(3r,4r)-n-(4-氯苯基)-1-(2,2-二氟乙基)-n』-[2-氟-4-(2-氧代-1(2h)-吡啶基)苯基...的製作方法

2023-06-17 21:01:46 5

專利名稱：(3r,4r)-n-(4-氯苯基)-1-(2,2-二氟乙基)-n』-[2-氟-4-(2-氧代-1(2h)-吡啶基)苯基 ...的製作方法
專利說明(3R，4R)-N-(4-氯苯基)-1-(2，2-二氟乙基)-N′-[2-氟-4-(2-氧代-1(2H)-吡啶基)苯基]-3，4-吡咯烷二甲醯胺的製備方法 本發明涉及製備式(X)的吡咯烷-3，4-二甲醯胺衍生物、即(3R，4R)-1-(2，2-二氟乙基)-吡咯烷-3，4-二甲酸3-[(5-氯-吡啶-2-基)-醯胺]4-{[2-氟-4-(2-氧代-2H-吡啶-1-基)-苯基]-醯胺}的方法
此外，本發明還涉及可用於那些方法的中間體。
式(X)化合物在WO2005/092881中有公開，是一種活性化合物，它可抑制凝血因子Xa。其結果是該化合物可影響血液凝固，因此可抑制凝血酶的形成，可以用於治療和/或預防血栓形成性紊亂，例如除了其它之外有動脈和靜脈血栓形成、深部靜脈血栓形成、周圍動脈閉塞性疾病(PAOD)、不穩定型心絞痛、心肌梗塞、冠狀動脈疾病、肺栓塞、由心房纖維性顫動引起的中風(腦血栓形成)、炎症和動脈硬化。該化合物在治療與血栓溶解療法有關的急性血管閉合、再狹窄、例如在腔內冠狀血管成形術(PTCA)或者冠狀或外周動脈旁路移植術後的上述疾病中具有潛在益處，以及在維持長期血液透析患者的血管通路開放中具有潛在益處。式(X)化合物可以形成與具有不同作用方式的抗凝血劑或與血小板聚集抑制劑或與血栓溶解劑的組合治療的一部分。而且，式(X)化合物還對腫瘤細胞具有作用和可阻止轉移。因此該化合物還可以用作抗腫瘤劑。
WO2005/092881公開了製備式(X)化合物的方法。但是，WO2005/092881(在實施例中)中描述的方法所產生的製備式(X)化合物的總產率低。此外，一些問題對於該方法的放大規模是不適宜的，例如對於[3+2]環化加成反應將低聚甲醛/N-Bn-甘氨酸混合物多次以固態加入到富馬酸二乙酯的熱溶液中，使用自燃性(pyrophoric)三甲基鋁進行的Weinreb醯胺化步驟的產率低且可變，使用大大過量的烷基化劑(三氟甲磺酸二氟乙基酯)，最後步驟的產率一般，以及K2CO3和DMSO的組合在高溫下潛在地不安全(對於N-芳基化步驟而言)。
因此，本發明提供了製備式(X)化合物的改進方法。
除非另有說明，以下定義被提出以說明和定義用於描述本文中的發明的不同術語的含義和範圍。
術語「滷素」指氟、氯、溴和碘，優選氟、氯和溴。
單獨或與其它基團組合的術語「C1-5烷基」指具有1至5個碳原子的支鏈或直鏈單價烷基。該術語通過諸如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基的基團做了進一步示例。單獨或與其它基團組合的術語「C1-3烷基」指具有1至3個碳原子的支鏈或直鏈單價烷基。
術語「環烷基」指具有3至10個碳原子、優選3至6個碳原子的單價碳環基團，例如環丙基、環丁基、環戊基或環己基。
術語「烷氧基」指其中R』是烷基的基團R』-O-。術語「低級烷氧基」指其中R』是低級烷基的基團R』-O-。
術語「烷硫基」指其中R』是烷基的基團R』-S-。術語「低級烷硫基」指其中R』是低級烷基的基團R』-S-。
術語「氟代-低級烷氧基」指其中R」是氟代-低級烷基的基團R」-O-。氟代-低級烷氧基的實例有例如CFH2-O、CF2H-O、CF3-O、CF3CH2-O、CF3(CH2)2-O、(CF3)2CH-O和CF2H-CF2-O。
單獨或與其它基團組合的術語「鏈烯基」表示包含烯鍵和2至20個、優選2至16個碳原子、更優選2至10個碳原子的直鏈或支鏈烴殘基。如還在下文描述的低級鏈烯基是優選的鏈烯基。術語「低級鏈烯基」指包含烯鍵和2至7個、優選2至4個碳原子的直鏈或支鏈烴殘基，例如2-丙烯基。
單獨或與其它基團組合的術語「炔基」表示包含三鍵和最多20個、優選最多16個碳原子的直鏈或支鏈烴殘基。術語「低級炔基」指包含三鍵和2至7個、優選2至4個碳原子的直鏈或支鏈烴殘基，例如2-丙炔基。低級炔基可以例如被羥基取代。
術語「亞烷基」指具有1至20個碳原子、優選1至16個碳原子、更優選最多10個碳原子的直鏈或支鏈二價飽和脂肪族烴基團。如還在下文描述的低級亞烷基是優選的亞烷基。術語「低級亞烷基」指具有1至7個、優選1至6個或3至6個碳原子的直鏈或支鏈二價飽和脂肪族烴基團。優選直鏈亞烷基或低級亞烷基。
術語「芳基」涉及苯基或萘基、優選苯基，其可以任選被1至5個、優選1至3個獨立地選自如下的取代基所取代低級鏈烯基、低級炔基、二氧代-低級亞烷基(例如形成benzodioxyl(苯並二氧雜環己烯基))、滷素、羥基、CN、CF3、NH2、N(H，低級烷基)、N(低級烷基)2、氨基羰基、羧基、NO2、低級烷氧基、低級烷硫基、低級烷基磺醯基、氨基磺醯基、低級烷基羰基、低級烷基羰基氧基、低級烷氧基羰基、低級烷基-羰基-NH、氟代-低級烷基、氟代-低級烷氧基、低級烷氧基-羰基-低級烷氧基、羧基-低級烷氧基、氨甲醯基-低級烷氧基、羥基-低級烷氧基、NH2-低級烷氧基、N(H，低級烷基)-低級烷氧基、N(低級烷基)2-低級烷氧基、苄氧基-低級烷氧基，和低級烷基，可以任選被滷素、羥基、NH2、N(H，低級烷基)或N(低級烷基)2所取代。優選的取代基有滷素、低級烷氧基、氟代-低級烷氧基、低級烷硫基和氨基。
如本文所用的術語「雜環基」表示包含1、2或3個選自氮、氧和硫的雜原子的具有4或6個環成員的非芳香族單環雜環。適宜的雜環的實例有吡咯烷基、氧代吡咯烷基、異噁唑烷基、異噁唑啉基、吡咯啉基、咪唑烷基、咪唑啉基、吡唑烷基、吡唑啉基、哌啶基、2-氧代-哌啶基、3-氧代-嗎啉基、2-氧代-哌嗪基、2-氧代-噁唑烷基、2-氧代-氮雜環丁基、哌嗪基、嗎啉基、吡喃基、四氫吡喃基、4，5-二氫-噁唑基、4，5-二氫-噻唑基。優選的雜環有嗎啉基、3-氧代-嗎啉基、2-氧代-哌嗪基和2-氧代-哌啶基。雜環基可以具有如先前對術語「芳基」所描述的取代模式。
術語「雜芳基」指可包含1、2或3個選自氮、氧和/或硫的原子的芳香族5至6元單環或者9至10元二環，例如呋喃基、吡啶基、噠嗪基、氧代-噠嗪基、嘧啶基、2-氧代-吡啶基、2-氧代-嘧啶基吡嗪基、噻吩基、異噁唑基、噁唑基、噁二唑基、咪唑基、吡咯基、吡唑基、三唑基、四唑基、噻唑基、異噻唑基、1，2，3-噻二唑基、苯並咪唑基、吲哚基、吲唑基。優選的雜芳基有2-氧代-吡啶基、2-氧代-嘧啶基、吡啶基和吲哚基。雜芳基可以具有如先前對術語「芳基」所描述的取代模式。優選的取代基有滷素、低級烷基、低級烷氧基或CN。
通用合成方法 按照本發明，式(X)化合物如下製備 I.酶途徑A
在流程1中，R表示C1-5烷基或被一個或多個選自羥基、甲氧基、乙氧基和滷素的取代基所取代的C1-3烷基。式(6)化合物可以是水合物。其中R是Et的式(6)化合物的水合物(6』)尤其可以容易地被分離為相應的結晶水合物(6』)。

該途徑包括以下步驟 1.在原位產生的甲亞胺內鎓鹽(azomethine ylide)之間進行偶極[3+2]環加成，得到苄基保護的吡咯烷2。
2.吡咯烷2進行脫苄基，得到3。
3.對3進行Boc保護，得到外消旋的二酯4。
4.進行酶法拆分，其中(S，S)-對映異構體被水解和洗脫出，得到(R，R)-二酯5。
5.進行選擇性單水解，得到(R，R)-一元酸6。
6.與苯胺11進行醯胺偶聯，得到醯胺酯7。
7.與2-氨基-5-氯吡啶進行鹼性醯胺化，得到雙醯胺8。
8.進行Boc脫保護，得到吡咯烷9。
9.進行烷基化，得到二氟乙胺10。
I-1.環加成步驟 如在文獻(Rodriguez Sarmiento等人，TetrahedronAsymm.2003，1547-1551；M.Joucla，J.Mortier，Bull.Soc.Chim.Fr.1988，579；O.Tsuge，S.Kanemasa，M.Ohe，S.Takenaka，Bull.Chem.Soc.Jpn.1987，4079；O.Tsuge，S.Kanemasa，M.Ohe，S.Takenaka，Chem.Letters 1986，973；M.Joucal，J.Mortier，J.Chem.Soc.Chem.Comm.1985，1566.)中發現的那樣，環加成可以通過富馬酸二酯與N-苄基甘氨酸和甲醛(低聚甲醛)反應來進行。環加成還可以通過使富馬酸二酯與甲亞胺內鎓鹽前體如N-苄基-三甲基甲矽烷基甲胺1的N-(烷氧基甲基)或N-(苯並三唑-甲基)衍生物通常在酸/路易斯酸催化或熱條件下反應來進行(Hosomi等人，Chemistry Letters 1984，1117；Katritzky等人，Tetrahedron 1994，12571；Karlsson和

J.Chem.Soc.Perkin Trans.1 2002，1076；Kazuo等人，Chem.& Pharm.Bull.1985，896；I.F.Cottrell，D.Hands，D.J.Kennedy，K.J.Paul，S.H.B.Wright，K.Hoogsteen，J.Chem.Soc.Perkin Trans.1 1991，1091；J.S.Cavey，J.Org.Chem.2001 2526；C.Savarin，「有機方法研究和進展」(Organic ProcessResearch and Development)，科學更新會議錄，Nice，2006年3月30日)。通常分離出內鎓鹽前體和通常從反應混合物中排除水以防止原位產生的內鎓鹽被淬滅。
但是，發現N-苄基-三甲基甲矽烷基甲胺1與甲醛水溶液反應得到甲亞胺內鎓鹽前體，該前體可以未經預先乾燥而直接用於與富馬酸二酯進行環加成。確實，在適宜的條件下，在所產生的內鎓鹽與富馬酸酯的環加成和內鎓鹽被水淬滅之間的競爭有利於環加成，從而得到產率優良的環加合物(在粗反應混合物中檢測到N-甲基-N-苄胺，這表示競爭性的內鎓鹽被水淬滅)。這提供了由N-苄基-三甲基甲矽烷基甲胺1和甲醛水溶液進行的簡單方法，避免了內鎓鹽前體的分離。
因此，首先將N-苄基-三甲基甲矽烷基甲胺1溶於適宜的溶劑如THF、二噁烷、甲苯、乙酸乙酯和DME中。優選THF。於室溫加入甲醛水溶液(優選濃溶液，通常為約36％溶液，至少1當量)(在不存在富馬酸二酯時加熱該溶液是有害的，因為可能發生內鎓鹽產生，隨後內鎓鹽被水淬滅)。
使所得混合物與富馬酸二酯在例如純粹熱條件下、優選50℃以上反應。
與富馬酸二酯的反應還可以在較低溫度下(例如於室溫)進行，在這種情況下，反應可以需要通過加入適宜的酸如三氟乙酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、鹽酸、硫酸、磷酸、三氟甲磺酸、甲酸和乙酸來催化。優選三氟乙酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、鹽酸、硫酸或磷酸。更優選三氟乙酸。酸催化的反應還可以在升高溫度下、例如在回流THF中進行。
優選的條件包括將濃甲醛溶液(至少一當量，優選在1至1.5當量之間)加入到N-苄基-三甲基甲矽烷基甲胺1在THF中的溶液中。通過於室溫使所得的反應混合物與富馬酸二酯的THF溶液和催化量的三氟乙酸(優選1當量以下，更優選在1至5mol％之間)反應來進行環加成。在這些條件下，環加成部分可以在0℃至60℃、優選在20℃至60℃、更優選於室溫進行。
其它加入順序是可能的，例如將N-苄基-三甲基甲矽烷基甲胺1加入到富馬酸二酯、三氟乙酸和甲醛在THF中的混合物中，或者將甲醛加入到N-苄基-三甲基甲矽烷基甲胺1、三氟乙酸和富馬酸二酯在THF中的混合物中，或者相應的相反加入方式。
供選的方法包括將N-苄基-三甲基甲矽烷基甲胺1和甲醛的混合物加入到富馬酸二酯的熱混合物中(例如在THF中，在40℃至回流溫度，優選在回流下)。在不存在富馬酸二酯時將N-苄基-三甲基甲矽烷基甲胺、甲醛和三氟乙酸混合不是優選的，因為將產生內鎓鹽並被水淬滅。
在適宜的條件下，環加合物的純度對於將其直接引入下一步驟而言是足夠的。但是，如果需要的話，環加合物可以通過本領域技術人員已知的方法如蒸餾、色譜法或鹽形成來純化。
I-2.和3.脫苄基-Boc保護 化合物2可以在本領域技術人員已知的標準條件下脫苄基，包括例如在催化劑如鈀/碳或氫氧化鈀/碳的存在下氫解。氫解可以在適宜的溶劑如乙醇、THF、乙酸乙酯和乙酸中進行。優選乙醇。可以加入酸如鹽酸，但是反應優選在游離鹼上進行。可以通過本領域技術人員已知的標準條件對脫保護的胺3進行Boc保護，得到化合物4。優選的條件包括在溶劑如乙醇、THF、MTBE、乙酸乙酯和甲苯中、優選在乙醇或THF中，在0℃至100℃、優選在20℃至40℃的溫度下、更優選於室溫，使化合物3與Boc2O反應。為了破壞過量的Boc2O，可以使粗產物與DMAP或甘氨酸、優選與DMAP在THF水溶液中反應。
在適宜的條件下(參見實驗部分)，粗產物具有適於被直接引入下一步驟的純度。但是，如果需要的話，它可以通過本領域技術人員已知的方法如蒸餾或色譜法來純化。
I-4.和5.酶法拆分/單水解
在流程2中，R是C1-5烷基或被一個或多個選自羥基、甲氧基、乙氧基和滷素的取代基所取代的C1-3烷基。式(6)化合物可以是水合物。其中R是Et的式6化合物尤其可以容易地被分離為相應的水合物6』。

使用式(6)的(R，R)-N-Boc-吡咯烷-3，4-二甲酸單酯作為中間體來製備式(X)化合物。對R而言優選的C1-5烷基是甲基、乙基或正丙基，更優選甲基或乙基，尤其是乙基。式(4)的二酯如上所述來製備。
中間體(6)可以通過下述基於動力學外消旋拆分的化學酶方法製得。
1.如流程2所概述的那樣，使反式-外消旋N-Boc-吡咯烷-3，4-二甲酸二酯(4)進行對映選擇性酶水解，和 2.按照流程2，將保留的(R，R)-N-Boc-吡咯烷-3，4-二甲酸二酯(5)在緩衝劑水溶液中進行選擇性單水解。
通過使酶與在緩衝劑水溶液中經劇烈攪拌而乳化的二酯底物(4)接觸直到所保留的二酯(5)已經達到了高對映異構體過量(＞50％轉化)，進行了對映選擇性水解。
除了用在文獻(Rodriguez Sarmiento，Wirz & Iding(2003)TetrahedronAsymm.14，1547-1551)中描述的特異性酶ESP-ESL 1199(Diversa公司)來拆分二乙酯4外，當應用適當的反應條件時還可以發現另外的對映選擇性酶酯酶NE09(通過斯雷克特公司(Selectchemie AG)[Etzelstrasse 42，郵政信箱772，CH-8038蘇黎世，瑞士]購買的熱素)、來自米根黴(Rhizopus oryzae)的脂酶和來自疏棉狀嗜熱絲孢菌(Thermomyceslanuginosus)的脂酶。優選來自米根黴的脂酶-其市售製品為來自阿瑪諾天野酶公司(Amano Enzymes)(名古屋，日本)的脂酶D-和來自疏棉狀嗜熱絲孢菌的脂酶，最優選來自疏棉狀嗜熱絲孢菌的脂酶，其可市售獲得的代表物是來自諾維信公司(Novozymes)(Bagsvaerd，丹麥)的Lipolase 100L型EX，這是一種便宜的商品酶，其證明在底物質量方面比酯酶1199更穩健。
適宜的緩衝劑是生物化學中常用的常規緩衝劑，其範圍為pH5-10、優選6-9。在反應期間，通過加入鹼、優選NaOH或KOH-溶液使反應混合物的pH恆定地保持在所選的值。
對於Lipolase 100L型EX，在非極性有機溶劑如正庚烷(如5％v/v)或氯化銨(如0.5M)的存在下使用磷酸鹽緩衝液(如pH7)可積極地影響選擇性(E≥25)。較高濃度的磷酸鹽緩衝液(如100mM)顯著提高酶活性，從而允許降低溫度而有利於升高對映選擇性。底物濃度可以為1-20％w/w，優選5-15％w/w。
所有酶可以在較低溫度(0-25℃)下應用以提高對映選擇性。可以通過在較高溫度下起作用來提高酶的活性，但是這是以選擇性為代價的。或者，酶可以以固定化形式使用。反應終止後，通過萃取對二酯產物進行常規的後處理。
然後，如文獻(Rodriguez Sarmiento，Wirz & Iding(2003)TetrahedronAsymm.14，1547-1551)所述，採用來自圓柱念珠菌(Candida cylindracea)(皺褶念珠菌(C.rugosa)；名糖產業株式會社(Meito Sangyo)；日本東京)的商品酶脂酶OF，將所保留的對映異構純(通常以99％以上的e.e.得到)的(R，R)-二酯(5)單水解為對映異構純的(R，R)-單酯(6)。在較高的、技術上更相關的5-15％底物濃度下，二元酸的形成是更顯著的，但是酶的性能可以被提高。
通過向緩衝劑水溶液中加入糖(如1M D-葡萄糖)引發脂酶OF在較高底物濃度下的選擇性。對於使用技術上相關的溶劑作為萃取劑(例如乙酸乙酯)進行產物分離而言，含有產物單酯和副產物二元酸的水相的pH被設置為4.0-4.5。
任選地，(R，R)-單酯6可以直接由二酯4、通過採用高度(R，R)-選擇性酶進行的對映選擇性單水解來合成。
I-6.第一個醯胺偶聯 適於式6化合物(作為無水形式)與化合物11反應得到醯胺酯7的條件是本領域技術人員眾所周知的。這類反應可以在如下條件下進行在適宜的溶劑如二氯甲烷、DMF、乙腈、THF、NMP和DMA中、優選在THF或乙腈中、更優選在THF中，在適宜偶聯劑如EDC、DIC、DCC、CDI、TBTU、HBTU、EEDQ、CIP、HOBt、HATU、PyBOP、PyBrOP、BOP、BOP-Cl和TFFH的存在下，在可以在-20℃至120℃範圍內選擇的適宜溫度下。另外的反應條件可以包括使用偶聯劑如CDMT(2-氯-4，6-二甲氧基-[1，3，5]三嗪)、三氯三嗪或其相應的N-甲基嗎啉加合物(即4-(4，6-二甲氧基-[1，3，5]三嗪-2-基)-4-甲基-嗎啉鎓鹽酸鹽)。
或者，酸6可以在如下條件下活化使用氯甲酸烷基酯或芳基酯、優選氯甲酸烷基酯、優選氯甲酸低級烷基酯、更優選氯甲酸異丁酯，在溶劑和鹼中，所述的溶劑例如有二氯甲烷、DMF、乙腈、THF、NMP和DMA，優選DMF、THF或乙腈，更優選THF，所述的鹼例如有三乙胺、N-甲基嗎啉、N，N-二甲基苯胺和三甲基吡啶，優選N-甲基嗎啉或三甲基吡啶，更優選N-甲基嗎啉。活化在選自-50℃至50℃、優選-20℃至40℃、更優選-10℃至20℃的適宜溫度下進行。可以將氯甲酸酯加入到酸6與適宜胺的混合物中，或者將胺與酸6的混合物反向加入到氯甲酸酯中，優選後一種加入順序。
然後使活化的酸與苯胺11在選自0℃至120℃、優選在20℃至60℃、優選在50℃至60℃的溫度下反應。發現加入無機鹽如氯化鋰可以顯著提高反應速率，這允許反應在室溫下容易地進行。氯化鋰通過1，3-二羰基片段的複合而最有可能活化混合酸酐。
或者，在與苯胺11反應之前，可以在本領域技術人員眾所周知的條件下將酸轉化為相應的醯基氯。優選的條件包括用SOCl2、OPCl3、草醯氯或四甲基烯酮亞銨氯化物(tetramethyl keteneiminium chloride)、優選草醯氯進行活化。根據所用試劑，可能有必要通過使用叔鹼來淬滅所產生的鹽酸以避免Boc脫保護。
I-7.第二個醯胺偶聯 醯胺酯7可以用2-氨基-5-氯吡啶在如下條件下直接轉化為雙醯胺8在本領域技術人員已知的條件下，在三烷基鋁烷或二烷基氯化鋁或烷基二氯化鋁的存在下、優選在三烷基鋁烷的存在下，在適宜溶劑如THF、二噁烷、DME和甲苯中、優選在二噁烷或甲苯中、更優選在甲苯中，在-10℃至120℃、優選在50℃至120℃、更優選在90℃至110℃的範圍內選擇的適宜溫度下。
或者，醯胺酯7可以在如下條件下直接轉化為雙醯胺8在本領域技術人員已知的條件下，在強鹼如NaH、LiH、KH、LDA、LiHMDS、KHMDS、NaHMDS、LiOtBu、KOtBu、NaOtBu、叔戊醇鋰、叔戊醇鉀和叔戊醇鈉的存在下、優選在LiHMDS、LDA或叔戊醇鋰的存在下、更優選在LiHMDS或叔戊醇鋰的存在下、甚至更優選在LiHMDS的存在下，在適宜溶劑如THF、二噁烷、DME、甲苯或DMSO中、優選在THF、二噁烷或DME中、更優選在THF中，在可以例如在選自-20℃至80℃的適宜溫度下。優選的條件包括在THF中、在-10℃至60℃、優選在0℃至40℃、更優選在0℃至室溫之間的溫度下使用LiHMDS。
在反應混合物進行後處理後，產物8最好從乙醇中結晶。
或者，雙醯胺8可以由醯胺酯7通過皂化為相應的醯胺、然後與5-氯-2-氨基-吡啶偶聯而得到。用於酯皂化的條件是本領域技術人員眾所周知的。這同樣用於與5-氯-2-氨基-吡啶偶聯，用於此的通用條件還可以在本發明的描述中找到。
I-8.和9.Boc-脫保護-烷基化 雙醯胺8可以如下進行Boc-脫保護在本領域技術人員眾所周知的條件下，在適宜溶劑如甲苯、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、二噁烷、THF、異丙醇和水中，優選在THF、異丙醇或水中，更優選在水中，在酸如甲磺酸、對甲苯磺酸、磷酸、HBr、硫酸、三氟甲磺酸、三氟乙酸和鹽酸的存在下，優選在三氟乙酸或鹽酸的存在下，更優選在鹽酸的存在下。
脫保護的胺9可以作為鹽被分離出(例如當用HCl在iPrOH中進行Boc脫保護時，可以通過過濾分離出鹽酸鹽9·n HCl，其中n通常在1.8至2.6之間)，或者通過本領域技術人員已知的後處理作為游離鹼被分離出。但是，由於游離鹼的水溶性，優選產物被直接引入下一步驟、即烷基化步驟中。在適宜反應條件下，粗反應混合物可以被直接引入下一步驟中(參見下文)。
胺9可以在如下條件下被烷基化在適宜的溶劑如乙腈、THF、二噁烷、二氯甲烷、DMF、DMSO、DMA、NMP和乙酸乙酯中，優選在THF、DMSO、二氯甲烷或乙腈中，更優選在二氯甲烷或乙腈中，進一步更優選在乙腈中，使用烷基化劑如2，2-二氟乙基滷化物(碘化物、溴化物、氯化物)、甲苯磺酸2，2-二氟乙基酯、甲磺酸2，2-二氟乙基酯、n-硝基苯磺酸2，2-二氟乙基酯(n＝2、3或4)或三氟甲磺酸2，2-二氟乙基酯，優選使用n-硝基苯磺酸2，2-二氟乙基酯(n＝2、3、4)或三氟甲磺酸2，2-二氟乙基酯，更優選使用3-硝基苯磺酸2，2-二氟乙基酯或三氟甲磺酸2，2-二氟乙基酯，在選自例如20℃至130℃的適宜溫度下，在適宜的鹼如三乙胺、乙基二異丙基胺、三甲基吡啶、吡啶、二甲基吡啶、Na2CO3、NaHCO3、K2CO3和Cs2CO3的存在下，優選在乙基二異丙基胺或三甲基吡啶的存在下，更優選在乙基二異丙基胺的存在下。游離鹼烷基化的優選的條件包括在乙腈中，在20℃至80℃、優選在50℃至80℃的溫度下、更優選在回流的乙腈中，在叔胺如乙基二異丙基胺的存在下，與3-硝基苯磺酸2，2-二氟乙基酯反應。胺9烷基化的其它優選的條件包括在THF、乙腈、乙酸乙酯或二氯甲烷中、優選在THF、乙腈或二氯甲烷中、更優選在二氯甲烷中，在-10℃至80℃、優選在0℃至50℃、更優選在0℃至室溫之間的溫度下，在叔胺如乙基二異丙基胺的存在下，與三氟甲磺酸2，2-二氟乙基酯反應。
可以在類似於以上對游離鹼描述的條件下將脫保護的胺作為酸鹽進行烷基化，酸鹽通過適宜鹼的作用在原位產生。但是，如果該鹽的抗衡陰離子部分也可以用作親核部分(如氯離子)並且以競爭方式與烷基化劑反應，則有必要引入過量的烷基化劑。在這種情況下，可以優選在雙相水性/有機溶劑條件下起作用。在適宜的條件下，抗衡陰離子可以分離在水相中並且不能與存在於有機相中的烷基化劑反應。通過使用適宜的鹼在原位產生的游離胺(雖然是部分水溶的)將被連續萃取在有機相中，在那裡它將被適宜的烷基化劑所烷基化。
Boc-脫保護/雙相烷基化的最優選的條件包括在乙酸乙酯、THF、異丙醇或水中、優選在THF、異丙醇或水中、更優選在水中進行Boc脫保護。烷基化步驟由粗Boc-脫保護反應混合物在如下條件下進行在水以及適宜的鹼的存在下，所述的適宜的鹼例如有乙基二異丙基胺、Na2CO3、NaHCO3、KHCO3、K2CO3、NaOH、KOH或其混合物，例如乙基二異丙基胺和NaOH(或KOH)的混合物、乙基二異丙基胺和NaHCO3(或KHCO3)的混合物、NaHCO3和NaOH(KOH)的混合物以及KHCO3和KOH(或NaOH)的混合物，更優選在NaHCO3的存在下，以及在另外的有機溶劑如乙酸乙酯、醋酸異丙酯、2-甲基-THF、MTBE和甲苯的存在下，優選在乙酸乙酯、醋酸異丙酯或2-甲基-THF的存在下，更優選在乙酸乙酯的存在下，以及在烷基化劑如n-硝基苯磺酸2，2-二氟乙基酯(n＝2、3、4)和三氟甲磺酸2，2-二氟乙基酯的存在下，優選在3-硝基苯磺酸二氟乙基酯或三氟甲磺酸2，2-二氟乙基酯的存在下，更優選在三氟甲磺酸2，2-二氟乙基酯的存在下，在選自0℃至100℃、優選20℃至50℃的適宜溫度下。
在最佳條件下，可以使用等量或僅稍微過量的烷基化劑(參見反應和類似實施例的實驗描述)。
II.通過環加成/Boc保護獲得Boc-吡咯烷中間體4的供選途徑 製備Boc-吡咯烷中間體4的供選方法包括三甲基甲矽烷基甲胺12進行[3+2]環加成，得到縮醛胺13，縮醛胺13可以直接轉化為預期的Boc-吡咯烷或者被釋放得到吡咯烷3，如上所述將吡咯烷3容易地進行Boc保護，得到4。該順序避免了脫苄基步驟並且其原子經濟性更高。

在流程3中，R是C1-5烷基或者被一個或多個選自羥基、甲氧基、乙氧基和滷素的取代基所取代的C1-3烷基。
II-1.新的[3+2]環加成 三甲基甲矽烷基甲胺和富馬酸二酯之間的[3+2]環加成可以在類似於對1轉化為2所描述的環加成的條件下進行。但是，在相同條件下，獲得低至中產率。獲得最好反應產出的關鍵是甲醛的用量。該反應最好採用過量甲醛、在1.3當量以上、優選在1.5至3當量之間、更優選2當量的過量甲醛進行。雖然能夠如對1轉化為2所描述的那樣通過酸催化劑進行活化，但是該反應最好在如下條件下進行在純粹熱條件下，在選自40℃至120℃、優選50℃至80℃、更優選55℃至65℃的溫度下，在溶劑如THF、二噁烷、NMP、DMSO、DMA、DME、DMF、乙酸乙酯和甲苯中，優選在THF、二噁烷、DMSO或甲苯中，更優選在THF或二噁烷中。
II-2.Boc保護 通過與Boc2O在水/有機溶劑混合物中反應，縮醛胺可以直接轉化為Boc保護的吡咯烷4。在反應過程中，縮醛胺在原位被水解為相應的吡咯烷3，然後吡咯烷3與Boc2O反應，得到4。該反應最好在水和有機溶劑如THF、二噁烷、甲苯、乙酸乙酯、MTBE、醋酸異丙酯、丙酮和二氯甲烷的混合物中進行。優選的有機溶劑有THF、二噁烷、甲苯、乙酸乙酯、MTBE或醋酸異丙酯，更優選乙酸乙酯、MTBE或THF。該反應還可以在鹼如NaHCO3、KHCO3、三乙胺、Na2CO3和K2CO3的存在下進行。優選的鹼有NaHCO3或KHCO3，尤其是NaHCO3。或者，縮醛胺可以與鹽酸羥胺例如在水/有機溶劑混合物中反應，經後處理後得到吡咯烷3。該反應任選在鹼如NaHCO3、KHCO3、三乙胺、Na2CO3和K2CO3的存在下進行。優選的鹼有NaHCO3或KHCO3，尤其是NaHCO3。如果需要的話，Boc-吡咯烷4可以通過本領域技術人員已知的方法如色譜法或蒸餾來純化。
III.通過脫保護/游離鹼形成/烷基化/醯胺形成將醯胺酯7轉化為化合物(X)的供選途徑
在流程4中，R是C1-5烷基或者被一個或多個選自羥基、甲氧基、乙氧基和滷素的取代基所取代的C1-3烷基。
醯胺酯7轉化為化合物(X)的供選方法包括含有a)Boc脫保護、b)烷基化(優選在游離鹼上)和第二個醯胺形成的反應序列。
Boc脫保護在本領域技術人員已知的條件下進行。脫保護的吡咯烷可以作為鹽酸鹽或者通過適當的後處理作為游離鹼被分離出。例如，其中R是Et的鹽酸鹽14可以通過與NH3(例如作為在乙醇中的溶液)在適宜的溶劑中反應而轉化為游離胺15。適宜的溶劑包括乙醇或者乙醇與有機溶劑的混合物，所述的有機溶劑例如有乙酸乙酯、甲苯、MTBE、丙酮、醋酸異丙酯、二異丙醚和THF，優選乙酸乙酯。
然後通過已經在上文對類似底物所描述的條件將游離胺15進行烷基化。優選的條件包括在適宜的溶劑或溶劑混合物中、在適宜鹼的存在下使用三氟甲磺酸二氟乙基酯和3-硝基苯磺酸二氟乙基酯。
IV.酶途徑B
在流程5中，R是C1-5烷基或者被一個或多個選自羥基、甲氧基、乙氧基和滷素的取代基所取代的C1-3烷基。R優選是任選被滷素、甲氧基或羥基所取代的C1-3烷基，更優選C1-3烷基，尤其是甲基。
還可以通過如以上流程中所述將N-(2，2-二氟乙基)-吡咯烷-3，4-二甲酸二酯進行酶法拆分而得到化合物(X)。該途徑可以在如上文定義的酯系列中進行，但是優選在甲基酯系列中進行。
可以在上文已經描述的條件下、經由適當的富馬酸二酯與衍生自胺1與甲醛的組合的甲亞胺內鎓鹽之間的[3+2]環加成製得外消旋酯。在本領域技術人員已知的條件下將所得的N-苄基-吡咯烷二甲酸二酯脫保護。然後在先前對類似底物描述的條件下(即通過與三氟甲磺酸二氟乙基酯或3-硝基苯磺酸二氟乙基酯、在適當的溶劑或溶劑混合物中以及在適當鹼的存在下反應)將吡咯烷進行烷基化。然後將外消旋的二酯拆分，得到預期的(R，R)-吡咯烷二酯。然後後者被單水解為一元酸單酯，該一元酸單酯在本專利中對類似底物描述的條件下轉化為化合物(X)。
順序包括 1.在富馬酸二酯與衍生自胺1與甲醛的組合的甲亞胺內鎓鹽之間進行[3+2]環加成，得到吡咯烷17。
2.將17進行脫苄基，得到18。
3.吡咯烷18進行烷基化，得到化合物19。
4.將(外消旋)-吡咯烷二酯19拆分，得到(R，R)-吡咯烷二酯20。
5.吡咯烷二酯20進行單水解，得到(R，R)-一元酸單酯21。
6.一元酸單酯21與苯胺11偶聯，得到單醯胺單酯22。
7.單醯胺單酯22與2-氨基-5-氯吡啶直接偶聯。
或者，吡咯烷19可以通過包括如下的步驟而直接得到 1.使三甲基甲矽烷基甲胺與烷基化劑進行烷基化，得到N，N，-(三甲基甲矽烷基甲基)-(二氟乙基)-胺29，其中所述的烷基化劑例如有三氟甲磺酸2，2-二氟乙基酯、甲苯磺酸2，2-二氟乙基酯、n-硝基苯磺酸2，2-二氟乙基酯(n＝2、3、4)、2，4-二氯苯磺酸2，2-二氟乙基酯和甲磺酸2，2-二氟乙基酯，優選三氟甲磺酸2，2-二氟乙基酯或3-硝基苯磺酸2，2-二氟乙基酯，更優選三氟甲磺酸2，2-二氟乙基酯。
2.試劑29然後與甲醛、富馬酸二酯在酸(以足以至少使在烷基化步驟中所用的任意過量的鹼質子化的量)的存在下反應，得到相應的[3+2]環加成產物、即吡咯烷19。或者，環加成步驟可以在熱條件下進行。

在流程6中，R是C1-5烷基或者被一個或多個選自羥基、甲氧基、乙氧基和滷素的取代基所取代的C1-3烷基。R優選是任選被滷素、甲氧基或羥基所取代的C1-3烷基，更優選C1-3烷基，尤其是甲基。
或者，醯胺酯22可以經由酯水解為相應的醯胺酸和使酸官能團與2-氨基-5-氯吡啶在本領域技術人員已知的條件下偶聯來轉化為10。
酶法拆分/單水解
在流程7中，R是C1-5烷基或者被一個或多個選自羥基、甲氧基、乙氧基和滷素的取代基所取代的C1-3烷基。R優選是任選被滷素、甲氧基或羥基所取代的C1-3烷基，更優選C1-3烷基，尤其是甲基。
使用式21的(R，R)-N-(2，2-二氟乙基)-吡咯烷-3，4-二甲酸單酯作為中間體來製備式(X)化合物。對R而言優選的C1-3烷基是甲基或乙基。在式19、20和21中，優選R是乙基或甲基，最優選是甲基。
中間體21可以通過下述基於動力學外消旋拆分的化學酶方法製得。
1.按照流程7所概述的那樣，使反式-外消旋N-(2，2-二氟乙基-吡咯烷-3，4-二甲酸二酯19進行對映選擇性酶水解，和 2.按照流程7，將保留的(R，R)-N-(2，2-二氟乙基)-吡咯烷-3，4-二甲酸二酯20在緩衝劑水溶液中進行選擇性單水解。
通過使酶與在緩衝劑水溶液中經劇烈攪拌而乳化的二酯底物19接觸直到所保留的二酯20已經達到了高對映異構體過量(＞50％轉化)，進行了對映選擇性水解(流程7)。
當應用適當的反應條件時可以發現數種對映選擇性酶來自南極念珠菌(Candida antarctica)形式B的脂酶、來自閃光須黴(Phycomyces nitens)的脂酶、來自芽孢桿菌(Bacillus sp.)的蛋白酶(Esperase 4.0T；諾維信公司)、來自芽孢桿菌(Bacillus sp.)的枯草蛋白酶(Alcalase 2.5L；諾維信公司)和酯酶ESP-ESL-1199。優選來自南極念珠菌形式B的脂酶、來自閃光須黴的脂酶(脂酶PN，和光純藥工業株式會社(Wako Pure Chemical Industries，Ltd.)；日本大阪)和酯酶ESP-ESL-1199(Diverasa公司；聖地牙哥，美國)，最優選來自南極念珠菌形式B的脂酶(其市售製品為Lipozyme CALB L或諾維信CALB L(Novozyme CALB L)；諾維信公司；Bagsvaerd，丹麥)。
適宜的緩衝劑是生物化學中常用的常規緩衝劑，其範圍為pH5-9、優選6-8。在反應期間，通過加入鹼、優選NaOH或KOH-溶液使反應混合物的pH恆定地保持在所選的值。
對於酯酶ESP-ESL-1199，使用含有添加劑如醋酸鎂(如飽和)、乙腈(如5％v/v)和乙醇(如5％v/v)的pH7.2的磷酸鹽緩衝液(如30mM)對選擇性(E＞＞40)而言是有利的。pH低於7(例如pH6.2的MES緩衝液)也可提高選擇性。
對於來自南極念珠菌形式B的脂酶，使用含有添加劑如硫酸鉀(如0.5M)、氯化鉀(如0.5M)、硫氰酸鋰(如0.1M)、醋酸鎂(如飽和)、聚乙二醇6000(如10％w/v)、鹽酸胍(guanidinium chloride)(如0.1M)、D-葡萄糖(如0.5M)、DMSO(如5％v/v)和乙醇(如5％v/v)的pH7.2的磷酸鹽緩衝液(如30mM)對選擇性(E＞＞40)而言是有利的。pH低於7(例如醋酸鹽或MES緩衝液)也可提高選擇性。
所有酶可以在較低溫度(0-25℃)下應用以提高對映選擇性。可以通過在較高溫度下起作用來提高酶的活性，但是這是以選擇性為代價的。或者，酶可以以固定化形式使用。
反應終止後，通過萃取對二酯產物進行常規的後處理。
然後，通過使其在水性系統中與脂酶、酯酶、膽固醇酶(cholestrases)或蛋白酶接觸，將保留的對映異構純的(R，R)-二酯20單水解為對映異構純的(R，R)-單酯21。豬肝臟酯酶(其市售製品例如是來自羅氏應用科學公司(Roche Applied Sciences)的PLE工業級(3.12MU/L；目錄號10491228；Penzberg，德國))和來自圓柱念珠菌(皺褶念珠菌；名糖產業株式會社；日本東京)的脂酶OF被證明是最適宜的酶。
底物濃度可以為1-20％w/w，優選5-15％w/w。
通過用乙酸乙酯在pH3.5-4下重複萃取(在萃取步驟之間調節pH，或者使用強pH3.5-4的磷酸鹽緩衝液)，將單酯產物從水相中萃取出來。
任選地，(R，R)-單酯21可以直接由二酯19、通過採用高度(R，R)-選擇性酶進行對映選擇性單水解來合成。
V.環酐途徑
在流程8中，R1是甲基、乙基、肉桂基或肉桂醯基、苄基或苯乙基。
該途徑包括以下步驟 1.進行[3+2]環加成反應，得到二氟乙基吡咯烷23。
2.進行苄基酯氫解，得到順式二元酸24。
3.形成環酐25。
4.酐去對稱化，形成順式一元酸單酯26。
5.使α酯中心進行差向異構化，得到相應的反式一元酸單酯27。
6.與苯胺11進行第一個醯胺偶聯，得到醯胺酯28。
7.酯醯胺28與2-氨基-5-氯吡啶直接偶聯，得到化合物10。
環加成步驟(形成23)的條件類似於對由(三甲基甲矽烷基-甲基)-胺經由試劑29製備吡咯烷19所描述的那些條件。
23氫解為24在本領域技術人員已知的條件下進行。根據所用條件，在氫解過程中可以發生結晶。這可以通過在叔胺如三乙胺和二異丙基乙胺的存在下、優選在三乙胺的存在下進行氫解來避免。二元酸24最好從乙酸中或者從乙酸和溶劑如甲苯、乙酸乙酯、醋酸異丙酯和MTBE的混合物中、優選在乙酸和MTBE的混合物中結晶出。必須指出，差向異構化為相應的反式酸可以例如在順式酸24在乙酸中加熱時發生。必須小心選擇後處理條件以避免這種差向異構化。但是有可能使24的反式異構體轉化為環酐，雖然在更劇烈的條件下(參見下文)。
通過使順式二元酸24與脫水劑如磺醯氯、磷氧化物(OPCl3、P2O5)、磷滷化物(PCl3、PCl5、PBr3)或羧酸酐如丙酸酐和醋酸酐反應來進行環酐的形成。優選的條件包括在適宜溶劑、優選乙酸中使用醋酸酐。
通過使式25的內消旋環酐進行去對稱化反應(參見例如Bolm等人，TetrahedronAsymmetry 2003，3455；Bolm等人，J.Org.Chem.2000，6984；Deng等人，美國專利2004/0082809；Deng等人，J.Am.Chem.Soc.2000，9542)，得到式26化合物。
通過用醇選擇性開環使環酐去對稱化在手性試劑如手性胺、尤其是金雞納生物鹼或其衍生物的存在下、優選在奎寧的存在下進行。該反應可以在有機溶劑如THF、甲苯、乙酸乙酯、醋酸異丙酯、丙酮、MTBE、2-甲基-THF和乙腈中、優選在THF、甲苯或2-甲基-THF中、更優選在甲苯或THF中進行(見下表)。
用奎寧作為助催化劑和用BnOH作為親核試劑進行的篩選的結果 溶劑混合物也是可能的。但是，必須找到在試劑溶解性、反應活性和選擇性之間的最佳平衡。
可以用亞化學計算量的奎寧進行反應。但是，在這種情況下，反應最好在添加劑、優選非親核的鹼如Hünig氏鹼和四甲基哌啶的存在下、優選在Hünig氏鹼的存在下進行。反應在選自-80℃至50℃、優選-40℃至25℃、更優選約-20℃的溫度下進行。
當使用奎寧作為助催化劑時，可以用醇使酐開環，所述的醇例如有甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、苯甲醇、肉桂醇和2-苯基-乙醇，優選甲醇、乙醇、苯甲醇、肉桂醇或2-苯基-乙醇，更優選乙醇、苯甲醇或2-苯基-乙醇，更優選2-苯基-乙醇。在最佳條件下，得到90-95∶10-5對映異構體比例的產物。
可以通過本領域技術人員已知的後處理、例如通過萃取來分離產物。在一些情況下，它們的奎寧鹽可以從反應混合物中直接分離出，或者在適當的溶劑交換後分離出。
在一些情況下，可以通過用胺如奎寧使其鹽結晶/重結晶來提高一元酸單酯的對映異構純度。可以通過酸從水中結晶來提高對映異構純度，如對於其中R是PhCH2CH2的一元酸單酯26而言。
順式一元酸單酯26差向異構化為相應的反式一元酸單酯27在鹼性條件下用＞1當量、優選1.05-3當量、更優選1.1-2當量、更優選1.3-1.6當量的強鹼如LiHMDS、KHMDS、NaHMDS、LDA、KOtBu、NaOtBu、LiOtBu、叔戊醇鋰、叔戊醇鉀和叔戊醇鈉進行。優選的鹼是KOtBu或叔戊醇鉀，尤其是KOtBu。反應在溶劑如甲苯、THF、DME和二噁烷中、優選在甲苯或THF中、更優選在THF中進行。反應在選自-80℃至50℃、優選-80℃至室溫之間、更優選-80℃至-15℃、甚至更優選-80℃至-60℃的溫度下進行。
必須注意，起始的一元酸單酯26被完全溶解或至少顯示出足夠的溶解性以便與鹼反應。當溶解性不利時，加入叔胺形成可溶性鹽可以解決該問題。優選的胺例如有三乙胺、三丁胺或二異丙基乙胺，更優選三乙胺。
粗混合物中的非對映異構純度(反式∶順式)通常為約99％。當R是PhCH2CH2時，其在後處理和從水中結晶後可以進一步增加。
當R是PhCH2CH2時，對映異構純度和非對映異構純度均可以通過在例如乙酸乙酯與庚烷的混合物中(重)結晶而提高。
27向10的轉化在已經在本專利中對類似底物所描述的條件下進行。
還可以經由下述流程中描述的反應序列得到環酐25，包括以下步驟 1.在類似於已經對12轉化為13所描述的條件下，三甲基甲矽烷基甲胺/甲醛/富馬酸二苄基酯之間進行環加成，得到縮醛胺30(異構體的混合物，相鄰酯基團之間的所有反式相對構型，其中R是苄基)。
2.縮醛胺原位裂解為相應的胺，胺作為鹽酸鹽31被分離出。
3.在已經在本專利中對類似底物所描述的條件下，使31的相應的游離胺進行烷基化，得到32。
4.進行苄基酯氫解，得到反式二元酸33。
5.形成酐。

反式二元酸33可以直接轉化為順式-酐25。確實在適宜的反應條件下，在33的順式和反式異構體之間存在平衡。然後順式異構體被醋酸酐捕獲並轉化為預期的酐。反應條件類似於用於24轉化為25的條件，不同的是必須升高反應溫度以進行足夠快的反式-順式異構化。優選的條件包括在60℃至140℃、優選在80℃至120℃、更優選在100℃至110℃的溫度下，在適宜溶劑、優選乙酸中，使二元酸33與醋酸酐反應。
還可以通過使相應的酯(例如二甲基-、二乙基-、二苄基-、二丙基、二異丙基-、二丁基-酯)水解和從pH3-3.5的水中結晶而得到二元酸33。
1-(4-氨基-3-氟-苯基)-1H-吡啶-2-酮(化合物11)的製備 美國專利2005/0215599中描述的方法、即銅催化的2-羥基吡啶與4-溴-2-氟苯胺的N-芳基化存在嚴重的安全問題。

確實，K2CO3和DMSO的混合物在高溫下可能導致將伴有非常高的絕熱溫度升高的失控事件。達到失控事件的最大速率的時間(由ARC測定)由反應時間控制，因此這類方法按照現在情況不能進行放大。
該方法的第一種變通包括用NMP或DMA、優選DMA代替DMSO。
銅(I)源可以是CuI、CuCl、CuBr、Cu2O，優選CuI和Cu2O，更優選Cu2O。
N-芳基化的優選條件包括在DMA中，在K2CO3的存在下，在110℃至150℃、更優選在120-140℃、甚至更優選在130-140℃的溫度下，使用0.05至1當量、優選0.05-0.5當量、更優選0.1-0.2當量的Cu2O。
其它優選的條件包括在100-150℃、優選在100-120℃的溫度下(對於溫度超過沸點的情況，使用壓熱器)，使用吡啶作為溶劑以及使用0.1至1當量、更優選0.25至0.75當量、甚至更優選約0.5當量的Cu2O。
在這兩種情況下，產物通過加入水進行結晶來分離。
如果需要的話，產物可以通過炭處理和/或在乙醇或甲醇、優選甲醇中重結晶進行進一步純化。
N-芳基化還可以在甲苯中、在配體的存在下進行，所述的配體例如有反式-環己基-1，2-二胺、TMEDA、乙二胺、反式-N，N』-二甲基-環己基-1，2-二胺、N，N』-二甲基乙烷-1，2-二胺，優選反式-N，N』-二甲基-環己基-1，2-二胺和TMEDA，優選TMEDA。
苯胺11還可以通過包括如下的順序來製備首先對4-溴-2-氟苯胺進行保護，然後進行N-芳基化(在類似於上文對未保護的苯胺所描述的條件下)，然後進行脫保護。4-溴-2-氟苯胺優選通過雙苄基化進行保護。在各步驟中得到結晶中間體。脫保護步驟需要小心監測氫解以避免吡啶酮環的氫化。適當選擇催化劑也是關鍵的，在我們手頭上，來自Johnson Matthey的5％Pd/C給出了最好的結果。

實施例 以下實施例用於更詳細地說明本發明。但是它們不意欲以任何方式限制其範圍。
實施例1酶途徑A 步驟1[3+2]環加成
於20-25℃將900g N-苄基-N-三甲基甲矽烷基甲基胺(4654mmol)溶於5.6l THF中。歷經15min加入450ml 36％甲醛水溶液(5880mmol，1.26當量)，同時保持溫度為20-25℃。15min後，歷經15min加入760ml富馬酸二乙酯(1當量)、2.25l THF和11.2ml三氟乙酸(0.03當量)的混合物。將反應混合物攪拌過夜，同時保持溫度為20-30℃(在過程過程中進行GC)。加入3.5l 1N HCl，然後加入2.3l庚烷。分離水相，用3.4l庚烷洗滌。將庚烷相連續用3.5l 1N HCl洗滌。將4.5l MTBE加入到合併的水相中。在劇烈攪拌下加入720ml 32％NaOH水溶液(pH13)。分離水相，用4.5l MTBE再次萃取。將MTBE相連續用2.2l水洗滌，合併，於45℃濃縮至幹，得到1.295kg粗(外消旋)-反式-N-苄基-吡咯烷-3，4-二甲酸二乙酯。如果需要的話，可以將粗環加合物蒸餾。
步驟1[3+2]環加成(供選條件) 將200gN-苄基-N-三甲基甲矽烷基甲基胺(1035mmol)溶於800ml THF中。於室溫向該溶液中加入98.3ml 37％甲醛水溶液(1.26當量)。於室溫攪拌15min後，歷經2h將所得溶液加入到由181.8g富馬酸二乙酯(1035mmol)、1.2l THF和2.5ml三氟乙酸(0.03當量)組成的熱(50-55℃)溶液中。反應完全後(通過GC或HPLC進行IPC)，將反應混合物冷卻至室溫，如前述實施例中所述進行後處理，得到301.8g預期的環加合物。
步驟2-3脫苄基/Boc保護
於室溫將1.295kg(外消旋)-反式-1-苄基-吡咯烷-3，4-二甲酸二乙酯在含有100g10％Pd/C催化劑的6.5l EtOH中氫化。反應完全後，濾出催化劑，加入935g二碳酸二叔丁酯(1.01當量)在480ml EtOH中的溶液。反應完全後(在過程過程中進行GC)，將反應混合物蒸發，溶於9.7l THF中。加入8ml水，然後加入5.3g DMAP(0.01當量)。於室溫將反應混合物攪拌30min，濃縮至幹。將殘餘物溶於6.5l MTBE中，用1.29l 5％枸櫞酸水溶液、3.3l 10％NaHCO3水溶液和3.3l水洗滌。將水相連續用6.5l MTBE再次萃取。將合併的有機相通過Na2SO4乾燥，於40℃濃縮至幹，得到1.233kg粗(外消旋)-反式-N-Boc-吡咯烷-3，4-二甲酸二乙酯。
注釋當用Lipolase 100L型EX酶進行酶法拆分時，可以省略DMAP淬滅。
步驟4酶法拆分(Lipolase)
在劇烈攪拌下將32g(外消旋)-反式-N-Boc-吡咯烷-3，4-二甲酸二乙酯(96.19mmol，95a％GC)在32ml庚烷和256ml 0.1M磷酸鈉緩衝液(pH7.0)中乳化。將乳液冷卻至0-1℃。加入2.30ml Novozyme Lipolase 100L型EX(諾維信公司)，自動加入(pH恆定器)1.0M NaOH溶液使pH保持恆定在7.0。達到目標對映異構體過量後(通常＞99％，反應時間約45h，加入0.55當量NaOH，在過程過程中進行GC)，加入250ml二氯甲烷。分離水相，用500ml二氯甲烷萃取2次。將合併的有機相蒸發，在此期間形成白色沉澱物。將殘餘物再次溶於250ml乙酸乙酯中，將白色沉澱物濾除。將濾液用75ml飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。將有機相通過硫酸鈉乾燥，蒸發，在高真空下乾燥過夜，得到13.47g淡黃色油狀的(3R，4R)-反式-N-Boc-吡咯烷-3，4-二甲酸二乙酯(通過GC測得純度為96％)。
或者，可以將產物用庚烷或MTBE、優選庚烷萃取。還可以將NaCl加入到水相中以幫助相分離。
步驟5選擇性單水解
將2.95kg(3R，4R)-反式-N-Boc-吡咯烷-3，4-二甲酸二乙酯在26.5l 5mM磷酸鉀水溶液/1M D-葡萄糖緩衝液中攪拌，形成乳液。加入溶於0.5l水中的5.9g脂酶OF(名糖產業株式會社)。加入1M NaOH使pH保持在7.2。反應完全後(8.4kg 1M NaOH，反應時間24h，在過程過程中進行GC)，加入10lMTBE。分離並棄去有機層。加入40l乙酸乙酯，加入H2SO4將pH調至4。分離有機層，將水相用40l乙酸乙酯再次萃取。將合併的有機相蒸發至幹，得到2.35kg(3R，4R)-反式-N-Boc-吡咯烷-3，4-二甲酸單乙酯。
(3R，4R)-反式-N-Boc-吡咯烷-3，4-二甲酸單乙酯可以在丙酮/水中結晶 將3.2kg(3R，4R)-反式-N-Boc-吡咯烷-3，4-二甲酸單乙酯溶於3.2l丙酮中。於室溫向該溶液中加入3.2l 0.1％乙酸水溶液。向渾濁的溶液加入晶種。15min後開始結晶。另外30min後，加入30l水，於室溫將混懸液攪拌22h。將混懸液過濾。將濾餅分批用總共7l的水洗滌，乾燥至恆重，得到3.295kg白色粉末狀的(3R，4R)-反式-N-Boc-吡咯烷-3，4-二甲酸單乙酯一水合物。
步驟6第一個醯胺偶聯
將135g反式-N-Boc-吡咯烷-3，4-二甲酸單乙酯一水合物混懸於700ml甲苯中，濃縮至150-200ml(60℃套層溫度，在約100mbar下；共沸除去水，通過卡爾-費休(Karl Fischer)分析檢查殘餘水含量)。加入400ml THF，然後加入55ml N-甲基嗎啉(1.11當量)。歷經30min將所得溶液加入到60ml(1.04當量)氯甲酸異丁酯在900ml THF中的冷(0-5℃)溶液中。將加液漏鬥用50ml THF洗滌。於0-5℃將白色混懸液攪拌15min。一次性加入90g氟苯胺(1.0當量)，將反應混合物加熱回流。反應完全後(在過程控制中進行HPLC)，將反應混合物冷卻至室溫。加入900ml甲苯，然後加入500ml 1M HCl。分離水相，用900ml甲苯萃取。將有機相連續用500ml 1M HCl和500ml 5％NaHCO3水溶液洗滌。合併有機相，通過Na2SO4乾燥，濃縮至約500ml(60℃套層溫度)。通過以恆定的體積與約1l甲苯共沸蒸餾而除去異丁醇(通過GC檢查異丁醇除去)。然後將粗產物溶液濃縮至337g(在甲苯中的60％m/m溶液，其直接用於下一步，相當於97％產率)。
或者，反應可以於室溫用LiCl活化進行將10g一元酸單酯一水合物(32.75mmol，1當量)溶於100ml THF中，經MgSO4乾燥，過濾，濃縮至幹，與4.15ml N-甲基嗎啉(1.15當量)一起重新溶於30ml THF中。歷經15min將該溶液加入到4.46ml氯甲酸異丁酯(1.0當量)在50ml THF中的冷(0-5℃)溶液中。於0-5℃達1.5h後(保持時間可以更短，因為活化步驟主要受加料控制。這還可以減少任何混合酸酐分解)，加入1.4g氯化鋰(1.0當量)，然後加入6.88g苯胺(先加入苯胺、然後加入LiCl也是可能的)。於室溫反應18h後，加入150ml甲苯。將反應混合物用60ml 1N HCl、60ml 5％NaHCO3水溶液和60ml半飽和NaCl水溶液洗滌2次。將水相連續用100ml甲苯再次萃取。合併有機相，經MgSO4乾燥，過濾，在減壓下於45℃濃縮至幹，得到15.92g泡沫狀物(約97％產率，含有約4％甲苯)。必須保證異丁醇被除去。另外的共沸除去是可能的，參見前述實施例。
步驟7第二個醯胺偶聯
將在甲苯中的337g 60％m/m醯胺酯(參見上一步)溶液(431mmol，1當量)加入到反應器中，然後加入650ml THF。加入86g 5-氯-2-氨基吡啶(1.5當量)。歷經30min加入1.2l在THF中的1M LiHMDS溶液，同時保持溫度為20-25℃。反應完全後(在過程控制中進行HPLC)，加入由300ml 37％HCl水溶液在1.2l水中組成的溶液(pH1-2)。加入2l二氯甲烷，分離有機相，用1l水洗滌。將水相連續用1l二氯甲烷萃取。將合併的二氯甲烷相濃縮至體積為2.5-3.5l。以恆定的體積進行與乙醇的溶劑交換(60℃套層溫度，400至100mbar，總共5l乙醇)，在此期間開始結晶。將混懸液冷卻至室溫，於室溫攪拌過夜，於0-5℃攪拌2h。將混懸液過濾，將濾餅用250ml冷(-20℃)EtOH洗滌4次。於45℃在減壓下將結晶乾燥至恆重，得到180g白色粉末狀的預期的Boc-吡咯烷雙醯胺(75％產率)。
步驟8-9Boc脫保護/烷基化
於室溫將53.2g Boc-吡咯烷雙醯胺(95.7mmol，1當量)分批加入到由160ml水和160ml 37％HCl水溶液(20當量)組成的溶液中。反應完全後(約30min，在過程控制中進行HPLC)，歷經1h將所得溶液加入到由197g碳酸氫鈉(24.5當量)、320ml水、530ml乙酸乙酯和23g三氟甲磺酸2，2-二氟乙基酯(1.1當量)組成的熱(50℃)溶液中。將加液漏鬥用15ml水洗滌。反應完全後(約30min，在過程控制中進行HPLC)，將反應混合物冷卻至室溫。分離水相，用530ml乙酸乙酯再次萃取。將有機相連續用265ml半飽和NaCl溶液洗滌。將合併的乙酸乙酯相通過Na2SO4乾燥，過濾。將Na2SO4濾餅用230ml乙酸乙酯洗滌。與乙醇進行溶劑交換並於室溫結晶過夜後，將所得混懸液冷卻至-20℃。於-20℃達1h後，將混懸液過濾，用總共100ml冷(-20℃)乙醇分批洗滌。將結晶乾燥至恆重(50℃/減壓)，得到40g白色粉末(78％產率)。
實施例2通過環加成/Boc保護獲得Boc-吡咯烷中間體4的供選途徑 1.新的[3+2]環加成
將50g三甲基甲矽烷基甲胺(475mmol，1當量)溶於500ml THF中，於室溫用71.7ml 37％甲醛水溶液(2當量)處理。在該溫度下15min後，歷經10min將所得溶液加入到83.4ml富馬酸二乙酯在500ml THF中的60℃熱溶液中。將反應混合物回流過夜。將反應混合物冷卻至室溫，濃縮至幹。將殘餘物重新溶於1l MTBE中，用500ml 1M HCl水溶液萃取。在劇烈攪拌下，將500ml MTBE加入到水相中，然後加入500ml 1M NaOH。分離水相，用250ml MTBE再次萃取。將合併的有機相用250ml飽和NaCl水溶液洗滌，經MgSO4乾燥，過濾，濃縮至幹，得到83.3g油狀的粗環加合物縮醛胺(80％產率)。該產物可以含有一定量的水解縮醛胺。
2.由縮醛胺直接進行Boc-保護
將來自上一步的79.8g環加合物縮醛胺(180mmol，1當量)溶於798mlTHF中。於室溫在攪拌下依次加入320ml水和86.8g二碳酸二叔丁酯(2.16當量)。於室溫將澄清的雙相反應混合物攪拌過夜(在過程控制中進行TLC)。反應完全後，加入225mg DMAP以破壞過量的二碳酸二叔丁酯。在減壓下蒸發THF，加入1l MTBE。將粗產物溶液用0.8l 1N HCl水溶液洗滌。將水相用1l MTBE再次萃取。將合併的有機相用500ml水洗滌，經MgSO4乾燥，濃縮至幹，得到96.6g預期的Boc-保護的吡咯烷(87％產率)，為油狀。
或者，可以在MTBE/水混合物中進行Boc保護，這允許進行容易且直接的萃取。但是，在這種情況下，如上所述用DMAP進行Boc2O淬滅是不可能的。但是這沒有問題，因為粗產物可以如「實施例1步驟4.用Lipolase進行拆分」中所述直接用於下述酶步驟。
實施例3酶途徑B 步驟1環加成
將180g N-苄基-三甲基甲矽烷基甲基胺(903mmol，1當量)溶於1.25lTHF中，用87.2ml 37％甲醛水溶液(1.28當量)處理。於室溫15min後，加入134g富馬酸二甲酯(1當量)和1.4ml三氟乙酸(0.02當量)在625ml THF中的混懸液。將反應混合物攪拌直至完全(在過程過程中進行GC，約5h)，同時保持溫度為20至35℃。加入1l庚烷，然後加入966ml 1M HCl水溶液和200ml水的混合物。分離有機相，用450ml 1M HCl水溶液和1l水的混合物萃取。在劇烈攪拌下，將1l MTBE加入到合併的水相中，然後加入150ml 32％NaOH水溶液。分離水相，用1l MTBE再次萃取。將合併的有機相用500ml水洗滌，經MgSO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮，得到238g黃色油狀的環加合物(95％產率)。
步驟2脫苄基
將235g N-苄基吡咯烷溶於2.35l MeOH中，於室溫、在大氣氫壓力下、在47g 20％Pd(OH)2/C的存在下氫化。反應完全後，濾除催化劑，在減壓下將濾液濃縮至幹，得到147.7g胺(93％產率)。或者，也可以使用Pd/炭。
步驟3烷基化
將125g胺(668mmol，1當量)溶於625ml乙腈中。加入178g 3-硝基苯磺酸二氟乙基酯(1當量)和114ml乙基二異丙基胺(1當量)。將反應混合物加熱回流直到反應完全(在過程過程中進行GC，約20h)。將反應混合物冷卻至室溫，濃縮至幹。加入500ml MTBE和250ml 10％Na2CO3水溶液。分離有機相，用25％NH4Cl水溶液洗滌2次。將水相連續用500ml MTBE再次萃取。合併有機相，通過Na2SO4乾燥，過濾，濃縮至幹，得到162.8g二氟乙胺產物(84％產率，通過GC測得約86a％)。
如果需要的話可以將產物純化或者產物可以直接用於下一步驟。
步驟4酶法拆分
實施例a) 將132.5g(外消旋)-反式-二甲酯(454mmol，1當量，通過GC測得純度為86％)在1.2l 0.05M醋酸鎂水溶液(pH6)中攪拌。加入乙酸將所得乳液(pH8.2)的pH調至6.5。然後加入9.7ml諾維信CALB L(諾維信公司)，從而引發反應。自動加入1M NaOH(pH恆定器)使pH保持恆定在6.5。反應完全後(達到了目標e.e.，通常＞99％e.e.，反應時間約90h，加入0.57當量NaOH，在過程過程中進行GC)，加入1l二氯甲烷。將pH調至7。分離水相，用1l二氯甲烷再次萃取3次。將有機相用400ml飽和NaHCO3溶液和400ml水洗滌。合併有機相，通過Na2SO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮至幹，得到64.2g粗(R，R)-二酯(49％產率，通過GC測得純度為88％)。
實施例b) 將500g(外消旋)-反式-二甲酯(1.839mol，1當量，通過GC測得純度為92.4％)在4.5l 0.05M醋酸鎂水溶液(pH6)中攪拌。加入乙酸將所得乳液的pH調至6.5。然後加入40ml諾維信CALB L(諾維信公司)，從而引發反應。自動加入1M NaOH(pH恆定器)使pH保持恆定在6.5。反應完全後(達到了目標e.e.，通常＞99％e.e.，反應時間約69h，加入0.55當量NaOH，在過程過程中進行GC)，加入100ml二氯甲烷。加入1kg氯化鈉，將反應混合物用5lMTBE萃取2次。將合併的有機相用2l飽和NaHCO3溶液和2l水洗滌。將有機相通過Na2SO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮至幹，得到215.5g粗(R，R)-二酯(43％產率，通過GC測得純度為92％)。
步驟5酶單水解
實施例a) 將63.1g粗(R，R)-二酯在730ml 0.1M NaCl水溶液/3.8M磷酸鈉緩衝液(pH7)中攪拌。於室溫向所得乳液中加入210μl工業級豬肝臟酯酶(工業級；目錄號10491228；羅氏應用科學公司)。自動加入1M NaOH水溶液使pH保持在7.0。反應完全後(消耗了240ml 1M NaOH，反應時間約75h，在過程過程中進行GC)，加入1l二氯甲烷。分離並棄去有機相。加入25％HCl水溶液將水相的pH調至3.5。將水相用1l乙酸乙酯萃取。將pH調節和萃取步驟重複4次。將合併的有機相通過Na2SO4乾燥，過濾，濃縮至幹，得到41.8g一元酸單酯(通過GC測得純度為98％，78％產率)。
實施例b) 在裝配有機械攪拌器、溫度計、pH探針和與pH恆定器連接的滴定劑入口的750ml四頸瓶中，在劇烈攪拌下將38g(R，R)-二酯(141.3mmol；GC-純度93.4％)在340ml 0.1M氯化鈉/3.8mM磷酸鈉緩衝液(pH7.0)中乳化。加入240ul豬肝臟酯酶(工業級，3.12MU/L；羅氏應用科學公司)使反應開始，在劇烈攪拌下自動加入(pH恆定器)1.0M NaOH溶液使pH保持恆定在7.0。消耗137.3ml 1.0M NaOH溶液(137mmol，46h後有97.2％轉化)後，加入20ml二氯甲烷使反應終止，用760ml MTBE洗滌。加入139ml濃磷酸鈉溶液(將63ml磷酸加入到76ml 28％NaOH中)將水相調至pH3.6，用3×760ml乙酸乙酯萃取。將合併的乙酸乙酯相通過硫酸鈉乾燥，過濾，蒸發，乾燥，得到29.4g白色固態的(R，R)-一元酸(86％)。
粗一元酸單酯的結晶在加熱下將56.37g粗一元酸單酯溶於200ml乙酸乙酯中。將該溶液冷卻至室溫，緩慢加入400ml庚烷。向渾濁的溶液中加入晶種。於室溫1h後，將混懸液過濾。於45℃在減壓下將濾餅乾燥，得到46.82g白色粉末。將母液蒸發，重新溶於20ml乙酸乙酯中。加入60ml庚烷。於室溫3h後，將混懸液過濾。於45℃在減壓下將濾餅乾燥，得到7.12g白色粉末。總共分離出53.94g一元酸單酯。
步驟6第一個醯胺偶聯
實施例a) 將1g一元酸單酯(4.2mmol，1當量)與465ul N-甲基嗎啉(1當量)一起溶於3ml THF中。歷經20min將該溶液逐滴加入到575ul氯甲酸異丁酯在5mlTHF中的冷(0-5℃)溶液中。於0-5℃達1h後，加入181mg氯化鋰(1當量)，然後加入861mg氟苯胺(1當量)。於室溫將反應混合物攪拌直到反應完全(在過程控制中進行HPLC，約1-3h)。加入7ml水、20ml乙酸乙酯和10ml 1M HCl水溶液。分離有機相，用10ml 1M HCl水溶液再次萃取。加入飽和Na2CO3將合併的水相的pH調至9-10，用50ml乙酸乙酯萃取2次。將合併的有機相經MgSO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮至幹，得到1.72g醯胺酯(通過HPLC測得純度為96％，96％產率)。
實施例b) 將20g一元酸單酯(84.3mmol，1當量)與9.29ml N-甲基嗎啉(1當量)一起溶於60ml THF中。歷經20min將所得溶液逐滴加入到11.49ml氯甲酸異丁酯(1當量)在100ml THF中的冷(0-5℃)溶液中。於0-5℃達1h後(該保持時間可以更短，因為活化受加料控制)，加入17.22g氟苯胺(1當量)，然後加入3.57g氯化鋰(1當量)。將反應混合物溫熱至室溫。反應3h後，加入140ml水、400ml乙酸乙酯和2001M HCl。分離有機相，用200ml 1M HCl再次萃取。合併水相，加入160ml飽和Na2CO3水溶液將pH調至-10。將所得混合物用400ml乙酸乙酯萃取2次。合併有機相，經MgSO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮至體積為約140ml(結晶可以已經開始)。緩慢加入420ml庚烷。於室溫將所得混懸液攪拌3h，過濾。在減壓下將濾餅乾燥，得到31.1g產物(87％產率)。
步驟7第二個醯胺偶聯
實施例a) 將465mg 5-氯-2-氨基吡啶(1.5當量)與1g醯胺酯(2.36mmol，1當量)一起溶於8ml THF中。將該溶液冷卻至0-2℃，逐滴加入7.1ml在THF中的1MLiHMDS溶液(3當量)。反應完全後(約2h，在過程控制中進行HPLC)，加入2M HCl水溶液(約6ml，5當量)將pH調至3.5。將反應混合物用15ml乙酸乙酯萃取2次。將有機相連續用13ml水洗滌。將合併的有機相經MgSO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮至幹，得到1.27g粗的式(X)化合物。
實施例b) 將13.94g 2-氨基-5-氯吡啶(1.5當量)和30g單酯單醯胺(70.85mmol，1當量)溶於240ml THF中。將該溶液冷卻至0-2℃，歷經20min加入212.6ml在THF中的1M LiHMDS溶液(3當量)。反應1.5h後(在過程控制中進行HPLC)，歷經15min加入245ml 2M HCl水溶液，同時保持溫度為0-10℃(所得混合物的pH3.2)。將所得混合物用350ml乙酸乙酯萃取2次。將有機相連續用200ml半飽和NaCl水溶液洗滌，合併，通過Na2SO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮，得到粗產物，然後將其通過從1∶2乙醇/庚烷混合物中結晶進行純化(85％產率)。
支線13-硝基-苯磺酸二氟乙基酯
將194g 3-硝基-苯磺醯氯(1.13當量)加入到反應容器中，然後加入1.3l醋酸異丙酯，將該溶液冷卻至0-5℃。歷經30min逐滴加入65g 2，2-二氟乙醇(753mmol，1當量)、163ml三乙胺(1.55當量)和325ml醋酸異丙酯的溶液，同時保持溫度為0-5℃。反應4h後(在過程控制中進行HPLC)，將反應混合物用650ml水洗滌。將水相用650ml醋酸異丙酯再次萃取。將有機相用650ml1M HCl水溶液和650ml 10％NaCl水溶液洗滌。合併有機相，經MgSO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮至幹，得到196g粘稠油狀的3-硝基苯磺酸2，2-二氟乙基酯(97％產率)，其在放置後結晶。該產物還可以從異丙醇中結晶(於30℃加入晶種，濃度約13L/kg產物)。
支線2氟苯胺方法A
將44g 4-溴-2-氟苯胺(229mmol，1當量)、31.5g 2-羥基吡啶(1.4當量)、34.80g碳酸鉀(1.1當量)、6.55g碘化亞銅(I)(0.15當量)加入到反應容器中，然後加入100ml N，N-二甲基乙醯胺。於155℃(套層溫度)將該混懸液加熱4h(在過程控制中進行HPLC)。將反應混合物冷卻至120℃(套層溫度)，歷經30min加入400ml水，將反應混合物緩慢冷卻至室溫。30min後，將反應混合物冷卻至0-5℃，在該溫度下保持1h，過濾。將濾餅用200ml水(0-5℃)洗滌，於70℃在減壓下將結晶乾燥過夜，得到43.1g粗產物。將粗產物與5g活性炭Norit SX-3一起混懸於1l乙醇中，加熱回流30min。將熱混懸液經高壓濾器(帶有炭板)過濾。將濾餅用200ml熱乙醇洗滌。於60℃在約180mbar下將濾液濃縮至約500ml。然後於室溫將混懸液攪拌30min，然後於0-2℃攪拌30min，最後過濾。將結晶分批用總共50ml的冷(0℃)乙醇洗滌，於60℃在減壓下乾燥至恆重，得到33.9g產物(72％產率)。
支線2氟苯胺方法B 將50g(263mmol)4-溴-2-氟苯胺、25g(263.1mmol)2-羥基吡啶和19.4g(0.5當量)氧化亞銅(I)加入到反應容器中。加入100ml吡啶，將混懸液加熱回流14h(在過程控制中進行HPLC，＜3a％4-溴-2-氟苯胺)。將100ml吡啶加入到深色反應混合物中，同時保持溫度為85-95℃。於85-95℃歷經15-30min加入200ml水。歷經3h將深色溶液冷卻至0℃(如果在40℃不自發發生結晶，則在40℃向溶液中加入0.5g晶種-如果需要的話可以在30-40℃重複加入晶種)。於0℃將深色混懸液攪拌30min至1h，過濾。將濾餅用100ml冷(4-10℃)水洗滌3次。於60-65℃在減壓下將結晶乾燥至恆重，得到28.9g產物(94％m/m純度，50％產率)。對於粗產物質量不適宜的情況，其可以通過在熱MeOH中進行炭處理、然後趁熱過濾和在MeOH中結晶來提高。
支線2氟苯胺方法C 將3.0g(15.8mmol)4-溴-2-氟苯胺、1.5g(15.8mmol.1.0當量)2-羥基吡啶、0.47g(3.16mol，0.2當量)氧化亞銅(I)、347μl(3.16mmol，0.2當量)N，N』-二甲基乙二胺和2.4g(17.4當量，1.1當量)碳酸鉀加入到反應容器中。加入34ml甲苯，將混懸液加熱回流16h(在過程控制中進行HPLC，＜1a％4-溴-2-氟苯胺)。將10ml甲苯加入到深色反應混合物中，同時保持溫度為85-95℃。於85-95℃歷經15-30min加入45mL水。通過冷卻至0℃使深色溶液結晶，於0℃攪拌30min至1h，過濾。將濾餅用25ml冷(4-10℃)水洗滌3次。於60-65℃在減壓下將結晶乾燥至恆重，得到3.0g產物(79％m/m純度，75％產率)。對於粗產物質量不適宜的情況，其可以通過在熱MeOH中進行炭處理、然後趁熱過濾和在MeOH中結晶來提高。
支線2氟苯胺方法D 將20g 4-溴-2-氟苯胺(103mmol，1當量)和15.16g(155mmol，1.5當量)2-羥基吡啶加入到反應容器中，然後加入40ml二甲基乙醯胺。加入15.7g(1.1當量)碳酸鉀和760mg(0.05當量)Cu2O。於130℃將該混懸液加熱18h(在過程控制中進行HPLC)。加入70ml N，N-二甲基乙醯胺。將反應混合物冷卻至100℃。加入60ml水，將反應混合物緩慢冷卻至室溫(結晶在約40℃時開始，如果需要的話可以加入晶種)。加入27ml 2M HCl水溶液將pH調至8。將混懸液冷卻至0℃，於0℃攪拌2h。將混懸液過濾，將濾餅用50ml水和80mlMTBE洗滌。於60℃將結晶乾燥至恆重，得到15.2g產物(93a％，約67％產率)。對於粗產物質量不適宜的情況，其可以通過在熱MeOH中進行炭處理、然後趁熱過濾和在MeOH中結晶來提高。
支線2氟苯胺方法E 步驟1
將10g 4-溴-2-氟苯胺(51.6mmol，1當量)、8.26g Na2CO3(1.5當量)和60ml DMF加入到反應容器中，然後加入13.13ml苄基溴(2.1當量)。於100-110℃將反應混合物加熱約2-4h(在過程控制中進行HPLC)，然後將其冷卻至室溫。將反應混合物加入到120ml水和200ml MTBE的混合物中(在攪拌下)。分離有機相，用120ml水洗滌，經MgSO4乾燥，過濾。將溶劑與庚烷交換，終濃度為約1∶3m/v產物/庚烷。於約70℃將所得混合物加熱，冷卻至室溫，然後於0℃冷卻1h。將所得的白色混懸液過濾，用冷(0-5℃)庚烷洗滌，乾燥至恆重(50℃/5-10mbar)，得到14.4g灰白色粉末。
步驟2
於室溫將20g二苄基苯胺(48.64mmol，1當量)溶於40ml N，N-二甲基乙醯胺中。依次加入7.15g 2-羥基吡啶(1.5當量)、717mg Cu2O(0.1當量)和7.39g K2CO3(1.1當量)。於130℃將反應混合物加熱約23h(在過程控制中進行HPLC)，然後冷卻至室溫。加入100ml二氯甲烷和200ml 2M HCl。分離有機相，用200ml 2M HCl洗滌。將水相用100ml二氯甲烷萃取。將合併的有機相經MgSO4乾燥，於45℃在減壓下濃縮至恆重。將所得的粗固體(約20g)在150ml AcOEt中加熱直到溶解。緩慢加入100ml庚烷直到獲得混濁的溶液。將該混合物緩慢冷卻至室溫。約30min後開始結晶(如果沒有開始，可以加入晶種)。於室溫另外攪拌1h後，將混懸液過濾。將濾餅用40ml庚烷與AcOEt的1∶1混合物洗滌，於50℃在減壓下乾燥至恆重，得到16g灰白色粉末(83％產率)。
步驟3
將4g二苄胺溶於80ml MeOH與80ml AcOEt的混合物中。加入400mg5％Pd/C(Johnson Matthey)。於室溫在H2的大氣壓力下進行氫化。通過氣體吸收和HPLC監測氫化以避免(吡啶酮環)過度氫化。反應完全後，將反應混合物過濾以除去催化劑，將濾餅用40ml MeOH洗滌。將濾液在減壓下濃縮，得到2g粗產物。加入25ml MeOH，將該混合物加熱直到完全溶解。將溶液冷卻至室溫，攪拌4h。將所得混懸液過濾。將濾餅用2ml冷(0-5℃)MeOH洗滌，於50℃在減壓下乾燥至恆重，得到1.5g灰白色粉末(72％產率)。
實施例4通過脫保護/游離鹼形成/烷基化/醯胺形成將醯胺酯轉化為化合物(X)的供選途徑 步驟1Boc脫保護
將15g粗Boc-吡咯烷(31.68mmol，1當量)溶於150ml乙醇中。於室溫歷經20min加入13.64ml乙醯氯(6當量)。反應20h，在此期間形成混懸液，然後歷經5min加入150ml MTBE。90min後，將混懸液過濾，在減壓下於45℃將濾餅乾燥，得到12.07g鹽酸鹽(約2-3HCl.，約90％產率)。
步驟2游離鹼形成
將1.79g(4mmol，1當量，作為雙鹽酸鹽採用，n＝2)鹽酸鹽(見前述步驟)混懸於50ml AcOEt與9ml乙醇的混合物中。加入10ml 5M NH3乙醇溶液(20mmol，5當量)，於室溫將混懸液攪拌70h，過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到1.5g游離胺(定量產率)。
或者，可以通過在鹼性pH下萃取而釋放胺鹽酸鹽。
步驟3烷基化
將3g(8mmol，1當量)胺與2.39g(1當量)3-硝基-苯磺酸二氟乙基酯和1.5ml(1.1當量)乙基二異丙基胺一起溶於15ml乙腈中。於80℃將該溶液加熱22h(在過程控制中進行HPLC)。將反應混合物冷卻至室溫，在減壓下濃縮。將殘餘物重新溶於30ml AcOEt中。加入15ml 10％K2CO3水溶液。將該混合物過濾。從雙相濾液中分離出有機相，用15ml 10％K2CO3水溶液洗滌2次。將水相連續用30ml AcOEt再次萃取。合併有機相，經MgSO4乾燥，在減壓下濃縮至體積為約10ml。緩慢加入35ml MTBE，產生渾濁的溶液。向後者加入晶種，於室溫攪拌1h，進行部分濃縮，由此開始結晶。於室溫攪拌2h後，將混懸液過濾。於45℃在減壓下將濾餅乾燥，得到2.56g淡黃色結晶(72％產率)。
或者，a)產物還可以通過例如色譜法進行純化。b)在萃取過程中還可以使用Na2CO3水溶液代替碳酸鉀溶液。
步驟4第二個醯胺形成
將1.04g(7.9mmol，1.5當量)5-氯-2-氨基吡啶、2.3g(5.3mmol，1當量)醯胺酯和18.4ml THF加入到反應容器中，將所得混合物冷卻至0-5℃。歷經20min加入15.8ml(3當量)在THF中的1M LiHMDS溶液。反應3h後(在過程控制中進行HPLC)，加入18ml(6.85當量)2M HCl水溶液(pH3.3)。將所得混合物用92ml AcOEt萃取2次。將有機相連續用23ml飽和NaCl水溶液洗滌，合併，經MgSO4乾燥，在減壓下濃縮，得到2.78g粗產物。可以通過色譜法或者從EtOH或乙醇/庚烷中結晶將產物純化。
實施例5環酐方法 步驟1環加成
於20-25℃將25g三氟甲磺酸二氟乙基酯(117mmol，1當量)逐滴加入到16ml三甲基甲矽烷基甲基胺(1當量)和20ml乙基二異丙胺(1當量)在225mlTHF中的溶液中。2h後，將反應混合物用11.46ml 37％甲醛水溶液(1.3當量)處理。於室溫10min後，加入由34.61g馬來酸二苄基酯(1當量)、12.5ml THF和913ul三氟乙酸(0.1當量)組成的溶液。反應17h後，將反應混合物濃縮至約80ml。加入125ml MTBE和104ml 1M HCl水溶液(2.5當量)。分離水相，用62.5ml MTBE再次萃取。將有機相用125ml水和167ml半飽和NaHCO3水溶液洗滌，合併，經MgSO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮至幹，得到45.5g粗的環加合物(約86％產率，含有約11％m/m馬來酸二苄基酯)。
可以例如通過色譜法將粗產物純化，但是其可未經純化而更方便地被引入下一步驟。
步驟2氫化
將45.5g粗的二苄酯(100mmol，1當量，89％純m/m，見上述步驟)溶於364ml乙醇中，然後加入32.15ml三乙胺(2.3當量)和2.1g 10％Pd/C。在氫的大氣壓力下將二苄酯氫化。反應完全後，濾除催化劑，加入80.7ml乙酸，然後加入晶種。在減壓下於40℃蒸餾除去乙醇(於60℃觀察到顯著的順式向反式的異構化)。於室溫將所得混懸液攪拌過夜，過濾。將結晶用20ml乙酸、60ml MTBE洗滌，在減壓下乾燥，得到14.6g白色粉末狀的二元酸(60％產率，含有約9％m/m殘餘乙酸)。
步驟3環酐形成
將14.3g二元酸(58.6mmol，1當量，92％m/m)混懸於143ml乙酸中。加入27.7ml醋酸酐(5當量)，將反應混合物加熱到60℃。1h後，得到溶液。3h後，將反應混合物冷卻至室溫，濃縮至無色油狀物，向其中加入50ml二異丙醚。向溶液加入晶種。於室溫攪拌1h後，將混懸液過濾。將結晶用二異丙醚洗滌，於50℃在減壓下乾燥，得到7.8g白色粉末狀的酐。將母液濃縮至幹，將殘餘的油狀物用50ml二異丙醚和晶種處理，在過濾、洗滌和乾燥後，得到第二批酐(3.2g)。總產率91％。
步驟4環酐的開環
實施例a) 將由16.94g奎寧(1當量)和9.3ml 2-苯基乙醇(1.5當量)在120ml THF中組成的溶液冷卻至-20至-15℃。逐滴加入10.5g酐(51.2mmol，1當量)在30mlTHF中的溶液。反應4h後(在過程控制中進行HPLC或者進行帶有ReactIRiC10系統的在線FTIR光譜法)，將所得混懸液溫熱至室溫過夜，濃縮至幹，得到43.5g粗的酯酸，為奎寧鹽(通過HPLC測得92∶8d.r.)。將粗鹽混懸於50ml醋酸異丙酯和50ml水的混合物中。加入20ml 25％HCl水溶液將pH調至1。分離水相，用50ml醋酸異丙酯洗滌。將有機相用25ml 1M HCl再次萃取。合併水相，冷卻至0-2℃，加入32％NaOH水溶液將pH調至3.0。產物開始結晶。於0-2℃攪拌2h後，將混懸液過濾。將濾餅用50ml冷(0-2℃)水洗滌，於60℃在減壓下乾燥，得到14.8g白色粉末狀的產物(88％產率，95∶5d.r.)。
實施例b) 在-20至-15℃將40g酐(195mmol，1當量)在150ml THF中的溶液逐滴加入到由71g奎寧(1.1當量)和36.1g 2-苯基乙醇(1.5當量)在750ml THF中組成的溶液中。反應過夜後(在過程控制中進行HPLC或者進行帶有ReactIRiC10系統的在線FTIR光譜法)，將所得混懸液溫熱至室溫，加入250ml水。於40℃在減壓下蒸餾除去THF。將125ml MTBE加入到所得的水混懸液中，加入125ml 25％HCl水溶液將pH調至約1。分離水相，用125ml MTBE洗滌。將有機相連續用62.5ml 1M HCl水溶液洗滌。合併酸性水相，冷卻至0-5℃。加入55ml 32％NaOH水溶液將pH調至3.0，由此沉澱出產物。於0-5℃將混懸液攪拌4h，過濾。將濾餅用125ml冷(0-5℃)水洗滌2次，於60℃在減壓下乾燥至恆重，得到59.9g白色粉末狀的半酯(95∶5e.r.，通過定量HPLC測得98.7％w/w，93％產率)。
步驟5差向異構化
實施例a) 將10.6g(順式)-酸酯(32.4mmol，1當量)溶於212ml THF中(得到溶液是重要的)。將該溶液冷卻至-70℃，加入5.56g叔丁醇鉀(1.5當量)。反應30min後(在過程控制中進行HPLC)，加入9.3ml乙酸(5當量)。將反應混合物加入到100ml水(pH6.5)中，加入1M HCl(約60ml 1.85當量)將pH調至3.0。在減壓下於40℃除去THF，由此開始結晶。於室溫將白色混懸液攪拌30min，過濾。將濾餅用冷水洗滌。於50℃在減壓下將結晶乾燥，得到8.0g白色粉末狀的反式-酯一元酸(76％產率，＞99％反式＜1％順式)。
或者，可以通過在二噁烷中加入HClg將反應物淬滅。
在加入KOtBu之前得到溶液是重要的。確實，有時已經在原料溶液冷卻至-70℃過程中觀察到了一些沉澱。在這些情況下，我們後來證明原料的溶解度釋如此低以致於它反應不完全，從而得到低的反式/順式選擇性。此處是避免這個問題的改進方法。可以通過形成適當的可溶性胺鹽如其三乙胺鹽而將原料保持在於THF中的溶液中 實施例b) 將50g順式-一元酸單酯(151mmol，1當量)加入到反應容器中，然後加入850ml THF和21ml三乙胺(1當量)。將所得溶液冷卻至-70℃，逐滴加入25.9gKOtBu(1.5當量)在100ml THF中的溶液，同時保持溫度＜-65℃。反應45min後(在過程控制中進行HPLC)，加入12.9ml乙酸(1.5當量)將反應物淬滅。將反應混合物溫熱至室溫，加入250ml水(所得的pH為約7.8)。於40℃在減壓下蒸餾掉THF。加入300ml乙酸乙酯，加入HCl 2M(約180ml，2.4當量)將pH調至3.0。分離水相，用150ml乙酸乙酯再次萃取。將有機相用250ml水洗滌，合併，在40℃/約150mbar下濃縮至約250ml。加入500ml庚烷，將混懸液加熱回流直到溶解。停止加熱，將溶液緩慢冷卻至室溫，在此期間開始結晶。於室溫攪拌過夜後，將混懸液過濾。將濾餅用200ml 1∶2乙酸乙酯/庚烷混合物洗滌，於50℃在減壓下乾燥至恆重，得到42.5g白色粉末狀的反式半酯(86％產率，通過HPLC測得e.r.和d.r.＞99＜1，低於檢測限)。
步驟6第一個醯胺偶聯
實施例a) 將500mg反式-酸酯(1.58mmol，1當量)與168ul N-甲基嗎啉(1.0當量)一起溶於1.5ml THF中。將該溶液加入到208ul氯甲酸異丁酯(1當量)在2.5mlTHF中的冷(0-5℃)溶液中。反應30min後，加入65mg氯化鋰(1當量)，然後加入312mg苯胺(1當量)。然後於室溫將反應混合物攪拌2h(在過程控制中進行TLC或HPLC)。加入3.5ml水、15ml乙酸乙酯和5ml 1M HCl水溶液。分離有機相，用3.6ml 1M HCl水溶液再次萃取，棄去有機相。加入1.5mlNa2CO3將合併的水相的pH調至9-10，用25ml乙酸乙酯萃取2次。合併有機相，經MgSO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮至幹，得到720mg粗的醯胺酯(90％產率)。
實施例b) 歷經30min將40g反式酸酯(122mmol，1當量)和13.46ml(1當量)N-甲基-嗎啉在120ml THF中的溶液加入到氯甲酸異丁酯在200ml THF中的冷(0-5℃)溶液中。於0-5℃達60min後(反應受加料控制，因此該保持時間可以減少)，加入24.95g苯胺(1當量)和5.23g氯化鋰(1當量)。將反應混合物溫熱至室溫。反應完全後(約3h，在過程控制中進行HPLC)，加入280ml水、400ml乙酸乙酯和400ml 1M HCl。分離有機相，用200ml 1M HCl萃取。合併水相，加入170ml飽和Na2CO3水溶液將pH調至約9-10，用200ml乙酸乙酯萃取2次。合併有機相，經MgSO4乾燥，過濾，於45℃在減壓下濃縮，得到54.2g半固態油狀的醯胺酯(84％產率，對2％殘餘乙酸乙酯進行了校正)。
步驟7第二個醯胺偶聯
實施例a) 將197mg 2-氨基-5-氯吡啶(1.5當量)和500mg醯胺酯(0.97mmol，1當量)溶於4ml THF中。將該溶液冷卻至0-5℃。歷經5min加入2.9ml(3當量)在THF中的1M LiHMDS溶液。反應完全後(在過程控制中進行HPLC)，歷經15min加入2.5ml 1M HCl以將反應物淬滅並將pH調至3.5。將雙相混合物用7.5ml乙酸乙酯萃取2次。將有機相用6.3ml半飽和NaCl水溶液洗滌，合併，經MgSO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮至幹，得到720mg粗的式(X)化合物。
實施例b) 將8.9g 2-氨基-5-氯吡啶(1.5當量)和25g醯胺酯(45.3mmol，1當量)溶於200ml THF中。將該溶液冷卻至0-5℃。歷經20min逐滴加入136ml在THF中的1M LiHMDS溶液(3當量)。反應1h後(在過程控制中進行HPLC)，加入171ml 2M HCl水溶液將pH調至3.5。將反應混合物用100ml乙酸乙酯萃取2次。將有機相連續用100ml半飽和NaCl洗滌，經MgSO4乾燥，過濾，於45℃在減壓下濃縮，得到34.8g粗的化合物X。將粗產物溶於260ml乙醇中，歷經10min加入260ml庚烷。向澄清溶液中加入晶種。約15min後得到混懸液。於室溫60min後，歷經30min加入260ml庚烷。將混懸液於室溫攪拌30min，於0℃攪拌2h，過濾。將濾餅用50ml乙醇/庚烷的冷(0-5℃)1∶3混合物洗滌，於50℃在減壓下乾燥，得到21.5g白色粉末狀的化合物X(86％產率，對3％殘餘庚烷進行了校正，97.5a％HPLC，通過HPLC沒有檢測出(S，S)對映異構體和順式異構體)。
或者環酐可以通過以下順序製得 步驟1[3+2]環加成
將69.5g(三甲基甲矽烷基甲基)-胺(660mmol，1當量)溶於765ml THF中。加入99.7ml 37％甲醛水溶液(2當量)，同時保持溫度為20-25℃。於室溫攪拌15min後，歷經40min將所得溶液加入到200g富馬酸二苄酯(1當量)在765ml THF中的回流溶液中。反應20h後，將反應混合物冷卻至室溫，歷經10min將其加入到52.3g鹽酸羥胺(1.14當量)在400ml THF中的混懸液中。向所得澄清溶液中加入晶種，由此得到渾濁的溶液。迅速開始結晶。於室溫將白色混懸液攪拌1h，通過P3玻璃濾器過濾。將濾餅用72ml水洗滌，用400ml MTBE洗滌2次。於50℃在減壓下將結晶乾燥至恆重，得到215g吡咯烷鹽酸鹽(86％產率)。
步驟2游離鹼形成/烷基化
將188.5g鹽酸鹽(501.5mmol，1當量)混懸於700ml MTBE中。於0-5℃加入597ml 1M NaOH。分離所得的澄清雙相混合物，將水相(pH13)用350mlMTBE再次萃取。合併有機相，經MgSO4乾燥，在減壓下於40℃濃縮，得到166g無色油狀物(98％產率)。
將145g所得的油狀物(427mmol，1當量)重新溶於1.16l乙腈中。加入114g 3-苯磺酸二氟乙基酯(427mmol，1當量)，然後加入87.8ml乙基二異丙基胺(1.2當量)。將溶液加熱回流24h(＞90％轉化)，冷卻至室溫，在減壓下、於40℃濃縮至粘稠的橙色油狀物。將粗混合物溶於750ml AcOEt中，用Na2CO3水溶液、NH4Cl水溶液和水洗滌。將水相連續用AcOEt再次萃取。合併有機相，經MgSO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮，得到178.5g粗產物(80-85％m/m，＞90％產率)。
步驟3脫苄基
將175g來自上一步的粗雙酯溶於1.6l乙酸中，在大氣壓力下於60℃通過9.2g 10％Pd/C氫化。氫化完成後，於60℃將反應混合物過濾。將催化劑用175ml熱(60℃)乙酸洗滌。將濾液冷卻至室溫，加入800ml MTBE，產生渾濁的溶液。向該溶液加入晶種，於室溫攪拌1h。將950ml MTBE加入到混懸液中，然後於室溫將其攪拌過夜，然後於0℃攪拌3h。將混懸液過濾，將濾餅用100ml MTBE洗滌2次。在減壓下、於60℃將結晶乾燥，得到89.7g白色粉末狀的產物(90％產率)。
在MTBE/AcOH中結晶對粗反應混合物的純度是敏感的。或者，可以將反應混合物濃縮和將產物在EtOH中結晶。從水中(重)結晶也是可能的。
步驟4環酐形成
將50g(221mmol，1當量)二元酸混懸於150ml乙酸和24ml醋酸酐(1.15當量)的混合物中，於105℃加熱。1h後，得到澄清溶液。反應完全後(約5h，通過NMR進行IPC)，將反應混合物冷卻至50℃，於60℃、在約80mbar下濃縮至體積為約40-50ml(90g溶液)。於60℃加入400ml叔戊醇，於60℃、在約80mbar下將溶液濃縮至150g(與叔戊醇進行溶劑交換和除去AcOH)。將橙色溶液緩慢冷卻至40℃，由此開始結晶。於40℃歷經30min加入300ml庚烷。於室溫將混懸液攪拌過夜，過濾。將濾餅用100ml庚烷洗滌，在減壓下、於45-50℃乾燥至恆重，得到41g淡褐色粉末(約90％產率)。
製備二元酸33的供選方法
將20g雙酯(74.75mmol，1當量)溶於40ml THF和20ml水的混合物中。加入20.8ml 32％NaOH水溶液(3當量)，於50℃將反應混合物加熱2h(通過TLC進行IPC，AcOEt/庚烷3∶1，用KMnO4顯色)。通過於40℃在減壓下蒸餾而除去THF。將水相冷卻至室溫，用20ml AcOEt洗滌。通過於40℃在減壓下蒸餾而除去水相中殘餘的有機溶劑。將水相冷卻至室溫，緩慢加入25％HCl水溶液(約27ml)將pH調至3.5，由此產物結晶。於室溫將稠厚的混懸液攪拌過夜，過濾。將濾餅用20ml冷(0-5℃)水洗滌，於50℃在減壓下乾燥至恆重，得到13.5g白色粉末狀的預期二元酸(81％產率)。
權利要求
1.製備式(X)化合物的方法，
該方法包括如下步驟在雙相水性/有機溶劑條件下使式(9)化合物的游離鹼或式(9)化合物的鹽
與選自三氟甲磺酸二氟乙基酯和全氟丁磺酸二氟乙基酯的烷基化劑反應。
2.製備式(X)化合物的方法，
該方法包括如下步驟
a)使式(4)化合物的外消旋混合物進行對映選擇性酶水解，
得到式(5)化合物，
b)使式(5)化合物選擇性單水解，得到式(6)化合物或其水合物，
c)使式(6)化合物或其水合物與1-(4-氨基-3-氟-苯基)-1H-吡啶-2-酮進行偶聯，得到式(7)化合物，
d)使式(7)化合物與5-氯-2-氨基吡啶進行偶聯，得到式(8)化合物，
e)對式(8)化合物進行Boc脫保護，得到式(9)化合物或其鹽，
和
f)使式(9)化合物的游離鹼或式(9)化合物的鹽與烷基化劑反應，得到式(X)化合物，
其中R是C1-5烷基或者被一個或多個選自羥基、甲氧基、乙氧基和滷素的取代基所取代的C1-3烷基。
3.根據權利要求2的方法，其中通過使用來自米根黴的脂酶或來自疏棉狀嗜熱絲孢菌的脂酶進行步驟(a)，通過使用來自圓柱念珠菌的脂酶進行步驟(b)。
4.式(6』)化合物
5.製備式(6)化合物或其水合物的方法，
該方法包括如下步驟使用來自米根黴的脂酶或來自疏棉狀嗜熱絲孢菌的脂酶對式(4)化合物的外消旋混合物進行對映選擇性酶水解，
得到式(5)化合物，
和
通過來自圓柱念珠菌的脂酶使式(5)化合物選擇性單水解，
其中R是C1-5烷基或者被一個或多個選自羥基、甲氧基、乙氧基和滷素的取代基所取代的C1-3烷基。
6.製備式(X)化合物的方法，
該方法包括根據權利要求5的方法。
7.製備式(X)化合物的方法，
該方法包括
a)使式(4)化合物的外消旋混合物進行對映選擇性酶水解，
得到式(5)化合物，
b)使式(5)化合物選擇性單水解，得到式(6)化合物或其水合物，
c)使式(6)化合物或其水合物與1-(4-氨基-3-氟-苯基)-1H-吡啶-2-酮進行偶聯，得到式(7)化合物，
d)使式(7)化合物進行Boc脫保護，得到式(14』)化合物或其鹽，
e)使式(14)化合物的游離鹼或式(14)化合物的鹽與烷基化劑反應，得到式(16)化合物，
f)使式(16)化合物與5-氯-2-氨基吡啶進行偶聯，得到式(X)化合物，其中R是C1-5烷基或者被一個或多個選自羥基、甲氧基、乙氧基和滷素的取代基所取代的C1-3烷基。
8.根據權利要求7的方法，其中通過使用來自米根黴的脂酶或來自疏棉狀嗜熱絲孢菌的脂酶進行步驟(a)，通過使用來自圓柱念珠菌的脂酶進行步驟(b)。
9.根據權利要求7和8任一項的方法，其中步驟e)中的烷基化劑是式(XX)化合物或三氟甲磺酸二氟乙基酯
10.製備式(X)化合物的方法，
該方法包括使式(14』)化合物或式(14』)化合物的鹽
與式(XX)的烷基化劑或三氟甲磺酸二氟乙基酯反應，
得到式(16)化合物，
其中R是C1-5烷基或者被一個或多個選自羥基、甲氧基、乙氧基和滷素的取代基所取代的C1-3烷基。
11.式(16)化合物，
其中R是C1-5烷基或者被一個或多個選自羥基、甲氧基、乙氧基和滷素的取代基所取代的C1-3烷基。
12.製備式(X)化合物的方法，
該方法包括
a)使式(18)化合物的外消旋混合物
與烷基化劑反應，得到式(19)化合物的外消旋混合物，
b)使式(19)化合物的外消旋混合物進行對映選擇性酶水解，得到式(20)化合物，
c)使式(20)化合物選擇性單水解，得到式(21)化合物，
d)使式(21)化合物與1-(4-氨基-3-氟-苯基)-1H-吡啶-2-酮進行偶聯，得到式(22)化合物，
e)使式(22)化合物與5-氯-2-氨基吡啶進行偶聯，得到式(X)化合物，
其中R是C1-5烷基或者被一個或多個選自羥基、甲氧基、乙氧基和滷素的取代基所取代的C1-3烷基。
13.根據權利要求12的方法，其中步驟a)中的烷基化劑是式(XX)化合物或三氟甲磺酸二氟乙基酯
14.製備式(X)化合物的方法，
該方法包括如下步驟使式(18)化合物的外消旋混合物
與式(XX)的烷基化劑或三氟甲磺酸二氟乙基酯反應，
得到式(19)化合物的外消旋混合物，
其中R是C1-5烷基或者被一個或多個選自羥基、甲氧基、乙氧基和滷素的取代基所取代的C1-3烷基。
15.製備式(X)化合物的方法，
該方法包括如下步驟使式(14』)化合物或式(14』)化合物的鹽
與式(XX)的烷基化劑或三氟甲磺酸二氟乙基酯反應，
得到式(16)化合物，
其中R是C1-5烷基或者被一個或多個選自羥基、甲氧基、乙氧基和滷素的取代基所取代的C1-3烷基。
16.式(19)化合物的外消旋混合物
其中R是C1-5烷基或者被一個或多個選自羥基、甲氧基、乙氧基和滷素的取代基所取代的C1-3烷基。
17.式(20)化合物
其中R是C1-5烷基或者被一個或多個選自羥基、甲氧基、乙氧基和滷素的取代基所取代的C1-3烷基。
18.式(21)化合物
其中R是C1-5烷基或者被一個或多個選自羥基、甲氧基、乙氧基和滷素的取代基所取代的C1-3烷基。
19.製備式(X)化合物的方法，
該方法包括如下步驟
a)對式(23)化合物進行苄酯氫解，
得到式(24)化合物，
或者
a』)對式(32)化合物的外消旋混合物進行苄酯氫解，
得到式(33)化合物的外消旋混合物，
或者
a′』)對式(19)化合物的外消旋混合物進行酯水解，
得到式(33)化合物的外消旋混合物，
b)將式(24)化合物或式(33)化合物轉化為式(25)化合物，
c)用R1OH和手性試劑使式(25)化合物進行環酐去對稱化，得到式(26)化合物，
d)使式(26)化合物進行差向異構化，得到式(27)化合物，
e)使式(27)化合物與1-(4-氨基-3-氟-苯基)-1H-吡啶-2-酮進行偶聯，得到式(28)化合物，
f)式(28)化合物與5-氯-2-氨基吡啶進行偶聯，得到式(X)化合物，其中R1是甲基、乙基、肉桂基或肉桂醯基、苄基或苯乙基。
20.式(23)化合物
21.式(24)化合物
22.式(33)化合物的外消旋混合物
23.式(25)化合物
24.式(26)化合物
其中R1是甲基、乙基、肉桂基或肉桂醯基、苄基或苯乙基。
25.式(27)化合物
其中R1是甲基、乙基、肉桂基或肉桂醯基、苄基或苯乙基。
26.式(XX』)化合物
27.式(32)化合物的外消旋混合物
28.如上文所定義的本發明。
全文摘要
本發明涉及製備式(I)的吡咯烷-3，4-二甲醯胺衍生物的方法和可用於那些方法的中間體。
文檔編號C07D401/12GK101611026SQ200780051502
公開日2009年12月23日 申請日期2007年12月12日 優先權日2006年12月22日
發明者J-M·亞當, P·多特, H·伊丁, H-J·梅爾, R·雷恩茨, B·威爾茲 申請人:弗·哈夫曼-拉羅切有限公司