一種解酒護肝的藥物組合物的製作方法
2023-05-30 22:27:06
專利名稱：一種解酒護肝的藥物組合物的製作方法
技術領域：
本發明提供了一種具有解酒護肝作用的藥物組合物，主要由葛根提取物、銀杏葉提取物、L-半胱氨酸和維生素C組成，屬於保健食品領域。本發明品於2007年獲國家食品藥品監督管理局頒發的保健食品文號--國食健字G20070342。
背景技術：
我國酒文化源遠流長，適當飲酒可舒筋活血、強身健體，但過量飲酒，輕則降低機體反應能力、刺激消化道，重則引起中樞麻痺，甚至導致呼吸衰竭和死亡。酒精代謝產物乙醛對肝細胞具有顯著毒性作用，可幹擾肝臟細胞的氧化還原狀態，造成肝細胞變性和壞死。長期持續過量飲酒，可誘發化學性肝損傷，引起脂肪肝、酒精性肝炎和肝硬化等疾病。如果嗜酒者能夠及早採取預防和治療措施，可避免化學性肝損傷的發展。
過量飲酒危害重大，可給家庭和社會造成重大損失。因此，開發安全有效的解酒藥品對我國的國計民生意義重大。
目前市售具有解酒護肝功能的產品，多為單純中藥組方，或添加人參、冬蟲夏草等組分，或添加茶多酚、幾丁聚糖等功能成分，劑型包括口服液、飲料、衝劑等。本發明品由中藥、維生素和胺基酸組成，不僅可以有效地預防化學性肝損傷，而且還可以提供肝臟修復所需的營養成分，多角度、多渠道地起到解酒護肝的作用。此外，本發明品經國家權威機構驗證，安全無毒副作用。本發明品於2007年獲得國家食品藥品監督管理局頒發的保健食品文號--國食健字G20070342。
發明內容
本發明的目的是提供一種藥物組合物，可以解酒護肝、預防化學性肝損傷，主要由葛根提取物、銀杏葉提取物、L-半胱氨酸和維生素C組成。
為了實現本發明目的，本發明的藥物組合物，主要成分包括葛根提取物、銀杏葉提取物、L-半胱氨酸和維生素C，其包括如下重量份的活性成分 葛根提取物150～300份、銀杏葉提取物50～200份、L-半胱氨酸30～200份、維生素C20～300份。
優選的為葛根提取物150～250份、銀杏葉提取物80～180份、L-半胱氨酸50～150份、維生素C30～150份。
本發明所述的份為重量份，為本領域常用的微克、毫克、克、兩、公斤、噸等重量單位。
本發明藥物組合物的製備方法可採用本領域常規方法添加藥用輔料，如微晶纖維素、糊精、滑石粉、羧甲基澱粉鈉、微粉矽膠、硬脂酸鎂、羥丙基甲基纖維、鈦白粉、滑石粉、有色有機染料等，經過預混、顆粒製備、總混、壓片、薄膜包衣等過程製成不同製劑，比如片劑或膠囊劑等。
本發明藥物組合物建議日服有效量為1200mg(以60kg成年人為例)，飲酒前或飲酒後半小時服用即可。
葛根味甘性涼，入脾、胃經，生津除煩，善治酒積，自唐代即用於「解酒毒」，曾收錄於《神農本草經》、《千金要方》、《本草衍義》中。現代藥理研究表明葛根可提高肝細胞中穀胱甘肽和超氧化物歧化酶水平，清除自由基並對抗脂質過氧化；促進血液循環，使乙醇排洩加速；提高乙醇脫氫酶活性，促進乙醇分解代謝；對抗中樞抑制，達到醒酒作用；改善心腦循環，減少宿醉反應；緩解胃腸道痙攣，減輕嘔吐症狀；葛根對嗜酒大鼠的乙醇攝入量還有抑制作用。因此，葛根具有良好的預防飲酒導致的化學性肝損傷的作用。
銀杏葉含有多種化學組分，包括黃酮類(山奈黃素、槲皮素、異鼠李黃素)、萜類、烴基酚類和多烯醇類等。銀杏葉中的黃酮類成分為強力自由基清除劑和代謝增強劑。研究表明，銀杏葉提取物可以通過誘導血紅素氧化酶-1表達，減少酒精所致肝臟穀胱甘肽的耗竭，增加抗氧化物質活性或含量，抑制脂質過氧化反應，清除自由基，有效預防酒精所導致的化學性肝損傷。銀杏葉還具有降低血中膽固醇、甘油三酯、穀草轉氨酶和谷丙轉氨酶的作用，起到防治化學性肝損傷的作用。
維生素C是一種強力自由基清除劑，可作為酶的輔因子參與多種重要的代謝酶合成過程，還可以協同其他抗氧化劑，如葛根素中的異黃酮成分、穀胱甘肽等，保護細胞免受過氧化損害。另一方面，研究發現，化學性肝損傷患者血漿維生素C含量顯著低於正常。因此，補充維生素C可有效捕獲自由基，預防脂質過氧化對肝細胞的損害，從而起到保護和營養肝細胞的作用。
半胱氨酸是含硫胺基酸，所帶巰基(-SH)具有多種生理作用。研究發現，酒精性脂肪肝血漿半胱氨酸水平下降超過60.0％。半胱氨酸是合成肝臟穀胱甘肽過氧化物酶(GSH)的重要胺基酸，GSH是體內重要的抗氧化劑，半胱氨酸水平下降可導致GSH合成不足。因此，補充半胱氨酸可促進GSH的合成，從而減輕酒精性肝臟過氧化損傷。
本發明品綜合運用中藥、維生素和胺基酸，利用多種不同的作用機理，促使體內乙醇代謝、排洩加快，降低血中乙醇濃度，達到預防、減輕飲酒導致的化學性肝損傷的作用，同時含有修復肝細胞必需的胺基酸、維生素。本發明品不含任何添加劑，服用安全，無毒副作用。原料來源廣泛，成本低廉，社會效益和經濟效益顯著。
具體實施例方式 以下實施例用於說明本發明，但不用來限制本發明的範圍。
實施例1 本實施例藥物組合物片劑的原料如下表
每100份本發明的藥物組合物加15.0份的微晶纖維素、5.0份的羧甲基澱粉鈉、1.0份的硬脂酸鎂、1.0份的薄膜包衣預混劑，經過預混、顆粒製備、過篩、總混、壓片、包衣製成片劑。
實施例2 本實施例藥物組合物膠囊劑的原料如下表
每100份本發明的藥物組合物加20.0份的糊精、5.0份的微晶纖維素，經過混勻後，過150目篩，裝膠囊，得組合物膠囊劑。
實施例3 製備過程同實施例1，不同的是，本實施例藥物組合物片劑的原料如下表
實驗例1 本實驗例的目的在於研究本發明藥物組合物是否具有急性毒性作用。
使用實施例1中製備的本發明藥物組合物，對其急性毒性進行檢驗。研究對象為ICR種小鼠20隻，雌雄各半，體重18～22g，SPF級動物試驗室(合格證號醫動字01-4059)條件下進行飼養，室溫22±2℃，相對溼度60％，真空包裝飼料由軍事醫學科學院實驗動物中心提供，合格證號SCXK-(軍)2002-018。採用經口最大耐受量法試驗，將本發明品10g加純淨水混勻至20ml配製成50％濃度的溶液，給予10g/kgBW(相當於本發明品推薦劑量0.02g/kgBW的500倍)，經口灌胃0.2ml/10gBW，灌胃前停食16小時，連續觀察2周，記錄動物中毒症狀及死亡情況。
表1急性毒性試驗前後小鼠體重及死亡情況
研究結果表明，動物活動均正常，毛色光澤度良好，未發現任何症狀。說明本發明品以急性毒性分級，屬實際無毒物質。
實驗例2 本實驗例的目的在於研究本發明藥物組合物遺傳毒性作用。
使用實施例3中製備的本發明藥物組合物，進行遺傳毒性試驗，包括小鼠骨髓嗜多染紅細胞(PCE)微核試驗、小鼠精子畸變試驗和Ames試驗，驗證其可能的致突變和致畸作用。
1)小鼠骨髓PCE微核試驗 研究對象為ICR種小鼠50隻，SPF級合格動物(合格證號醫動字01-4059)，體重23～28g，按體重分層隨機分組，每組動物各10隻，雌雄各半。SPF級動物試驗室(合格證號醫動字01-4059)條件下進行飼養，室溫22±2℃，相對溼度60％，群籠餵養5隻/籠，真空包裝飼料由軍事醫學科學院實驗動物中心提供，合格證號SCXK-(軍)2002-018。將本發明品10.0g、5.0g、2.5g分別加純淨水混勻至20ml，配製成50％、25％和12.5％濃度的溶液。按照急性毒性試驗最大劑量10g/kgBW為最高計量，以下分別設1/2(5.0g/kgBW)及1/4(2.5g/kgBW)兩個劑量組，另設陽性對照組環磷醯胺(CP)40mg/kgBW及陰性對照組。小鼠經口灌胃0.2ml/10gBW，連續給予本發明品兩天(間隔24小時)。於末次給藥後6小時，動物頸椎脫臼處死。取胸骨骨髓，按常規製片、染色、鏡檢。每隻動物觀察100個PCE，記錄含微核PCE數，計算微核率及PCE與紅細胞(RBC)的比值。採用泊松分布U檢驗方法進行統計學分析。結果見表2。
表2小鼠骨髓PCE微核試驗結果
陽性對照組與陰性對照組比較，**P＜0.01。
研究結果表明，各劑量組與陰性對照組相比，均未發現有顯著性差異(P＞0.05)，陽性對照組與陰性對照組相比有非常顯著的差異(P＜0.01)。結果表明在本試驗劑量範圍內，該發明品不誘發微核率的增加。
2)小鼠精子畸變試驗 研究對象為雄性ICR種小鼠25隻，SPF級合格動物(合格證號醫動字01-4059)，體重23～28g，按體重分層隨機分組，每組動物5隻。SPF級動物試驗室(合格證號醫動字01-4059)條件下進行飼養，室溫22±2℃，相對溼度60％，群籠餵養5隻/籠，真空包裝飼料由軍事醫學科學院實驗動物中心提供，合格證號SCXK-(軍)2002-018。將實施例1中本發明品10.0g、5.0g、2.5g分別加純淨水混勻至20ml，配製成50％、25％和12.5％濃度的溶液。按照急性毒性試驗最大劑量10g/kgBW為最高計量，以下分別設1/2(5.0g/kgBW)及1/4(2.5g/kgBW)兩個劑量組，另設陽性對照組(CP 40mg/kgBW)及陰性對照組。小鼠經口灌胃0.2ml/10gBW，連續給予本發明品五天，於第一次給藥後的第35天處死，取雙側附睪按常規製片染色和鏡檢，每隻動物觀察1000個精子，記錄畸變精子數，計算畸變率。採用秩和檢驗的方法進行統計學分析。結果見表3。
表3小鼠精子畸變試驗結果
陽性對照組與陰性對照組比較，**P＜0.01。
研究結果可見，各劑量組與陰性對照組相比，均未發現有顯著性差異(P＞0.05)，陽性對照組與陰性對照組相比，其精子畸變數與畸變率差異非常顯著(P＜0.01)。表明在本試驗劑量範圍內，未發現該發明品對生殖細胞有誘變作用。
3)Ames試驗 採用鼠傷寒沙門氏菌、微粒體酶平板摻入突變試驗預先溫浴法。試驗菌株TA97a、TA98為移碼型突變株，TA100、TA102為鹼基置換型突變株，四株的五個遺傳特性經檢測都達到規定標準。實驗前，取20μl-80℃保存的菌液接種到10ml營養肉湯培養基中，37℃ 12～16小時水浴振蕩培養，得到大約2×108菌懸液。取實施例3中本發明品1g，溶於無菌水中，不溶部分再溶於二甲基亞碸(DMSO)中，將兩者混勻後定容至20ml作為5mg/皿劑量，以下分別按1倍、5倍、10倍、50倍稀釋。實驗劑量選定為5mg/皿、2.5mg/皿、1.0mg/皿、0.5mg/皿、0.1mg/皿五個劑量。同時設空白對照組、溶劑對照(DMSO)組和陽性對照組。試驗組加入不同濃度本發明品100μl(5mg/皿、2.5mg/皿、1.0mg/皿、0.5mg/皿、0.1mg/皿五個劑量組)、菌液100μl，需活化時加入S-90.5ml，混合後37℃水浴振蕩20分鐘，再加2ml頂面瓊脂(0.5mM組氨酸/生物素)，快速倒板均勻鋪平，37℃孵育48小時看結果。陽性對照不加本發明品，只加標準致突變物[2-AF(2-氨基芴)10μg/皿、MMS(甲基甲烷磺酸酯)1μl/皿、芴酮(2，4，7-三硝基9芴酮)0.2μg/皿或2-AA 12μg/皿]，溶劑對照(DMSO)加除本發明品和標準致突變物以外所有試劑，空白對照只在培養基上加菌液。實驗參數(1)Aroclo-1254誘導的大鼠肝勻漿，蛋白含量33mg/mL。(2)按1983年Ames Test修訂方法，S-9加入量20μl/皿。(3)實驗結果數據為三個平皿均數。結果見表4～7。
表4Ames Test結果一
表5Ames Test結果二
表6Ames Test結果三
表7Ames Test結果四
研究結果表明，採用四株兩種突變類型的菌株對樣品進行了六個劑量的測試，在有代謝活化+S9或無代謝活化-S9系統的條件下，本發明品對四種菌株沒有明顯的誘導作用。說明在本實驗的條件下，所選劑量範圍內，該發明品對四種菌株未見明顯的誘導突變作用。
實驗例3 本實驗例目的在於進一步研究本發明藥物組合物毒性作用及其對生長發育的影響。
使用實施例1中製備的本發明藥物組合物，進行30天餵養試驗。試驗動物為Wistar種斷乳大鼠，體重60～76g。SPF級動物實驗室(合格證號醫動字01-4059號)條件下進行飼養，室內溫度22±2℃，相對溼度53％～57％。粉狀基礎飼料由軍事醫學科學院實驗動物中心提供真空包裝無菌飼料，合格證號SCXK-(軍)2002-018。醫學觀察3天後，按體重分層隨機分入各組。以人群推薦量(0.02g/kgBW)的100、75和50倍設三個劑量組，即2.0g/kgBW、1.5g/kgBW及1.0g/kgBW，另設陰性對照組(粉狀基礎飼料)，每組動物雌、雄各10隻。以大鼠體重10％作為飼料攝入量，按劑量配製含不同本發明品濃度的飼料，即2.0％、1.5％和1.0％。大鼠自由攝入飼料。
每日觀察動物的活動情況、毛色、攝食及排洩情況，症狀及出現的時間，出現死亡時進行屍體解剖，肉眼觀察臟器的病理改變，有病理改變時作病理切片作組織學觀察。實驗前及實驗期間每周稱量體重、飼料加入量及剩餘量，計算食物利用率。試驗結束時取血，測定血液學指標血紅蛋白(Hb)、紅細胞(RBC)、血小板(PLT)、白細胞(WBC)及其分類和生化指標谷丙轉氨酶(ALT)、穀草轉氨酶(AST)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、白球比(A/G)、尿素氮(BUN)、肌苷(CRE)、血糖(GLU)、總膽固醇(TC)及總甘油三酯(TG)。稱量臟器(肝、脾、腎、睪丸或卵巢)並計算臟器係數。病理檢查採用常規製片、染色，光學顯微鏡檢查心、肝、脾、胰、腎、胃、十二指腸、睪丸或卵巢的組織學改變。統計學方法採用方差分析。
結果表明，各組動物在實驗期間活動正常，毛色光澤度較好，攝食及排洩正常，未發現有症狀出現。病理組織學觀察結果如下 1)大體解剖可見各劑量組及對照組肝臟的顏色正常，邊緣銳利，其他臟器均未見異常。病理組織學觀察高劑量組20例、中劑量組10例、低劑量組10例和對照組20例共60例(雌雄各半)。
2)光鏡觀察 肝臟除各組均有少數動物出現輕度點狀壞死(高劑量組雄鼠1例，中劑量組雄鼠2例、雌鼠1例，低劑量組雌鼠2例，對照組雌、雄各2例)及嗜酸性變(中劑量組雌鼠1例、低劑量組雄鼠1例)外，各組肝被膜無明顯增厚及滲出，未見匯管區間質纖維組織增生及假小葉形成，未見間質內炎細胞浸潤。
腎臟腎被膜無明顯增厚及滲出，腎小球結構正常，球內無內皮細胞增生，無炎性細胞浸潤；腎小球未見明顯纖維化；腎小管內未見明顯蛋白管型、細胞及顆粒管型。
心臟心外膜無明顯增生，無漿液及纖維素滲出，心肌細胞無明顯變性及壞死；間質無炎性細胞浸潤。心內膜無明顯增厚，內膜內無炎性細胞浸潤。
脾臟被膜無明顯增厚，小梁無明顯增粗，淋巴小結無明顯增生。
胃胃黏膜無明顯滲出物，無炎性細胞浸潤，胃壁無出血及潰瘍，胃黏膜腺體無明顯增生及肥大，無萎縮。
胰腺胰腺的外分泌腺未見出血及壞死，胰島細胞未見變性及壞死，胰腺間質未見炎細胞浸潤。
十二指腸未見出血、壞死及潰瘍形成，黏膜層未見炎性細胞浸潤。
生殖系統睪丸與卵巢未見明顯病變。
其他結果見表8～13。
表8各組動物試驗前及試驗期間各周體重(g，x±s)
可見三個劑量組動物的試驗前和試驗期間各周體重與陰性對照組相比，均未發現顯著性差異(P＞0.05)。
表9各組動物的總增重和食物利用率(x±s)
可見三個劑量組動物的增重食物利用率與陰性對照組相比，均未發現顯著性差異(P＞0.05)。
表10各組動物血液學指標測定結果(x±s)
可見三個劑量組動物的各項血液學指標與陰性對照組相比，均未發現顯著性差異(P＞0.05)。
表11各組動物生化指標測定結果一(x±s)
表12各組動物生化指標測定結果二(x±s)
由表11、12可見三個劑量組動物的各項生化指標與陰性對照組相比，均未發現顯著性差異(P＞0.05)。
表13各組動物的主要臟器係數(x±s)
中、高劑量組雄性動物的肝臟重量及臟器係數均高於陰性對照組，但均在正常值範圍之內，分析其原因可能與體重有關。2.0g/kgBW、1.5g/kgBW組均有4隻動物的體重超過300g，其肝重量均大於10g。但相應動物的肝功能(ALT、AST、TP及ALB)及病理檢查均為正常，故考慮無臨床意義。其他各主要臟器重量和臟器係數與陰性對照組相比，均未發現有顯著性差異(P＞0.05)。
試驗結果表明，該發明品在本實驗劑量範圍內(1.0～2.0g/kgBW)，對實驗動物的生長發育、食物利用率、血液系統、血清生化指標及病理組織學改變均無明顯影響。
實驗例4 本實驗例的目的在於研究本發明藥物組合物是否具有預防化學性肝損傷的功能。
使用實施例2中製備的本發明藥物組合物，對預防化學性肝損傷功能進行檢驗。研究對象為昆明種雄性小鼠50隻，體重21～23g。劑量設計按照每人每日食用1200毫克的1倍、10倍、30倍設低、中、高三個劑量，即20、200、600mg/kgBW，同時設陰性對照組和乙醇(5600mg/kgBW)陽性對照組，將小鼠隨機分組，每組10隻。將本發明品以去離子水配製，每日一次經口灌胃給予各劑量組動物，灌胃量0.1ml/10gBW，陰性對照組及乙醇陽性對照組給予等量去離子水，連續灌胃30天，每周稱體重，調整給藥量。於試驗第30天將本發明品灌胃各組及陽性對照組小鼠給予50％(V/V)乙醇0.14ml/10gBW，禁食12小時後，取肝臟製成0.1g/ml肝勻漿，分別測甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)及還原型穀胱甘肽(GSH)含量。結果用「SPSS 8.0」軟體進行方差分析統計，見表14～15。
表14藥物組合物對實驗動物體重影響(g，x±s)
可見各組動物試驗期內體重持續增長，各組之間體重差異無顯著性(p＞0.05)。
表15藥物組合物對小鼠化學性肝損傷MDA、GSH、TG水平的影響(x±s)
試驗組與陽性對照組比較，**P＜0.01，*P＜0.05；陽性對照組與陰性對照組比較，##P＜0.01。
研究結果表明，陽性對照組與陰性對照組相比，肝組織中MDA、TG含量明顯升高，GSH含量明顯降低，差異有極顯著性(p＜0.01)。本發明品中、高劑量組MDA含量比陽性對照組顯著降低(p＜0.01)，低、中、高劑量組GSH含量顯著高於陽性對照組(p＜0.01)，高劑量組TG含量明顯低於陽性對照組(p＜0.05)，表明本發明品可降低肝組織中MDA、TG含量、能有效阻止GSH耗竭，說明本發明品具有預防化學性肝損傷的功能。
實驗例5 本實驗例的目的在於研究本發明藥物組合物對於解酒效果的人體試驗。
使用實施例2中製備的本發明的藥物組合物膠囊劑，對本品解酒效果進行檢驗。研究對象為健康男性志願者40名，體檢未發現心、肝、腎等重要臟器疾患，平均年齡29.2±5.8歲。將受試對象按照一般狀況指標為參數配對，隨機分為試驗組和對照組，每組20人。試驗組和對照組人員分別在試驗前進行心率、血壓、反應時、閃光融合頻率等一般指標測定，無顯著性差異，具有可比性。試驗前1周正常飲食，禁止飲酒。試驗組在試驗前30min服用本發明品膠囊劑(有效量為1200mg)，對照組同時服用與本試驗品外觀、形狀完全一致的藥用澱粉膠囊。而後按250g/人口服食用酒精。分別於飲酒後1h、2h、4h測定心率、血壓、反應時和閃光融合頻率等指標，並分別在1h、4h填寫主觀症狀調查表。
表16參試人員飲酒前後心率比較(次/分，x±s)
與對照組相比，*p＜0.05 表17參試人員飲酒前後血壓變化比較(mmHg，x±s)
與對照組相比，*p＜0.05。
表18參試人員飲酒後主觀症狀比較(％，x±s)
與對照組相比，**p＜0.01 表19參試人員飲酒前後反應時比較(秒，x±s)
與對照組相比，**p＜0.01。
表20參試人員飲酒前後閃光融合頻率比較(秒，x±s)
與對照組相比，**p＜0.01。
由表16～20可見，對照組攝入本發明複合物後1h、2h、4h的心率加快，收縮壓升高(P＜0.05)，反應時和閃光融合頻率顯著延長(P＜0.01)，對照組飲酒後頭痛、頭暈、噁心、嗜睡等「醉酒」症狀也較試驗組明顯加重，說明本發明複合物解酒效果良好。
雖然，上文中已經用一般性說明及具體實施方案對本發明作了詳盡的描述，但在本發明基礎上，可以對之作一些修改或改進，這對本領域技術人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發明精神的基礎上所做的這些修改或改進，均屬於本發明要求保護的範圍。
權利要求
1、一種藥物組合物，其包括如下重量份的活性成分葛根提取物150～300份、銀杏葉提取物50～200份、L-半胱氨酸30～200份、維生素C 20～300份。
2、根據權利要求1所述的藥物組合物，其特徵在於，包括如下活性成分葛根提取物150～250份、銀杏葉提取物80～180份、L-半胱氨酸50～150份、維生素C 30～150份。
3、根據權利要求1或2所述的藥物組合物，其特徵在於，其與藥用輔料製成的片劑或膠囊劑。
全文摘要
本發明提供了一種具有解酒護肝作用的藥物組合物，該組合物主要由葛根提取物、銀杏葉提取物、L-半胱氨酸和維生素C組成，其包括如下重量份的活性成分葛根提取物150～300份、銀杏葉提取物50～200份、L-半胱氨酸30～200份、維生素C 20～300份。本發明組合物製成的劑型，具有良好的保護肝臟的作用，醒酒效果良好，且無毒副作用。
文檔編號A61P1/00GK101306074SQ200810089458
公開日2008年11月19日 申請日期2008年4月1日 優先權日2008年4月1日
發明者羅麗華, 楊昌林, 鵬 杜, 王若永 申請人:中國人民解放軍空軍航空醫學研究所