具有防治類風溼性關節炎的白藜蘆醇緩釋膠囊的製備方法

2023-05-31 02:34:06 1

專利名稱：具有防治類風溼性關節炎的白藜蘆醇緩釋膠囊的製備方法
技術領域：
本發明屬於白藜蘆醇藥物製劑的製備領域，特別涉及一種具有防治類風溼性關節
炎的白藜蘆醇緩釋膠囊的製備方法。
背景技術：
白藜戸醇(Resveratrol)是植物在受到應激時自身合成的一種植物抗毒素，廣泛 存在植物中，現在至少在21個科、31個屬的72種植物中發現有白藜蘆醇存在。但從文獻報 道情況來看，目前研究最多、最被關注的只有虎杖、葡萄、花生等少數幾種中草藥和可食用 的植物。 目前，提取天然白藜蘆醇多以中藥材虎杖(根)為原料。由於中藥虎杖種植容 易，產量高、價格低，來源方便，後續資源有保障，研究人員做了很多研究，如CN1251361A， 一種從中藥虎杖中提取白藜蘆醇的工藝；01126769. O，一種從虎杖中製備白藜蘆醇的方法； 02114583. O—種從虎杖中提取白藜戸醇的製備方法；03147908. l，一種從虎杖中製備白藜 戸醇的方法；200510027573. 4，從中草藥植物虎杖中製備白藜戸醇的方法；
200610161949. 5， 一種從中藥虎杖中分離純化白藜蘆醇苷和白藜蘆醇的方法；
200810032067. 8，從虎杖中提取純度98 %以上的白藜蘆醇的工藝； 200710030601. 7， 一種從新鮮虎杖中提取、純化白藜蘆醇的工藝方法。但是以上技術均未解 決工業化生產和藥用問題。 白藜蘆醇具有多方面的保健功能，具有防治心血管疾病、防癌、抗病毒及免疫調節 作用，其作用主要表現為它的抗氧化特性。在醫藥、食品、化妝等行業有著廣泛應用前景。近
年來，歐美各國已將其開發為保健食品上市，有片齊U、膠囊、口服液等多種劑型。最近，國內 也出現了 一些白藜蘆醇產品，如"天獅活力膠囊"、"紫金膠囊"、"納貝益生膠囊"等；歐美已 批准上市的白藜蘆醇高端製劑產品(包括藥品及保健品)已有千餘種，全球使用者約2億 人，並且，平均以每年5000萬人的速度增長。估計未來白藜蘆醇製劑的銷售將達到5億 8億美元，形成非常巨大的產業。 由於其具有調節免疫功能，在治療免疫性疾病有一定療效、副作用小的優點，文獻 報導，200510031435. 3，白藜蘆醇在治療類風溼關節炎、非感染性炎症中的應用。然而，沒有 解決應用到人體的製劑及製備方法，以及人體口服的劑量。

發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種具有防治類風溼性關節炎的白藜蘆醇緩 釋膠囊的製備方法，該製備方操作簡單，原料來源廣泛，成本低，對環境友好，在製備過程中 加入纖維素酶預處理，大大提高了有效成分的轉移率，確保了提取的白藜蘆醇的純度，適合 工業化生產。 本發明的一種具有防治類風溼性關節炎的白藜蘆醇緩釋膠囊的製備方法，包括
(1)白藜蘆醇的提取
粉碎虎杖粉得10-30目的粗粉，加入O. 1-1. 0% (W/V)的纖維素酶(市售)的溶液 於20-4(TC預處理30-60小時，然後用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，加水，用大孔吸附樹 脂分離，再傾入水和15% 75%的乙醇進行洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，加入0. 1-0.5% (W/V)的活性炭脫色，最後用乙醇反覆結晶得白藜蘆醇；
(2)緩釋膠囊的製備 速釋顆粒白藜蘆醇50-100g、乳糖20-50g和澱粉20_50g分別過100目，混合均 勻，加入1_10%的澱粉漿製成軟材，過40目篩，乾燥，備用； 緩釋顆粒白藜戸醇50-100g、羥丙基甲基纖維素30-60g、甲基纖維素10-50g、乳 糖10-20g分別過100目，混合均勻，加入聚乙烯吡咯烷酮(PVP-K30)的5%乙醇溶液潤溼， 製成軟材，過40目篩，乾燥，備用； 將上述速、緩二顆粒按質量比1 : l混合，填充膠囊。 所述步驟(1)中藥粉與0. 1-1. 0 % (W/V)纖維素酶液的質量體積比為 lg : 1. 0-2. Oml ; 所述步驟(1)中的大孔吸附樹脂的用量為虎杖粉質量的0. 5-2倍； 所述步驟(1)中的分離是指用D型大孔吸附樹脂柱子，流速lL/分鐘，用去離子水
洗脫至無色； 所述步驟(1)中的洗脫是指先後用15wt^乙醇和75wt^乙醇進行洗脫。 本發明提供了從虎杖提取、分離白藜蘆醇的方法，用纖維素酶預處理，將糖苷水解
使白藜蘆醇游離，再用乙醇萃取，有效成分轉移率高，雜質少；另因為大孔吸附樹脂分離效
果好，成本低，易生產，本發明製備白藜蘆醇的方法中主要使用D、DA系列，確定大孔吸附樹
脂用量為藥材量的0. 5-2倍的最佳用量，充分確保吸附有效成分，減少樹脂的浪費。 通過對白藜蘆醇在對大鼠佐劑性關節炎的防治作用、對大鼠佐劑性關節炎繼發性
病變的預防作用、對II型膠原引起大鼠風溼性關節炎作用研究等三個方面作用研究，證明
該藥在治療關節炎方面具有較好的治療作用，動物實驗表明無論對大鼠佐劑性關節炎還是
對大鼠由II型膠原誘導的風溼性關節炎多具有治療作用，同時該藥具有抗炎、鎮痛作用。
這些實驗充分證明了該藥具有多個作用靶點、多種治療作用，是一個非常獨特的藥物。 有益效果 本發明的製備方操作簡單，原料來源廣泛，成本低，對環境友好，在製備過程中加 入纖維素酶預處理，大大提高了有效成分的轉移率，確保了提取的白藜蘆醇的純度，適合工 業化生產。
具體實施例方式
下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用於說明本發明 而不用於限制本發明的範圍。此外應理解，在閱讀了本發明講授的內容之後，本領域技術人 員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落於本申請所附權利要求書所限定 的範圍。 實施例1 乾燥虎杖200kg，粉碎成粗粉(10目)，用0. 1%的纖維素酶液(藥粉酶液= lg : 1.3ml)預處理，25t:，30小時，處理過的藥粉，用乙醇1200L回流提取，提取液回收乙醇，加水，用D101-I型大孔吸附樹脂200kg的柱子，流速lL/分鐘，用去離子水洗脫至無色， 再用15%乙醇200L洗脫，及用75%乙醇500L洗脫，收取75%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮 液用0. 1-0. 5% (W/V)的活性炭脫色，乙醇反覆結晶得白藜蘆醇2. 2kg。
實施例2 乾燥虎杖200kg，粉碎成粗粉(20目)，用0.3%的纖維素酶液(藥粉酶液= lg : 1.5ml)預處理，3(TC，48小時，處理過的藥粉，用乙醇1400L回流提取，提取液回收乙 醇，加水，用D101-I型大孔吸附樹脂250kg的柱子，流速1L/分鐘，用去離子水洗脫至無色， 再用15 %乙醇200L洗脫，及用75 %乙醇500L洗脫，收取75 %乙醇洗脫液，回收乙醇，用 0. 1-0. 5% (W/V)的活性炭脫色，乙醇反覆結晶得白藜蘆醇2. 4kg。
實施例3 乾燥虎杖200kg，粉碎成粗粉(30目)，用0.5%的纖維素酶液(藥粉酶液= lg : 1.8ml)預處理，35t:，60小時，處理過的藥粉，用乙醇1600L回流提取，提取液回收乙 醇，加水，用D101-I型大孔吸附樹脂300kg的柱子，流速1L/分鐘，用去離子水洗脫至無色， 再用15 %乙醇200L洗脫，及用75 %乙醇500L洗脫，收取75 %乙醇洗脫液，回收乙醇，用 0. 1-0. 5% (W/V)的活性炭脫色，乙醇反覆結晶得白藜蘆醇2. 5kg。


實施例4 白藜蘆醇緩釋膠囊質量標準處方每粒含白藜蘆醇120mg。 速釋顆粒 品名規格用量備註
白藜蘆醇》98.5%70g主藥乳糖藥用35g輔料
澱粉 藥用 30g 輔料 緩釋顆粒
a々規格用量備註
白藜盧醇》98.5%50g主藥
羥丙基甲基纖維素藥用(HPMC-K4M)50g輔料
甲基纖維素藥用EC25g輔料
乳糖藥用10g輔料
聚乙烯吡咯烷酮藥用(PVP-K30) 5%乙醇溶液QS黏合劑製備工藝
速釋顆粒；將主藥與輔料分別過IOO目，混合均勻，用5%的澱粉漿製成軟材，過40 目篩，乾燥，備用。 緩釋顆粒；將主藥與輔料分別過100目，混合均勻，用適量PVP-K305 %乙醇溶液潤 溼，製成軟材，過40目篩，乾燥，備用。 將速、緩二顆粒，等分混合，填充1號膠囊，每粒0. 3g。
性狀膠囊劑，內容物為白色至類白色顆粒狀，味微苦。鑑別取本品內容物0. lg，用乙醇2ml溶解，乙醇溶液，滴在濾紙上，乾燥後，噴灑
三氯化鐵試液，顯紫藍色。檢查含量測定
色譜條件與系統適用性試驗 色譜杜(4. 6X250mm);填充劑為十八烷基矽烷鍵合矽膠。
流動相甲醇水=40 : 60 ;
流速1. OmL/min ; 檢測波長304nm ;進樣最20 ii L ;柱溫25°C 。
理論板數按白藜蘆醇峰計算應不低於2500. 對照品溶液的製備精密稱取白藜蘆醇對照品5mg，加甲醇製成每lml含50 y g的 溶液，即得。 供試品溶液的製備取本品10粒，取出內容物，精密稱取30mg，置100ml量瓶，加 甲醇至刻度，搖勻，取lml，置20ml量瓶，加甲醇至刻度，即得。 測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液(用微孔(0.45m)濾過)各 20 iU，注入液相色譜儀，測定，即得。 本品每粒含白藜蘆醇(C14H1203)計，應在108-132mg內。
適應症適用於成人類風溼關節炎，有改善病情作用。
用法與用量每次l粒，一日2次。或遵醫囑。
規格每粒0.3g，24粒/盒(瓶)。
貯藏密封。
實施例5白藜戸醇(090701)藥代動力學參數(使用DAS 2. 1. 1計算)
統計矩參數單位低劑量中劑量高劑量
(20mg/kg)(60mg/kg)(180mg/kg)
AUC(O-t)mg/L*h449.815991547.881
AUC(O-")mg/L*h486.905699.7821641.215
MRT(O-t)h3.8394.4534.151
MRT(O-")h4.7976.374.767
t1/2zh3.0673.9932.072
丁m3Xh0.50.51.5
Vz/FL/kg0.1820.4940.328
CLz/FL/h/kg0.0410.0860.11
GtTl3Xmg/L182.4207.5166667313.權利要求
一種具有防治類風溼性關節炎的白藜蘆醇緩釋膠囊的製備方法，包括(1)白藜蘆醇的提取粉碎虎杖粉得10-30目的粗粉，加入0.1-1.0％(W/V)的纖維素酶的溶液於20-40℃預處理30-60小時，然後用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，加水，用大孔吸附樹脂分離，再傾入水和15％～75％的乙醇進行洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，加入0.1-0.5％(W/V)的活性炭脫色，最後用乙醇反覆結晶得白藜蘆醇；(2)緩釋膠囊的製備速釋顆粒白藜蘆醇50-100g、乳糖20-50g和澱粉20-50g分別過100目，混合均勻，加入1-10％的澱粉漿製成軟材，過40目篩，乾燥，備用；緩釋顆粒白藜蘆醇50-100g、羥丙基甲基纖維素30-60g、甲基纖維素10-50g、乳糖10-20g分別過100目，混合均勻，加入聚乙烯吡咯烷酮的5％乙醇溶液潤溼，製成軟材，過40目篩，乾燥，備用；將上述速、緩二顆粒按質量比1∶1混合，填充膠囊。
2. 根據權利要求1所述的一種具有防治類風溼性關節炎的白藜蘆醇緩釋膠囊的製備 方法，其特徵在於所述步驟(1)中藥粉與O. 1-1.0% (W/V)纖維素酶的溶液的質量體積比 為lg : 1. 0-2. Oml。
3. 根據權利要求1所述的一種具有防治類風溼性關節炎的白藜蘆醇緩釋膠囊的製備 方法，其特徵在於所述步驟(1)中的大孔吸附樹脂的用量為虎杖粉質量的0.5-2倍。
4. 根據權利要求1所述的一種具有防治類風溼性關節炎的白藜蘆醇緩釋膠囊的製備 方法，其特徵在於所述步驟(1)中的分離是指用D型大孔吸附樹脂柱子，流速1L/分鐘，用 去離子水洗脫至無色。
5. 根據權利要求1所述的一種具有防治類風溼性關節炎的白藜蘆醇緩釋膠囊的製備 方法，其特徵在於所述步驟(1)中的洗脫是指先後用15wt^乙醇和75wt^乙醇進行洗脫。
全文摘要
本發明涉及一種具有防治類風溼性關節炎的白藜蘆醇緩釋膠囊的製備方法，包括粉碎虎杖粉得10-30目的粗粉，加入纖維素酶液預進行處理，然後用乙醇回流提取，接著用大孔吸附樹脂分離，再傾入水和乙醇進行洗脫後，加入活性炭脫色，最後用乙醇反覆結晶得白藜蘆醇；分別製備速釋顆粒和緩釋顆粒，然後將速、緩二顆粒按質量比1∶1混合，填充膠囊，即可。該製備方操作簡單，原料來源廣泛，成本低，對環境友好，在製備過程中加入纖維素酶預處理，大大提高了有效成分的轉移率，確保了提取的白藜蘆醇的純度，適合工業化生產。
文檔編號A61P19/02GK101693022SQ20091019775
公開日2010年4月14日 申請日期2009年10月27日 優先權日2009年10月27日
發明者沈海龍, 趙正福 申請人:趙正福;