物癌細胞的放射線治療的敏感性。
全文摘要
本發明涉及具有提升的水溶解度的含雷帕黴素的高分子納米粒子注射劑型組合物。更詳細地，涉及通過將水溶解度低的雷帕黴素增容成高分子納米粒子而提升水溶解度的含雷帕黴素的注射劑型組合物及其製備方法，以及用於與放射線療法聯用的抗癌組合物。
文檔編號A61P35/00GK102740834SQ201080060367
公開日2012年10月17日 申請日期2010年12月29日 優先權日2009年12月30日
發明者姜惠媛, 崔恩卿, 徐敏孝, 李思元, 禹漢娜, 鄭盛允, 金峰五 申請人:株式會社三養生物製藥