可增重和降低料肉比的水禽飼養用生物複方製劑及製備方法與流程

2023-06-23 03:58:26

本發明涉及一種用於提高水禽生產性能的生物複方製劑，尤其是一種可增重和降低料肉比的水禽飼養用生物複方製劑及製備方法。
背景技術：
：水禽（鴨子、鵝等）在養殖過程中，常因致病菌、病毒、飼料發生黴變、飼料中過量鈣質、代謝障礙、藥物中毒、種蛋與孵化條件等諸多因素引起腹瀉。腹瀉可導致機體嚴重缺水，營養物質流失，具體表現出食慾下降、生產性能降低、精神不振等不良狀況，一旦全群水禽被感染，則導致死淘率增加，飼料轉化率降低。目前對於水禽腹瀉的治療大多直接採用抗生素、激素等治療，不僅引起水禽菌群失調、耐藥株增多、免疫功能下降，而且造成水禽產品中藥物等有害物質殘留，導致動物源性食品安全問題。微生態類產品具有天然、低毒、殘留少、不產生抗藥性等特點，利用獨特的靶位定植原理，對致病菌、病毒等病原物有一定的抑制和防禦功能，已替代部分抗生素，可保障動物源性食品的安全。但是，現有的生物製劑對防治水禽腹瀉效果並不十分理想，直接降低了水禽的重量，提高了料肉比。技術實現要素：本發明是為了解決現有技術所存在的上述技術問題，提供一種可增重和降低料肉比的水禽飼養用生物複方製劑及製備方法。本發明的技術解決方案是：一種可增重和降低料肉比的水禽飼養用生物複方製劑，其特徵在於組分及質量百分比如下：可溶性葡萄糖50~55%、屎腸球菌1~4%、枯草芽孢桿菌0.5~2%、凝結芽孢桿菌10~20%、酪酸梭菌3~10%、粘附因子1~5%、動物用複合型免疫球蛋白15~30%，所述屎腸球菌、枯草芽孢桿菌、凝結芽孢桿菌、酪酸梭菌、粘附因子是將菌種發酵液通過包被形成菌粉，包被後的菌粉活菌數分別為：屎腸球菌1500~2500×108cfu/g、枯草芽孢桿菌4500~5500×108cfu/g、凝結芽孢桿菌30~50×108cfu/g、酪酸梭菌90~100×108cfu/g、粘附因子40~60×108cfu/g。一種如上所述可增重和降低料肉比的水禽飼養用生物複方製劑的製備方法，其特徵在於所述凝結芽孢桿菌菌種發酵液依次按如下方法製備：a.菌種活化將凝結芽孢桿菌菌種接種於固體培養基上，於37~40℃培養48h，重複培養活化3代；所述固體培養基各組分及質量百分比為：半胱氨酸0.025%，乙酸鈉0.35%，磷酸氫二鉀0.1%，硫酸鎂0.01%，硫酸錳0.0025%，大豆蛋白腖0.5%，酵母粉0.2%，葡萄糖0.5%，ph7.2±0.2，瓊脂粉0.2%，餘量為水；培養基121℃高壓滅菌15min；b.種子製備將傳至3代的凝結芽孢桿菌菌種無菌接於三角燒瓶液體培養基中，三角燒瓶裝液量為25ml，於搖床中180~200r/min，37~40℃培養30~48h；所述培養基為液體培養基組分及質量百分比為：半胱氨酸0.025%，乙酸鈉0.35%，磷酸氫二鉀0.1%，硫酸鎂0.01%，硫酸錳0.0025%，大豆蛋白腖0.5%，酵母粉0.2%，葡萄糖0.5%，ph7.2±0.2，餘量為水；培養基121℃高壓滅菌15min；c.種子擴大培養將菌種接於大罐發酵，培養基同b步驟，培養條件為轉速180~200r/min，溫度為37~40℃，培養時間為48h；d.發酵罐發酵按接種量為1%將種子接入發酵罐，培養基同b步驟，裝液量為60%~80%；培養條件為350r/min，通氣比為1.5，溫度為37~40℃，培養時間為30~48h。本發明是將可溶性葡萄糖、屎腸球菌、枯草芽孢桿菌、凝結芽孢桿菌、酪酸梭菌、粘附因子及動物用複合型免疫球蛋白等生物製劑按比例復配而成，尤其是凝結芽孢桿菌菌種的發酵方法可使活菌數含量達到3×109cfu/g以上，各組分相互作用，可有效促進水禽生長，增加重量，提高飼料利用率，降低料肉比；可替代抗生素，避免使用抗生素而帶來的一系列問題。具體實施方式一種可增重和降低料肉比的水禽飼養用生物複方製劑，由下述組分按質量百分比混合而成100g製劑：可溶性葡萄糖51.5%、屎腸球菌4%、枯草芽孢桿菌2%、凝結芽孢桿菌13.2%、酪酸梭菌5%、粘附因子3%、動物用複合型免疫球蛋白21.3%，所述屎腸球菌、枯草芽孢桿菌、凝結芽孢桿菌、酪酸梭菌、粘附因子是將菌種發酵液通過包被形成菌粉，每100g製劑的活菌數含量為：屎腸球菌8000×108cfu、枯草芽孢桿菌9000×108cfu、凝結芽孢桿菌400×108cfu、酪酸梭菌500×108cfu、粘附因子1500×108cfu。各組分原料來源：除動物用複合型免疫球蛋白（specificproteins）是按照中國專利號為200510047201.8「動物用複合型免疫球蛋白的生產方法」製備外，可溶性葡萄糖及其它菌種均為外購。可溶性葡萄糖（glucose，外購）、屎腸球菌（enterococcusfaecium）ciccno.m20424，枯草芽孢桿菌（bacillussubtilis）ciccno.m6060凝結芽孢桿菌（bacilluscoagulans）ciccno.m:21736，酪酸梭菌（clostridiumbutyricum）ciccno.m23847，粘附因子（adhesionfactor）atcc53103；本發明製備方法除凝結芽孢桿菌菌種發酵液按下述方法製備外，其他菌株按常規發酵工藝進行發酵並包被成菌粉。凝結芽孢桿菌菌種發酵液依次按如下方法製備：a.菌種活化將凝結芽孢桿菌菌種接種於固體培養基上，於40℃培養48h，重複培養活化3代；所述固體培養基組分及質量百分比為：半胱氨酸0.025%，乙酸鈉0.35%，磷酸氫二鉀0.1%，硫酸鎂0.01%，硫酸錳0.0025%，大豆蛋白腖0.5%，酵母粉0.2%，葡萄糖0.5%，ph7.2±0.2，瓊脂粉0.2%，餘量為水；培養基121℃高壓滅菌15min；b.種子製備將傳至3代的凝結芽孢桿菌菌種無菌接於三角燒瓶液體培養基中，250ml三角燒瓶裝液量為25ml，於搖床中200r/min，40℃培養48h；所述培養基為液體培養基組分及質量百分比為：半胱氨酸0.025%，乙酸鈉0.35%，磷酸氫二鉀0.1%，硫酸鎂0.01%，硫酸錳0.0025%，大豆蛋白腖0.5%，酵母粉0.2%，葡萄糖0.5%，ph7.2±0.2，餘量為水；培養基121℃高壓滅菌15min；c.種子擴大培養將菌種接於500ml培養瓶擴大培養做為擴培菌種，培養基同b步驟，培養條件為轉速200r/min，溫度為40℃，培養時間為48h；d.發酵罐發酵按接種量為1%將種子接入發酵罐，培養基同b步驟，發酵罐體積為20l，裝液量為80%；培養條件為350r/min，通氣比為1.5，溫度為40℃，培養時間為48h。發酵罐中的液體移至離心機進行固液分離，得到菌泥去上清，菌泥經過包被處理得到菌粉，活菌數含量達到3×109cfu/g以上。實驗例1：本發明凝結芽孢桿菌製劑對肉鴨生產性能的影響（1）飼料飼料：現有技術飼料。（2）實驗分組及方法：櫻桃谷肉鴨60000隻，平均分為對照組、屎腸球菌組、枯草芽孢桿菌組、凝結芽孢桿菌組、酪酸梭菌組及本發明實施例組，10000隻/組。對照組正常飲食、飲水。其它組除飲水與對照組相同外，從1日齡開始1日~7日飼餵與各試驗組製劑混合均勻的飼料（每噸含有製劑活菌數為9700×108cfu）；30日至出欄飼餵與各試驗組製劑混合均勻的飼料（每噸含有製劑活菌數為19400×108cfu），自由採食。觀察記錄周末體重、耗料量等。（3）飼養方法同現有技術。（4）實驗結果統計及分析：本發明實施例實驗組鴨子因腹瀉而導致死亡的數量大大低於其它組，各實驗組生產性能如表1所示：表1各組生產性能指標組別初始均重g末重kg日增重g料肉比歐洲指數對照50.03±0.453.03±0.06a75.51±1.47a2.03±0.03a372.82±12.79ac屎腸球菌49.8±0.533.11±0.01a77.48±0.26a1.96±0.02a396.09±4.52ac枯草芽孢桿菌49.67±0.473.14±0.04b78.28±1.03a1.93±0.02b404.34±7.99bc凝結芽孢桿菌49.83±0.43.12±0.02a77.72±0.51a1.96±0.02a397.26±6.00ac酪酸梭菌50±0.263.12±0.03a77.81±0.64a1.95±0.03a399.72±8.04ac本發明實施例49.9±0.263.21±0.03a80.09±0.82a1.89±0.02a425.02±8.71a註：表中字母標識，同一字母大小表示差異極顯著，不同字小寫字母表示差異顯著，不同大寫字母不發生關係。表中可見，初始均重差異不顯著，末重本發明實施例組與空白對照、屎腸球菌、凝結芽孢桿菌、酪酸梭菌添加組差異極顯著，與枯草芽孢桿菌組差異顯著；日增重本發明實施例組極顯著高於其他組別，料肉比本發明實施例組極顯著低於空白對照、屎腸球菌、凝結芽孢桿菌、酪酸梭菌添加組，顯著低於枯草芽孢桿菌添加組。歐洲指數體現了養殖水平及收益大小，越高收益越大。從表中可見本發明實施例組的歐洲指數極顯著高於其他菌株添加組及對照組，顯著高於枯草芽孢桿菌組。而對照組極顯著低於其他各試驗組。結果表明：本發明用於水禽養殖中，可防治腹瀉、提高其生產性能，顯著增重，降低料肉比。當前第1頁12