酶抑制劑的製作方法

2023-06-04 15:55:31

專利名稱：：酶抑制劑的製作方法酶抑制劑本發明涉及抑制組蛋白脫乙醯酶家族成員的化合物以及該化合物在治療包括癌症在內的細胞增殖疾病、聚穀氨醯胺病如亨廷頓病、神經變性疾病如阿耳茨海默病、自身免疫性疾病如類風溼性關節炎和器官移植排斥、糖尿病、血液學疾病、炎性疾病、心血管疾病、動脈粥樣硬化以及感染的炎性後遺症中的應用。發明背景在真核細胞中，DNA被組蛋白包裹以形成染色質。大約150個DNA鹼基對在組蛋白八聚體(組蛋白2A、2B、3和4各兩個)周圍被包裹兩次從而形成染色質的基本單位一核小體。染色質的有序結構需要被修飾以轉錄相關基因。轉錄調節是分化、增殖和凋亡的關鍵，因此被密切控制。對染色質結構改變的控制(以及因此對轉錄的控制)受組蛋白的共價修飾調節，最顯著的是N-末端尾巴。對胺基酸側鏈的共價修飾(例如甲基化、乙醯化、磷酸化和泛素化)是由酶介導的(有關組蛋白的修飾以及它們在轉錄調節中的作用的綜述可在BergerSL2001Oncogene20，3007-3013中找到；參見Grunstein，M1997Nature389，349-352;WolffeAP1996Science272，371-372;以及WadePA等，1997TrendsBiochemSci22，128-132，其中回顧了組蛋白的乙醯化和轉錄)。組蛋白的乙醯化與具有轉錄活性的染色質區域有關，而具有低乙醯化水平的核小體通常是轉錄沉默的。組蛋白的乙醯化狀態受兩類活性相對的酶控制組蛋白乙醯轉移酶(HAT)和組蛋白脫乙醯酶(HDAC)。在轉化的細胞中，據信HDAC的不適當的表達導致腫瘤抑制因子沉默(關於HDAC在腫瘤發生中的作用的綜述，可參見GraySG和TehBT2001CurrMolMed1，401-429)。該文獻中已經描述了HDAC酶抑制劑並顯示它可誘導某些基因的轉錄再激活，從而導致抑制癌細胞增殖、誘導凋亡和抑制腫瘤在動物中生長(相關綜述，可參見Kelly，WK等，2002ExpertOpinInvestigDrugs11，1695-1713)。這種發現提示，HDAC抑制劑有治療癌症等增殖性疾病的治療潛能(Kramer,OH等，2001TrendsEndocrinol12，294-300，VigushinDM和CoombesRC2002AnticancerDrugs13，1-13)。此外，還提到異常的HDAC活性或組蛋白乙醯化與以下疾病和紊亂有關聚穀氨醯胺病如亨廷頓病(HughesRE2002CurrBiol12，R141-R143;McCampbellA等，2001ProcSocNatlAcadSci98，15179-15184;HocklyE等，2003ProcSocNatlAcadSci100，2041-2046)，其它神經變性疾病如阿耳茨海默病(HempenB和BrionJP1996，JNeuropatholExpNeurol55，964-972)，自身免疫性疾病和器官移植排斥(SkovS等，2003Blood101，1430-1438;MishraN等，2003JClinInvest111，539-552)，糖尿病(MosleyAL和OzcanS2003JBiolChem278，19660陽19666)和糖尿病併發症，感染(包括原生動物感染(Darkin-Rattray，SJ等，1996ProcSocNatlAcadSci93，13143-13147))和血液學疾病包括地中海貧血(WittO等，2003Blood101，2001-2007)。這些文獻中的觀察結果提示，抑制HDAC對於這些疾病以及其它相關疾病應具有治療益處。已經提出過許多類型的HDAC抑制劑化合物，這些化合物中的一些目前正在接受關於治療癌症的臨床評價。例如，以下專利申請公開了這種化合物US5,369,108禾卩WOWO03畫395WO04/1109890測171WO03/076400WO04/092115US4,254,220WO03/076401WO0柳22柳1WO01/70675WO03/076421WO05/014588WO01/38322WO03/076430WO05/018578WO02/30879WO03/076422WO05/019174WO02/26703WO03艦2明WO05/004861WO02/069947WO03/08TO57WO05/007091WO02/26696WO03/092686WO05/030704WO0纖22幼WO03,579WO05/013958WO02/22577WO03/011851WO05/028447WO03/075929WO04/013,30WO05/026907其中，環A是具有任選的取代基R的碳環或雜環環系統，[鍵合基(linker)]是各種類型的鍵合基。異羥肟酸(hydroxamate)基團作為金屬連接基團，與HDAC酶活性位點上的金屬離子相互作用，其位於摺疊的酶結構內的袋的基部。環或環系統A位於含有金屬離子的袋內或入口上，而-(鍵合基]-基團深入到該袋中以使A與結合異羥躬本領域抑制的HDAC抑制劑中有許多具有式(A)所示的結構模板:酸基的金屬相連。在本領域中，環或環系統A有時被非正式地稱為抑制劑的"頭部基團(headgroup)",在本文中有時也這樣。使用前藥來增強到靶器官和組織的遞送或克服母體藥物較差的藥代動力學特性是一種熟知的藥物化學方法。給予酯類前藥，例如可在體內被血清羧酸酯酶水解成活性母體酸的酯，能使母體酸的血清水平高於給予酸本身。發明簡述本發明基於以下發現，即將a胺基酸酯基團引入上述HDAC抑制劑分子模板(A)有助於藥劑透過細胞膜，從而使細胞內羧酸酯酶活性水解酯以釋放母體酸。酸在帶有電荷時不容易被轉運出細胞，從而會累積而提高活性HDAC抑制劑的細胞內濃度。這導致作用潛能提高且持續時間增加。因此，本發明提供了一類以具有a胺基酸酯部分為結構特徵的化合物，a胺基酸酯部分是共價連接到HDAC抑制劑分子模板的細胞內羧酸酯酶(文中也稱為"酯酶基序")的底物，並提供了相應的去酯化的母體酸，這種化合物具有藥物用途，可用於治療諸如癌症等受益於在細胞內抑制HDAC的疾病。發明詳述根據本發明，提供了一種式(I)的化合物其鹽、N-氧化物、水合物或溶劑合物/N—Y—L1—X1—[CH2];H其中，&是羧酸基(-COOH)或是可被一種或多種細胞內羧酸酯酶水解成羧酸基的酯基；R2是天然或非天然a胺基酸的側鏈；Y是鍵、-C(=0)-、-S(=0)r、-C(=0)0-、-C(=0)NR3-、-C(=S)-NR3、-C(=NH)NR3或-S(K))2NR3-，其中R3是氫或任選取代的C,-C6烷基；L1是式-(Alk、(Q)n(Alk2)p-的二價基團，其中，m、n和p獨立為0或1，Q是:(i)具有5-13個環成員的任選取代的二價單環或雙環碳環或雜環基團，或(ii)，當m和p都是0時是式-X、QL或-Q^X、的二價基團，其中乂2是-0-，:鍵合基1—CONHOH(I)S-或NRA-，其中RA是氫或任選取代的C廣C3烷基，(^是具有5-13個環成員的任選取代的二價單環或雙環碳環或雜環基團，AU^和AlP獨立代表任選取代的二價C3-C7環烷基，或任選取代的直鏈或支鏈的C,-C6亞垸基、CrC6亞烯基或C2-C6亞炔基，所述基團可任選含有或終止於醚(-O-)、硫醚(-S-)或氨基(-NRA-)連接，其中，RA是氫或任選取代的C1-C3院基5X1代表鍵；-C(=0);或-8(=0)2-;-NR4C(=0)-、國C(K))NR4-、-NR4C(=0)NR5-、-^8(=0)2-或-8(=0)2^-，其中R4和Rs獨立為氫或任選取代的C,-C6垸基；Z是0或1;A代表任選取代的單環、二環或三環碳環或雜環環系統，其中，基團R,R2NH-Y-L、X、[CH2]z-和HONHCO-[鍵合基]-結合於不同的環原子；和-[鍵合基-代表連接A中的環原子與異羥肟酸基CONHOH的二價鍵合基，該鍵合基的長度，即從連接A的環原子的最後一個原子到連接異羥肟酸基的最後一個原子的長度，等於含有3-10個碳原子的無支鏈飽和烴鏈的長度。儘管上面的定義可能包括高分子量的分子，但根據藥物化學實踐的一般原則，優選本發明涉及的化合物的分子量應不超過600。在另一個廣義方面，本發明提供了上面定義的式(I)的化合物或其N-氧化物、鹽、水合物或溶劑合物在製備用於抑制HDAC酶活性的組合物中的應用。本發明涉及的化合物可用於在體外或體內抑制HDAC活性，尤其是HDAC1活性。在本發明的一個方面，本發明的化合物可用於製備用來治療以下疾病的組合物細胞增殖疾病如癌細胞增殖、聚穀氨醯胺病如亨廷頓病、神經變性疾病如阿耳茨海默病、自身免疫性疾病如類風溼性關節炎、器官移植排斥、糖尿病、血液學疾病、感染(包括但不限於原生動物和真菌感染)、炎性疾病、以及包括動脈粥樣硬化在內的心血管疾病。另一方面，本發明提供了一種治療上述疾病類型的方法，所述方法包括給予患有這種疾病的對象有效量的如上文所定義的式(I)的化合物。術語"酯"或"酯化的羧基，，表示基團R90(C=0)-，其中R9是從理論上說衍生自醇R9OH的酯的特徵性基團。文中，術語"(CVCb)垸基"，其中a和b是整數，表示含有a-b個碳原子的直鏈或支鏈垸基。因此，例如當a是l而b是6時，該術語包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基和正己基。文中，術語"二價(CVCb)亞烷基"，其中a和b是整數，表示含有a-b個碳原子和兩個不飽和化學價的飽和烴鏈。文中，術語"((VCb)烯基"，其中a和b是整數，表示含有a-b個碳原子並具有至少一個合適的E或Z立體化學的雙鍵的直鏈或支鏈烯基部分。該術語包括，例如，乙烯基、烯丙基、l-和2-丁烯基和2-甲基-2-丙烯基。文中，術語"二價(CVCb)亞烯基"表示含有a-b個碳原子、至少一個雙鍵和兩個不飽和化學價的烴鏈。文中，術語"CVCb炔基"，其中a和b是整數，表示含有2-6個碳原子且還含有一個三鍵的直鏈或支鏈烴基。該術語將包括，例如，乙炔基、l-丙炔基、l-和2-丁炔基、2-甲基-2-丙炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、4-戊炔基、2-己炔基、3-己炔基、4-己炔基和5-己炔基。文中，術語"二價(CVCb)亞炔基"，其中a和b是整數，表示含有2-6個碳原子和至少一個三鍵的二價烴鏈。文中，術語"碳環"指含有最多達16個環原子且所有環原子均為碳原子的單環、二環或三環基團，並包括芳基和環垸基。文中，術語"環烷基"指含有3-8個碳原子的單環的飽和碳環基團，該術語包括，例如，環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基和環辛基。文中，非限制性術語"芳基"指單環、二環或三環的碳環芳香基團，並包括含有兩個通過共價鍵直接相連的單環碳環芳香環的基團。這種基團的例子有苯基、聯苯基和萘基。文中，非限制性術語"雜芳基"指含有一個或多個選自S、N或0的雜原子的單環、二環或三環芳香基團，並包括含有通過共價鍵直接相連的兩個此類單環或者一個此類單環和一個單環芳基環的基團。這種基團的例子有噻吩基、苯並噻吩基、呋喃基、苯並呋喃基、吡咯基、咪唑基、苯並咪唑基、噻唑基、苯並噻唑基、異噻唑基、苯並異噻唑基、吡唑基、噁唑基、苯並噁唑基、異噁唑基、苯並異嚼、唑基、異噻唑基、三唑基、苯並三唑基、噻二唑基、噁二唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、吲哚基和吲唑基。文中，非限制性術語"雜環基"或"雜環"包括上面定義的"雜芳基"，其非芳香含義包括含有一個或多個選自S、N或O的雜原子的單環、二環或三環非芳香基團，並包括由含有一個或多個這種雜原子的單環非芳香基團構成的基團，所述單環非芳香基團共價連接到另一個此類基團或連接到單環碳環基團。這種基團的例子有吡咯基、呋喃基、噻吩基、哌啶基、咪唑基、噁唑基、異嗎唑基、噻唑基、噻二唑基、吡唑基、吡啶基、吡咯垸基、嘧啶基、嗎啉基、哌嗪基、吲哚基、嗎啉基、苯並呋喃基、吡喃基、異嗯唑基、苯並咪唑基、亞甲基二氧苯基、亞乙基二氧苯基、馬來醯亞胺基(maleimido)和琥珀醯亞胺基。除非當其出現時文中另有說明，術語"取代的"用於本文所述的任何部分時表示被最多4個相容的取代基取代，各取代基獨立為，例如，(C!-C6)烷基，(d-C6)烷氧基，羥基，羥基(CrC6)垸基，巰基，巰基(CrC6)垸基，(d-C6)垸硫基，苯基，滷素(包括氟、溴和氯)，三氟甲基，三氟甲氧基，硝基，腈(-CN)，氧代，-COOH，-COORA，-cora，-so2ra，-conh2，-so2nh2，-conhra，-so2nhra，陽conrArb，-so2nrarb，-NH2，畫NHRA，-NRARB，-OCONH2，-OCONHRA，-OCONRARB，-NHCORA，-NHCOORA，-NRBCOORA，-NHS02ORA，-NRBS02OH，-NRBS02ORA，-NHCONH2，-NRACONH2，-NHCONHR8，-NRaCONHRb，-NHCONRARB或-NRACONRARB，其中，rA和rB獨立為(C,-C6)烷基，(C3-C6)環垸基，苯基或含有5或6個環原子的單環雜芳基。"任選的取代基"可以是上述取代基之一。術語"天然或非天然a-胺基酸的側鏈"表示式NH2-CH(R、COOH所示天然或非天然胺基酸的W基團。天然a胺基酸的側鏈的例子包括丙氨酸、精氨酸、天冬醯胺、天冬氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、穀氨酸、組氨酸、5-羥基賴氨酸、4-羥基脯氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸、纈氨酸、a-氨基己二酸、a-氨基-正丁酸、3,4-二羥基苯丙氨酸、高絲氨酸、a-甲基絲氨酸、鳥氨酸、2-哌啶酸和甲狀腺素的側鏈。在其特徵性側鏈中含有功能性取代基如氨基、羧基、羥基、巰基、胍基、咪唑基或吲哚基的天然a-胺基酸包括精氨酸、賴氨酸、穀氨酸、天冬氨酸、色氨酸、組氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸和半胱氨酸。在本發明的化合物中，當R2是上述側鏈之一時，則所述功能性取代基可任選被保護。術語"保護的"當用於天然a-胺基酸側鏈中的功能性取代基時表示衍生這種取代基使其基本失去功能。例如，羧基可被酯化(例如Q-C6垸基酯)，氨基可被轉化成醯胺(例如作為NHCOd-C6烷基醯胺)或氨基甲酸酯(例如作為NHC—0)OCrC6烷基或NHC(=0)OCH2Ph氨基甲酸酯)，羥基可被轉化成醚(例如OCrC6烷基或0(d-C6垸基)苯基醚)或酯(例如0C—0)d-C6烷基酯)，硫醇基團可被轉化成硫醚(例如叔丁基或苄基硫醚)或硫代酸酯(thioester)(例如SC(=0)CrC6垸基硫代酸酯)。非天然a胺基酸的側鏈的例子包括下文在討論用於本發明化合物的合適的R2基團時提到的那些。文中，術語"鹽"包括鹼加成鹽、酸加成鹽和季鹽(quatemarysalt)。酸性的本發明的化合物可與鹼、有機鹼形成鹽，包括藥學上可接受的鹽，所述鹼例如鹼金屬的氫氧化物如氫氧化鈉和氫氧化鉀；鹼土金屬的氫氧化物如氫氧化鈣、氫氧化鋇和氫氧化鎂；所述有機鹼例如N-甲基-D-葡糖胺、膽鹼三(羥甲萄氨基-甲垸、L-精氨酸、L-賴氨酸、N-乙基哌啶、二苄基胺等。那些鹼性的化合物(I)可與無機酸和有機酸形成鹽，包括藥學上可接受的鹽，所述無機酸例如氫滷酸如鹽酸或氫溴酸、硫酸、硝酸或磷酸等，所述有機酸例如乙酸、酒石酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、蘋果酸、水楊酸、檸檬酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、苯甲酸、苯磺酸、穀氨酸、乳酸和扁桃酸等。由於存在不對稱碳原子，含有一個或多個實際的或潛在的手性中心的本發明的化合物可作為許多在各手性中心上具有R或S立體化學的非對映異構體存在。本發明包括所有這些非對映異構體和它們的混合物。如上所述，本發明的酯是它們將被細胞內羧酸酯酶轉化成的相應羧酸的主要前藥。然而，只要它們還未被水解，所述酯本身就具有HDAC抑制活性。本發明的化合物不僅包括酯，還包括相應的羧酸水解產物。異羥肟酸基團-C一O)NHOH在本發明的化合物中，異羥肟酸基團作為金屬連接基團，與HDAC醇活性位點上的金屬離子相互作用，其位於摺疊的酶結構內的袋的基部。環或環系統A環或環系統A是任選被取代的單環、二環或三環碳環或雜環環系統。在本發明的化合物中，當結合到HDAC酶的活性位點時，環或環系統A位於含有金屬離子的袋內或入口處，而-(鍵合基]-基團深入到該袋中以使A與結合異羥肟酸基的金屬相連。在本領域中，環或環系統A有時被非正式地稱為抑制劑的"頭部基團"。環系統A的例子包括以下這些其中R,o是氫或任選取代的C,-C6烷基，被波浪線貫穿的鍵連接化合物(I)中的鍵合基，而化合物(I)中的基團R,R2CHNHYlJx、CH2]z與所示環系統中任何方便的環原子相連。-r鍵合基i-基團-[鍵合基]-代表連接A中的環原子與異羥肟酸基CONHOH的二價鍵合基，該鍵合基的長度，即從連接A的環原子的最後一個原子到連接異羥肟酸基的最後一個原子的長度，等於含有3-10個碳原子的無支鏈飽和烴鏈的長度。含有3個碳原子的無支鏈飽和烴鏈的長度約為2.5埃，含有10個碳原子的無支鏈飽和鏈烴的長度約為11.3埃。任何給定的-[鍵合基]-的長度可根據文獻中的原子半徑和鍵長數據來確定，或者可用DSViewerPro(Accelrys，Inc)等化學結構建模軟體來確定。-[鍵合基]-的規定長度反映了頭部基團A可位於酶活性位點上的含有金屬離子的袋入口處或該袋內這一事實，因此與袋的深度鬆散相關。在多數情況下，鍵合基的長度將等於有4-9個碳原子，例如5、6或7個碳原子的無支鏈飽和烴鏈的長度。具體通用類型的-[鍵合基]-是下述"1型"、"2型"和"3型"鍵合基。l型鍵合基在這種類型中，-[鍵合基]-代表式為-(<:112、-2丄2-的二價基團，其中x是O或1;Z是鍵、-NR3-、-NR3C(=0)-、-C(=0)NRr、-NR4C(=0)-NR3-、-C(=S)-NR3、陽C^N)-NR3-NR3S^O)2-或-S(K))2NR3-，其中R3是氫或CVC6烷基；-C(=0);或-S(=0)2-;禾口1^代表任選取代的直鏈或支鏈的CVC7亞垸基、C4-C6亞烯基或C4-C6亞炔基，所述基團任選含有或終止於醚(-O-)、硫醚(-S-)或氨基(-NRA-)連接，其中，RA是氫或任選取代的Q-C3垸基。在這種類型的鍵合基的一個亞類中，在任何相容的組合中，x是0;Z是-NH-、-c(=o)-、-,<:(=0)-或-(:(=0),國和1是-((:112)5-、-(<:!12)6-或-((:112)7陽。2型鍵合基在這種類型中，-[鍵合基]-代表式為-(<:112))(丄3-八一丄4-的二價基團，其中X是O或1;1^是Z或I^或Z-L2，其中，Z如對l型鍵合基的定義，I是鍵或任選取代的二價Q-C3亞烷基；Ar'是二價苯基或具有5-13個環成員的二價單環或二環雜芳基，和L4是鍵或任選取代的-CH2-或-Cr^CH-。在這種類型的鍵合基的一個亞類中，在任何相容的組合中，x是0或l;I是Z或Z-L2，其中Z是-NH-、-NHS(=0)2-、-S(K))2NH-或-S(-0)2-;1^2是-0"12丄4是鍵或-CH2-;和Ar'是選自下組的二價基團其中，X是O、S或NH。在上述A,基團中，一個具體的例子是苯並[b]噻吩-6-基在這種類型的鍵合基的一個亞類中，在任何相容的組合中，X是0;1^是L2，其中I是可任選含有醚(-0-)、硫醚(-S-)或氨基(-NRA-)連接的直鏈CrC5亞烷基，其中，RA是氫或任選取代的CrC3烷基，例如羥乙基；Ar1是選自上段所列基團的二價基團。在這種類型的另一個亞類中，x是0，1^3和1/是鍵，A—是二價苯基或含有9-13個環成員的二價二環雜芳基，例如可選自下組xw々uX少Q、、Pu'其中，X選自0、S或NH，P、Q和U獨立選自N和CH;用"標記的鍵連接到CONHOH基團；用4示記的鍵連接到環或環系統A。3型鍵合基在這種類型中，-[鍵合基]-代表式為-(CH2)x-L3-B-Ar1-L4-的二價基團，其中x、Ar1，!^和1/如上文對2型鍵合基的討論；B是單環或二環雜環環系統。在這種類型的鍵合基的一個亞類中，B是以下基團之一廠NVN-formulaseeoriginaldocumentpage19其中，X是N，W是NH、O或S。酯基A必須是本發明化合物中被一種或多種細胞內羧酸酯酶水解成羧酸基的基團。能夠將本發明化合物的酯基水解成相應的酸的細胞內羧酸酯酶包括三種已知的人類的酶的同種型hCE-l、hCE-2和hCE-3。儘管這些酶被認為是主要的酶，但其它的酶如聯苯基水解酶(BPH)也具有水解酯的作用。通常，如果羧酸酯酶將游離的胺基酸酯水解成母體酸，由於下述hCE-2和hCE-3針對的是N-羰基，則當共價結合到HDAC抑制劑時羧酸酯酶也會水解酯基序(estermotif)。因此，本文描述的破細胞測定法(brokencellassay)提供了一種直接、快速且簡便的首次篩選具有所需水解曲線的酯的方法。當將用這種方法選出的酯基序通過選擇性結合化學結合到調節物時可採用相同的羧酸酯酶測定法再次測定，以證實它仍舊是該背景下的羧酸酯酶底物。為被細胞內羧酸酯酶水解，特定的酯基!^的例子包括式-(CW)OR9的基團，其中，R9是(i)R7R8CH-，其中，R7是任選取代的(CrC3)垸基-(Z')a-(C,-C3)烷基-或(C2-C3)烯基-(Z')a-(C廣C3)垸基-，其中a是0或l，Zi是-0-、-S-或-NH-，R8是氫或(C!-C3)烷基-，或者R7和R8與它們所結合的碳原子一起形成任選取代的C3-C7環烷基環或任選取代的5或6個環原子的雜環；或(ii)任選取代的苯基或含有5或6個環原子的單環雜環。在這些種類中，R9可以是，例如，甲基，乙基，正或異丙基，正或仲丁基，環己基，烯丙基，苯基，苄基，2-、3-或4-吡啶基甲基，N-甲基哌啶-4-基，四氫呋喃-3-基或甲氧基乙基。目前優選R9是環戊基。已知巨噬細胞通過釋放細胞因子，尤其是TNFa和IL-1而在炎性疾病中發揮關鍵作用(vanRoon等，ArthritisandRheumatism,2003，1229-1238)。在類風溼性關節炎中，它們是維持關節炎症和關節破壞的主要貢獻者。巨噬細胞也參與腫瘤的生長和發展(Naldini和Carraro，CurrDrugTargetsInflammAllergy,2005，3-8)。因此，選擇性靶向巨噬細胞增殖的試劑對於治療癌症和自身免疫性疾病很有價值。預計靶向特定細胞類型能降低副作用。發明人已經發現了將HDAC抑制劑靶向巨噬細胞的方法，該方法基於以下發現，即酯酶基序連接HDAC抑制劑的方式決定了它是否被水解，因此是否在不同細胞類型中累積。具體地說，已經發現巨噬細胞含有人羧酸酯酶hCE-l而其它細胞類型不含有。在通式(I)中，當酯酶基序R^2CHNH-的氮不直接連接到羰基(-C(K))-)時，即當Y不是-C(-O)、-CtO)O-或-C(K))NRr基團時，該酯將僅被hCE-l水解，因此HDAC抑制劑將僅在巨噬細胞中累積。文中，除非具體提到"單核細胞"或"單核細胞"，術語巨噬細胞將用來表示巨噬細胞(包括腫瘤相關的巨噬細胞)和/或單核細胞。胺基酸側鏈R7當需要使酯基&被細胞內羧酸酯酶水解時，不要求側鏈基團R2是相同的。胺基酸側鏈的例子包括C,-Q烷基，苯基，2-、3-或4-羥基苯基,2-、3-或4-甲氧基苯基，2-、3隱或4-吡啶基甲基、苄基、苯基乙基，2-、3-或4-羥基苄基，2-、3-或4-苄氧基苄基，2-、3-或4-d-C6烷氧基苄基，以及苄氧基(CrC6垸基)-基團；天然a胺基酸的特徵性基團，其中的任何官能團可被保護；基團-[Alky^，其中，Alk是任選被一個或多個-0-或-S-原子或-N(R7)-基團[其中，R7是氫原子或(CVC6)烷基]打斷的(C,-C6)烷基或(CVC6)烯基或，n是0或l，&是任選取代的環烷基或環烯基；在苯環中被式-OCH2COR8的基團取代的苄基，其中R8是羥基、氨基、(Q-C6)垸氧基、苯基(Q-C6)垸氧基、(CrC6)烷基氨基、二((CrC6)垸基)氨基、苯基(Q-C6)烷基氨基、胺基酸或醯基滷的殘基、酯或其醯胺衍生物，所述殘基通過醯胺鍵連接，所述胺基酸選自甘氨酸、a或(3丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、天冬醯胺、穀氨醯胺、賴氨酸、組氨酸、精氨酸、穀氨酸或天冬氨酸；在雜環環中未被取代或被以下基團單-或二-取代的雜環(Q-C6)垸基滷素、硝基、羧基、(C-C6)烷氧基、氰基、(C廣C6)垸醯基、三氟甲基(C廣C6)烷基、羥基、甲醯、氨基、(CVC6)烷基氨基、二-(CrC6)烷基氨基、巰基、(C,-C6)垸硫基、羥基(CrC6)垸基、巰基(CrC6)垸基或(d-C6)垸基苯基甲基；和基團-CRaRbR^，其中Ra、Rb和K各自獨立為氫、(C,-C6)烷基、(CVC6)烯基、(CVC6)炔基、苯基(CVC6)垸基、(C3-C8)環烷基；或Rc是氫，Ra和Rb獨立為苯基或雜芳基，如吡啶基；或Rc是氫、(CrC6)垸基、(CVC6)烯基、(C2-C6)炔基、苯基(CVC6)垸基或(C3-C8)環垸基，Ra和Rb與它們所結合的碳原子一起形成3-8元環烷基或5-6元雜環；或Ra、Rb和Rc與它們所結合的碳原子一起形成三環(例如金剛垸基)；或Ra和Rb各自獨立為(C,-C6)烷基、(C2-C6)烯基、(CrC6)炔基、苯基(Ci-C6)焼基、或是除氫之外的如下文對Rc定義的基團，或者Ra和Rb與它們所結合的碳原子一起形成環烷基或雜環，且Rc是氫、-OH、-SH、滷素、-CN、-c02H、(CVC4)全氟垸基、-ch2oh、-c02(c廣C6)垸基、-0(<:1曙(:6)垸基、-0((:2-(:6)烯基、-s(c廣C6)垸基、-80(<:1-(:6)垸基、-802((:1-<:6)垸基、-8(<:2-(:6)烯基、-80(<32《6)烯基、-802((:2-(:6)烯基或基團-(^\^，其中，Q代表鍵或-O-、-S-、-SO-或-SOr，w代表苯基、苯基烷基、(C3-C8)環垸基、(C3-C8)環垸基垸基、(C4-C8)環烯基、(C4-C8)環烯基垸基、雜芳基或雜芳基烷基，基團w可任選被一個或多個獨立選自下組的取代基取代羥基、滷素、-cn、-c02h、-c02(c廣C6)垸基、-conh2、-(:0麗((:1-(:6)烷基、-<:0麗(<:1-(:6烷基)2、-cho、-ch2oh、(c廣Q)全氟烷基、-0(cvc6)烷基、-s(d-C6)烷基、-80(<:1-(:6)烷'基、陽so2(c廣C6)烷基、-no2、-nh2、-麗(^((<:1-(:6)烷基)2、-雨(:0((:1《6)烷基、(c廣C6)烷基、(crc6)烯基、(CVC6)炔基、(C3-C8)環烷基、(CVC8)環烯基、苯基或苄基。具體的R2基團的例子包括氫(甘氨酸"側鏈")、苄基、苯基、環己基甲基、環己基、吡啶-3-基甲基、叔丁氧基甲基、異丁基、仲丁基、叔丁基、l-苄硫基-l-甲基乙基、l-甲硫基-l-甲基乙基、l-巰基-l-甲基乙基和苯基乙基。目前優選的R2基團包括苯基、苄基和異丁基。對於要全身給予的本發明的化合物，優選被羧酸酯酶斷裂的速率慢的酯，因為這種酯不易於被系統前代謝。因此它們完整到達其靶組織的能力增強了，且所述酯可在靶組織的細胞內被轉化成酸產物。然而，對於局部給藥而言，此時酯被直接施加於耙組織或通過例如吸入直接到達靶組織，通常需要這種酯被酯酶快速斷裂，以使全身暴露和隨後不希望的副作用最小。在本發明的化合物中，如果鄰近a胺基酸酯a碳原子的碳原子被單取代，即R2是CH2RZ(RZ為單取代基)，則與上述碳原子如果被二取代或三取代(例如R2是苯基或環己基的情況)相比，這種酯趨於更快被斷裂。該基團(或鍵)來自於選擇用來偶聯胺基酸酯基序RiCH(R2)NH-與抑制劑的頭部基團A的特定化學方法。顯然，用於該偶聯的化學方法可以非常多，因此Y、L1、X1和z可以有許多組合。然而，如上所述，當抑制劑結合到HDAC酶的活性位點時，頭部基團A位於該酶含有金屬離子的袋的頂部或之內，因此，將胺基酸酯基序與頭部基團連接時，頭部基團通常向離開袋的方向延伸，從而最小化或避免了對抑制劑模板A-[鍵合基]-CONHOH的結合模式的幹擾。因此，構成胺基酸酯基序與頭部基團A之間的連接化學的變量的精確組合將通常與作為一個整體的化合物的結合模式無關。另一方面，在一些情況下，連接化學選擇與位於含有金屬離子的袋頂部或鄰近該袋的酶採取其它結合相互作用，從而增強了結合。還應當注意，當胺基酸酯基序與頭部基團之間的鍵不是細胞內肽酶活性(這種活性可導致從分子中切割下胺基酸)的底物時，上述胺基酸酯基序的益處(易於進入細胞、在細胞內被羧酸酯酶水解、以及在細胞內累積活性羧酸水解產物)最大。當然，也可將該化合物與破裂的細胞內容物一起孵育並分析任何此類切割來方便地測量對細胞內肽酶的穩定性。當頭腦中有了上述一般概念時，接下來就可以考慮構成基團-Y-lAx^[CH2]z-的各種變量Z可以是0或1，因此頭部基團A上可任選連接有亞甲基；當不需要巨噬細胞選擇性時，特別優選的Y的例子包括-(0=0)-、-(CK))NH-和-(CK))O-;當需要巨噬細胞選擇性時，Y的任何其它選擇，包括Y是鍵的情況，都是合適的。在基團L1中，當AlW和AlP基團存在時，其例子包括-CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH2CH2CH2CH2-、-CH=CH-、-CH=CHCH2-、-CH2CH=CH-、CH2CH=CHCH2-、-C三C-、-C=CCH2-、CH2C三C-和CH2C=CCH2。Alk1和Alk2的其它例子包括-CH2W-、-CH2CH2W-、-CH2CH2WCH2-、-CH2CH2WCH(CH3)-、-CH2WCH2CHr、-CH2WCH2CH2WCH2^n-WCH2CHr，其中W是-O-、-S-、-nh-、-1^(013)-或-(:112<:112:^((:112(:112011)012-。aiW和Aik2進一步的例子包括二價環丙基、環戊基和環己基。在lJ中，當n是0時，所述基團是烴鏈(任選被取代，且可能含有醚、硫醚或氨基連接)。目前優選I^中沒有任選的取代基。當m和p都是0時，"是含有5-13個環原子的二價單環或雙環碳環或雜環基團(任選被取代)。當n是1且m和p中至少有一個是l時，U是二價基團，包括一條或多條烴鏈以及含有5-13個環原子的單環或雙環碳環或雜環基團(任選被取代)。當Q存在時它可以是，例如，二價苯基、萘基、環丙基、環戊基或環己基，或是含有5-13個環成員的單環或二環雜環基團，如哌啶基、哌嗪基、吲哚基、吡啶基、噻吩基或吡咯基，但目前優選l,4-亞苯基。具體地說，在本發明的一些實施方案中，L1、m和p可以是O而n為1。在其它實施方案中，n和p可以是O而m為l。在其它實施方案中，m、n和p可以都是0。再在其它實施方案中，m可以是0，n可以是l，而Q為單環雜環基團，且p可以是0或l。Alk1和Alk2當存在時可以選自-CHr、-CH2CH24n-CH2CH2CH2-，而Q可以是1,4-亞苯基。基團-Y-I^X^CH^-的具體例子包括-C(=0)-和-C(=0)NH-、以及-(CH2)V-、formulaseeoriginaldocumentpage23其中，v是l、2、3或4，w是l、2或3，如-CH2-、-CH20-、-C(=0)-CH2-、-C(=0)-CH20-、-C(=0)-NH-CH2^n-C(=0)-NH-CH20-。本發明化合物特定亞組的例子包括式(IA)-(IM)所示的那些formulaseeoriginaldocumentpage23formulaseeoriginaldocumentpage24其中，z、R卜R2、R3、L1以及^和Y如上述有關式(I)的定義，包括其優選條件。具體的本發明化合物的例子包括以下這些(S)-[4-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄基氨基]-苯基-乙酸環戊酯(S)-2-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-節基氨基]-4-苯基-丁酸環戊酯(S)-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄基氨基]-苯基-乙酸環戊酯(S)-2-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄基氨基]-4-甲基-戊酸環戊酯(SH2-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苯基]-乙基氨基)-苯基-乙酸環戊酯(S)-2-(3-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苯氧基]-丙基氨基〉-3-苯基-丙酸環戊酯(8)-2-(4-{[(2-羥基氨甲醯基-苯並[13]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基}-苄基氨基)-3-(4-羥基-苯基)-丙酸環戊酯(S)-3-叔丁氧基-2-(4-U(2-羥基氨甲醯基-苯並[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基h苄基氨基)-丙酸環戊酯(8)-1-(4-{[(2-羥基氨甲醯基-苯並[13]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基}-苄基)-吡咯烷-2-羧酸環戊酯(S)-2-(4《(2-羥基氨甲醯基-苯並[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基L苄基氨基)-丙酸環戊酯(4-{[(2-羥基氨甲醯基-苯並[，塞吩-6-基甲基)-氨基]-甲基}-苄基氨基)-乙酸環戊酯例如，可通過下述方法和這裡的實施例中描述的方法製備本發明的化合物。例如，本發明的化合物可從相應的相應的羧酸(II)製備，方法是將其活化衍生物如醯基氯與羥胺或保護的羥胺反應。或者，N-或O-保護的或N，O-雙保護的所需化合物(I)的前體可被去保護。在這種方法的一種有用的版本中，O-保護由樹脂載體提供，可通過例如酸性水解從樹脂載體上切下所需的異羥肟酸(I)。本發明的羧基保護的化合物(II)的衍生物，或O-連接的樹脂-支持的化合物(II)的衍生物可用文獻中所述的方法合成，按照所需化合物的具體結構進行選擇。那種情況下，上述專利公開提供了關於合成與本發明的那些HDAC抑制劑結構類似的HDAC抑制劑的信息。在一種適用於化合物(I)的方法中，其中Z是亞磺醯氨基-NHS02-，可使胺(III)formulaseeoriginaldocumentpage26(III)與活化衍生物，例如磺酸HOS02-lAzS的醯基氯反應，其中，ZZ是保護的羧基，如可切割的酯或O-連接的樹脂-支持的異羥肟酸基。在另一種適用於化合物(I)的方法中，Z是醯胺基-NHC(K))-，可在存在碳二亞胺偶聯劑時使胺(III)與羧酸HOC(=0)-L-Z2反應，Z2如上一段中的定義。對於環或環系統A通過環氮原子連接到-鍵合基-CONHOH部分且Z是-(CK))-或-S02-的化合物(1)，可使合適的N-雜環(IV)(IV)與相應的羧酸或磺酸(即H00C-L、ZZ或H0S02-IAZ2，其中，ZZ如上文的定義)反應，所述羧酸或磺酸可作為其活化衍生物如氯化物或在存在碳二亞胺偶聯劑時反應。為進一步闡述文獻方法在合成上述式(I)範圍內的化合物中的應用，提供了以下反應方案l-6。在這些方案中，基團R代表本發明化合物中存在的基團R2N—Y—L'—X'——[CH2]Z——H，或代表可用文獻方法構建該基團的官能團。還在這些方法中，符號@代表固相樹脂載體。NaOH,THFEDC,HOBtNH2OH,DMF方案l、NaH,Br',OHformulaseeoriginaldocumentpage28TFA/DCM[OHAPyBOPDCMiPr2EtN,皂化和>與胺基酸方案3formulaseeoriginaldocumentpage30formulaseeoriginaldocumentpage31如上所述，本發明涉及的化合物是HDAC抑制劑，因此可用於治療人類和其它哺乳動物的細胞增殖疾病，如癌症。應理解，用於任何特定患者的具體劑量水平將取決於各種因素，其中包括採用的具體化合物的活性、年齡、體重、一般健康、性別、飲食、給藥次數、給藥途徑、排洩率、藥物組合以及接受治療的特定疾病的嚴重性。最佳劑量水平和給藥頻率將由臨床試驗確定。本發明涉及的化合物可被製成通過任何與其藥代動力學特性一致的途徑給予。可口服給予的組合物的形式可以是片劑，膠囊，粉末，顆粒，錠劑，液體或凝膠製品如口服、局部或無菌腸胃外溶液或懸浮液。供口服給藥的片劑或膠囊可採用單位劑型，並可含有常規賦形劑，如粘合劑，例如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨糖醇、黃蓍膠或聚乙烯吡咯烷酮；填料，例如乳糖、蔗糖、玉米澱粉、磷酸鈣、山梨糖醇或甘氨酸；壓片潤滑劑，例如硬脂酸鎂、滑石、聚乙二醇或二氧化矽；崩解劑，例如馬鈴薯澱粉，或可接受的潤溼劑如月桂基硫酸鈉。可按照常規製藥實踐中熟知的方法將片劑包衣。口服液體製劑的形式可以是，例如，水性或油性懸浮液、溶液、乳劑、糖漿劑或酏劑，或者可呈現為在使用前用水或其它合適載體重建的乾燥產品。這種液體製劑可含有常規的添加劑，如懸浮劑，例如山梨糖醇、糖漿、甲基纖維素、葡萄糖漿、明膠、氫化食用脂肪；乳化劑，例如卵磷脂、去水山梨糖醇單油酸酯或阿拉伯膠；非水性載體(可包括食用油)，例如杏仁油、分餾椰子油、油性酯如甘油、丙二醇或乙醇；防腐劑，例如對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯或山梨酸，需要的話還可含有常規的調味劑或著色劑。當局部施用於皮膚時，可將藥物製成霜劑、洗劑或軟膏劑。可用於藥物的霜劑或軟膏劑配方是本領域熟知的常規配方，例如標準藥物教科書如《英國藥典》(BritishPharmacopoeia)中描述的配方。為通過吸入局部施用，可將藥物製成通過氣霧劑遞送，例如通過壓力驅動的噴射霧化器或超聲霧化器，或者優選通過推進劑驅動的計量式氣霧劑或者不釆用推進劑給予微粉化粉末，例如吸入劑膠囊或其它"乾粉"遞送系統。這種吸入配方中可含有賦形劑，例如推進劑(例如，在計量式氣霧劑中為Frigen)、表面活性物質、乳化劑、穩定劑、防腐劑、調味劑和填料(例如，在乾粉吸入器中為乳糖)。為了吸入，大量裝置都是適用的，這些裝置能產生最佳粒度的氣溶膠並採用適合患者的吸入技術給予。除了採用適配器(間隔物(spacer)、擴展器)和梨形容器(例如Nebulator、Volumatic)以及發射吹入噴霧的自動裝置(Autohaler⑧)，為給予經過計量的氣溶膠，尤其是採用乾粉吸入器時，許多技術方案是適用的(例如，Diskhaler、Rotadisk、Turbohaler或者例如歐洲專利申請EPO505321中描述的吸入器)。為局部施用於眼睛，可用合適的水性或非水性無菌載體將藥物製成溶液或懸浮液。也可含有添加劑，例如，緩衝劑，如偏亞硫酸氫鈉或依地酸二鈉；防腐劑，包括殺菌劑和殺真菌劑如醋酸苯汞或硝酸苯汞、苯扎氯銨或氯己定；以及增稠劑，如羥丙甲纖維素。也可採用無菌介質腸胃外給予活性成分。根據所用載體和濃度，藥物可懸浮於或溶於載體中。有利地，佐劑如局部麻醉劑、防腐劑和緩衝劑也可溶於載體。以下實施例例舉了本發明的具體化合物的製備及其HDAC抑制特性在這些實施例中市售試劑和溶劑(HPLC級)無需進一步純化即可使用。微波照射用CEMDiscover聚焦微波反應器進行。用無加熱的GeneVacSeriesI或具有30°CVacRamp的GenevacSeriesII或Buchi旋轉式蒸發儀除去溶劑。用獲自Silicycle的粒度為40-63|im(230-400目)的矽膠通過快速層析柱純化化合物。用製備型HPLC純化化合物是在Gilson系統上進行的，採用反相ThermoHypersil-KeystoneHyperprepHSC18柱(12,，訓x21.2mm)，9.5分鐘20-100%B梯度(A-水/0.P/oTFA，B=乙腈/0.1o/。TFA)，流速=30ml/min，加樣溶劑2:1DMSO:乙腈(1.6ml)，在215nmUV檢測。在氘化溶劑中用Bruker400MHzAV光譜儀記錄NMR譜。化學位移(S)用用百萬分之一份(ppm)表示。用Kieselgel60F254(Merck)板進行薄層層析(TLC)分析並用紫外光顯色。分析型HPLCMS在AgilentHPllOO、Waters600或Waters1525LC系統上進行，採用反相HypersilBDSC18柱(5pm,2.1x50mm)，2.10分鐘0-95%B梯度(A^水/0.1%TFA，B=乙腈/0.1。/。TFA)，流速=1.0ml/min。用GilsonG1315A二極體陣列檢測器、G1214A單波長UV檢測器、Waters2487雙波長UV檢測器、Waters2488雙波長UV檢測器或Waters2996二極體陣列UV檢測器記錄215nm的UV光譜。用具有Z-噴射界面的MicromassLCT或者具有Z-噴射或MUX界面的MicromassLCT以每秒掃描2次或每1.2秒掃描1次的採樣速率獲得m/z150-850之間的質譜。數據用OpenLynx和OpenLynxBrowser軟體積分和報告。採用以下縮寫MeOH=甲醇EtOH-乙醇EtOAc=乙酸乙酯Boc=叔丁氧基羰基Cbz=節氧羰基(carbobenzyloxy)DCM=二氯甲烷DCE=二氯乙烷DMF=二甲基甲醯胺DMSO=二甲亞碸TFA=三氟乙酸THF=四氫呋喃Na2C03=碳酸鈉HC1=鹽酸DIPEA=二異丙基乙胺NaH=氫化鈉NaOH=氫氧化鈉NaHC03=碳酸氫鈉Pd/C=碳載鈀TBME=叔丁基甲基醚DMAP=4-二甲基氨基吡啶N2=氮氣PyBop=苯並三唑-l-基-氧-三-吡咯垸-磷鏡六氟磷酸鹽Na2S04=硫酸鈉Et3N=三乙胺NH3=氨TMSC1=三甲基氯矽烷NH4C1=氯化銨LiAlH4=氫化鋁鋰pyBrOP=溴代-三-吡咯垸磷鎩v六氟磷酸鹽MgS04=硫酸鎂Mn02=二氧化錳nBuLi=正丁基鋰C02=二氧化碳EDCI-AK3-二甲基氨基丙基)W-乙基碳二亞胺鹽酸鹽Et20=二乙醚LiOH=氫氧化鋰HOBt-l-羥基苯並三唑DIAD=偶氮二羧酸二異丙酯HATU=0-(7-氮雜苯並三唑-l-基-A/;A/;A^7V'-四甲基脲鏡(uronium)六氟磷酸鹽ELS=蒸發光散射TLC=薄層層析ml=毫升g=克mg=毫克mol=摩爾mmol=毫摩爾eq=摩爾當量LCMS-高效液相色譜/質譜NMR=核磁共振r.t.=室溫樹脂化學的標準洗滌過程樹脂按以下順序洗滌DMF，MeOH,DMF，MeOH，DCM，MeOH，DCM，MeOHx2，TBMEx2。樹脂的測試切除室溫下將少量功能化的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(約0.3ml反應混合物，約10mg樹月旨)用2。/。TFA/DCM(0.5ml)處理10分鐘。過濾樹脂，濾液通過氮氣氣流吹掃濃縮。獲得殘餘物的LCMS。(注意對於功能化的羥胺Wang樹脂的測試切除採用50%TFA/DCM進行)。製備辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂formulaseeoriginaldocumentpage36階段1—固定到2-氯三苯甲基-0-NH2樹脂formulaseeoriginaldocumentpage36在裝有2-氯三苯甲基-0-NH2樹脂(6g，以1.14mmol/g加載，6.84mmol)和DCM(60ml)的圓底燒瓶中加入二異丙基乙胺(5.30，41.0mmol，6eq)。邊定軌振蕩(orbitalshaking)邊在反應混合物中緩慢加入8-氯-8-氧代辛酸甲酯(4.2g，20.5mmol，3eq)，再將將反應混合物振蕩48小時。將樹脂過濾，並用標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。LCMS純度通過ELS檢測測定，100%，m/z204[]Vr+H]+。階段2_皂化formulaseeoriginaldocumentpage36在裝有階段1的樹脂(4g，以1.14mmol/g加載，4.56mmol)的圓底燒瓶中加入THF(16ml)和MeOH(16ml)。在反應物中加入NaOH(0.91g，22.8mmol，5叫)的水(16ml)溶液。將反應混合物振蕩48小時。將樹脂過濾並用水X2和MeOHX2洗滌，然後用標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。LCMS純度通過ELS檢測測定，100%m/z190[M"+H]+。製備環戊酯該酯按照以下方法之一製備。方法A—合成(S)-2-氨基-3-叔丁氧基-丙酸環戊酯formulaseeoriginaldocumentpage36階段1:(S)-2-苄氧基羰基氨基-3-叔丁氧基-丙酸環戊酯formulaseeoriginaldocumentpage37將(S)-2-苄氧基羰基氨基-3-叔丁氧基-丙酸(4g，0.014mol)溶於DMF(40ml)。加入環戊醇(2.54ml，0.027mol)和二甲基氨基吡啶(0.165g，0.014mol)。溶液用冰浴冷卻至(TC並在其中加入N-(3-二甲基氨基丙基)-N，-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(2.73g，(X014mo1，1.05eq.)。混合物在0。C攪拌IO分鐘，然後使其回復室溫並再攪拌18小時。在反應混合物中加入水(20-30ml)，然後加入EtOAc(40ml)。分離各層，含水層用EtOAc(15ml)重新萃取。合併的有機層用水(4x20ml)洗滌，乾燥(MgS04),並在真空下除去溶劑以得到殘餘物。通過柱層析(l:lEtOAc/庚烷)純化得到無色油狀產物(3.82g，78%產率)。！HNMR(300MHz，CDC13)，5:U5(9H，s，CH3x3)，1.50-1.90(8H，m，CH2x4)，3.57(1H，dd，J=7.4,1.2Hz，CH)，3.85(1H，dd，J=7.4，1.2Hz，CH)，4.45(1H，m，CH)，5.15(2H，s，CH2)，5.25(1H，m，CH)，5.65(1H，d，CH，J=7,6Hz)，7.30-7.50(5H，m，ArHx5)。階段2:(S)-2-氨基-3-叔丁氧基丙酸環戊酯將(S)-2-苄氧基羰基氨基-3-叔丁氧基-丙酸環戊酯(3.82g，O.Ollmol)溶於EtOH(50ml)。在溶液中小心加入20重量％氫氧化鈀(溼)。將系統排空並在氫氣氛下放置4小時。將系統排空並通過硅藻土濾去殘餘的鈀。硅藻土用EtOH(3x5ml)充分洗滌。在真空下除去濾液的溶劑以得到無色油狀產物(2.41g，100%產率)。^NMR(300MHz，CDC13)，5:1.15(9H,s，CH3x3)，1.50-1.90(IOH，m，CH2x4，NH2)，3.50-3,70(3H，m，CH2，CH)，5.22(1H，s，CH)。方法B—合成(S)-氨基-環己基-乙酸環戊酯formulaseeoriginaldocumentpage38階段l:(S)-叔丁氧基羰基氨基-環己基-乙酸環戊酯該物質用與(S)-2-節氧基羰基氨基-3-叔丁氧基-丙酸環戊酯(方法A，階段l)相同的方法但從(S)-叔丁氧基羰基氨基-環己基乙酸製備。1HNMR(300MHz，CDC13)，S:1.00-1.40(IOH，m，CHxlO)，1.45(9H，s，C(CH3)3)，1.60-2.00(8H，m，4xCH2)，4.15(1H，m，CH)，5.05(1H，d，NH，J=7.6Hz)，5.25(1H，m，CH)。階段2:(S)-氨基-環己基-乙酸環戊酯(TC下將(S)-叔丁氧基羰基氨基-環己基-乙酸環戊酯(1.17g，3.60mmol)溶於TFA/DCM混合物(l:l，10ml)。將溶液攪拌90分鐘，在真空下除去溶劑。殘餘物與DCM/庚烷混合物共沸(2x)以得到膠狀物。將膠狀物重溶於DCM(10ml)並用飽和NaHC03水溶液(3xl0ml)洗滌，乾燥(MgS04)並過濾。在真空下除去濾液的溶劑以得到油狀產物(0.780g，78%產率)。'H薩R(300MHz，CDC13)，S:1.00-1.40(IOH，m，CHxlO)，1.50-2.00(8H，m，CHx8)，3.25(1H，d，CH，J=7.2Hz)，5.20(1H，m，CH)。方法C一合成(S)-2-氨基-4-甲基-戊酸環戊酯階段l:(S)-2-氨基-4-甲基-戊酸環戊酯甲苯-4-磺酸formulaseeoriginaldocumentpage39在(S)-亮氨酸(15g，0.11mol)的環己烷(400ml)懸浮液中加入環戊醇(103.78ml，1.14mmol)和對甲苯磺酸(23.93g，0.13mol)。將懸浮液加熱回流以有效溶劑化。將溶液回流16小時後將其冷卻以得到白色懸浮液。將庚烷(500ml)加入混合物並過濾懸浮液以得到白色固體狀產物(35g，85%產率)。iHNMR(300MHz，MeOD)，5:1.01(6H，t，CH3x2，J=5.8Hz)，1.54-2.03(IIH，m，llxCH)，2.39(3H，s，CH3)，3.96(1H，t，CH，J=6.5Hz)，5.26-5.36(1H，m，CH)，7.25(2H，d，ArHx2，J=7.9Hz)，7.72(2H，d，ArHx2，J=8.3Hz)。階段2:合成(S)-2-氨基-4-甲基-戊酸環戊酯formulaseeoriginaldocumentpage39(S)-2-氨基-4-甲基-戊酸環戊酯甲苯-4-磺酸(2.57g，0.013mol)的DCM(5ml)溶液用飽和NaHC03水溶液(2x3ml)洗滌。合併的含水層用DCM(3x4ml)回萃。將合併的有機層乾燥(MgSO4)並在真空下除去溶劑以得到無色油狀物(1.10g,80%產率)。iHNMR(300固z，CDC13)，5:0.卯(6H，t，CH3x2,J=6.4Hz)，1.23-1.94(IIH，m，5xCH2，CH)，3.38(1H，dd，CH，J=8.4，5.9Hz)，5.11-5.22(1H,m，CH)。方法D—合成(S)-2-氨基-3-叔丁硫基(butylsulfanyl)-丙酸環戊酯formulaseeoriginaldocumentpage39階段1:(S)-3-叔丁硫基-2-(9H省-9-基甲氧基羰基氨基)-丙酸環戊酯formulaseeoriginaldocumentpage39該物質用與(S)-2-苄氧基羰基氨基-3-叔丁氧基-丙酸環戊酯(方法A，階段l)相同的方法但從(S)-3-叔丁硫基-2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)-丙酸製備。]HNMR(300顧z，CDC13)，5:1.30(9H，s，(CH3)3)，1,55-1,95(8H，m，CH2x4)，3.05(2H，d，CH2，J=4.8Hz)，4.20-4.30(1H，m，CH)，4.40(2H，d，CH2，J=7.5Hz)，4.65(1H，m，CH)，5.25(1H，m，CH)，5.70(1H，d，NH，J=7.8Hz)，7.30-7.50(4H，m，ArHx4)，7.65(2H，d，J=7.5Hz，ArHx2)，7.80(2H，d，J=7.5Hz，ArHx2)。階段2:(S)-2-氨基-3-叔丁硫基-丙酸環戊酯(TC下將(S)-3-叔丁硫基-2-(9H-芴-9-基甲氧基羰基氨基)-丙酸環戊酯(1.63g，3.5Ommol)溶於CH3CN(25ml)。在此溶液中加入哌啶(21ml)。攪拌30分鐘後在真空下除去溶劑以得到殘餘物。通過柱層析(EtOAc洗脫液)純化得到無色油狀產物(628mg，73%產率)。!HNMR(300MHz，CDC13)，5:1.30(9H，s，(CH3)3)，1.55-1.95(8H，m，CH2x4)，2.75(1H，dd，CH，J=7.2，12.3Hz)，2.95(1H，dd，CH，J=4.8，12.3Hz)，5.25(1H，m，CH)。按照上述方法A將以下N-Cbz保護的胺基酸轉化成環戊酯(S)-2-苄氧基羰基氨基-琥珀酸4-叔丁酯(S)-2-苄氧基羰基氨基-琥珀酸(succinamicacid)(S)-2-節氧基羰基氨基-4-氨甲醯基-丁酸(S)-2-節氧基羰基氨基-3-(4-叔丁氧基-苯萄-丙酸(S)-2-苄氧基羰基氨基-3-羥基-丁酸(S)-2-節氧基羰基氨基-3，3-二甲基-丁酸(S)-2-節氧基羰基氨基-3-(lH-吲哚-2-基)-丙酸(8)-2-苄氧基羰基氨基-6-叔丁氧基羰基氨基-己酸按照上述方法B將以下N-Boc保護的胺基酸轉化成環戊酯叔丁氧基羰基氨基-乙酸(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-甲基-戊酸(S)-吡咯垸-l,2-二羧酸1-叔丁酯(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-甲基-丁酸(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-4-甲硫基(methylsuIfanyl)-丁酸按照上述方法C將以下游離胺基酸轉化成環戊酯(s)-氨基-苯基-乙酸(S)-2-氨基-3-苯基-丙酸(S)-2-氨基-丙酸(S)-2-氨基-4-甲基-戊酸製備6-甲醯-苯並fW噻吩-2-羧酸(l-異丁氧基-乙氧基)醯胺合成顯示在下面的方案7中。與該途徑有關的其它文獻參考可在refra/z^ro"35，2，219-222和WO05/034880中找到。NalO,_硫基乙醇酸乙酯K2C03,DMF階段3方案7啶熱M力段階段l:4-(2-二甲基氨基-乙烯基)-3-硝基苯甲酸甲酯將4-甲基-3-硝基苯甲酸甲酯(5g，25.6mmol)溶於DMF(25mL，5體積)並在其中加入AUV-二甲基甲醯胺二甲基縮醛(4.4mL，33.3mmol)。混合物在140。C攪拌3小時。將所得深紅色溶液冷卻並真空濃縮。殘餘物與甲醇一起研磨並過濾。濾液用甲醇洗滌並在燒結漏鬥(sinter)上乾燥以得到4-(2-二甲基氨基-乙烯基)-3-硝基苯甲酸甲酯(5.2g，80%)。'H麗R(300MHz，DMSO)，5:2.98(6H，s，2xCH3)，3.87(3H，s，CH3)，5.58(1H，m，CH)，7.72-7.83(3H，m，ArH)，8.32(1H，m，CH)。階段2:4-甲醯-3-硝基苯甲酸甲酯在烯胺(5g，20.0mmol)的THF(50mL，10體積)和水(50mL，IO體積)溶液中加入高碘酸鈉(12.8g，60.0mmol)並將混合物攪拌2小時。將混合物過濾，所得固體用EtOAc(500mL)洗滌。將有機層分離，用NaHC03(3xlOOmL)洗滌並乾燥(MgS04)。真空濃縮得到4-甲醯-3-硝基苯甲酸甲酯(3.9g，93%)。LCMSm/z210[M^H]+，&NMR(300畫z，DMSO)，5:3.96(3H，s，OMe)，8.01(1H，d，ArH)，8.39(1H，d，ArH)，8.54(1H，s，ArH)，10.31(1H，s，CHO)。階段3:苯並[b]噻吩-2,6-二羧酸2-乙酯6-甲酯將4-甲醯-3-硝基苯甲酸甲酯(3.9g，18.7mmol)、巰基-乙酸乙酯(2.2mL，20.4mmol)和K2C03(3.3g,24mmol)的DMF(40ml，10體積)的混合物在50。C加熱過夜。冷卻至室溫後將混合物倒入冰冷的水(250mL)中並將所得混合物攪拌40分鐘。形成的固體通過過濾分離，用水(4x50mL)洗滌並真空乾燥以得到標題化合物(3.9g，80%)。LCMSm/z265[Iv^+H]+，'HNMR(300MHz，CDC13)S:1.40(3H，tJ=6.8Hz,CH3)，3.95(3H，s，OMe)，4.40(2H，qJ=7.2Hz，CH2)，7.88(1H，dJ=8.0Hz，ArH)，7.97-8.09(2H，m.ArH)，8.56(1H，s，ArH)。階段4:苯並[b]噻吩-2,6-二羧酸2-乙酯將苯並[b]噻吩-2,6-二羧酸2-乙酯6-甲酯(3.9g，14.77mmol)和碘化鋰(10g，74.6mmol)的無水吡啶(30ml，9體積)混合物攪拌回流16小時。冷卻至室溫後將混合物加入(以熔化物形式或切碎的形式)冰冷的2NHC1(200mL)中。形成的固體通過過濾分離並用水(3x50mL)洗滌。產物通過從甲醇中重結晶純化以得到標題化合物(1.8g，49%)。LCMSm/z251[lyT+H]+，'HNMR(300應z，DMSO)，S:1.35(3H，tJ=6.9Hz，CH3)，4.38(2H，qJ=7.1Hz，CH2)，7.99(1H，dJ=8.3Hz，ArH)，8.12(1H，dJ=8.3Hz，ArH)，8.27(1H，s，ArH)，8.70(1H，s，ArH)。階段5:6-羥甲基-苯並[b]噻吩-2-羧酸乙酯將苯並[b]噻吩-2,6-二羧酸2-乙酯(1.6g，6.4mmol)的無水THF(40mL，25體積)溶液冷卻至(TC。在其中緩慢加入BH3(1M，用THF配製，30mL，30.Ommo1)。使反應物回復至室溫並攪拌3小時。然後將溶液冷卻至O'C並用INHC1(7.5mL)淬滅(quench)。將反應混合物真空濃縮以除去所有THF，所得固體通過過濾分離並真空乾燥以得到6-羥甲基-苯並[b]噻吩-2-羧酸乙酯(1.3g，87%)。LCMSm/z237pvT+H]+，&NMR(300麗z，DMSO)，5:1.34(3H，tJ=6.9Hz，CH3)，4.35(2H，qJ=7.1Hz，CH2)，4.65(2H，s，CH2)，6.53(1H，brs，OH)，7.42(1H，dJ=9.4Hz)，7,98(3H，m，ArH)，8.18(1H，s，ArH)。階段6:6-羥甲基-苯並[b]噻吩-2-羧酸將6-羥甲基-苯並[b]噻吩-2-羧酸乙酯(2.4g，9.6mmo1，1叫)溶於THF(10mL，4體積)並加入(IOmL)和LiOH(0.69g，28.8mmol)。反應混合物在50。C攪拌3小時，然後濃縮至幹並無需純化用於下一步驟。階段7:6-羥甲基-苯並[b]噻吩-2-羧酸(l-異丁氧基-乙氧基)醯胺formulaseeoriginaldocumentpage44在6-羥甲基-苯並[b]噻吩-2-羧酸(1.76g，8.4mmol，1eq)的DMF溶液中加入PyBrOP(4.3g，9.2mmol)、0-(異丁氧基-乙基)-羥胺(11.5mL，84.0mmol)(通過WO0160785所述方法製備)和DIPEA(2.9mL，16.7mmol)。反應混合物在室溫攪拌2小時，然後用水(40mL)和EtOAc(40mL)稀釋。將有機層分離，用鹽水(50mL)洗滌並濃縮。殘餘物通過矽膠層析純化，用EtOAc/庚烷(l:l)洗脫以得到標題化合物(1.8g，兩個步驟的產率為67%)。LCMSm/z322[M^H]+，^NMR(300MHz，MeOD)，5:0.83(6H，dJ=6.6Hz，2xCH3)，1.32(3H，dJ=5.9Hz，CH3)，1.75(1H，m，CH)，3.38(2H，m，CH2)，4.63(2H，s，CH2)，4.95(1H，m，CH)，7.32(1H，dJ=8.2Hz，ArH)，7.77(3H，m，ArH)。階段8:6-甲醯-苯並[b]噻吩-2-羧酸(l-異丁氧基-乙氧基)醯胺在6-羥甲基-苯並[b]噻吩-2-羧酸(l-異丁氧基-乙氧基)醯胺(600mg，1.86mmol)的DCM(3mL)溶液中加入Mn02(2.1g，24.1mmol)。將混合物室溫攪拌30分鐘然後通過硅藻土過濾。將濾液濃縮以得到標題化合物(435mg，82%)。LCMSm/z320[M+-H]+，iHNMR(300顧z，MeOD)，S:0.94(6H，dJ=6.7Hz，2xCH3)，1.45(3H，dJ=5.3Hz，CH3)，1.87(1H，m，CH)，3.40(2H，m，CH2)，5.08(1H，ddJ=5.2，10.6Hz，CH)，7.89-8.09(3H，m，ArH)，8.55(1H，s，ArH)，10.11(1H，s，CHO)。合成圖1的化合物，以化合物(1)和化合物(2)為例力HR=環戊基1R=H2R=環戊基3R=H4formulaseeoriginaldocumentpage44製備結構單元A-G結構單元A和B將N-Boc-D-四氫-P-咔啉-3-羧酸(5.0g，15.8mmol)和TMSC1(20ml，158mmol)的MeOH(50ml)溶液加熱回流2小時。將反應混合物蒸發至幹以得到(R)-2，3，4,9-四氫-lH-!3-咔啉-3-羧酸甲酯(結構單元A)。LCMS純度100%。m/z231[]Vr+H]+，461[2M^H]+。結構單元A無需進一步純化即可使用。用N-boc-L-四氫-P-咔啉-3-羧酸通過與結構單元A相同的方法獲得(S)-2,3，4,9-四R=乙基5R=H6R-OMeOR=環戊基11R-H12R—O'OHPhOR二環戊基13R=H14R-環戊基15R=H16PhOR—OR=環戊基17R=H18R-叔丁基19圖1ooo=氫-lH-p-昨啉-3-羧酸甲酯(結構單元B)。階段h邊攪拌邊將乙醛酸單水合物(1.51g，16.4mmol)的水(10ml)溶液逐滴加入鹽酸色胺(3.0g，15.3mmol)的水(200ml)溶液。加入KOH(0.827g，14.7mmol)的水(10ml)溶液。將反應混合物室溫攪拌1小時，之後發生隨時間沉澱。減壓過濾後收集四氫-(3-咔啉-l-羧酸並用水洗滌。產量為1.9g(58%);m/z217[M"+H]+。階段2:四氫-P-咔啉-l-羧酸(7.4g)的MeOH(250ml)溶液用HC1氣體飽和20分鐘。反應混合物在室溫溫和攪拌18小時，觀察到約80%轉化。反應混合物用HC1氣體再次處理並再攪拌18小時。反應完成後真空濃縮混合物以得到2,3,4,9-四氫-lH-p-咔啉-l-羧酸甲酯(結構單元C)，LCMS純度95。/。，m/z231[M++H]+。產物無需進一步純化即可使用。結構單元DD採用結構單元C所用的方法將6-甲氧基-四氫-p-咔啉-l-羧酸酯化得到6-甲氧基-2,3，4,9-四氫-111-(3-咔啉-1-羧酸甲酯(結構單元D)。結構單元D:LCMS純度98%,m/z261[AT+H]+。結構單元D無需進一步純化即可使用。結構單元E4-哌嗪-l-基-苄腈(1.5g，8.0mmol)的MeOH(150ml)溶液用HCl氣體飽和。加入水(0.17ml)並將混合物加熱回流18小時。將反應混合物冷卻至室溫並用HC1氣體再次飽和。再回流24小時。將混合物減壓濃縮得到4-哌嗪-l-基-苯甲酸甲酯(結構單元E)。LCMS純度90%，m/z221[M^H]+。結構單元E無需進一步純化即可使用。結構單元FO按照與結構單元E相同的方法製備l，2，3，4-四氫-異喹啉-7-羧酸甲酯(結構單元F)。LCMS純度89。/。。m/z193[M"+H]+。該產物無需進一步純化即可使用。結構單元GoG4-氨基-苯甲酸甲酯(結構單元G)是市售的合成化合物(1)和化合物(2)在無水DCM(50ml)中溶脹用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(4.6g，以U4mmol/g加載，5.24mmo1)。加入結構單元A(4.76g，15.72mmo1)，然後加入pyBOP(8.18g，15.72mmo1，3eq)和DIPEA(6.77g，52.4mmo1，10eq)。將反應物振蕩18小時，過濾，並用標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。注意對於結構單元G，採用上述條件偶聯得到約10%的轉化。因此採用另一種條件將階段2的樹脂(1.0g，以1.14mmol/g加載)在無水DCM(100ml)中溶脹。0°C時在氮氣下加入l-氯-W/Z-2-三甲基丙烯胺(Ghosez試劑y(7.53ml，57.0mmol，50叫)。使混合物回復室溫並溫和振蕩1-2小時。在20分鐘內分批加入苯胺結構單元G(8.6g，57.0mmo1，50eq)。加入Et3N(8.0ml，57.0mmo1，50eq)。將混合物振蕩18小時。測試切除後的LCMS顯示有70%轉化，m/z323[M^H]+，645[2!vT+H]+。將樹脂過濾，並用標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。階段2:皂化將階段1的樹脂(4.8g，以U4mmol/g加載，5.47mmol)懸浮於MeOH(17.5ml)和THF(17.5ml)。加入NaOH(l.lg，27.5mmol，5eq)的水(17.5ml)溶液。將混合物振蕩18小時。測試切除後的LCMS證實反應完全，m/z388[M^H]+，775[2M"+H]+。將樹脂過濾並用水x2和MeOHx2洗滌，然後用標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。注意對於結構單元E，皂化用10eq.2.7MNaOH進行並振蕩72小時。階段3:與L-苯基甘氨酸環戊酯偶聯將階段2的樹脂(2.4g，以U4mmol/g加載，2.7mmol)懸浮於無水DCM(30ml)。加入L-苯基甘氨酸環戊酯甲苯磺酸鹽(tosyl5化)(3.2§，8.111111101，369)，然後加入？丫80(4.2g，8.1mmo1，3叫)和DIPEA(3.5g，27.0mmo1，IO叫)。將混合物振蕩18小時。測試切除後的LCMS(即用標準洗滌過程洗滌少量樹脂，乾燥，並在2。/oTFA/DCM中切除。將樹脂濾出並濃縮至幹。獲得LCMS)證實反應完全，m/z589[M++H]+。將所有樹脂樣品過濾，並用標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。注意對於化合物5-8，採用L-苯丙氨酸乙酯(3eq)。對於化合物19，採用L-苯基甘氨酸叔丁酯(3eq)。階段4:0{[(11)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-2，3,4,9-四氫-111-卩-咔啉-3-羰基]-氨基}-苯基-乙酸環戊酯(l)formulaseeoriginaldocumentpage49將階段3的樹脂(1.0g，以1.14mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液並在室溫下減壓蒸發。樹脂用2n/。TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘後過濾。將合併的濾液在室溫下減壓蒸發至幹，殘餘物(約300mg)通過製備型HPLC純化以得到化合物(l)，m/z589[Nf+H]+;NMR(400MHz,CD3OD)S:1.3-1.7(16H，m，CH2)，2.1-2.3(2H，m，CH2)，2.5(2H，m，CH2)，3.0-3.5(2H，m，CH2)，4.5-4.8(2H，m，CH2)，5.1(1H，m，C02CH)，5.2(1H，dd，CH2C1JNC0)，5.5-5.9(1H，d，CONHC)，7.0-7.5(9H，m，Ar)。相應的羧酸通過以下過程獲得階段5:皂化將階段3的樹脂(1.0g，以1.14mmol/g加載)懸浮於MeOH(4ml)和THF(4ml)。加入NaOH(0.23g，5.7mmoI)的水(4ml)溶液。將混合物振蕩18小時。測試切除後的LCMS證實反應完全，m/z521[N^+H]+。將樹脂過濾並用水x2和MeOHx2洗滌，然後通過標準洗滌過程洗滌。樹脂在真空下乾燥。階段6:0{[(!1)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-2,3,4,9-四氫-111-(3-咔啉-3-羰基]-氨基}-苯基-乙酸(2)階段5的樹脂(1.0g，以1.14mmol/g加載)用階段6所述方法切割得到化合物(2)，m/z521[M+十H]+;'HNMR(400麗z，CD3OD)，5:1.3-1.5(4H，2xCH2),1.6-1.8(4H，2xCH2)，2.1-2.2(2H，m，CH2)，2.4-2.7(2H，m，CH2)，3.0-3.2(1H，m)，3.5(1H，m)，4.55(m)，4.9(m)，5.1-5.35(2H，m)，(2H，m，CH2NCO)，5.75-5.8(1H，2xd，NHCgPh),7.0-7.5(9H，m，Ar)，7.6(d),7.7(d),8.35(d),8.95(s)，9.05(s)。以下化合物按照為化合物(1)和化合物(2)描述的方法製備(SH[(S)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-2，3，4，9-四氫-lH-P-咔啉-3-羰萄-氨基卜苯基-乙酸環戊酯(3)使用結構單元BLCMS純度98。/。，m/z589[Nf+H]+，HNMR(400MHz，MeOD)，5:1.20-1.40(8H，m，4xCH2)，1.40-1.80(8H，m，4xCH2)，2.10(2H，m，CH2)，3.45(2H，m，CH2)，5.0(2H，m，(3112與020峰重疊)，5.25-5.45(2H，m，2xCH)，5.50(1H，s，CONHCgPh)，7.00-7.50(9H，m，Ar)。(SH[(S)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-2，3，4，9-四氫-lH-P-咔啉-3-羰基]-氨基)-苯基-乙酸(4)使用結構單元BLCMS純度100%，m/z521[M^H]+，^NMR(400固z，MeOD)，51.30-1.50(4H,m，2xCH2)，1.55-1.80(4H，m，2xCH2)，2.15(2H，m，CH2)，2.60(2H，m，CH2)，3.00-3.25(2H，m，CH2)，3.40-3.55(2H，m，CH2)，5.20-5.30(1H，m，CHCON)，5.35(IH，s，NHCgPh)，7.05-7.50(9H，m，Ar)。(S)-2-U(R)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-2，3，4，9-四氫-lH-p-咔啉-3-羰基-氨基)-3-苯基-丙酸乙酯(5)使用結構單元ALCMS純度100%m/z563[Nf+H]+，iHNMR(400MHz，MeOD)，51.00(3H，t，CH3)，1.20-1.24(4H，m，2xCH2)，1.50-1.70(4H，m，2xCH2)，2.00(2H，m，CH2)，2.30-2.50(2H，m，CH2)，2.80-3.00(2H，m，CH2)，4.05(2H，q，C02CH2)，4.35-4.50(1H，m，CH)，4.80-5.05(2H，m,CH2)，5.40(1H，s，NHPhCO)，6.80-7.30(9H，m，Ar)。(S)-2-U(R)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-2，3，4，9-四氫-lH-P-咔啉-3-羰基-氨基H-苯基-丙酸(6)使用結構單元ALCMS純度100%，m/z534[JVT+H]+，'HNMR(400MHz，MeOD)，51.30-1.50(4H，m，2xCH2)，1.60-1.80(4H,m，2xCH2)，2.15(2H，m，CH2)，2.50(2H，m，CH2)，3.00(2H，m，CH2)，3.20(2H，m，CH2)，4.30-4.80(2H，m，CH2)，5.15(1H，m，CH)，6.90-7.50(9H，m，Ar)。(S)-2-U(S)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-2，3，4，9-四氫-lH-p-咔啉-3-羰基卜氨基)-3-苯基-丙酸乙酯(7)使用結構單元BLCMS純度100%，m/z563[ivT+H]+，'HNMR(400MHz，MeOD)，S1.00(3H，t，CH3)，1.30-1.50(4H，m，2xCH2)，1.60-1.70(4H，m，2xCH2)，2.10(2H，m，CH2)，2.30-2.65(2H，m，CH2)，2.95-3.20(2H，m，CH2)，3.45(1H，m，CH)，4.05(2H，q，C02CH2)，4.35-4.50(1H，m，CH)，4.80-5.05(2H，m，CH2)，5.50(1H，s，麗PhCO)，6.90-7.50(9H，m，Ar)。(S)-2-U(S)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-2，3，4，9-四氫-lH-p-咔啉-3-羰基-氨基)-3-苯基-丙酸(8)使用結構單元BLCMS純度100%，m/z534[M++H]+，&NMR(400MHz，MeOD)，51.30-1.50(4H，m，2xCH2)，1.60-1.80(4H，m，2xCH2)，2.15(2H，m，CH2)，2.50(2H，m，CH2)，2.95-3.15(2H，m，CH2)，3.20-3.50(2H，m，CH2)，4.30-4.50(2H，m，2xCH)，4.80-5.20(2H，m，CH2)，6.90-7.50(9H，m，Ar)。(SH[2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-2，3，4，9-四氫-lH-p-咔啉-l-羰基-氨基!-苯基-乙酸環戊酯(9)使用結構單元CLCMS純度100%，m/z589[Nf+H]+，！HNMR(400MHz，CDC13)，S1.30-1.80(16H，m，8xCH2)，2.15(2H，m，CH2)，2.45-2.70(2H，m，CH2)，2.95(2H，m，CH2)，3.55(1H，m，CH)，4.35(1H，m，CH)，5.15(1H，m，C02CH)，5.45(1H，m，CH)，6.20(1H，d，PhCHNH)7.00-7.80(9H，m，Ar)，8.80-9.20(1H，寬峰m，CHNHOH)。(SH2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-2，3，4，9-四氫-lH-p-咔啉-l-羰基-氨基)-苯基-乙酸(10)使用結構單元cLCMS純度100%,m/z521[Nf+H]+，！HNMR(400MHz，MeOD)，51.30-1.50(4H，m，2xCH2)，1.60-1.80(4H,m，2xCH2)，2.15(2H，m，CH2)，2.50-2.65(2H，m，CH2)，2.95(2H，m，CH2)，3.70(1H，dd，CH)，4.30(1H，dd，CH)，5.50(1H，m，CH)，6.10禾口6.20(各0.5H，s，PhCiJNH)7.00-7.50(9H，m，Ar)。(SH[2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-6-甲氧基-2,3，4，9-四氫-lH-p-咔啉-l-羰基-氨基卜苯基-乙酸環戊酯(ll)使用結構單元DLCMS純度100%，m/z619[]Vr+H]+，'HNMR(400顧z，CDC13)，S1.30-1.80(16H，m，8xCH2)，2.15(2H，m，CH2)，2.50-2.65(2H，m，CH2)，2.85(2H，m，CH2)，3.70(1H，dd，CH)，3.80(3H，s，OMe)，4.30(1H，dd，CH)，5.20(1H，m，C02CH)，5.30-5.50(1H，m，CH)，6.15-6.20(1H，d，PhQiNH)6.80-7,80(8H，m，Ar)，8.80-9.00(1H，m，CONHOH)。(SH2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-6-甲氧基-2，3，4，9-四氫-lH-P-咔啉-l-羰基-氨基〉誦苯基-乙酸(12)使用結構單元DLCMS純度1000/0，m/z551[M++H]+，'HNMR(400MHz，MeOD)，51.30-1.60(8H，m，4xCH2)，2.05(2H，m，CH2)，2.50-2.65(2H，m，CH2)，2.80(2H，m，CH2)，3.55(1H，dd，CH)，3.70(3H，s，OMe)，4.30(1H，dd，CH)，5.30-5.50(1H，m，CH)，5.90-6.10(各0.5H，s，PhCHNH)，6.65(1H，m，Ar)，6.80(1H，m，Ar)，7.10(1H，m，Ar)，7.35(5H，m，Ar)。(SH[2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-6-甲氧基-2，3，4，9-四氫-111-|}-咔啉-1-羰基-氨基}-苯基-乙酸環戊酯(13)使用結構單元ELCMS純度95%，m/z579[M++H]+，'H畫R(400MHz，CDC13)，51.40-1.90(16H，m，8xCH2)，2.15(2H，m，CH2)，2.45(2H，m，CH2)，3.40(4H，m，2xCH2N),3.60-3.80(4H，m，2><CH2)，5.10-5.30(1H，m，C02CH)，5.70(IH，m,PhCHNH)，7.30-7.80(9H，m，Ar)。(SH4-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苯甲醯氨萄-苯基-乙酸(18)使用結構單元GLCMS純度100%，m/z442[M++H]+，'HN證(400畫z，MeOD)，51.30-1.40(4H，m，2xCH2)，1.50-1.70(4H，m，2xCH2)，2.20(2H，t，CH2)，2.35(2H，t，CH2)，5.70(1H，s，PhCHNH)，7.25-7.40(3H，m，Ar)，7.50(2H，d，Ar)，7.65(2H，d，Ar)，7.80(2H，d，Ar)。(8)-{[(議)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-2，3，4，9-四氫-111+咔啉-3-羰基1-氨基}-苯基-乙酸叔丁酯(19)使用結構單元ALCMS純度100%，m/z577[M++H]+，！HNMR(400畫z，CDC13)，51.20-1.40(17H，m，4xCH2禾口C(CH3)3)，2.10(2H，m，CH2)，2.45(2H，m，CH2)，3.15-3.60(2H，m，CH2)，4.75(2H，m，CH2)，5.35(2H，m，PhCHNH和CH)，6.90-7.50(9H，m，Ar)o合成化合物(20)和化合物(21)20階段l:(S)-(4-硝基-苄基氨基)-苯基-乙酸環戊酯,0、'21將DMF(250ml)中的4-硝基苄基溴化物(15g，69.4mmo1)、L-苯基甘氨酸環戊酯甲苯磺酸鹽(27.1g，60.4mmol)和碳酸鉀(19.6g，138.8mmol)的混合物室溫攪拌18小時。反應混合物用EtOAc(300ml)稀釋並用水(3x200ml)洗滌。將EtOAc層分離，乾燥(Na2S04)，過濾並濃縮至幹得到橙色油狀物。分離出21克粗產物。LCMS純度81%,m/z355[M++H;T。該產物無需進一步純化即可使用。階段2:(S)-[叔丁氧基羰基-(4-硝基-節基)-氨基]-苯基-乙酸環戊酯,0、=在階段1的產物(15g，42.37mmol)的THF(150ml)溶液中加入K2C03(6.9g，50.8mmo1)，然後加入二碳酸二叔丁酯(22.2g，101.7mmo1)。加入水(150ml)並將反應物室溫攪拌36小時。將反應混合物蒸發至幹。將殘餘物重溶於EtOAc(300ml)，用0.1MHC1(150ml)、飽和NaHC03水溶液和水(150ml)依次洗滌。將EtOAc層乾燥(Na2S04)，過濾並濃縮至幹得到黃色油狀物。通過柱層析(10。/。EtOAc/己垸)純化後獲得澄清的黃色油狀產物(12g，62%產率)。LCMS純度95%，m/z455[]Vf+H]+，496[M^H+41]+。階段3:(S)-[(4-氨基-苄基)-叔丁氧基羰基-氨基]-苯基-乙酸環戊酯.0、將EtOAc(350ml)中的階段2的產物(12g，26.4mmol)和10%Pd/C(2.0g)的混合物在室溫下氫化18小時。通過硅藻土墊濾去Pd/C催化劑。將濾液減壓濃縮以得到白色固體(10.1g，90%產率)。LCMS純度1000/。，m/z425[1VT+H]+，466[!VT+H+41]+。階段4:偶聯階段3的苯胺將用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(1.0g，以0.94mmol/g加載)在無水DCM(100ml)中溶脹。0。C時在氮氣下加入l-氯-A^-2-三甲基丙烯胺(Ghosez試劑)1(0.373ml，2.82mmo1，3叫)。使混合物回復室溫並溫和振蕩1-2小時。在20分鐘內分批加入階段3的苯胺(1.2g，2.82mmo1，3叫)。加入Et3N(0.53ml，3.76mmo1，4eq)。將混合物振蕩l小時。測試切除後的LCMS顯示有70。/。轉化，m/z596[]Vr+H]+。將樹脂過濾，並用標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。階段5:(S)-[4-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄基氨基]-苯基-乙酸環戊酯(20)formulaseeoriginaldocumentpage55將階段4的樹脂(1.5g，以0.94mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液並在室溫下減壓蒸發。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘後過濾。合併的濾液在室溫下減壓蒸發至幹以得到殘餘物。使該殘餘物在20。/。TFA/DCM中靜置40分鐘。再在室溫下減壓蒸發至幹後，殘餘物通過製備型HPLC純化以得到化合物(20)，其為TFA鹽，LCMS純度95%，m/z496[M^+H]+，'HNMR(400固z，DMSO)，S:1.30-1.50(6H，m，3xCH2)，1.50-1.70(8H，m，4xCH2)，1.80(2H，m，CH2)，2.10(2H，t，CH2)，2.45(2H，t，CH2)，4.1(2H，dd，賜NH)，5.25(1H，m，C即CO)，5.35(1H，m，OCOC^Ph),7.45(2H，d，Ar)，7.60(5H，m，Ar)，7.80(2H，d，Ar)，10.00-10.10(2H，brs)，10.50(1H，s)。階段6:環戊酯的皂化將階段4的樹脂(2.5g，以0.94mmol/g加載，2.35mmol)懸浮於MeOH(8.7ml)和THF(8.7ml)。加入2.7NNaOH水溶液(8.8ml，10eq，23.5mmo1)。將混合物振蕩36小時。測試切除後的LCMS證實反應完全，m/z528[Nf+H]+。將樹脂過濾並用水x2和MeOHx2洗滌，然後通過標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。階段7:(S)-[4-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄基氨基]-苯基-乙酸(21)將階段6的樹脂(2.5g，以0.94mmol/g加載，2.35mmol)切除並用階段5中列出的過程進行boc去保護。粗產物(0.40g)通過製備型HPLC純化得到化合物(21)，其為TFA鹽。LCMS純度100。/。，m/z428[W+H]，NMR(400MHz，CD3OD)，5:1.30(4H，2xCH2)，1.55(4H，2xCH2)，2.00(2H，t，CH2)，2.30(2H，t，CH2)，3.90(1H，s，NHCH2)，4.05(2H，dd，NHQ^),4.95(1H，s，CgPh)，7.35(2H，d，Ar)，7.40(5H,m，Ar)，7.55(2H，d，Ar)。合成化合物(22)和化合物(23)(TC下，在L-苯基甘氨酸(0.227g，1.5mmol)的水(5ml)和二嚼烷(5ml)溶液中加入三乙胺(0.42ml，3.0mmol)，然後緩慢加入4-硝基苯磺醯氯(0.5g，2.3mmol)的二噁烷(5ml)溶液。攪拌45分鐘後將反應混合物蒸發至幹，重溶於EtOAc並用飽和NaHC03階段l(S)-(4-硝基-苯磺醯基氨基)-苯基-乙酸溶液(2x20ml)和水(10ml)洗滌。EtOAc層用Na2S04乾燥，過濾並蒸發至幹。LCMS純度75%，(未觀察到分子離子)產量為0.58g，(76%)。該材料無需任何純化即可使用。階段2:(S)-(4-硝基-苯磺醯基氨基)-苯基-乙酸環戊酯(TC時在階段1的酸(4.32g，12.8mmol)的環戊醇(60ml)溶液中緩慢加入亞硫醯氯(9.3ml，128mmo1)。攪拌反應混合物並在7(TC加熱回流2小時。在真空下蒸發除去過量亞硫醯氯，將反應混合物萃入EtOAc，用飽和NaHC03溶液洗滌並用Na2S04乾燥，過濾並蒸發至幹。用DCM進行快速柱層析純化得到所需產物(3.6g，70%產率)。LCMS純度為100%，(未觀察到分子離子)。階段3:(S)-(4-氨基-苯磺醯基氨基)-苯基-乙酸環戊酯室溫下，將EtOAc(350ml)中的(S)-(4-硝基-苯磺醯基氨基)-苯基-乙酸環戊酯(5.29g，13.1mmol)和10%Pd/C(5.0g)的混合物在氣球壓力(balloonpressure)下氫化24小時。通過硅藻土墊濾去Pd/C催化劑。將濾液減壓濃縮以得到所需產物(4.54g，92%產率)。LCMS純度100%，m/z375[1VT+H]+。階段4:偶聯苯胺(anline)將用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(0.39g，以1.14mmol/g加載)在無水DCM(25ml)中溶脹，並於O'C在氮氣下逐滴加入l-氯-WM2-三甲基丙烯胺(0.175ml，1.33mmo1)。將(25ml)溶液，然後加入三乙胺(0.251111，1.76mmo1)。將反應混合物再振蕩10分鐘。測試切除後的LCMS顯示61。/。轉化，m/z546[1Vr+H]+。將樹脂過濾，並用標準洗滌過程洗滌。樹脂在真空下乾燥並用於下一步驟。階段5:(S)-[4-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苯磺醯基氨萄-苯基-乙酸環戊酯(22)將階段4的樹脂(1.12g，以1.14mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液並在室溫下減壓蒸發。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘後過濾。合併的濾液在室溫下減壓蒸發至幹以得到殘餘物。殘餘物通過製備型HPLC純化以得到化合物(22)。LCMS純度93%，m/z546[M++H]+，&NMR(400MHz，DMSO)，5:1.20-1.68(16H，m，8><CH2)，1.93(2H，t，CH2)，2.33(2H，t，CH2)，4.80(1H，m，C邸CO)，4.81(1H，d，OCOCgPh)，7.27(5H，m，Ar)，7.65(2H，d，Ar)，7.71(2H，d，Ar)，8.67(1H，brs)，8.75(1H，d)，10.24(1H，s)，10.34(1H，s)。階段6:環戊酯的皂化將階段4的樹脂(1.2g，以1.14mmol/g加載)懸浮於THF(8ml)和甲醇(8ml)並加入2.7M氫氧化鈉(5.1ml，13.68mmo1)。將混合物振蕩48小時。測試切除後的LCMS證實反應完全，m/z478[NT+H]+。將樹脂過濾並用水x2和MeOHx2洗滌，然後通過標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。階段7:(S)-[4-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苯磺醯基氨基]-苯基-乙酸(23)formulaseeoriginaldocumentpage59將階段6的樹脂(1.2g，以1.14mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液並在室溫下減壓蒸發。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘後過濾。合併的濾液在室溫下減壓蒸發至幹以得到殘餘物。殘餘物通過製備型HPLC純化以得到化合物(23)。LCMS純度91。/。，m/z478[1Vr+H]+，&NMR(400顧z，MeOD)，S:1.44(4H，m，2xCH2)，1.62-1.74(4H，m，2xCH2)，2.12(2H，t，CH2)，2.34(1H，m，OCOCgPh)，2.41(2H，t，CH2)，7.25(5H，m，Ar)，7.69(2H，d，Ar)，7.72(2H，d，Ar)。合成化合物(24)和化合物(25)(formulaseeoriginaldocumentpage59階段1:(2,3，4,9-四氫-lH-(3-咔啉-6-基氧基)-乙酸甲酯formulaseeoriginaldocumentpage59將5-羧基甲氧基色胺(1.248，4.56mmol)、36%甲醛水溶液和MeOH(25ml)的混合物加熱回流1.5小時。將反應混合物蒸發至幹。依次加入MeOH(50ml)和TMSC1(1.24ml)。繼續回流l小時。將反應混合物蒸發至幹並不經純化用於下面的階段。階段2:醯胺化MeO將用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(2.0g，以1.14mmol/g加載，2.28mmo1)懸浮於DCM(40ml)。加入pyBOP(3.56g)，然後加入階段1的胺(4.56mmol)的DCM溶液(40ml)和DIPEA(3.9ml，22.8mmol)。將反應物室溫振蕩18小時。測試切除後的LCMS證實反應完全。將樹脂過濾，用標準洗滌過程洗滌並充分乾燥。階段3:甲酯的皂化o將階段2的樹脂(2.0g，1.14mmol/g，2.28mmol)懸浮於THF(10ml)和MeOH(10ml)的混合物。在5分鐘內加入1.4MNaOH(10ml)。將混合物振蕩18小時。測試切除後的LCMS證實反應完全。將樹脂過濾，並用標準洗滌過程洗滌。階段4:與L-苯基甘氨酸環戊酯偶聯將階段3的樹脂(2.0g，以1.14mmol/g加載，2.28mmol)懸浮於DCM(30ml)。加入pyBOP(3.56g，6.84mmo1)，然後加入L-苯基甘氨酸環戊酯(2.59g，6.84mmol)和DIPEA(3.9ml，22.8mmo1)。將混合物振蕩18小時。測試切除後的LCMS證實反應完全。將樹脂過濾，用標準洗滌過程洗滌並真空乾燥。階段5:(SH2-[2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-2,3，4,9-四氫-lH-(3-咔啉-6-基氧基]-乙醯氨基}-苯基-乙酸環戊酯(24)用2%TFA/DCM(3xl0ml)切除階段4的樹脂(0.8g，以1.14mmol/g加載，0.91mmo1)。濾液在室溫下減壓蒸發至幹以得到油狀殘餘物(200mg)，該物質通過製備型HPLC純化以得到化合物(24)，其為TFA鹽。LCMS純度95%，m/z619[JVT+H]+，!HNMR(400匿z，固SO)，S:1.05-1.66(16H，m，8xCH2)，1Z79(2H，m，CH2)，2.16-2.31(2H，m，2.41-2.56(2H，m，CH2)，3.60(2H，m，CH2)，4.42(2H，s，CH2)，4.49(2H，s，CH2)，4,93(1H，m，QJOCO)，5.28(1H，m，OCOCgPh)，6.59(1H，d，Ar)，6.65(1H，s，Ar)，7.04(1H，d，Ar)，7.21(5H，m，Ar)，8.57(1H，m)，10.17(1H，s)，10.58(1H，s，Ar)。階段6:環戊酯的皂化階段4的樹脂(1.0g，以1.14mmol/g加載，1.14mmol)按照階段3中描述的過程皂化。formulaseeoriginaldocumentpage61階段7:(SH2-[2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-2，3，4,9-四氫-m-l3-咔啉-6-基氧基]-乙醯氨基}-苯基-乙酸環戊酯(25)formulaseeoriginaldocumentpage61將階段6的樹脂(1.0g，以1.14mmol/g加載，1.14mmol)切除並用階段5中詳細描述的過程純化。化合物(25):LCMS純度97。/。，m/z551[M""+H]+，NMR(400MHz，MeOD)，S:1.33-1.49(4H，m，2xCH2)，1.58-1.75(4H，m，2xCH2)，2.06-2.17(2H，m，CH2)，2.51-2.60(2H，m，CH2)，2.70-2.83(2H，m，CH2)，3.85-3.96(2H，m，CH2)，4.61(2H，m，CH2)，4.78(2H，m，CH2)，5.56(1H，s，OCOCgPh)，6.89(1H，m，Ar)，7.00(1H，s，Ar)，7.26(1H，m，Ar)，7.35(5H，m，Ar)。合成圖2的化合物，以化合物(26)和化合物(27)為例formulaseeoriginaldocumentpage61R=乙基26R=乙基29R-H27R-H30合成化合物(26)和化合物(27)階段1:(S)-2-(3-硝基-苄基氨基)-3-苯基-丙酸乙酯將3-硝基苄基溴化物(10.0g，46mmol)溶於DMF(180ml)並加入碳酸鉀(12.7g，92mmol)和L-苯丙氨酸乙酯鹽酸(10.6g，46mmo1)。將反應物室溫攪拌17小時，然後蒸發至幹。將殘餘物重溶於EtOAc(150ml)，並用水(3x80ml)洗滌，乾燥(^2804)，過濾並濃縮至幹。通過快速柱層析(30。/。EtOAc/己垸)純化後獲得產物(3.7g，24%產率)。LCMS純度86%,m/z329[1Vf+H]+。階段2:(S)-2-[叔丁氧基羰基-(3-硝基-苄基)-氨基]-3-苯基-丙酸乙酯formulaseeoriginaldocumentpage62將階段1的胺(13.4g，40.9mmol)溶於THF(250ml)，然後加入碳酸鉀(8.46g，61.4mmol)和水(150ml)。加入二碳酸二叔丁酯(35.6.163mmol)並將反應混合物在50°C加熱18小時。在所得混合物中加入DCM，用0.1MHC1(150ml)、飽和NaHC03水溶液和水(150ml)連續洗滌。將DCM層乾燥(Na2S04)，過濾並濃縮至幹。通過快速柱層析(5%EtOAc/己垸)純化後將產物分離(9.4g，54。/。產率)。LCMS純度95%，m/z428[M++H]+。階段3:(S)-2-[(3-氨基-節萄-叔丁氧基羰基-氨基]-3-苯基-丙酸乙酯將階段2的氨基甲酸酯(4.92g，11.5mmol)溶於EtOAc(150ml)，然後加入Pd/C(100/0溼(wet))催化劑(0.8g)並於室溫在氣球壓力下氫化18小時。將反應混合物通過硅藻土墊過濾並蒸發至幹以得到紅色固體(4.0g，89%產率)。LCMS純度100%，m/z399[M++H]+。階段4:偶聯到樹脂將用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(0.39g，以0.83mmol/g加載)在DMF(15ml)中溶脹並加入PyBOP(1.36g，2.61mmo1)，接著加入DIPEA(1.5ml，8.7mmo1)。將階段3的苯胺(1.04g，2.61mmol)溶於DCM(15ml)並加到反應混合物中。將反應物室溫振蕩24小時。測試切除後的LCMS顯示86%轉化，m/z570[M++H]+。將樹脂過濾，並用標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。階段5:(S)-2-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄基氨基]-3-苯基-丙酸乙酯(26)階段4的樹脂(1.3g，以0.83mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。濾液在室溫下減壓蒸發。樹脂用2。/。TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘後過濾。合併的濾液在室溫下減壓蒸發至幹以得到油狀殘餘物。使殘餘物在20%TFA/DCM中靜置40分鐘。同樣在室溫下減壓蒸發至幹後，將粗產物通過製備型HPLC純化以得到化合物(26)。LCMS純度100%，m/z470[M^H]+，iHNMR(400固z，MeOD)，5:1.08(3H，t，CH3)，1.35-1,45(4H，m，2xCH2)，1.60-1.80(4H，m，2xCH2)，2.10(2H，t，CH2)，2.40(2H，t，CH2)，3.13(1H，dd，PhCgH)，3.40(1H，dd，PhC昭)，4.11(2H，q，C壓CH3)，4.14-4.22(3H，m)，7.20-7.48(8H，m，Ar)，7.92(1H，s，Ar)。階段6:皂化將階段4的樹脂(1.4g，以0.83mmol/g加載)懸浮於THF(8.6ml)和甲醇(8.6ml)並加入1.4M氫氧化鈉溶液(8.6ml，5.98mmo1)。將混合物振蕩24小時，然後測試切除顯示83%轉化成所需的酸，m/z541[IVf+H]將樹脂過濾並用水x2和MeOHx2洗滌，然後通過標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。階段7:(S)-2-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄基氨基]-3-苯基-丙酸(27)將階段6的樹脂(1.44g，以0.83mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。濾液在室溫下減壓蒸發。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘後過濾。合併的濾液在室溫下減壓蒸發至幹以得到油狀殘餘物。使殘餘物在20。/。TFA/DCM中靜置40分鐘。在室溫下減壓蒸發至幹後，將粗產物通過製備型HPLC純化以得到化合物(27)。LCMS純度100%，m/z442[VT+H]+，^NMR(400顧z，MeOD)，S:1.35-1.48(4H，m，2><CH2)，1.60-2.00(12H，m)，2.13(2H，t，CH2)，2.42(2H，t，CH2)，3.83-4.00(2H，m)，4.18(1H，m)，4.28(2H，s，CH2Ph)，5,35(1H，m)，7.25(1H，m，Ar)，7.45(2H，m，Ar)，7.卯(1H，s，Ar)。(S)-3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄基氨基-苯基-乙酸叔丁酯(35)LCMS純度97%，m/z484[M^H]+，！H雨R(400畫z，MeOD)，5:1.30(13H，m，2xCH2，C(Qi3)3)，1.45-1.65(4H，m，CH2x2)，1.93-2.05(2H，m，CH2)，2.20-2.40(2H，m，CH2)，3,99(2H，q，CH2)，4.65-4.95(1H，m，CH，掩蔽的信號)7.05(1H，d，Ar)，7.25-7.33(2H，m，Ar)，7.35-7.50(5H，m，Ar)，7.75(1H，s，Ar)。(SH3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-節基氨萄-苯基-乙酸環戊酯(36)LCMS純度100%，m/z496[]VT+H]+，^NMR(400畫z，MeOD)，5:1.30-1.70(16H，m，8xCH2)，2.00(2H，t，CH2)，2.30(2H，t，CH2)，4.05(2H，dd，Q^NH),5.00(1H，m，OCOCHPh)，5.15(1H，m，CgOCO)，7.05(1H，m，Ar)，7.30(2H，m，Ar)，7.40(5H，m，Ar)，7.75(1H，m，Ar)。(S)-3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄基氨基-苯基-乙酸(37)LCMS純度100%，m/z428[MVH]+，'HNMR(400MHz,MeOD)，S:1.20-1.35(4H，m，2xCH2)，1.50-1.65(4H，m，2xCH2)，2.00(2H,m，CH2)，2.30(2H，m，CH2)，4.00(2H，dd，CH^NH),4.卯(1H，m，OCOCHPh)，7.05(1H，m，Ar)，7.25-7.50(7H，m，Ar)，7.70(1H，m，Ar)。(S)-2-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄基氨基]-4-甲基-戊酸(38)LCMS純度91。/。，m/z408[M^+H]+，'HNMR(400MHz，MeOD)，S:0.78(3H，d，J=6.6Hz，CH3)，0.84Hz(3H，d，J=6.6Hz,CH3)，1.26-1.40(6H，m，烷基)，1.49-1.70(5H，m，CH+2xCH2)，1.95(2H，t，J=7.32，CH2)，2.25(2H，t，J=7.36，CH2)，3.00(1H，t，J=6.88Hz，NHCgCO),3.42(1H，d，J=12.7Hz，CH)，3.68(1H，d,J=12.5Hz，CH),7.00(1H,d，J=7.6Hz，Ar)，7.15(1H，t，J=7.8Hz，Ar)，7.30(1H，s.Ar)，7.47(1H，brd，Ar)(S)-2-[M7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-節基氨基-4-甲基-戊酸環戊酯(39)LCMS純度100。/。，m/z476[M""+H]+，'HNMR(400固z，MeOD)，5:0.85-0.95(6H，2xd，2xCH3)，1.30(4H，m，2xCH2)，1.50-1.70(13H，m，烷基)，1.75(2H，m，CH2)，2.00(2H，t，CH2)，2.30(2H，t，CH2)，3.90(1H，NHCgCO)，4.10(2H，q，CH2)，5.25，(1H，m，CH)，7.10(1H，d，Ar)，7.30(2H，m)，7.80(1H，s，Ar)合成化合物(40)和化合物(41)4041階段l:(S)-(2-硝基-苄基氨基)-苯基-乙酸環戊酯將DMF(300ml)中的2-硝基苄基溴化物(15g，69.4rnrno1)、L-苯基甘氨酸環戊酯甲苯磺酸鹽(27.2g，69.4!!111101)和碳酸鉀(19.2§，138.8mmol)的混合物室溫攪拌18小時。反應混合物用EtOAc(300ml)稀釋並用水(3x200ml)洗滌。將EtOAc層分離，乾燥(Na2S04)，過濾並濃縮至幹得到橙色油狀物。分離出24克粗產物。LCMS純度81。/t)，m/z355[M"+H]+。該產物無需進一步純化即可使用階段2:(SH叔丁氧基羰基-(2-硝基-節基)-氨基]-苯基-乙酸環戊酯formulaseeoriginaldocumentpage68在(S)-(2-硝基-苄基氨基)-苯基-乙酸環戊酯(24.4g，69.1mmol)的THF(150ml)溶液中加入K2C03(7.6g，69.1mmo1)，然後加入二碳酸二叔丁酯(30.1g，138.1mmo1)。加水(150ml)，再加入二碳酸二叔丁酯(45.1g，206.6mmo1)，並將反應物室溫攪拌8天。將反應混合物蒸發至幹。殘餘物重溶於EtOAc(300ml)，用0.1MHC1(150ml)、飽和NaHC03水溶液和水(150ml)洗滌。將EtOAc層乾燥(Na2S04)，過濾並濃縮至幹得到黃色油狀物。通過柱層析(20%EtOAc/己垸)純化後獲得澄清的黃色油狀產物(15g，48%產率)。「段3:(S)-[(2-氨基-苄基)-叔丁氧基羰基-氨基]-苯基-乙酸環戊酯formulaseeoriginaldocumentpage68室溫下，將EtOAc(130ml)中的階段2的氨基甲酸酯(4.44g，9.78mmol)和10%Pd/C(0.7g)的混合物在氣球壓力下氫化18小時。通過硅藻土墊濾去Pd/C催化劑。將濾液減壓濃縮以得到白色固體(4.25g)。LCMS純度100。/。，m/z425[M^H]+，階段4:偶聯階段3的苯胺formulaseeoriginaldocumentpage68將用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(1.6g，以0.83mmol/g加載)在無水DCM(100ml)中溶脹。(TC在氮氣下加入l-氯-A^-2-三甲基丙烯胺(Ghosez試劑)1(0.56ml，3.3mmo1，3eq)。使混合物回復室溫並溫和振蕩1-2小時。在20分鐘內分批加入階段3的苯胺(1.4g，3.3mmo1，3叫)。加入Et3N(0.76ml，4.4mmo1，4eq)。將混合物振蕩1小時。測試切除後的LCMS顯示有97n/。轉化，m/z596[M++H]+。將樹脂過濾，並用標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。_1.Ghosez等，J.C,S.Chem.Comm.,1979，1180。階段5:(S)-[2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄基氨基]-苯基-乙酸環戊酯(40)將階段4的樹脂(1.34g，以0.83mmol/g加載)在2°/。TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液並在室溫下減壓蒸發。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘後過濾。合併的濾液在室溫下減壓蒸發至幹以得到殘餘物。使殘餘物在20。/。TFA/DCM中靜置40分鐘。同樣在室溫下減壓蒸發至幹後，將粗產物通過製備型HPLC純化以得到化合物40，其為TFA鹽，LCMS純度100%，m/z496[M十+H]+，'HNMR(400MHz，MeOD)，S:1.40-2.00(16H，m,8xCH2)，2.15(2H,m，CH2)，2.45(2H，m，CH2)，3.95(1H，d，Qj^NH),4.20(1H，d，CH^NH)'5.20(1H，m，OCOCHPh)，5.35(1H，m，CgOCO),7.25(1H，m，Ar)，7.40(1H，m，Ar)，7.50-7.60(7H，m，Ar)。階段6:皂化將階段4的樹脂(2.0g，以0.83mmol/g加載，2.35mmol)懸浮於MeOH(6.1)和THF(6.1ml)。加入2.7NNaOH(水溶液，6.1ml)。將混合物振蕩5天。測試切除後的LCMS證實反應完全，m/z528[MT+H]+。將樹脂過濾並用水x2和MeOHx2洗滌，然後通過標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。階段7:(S)-[2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-節基氨蜀-苯基-乙酸化合物(41)將階段6的樹脂(2.0g，以0.83mmol/g加載)切除並用階段5中列出的方法進行boc去保護。粗產物通過製備型HPLC純化得到化合物(41)，其為TFA鹽。LCMS純度98%，m/z428[M++H]+，'HNMR(400固z，MeOD)，5:1.25-1.35(4H，m，2xCH2)，1.50-1.65(4H，m，2xCH2)，2.00(2H，m，CH2)，2.30(2H，m，CH2),3.80(1H，d，C1^NH)，4.10(1H，d，Q^NH)，5.00(1H，m，OCOCgPh)，7.10(1H，m，Ar)，7.30(1H，m，Ar)，7.40-7.50(7H，m，Ar)。合成化合物(42)和化合物(43)階段1:1,3，4,9-四氫-P-咔啉-l，2-二羧酸2-苄基酯將1，2,3,4-四氫咔啉-l-羧酸(5g，23.1mmol)在二噁垸(25ml)和2MNaOH(23ml，46mmol)中的溶液冷卻至0'C。緩慢加入氯甲酸苄酯(3.95ml，27mmo1)。室溫攪拌1小時後再加入氯甲酸苄酯(1.4ml，9.5mmo1)。2.5小時後用醚洗滌反應混合物。將含水層酸化至pH2並用DCM萃取，乾燥(MgS04)，過濾並蒸發至幹，得到第一批黃色固體，其LCMS純度為79。/。，m/z351[!VT+H]+。最初的一批無需進一步純化即可使用。將醚層濃縮後獲得第二批材料從而得到進一步的粗產物。該粗材料通過快速層析純化，用DCM到20%2M甲醇NH3、80%DCM洗脫，得到進一步的Cbz-保護的化合物(產率49。/。)，其LCMS純度為82。/。，m/z351[Nf+H]+。階段2:1-(甲氧基-甲基-氨甲醯基)-1,3,4,9-四氫-P-咔啉-2-羧酸苄基酯^^^^N-cbzHO6—將1,3,4,9-四氫-(3-咔啉-1,2-二羧酸2-苄基酯(3g，8.4mmol)溶於無水DCM(30ml)並加入三乙胺(5.22ml，37.8mmo1)。在此溶液中加入HOBt(2.848g，21.4mmol)、EDCI(4.08g，21.4mmol)和N，O-二甲基羥胺鹽酸鹽(1.86g，19丄mmo1)。室溫攪拌2小時後將反應混合物蒸發至幹，重溶於EtOAc並用飽和NaHC03溶液(2x100ml)和水(50ml)洗滌。將EtOAc層乾燥(Na2S04)，過濾並蒸發至幹。通過柱層析純化，用DCM到3。/o甲醇/DCM洗脫，得到所需的Weinreb醯胺(產率40%)。LCMS純度85%，m/z394[VT+H]+。階段3:l-甲醯-l,3,4,9-四氫-P-咔啉-2-羧酸苄基酯氮氣下將1,3,4,9-四氫-卩-咔啉-l,2-二羧酸2-苄基酯(3.7mg，9.4mmol)的THF(100ml)溶液冷卻至-78"C。在2小時內加入1.5MDIBAL的甲苯溶液(31.2ml，47mmo1)。攪拌4小時後用甲醇和水淬滅反應混合物，萃入EtOAc並用稀HCl水溶液洗滌。有機層用Na2S04乾燥，過濾並蒸發至幹。LCMS純度50。/。，m/z335[NT+H]+。該材料無需進一步純化便可用於下一階段。階段4:l-([((S)-環戊氧基羰基-苯基-甲基)-氨基]-甲基W,3,4,9-四氫-卩-咔啉-2-羧酸苄基酯將IPA(100ml)中的l-甲醯-l,3,4，9-四氫-P-咔啉-2-羧酸苄基酯(lg，3mmo1)、乙酸鈉(0.68g，87.4mmo1)、L-苯基甘氨酸環戊酯甲苯磺酸鹽(1.16g，3mmo1)、氰基硼氫化鈉(0.26g，4.2mmol)和分子篩的混合物室溫攪拌1小時。將反應混合物蒸發至幹，重溶於EtOAc並依次用飽和NaHC03溶液和鹽水洗滌。將EtOAc層用MgS04乾燥，過濾並蒸發至幹。LCMS純度為39。/。，m/z538[VT+H]+。粗材料無需進一步純化便可用於下一階段。階段5:l-U叔丁氧基羰基-((S)-環戊氧基羰基-苯基-甲萄-氨基]-甲基卜1,3,4,9，氫-P-咔啉-2-羧酸苄基酯HO邊攪拌邊在階段4的胺(1.08g，2.0mmol)的THF(20ml)溶液中加入碳酸鉀(0.42g，3.0mmol)和二碳酸二叔丁酯(1.75g，8.0mmo1)。將反應混合物在50。C攪拌96小時，冷卻至室溫，用DCM(50ml)稀釋並用O.IMHC1溶液(25ml)、飽和NaHC03溶液(2x25ml)和水(15ml)洗滌。將DCM層用Na2S04乾燥，過濾並蒸發至幹。用10%EtOAc/庚垸通過柱層析純化得到產物(0.89g70。/。產率)。LCMS純度為79%，m/z638[M^H]+。階段6:(S)-[叔丁氧基羰基-(2,3,4,9-四氫-lH-P-咔啉-l-基甲基)-氨基]-苯基-乙酸環戊酯氫氣下，在存在10%Pd/C(0.4g)時將階段5的二氨基甲酸酯(0.5g，0.78mmol)的乙醇(40ml)溶液在氣球壓力下攪拌2小時。將反應混合物通過硅藻土墊過濾並蒸發至幹得到所需產物(0.35g，90%)，91。/o純度(LCMS)，m/z504[]VT+H]+。階段7:偶聯階段6的胺將用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(703mg，以0.83mmol/g加載)在DCM(12ml)中溶脹。加入PyBOP(912mg，1.75mmo1)，然後加入階段6的胺(325mg，0.64mmol)和DIPEA(1.01ml，5.8mmo1)。將反應混合物振蕩18小時。測試切除後材料的LCMS顯示80%轉化。m/z675[]VT+H]+。將樹脂過濾，並用標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。階段8:(SH[2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-2,3,4,9-四氫-lH-P-咔啉-l-基甲基]-氨基卜苯基-乙酸環戊酯(42)formulaseeoriginaldocumentpage73將階段7的樹脂(135mg，以0.83mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。濾液在室溫下減壓蒸發。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘後過濾。合併的濾液在室溫下減壓蒸發至幹以得到油狀殘餘物。使殘餘物在20。/。TFA/DCM中靜置40分鐘。同樣在室溫下減壓蒸發至幹後，將粗產物通過製備型HPLC純化以得到化合物(42)，其為TFA鹽，LCMS純度91%，m/z575[M十+H]+，'HNMR(400畫z，MeOD)，5:1.30-1.70(16H，m，8xCH2)，2.00(2H，m，CH2)，2.50(2H，m，CH2)，2.75(2H，m，CH2)，3.30-3.50(2H，m，CH2)，4.15(1H，m，CH2CH)，4.80(2H，m，CgNH,掩蔽的信號)，5.25(1H，m，CgOCO),6.00(1H，m，OCOQiPh)，6.90(1H，m，Ar)，7.00(1H，m，Ar)，7.20(IH，m，Ar)，7.30(IH，m，Ar)，7.45(5H，m，Ar)。階段9:環戊酯的皂化formulaseeoriginaldocumentpage73將階段7的樹脂(395mg，以0.83mmol/g加載)懸浮於THF(1.5ml)和甲醇(1.5ml)並加入1.4M氫氧化鈉水溶液(1.17ml，1.6mmol)。將混合物振蕩8天。測試切除顯示86%轉化成酸，m/z607[M++H]。將樹脂過濾並用水x2和MeOHx2洗滌，然後通過標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。階段10:(SH[2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-2,3，4,9-四氫-lH-P-咔啉-l-基甲基]-氨基卜苯基-乙酸(43)formulaseeoriginaldocumentpage73將階段9的樹脂(100mg，以0.83mmol/g加載)切除並用為化合物(42)列出的過程進行boc去保護。通過製備型HPLC純化得到化合物(43)，其為TFA鹽，LCMS純度96%，m/z507[M""+H]+，'HNMR(400顧z，MeOD)，S:1.25-1.40(4H，m，2xCH2)，1.50-1.65(4H，m，2xCH2)，2.00(2H，m，CH2)，2.50(2H，m，CH2)，2.70(2H，m，CH2)，3.40(2H，m，CH2)，4.15(1H，m，CH2Cg)，4.80(2H，m，C]^NH，掩蔽的信號)，6.00(1H，m，OCOCHPh)，6.90(1H，m，Ar)，7.00(1H，m，Ar)，7.20(1H，m，Ar)，7.30-7.50(6H，m，Ar)。合成圖3的化合物，以化合物(44)和化合物(45)為例r=乙基50r=環戊基53r二環戊基51r=h.54r=hs2formulaseeoriginaldocumentpage75製備結構單元h-l結構單元hTMSCIMeOH將(S)-l,2,3，4-四氫異喹啉-3-羧酸(10g，56mmol)、TMSCI(39ml，310mmol)和甲醇(500ml)—起回流(在7(TC)2小時。將反應混合物蒸發至幹，LCMS分析表明100%轉化成(S)-l,2,3,4-四氫-異喹啉-3-羧酸甲酯，m/z192[IvT+H]+。結構單元iJLTMSCI1zIj!jHMeOHVnHHCI將DL-脯氨酸(10g，87mmol)、TMSCI(51ml，430mmol)和甲醇(500ml)—起回流2小時(在7(TC)。將反應混合物蒸發至幹，LCMS分析顯示100%轉化成所需產物吡咯垸-2-羧酸甲酯，m/z130[1Vr+H]+。結構單元J階段1和2將(R)-2-Fmoc-l，2，3,4-四氫去甲哈爾滿(norharmane)-3-羧酸(2.0g，9.25mmol)加入TMSCl(6ml，47.17mmol)的甲醇(100ml)溶液並加熱回流2小時。將反應混合物蒸發至幹以得到1.7g產物(LCMS顯示100%轉化，m/z453[VT+H]+)。用20%哌啶的DCM溶液(100ml)處理階段l的酯(1.7g)30分鐘以有效除去fmoc。將粗製反應混合物蒸發至幹，溶於DCM並用飽和NaHC03溶液洗漆。將DCM層分離，乾燥(Na2S04)，過濾並濃縮至幹。用3%MeOH/DCM通過柱層析純化以得到(S)-2，3，4,9-四氫-lH-p-咔啉-4-羧酸甲酉旨。LCMS100%，m/z231[Nf+H]+。結構單元KO3-氨基苯甲酸甲酯獲自市售原料結構單元Lo階段l邊攪拌邊在鹽酸色胺(3.0g，15.3mmol)的水(200ml)溶液中加入乙醛酸單水合物(1.51g，16.4mmol)的水(10ml)溶液。加入KOH(0.827g，14.7mmol)的水(10ml)溶液。將反應混合物室溫攪拌1小時，之後發生隨時間沉澱。減壓過濾後收集白色沉澱並用水洗滌以得到2，3,4，9-四氫-lH-(3-咔啉-l-羧酸，產量為1.9g(58%);m/z217[IvT+H]+。階段21,2,3,4-四氫-(3-咔啉-l-羧酸(7.4g)的MeOH(250ml)溶液用HC1氣體飽和20分鐘。將反應混合物在室溫溫和攪拌18小時。反應混合物再用HC1氣體處理並再攪拌18小時。反應完成後將混合物真空濃縮以得到結構單元L，LCMS純度95。/。，m/z231[ivT+H]+。產物(2,3,4,9-四氫-lH-p-咔啉-l-羧酸甲酯)無需進一步純化即可使用。合成圖3列出的化合物，以化合物(44，R-環戊基)和化合物(45，R-H)為例0H階段l:將胺加載到樹脂上o將用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(6.6g，以0.83mmol/g加載)在無水DCM(65ml)中溶脹。加入PyBOP(8.6g，16.43mmo1)、胺結構單元A(3.7g，16.43mmol)和DIPEA(9.5ml，58.4mmo1)。將反應物室溫振蕩24小時。測試切除材料的LCMS顯示反應完全。將樹脂過濾，並用標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。階段2:甲酯的皂化O將結合樹脂的階段1的酯(6.95g，以0.83mmol/g加載)懸浮於THF(25ml)和甲醇(25ml)。加入1.4M的氫氧化鈉水溶液(25ml)。將混合物振蕩48小時，24小時後再加入氫氧化鈉(25ml)。測試切除材料的LCMS顯示65。/。轉化成酸。m/z349[IvT+H]+。將樹脂過濾並用水x2和MeOHx2洗滌，然後通過標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。階段3:與L-苯基甘氨酸環戊酯偶聯formulaseeoriginaldocumentpage78在無水DCM(25ml)中溶脹結合樹脂的階段2的羧酸(2.2g，以0.83mmol/g加載)。加入PyBOP(2.85g，5.48mmo1)、L-苯基甘氨酸環戊酯甲苯磺酸鹽(2.14g，5.48mmo1)和DIPEA(3.17ml，18.3mmo1)。將混合物室溫振蕩24小時。測試切除後的LCMS顯示52%轉化，m/z550[1Vr+H]+。將樹脂過濾並用標準洗滌過程洗滌。樹脂在真空下乾燥。階段4:(S)-U(S)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-l,2,3，4-四氫-異喹啉-3-羰基]-氨基)-苯基-乙酸環戊酯(44)將階段3的樹脂(2.2g，以0.83mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液並在室溫下減壓蒸發。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘後過濾。合併的濾液在室溫下減壓蒸發至幹以得到殘餘物。殘餘物通過製備型HPLC純化以得到化合物(44)，其為TFA鹽。LCMS純度95%，m/z550[M+十H]+，'HNMR(400畫z，MeOD)，5:1.12-1.75(16H，m，8xCH2)，1.92-2.02(2H，m，CH2)，2.09-2.30(1H，m)，2.48(1H，m)，3.10(2H，m，CH2)，4.58-4.66(2H，m，CH2)，4.82(1H，m)，5.04(1H，m)，5.20(1H，s，OCOCHPh)，6.95-7.20(9H，m，Ar)。階段5:環戊酯的皂化將階段3的樹脂(1.3g，1.13mmol)懸浮於THF(4.6ml)和甲醇(4.6ml)。加入1.4M的氫氧化鈉水溶液(4.6ml)。將混合物振蕩24小時。測試切除材料的LCMS證實轉化成所需的酸。將樹脂過濾並用水x2和MeOHx2洗滌，然後通過標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。階段6:(SH[(S)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-l,2,3，4-四氫-異喹啉-3-羰基]-氨基)-苯基-乙酸(45)將階段5的樹脂(1.3g，以0.83mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液並在室溫下減壓蒸發。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘後過濾。合併的濾液在室溫下減壓蒸發至幹以得到殘餘物。殘餘物通過製備型HPLC純化以得到化合物(45)。LCMS純度96%，m/z482[]VT+H]+，^NMR(400固z，MeOD)，S:1.12-1.38(4H，m，2xCH2)，1.45-1.61(4H，m，CH2)，1.98(2H，m，CH2)，2.10-2.58(2H，m，CH2)，3.04-3.20(2H，m，CH2)，4.48-4.65(2H,m)，4.85(1H，m)，5.20(1H，m)，6.92-7.25(9H，m，Ar)。以下化合物按照為化合物(44)和化合物(45)描述的方法製備(SH[(S)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-l，2，3，4-四氫-異喹啉-3-羰基-氨基r苯基-乙酸乙酯(46)使用結構單元HLCMS純度97%，m/z510[M^H]+，'HNMR(400固z，MeOD)，S:1.19(3H，t，CH3)，1.32-1.48(4H，m，2xCH2)，1.54-1.73(4H，m，2xCH2)，2.02-2.15(2H，m，CH2)，2.50-2.70(2H，m，CH2)，3.10-3.30(2H，m，CH2)，4.10(2H，m，CH2)，4.70(2H，m)，4.95(1H，m)，5.35(1H，s，OCOCgPh)，7,10-7,40(9H，m，Ar)。(8)-2-{[(8)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-1，2，3，4-四氫-異喹啉-3-羰基-氨基}-3-苯基-丙酸乙酯(47)使用結構單元HLCMS純度100。/。，m/z524[VT+H]+，'HNMR(400廳z，MeOD)，5:1.20(3H，m，CH3)，1,30-1.49(4H，m，2xCH2),1.55-1.70(4H，m，CH2)，2.10(2H，m，CH2)，2.60(2H，m)，2.88-3.25(4H，m)，4.08-4.20(2H，m，CH2)，4.45-4.62(2H，m)，4.75(IH，m)，5.03(1H，m)，7.09-7.32(9H，m，Ar)。，(8)-2-{[(8)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-1，2，3，4-四氫-異喹啉-3-羰萄-氨基}-3-苯基-丙酸(48)使用結構單元HLCMS純度100%,m/z564[ivT+Hf,!HNMR(400顧z，MeOD)，5:1.25-1.85(16H，m，8xCH2)，2.10(2H，m，CH2)，2.55(2H，t，CH2)，2.85-3.20(4H，m)，4.40-4.60(2H，m)，4.75(1H，m)，4.95-5.15(2H，m)，7.05-7.30(9H，m，Ar)。(8)-2-{[(8)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-1，2，3，4-四氫-異喹啉-3-羰基-氨基}-3-苯基-丙酸(49)使用結構單元HLCMS純度100%，m/z496[M"+H]+，'HNMR(400固z，MeOD)，5:1.10-1.31(4H，m，2xCH2)，1.40-1.55(4H，m，2xCH2)，1.98(2H，m，CH2)，2.43(2H，m，CH2)，2.75-3.10(4H，m)，4.30-4.75(3H，m)，4.90(1H，m)，6.90-7.15(9H，m，Ar)。(S)-2-U(S)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-1，2,3，4-四氫-異喹啉-3-羰基-氨基}-4-甲基-戊酸乙酯(50)使用結構單元HLCMS純度98%,m/z490[lVr+H]+，'HNMR(400固z，MeOD)，5:0.60(1H，m，CH)，0.70-0.85(6H，m，2xCH3)，1.25(3H，t，CH2賜)，1.38-1.65(10H，m，5xCH2)，2.10(2H，m，CH2)，2.60(2H，m，CH2)，3.20(2H，m，CH2)，4.10(2H，q，Ci^CH3)，4.35(1H，m，CH)，4.70-4.80(2H，m，CH2)，4.95(1H，m，CH)，7.23-7.25(4H，m，Ar)。(8)-2-{(8)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-1，2，3，4-四氫-異喹啉-3-羰基-氨基}-4-甲基-戊酸環戊酯(51)使用結構單元HLCMS純度96。/。，m/z530pvT+H]+，^NMR(400應z，MeOD)，S:0.75(3H，d，CH3)，0.88(3H，d，CH3)，1.30-1.90(19H，m)，2.10(2H，t，CH2)，2,60(2H，m，CH2)，3.15-3.30(2H，m，CH2)，4.30(1H，m)，4.65-4.85(2H，m)，4.95(1H，m)，5.10(1H，m)，7.15-7.28(4H，m，Ar)。(8)-2-{[(8)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-1，2，3，4-四氫-異喹啉-3-羰基]-氨基}-4-甲基-戊酸乙酯(52)使用結構單元HLCMS純度1000/0，m/z462[]VT+H]+，'HNMR(400MHz，MeOD)，S:0.60(1H，m，CH)，0.70-0.85(6H，m，2xCH3)，1.38-1.65(10H，m，5xCH2)，2.10(2H，m，CH2)，2.40-2.60(2H，m，CH2)，3.20(2H，m，CH2)，4.35(1H，m，CH)，4.70-4.80(2H，m，CH2)，4.95(1H，m，CH，掩蔽的信號)，7.23-7.25(4H，m，Ar)。(8)-{[1-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-吡咯垸-2-羰基-氨基}-苯基-乙酸環戊酯(53)使用結構單元ILCMS純度100%，m/z488[!VT+H]+，^NMR(400顧z，MeOD)，5:1.30-2,45(24H，m)，3.50-3.70(2H，m，CH2)，4.55(1H，m，CH)，5.18(1H，m，CH)，5.40(1H，m，CH)，7.40(5H，m，Ar)。(SH[l-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-吡咯垸-2-羰基-氨基卜苯基-乙酸(54)使用結構單元ILCMS純度90%，m/z420[M++H]+，^NMR(400MHz,MeOD)，5:1.20-1.20(4H，m，2xCH2)，1.45-1.56(4H，m，CH2)，1.75-2.35(8H，m)，3.35-3.60(2H，m)，4.45(1H，m)，5.35(1H，m)，7.18-7.35(5H，m，Ar)。(S)-2-Ul-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-吡咯垸-2-羰基-氨基P-苯基-丙酸乙酯(55)使用結構單元ILCMS純度100%，m/z462[M++H]+，^NMR(400固z，MeOD)，S:1.20-2.20(19H，m)，2.94-3.20(2H，m，CH2Ph)，3.48-3.69(2H，m，CJ^N),4.10-4.25(2H，m，CS2CH3)，4.33-4.49(1H，m)，4.60-4.79(1H，m)，7.20-7.35(5H，m，Ar)。(S)-2-Ul-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-吡咯垸-2-羰基卜氨基〉-3-苯基-丙酸環戊酯(56)使用結構單元ILCMS純度100。/。，m/z502[M++H]+，'HNMR(400畫z，MeOD)，5:1.27-2.23(22H，m，llxCH2)，2.35(2H，m，CH2)，2.97-3.27(2H，m，CH2Ph)，3.53-3.63(2H，m，CH2)，4.35-4.45(1H，m，CH)，4.60-4.70(1H，m，CgCH2Ph)，5.10-5.20(1H，m，CgOCO)，7.23-7.30(5H，m，Ar)。(S)-2-Ul-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-吡咯垸-2-羰基]-氨基)-3-苯基-丙酸(57)使用結構單元ILCMS純度90。/。，m/z434[JVT+H]+，！HNMR(400畫z，MeOD)，5:1.30-1.41(4H，m，2xCH2)，1.55-1.69(4H，m，2xCH2)，1.80-1.90(8H，m)，2.91-3.26(2H，m)，3.45-3.70(2H，m)，4.40(1H，m)，4.72(1H，m)，7.16-7.30(5H，m，Ar)。(S)-2-U(S)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-2，3，4，9-四氫-lH-p-咔啉-4-羰基-氨基)-3-苯基-丙酸環戊酯(58)使用結構單元JLCMS純度為100%,m/z563[Nf+H]+，^NMR(400顧zMeOD)，S:1.10-1.30(3H，m，CH3)，1.35-1.80(8H，m，4xCH2)，2.15(2H，m，CH2)，2.4-2.65(2H，m，CH2)，2.95-3.20(3H，m)，4.0-4.2(2H，mC,)，4.3-5.0(4H，m掩蔽的信號)，5.05-5.20(1H，mCgOCO)，6.90-7.50(9H，m，Ar)。(S)-2-U(S)-2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-2,3,4，9-四氫-lH-P-咔啉-4-羰基-氨基)-3-苯基-丙酸(59)使用結構單元JLCMS純度為100%，m/z535[M++H]+，&NMR(400固zMeOD)，5:1.20-1.40(4H，m，2xCH2)，1.45-1.65(4H，m，2xCH2)，1.90-2.10(2H，m，CH2)，2.30-2.50(2H，m，CH2)，2.70-3.15(3H，m)，4.2-4.9(4H，m掩蔽的信號)，5.00(1H，mCgOCO)，6.75-7.40(9H，m，Ar)(S)-P-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苯甲醯氨基]-苯基-乙酸環戊酯(60)使用結構單元KLCMS純度100。/。，m/z510[1VT+H]+，'HNMR(400MHz，MeOD),5:1.28(4H，m，2xCH2)，1.40-1.80(12H，m，6xCH2)，1.98(2H，t，CH2)，2,27(2H，t，CH2)，5.12(1H，m)，5.50(1H，s，OCOCgPh),7.21-7.32(4H，m，Ar)，7.36(2H，m，Ar)，7,45(1H，d，Ar)，7.61(1H，d，Ar)，7.90(1H，s，Ar)。(S)-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苯甲醯氨基-苯基-乙酸(61)使用結構單元KLCMS純度1000/。，m/z442pyT+H]+，iHNMR(400畫z，MeOD)，5:1.21-1.34(4H，m，2xCH2)，1.48-1.63(4H，m，2xCH2)，1.98(2H，t，CH2)，2.26(2H，t，CH2)，5.55(1H，s，OCOCgPh)，7.20-7.32(4H，m，Ar)，7.40(2H，d，Ar)，7.48(1H，d，Ar)，7.64(1H，d，Ar)，7,89(1H，s，Ar)。(S)-2-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苯甲醯氨萄-4-甲基-戊酸環戊酯(62)使用結構單元KLCMS純度93。/。，m/z490[M^H]+，'HNMR(400顧z，MeOD)，5:0.84(3H，d，CH(Cii2))，0.88(3H，d，CH(CHi))，1.20-1.40(4H，m，2xCH2)，1.40-1.85(15H，m，6xCH2，CH(CH3)2，賜CH(CH3)2)，2.00(2H，t，CH2)，2.25(2H，t，CH2)，4.45(1H，m，OCOCHCH2)，5.10(1H，m，C即CO)，7.25(1H，mAr)，7.40(1H，d，Ar)，7.60(1H，d，Ar)，7.90(1H，s，Ar)。(S)-2-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苯甲醯氨基-4-甲基-戊酸(63)使用結構單元KLCMS純度97%，m/z422pvT+H]+，'HNMR(400函z，MeOD)，5:1.03(3H，d，CH(Qi2》，1.06(3H，d，CH(Q^))，1.40-1.55(4H，m，2xCH2)，1.65-1.95(7H，m,2xCH2，C,H3)2，賜(:即113)2)，2.15(2H，t，CH2)，2.45(2H，t，CH2)，4.70(1H，m，OCOCHCH2)，7.45(1H，m，Ar)，7.60(1H，d，Ar)，7.80(1H，d，Ar)，8.05(IH，s，Ar)。(8)-2-{[2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-2，3，4，9-四氫-111+-咔啉-1-羰基-氨基}-3-苯基-丙酸環戊酯(64)使用結構單元LLCMS純度100%，m/z603[1Vf+H]+，'HNMR(400MHz，MeOD)，5:1.18-1.71(16H，m，8xCH2)，2.00(2H，t，CH2)，2.45(2H，m)，2.70(2H，m)，2.90-3.11(2H，m)，3.40(1H，m)，4.10(1H，m)，4.50(1H，m)，5.00(1H，m)，5.95(1H，m)，6.90-7.11(7H，m，Ar)，7.25(1H，d，Ar)，7.34(1H，d，Ar)。(S)-2-U2-(7-羥基氨甲醯基-庚醯)-2，3，4，9-四氫-lH-P-咔啉-l-羰基-氨基l-3-苯基畫丙酸(65)使用結構單元LLCMS純度91%，m/z535[N^+H〗+，！HNMR(400而z，MeODS:1.15-1.32(4H，m，2xCH2)，1.40-1.60(4H，m，2xCH2)，1.98(2H，t，CH2)，2.41(2H，m)，2.69(2H，m)，2.90-3.11(2H，m)，3.30(1H，m)，4.06(1H，m)，4.60(1H，m)，5.92(1H，m)，6.84(7H，m，Ar)，7.20(1H，d，Ar)，7.31(1H，d，Ar)。合成化合物(66)和化合物(67)6667階段l:5-氨基-煙酸甲酯將5-氨基煙酸(lg，7.2mmmol)懸浮於甲醇(100ml)並在Ot:時逐滴加入亞硫醯氯(4.22ml，57.9mmo1)。將反應混合物室溫攪拌18小時。將反應混合物蒸發至幹，將所得黃色油狀物重溶於甲醇/乙醚(l:l)，並通過過濾收集所得黃色晶體(鹽酸鹽)，產量為1.2g(85%)。LCMS純度91%，m/z153[Nf+Hf階段2:(5-氨基-吡啶-3-基)-甲醇N將5-氨基-煙酸甲酯(5.7g，30.2mmol)溶於THF(150ml)並在0。C下緩慢加入LiAlH4(1M的THF溶液，133ml，133mmo1)。將反應混合物室溫攪拌21小時。淬滅反應混合物，用稀HCl酸化至pH3，並用固體Na2C03鹼化(pH8)。減壓除去溶劑。殘餘物通過矽膠過濾，用20%MeOH/DCM洗脫得到3.8g產物，(100%)LCMS純度為97%，m/z125[VT+H]+，通過ELS測定。階段3:將階段2的酸偶聯到樹脂上將用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(0.49g，0.86mmol/g，0.42mmol)在無水DCM(6ml)中溶脹並加入PyBOP(0.67g，1.3mmo1)。將階段2的苯胺(0.16g，1.3mmo1)加入DMF(6ml)，隨後加入DIPEA(0.75ml，4.2mmo1)。測試切除後的LCMS顯示27%轉化，m/z296[Ivr+H]+。將樹脂過濾，並用標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。階段4:甲磺醯化將結合樹脂的階段3的醇(1.8g，1.57mmol)在無水DCM(30ml)中溶脹並在O'C下加入DIPEA(1.62ml，9.42mmo1)，然後加入甲磺醯氯(0.23ml，3.14mmo1)。將反應混合物在0。C振蕩30分鐘。測試切除後的LCMS顯示21。/。轉化，m/z374[]Vr+H]+，並有9%通過用氯化物取代甲磺酸酯衍生得到的副產物，m/z314[NT+H]+。將樹脂過濾，並用標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。階段5:用L-苯丙氨酸乙酯取代甲磺酸酯將結合樹脂的階段4的產物(0.5g，0.43mmol)在無水DMF(4ml)中溶脹並加入碘化鈉(0.05g，10。/。重量/體積)。加入L-苯丙氨酸乙酯鹽酸鹽(0.3g，1.29mmol)的無水DMF(4ml)溶液，然後加入DIPEA(0.75ml，4.3mmo1)。振蕩3小時後，測試切除材料的LCMS顯示35。/。轉化，m/z471[lVr+H]+。將樹脂過濾，並用標準洗滌過程洗漆。真空乾燥樹脂。階段6:(S)-2-U5-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-吡啶-3-基甲蜀-氨基H-苯基-丙酸乙酯(66)階段5的樹脂(2g，以0.87mmol/g加載)在2%TFA/DCM(20ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液並在室溫下減壓蒸發。樹脂用2。/。TFA/DCM(10ml)重新處理，10分鐘後過濾。合併的濾液在室溫下減壓蒸發至幹以得到粗產物。粗產物通過製備型HPLC純化以得到化合物(66)，其為TFA鹽。LCMS純度100%，m/z471[Nf+H]+，'HNMR(400畫z，MeOD)，S:1.10(3H，t，C02CH2Qi3)，1.31-1.50(4H，m，2xCH2)，1.58-1.80(4H，m，2xCH2)，2.05-2.15(1H，m，CH)，2.24-2.38(1H，m，CH)，2.45(2H，t，CH2)，3.10-3.20(1H，m，CH)，3.38-3.49(1H，m，CH)，4.12(2H，q，CH2)，4.35(3H，m，CH2，CH)，7.20-7.40(5H，m，Ar)，8,30-9.00(3H，m，Ar)。階段7:(S)-2-([5-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-吡啶-3-基甲基]-氨基H-苯基-丙酸(67)formulaseeoriginaldocumentpage86在階段6的產物(30mg，以1.8mmol/g加載)的THF(lml)溶液中加入1.4M氫氧化鈉(lml)。將反應混合物攪拌30分鐘。LCMS顯示75。/。轉化，m/z442[]VT+H]+。將反應混合物蒸發至幹並通過製備型HPLC純化以得到所需化合物，其為TFA鹽，化合物(67)。LCMS純度100%，m/z443[M++H]+。'HNMR(400畫z，MeOD)，5:1.30(4H，m，2xCH2)，1.50-1.70(4H，m，2xCH2)，2.00(2H，t，CH2)，2.30(2H，t，CH2)，3.20(2H，m，CM2Ph，掩蔽的信號)，4.20(3H，m)，7.20(5H，m，Ar)，8.30(1H，brs，Ar)，8.40(1H，s，Ar)，8.65(1H，brs，Ar)。合成化合物(68)formulaseeoriginaldocumentpage86(S)-2-([5-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-吡啶-3-基甲基]-氨基H-苯基-丙酸叔丁酯(68)使用所列出的用來製備化合物(66)的步驟進行製備LCMS純度100。/。，m/z499[M十+H]+，！HNMR(400顧z，MeOD)，5:1.20(9H，s，C(Cg3)3)，1.25-1.35(4H，m，2xCH2)，1.49-1.65(4H，m，2xCH2)，2.00(2H，t，CH2)，2.35(3H，t，CH2)，3.00(1H，m)，3.32(1H，m)，4.15-4.30(3H，m)，7.15-7.30(5H，m，Ar)，8.30(1H，brs，Ar)，8.45(1H，s，Ar)，8.65(1H，brs，Ar)。合成化合物(69)和化合物(70)86formulaseeoriginaldocumentpage87階段L將Fmoc氨基己酸加載到樹脂上formulaseeoriginaldocumentpage87在羥胺2-氯三苯甲基樹脂(2.5g，以0.94mmol/g加載)和無水DCM(10ml)的混合物中加入1，3-二異丙基碳二亞胺(l.lml，7.05mmol)和6-(Fmoc-氨基)己酸(2.5g，7.05mmol)的無水DCM(10ml)溶液。加入DMF(5ml)並在室溫振蕩反應物1小時。測試切除顯示96%轉化成所需產物。將樹脂過濾，並用標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。階段2:Fmoc去保護將階段1的Fmoc保護的胺樹脂(2.0g，以0.94mmol/g加載)溶於20%的哌啶的DMF(25ml，過量)溶液並室溫振蕩30分鐘。測試切除，LCMS顯示完全轉化，100%(ELS檢測)。將樹脂過濾，用標準洗滌過程洗滌並真空乾燥。階段3:偶聯反應在結合樹脂的階段2的胺(2.0g，以0.94mmol/g加載)的無水DCM(10ml)和DMF(10ml)溶液中加入DIC(0.71ml，5.64mmol)和3-(氯甲基)苯甲酸(0.96g，5.64mmo1)。將混合物振蕩l小時，然後測試切除，LCMS顯示49。/。轉化，m/z219[VT+H]+。將樹脂過濾，並用標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。階段4:用L-苯基甘氨酸環戊酯取代氯化物formulaseeoriginaldocumentpage87在結合樹脂的階段3的氯化物(0.5g，0.47mmol)的無水DMF(51111)溶液中加入L苯基甘氨酸環戊酯甲苯磺酸鹽(0.57g，1.41mmol)、DIPEA(0.24ml，1.41mmoI)和催化量的碘化鈉。反應混合物在6(TC加熱1小時。測試切除後的LCMS顯示45%轉化，m/z482[M"+H]+。將樹脂過濾，並用標準洗滌過程洗滌。真空乾燥樹脂。階段5:(S)-[3-(5-羥基氨甲醯基-戊基氨甲醯基)-節基氨蜀-苯基-乙酸環戊酯(69)將階段4的樹脂(1.0g，以0.94mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液並在室溫下減壓蒸發。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘後過濾。合併的濾液在室溫下減壓蒸發至千以得到殘餘物。殘餘物通過製備型HPLC純化以得到化合物(69)。LCMS純度89%，m/z482[N^+H]+，]HNMR(400固z，MeOD)，S:1.24-1.82(14H，m，7xCH2)，2.03(2H，t，CH2)，3.30(2H，t，CH2)，4.08(1H，d，CHgPh)，2.20(1H，d，CgHPh)，5.09(1H，s，OCOQiPh)，5.18(1H，m，C即CO)，7.39-7.54(7H，m，Ar)，7.77(2H，m，Ar)。階段6:環戊酯的皂化將階段4的樹脂(1.35g，以0.94mmol/g加載)懸浮於THF(4.7ml)和甲醇(4.7ml)。加入1.4M氫氧化鈉(9.4ml，12.66mmol)。將混合物振蕩48小時。測試切除後的LCMS顯示49%轉化成酸，m/z414[NT+H]+。將樹脂過濾並用水x2和MeOHx2洗滌，然後通過標準洗滌過程洗滌。樹脂在真空下乾燥階段7:(S)-[3-(5-羥基氨甲醯基-戊基氨甲醯萄-節基氨基]-苯基-乙酸(70)將階段6的樹脂(1.35g，以0.94mmol/g加載)在2%TFA/DCM(10ml)中溫和振蕩20分鐘。將樹脂過濾。收集濾液並在室溫下減壓蒸發。樹脂用2%TFA/DCM(10ml)重新處理，20分鐘後過濾。合併的濾液在室溫下減壓蒸發至幹以得到殘餘物。殘餘物通過製備型HPLC純化以得到化合物(70)。LCMS純度100%,m/z414[M""+H]+，!HNMR(400函z，MeOD)，S:1.30(2H，m，CH2)，1.57(4H，m，2xCH2)，2.20(2H，t，CH2)，3.30(2H，t，CH2)，4.05(1H，d，CJiHPh)，4.18(1H，d，CH,)，4.90(1H，s，OCOCHPh)，7.35-7.52(7H，m，Ar)，7.78(2H，m，Ar)。合成圖4的化合物，以化合物(71)和化合物(72)為例formulaseeoriginaldocumentpage89R=環戊基71R=H72formulaseeoriginaldocumentpage89R=環戊基73R=H74formulaseeoriginaldocumentpage89R=環戊基75R=H76formulaseeoriginaldocumentpage89R=環戊基77R=H78formulaseeoriginaldocumentpage89圖4製備結構單元M，N，O結構單元Mformulaseeoriginaldocumentpage90階段l:2-(3-氨基-苯基)-乙醇將硝基苯乙醇(8.0g，0.047mol)和10%Pd/C(0.6g)的乙醇(100ml)混合物在氫氣下(氣球壓力)攪拌18小時。將反應混合物通過硅藻土墊過濾並除去Pd/C催化劑。將濾液減壓濃縮以得到淡棕色固體6.1g(95%產率)。LCMS純度98%，m/z138[M+H]+。階段2:3-(2-溴-乙基)-苯胺將2-(3-氨基-苯基)-乙醇(2.0g)在48%的HBr水溶液(20ml)中的溶液於9(TC加熱18小時。將混合物冷卻至室溫，並通過過濾收集形成的沉澱。真空乾燥固體得到結構單元M，1.8g(61。/。產率)。LCMS純度90。/。，m/z200/202[M+H]+。結構單元Nformulaseeoriginaldocumentpage90結構單元N階段l:2-(3-硝基-苯氧基)-乙醇在3-硝基苯酚(10g，71.9mmol)的DMF(40ml)溶液中加入加入NaOH顆粒(3.16g，79.1mmol)和2-溴乙醇(5.6ml，79.1mmo1)。反應混合物於60。C加熱18小時。LCMS顯示65%轉化成所需產物。反應混合物用水(10ml)稀釋並用2MHCl慢慢中和。反應混合物用EtOAc(50ml)萃取並用水(50ml)洗滌。將EtOAc層乾燥(Na2S04)，過濾並蒸發至幹。快速柱層析純化，用3(P/。EtOAc/庚垸洗脫，得到所需產物(8.2g，62%產率)。LCMS純度100%，m/z184[M+H]+。階段2:2-(3-氨基-苯氧基)-乙醇還原反應按照對於結構單元M列出的過程進行。階段3:3-(2-溴-乙氧基)-苯胺溴化反應按照對於結構單元M列出的過程進行。結構單元Oformulaseeoriginaldocumentpage91階段3結構單元O結構單元O按照對結構單元G的描述用3-溴-l-丙醇代替2-溴乙醇進行製備(合成圖4的化合物，以化合物(71，R-環戊基)和化合物(72，R-H)為例formulaseeoriginaldocumentpage91階段l:將苯胺衍生物偶聯到羧酸官能化的樹脂formulaseeoriginaldocumentpage91、在用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(1.0g，0.94mmo1，以0.94mmol/g加載)的DCM/DMF(10ml/10ml)懸浮液中加入DIPEA(1.75ml)，然後加入結構單元M(0.8g，2.82mmo1)。加入PyBrOP(0.53g，3.76mmol)並將懸浮液振蕩18小時。樹脂用標準洗滌過程洗滌並充分乾燥。階段2:用L-苯基甘氨酸環戊酯取代溴化物在瓶中的階段l的樹脂(0.4g，0.38mmol)的DMF(4ml)的懸浮液中加入L-苯基甘氨酸環戊酯甲苯磺酸鹽(0.44g，U2mmol)和DIPEA(0.67ml，3.76mmo1)，然後加入Nal(50mg)。使反應物在65'C靜置8小時。用標準洗滌過程充分洗滌樹脂。階段3:(S):2-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苯基]-乙基氨基卜苯基-乙酸環戊酯(71)用2%TFA/DCM(10mlx3)切除階段2的樹脂。將濾液濃縮至幹並通過製備型HPLC純化殘餘物以得到化合物(71)，其為TFA鹽。產量為21mg(總共11%)，LCMS純度99%，m/z510[M^H]+，'HNMR(400MHz，MeOD)，S:1.35-1.95(16H,m8xCH2)，2.10(2H，t，CH2)，2.38(2H，t，CH2)，2.91-3.29(4H，m)，5.18(1H，s，OCOQiPh)，5.32(1H，m，CgOCO),6.98(1H，m，Ar)，7.30(2H，m，Ar)，7.47-7.56(5H，m，Ar)，7.62(1H，s，Ar)。階段4:皂化將階段2的樹脂(1.2g，1.12mmol)懸浮於THF/MeOH(12ml/12ml)。加入2.7MNaOH溶液並將混合物室溫振蕩18小時。反應完成後充分洗滌樹脂(標準洗滌過程)。階段5:(SH2-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苯基]-乙基氨基卜苯基-乙酸(72)用2。/。TFA7DCM(10mlx3)切除階段4的樹脂(0.8g，0.76mmo1)。將濾液濃縮至幹並通過製備型HPLC純化殘餘物以得到化合物(72)，其為TFA鹽，產量為40mg(總共10%)。LCMS純度為100。/。，m/z442[M+十H]+，'HNMR(400MHzMeOD)，S:1.20-1.35(4H，m，2xCH2)，1.45-1.70(4H，m，2><CH2)，1.80-1.90(2H，m，NHCH2CH2)，2.00(2H，t，CH2)，2.25(2H，t，CH2)，2.55-2.70(2H，m，NHCJ^),3.90(2H，t，CH2CHzO)，4.25(1H，s，OCOCgPh)，5.05(1H，m，CgOCO)，6.55(1H，m，Ar)，6,95(1H，m，Ar)，7.00-7.10(1H，m，Ar)，6.15-6.35(6H，m，Ar)(SH3-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苯氧基-丙基氨基)-苯基-乙酸環戊酯(78)採用結構單元OLCMS純度為100%,m/z472[Iv/T+H]+，NMR(400MHz，DMSO)，5:1.20-1.40(4H，m，2xCH2)，1.45-1.65(4H，m，2xCH2)，1.90(2H，m，麗(:恥歸，2.00-2.20(2H，m，CH2)，2.20-2.35(2H，m，CH2)，2.80-3.10(2H，m，NHCHa掩蔽的信號)，3.90-4.00(2H，m，CH2C|^0)，4.60-4.85(1H，brs，OCOCgPh)，6.55(1H，d，Ar)，7.05(1H，d，Ar)，7.15(1H，m，Ar)，7.30-7.60(6H，m,Ar)，8.50-8.85(IH，brs)，9.85(1H，s)，10.35(1H，s)。合成圖5的化合物，以化合物79和化合物80為例R=環戊基79R=H80圖5合成化合物79(R-環戊基)和化合物80(R=H)formulaseeoriginaldocumentpage95階段l:3-硝基-苄胺將3-硝基苄基溴化物(10g，46.3mmol)溶於乙醇(200ml)並於室溫攪拌。在30分鐘內在反應物中逐滴加入濃氨水(200ml)的乙醇(300ml)溶液。將反應物室溫攪拌18小時，然後蒸發至幹。在殘餘物中加入水(350ml),溶液用EtOAc(2x200ml)洗滌。含水層用1MNaOH鹼化並用EtOAc(2x200ml)萃取。將鹼性層的有機萃取物合併，乾燥(Na2S04)並蒸發至幹。所得產物為橙色油狀物(4.6g，65%產率)。LCMS純度100%，m/z153[Nf+H]+。階段2:l-異氰酸甲酯基-3-硝基-苯在氮氣下將3-硝基-苄胺(2.3g，15.1mmol)溶於無水二噁垸(50ml)。加入雙光氣(2.2ml，18.2mmo1)，有沉澱形成，該沉澱在加熱至75'C時溶解。將反應物在75'C攪拌3小時，冷卻並蒸發至幹，得到3.4g粗材料，該材料無需進一步純化即可用於下一步驟。階段3:(S)-[3-(3-硝基-苄基)-脲基]-苯基-乙酸環戊酯formulaseeoriginaldocumentpage96將L-苯基甘氨酸環戊酯甲苯磺酸鹽(7.47g，19.1mmol)溶於DMF(70ml)。加入三乙胺(5.8ml，42.0mmol)並將混合物冷卻至0°C。氮氣下，在反應混合物中緩慢加入l-異氰酸甲酯基-3-硝基-苯溶液(3.4g，19.1mmo1，溶於30mlDMF)。繼續攪拌18小時使反應物回復室溫。混合物用水(200ml)稀釋並用EtOAc(2x200ml)萃取。有機萃取物用水(3xl00ml)和鹽水(100ml)洗滌，乾燥(Na2S04)並蒸發至幹。粗製的脲通過柱層析(1%MeOH/DCM)純化以得到淡黃色油狀物(4.6g，65%產率)。LCMS純度85%，m/z398[M+十H]+。階段4:(S)-[3-(3-氨基-苄基)-脲基]-苯基-乙酸環戊酯formulaseeoriginaldocumentpage96將(S)-[3-(3-硝基-苄基)-脲基]-苯基-乙酸環戊酯(3.6g，9.0mmol)溶於乙醇(50ml)，加入Pd/C(10M，溼重)催化劑(100mg)，混合物在氫氣(氣球壓力)下攪拌18小時。將反應混合物通過硅藻土塞過濾並蒸發至幹以得到紫色油狀物(2.34g，71%產率)。LCMS純度90%，m/z368[M^+H]+。階段5:偶聯到樹脂formulaseeoriginaldocumentpage96將用辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(1.5g，以0.94mmol/g加載)在DMF(15ml)中溶脹，加入PyBOP(2.2g，4.23mmol)和DIPEA(2.4ml，14.1mmo1)。將階段4的苯胺(1.3g，3.53mmol)溶於DCM(15ml)並加入反應混合物中。反應物在室溫下振蕩42小時，然後進行標準樹脂洗滌步驟和乾燥。階段6:(SH3-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄基]-脲基》-苯基-乙酸環戊酯(79)79將階段5的結合樹脂的環戊酯(1.75g)與2%TFA/DCM(15ml)—起振蕩10分鐘，然後過濾樹脂並在室溫下減壓蒸發溶劑。重複該過程(3次)，合併的粗產物通過製備型HPLC純化以得到化合物(79)。LCMS純度100%，m/z539[M^+H]+，&NMR(400MHz，MeOD)，5:1.34-1.90(16H，m，8xCH2),2.11(2H，t，CH2)，2.38(2H，t，CH2)，4.30(2H，s，CH2)，5.18(1H，m，C即CO)，5.30(1H，s，OCOCHPh)，7.05(1H，d，Ar)，7.26(1H，t，Ar)，7.34-7.40(5H，m，Ar)，7.47(2H，m，Ar)。階段7:(SH3-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-節基]-脲基)-苯基-乙酸(80)將化合物(79)(75mg)溶於THF(lml)並加入2MNaOH(水溶液，lml)。反應物室溫攪拌2小時。在氮氣氣流下除去THF，含水層(約lml)通過製備型HPLC純化以得到化合物(80)。LCMS純度99%，m/z471[M^H]+，&NMR(400MHz，MeOD)，5:1.20-1.35(4H，m，2xCH2)，1.45-1.65(4H，m，2xCH2)，2.00(2H，t，CH2)，2.25(2H，t，CH2)，4.20(2H，s賜,，5.25(1H，sCgPh)，6.90(1H，d，Ar)，7.10(1H，t，Ar)，7.15-7.40(7H，m，Ar)。以下化合物按照為化合物(79)和化合物(80)描述的方法製備(S)-2-(3-3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-節基-脲基H-苯基-丙酸環戊酯(81)LCMS純度950/0，m/z553[M^H]+，'HNMR(400固z，MeOD)，5:1.20-1.40(4H，m，2xCH2)，1.40-1.80(12H，m，6xCH2)，2.00(2H，t，CH2)，2.25(2H，t，CH2)，2.90(2H，m，CHC^Ph),4.15(2H，s賜NH)，4.40(1H，m，OCOCgCH2)，5.00(1H，m，CgOCO)，6.85(1H，d，Ar)，7.00-7.25(6H，m，Ar)，7.35(2H，brs，At)。(S)-2-P-3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-節基l-脲基卜3-苯基-丙酸(82)LCMS純度94。/。，m/z485[M十+H]+，!HNMR(400畫z，MeOD)，S:1.30-1.50(4H，m，2xCH2)，1.60-1.80(4H，m，2xCH2)，2.10(2H，t，CH2)，2.35(2H，t，CH2)，2.95-3.25(2H，m，CHCH^Ph)，4.25(2H，s，賜NH)，4.60(1H，mOCOC￡iCH2)，7.00(1H，d，Ar)，7.15-7.35(6H，m，Ar)，7.45(2H，m，Ar)合成圖6所示的化合物，以化合物(83)和化合物(84)為例R=環戊基83R=H84R=環戊基86R=H87R=環戊基89R=H90R=環戊基85O一HR=環戊基88R=環戊基91圖6O一HO一卜階段l:7-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲醯基)-庚酸甲酯0/0v0將辛二酸一甲酯(25.0g，13.3mmol，1.0eq)溶於THF(300mL)和DCM(300mL)。邊攪拌邊在溶液中加入EDC.HCl(25.46g，13.3mmol，1.0eq)，然後加入HOBt(17.95g，13.3mmol，1.0eq)和三乙胺(48.5mL，34.5mmol，2.6叫)。在粘性溶液中加入O-(l-異丁氧基-乙基)-羥胺(21.9mL，15.9mmol，1.2叫)並將反應物在室溫攪拌過夜。將反應混合物真空濃縮，加入DCM(350mL)並用水(250mL)和鹽水(200mL)洗滌。將有機層分離，乾燥(MgS04)，過濾並真空濃縮。所得產物為白色固體(36.6g，91%產率)LCMS純度88。/。，m/z302(M^H)+。該物質無需進一步純化便可用於下一步驟。階段2:7-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲醯基)-庚酸5CTC時，在存在氫氧化鋰(8.68g，36.2mmol，3.0叫)時將7-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲醯基)-庚酸甲酯(36.6g，12.1mmo1,1.0eq)在THF(200mL)和水(200mL)中攪拌3小時。在真空下蒸發掉THF並在混合物中加入水(100mL)和乙酸乙酯(200mL)。加入1NHCl將混合物小心酸化至pH3。分離有機相，含水層用乙酸乙酯(150mL)重新萃取。將有機相合併，乾燥(MgS04)，過濾並真空濃縮。所得產物為白色固體(29.0g，83%產率)，m/z288[IVT+Hf，該產物無需進一步純化便可用於階段4。階段3:4-三甲基甲矽垸氧基甲基-苯胺邊攪拌邊在4-氨基苄醇(16.0g，13.0mmol，1.0eq)的THF(400mL)溶液中加入三乙胺(18.9mL，13.6mmol，1.05eq)，然後加入三甲基氯矽烷(17.2mL，13.6mmol，1.05eq)。室溫氮氣下攪拌反應混合物過夜。在真空下蒸發THF並將混合物在乙酸乙酯(300mL)和水(300mL)之間分配。分離有機相，含水層用乙酸乙酯(2x100mL)重新萃取。合併的有機相用鹽水(2xl50mL)洗滌，乾燥(MgS04)，過濾並真空濃縮。所得產物為黃色油狀物(24.0g，95%產率)，該產物無需進一步純化便可用於階段4。階段4:辛二酸(Octanedioicacid)(4-羥甲基-苯基)-醯胺(l-異丁氧基乙氧基)-醯胺formulaseeoriginaldocumentpage99在DMF(140mL)中一起攪拌7-(1-異丁氧基-乙氧基氨甲醯基)-庚酸(5.0g，1.72mmol，1.0eq)和4-三甲基甲矽烷氧基甲基-苯胺(3.38g，1.72mmol，1.0叫)。在混合物中加入PyBroP(10.5g，2.25誦ol，1.3eq)和DiPEA(3.9mL，2.25腿ol，1.3eq)。室溫下在氮氣下攪拌反應物過夜。加入乙酸乙酯(200mL)和水(200mL)。將水相分離並用乙酸乙酯(2x100mL)重新萃取。合併的有機相用水(2x50mL)和鹽水(50mL)洗滌，然後乾燥(MgS04)，過濾並真空濃縮。將粗產物溶於最小量的乙酸乙酯並通過二氧化矽墊純化。產物通過二氧化矽用乙酸乙酯洗滌，並收集在100mL的錐形瓶中，直到LCMS分析顯示洗脫終止。純化得到黃色油狀物(3.59g，53%產率)。LCMS純度61%，m/zWClvr+Nar階段5:辛二酸(4-甲醯-苯基)-醯胺(l-異丁氧基-乙氧基)-醯胺o將辛二酸(4-羥甲基-苯基)-醯胺(1-異丁氧基乙氧基)-醯胺(100mg，0.025mmol，l.Oeq)溶於DCM(5mL)。在反應混合物中加入Mn02(286mg，0.33mmol，13.0叫)並室溫攪拌1.5小時。將反應混合物通過硅藻土過濾並用DCM洗滌，然後蒸發溶劑以得到黃色油狀物(78.6mg，79。/。產率)LCMS純度53%，m/z415[M"+Na]+。產物無需進一步純化便可用於下面的步驟。階段6:(RH4-[7-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲醯萄-庚醯氨基]-苄基氨基)-苯基-乙酸環戊酯將辛二酸(4-甲醯-苯基)-醯胺(l-異丁氧基-乙氧基)-醯胺(276mg，0.70mmol，1.0eq)和D-苯基甘氨酸環戊酯(170mg，0.77mmol，1.1eq)在DCE(15mL)中攪拌10分鐘。加入乙酸(65pL)並攪拌2分鐘。加入三乙醯氧基硼氫化鈉(448mg，0.21mmol，3.0eq)並將反應混合物在氮氣下室溫攪拌1小時。加入碳酸氫鈉以淬滅反應。然後加入DCM並分離有機相。含水層用DCM重新萃取，將有機層合併，乾燥(MgS04)，過濾並真空濃縮以得到粗產物(100mg，24%)，LCMS純度94.0。/。，m/z496[m++H]+，該產物無需進一步驟7:(R)-[4-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄基氨基]-苯基-乙酸環戊酯(83)將(RH4-[7-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲醯基)-庚醯氨基]-苄基氨基卜苯基-乙酸環戊酯(50mg，0.08mmol，1eq)溶於DCM(0.5mL)並與4MHC1—起在二嗯烷(0.2mL)中攪拌30分鐘。將所得鹽濃縮，溶於甲醇並通過製備型HPLC純化以得到化合物(83)。LCMS純度940/。，m/z496[Ivr+H]+，iH蘭R(300應z，MeOD)，5:1.41-1.95(16H,m，8xCH2)，2.15-2.17(2H，m，CH2)，2.40(2H，t，J=7.2Hz，CH2)，4.16(2H，q，J二13.5Hz，CH2)，5.12(1H，s，CH)，5.27-5.30(1H，m，CH)，7.40(2H，d，J=8.7Hz，Ar-H)，7.50-7.56(5H，m，Ar-H)，7.67(2H，d，J=8.7Hz，Ar-H)。階段8:(R)-[4-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄基氨基]-苯基-乙酸(84)formulaseeoriginaldocumentpage101在CHR-003644(50mg，0.008mmol，1.0叫)的THF(2mL)和水(2mL)的溶液中加入LiOH(8.0mg，0.033mmol，4.0eq)。反應物在氮氣下於40。C攪拌過夜。在真空下蒸發THF，所得水性反應溶劑用乙酸乙酯洗滌。將溶液酸化至pH3並真空濃縮產物。將所得鹽溶於甲醇並通過製備型HPLC純化產物以得到化合物(84)。LCMS純度97%，m/z428[M"+H]+，'HNMR(300畫z，MeOD)，S:1.39-1.41(4H，m，2xCH2)，1.62-1.74(4H，m，2><CH2)，2.13-2.15(2H，m，CH2)，2.40(2H，t，J=7.5Hz，CH2)，4.14(2H，q，J=12.9Hz，CH2)，5.06(1H，s，CH)，7.39(2H，d，J=8.4Hz，Ar-H)，7.54(5H，s，Ar-H)，7.67(2H，d，J=8.7Hz，Ar-H)以下化合物按照與化合物(83)和化合物(84)類似的方法採用合適的中間體製備。(S)-2-[4-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄基氨萄-4-甲基-戊酸環戊酯(85)LCMS純度97%，m/z476pvT+H]+，^NMR(300顧z，MeOD)，5:0.98-1.03(6H，m，2xCH3)，1.41-1.42(4H，m，2xCH2)，1.71-1.96(14H，m，7xCH2)，2.10-2.15(2H，m，CH2)，2,40(2H，t，J=7.2Hz，CH2)，3.96-4.01(1H，m，CH)，4.15-4.26(2H，m，CH2)，4.81(1H，s，CH)，5.31-5.34(1H，m，CH)，7.44(2H，d，J=8.7Hz，Ar-H)，7.70(2H，d，J=8.7Hz，Ar-H)(S)-環己基-[4-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄基氨萄-乙酸(87)LCMS純度95%，m/z434[Iv^+H]+，！HNMR(300應z，MeOD)，S:1.23-1.96(18H，m，9xCH2)，2.10-2.15(2H，m，CH2)，2.39(2H，m，CH2)，3.71(1H，m，CH)，4.12(2H，q，J=7.2Hz，CH2)，4.80(1H，s，CH)，7.43(2H，d，J=8.4Hz，Ar-H)，7.68(2H，d，J=8.7Hz，Ar-H)(S)-3-叔丁氧基-2-4-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄基氨基-丁酸環戊酯(88)LCMS純度83%，m/z520[!Vr+H]+，tHN證(300MHz，MeOD)，S:1.19(9H，s，3xCH3)，1.29(3H，d，J=7.8Hz，CH3)，1.37-1.41(4H，m，CH2)，1.64-1.89(12H，m，CH2)，2.09-2.15(2H，m，CH2)，2.40(2H，t，J=7.2Hz，CH2)，3.36-3.37(IH，m，CH)，3.70-3.71(1H，m，CH)，4.24-4.27(2H，m，CH2)，5.17-5.19(1H，m，CH)，7.42(2H，d，J=6.9Hz，Ar-H)，7.68(2H，d，J=8.4Hz，Ar-H)(S)-3-叔丁氧基-2-[4-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄基氨萄-丙酸環戊酯(89)LCMS純度95%，m/z506[M++H]+，^NMR(300應z，MeOD)，8:1.23(9H，s，C(CH3)3)，1.36-2.09(16H，m，8xCH2)，1.66(2H，t，J=7.7Hz，CH2)，1.75(2H，t，J=7.4Hz，CH2)，2.11(2H，t，J=7.4Hz，CH2)，2.40(2H，t，J=7.3Hz，CH2)，3,92(2H，m，CH2)，4.16(1H，m，CH)，4.26(2H，s，CH2)，5.32(1H，m，CH)，7.45(2H，d，J=8.5Hz，ArH)，7.67(2H，dd，J=3.2，8.3Hz，ArH)。(S)-3-叔丁氧基-2-[4-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄基氨萄-丙酸(90)LCMS純度95%，m/z438[M^H]+，^NMR(300固z，MeOD)，S:1.25(9H，s，C(CH3)3)，1.39-1.42(4H，m，2xCH2)，1.62-1.69(4H，m，2xCH2)，2.08-2.17(2H，m，CH2)，2.40(2H，t，J=7.5Hz，CH2)，3.85-3.96(2H，m，CH2)，4.01-4.04(1H,m，CH)，4.26(2H，s，CH2)，7.46(2H，d，J=8.4Hz，Ar隱H)，7.68(2H，d，J=8.4Hz，Ar鄰(S)-2-[4-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨萄-節基氨萄-3-苯基-丙酸環戊酯(91)LCMS純度95。/。，m/z510[ivT+H]+，&NMR(300應z，MeOD)，S:1.17-2.43(22H，m，llxCH2)，4.19-4.30(2H，m，CH2)，5.08(1H，s，CH)，5.20-5.26(1H，m，CH)，7.24-7.71(9H，m，Ar-H)化合物(86)用另一種方法製備，改變的條件在下面詳述步驟6b:(8)-環己基-{4-[7-(1-異丁氧基-乙氧基氨甲醯基)-庚醯氨基]-苄基氨基}-乙酸環戊酯將辛二酸(4-甲醯-苯基)-醯胺(1-異丁氧基-乙氧基)-醯胺(220mg，0.056mmol，1.0eq)和L-環己基-甘氨酸環戊酯(138.9mg，0.062mmol，1.1eq)在甲醇(8mL)中室溫攪拌過夜。加入氫硼化鈉(31.8mg，0.084mmol，1.5eq)並將反應混合物攪拌15分鐘。將反應混合物轉移到冰浴中並加入2滴氫氧化鈉(2M)。加入二乙醚並分離有機相。含水層用二乙醚重新萃取，將有機層合併並用鹽水洗滌。然後將有機相干燥(MgS04)，過濾並真空濃縮以得到粗材料，該材料無需進一步純化便可用於下一步驟。步驟L(8)-環己基-[4-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-節基氨基]-乙酸環戊酯(86)formulaseeoriginaldocumentpage103將步驟6b(50mg，0.083mmol，1eq)的材料溶於DCM/甲醇(2mL:2mL)並與TFA(1.0mL)—起攪拌2小時。將所得鹽濃縮，溶於甲醇並通過製備型HPLC純化以得到化合物(86)。LCMS純度100。/。，m/z502[VT+H]+，^NMR(300MHz，MeOD)，5:1.28-1.98(26H，m，13xCH2)，2.10-2.15(2H，m，CH2)，2.40(2H，t，J=7.8Hz，CH2)，3.81(1H，d，J=3.9Hz，CH)，4.21(2H，m，CH2)，5.01(1H，s，CH)，5.23-5.25(1H，m，CH)，7.43(2H，d，J=8.4Hz，Ar-H)，7.68(2H，d，J=8.7Hz，Ar-H)合成92和93formulaseeoriginaldocumentpage104階段l:4-(3-硝基-苯氧基)-丁酸甲酯在3-硝基苯酚(8.35g，60mmol)的DMF(50ml)溶液中加入K2C03(16.56g，12Ommo1)和1,4-溴代丁酸甲酯(11.95g，66mmo1)。將反應物室溫攪拌16小時。用乙酸乙酯和水稀釋反應物。將有機相分離並用水(2x200ml)洗滌。有機相用Na2S04乾燥並真空濃縮。通過層析(乙酸乙酯:庚烷，l:9)分離所需的醚，其為淡黃色固體(12.2g，85%產率)。LCMS純度100%，m/z240pvT+H]+。階段2:4-(3-氨基-苯氧基)-丁酸甲酯formulaseeoriginaldocumentpage104將階段1的硝基酯(250mg，lmmol)溶於乙醇(3ml)。加入Pd/碳(40mg)並將反應物在氫氣(氣球壓力)下攪拌16小時。將反應混合物通過硅藻土過濾。硅藻土墊用乙醇洗滌並將合併的有機餾分真空濃縮以得到橙色油狀的所需產物(210mg，100%產率)。LCMS純度89M，m/z210[M++H]+。苯胺無需進一步純化便可用於下一階段。階段3:偶聯到樹脂formulaseeoriginaldocumentpage104將辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(8g，7.52mmo1，以0.94mmol/g加載)在DCM/DMF(80ml/80ml)中溶脹。在燒瓶中加入PyBOP(11.8g，22.6mmol)和二異丙基乙胺(13.1ml，75.2mmol)，然後加入4-(3-氨基-苯氧基)-丁酸甲酯(4.73g，22.6mmol)。將反應物室溫振蕩72小時然後進行標準洗滌和乾燥。階段4:酯水解將階段3的樹脂(9.5g)懸浮於THF/MeOH(34ml/34ml)。加入NaOH(1.4M，水溶液，34ml)並將反應物室溫振蕩16小時。樹脂用標準洗滌過程洗滌，然後空氣乾燥。階段5:偶聯胺基酸酯將階段4的樹脂(2.Ig)懸浮於DCM/DMF(20ml/20ml)。依次加入PyBOP(3.1g，5.92mmo1)、N-苯基甘氨酸環戊酯(2.4g，5.92mmol)和二異丙基乙胺(3.4ml，19.7mmo1)並將反應物室溫振蕩72小時。對樹脂進行標準洗滌並乾燥。階段6:(S)-H-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苯氧基]-丁醯氨基卜苯基-乙酸環戊酯(92)92將階段5的結合樹脂的環戊酯(l.lg)與2e/。TFA/DCM(10ml)—起振蕩10分鐘，然後過濾樹脂並在室溫減壓蒸發溶劑。重複該過程(3次)，合併的粗產物通過製備型HPLC純化以得到化合物(92)(114mg)。LCMS純度99%,m/z568[TvT+H]+，^NMR(400麗z，MeOD)，S:1.40(4H，m，2xCH2)，1.45-1.90(13H，m，烷基)，2.10(4H，m，2xCH2)，2.40(2H，t，CH2)，2.50(2H，m，CH2)，4.00(2H,m，CH2)，5.15(1H，m，)，5.40(1H，s，NHCHCO)，6.65(1H，m，Ar)，7.15(1H，m，Ar)，7.20(1H，t，Ar)，7.30(1H，s，Ar)，7.40(5H，s，Ar)。階段7:(S)-(4-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苯氧基]-丁醯氨基卜苯基-乙酸(93)formulaseeoriginaldocumentpage106將階段6環戊酯樹脂(500mg)懸浮於THF(15ml)。在懸浮液加入NaOH(1.4M水溶液，1.6ml)並將反應物室溫振蕩16小時。除去濾液，將樹脂洗滌並乾燥，然後切除。與2。/。TFA/DCM(5ml)—起振蕩IO分鐘以進行有效切除，然後過濾樹脂並在室溫減壓蒸發溶劑。重複該過程(3次)，合併的粗產物通過製備型HPLC純化以得到化合物(93)(62mg)。LCMS純度99%,m/z500[M^H]+，'HNMR(400固z，MeOD)，5:1.40(4H，m，2xCH2),1.60-1.80(4H，m，烷基)，2.10(4H，m，2><CH2)，2.40(2H，t，CH2)，2.50(2H，t，CH2)，4.00(2H，m，CH2)，5.45(1H,s，NHCgCO),6.65(1H，d，Ar)，7.10(1H，m，Ar)，7.20(1H't，Ar)'7.25(1H，s，Ar)，7.30-7.45(5H，m，Ar)。合成94和95formulaseeoriginaldocumentpage106階段l:形成氯甲酸3-硝基-苄基酯在3-硝基苄醇(10g，65mmol)的二嗯垸(無水，100ml)溶液中加入氯甲酸三氯甲酯(9.47ml，78mmol)。反應物在氮氣下於75"C加熱16小時。蒸發溶劑，將殘餘物重懸於二嚼烷並蒸發。重複該過程(3次)。粗製氯甲酸酯無需進一步純化便可用於下一階段。階段2:(S)-2-(3-硝基-苄氧基羰基氨基)-3-苯基-丙酸環戊酯將L-Phe-環戊酯的TsOH鹽(9.42g，23mmol)懸浮於DCM(40ml)。加入三乙胺(6.5ml，47mmol)並將反應物室溫攪拌5分鐘。將溶於DCM(10ml)的階段1的氯甲酸酯(5g，23mol)逐滴加入反應混合物並冷卻(冰浴)。將反應物室溫攪拌16小時。除去溶劑並將殘餘物溶於EtOAc(100ml)，用水(50mlx3)洗滌並乾燥(Na2SO4)，然後真空濃縮。粗材料通過層析(EtOAc凍垸，l:9)純化以得到所需的氨基甲酸酯(6.4g，67%產率)。m/z413[MVh;T階段3:(S)-2-(3-氨基-苄氧基羰基氨基)-3-苯基-丙酸環戊酯將階段2的硝基氨基甲酸酯(6.4g，15.5mmol)溶於乙醇(64ml)。加入二水合氯化錫(17.5g，77mmol)然後將反應物室溫攪拌16小時。將溶劑蒸發並將殘餘物溶於EtOAc(60ml)。加入飽和酒石酸鈉鉀溶液(60ml)，然後加入加入飽和碳酸氫鈉溶液(120ml)。將此雙相溶液攪拌15分鐘。分離有機層並用EtOAc(60mlxl)萃取水相。將有機層合併，乾燥並蒸發溶劑以得到粗產物，粗產物通過層析(EtOAc:庚垸1:3—1:1)純化。分離所需產物(3.5g,59%產率)。LCMS純度100。/。，m/z383[VT+H;T。階段4:偶聯到樹脂將辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(2.0g，1.88mmo1，以0.94mmol/g加載)在DMF(20ml)中溶脹。加入PyBOP(2.93g，5.64mmol)和二異丙基乙胺(3.25ml，18.8mmo1)。加入溶於DCM(20ml)的階段3的苯胺基氨基甲酸酯(1.8g，4.7mmol)並將反應物振蕩4天，然後除去濾液，對樹脂進行標準洗滌並空氣乾燥。階段5:(S)-2-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-節氧基羰基氨基]-3-苯基-丙酸環戊酯(94)94將階段4的結合樹脂的環戊酯(2g)在2。/。TFA/DCM(15ml)中振蕩10分鐘，然後過濾樹脂並在室溫下減壓蒸發溶劑。重複該過程(3次)，合併的粗產物通過製備型HPLC純化以得到化合物(94)。LCMS純度95%,m/z554[IVT+H],!HNMR(400MHz，MeOD)，S:1.30(4H，m，2xCH2)，1.40-1.卯(13H,m，烷基)，2.00(2H，t，CH2)，2.30(2H，t，CH2)，2.90(2H，ddd，CH2)，3.80(1H，m)，4.25(1H,dd，NHCgCO)，4.90(2H，s，CH2)，5.05(IH，m)，5.35(1H，m)，6.95(1H，d，Ar)，7.05-7.25(6H，m，Ar)，7.35-7.75(2H，m，Ar)。階段6:(S)-2-[3-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苄氧基羰基氨基]3-苯基-丙酸(95)95將化合物(94)(100mg，0.18mmol)溶於THF(lml)並加入2MNaOH(lml)。將反應瓶振蕩4小時，然後用氮氣氣流除去THF。水性殘餘物通過製備型HPLC純化以得到化合物(95)(62mg)。LCMS純度95%，m/z486[M^H]+，&NMR(400固z，MeOD)，5:1.35(4H，m，2><CH2)，1.55-1.75(4H，m，烷基)，2.10(2H，t，CH2)，2.35(2H，t，CH2)，2.95(2H，dd，CH)，3.20(1H，dd，CH)，4.45(1H，dd，NHCgCO)，5.00(2H，s，CH2)，7.05(1H，d，Ar)，7.20-7.35(6H,m，Ar)，7.55(2H，m,Ar)。合成化合物(96)和化合物(97)R=環戊基96R=H97階段1:(S)-7-硝基-l，2,3，4-四氫-異喹啉-3-羧酸按照TettLetts42，2001，3507的描述製備。階段2:(S)-7-硝基-3,4-二氫-lH-異喹啉-2，3-二羧酸-2-叔丁酯將(S)-7-硝基-l,2,3,4-四氫-異喹啉-3-羧酸(7g，31.5mmol)溶於THF:7_K(1:1,350ml)。加入K2C03(5.2g，37mmol)，然後加入boc酸酐(13.7g，63mmol)並將溶液在4(TC加熱1小時。通過蒸發除去THF，將含水層調至pH-7，然後用EtOAc萃取。有機層用0.1MHC1(X3)洗滌並用Na2S04乾燥，然後真空濃縮。柱層析(EtOAc:庚垸2:3—EtOAc)後得到所需N-保護的產物(7.5g，74%)，LCMS純度92。/。，未觀察到分子離子階段3:(S)-3-((S)-l-環戊氧基羰基-3-甲基-丁基氨甲醯基)-7-硝基-3,4-二氫-lH-異喹啉-2-羧酸叔丁酯將(S)-7-硝基-3,4-二氫-lH-異喹啉-2，3-二羧酸-2-叔丁酯(2.5g，7.76mmol)溶於DCM(100ml)。加入HOBt(1.16g，8.53mmo1)，加入L-亮氨酸環戊酯(3.19g，8.53mmo1)，然後加入三乙胺(2.38ml，n.lmmol)。加入EDCI.HC1(1.46g，8.5mmol)並將反應物室溫攪拌16小時。在反應物中加入DCM(100ml)，有機層用水(3x300ml)洗滌，用Na2SO4乾燥並在真空下除去溶劑。粗產物通過層析(EtOAc:庚烷1:2—EtOAc)純化以得到所需產物3.14g(82%產率)，LCMS純度100%,m/z504[IVT+Hf階段4:(S)-7-氨基-3-((S)-l-環戊氧基羰基-3-甲基-丁基氨甲醯基)-3,4-二氫-lH-異喹啉-2-羧酸叔丁酯formulaseeoriginaldocumentpage110將(3)-3-((3)-1-環戊氧基羰基-3-甲基-丁基氨甲醯基)-7-硝基-3,4-二氫-lH-異喹啉-2-羧酸叔丁酯(3.14§，6.24mmol)和Pd/碳(0.4g)懸浮於EtOAc(20ml)。將反應物在氫氣(氣球壓力)下攪拌16小時。溶液通過硅藻土墊過濾並除去溶劑。粗產物(3.04g)無需進一步純化便可用於下一步驟。LCMS純度83。/。，m/z474[1Vf+H]十階段5:偶聯到樹脂將辛二酸衍生的羥胺2-氯三苯甲基樹脂(2,2g，以0.94mmol/g加載)在DCM/DMF(l:l，80ml)中溶脹。加入PyBOP(3.20g，6.15mmol)和二異丙基乙胺(3.54ml，20.7mmo1)。加入溶解在DMF(40ml)的階段3的苯胺基醯胺(3.04g，6.43mmol)並將反應物振蕩3天，然後除去濾液，對樹脂進行標準洗滌並空氣乾燥。階段6:(S)-2-([(S)-7-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-l,2,3,4-四氫-異喹啉-3-羰基]-氨基}-4-甲基-戊酸環戊酯(96)formulaseeoriginaldocumentpage110將階段5的結合樹脂的環戊酯(600mg)與2%TFA/DCM(8ml)—起振蕩30分鐘，然後濾去樹脂並在室溫減壓蒸發溶劑。粗產物通過製備型HPLC純化以得到(8)-2-{[(8)-7-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-1,2，3，4-四氫-異喹啉-3-羰基]-氨基}-4-甲基-戊酸環戊酯(17.5mg)。除了切除樹脂外，還除去boc基團。LCMS純度98。/。，m/z545PvT+H]+，'HNMR(400顧z，MeOD)，5:0.85-0.88(6H，2xd，J=6.4Hz，J=6.5Hz，2xCH3)，1.30(4H，m，烷基)，1.50-1.65(13H，m，烷基)，1.80(2H，m，CH2)，1.95(2H，t，CH2)，2.25(2H，t，CH2),3.00(1H，m，CH)，3.25(IH，m，CH)，4.10(1H，m，CH)，4.25(2H，s，CH2)，4.29(1H，m，CH)，5.10(1H，m，CH)，7.11(IH，d,J=8.4Hz'Ar)，7.25(1H,d，J=8.3Hz，Ar)，7,55(2H，m，Ar)。階段7:(S)-2-U(S)-7-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-l，2,3，4-四氫-異喹啉-3-羰基]-氨基卜4-甲基-戊酸(96)formulaseeoriginaldocumentpage111將階段5的環戊酯樹脂(1.55g)懸浮於THF/MeOH(10ml/10ml)。在懸浮液中加入NaOH(1.4M水溶液，5ml)並將反應物室溫振蕩16小時。除去濾液，將樹脂洗滌(標準洗滌)並乾燥，然後切除。與2。/。TFA/DCM(8ml)—起振蕩30分鐘以進行有效切除(600mg樹脂)，然後過濾樹脂並在室溫減壓蒸發溶劑。粗產物通過製備型HPLC純化以得到化合物(97)(73.4mg)。除了切除樹脂外，還除去boc基團。LCMS純度％%,m/z477pvT+H]+，'HNMR(400羅z，MeOD)，5:0.98-1.02(6H，2xd，J=6Hz,J=6.1Hz，2xCH3)，1.40(4H，m，烷基)，1.60-1.80(7H，m，烷基)，2.10(2H，t,J=7.4Hz，CH2)，2.39(2H，t，7.6Hz，CH2)，3.15(1H，dd，J=12.5Hz，J=16.6Hz，CH)，3.45(1H，dd，J=4.9Hz，J=17Hz，CH)，4.00(1H，s，CH)，4.20(1H，dd，J=4.7Hz，J=12.2Hz，CH)，4.40(2H，m，CH2)，4.55(1H，dd，J=4.7Hz，J=10Hz，CH)，7.25(1H，d，J=8.4Hz，Ar)，7.25(1H，d，J=8Hz，Ar)，7.55(1H，J=7Hz，Ar)。合成化合物(98)和化合物(99)丫mformulaseeoriginaldocumentpage112階段1:(S)-4-甲基-2-(4-硝基-苯甲醯氨基)-戊酸環戊酯將L-亮氨酸環戊酯的TsOH鹽(7.98g，21.51mmol)溶於THF(40ml)並加入三乙胺(6ml，21.5mmo1)。分批加入4-硝基苯甲醯氯(4g，21.5mmol)並用冰浴冷卻。將反應物室溫攪拌16小時然後蒸發至幹。將殘餘物溶於DCM(100ml)並用飽和碳酸氫鈉(3xl00ml)、1MHC1(3xl00ml)和鹽水洗滌，乾燥(Na2S04),並在真空下除去溶劑以得到5.25g所需產物(70%產率)，該產物無需進一步純化便可用於下一步驟，LCMS純度100%，m/z349[M^Hf階段2:(S)-2-(4-氨基-苯甲醯氨基)-4-甲基-戊酸環戊酯將階段1的硝基醯胺(5.25g，15.1mmol)溶於乙醇(100ml)。加入Pd/碳(200mg)並將反應物在氫氣(氣球壓力)下室溫攪拌16小時。將反應混合物通過硅藻土過濾並蒸發以得到3.9g所需的胺醯胺(amineamide)(81。/。產率)，該物質無需進一步純化便可用於下一步驟，LCMS純度100%，m/z319[Nf+Hf階段3:偶聯到樹脂將辛二酸衍生的Wang羥胺樹脂(1.6g，以1.8mmoI/g加載)在DCM(無水，20ml)中溶脹。逐滴加入l-氯-AUV-2-三甲基丙烯胺(1.15ml，8.64mmol)，然後室溫振蕩1小時。加入(S)-2-(4-氨基-苯甲醯氨基)-4-甲基-戊酸環戊酯(2.75g，8.64mmol)和三乙胺(2.4ml，17.63mmol)並將反應物室溫振蕩16小時。將樹脂洗滌(標準洗滌)並空氣乾燥。階段4:(S)-2-[4-(7-羥基氨甲醯基-庚醯氨基)-苯甲醯氨基]-4-甲基-戊酸環戊酯(98)將階段3的結合樹脂的環戊酯與2%TFA/DCM(10ml)—起振蕩10分鐘，然後過濾樹脂並於室溫減壓蒸發溶劑。重複該過程(3次)，合併的粗產物通過製備型HPLC純化以得到化合物(98)(36mg)。LCMS純度9P/。，m/z490[M++H]+，NMR(400麗z，MeOD)，5:0.80-0.95(6H，2xCH3)，1.25(4H，m，烷基)'1.40-1.85(15H，m，'烷基)，2.00(2H，t，CH2)，2.30(2H，t，CH2)，4.45(1H，m，CH)，5.05(1H，m，CH)，7.60(2H，d，Ar)，7.75(2H，d，Ar)。階段5:(S)-2-[4-(7-羥基氨甲醯基庚醯氨基)-苯甲醯氨基]-4-甲基-戊酸(99)99將化合物(98)(21mg，0.043mmol)溶於THF(lml)並加入2MNaOH(lml)。將反應瓶振蕩16小時，然後在溶液表面用氮氣吹掃以除去THF。水性殘餘物通過製備型HPLC純化以得到化合物(99)(5,2mg)。LCMS純度92%，m/z422[M"+H]+，'HNMR(400畫z，MeOD)，5:0.95-1.05(6H，m，2xCH3)，1.30-1.50(4H，m，烷基)，1.55-1.85(7H，m，烷基)'2.10(2H，t，CH2)，2.40(2H，t，CH2)，4.65(1H，m，CH)，7.65(2H，d，Ar)，7.80(2H，d，Ar)。合成化合物(100)和化合物(101)HR=環戊基100R=H101階段1:5-((E)-2-乙氧基羰基-乙烯基)-lH』引哚-2-羧酸在微波試管中加入5-溴吲哚-2-羧酸(400mg，1.66mmol)和三-0-甲苯基膦(96mg,0.32mmo1)。加入丙烯酸乙酯(0.56ml，5.6mmol)、Et3N(0.92ml，6.6mmol)、乙腈(2.5ml)和Pd(OAc)2(40mg,0.18mmo1)。反應物放置在150W、9CTC的CEM微波中處理30分鐘，斜坡時間(ramptime)為5分鐘。加入EtOAc並通過硅藻土過濾反應混合物。硅藻土墊用DCM洗滌，除去合併的有機組分以得到黃色固體。將該固體重溶於DCM並用飽和碳酸氫鈉萃取。含水層用DCM和二乙醚洗滌。水性鹼性層用2MHC1酸化(pt^5)並將產物萃取入EtOAc。除去溶劑以得到所需產物(370mg，86%產率)。LCMS純度86%，m/z260[Nf+Hf階段2:5-((E)-2-乙氧基羰基-乙烯基)-lH-吲哚-2-羧酸將5-((E)-2-乙氧基羰基-乙烯基)-lH-吲哚-2-羧酸(430mg，1.66mmol)溶於EtOAc(100ml)。加入Pd/碳(100mg)並將反應物在氫氣(氣球壓力)下攪拌18小時。將反應混合物通過硅藻土墊過濾並用EtOAc洗滌。除去溶劑以得到所需產物，該產物無需進一步純化便可用於下一步驟(0.47g)。LCMS純度92%，m/z262|>^+司+階段3:3-{2-[6-(四氫-吡喃-2-基氧基氨甲醯基)-己基氨甲醯基]-舊-吲哚-5-基}-丙酸乙酯將5-((E)-2-乙氧基羰基-乙烯基)-lH-吲哚-2-羧酸(0.427g，1.6mmol)溶於無水DMF(20ml)。加入EDCI.HC1(0.38g，2mmo1)、Et3N(0.59ml，4.3mmol)、HOBt(0.27g，2mmol)和7-氨基庚酸(四氫吡喃-2-基氧基)醯胺*(0.4g，1.6mmo1，溶於20ml無水DMF)並將反應物在氮氣下室溫攪拌16小時。加入水，將反應混合物酸化至pH-6-7(10n/。檸檬酸)並用DCM萃取。有機層用10%檸檬酸和飽和碳酸氫鈉(><2)洗滌。溶劑在真空下除去以得到粗產物，粗產物通過層析(EtOAc:己烷1:2—EtOAc)純化以得到黃色固體狀的所需產物(550mg，69%產率)。LCMS純度93%，m/z488[W+Hf階段4:3-(2-[6-(四氫-妣喃-2-基氧基氨甲醯基)-己基氨甲醯基]-lH-吲哚-5-基)-丙酸將3-{2-[6-(四氫-妣喃-2-基氧基氨甲醯基)-己基氨甲醯基]-1&吲哚-5-基}-丙酸乙酯(550rng，1.13mmol)溶於THF/甲醇(50ml/25ml)。加入1.4MNaOH溶液(50ml)並將反應物室溫攪拌4小時。將溶劑減少至約50%體積，加入1MHCl使pH為6-7。混合物用DCM萃取並用EtOAc進一步萃取。合併的有機層用Na2S04乾燥並在真空下除去溶劑以得到357mg黃色粉末狀的所需產物(69。/。產率)，該產物無需進一步純化便可用於下一步驟。LCMS純度94。/。，m/z460[M"+H;T階段5:(3)-3-苯基-2-(3-{2-[6-(四氫-吡喃-2-基氧基氨甲醯基)-己基-氮甲醯基]-111-吲哚-5-基}-丙醯氨基)-丙酸環戊酯將3-(2-[6-(四氫-吡喃-2-基氧基氨甲醯基)-己基氨甲醯基]-lH-吲哚-5-基卜丙酸(0.357g'0.78mmol)溶於DCM/DMF(20m脂ml)。力口入EDCI.HC1(0.163mg,0.86mmo1)、三乙胺(0.24ml，1.7mmo1)、HOBt(0.116mg，0.88mmol)禾卩L-苯丙氨酸環戊酯的TsOH鹽(0.346mg，0.88mmo1)，並將反應混合物在氮氣下室溫攪拌16小時。減小溶劑體積(約10ml)，加入DCM並用水(x3)洗滌有機層。將有機層乾燥(Na2S04)並除去溶劑以得到所需產物(500mg，95%產率)，該產物無需進一步純化即可使用。LCMS純度77。/。，m/z675[Nf+H]+階段6:(8)-2-{3-[2-(6-羥基氨甲醯基-己基氨甲醯基)-1^吲哚-5-基]-丙醯氨基}-3-苯基-丙酸環戊酯(100)formulaseeoriginaldocumentpage116將(S)-3-苯基-2-(3j2-[6-(四氫-吡喃-2-基氧基氨甲醯基)-己基-氨甲醯基]-lH-吲哚-5-基}-丙醯氨基)-丙酸環戊酯(200mg.0.297mrno1)在TFA/DCM/MeOH(1.5ml/15ml/15ml)中室溫攪拌3.5小時。再加入TFA(0.3ml)並將反應物再攪拌30分鐘。將溶液真空濃縮，重懸於DCM並除去溶劑(x3)。粗材料通過製備型HPLC純化以得到純的化合物(100)(19.3mg)，LCMS純度100%，m/z591[M^H]+，^NMR(4(K)MHz，MeOD)，S:1.27-1.70(16H，m，烷基)，1.97(2H，t，CH2),2.40(2H，t，J=7.84Hz，CH2)，2.76-2.85(4H，m，2xCH2)，3.25(2H，t，J=7Hz，CH2)，4.41(1H，m，麗CHCO，4.95(1H，m，CH)，6.85(1H，s，CH)，6.95(3H，m，Ar)，7.05(3H，m，Ar)，7.20-7.26(2H，s+d,J=8.5Hz，Ar)階段7:(3)-2-{3-[2-(6-羥基氨甲醯基-己基氨甲醯基)-111-吲哚-5-基]-丙醯氨基}-3-苯基-丙酸(lOl)將化合物(100)(80mg,0.14mmol)溶於THF/MeOH(lmV0.5ml)並加入1.4MNaOH(0.5ml)。將反應物室溫攪拌2小時。在溶液表面用氮氣氣流吹掃以除去THF，殘餘物通過製備型HPLC純化以得到化合物(101)(34.9mg)，LCMS純度95%,m/z523[M^H]+，iHNMR(400應z，MeOD)，S:1.35-1.50(4H，m，烷基)，1.60-1.75(4H，m，烷基)，2.15(2H，brt，CH2)，2.55(2H，brt，CH2)，2.95(3H，m，CH+CH2)，3.10(1H，dd，CH)，4.65，(1H，m，NHCHCO)，7.00-7.15(7H，m，Ar)，7.35-7.41(2H，m，Ar)*製備7-氨基庚酸(四氫吡喃-2-基氧基)醯胺階段1:6-(四氫-吡喃-2-基氧基氨甲醯基)-己基]-氨基甲酸9H-芴-9-基甲酯在7-(9H-芴-9-基氧基羰基氨基)庚酸(lg，2.72mmol)的無水DCM/THF(15ml/15ml)溶液中加入EDCI.HCl(627mg，3.27mmo1)、HOBt(442mg，3.27mmol)和O陽(四氫-吡喃-2-基)-羥胺(383mg，3.27mmol)並在氮氣下攪拌48小時。加入EDCI.HC1(260mg，1.36mmol)、HOBt(184mg，1.36mmol)和0隱(四氫-吡喃-2-基)-羥胺(159mg，1.36mmo1)並將反應物繼續攪拌24小時。反應混合物用稀DCM(IOOml)、水(3xl00ml)和鹽水(100ml)洗滌，乾燥(Na2S04)，過濾並真空濃縮。通過層析(MeOH:DCM2:98)純化得到白色固體(1.03g，81%)。階段2:7-氨基-庚酸四氫-吡喃-2-基酯將6-(四氫-吡喃-2-基氧基氨甲醯基)-己基]-氨基甲酸9H-芴-9-基甲酯(300mg，0.644,01)溶於20%呃啶/DCM(30ml)並將反應物攪拌0.5小時。將反應物蒸發至幹，重溶於DCM並蒸發(x3)。層析(MeOH:DCM:NH3)後得到120mg所需產物。LCMS純度98%，m/z245[M++H]+。合成化合物(102)和化合物(103)R=環戊基102R=H103階段l:加載樹脂將Wang羥胺樹脂(3.72g，1.8mmol/g)在DMF(50ml)中溶脹。加入HATU(7.5g，19.7mmo1)、5-硝基-l-苯並噻吩-2-羧酸(3g，13.45mmo，溶於150mlDMF)和二異丙基乙胺(4.65ml，26.7mmol)並將樹脂室溫振蕩4天。將樹脂過濾，用標準洗滌過程洗滌並空氣乾燥。階段2:還原硝基將階段1的樹脂(4.9g，1.8mmol/g)在DMF(200ml)中溶脹並加入二水合氯化錫(19.9g，88mmo1)。將反應物室溫振蕩16小時。將樹脂過濾，用標準洗滌過程洗滌並空氣乾燥。階段3:4-(4-苄氧基羰基甲基-苯氧基)-丁酸甲酯將4-羥基苯基乙酸苄酯(9g，37mmol)溶於DMF(300ml)。加入粉末氫氧化鈉(2.23g,56mmol)和4-溴丁酸甲酯(6.4ml，56mmol)並將反應物在6(TC加熱16小時。在冷卻的反應混合物中加入水並用1MHC1酸化該溶液(pH=5/6)。含水層用EtOAc萃取，有機層用水(x2)洗滌，用Na2S04千燥，過濾並蒸發至幹。層析(EtOAc:庚烷1:2)後獲得所需的二酯(9.56g，75%)LCMS純度90%，m/z343[VT+H]+。階段4:4-(4-羧甲基-苯氧基)-丁酸甲酯將4-(4-苄氧基羰基甲基-苯氧基)-丁酸甲酯(1.4g，4.09mmol)溶於EtOAc(60ml)。加入Pd/碳(100mg)並將反應物在氫氣(氣球壓力)下室溫攪拌16小時。將反應混合物通過硅藻土墊過濾，墊子用EtOAc洗滌。將濾液蒸發至幹以得到白色固體(1.03g，100%產率)。LCMS純度93%，m/z253[1Vf+H〗+。階段5:偶聯到樹脂將階段2的樹脂(0.18g，1.8mmol/g)在DMF(5ml)中溶脹。加入HATU(0.37g，0.96mmo1)、4-(4-羧甲基-苯氧基)-丁酸甲酯(0.247g，0.96mmo1，溶於10mlDMF)禾口二異丙胺(0.56ml，3.3mmol)並將反應物室溫振蕩16小時。過濾反應物，樹脂用標準洗滌過程洗滌並空氣乾燥。階段6:酯水解將階段5的甲酯(280mg，1.8mmol/g)溶於THF/MeOH(4ml/4ml)並加入1.4MNaOH(8ml)。將反應物室溫振蕩16小時。將樹脂過濾，用標準洗滌過程洗滌並空氣乾燥。階段7:胺基酸偶聯formulaseeoriginaldocumentpage120將階段6的樹脂(1.6g，1.8mmol/g)在無水DMF(120ml)中溶脹。加入HATU(3.3g，8.6mmo1)、L-苯丙氨酸環戊酯的TsOH鹽(3.4g，8.6mmol)和二異丙胺(5ml，2.9mmo1)並將反應物室溫振蕩16小時。過濾反應物，樹脂用標準洗滌過程洗漆並空氣乾燥。階段8:(S)-2-(4-(4-[(2-羥基氨甲醯基-苯並[b]噻吩-5-基氨甲醯基)-甲基]-苯氧基卜丁醯氨基)-3-苯基-丙酸環戊酯(102)formulaseeoriginaldocumentpage120將階段7的結合樹脂的環戊酯與2%TFA/DCM(10ml)—起振蕩10分鐘，然後濾去樹脂並在室溫下減壓蒸發溶劑。重複該過程(3次)，合併的粗產物通過製備型HPLC純化以得到化合物(102)(22.5mg)。LCMS純度99%，m/z644[N^+H]+，'HNMR(400MHz，MeOD)，S:1.45-1.80(6H，m，烷基)，1.95(2H，pent,CH2)，2.34(2H，t，J=7.3Hz,CH2)，2.90(1H，dd，CH)，3.04(1H，dd，CH)，3.62(2H，s，CH2)，3.86，(2H，m,CH2)，4.55(1H，m，NHCgCO)，5.07(1H，brs，CH)，6.83(2H，d，J=8.3Hz，Ar)，7.14-7.18(5H，m，Ar)，7.25(2H，d，J=8Hz，Ar)，7.47(IH，d，J=9Hz，Ar)，7.73(1H，s，Ar)，7.81(1H，d，J=8.8Hz)，8.25(1H，s，Ar)階段9:(S)-2-(4-(4-[(2-羥基氨甲醯基-苯並[b]噻吩-5-基氨甲醯基)-甲基]-苯氧基)-丁醯氨基)-3-苯基-丙酸formulaseeoriginaldocumentpage120(103)將階段7環戊酯樹脂(200mg)在THF/MeOH(2ml/2ml)中溶脹並加入1.4MNaOH(2ml)。將反應物室溫振蕩16小時。將樹脂過濾並用標準洗滌過程洗滌。將結合樹脂的羧酸與2%TFA/DCM(3ml)—起振蕩10分鐘，然後濾去樹脂並在室溫下減壓蒸發溶劑。重複該過程(3次)，合併的粗產物通過製備型HPLC純化以得到化合物(103)(33.7mg)。LCMS純度88%，m/z576[M++H]+，'HNMR(400MHz，d6醫DMSO),S:1.93(2H，m，CH2)，2.30(2H，m，CH2)，2.91(1H，dd，J=9.9Hz，J=13.8Hz，CH)，3.13(1H，dd，J=4.8Hz，J=13.9Hz，CH)，3.67(2H，s，CH2)，3.91，(2H,m，CH2)，4.50(1H，m，NHCgCO),6.92(2H，d，J=8.7Hz，Ar)，7.24-7.34(7H，m，Ar)，7.61(1H，m)，7.92(1H,brs，Ar)，8.00(1H，d，J=8.8Hz,Ar)，8.31(1H，d，J=8.1Hz，Ar)，8.39(1H，s)，9.36(1H，brs)，10.36(1H，s)，11.52(IH，s)，12.76(1H，brs)合成圖7的化合物，以化合物(104)和化合物(105)為例OR-環戊基113U5R=H114oR=環戊基116R=環戊基118R-H117R=H119步驟l:4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-苯甲酸0將4-氨基甲基苄醇(1.0g，6.60mmol)在THF(10mL)和水(10mL)的混合物中調成漿液。加入飽和碳酸氫鈉溶液直到溶液的pH值>pH9。將混合物冷卻至0'C並加入二碳酸二叔丁酯(2.89g，13.23mmol)。將反應物攪拌過夜然後在真空下除去THF。含水混合物用EtOAc(20mL)萃取，然後加入INHC1酸化至pH3。再用EtOAc(2x10mL傳取，將有機層合併，乾燥(MgSO4)並蒸發至幹以得到所需產物(1.60g，97%)。m/z252[IVT+Hf步驟2:(4-羥甲基-苄基)-氨基甲酸叔丁酯將LiAU(227mg，5.97mmol)在THF(5mL)和二嗯垸(5mL)的混合物中調成漿液並在氮氣下冷卻至0°C。將4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-苯甲酸溶於THF(5mL)和二嚼烷(5mL)的混合物並用15分鐘逐滴加入到所述的已冷卻的溶液中。使反應混合物回復室溫並攪拌16小時。在反應混合物中加水(lmL)，然後通過硅藻土過濾。將濾液蒸發至幹並使殘餘物在EtOAc(25mL)和水(25mL)之間分配。含水層用EtOAC(2x25mL)萃取，將有機層合併，乾燥(Na2SO4)並蒸發至幹以得到所需產物(460mg，100%)。m/z260[M^Naf步驟3:(4-甲醯-苄基)-氨基甲酸叔丁酯將(4-羥甲基-苄基)-氨基甲酸叔丁酯(480mg，0.71mmol)溶於DCM(3mL)並冷卻至-78。C(乾冰/丙酮)。將Dess陽Martin氧化齊'J(Dess-Martinperiodinane)(331mg，0.78mmol)加入反應物中，使其回復室溫並攪拌3小時。加入飽和碳酸氫鈉和亞硫酸鈉的l:l溶液(20mL)並將反應混合物劇烈攪拌15分鐘。將有機層分離，用飽和碳酸氫鈉(10mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)並蒸發至幹以得到所需化合物(480mg，100%)。m/z258[^T+Na〗十步驟4:(S)-2-[4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-苄基氨基]-3-苯基-丙酸環戊酯將(4-甲醯-苄基)-氨基甲酸叔丁酯(200mg，0.85mmol)溶於DCE(10mL)並在其中加入苯丙氨酸環戊酯(214mg，0.94mmo1)。將反應物室溫攪拌15分鐘。加入三乙醯氧基硼氫化鈉(538mg，2.55mmol)和乙酸(60uL)並將反應物再攪拌1小時。加入飽和碳酸氫鈉(IOml)並用DCM(20mL)稀釋該溶液。將有機層分離並濃縮以得到所需產物，該產物無需進一步純化便可用於下一步驟。111/2453[1^+11]+步驟5:(S)-2-(4-氨基甲基-節基氨基)-3-苯基-丙酸環戊酯用4MHC1的二嚼烷(lmL，0.25mmol)溶液處理(S)-2-[4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-苄基氨基]-3-苯基-丙酸環戊酯並室溫攪拌1小時。將混合物蒸發至幹並在EtOAc(20mL)和水(20mL)之間分配。在含水層中加入飽和碳酸氫鈉(20mL)然後用EtOAc(3x20mL)萃取。將有機層合併，乾燥(Na2S04)並蒸發至幹以得到所需產物(263mg，2個步驟79°/。)。m/z353[M^Hf步驟6:(3)-2-[4-({[2-(1-異丁氧基-乙氧基氨甲醯基)-苯並[1)]噻吩-6-基甲基]-氨基}-甲基)-苄基氨基]-3-苯基-丙酸環戊酯在氮氣下將6-甲醯-苯並[b]噻吩-2-羧酸(l-異丁氧基-乙氧基)醯胺(方案7)(220mg，0.68mmol)和(S)-2-(4-氨基甲基-苄基氨基)-3-苯基-丙酸環戊酯(263mg，0.75mmol)溶於DCE(10mL)。加入三乙醯氧基硼氫化鈉(430mg，2.04mmoI)和乙酸(50pL)並將反應物室溫攪拌3小時。加入碳酸氫鈉(20mL)並用二氯甲烷(3x50mL)萃取反應混合物。將有機層合併並濃縮。殘餘物通過柱層析(50。/。-100。/。EtOAc/庚烷)純化以得到保護的化合物(80mg，21%)。m/z658Of+H^步驟7:(S)-2-(4-([(2-羥基氨甲醯基-苯並[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基卜苄基氨基)-3-苯基-丙酸環戊酯(104)將(S)-2-[4-(([2-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲醯基)-苯並[b]噻吩-6-基甲基]-氨基)-甲基)-苄基氨基]-3-苯基-丙酸環戊酯溶於DCM(2mL)和MeOH(2mL)並用TFA(1mL)處理。將混合物室溫攪拌l小時，然後濃縮至幹並加入DCM(5mL)和庚烷(5mL)。混合物蒸發至幹。該過程重複三次以得到油狀化合物(104)(20mg，59%)。LCMS純度95%，m/z558[M^H]十，1HNMR(300MHz，MeOD)，5:1.25-1.91(8H，m，4xCH2)，3.12-3.47(2H，m，CH2)，4.26(1H，m，CH)，4.33(2H，d，J-5.5Hz，CH2)，4.36(2H，s，CH2)，4.43(1H，s，CH2)，5.16(1H，s，CH)，5.13(1H，m，CH)，7.25-7.37(6H，m,ArH)，7.54-7.63(4H，m，ArH)'7.94(2H，m，ArH)，8.09(1H，s，ArH)。步驟8:(S)-2-[4-(U2-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲醯基)-苯並[b]噻吩-6-基甲基]-氨基卜甲基)-苄基氨基]-3-苯基-丙酸將(S)-2-[4-(([2-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲醯基)-苯並[b]噻吩-6-基甲基]-氨基》-甲基)-苄基氨基]-3-苯基-丙酸環戊酯(40mg，0.06mmol)溶於THF(2mL)和水(2mL)。加入LiOH(8mg，0.30mmol)並將反應混合物在5(TC加熱36小時。蒸發除去THF，將殘餘物在水(IOmL)和EtOAc(10mL)之間分配。分離含水層並加入1MHC1將pH調至3。用EtOAc(3x20mL)萃取，將有機層合併並蒸發至幹。步驟9:(S)-2-(4-U(2-羥基氨甲醯基-苯並[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基卜節基氨基)-3-苯基-丙酸(105)將(S)-2-[4-U[2-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲醯基)-苯並[b]噻吩-6-基甲基]-氨基)-甲基)-苄基氨基]-3-苯基-丙酸溶於MeOH(2mL)和THF(2mL)。在混合物中加入TFA(lmL)並室溫攪拌1小時。將反應混合物濃縮至幹並加入DCM(5mL)和庚烷(5mL)。將混合物蒸發至幹。該過程重複三次以得到粉紅色固體狀的化合物(105)(17mg，57%)。LCMS純度90%，m/z4卯[Nf+H]+，1HN證(300MHz，MeOD)，5:3.33(2H，m，CH2)，4.19(1H，m，CH2)，4.29(2H，s，CH2)，4.35(2H，s，CH2)，4.42(2H，s，CH2)，7.29-7.39(5H，m，ArH)，7.54-7.72(5H，m，ArH)，7.88(1H，s，ArH)，8.00(1H，dJ=8.0Hz，ArH)，8.08(1H，s，ArH)以下化合物按照為化合物(104)和化合物(105)描述的方法製備(8)-2-(4-{[(2-羥基氨甲醯基-苯並[1)噻吩-6-基甲基)-氨基-甲基}-苄基氨基)-3-(4-羥基-苯基)-丙酸環戊酯(106)LCMS純度98%,m/z574OvT+H]+，'HNMR(300MHz，MeOD)，S:1.30-1.87(8H，m，4xCH2)，2.97-3.35(2H，m，CH2)，4.17(1H，m，CH)，4.31(2H，d，J=5.4Hz，CH2)，4.36(2H，s，CH2)，4.42(2H，s，CH2)，5.11-5.16(1H，m，CH)，6.77(2H，d，J=8.4Hz，Ar-H)，7.06(2H，d，J=8.4Hz，Ar-H)，7,54-7.65(5H，m，Ar-H)，7.87(1H，s，Ar-H)，7.99(1H，d，J=8.4Hz，Ar-H)，8.08(1H，s，Ar陽H)(8)-2-(4-{[(2-羥基氨甲醯基-苯並[1)噻吩-6-基甲基)-氨萄-甲基}-苄基氨基)-3-(4-羥基-苯基)-丙酸(107)LCMS純度90%，m/z505[ivT+H]+，iHNMR(300MHz，MeOD)，S:3.09-3.27(2H，m，CH2)，4.03(1H，m，CH)，4.24(2H，s，CH2),4.34(2H，s，CH2)，4.42(2H，s，CH2)，6.76(2H，dJ^8.3Hz，Ar-H)，7.11(2H，dJ-8.5Hz，Ar-H)，7.56-7.59(5H，m，Ar-H)，7.89(1H，s，Ar-H),8.02(1H，d，J=8.4Hz，Ar-H)，8.08(1H，s，Ar隱H)(S)-3-叔丁氧基-2-(4-U(2-羥基氨甲醯基-苯並[b]噻吩-6-基甲萄-氨萄-甲基卜苄基氨基)-丁酸環戊酯(108)LCMS純度99。/。，m/z568[M++H]+，]HNMR(300MHz，MeOD)，S:1.20(9H，s，3xCH3)，1.29(3H，d，J=6.6Hz，CH3)，1.67-1.94(8H，m，4xCH2)，3.75(1H，d，J=2.7Hz，CH)，4.29-4.32(1H，m，CH)，4.36(4H，d，J=2.4Hz，2xCH2)，4.43(2H，s，CH2)，5.22-5.25(1H，m，CH)，7.54-7.65(5H，m，Ar-H)，7.88(1H，s，Ar-H)，8.01(1H，d，J=8.1Hz,Ar陽H)，8.08(1H，s，Ar-H)(S)-3-叔丁氧基-2-(4-U(2-羥基氨甲醯基-苯並[bj噻吩-6-基甲萄-氨萄-甲基卜苄基氨基)-丙酸環戊酯(109)LCMS純度95%，m/z554[Ivf+H]十，JHNMR(300MHz，MeOD)，5:1.23(9H，s，3xCH3)，1.67-1.98(8H，m，4>1噻吩-6-基甲基)-氨基卜甲基}-苄基)-吡咯烷-2-羧酸(U2)LCMS純度100。/。，m/z440[M++H]+，!H雨R(300顧z，MeOD)，S:1.96-2.09(2H，m，CH2)，2.14-2.23(2H，m，CH2)，2.52-2.65(1H，m，CH2)，3.56-3.67(1H，m，CH2)，4.19-4.25(1H，m，CH),4.36-4.57(6H，m，3xCH2)，7.55-7.64(5H，m，Ar-H)，7.88(1H，s，Ar-H)，7.99-8.01(1H,m，Ar-H)，8.09(1H，s，Ar-H)(R)-3-叔丁硫基-2-(H[(2-羥基氨甲醯基-苯並[bl噻吩-6-基甲基)-氨萄-甲基p苄基氨基)-丙酸環戊酯(113)LCMS純度97。/。，m/z570[M+H]+，'H蘭R(300MHz，MeOD)，5:1.36(9H，s)，1.79(8H，m)，3.16(2H，d，5.3Hz)，4.25(2H，t，J=5.6Hz)，4.31(2H，s)，4.36(2H,s)，4.42(2H，s)，5.34(m，m)，7.56(1H，d，J=8.1Hz)，7.62(4H，s)，7.89(1H，s)，8.09(1H，s)，8.51(m，d，J=8.1Hz)，(R)-3-叔丁硫基-2-(4-U(2-羥基氨甲醯基-苯並[bl噻吩-6-基甲基)-氨萄-甲基)-苄基氨基)-丙酸(U4)LCMS純度97。/。，m/z502[M]+，'H畫R(300固z，MeOD),5:1.35(9H,s，3xCH3)，3.09(2H，m，CH2)，3.22(2H，m，CH2)，3.83(1H，t，J=8.8Hz，CH)，4.34(2H，s，CH2)，4.42(2H，s，CH2),7.57(1H，d，J=10.0Hz，ArH)，7.62(4H，s，ArHx4)，7.89(1H，s，ArH)，8.02(1H，d，J=8.1Hz，ArH)，8.09(1H，s，ArH)。(S)-2-(H(2-羥基氨甲醯基-苯並Ib噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基}-苄基氨基)-3，3-二甲基-丁酸環戊酯(115)LCMS純度94。/。，m/z546[M+Na]+，'HNMR(300MHz，MeOD)，S:1.08(9H，s，3xCH3)，1.80(8H，m，4>噻吩-6-基甲基)-氨基-甲基}-節基氨基)-乙酸(U7)LCMS純度100Q/。，m/z482[M+H]+，NMR(300MHz，MeOD),5:0.72-1.60(IOH，m，9xCH2)，3.89(1H，m,CH)，4.11(3H，m，CH)，4.23(2H，s，CH2)，4.31(2H，s，CH2)，7.48(5H，m，ArH)，7.76(1H，s，CH)，7.88(1H，dJ=11.6Hz，ArH)，7.98(1H，s，ArH)。(S)-2-(4-U(2-羥基氨甲醯基-苯並[bl噻吩-6-基甲基)-氨基卜甲基)-苄基氨基)-4-甲基-戊酸環戊酯(122)LCMS純度940/。，m/z524[M++H]+，1HNMR(300MHz，MeOD)，S:1.01(6H，s，2xCH3)，1.28(1H，m，CH)，1.56-1.95(IOH，m，4xCH2，CH2)，4.00-4.43(6H，m，3xCH2)，4.88(m，m，CH)，5.36(1H，brs，CH)，7.47-7.62(5H，m，ArH)，7.94(2H，t，ArH)，8.08(1H，s，ArH)。(S)-2-(4-U(2-羥基氨甲醯基-苯並[bl噻吩-6-基甲基)-氨基-甲基)-苄基氨基)-4-甲基-戊酸(123)LCMS純度980/0，m/z456pvT+H]+'lHNMR(300畫z'MeOD)，5:1.00(6H，m，2xCH3)，1.86(2H，m,CH2)，3.86(1H，m，CH)，4.29(2H，s，CH2)，4.36(2H，s，CH2)，4.43(2H，s，CH2)，7.56(1H，m,ArH)，7.89(1H，s，CH)，8.02(1H，dJ=8.2Hz，ArH)，8.09(1H，s，ArH)。(S)-(H[(2-羥基氨甲醯基-苯並[b噻吩-6-基甲基)-氨基-甲基)-節基氨基)-苯基-乙酸環戊酯(124)LCMS純度卯。/。，m/z544[Nf+H]+，1HNMR(300MHz，MeOD)，S:1.31-1.91(IOH，m，4xCH2，CH2)，4.22(2H，ddJ=13.1Hz，CH2)，4.35(2H，s，CH2)，4.42(1H，s，CH2)，5.16(1H，s，CH)，5.30(1H，m，CH)，7.47-7.62(9H，m，ArH)，7.94(2H，m，ArH),8.08(1H，s,ArH)。(S)-(4-U(2-羥基氨甲醯基-苯並[bl噻吩-6-基甲基)-氨萄-甲基p苄基氨基)-苯基-乙酸(125)LCMS純度1000/0，m/z476[^T+H]+，lHN魔(300麗z，MeOD)，5:4.08-4.24(3H，m，CH，CH2)，4.35(2H，s，CH2)，4.43(1H，s，CH2)，7.46-7.75(IOH，m，ArH)，7.89(1H，s，ArH),8.01(1H，dJ=7.9Hz,ArH)，8.09(1H，s，ArH)以下化合物按照為化合物(104)和化合物(105)描述的方法製備，步驟3和4採用下述可替換方法步驟3b:(4-溴甲基-苄基)-氨基甲酸叔丁酯將N-溴琥珀醯亞胺(5.13g，28.8mmol)溶於DCM(80mL)並冷卻至(TC。製備三苯基膦(7.18g，27.0mmol)的DCM(20mL)溶液並將其加入所述已冷卻的溶液中，然後加入吡啶(l.OmL，1.26mmol)。將步驟2的材料(2.14g，9.0mmol)溶於DCM(20mL)並加入，然後使反應物回復室溫並攪拌16小時。濃縮混合物，殘餘物通過柱層析(50。/。/50。/oEtOAc/庚垸)純化以得到所需化合物(864mg，32%)。m/z301[IvT+Naf步驟4b:(S)-2-[4-(叔丁氧基羰基氨基-甲萄-節基氨萄-丙酸環戊酯將L-丙氨酸環戊酯(463mg,1.41mmo)溶於DMF(9mL)並在其中加入DIPEA(0.74mL，4.24mmol)。將混合物室溫攪拌15分鐘，然後用1小時逐滴加入步驟3b所得材料(212mg，0.706mmol)的DMF(5mL)溶液。然後室溫攪拌反應物16小時，之後用水(50mL)和EtOAc(50mL)稀釋。有機層用鹽水(2x50mL)洗滌，乾燥並濃縮以得到粗材料(0.26g，100%)，其無需進一步純化便可用於下一步驟。m/z377步驟5-9如對化合物(104)和化合物(105)的描述formulaseeoriginaldocumentpage129(S)-2-(4-U(2-羥基氨甲醯基-苯並[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基卜苄基氨基)-丙酸環戊酯(118)LCMS純度95。/。，m/z482[Ivt+H]+，'HNMR(300MHz，MeOD)，S:1.61(3H，d，J=7.2Hz，CH3)，1.71-1.97(8H，m,4><CH2)，4.13(1H，q,J=7.2Hz，CH)，4.30(2H，s，CH2)，4.36(2H，s，CH2)，4.43(2H，s，CH2)，5.33-5.36(1H，m，CH)，7.54-7.63(5H，m，Ar-H)，7.88(1H，s，Ar-H)，8.00(1H，d，J=8.1Hz，Ar-H)，8.08(1H，s，Ar鄰formulaseeoriginaldocumentpage130(S)-2-(4-U(2-羥基氨甲醯基-苯並[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基}-苄基氨基)-丙酸(119)LCMS純度950/0，m/z414[M++H〗+，'HNMR(300MHz，MeOD)，S:1.64(3H，d'J=7.1Hz，CH3)，楊-4.4(lH,m,CH),4.31(2H,s，CH2)，4.36(2H，s，CH2)，4.43(2H，s,CH2)，7,55-7.63(5H，m，Ar-H)，7.88(1H，s，Ar-H)，8.00(1H，d，J=8.1Hz，Ar-H),8.09(1H，s，Ar陽H)以下化合物按照為化合物(118)和化合物(119)描述的過程製備，包括以下替換/額外步驟步驟4b:[4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-苄基氨基]-乙酸環戊酯formulaseeoriginaldocumentpage130過程如步驟4a(採用環戊酯的HC1鹽)產物m/z363[M++H]+步驟4c:[[4-(叔丁氧基羰基氨基-甲萄-節蜀-(9H-莉-9-基甲氧基-羰基)-氨基]-乙formulaseeoriginaldocumentpage130在[4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-苄基氨基]-乙酸環戊酯(0.2g，0.55mmol)和lM酸環戊酯Na2C03(1.1mL，1.1mmol)的DCM(2mL)溶液中邊攪拌和冰浴冷卻邊緩慢加入氯甲酸9-芴基甲基酯(0.14g，0.55mmol)的二噁烷(1.4mL)溶液。將混合物在冰浴中攪拌4小時並在室溫攪拌過夜。將混合物倒入水(卯mL)中並用二乙醚萃取。將有機萃取物合併，乾燥(MgSO4)並蒸發至幹以得到所需產物(0.32g，100%)。1^2607[^+,〗+步驟5a:[(4-氨基甲基-節基)-(9H-芴-9-基甲氧基羰基)-氨基]-乙酸環戊酯過程如步驟5中所述。產物m/z485[M++H]+步驟6a:((9H-芴-9-基甲氧基羰基)-[4-(U2-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲醯基)-苯並[b〗噻吩-6-基甲基]-氨基}-甲基)-苄基]-氨基}-乙酸環戊酯過程如步驟6中所述。產物m/z790[VT+H]+步驟7a:(4-([(2-羥基氨甲醯基-苯並[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基}-苄基氨基)-乙酸環戊酯(120)將{(附-芴-9-基甲氧基羰基)-[4-({[2-(1-異丁氧基-乙氧基氨甲醯基)-苯並[b]噻吩-6-基甲基]-氨基}-甲基)-苄基]-氨基卜乙酸環戊酯(0.11g，0.14mmol)溶於乙腈(3mL)並在其中加入哌啶(1.5mL)。將所得混合物室溫攪拌l小時。將溶劑蒸發至幹並將產物分成2份。對於其中l份將環戊酯水解，而將另一份溶於DCM(1.5mL)並與4MHC1的二嗯烷(1.0mL)溶液一起攪拌2小時。將溶劑蒸發至幹，產物通過製備型HPLC純化以得到所需產物，其為TFA鹽。LCMS純度99°/。，m/z468[Nf+H]+，^NMR(300應z，MeOD)，5:8.09(1H，s，ArH)，8.00(1H，d，J=8.3Hz，ArH)，7.88(1H，s，ArH)，7.54-7.65(5H，m，ArH)，5.31-5.35(1H，m，CH)，4.43(2H，s，CH2)，4.35(2H，s，CH2)，4.31(2H，s，CH2)，3.96(2H，s，CH2)，1.65-1.93(8H，m，4xCH2)步驟9a:(4-U(2-羥基氨甲醯基-苯並[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基卜苄基氨基)-乙酸(m)121過程如步驟9中所述。LCMS純度99。/。，m/z400[M++H]+，'HNMR(300MHz,MeOD)，S:8.09(1H，s，ArH)，8.00(1H，d，J=8.3Hz，ArH)，7.89(1H，s，ArH),7.54-7.62(5H，m，ArH)，4.43(2H，s，CH2)，4.35(2H，s，CH2)，4.32(2H，s，CH2)，3.93(2H，s，CH2)合成圖8的化合物，以化合物(126)和化合物(127)為例R=環戊基126R=環戊基128R=H127R=H129圖8階段l:4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基-環己烷羧酸將溶於40ml二嚼烷和40ml水的反-4-(氨基甲基)環己烷羧酸(lg，6.4mmol)和氫氧化鈉(256mg,6.4mmol)的溶液邊攪拌邊在冰水浴中冷卻。加入二碳酸二叔丁酯(1.39g，6.4mmol)並將混合物室溫攪拌5小時，然後靜置過夜。將溶液真空濃縮並用2NHCI酸化至pH2。酸化的含水層用EtOAc萃取3次。將有機層合併並用鹽水洗滌。有機層通過硫酸鎂乾燥並蒸發至幹。所得產物為白色固體(l.lg，64%產率)。^NMR(300MHz，CDC13)，S:0.86-1.07(2H，m，CH2),1.34-1.53(11H，m，boc和CH2)，1.84(2H，dd，J-13.0，2.3Hz，CH2)，2.05(2H，dd，CH2)，2.18-2.35(1H，m，CHCH2)，2.99(2H，t，J=6.3Hz，CJ^NH)'4.59(1H，br.s，CgCOOH)，II.0(1H，br.s，COOH)。階段2:(4-羥甲基-環己基甲基)-氨基甲酸叔丁酯將氫化鋁鋰(465mg，12.2mmol)懸浮於無水THF(10m)並在氮氣下冷卻至0'C。緩慢加入4-(叔丁氧基-羰基-氨基-甲基-環己烷羧酸(Ug，4.1mmol)的THF和二嗯烷(10ml，l:l)溶液並將混合物室溫攪拌過夜。逐滴加入水以猝滅過量的氫化鋁鋰。過濾並用THF(10ml)和MeOH(10ml)洗滌濾餅。真空濃縮濾液並用1NHCl酸化至pH2。水層用EtOAc萃取兩次。有機層通過硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發至幹以得到964mg產物(97%產率)。'H羅R(300MHz，CDC13)，5:0.81-1.08(4H，m，2><CH2)，1.33-1.60(10H，m，boc和CH)，1.82(4H，d，月.7Hz，2xCH2)，2.98(2H，t'J二6.4Hz，賜NH)，3.46(2H，d，J-6.4Hz，C逸OH)，4.60(1H，br.s，CH)階段3:(4-甲醯-環己基甲基)-氨基甲酸叔丁酯將(4-羥甲基-環己基甲基)-氨基甲酸叔丁酯(965mg，4.0mmol)溶於DCM(20ml)並冷卻至-78。C。將DessMartin試劑(2.52g，6.0mmol)溶於DCM(30ml)並緩慢加入階段2的醇的溶液中。然後將反應混合物室溫攪拌3小時。將所得溶液倒入飽和的NaHC03和Na2S203溶液(l:l，100ml)同時劇烈攪拌。將有機層分離並用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥並蒸發至幹以得到產物(786mg，82%產率)。'HNMR(300MHz，CDC13)，S:0.83-1.01(2H,m，CH2)，1.15-1.24(2H，m，CH2),1.34(9H，s，Boc)，1.75-1.88(2H，m，CH2)，1.90-2.00(2H，m，CH2)，2.05-2.18(1H，m，CH)，2.93(2H，t，7=6.4Hz，Qi^NH),4.53(1H，br.s，C旦CHO)，9.55(1H，s，CHO)階段4:(S)-([4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-環己基甲基]-氨基)-苯基-乙酸環戊酯將(4-甲醯-環己基甲基)-氨基甲酸叔丁酯(3卯mg，1.61!111101)和(3)-氨基-苯基-乙酸環戊酯(394mg，1.8mmol)在DCE(6ml)中室溫攪拌25分鐘。加入乙酸(9.6ul，0.16mmo1)和三乙醯氧基硼氫化鈉(1.0g，4.8mmol)並將所得混合物在室溫下攪拌1小時30分鐘。加入DCM(0m)和飽和NaHCO3溶液(10ml)並分離各相。含水相用EtOAc(2xl0ml)萃取，有機相通過硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發至幹。粗產物通過柱層析(8:2庚烷/EtOAc)純化以得到223mg純的胺(31%產率)。LCMS純度100%,m/z445[Nf+H]+。階段5:(S)-[(4-氨基甲基-環己基甲基)-氨基]-苯基-乙酸環戊酯將(S)-U4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-環己基甲基]-氨基)-苯基-乙酸環戊酯(223mg，0.5mmol)在DCM(4ml)中攪拌，加入TFA(lml)並將混合物室溫攪拌2小時。將溶液真空濃縮，溶解在DCM中，用飽和NaHC03溶液洗滌2次並用飽和鹽水溶液洗滌1次。有機相通過硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發以得到所需的胺，其為黃色油狀物(130mg，75%產率)。LCMS純度100。/。，m/z345[N^+H]+。階段6:(S)-[(4-([(2-羥基氨甲醯基-苯並[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-甲基卜環己基甲基)-氨基]-苯基-乙酸環戊酯(126)將階段5的胺(130mg，0.38mmol)與6-甲醯-苯並[b]噻吩-2-羧酸(l-異丁氧基-乙氧基)醯胺(方案7)(110mg，0.34mmol)的DCE溶液一起室溫攪拌30分鐘。加入乙酸(2.1ul，0.03mmol)和三乙醯氧基硼氫化鈉(218mg，l.Ommol)，所得混合物室溫攪拌過夜。將混合物真空濃縮，溶解在EtOAc中，用飽和NaHCO3溶液(10ml)和鹽水(10ml)洗滌。有機相通過硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發至幹。粗產物(167mg)通過製備型HPLC純化以得到淡粉色固體狀的化合物(126)。LCMS純度86%，m/z550[VT+H]+，約10%羧酸。'HNMR(300MHz，MeOD)，5:1.08(4H,m，2xCH2)，1.76(14H，m，6xCH2禾口2xCH)，2.81(4H，m，2xC腿H)，4.35(2H，s，賜NH)，5.12(1H，s，QJNH)，5.30(1H，m，OCH)，7.51(6H，m，Ar)，7.85(1H，s，Ar)，7.96(1H，d，Ar)，8.08(1H，s，Ar)。合成((S)-[(4-U(2-羥基氨甲醯基-苯並問噻吩-6-基甲基)-氨基j-甲基卜環己基甲基)-氨基1-苯基-乙酸(127)階段1:(SH[4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-環己基甲基]-氨基》-苯基-乙酸叔丁西將(4-甲醯-環己基甲基)-氨基甲酸叔丁酯(899mg，3.7mmol)和(S)-叔丁基苯基甘氨酸酯(850mg，4.1mmol)在DCE(20ml)中攪拌30分鐘。加入乙酸(20ul，0.37mmol)和三乙醯氧基硼氫化鈉(2.37g，11.1mmol)並將反應混合物室溫攪拌3小時。加入DCM(10ml)和飽和NaHCO3溶液(20ml)並將各相分離。水相用EtOAc(20ml)萃取。有機相通過硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮。粗產物(2.4g)用柱層析(7:3庚烷/EtOAe)純化以得到所需產物(385mg，24%產率)。LCMS純度100%，m/z433[VT+H]+。階段2:(SH[4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-環己基甲基]-氨基)-苯基-乙酸叔丁酯formulaseeoriginaldocumentpage136將(S)《4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-環己基甲基]-氨基)-苯基-乙酸叔丁酯(385mg，0.9mmol)在DCM(5ml)中攪拌，加入TFA(2ml)並將混合物室溫攪拌30分鐘。將溶液真空濃縮，溶解在EtOAc(5ml)中，用NaHC03飽和溶液(2x5ml)洗滌兩次並用飽和鹽水溶液(5ml)洗滌1次。有機相通過硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發以得到所需胺，其為黃色油狀物(2卯mg，97%產率)。LCMS純度100M，m/z333[M++H〗+。階段3:(SH[4-(([2-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲醯基)-苯並[b]噻吩-6-基甲基]-氨基V甲基)-環己基甲基]-氨基}-苯基-乙酸叔丁酯將(S)-([4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-環己基甲基]-氨基h苯基-乙酸叔丁酯(290mg，0.9mmol)和6-甲醯-苯並[b]噻吩-2-羧酸(l-異丁氧基-乙氧基)醯胺(方案7)(255mg，0.8mmol)在DCE(8ml)中攪拌30分鐘。加入乙酸(4ul，0.08mmol)和三乙醯氧基硼氫化鈉(504mg，2.4mmol)並將反應混合物室溫攪拌1小時30分鐘。加入DCM(5ml)和NaHCO3飽和溶液(10ml)並分離各相。水相用EtOAc(15ml)萃取。有機相通過硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮。粗產物(543mg)用柱層析(5-10。/。的MeOH的DCM溶液)純化以得到所需的純產物(172mg，34%產率)。LCMS純度100%，m/z638[M十+H]+。階段4:(SH[4-(([2-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲醯基)-苯並[b]噻吩-6-基甲基]-氨基卜甲基)-環己基甲基]-氨基}-苯基-乙酸叔丁酯(127)將(S)-U4-({[2-(1-異丁氧基-乙氧基氨甲醯基)-苯並問噻吩-6-基甲基]-氨基}-甲基)-環己基甲基]-氨基卜苯基-乙酸叔丁酯(172mg，0.27mmol)在4MHC1的二嗎烷溶液(2ml)中室溫攪拌30分鐘。將溶液蒸發至幹以得到化合物(127)，其為米色固體(123mg，95%產率)。LCMS純度98。/。，m/z482[VT+H]+。'HNMR(300固z，MeOD)，5:1.10(4H，m，2xCH2)，1.80(6H，m，2xCH2and2xCH)，2.88(2H，dd，C逸NH)，2.94(2H，d，賜,，4.36(2H，s，賜NH》5.07(1H，s，CH)，7.53(6H，m，Ar)，7.87(1H，s，Ar)，7.97(1H，d，Ar)，8.12(1H，s，Ar)。以下化合物按照為化合物(126)和化合物(127)描述的方法製備(S)-2-[(H(2-羥基氨甲醯基-苯並[bl噻吩-6-基甲基)-氨基j-甲基l環己基甲基)-氨基-4-甲基-戊酸環戊酯(128)LCMS純度86°/。，m/z530[IVf+H]+，^NMR(300MHz，MeOD)，S:0.99(6H，t，J=6Hz，2xCH3)，1.11(4H，t，J=8.1Hz，2xCH2)，1.76(20H，m，2xCH和9xCH2)，2.80(1H，m，CH)，2.97(4H,m，2xC,H)，3.95(1H，m，CH)，4.35(2H，s，Qi2NH)，5.32(1H，m，OCH)，7.54(1H，d，J=6Hz，Ar)，7.84(1H，s，Ar)，7.94(1H，d，J=9Hz，Ar)，8.08(1H，s，Ar)。(S)-2-[(4-U(2-羥基氨甲醯基-苯並[b噻吩-6-基甲基)-氨基l-甲基)-環己基甲基)-氨基-4-甲基-戊酸(129)LCMS純度95%，m/z462[M十+H]+，'HNMR(300MHz，MeOD)，5:1.00(6H，t，風3Hz，2xCH3)，1.10(4H，m，2>CH2)，1.85(8H，m，2xCH和3xCH2)，2.94(4H，m，2x賜NH)，3.91(1H，m，C,H)，4.36(2H，s，CHa卿，7.54(1H，d，J=7.8Hz，Ar)，7.85(1H，s，Ar)'7.95(1H，d，J=8.1Hz，Ar)，8.08(1H，s)。合成圖9的化合物，以化合物(130)為例ooformulaseeoriginaldocumentpage138132formulaseeoriginaldocumentpage138133formulaseeoriginaldocumentpage138134階段1:(S)-[(3-硝基-苄基)-氨基]-苯基-乙酸環戊酯formulaseeoriginaldocumentpage138在苯基甘氨酸環戊酯對甲苯磺酸鹽(3.08g，7.8mmol)的DCE(120ml)溶液中加入3-硝基苯甲醛(1.01g，6.7mmo1)，然後加入三乙醯氧基硼氫化鈉(3.03g)。將混合物攪拌3.5小時，然後加入飽和碳酸氫鈉溶液(200ml)進行淬滅。產物用DCM(250ml)萃取，將有機萃取物乾燥(MgS04)。產物無需進一步純化即可進行下面的步驟。階段2:(S)-[(3-硝基-節基)-叔丁氧基羰基-氨基]-苯基-乙酸環戊酯formulaseeoriginaldocumentpage138在DCM(50ml)中的(S)-[(3-硝基-苄基)-氨基]-苯基-乙酸環戊酯的粗製混合物中加入二碳酸二叔丁酯(3.38g，15.6mmo1)。混合物在5(TC加熱過夜，然後冷卻至室溫。然後加入MW-三甲基乙二胺(2ml)並將混合物攪拌2小時。然後將混合物倒入乙酸乙酯(150ml)並用lMHCl(3X50ml)洗滌，乾燥(MgS04)並濃縮以得到所需的無色油狀產物(1.509g'42%產率)。LCMS純度98。/。，m/z477(M+Na+)。&NMR(300MHz,d6-DMSO)，.5:7.97(1H，dd，J=2.1，9Hz),7.15-7.45(8H，m)，5.60-6.00(1H，m)，5.20-5,35(1H，m)，4.65-4.82(1H，m),4.21(1H，d，JN16Hz)，1.30-1.95(17H，m)階段3:(S)-[(3-氨基-苄基)-叔丁氧基羰基-氨基]-苯基-乙酸環戊酯在(S)-[(3-硝基苄基)-叔丁氧基羰基-氨基]-苯基-乙酸環戊酯(1.509g，3.32mmol)的乙醇(IOml)溶液中加入碳載鈀(10。/。，0.38g，0.36mmo)。將燒瓶排空並重新填滿氫氣。將混合物攪拌過夜，然後通過硅藻土過濾，用乙醇(150ml)洗滌並濃縮以得到所需無色油狀產物(1.351g，96%產率)。iHNMR(300MHz，CDC13)，S:7.19-7.42(5H，m)，6.97(1H，t，J=7.5Hz)，6.46(2H，dd，J=8.1，16.5Hz)，6.29(1H，brs)，5.58(1H，brs)，5.29(1H，brs)，4.69(1H，brs)，4.00(1H，d，J=15.9Hz)，3.74(1H，q，J=6.9Hz)，3.51(2H，brs)，1.20-2.00(17H，m)階段4:(SH叔丁氧基羰基-(3-([2-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲醯基)-苯射b]-噻吩-6-基甲基]-氨基}-苄基)-氨基]-苯基-乙酸環戊酯在(S)-[(3-氨基-苄基)-叔丁氧基羰基-氨基]-苯基-乙酸環戊酯(0.317g，0.75mmol)中加入6-甲醯-苯並[b]噻吩-2-羧酸(l-異丁氧基-乙氧基)-醯胺(方案7)(0.210g，0.65mmol)的DCE(8ml)溶液。加入2滴冰醋酸，然後加入三乙醯氧基硼氫化鈉(0.170g，0.8mmol)。將混合物攪拌2小時然後倒入DCM(150ml)。溶液用飽和碳酸氫鈉(50ml)洗滌，然後乾燥(MgS04)，濃縮並通過快速柱層析純化以得到所需淡黃色泡沫狀的產物(0.346g，73%產率)。^NMR(300MHz，CDC13)，S:8.35-8.43(1H，m)，7.56-8.05(2H'm)，7.01-7.41(8H，m)，6.卯-7.01(1H，m)，6.42(1H，dd，J=2.6，7.9Hz)，5.25-5.31(1H，m)，5.12(1H，q，J=5.2Hz)，4.40(1H，d，J5.4Hz)，4.00(1H，dd，J-3.1,15.8Hz)，3.60-3.70(1H，m)，3.35-3.40(1H，m)，1.33-1.94(21H,m)，0.98(3H，d，J=6.6Hz)，0.97(3H，d，J=6.6Hz)階段5:(SH3-[(2-羥基氨甲醯基-苯並[b]噻吩-6-基甲基)-氨基]-苄基-氨基)-苯基-乙酸環戊酯(130)在(S)-[叔丁氧基羰基-(3-([2-(l-異丁氧基-乙氧基氨甲醯基)-苯並[b]噻吩-6-基甲基]-氨基}-苄基)-氨基]-苯基-乙酸環戊酯(0.100g，0.14mmol)的DCM/MeOH(lml:lml)溶液中加入TFA(8ml)。將溶液攪拌2小時，然後用DCM(200ml)稀釋。溶液用飽和碳酸氫鈉(IOOml)洗滌。將溶液乾燥(Na2S04)，濃縮並通過反相HPLC純化以得到所需產物(8.1mg，11%產率)。LCMS純度98。/。，m/z531(M+H)+300MHz，DMSO，5:1.26-1.85(8H，m)，3.47(2H，s)，4.21(1H，s)，4.38(2H，d，J5.8Hz)，5.02-5.07(m，m)，6.32(m，t,J6.0Hz)，6.45(2H，d，J7.9Hz)，6.57(1H,s)，6.97(1H，t，J7.8Hz)，7.23-7.35(5H，m)，7.42(1H，dd，J1.2，8.3Hz)，7.84(1H，s)，7.87(1H，s)，7.93(1H，s)，9.23(1H，brs)，11.4(1H，brs)以下化合物按照為化合物(130)描述的過程製備(S)-(3-[(2-羥基氨甲醯基-苯並[b噻吩-6-基甲基)-氨基-苄基氨基卜環己基-乙酸環戊酯(131)LCMS純度>98%，m/z536.25(M+H)+，！HNMR(300MHz，d6-DMSO)，5:0.7-1.25(8H，m)，.50-1.95(14H,m),3.69(1H，brs)，3.98(2H，brs)，4.43(2H，brs)，5.14(1H，t，J5.4Hz)，6.60-6.71(2H，m)，7.05-7.28(3H，m)，7.43(1H,d，J8.5Hz)，7.83-7.98(2H，m)，9.25(1H，brs)，11.45(1H，brs)(S)-3-叔丁氧基-2-(3-[(2-羥基氨甲醯基-苯並b噻吩-6-基甲基)-氨基]-節基氨基卜丙酸環戊酯(132)LCMS純度〉980/。，m/z540.25(M+H)+，&NMR(300MHz，d6-DMSO)，5:1.05(9H,s)，1.50-1.78(8H，m)，3.15-3.67(5H，m)，4.38(2H，d，J5.8Hz)，5.05-5.15(1H，m)，6.31(1H，t，J5.9Hz)，6.40-6.48(2H，m)，6.56(1H，s)，6.96(1H，t，J7.8Hz)，7.42(1H，d，J8.2Hz)，7.87(1H，s)，7.93(1H，s)，9.24(1H，brs)，11.43(1H，brs)(S)-2-(3-(2-羥基氨甲醯基-苯並[b〗噻吩-6-基甲基)-氨基-節基氨基H-甲基-戊酸環戊酯(133)LCMS純度98%，m/z510.25(M+H)+,!HNMR(300固z,d6-DMSO)，5:0.87(6H，d，J6.4Hz)，1.50-1.94(IOH，m)，3.57-4.20(3H，m),4.44(2H，s)，5.20(1H，t，J5.8Hz)，6.58-6.74(3H，m)，7.11(IH,t，J7.7Hz)，7.43(1H，dJOHz)，7.85-7.96(3H，m)，9.38(2H，brs)，11.46(1H，brs)(S)-3-叔丁氧基-2書-[(2-羥基氨甲醯基-苯並b噻吩-6-基甲基)-氨基]-節基氨基卜丙酸環戊酯(134)LCMS純度98%，m/z540.25(M+H)+，^NMR(300MHz，d4-MeOD)，S:7.64-7.77(2H，m)，7.28(1H，d，J=7.2Hz)，6.99(2H，d，J=6.6Hz)，6.53(2H，d，J=6.6Hz)，5.06-5.08(1H，m)，4.35(2H,s)，3.40-3.75(5H，m)，1.50-1.82(8H，m)，1.04(9H，s)測量生物學活性組蛋白脫乙醯基酶活性用購自Biomol的HDAC螢光活性試驗測量化合物抑制組蛋白脫乙醯基酶活性的能力。簡言之，在存在或不存在抑制劑時將屍&orA丄^^底物(一種s-氨基被乙醯化的賴氨酸)與具有組蛋白脫乙醯基酶活性的原料(HeLa細胞核提取物)一起孵育。底物的脫乙醯化使底物對F/"or血Z^^顯影劑敏感從而產生螢光。因此，將底物與具有HDAC活性的原料一起孵育導致信號增強，而當存在HDAC抑制劑時信號減弱。數據表達為佔不存在抑制劑時測得的對照的百分比，所有樣品要減去背景信號，如下所示%活性=((Si-B)/(S°-B))xl00其中，Si是存在底物、酶和抑制劑時的信號，S。是存在底物、酶和載體時的信號，其中的抑制劑是被溶解的，而B是不存在酶時測得的背景信號。確定IC50值時釆用GraphpadPrism軟體，將8個數據點的結果擬合到具有可變斜率的S形劑量反應曲線方程(％活性與化合物濃度的對數)，然後通過非線性回歸分析確定IC50值。利用HeLa細胞粗製核提取物的組蛋白脫乙醯基酶活性進行篩選。購自4C(Seneffe，Bdgium)的製品是從收穫自指數生長期的HeLa細胞製備的。按照DignamJD1983Nucl.Acid.Res.il，1475-1489製備核提取物，在液氮中急凍並儲存於-80'C。最終的緩衝液組成為20mMHepes、100mMKC1、0.2mMEDTA、0.5mMDTT、0.2mMPMSF和20。/。(v/v)甘油。IC50結果被歸入3個範圍之一，如下範圍A:IC50〈100nM，範圍B:IC50從101nM到1000nM;範圍C:IC50>1001nM。NT=未檢測實施例的化合物在該試驗中的測試結果給在下面的表2的第二列中。細胞抑制試驗收穫生長在對數期的相應的癌細胞系(Hela、U937和HUT)並以1000細胞/孔(最終體積為200ul)接種到96孔組織培養板上。細胞生長24小時後用化合物(最終濃度為20uM)處理細胞。然後再將平板孵育72小時，之後按照Skehan19卯JNatlCancInst82，1107-1112進行磺基羅丹明B(SRB)細胞存活試驗。數據表達為不存在抑制劑時測得的對照的抑制百分數，如下所示%抑制=ioo-((sVs°)xioo)其中，Si是存在抑制劑時的信號，S。是存在DMSO時的信號。確定IC50值時採用GraphpadPrism軟體，將8個數據點的結果擬合到具有可變斜率的S形劑量反應曲線方程(。/。活性與化合物濃度的對數)，然後通過非線性回歸分析確定IC50值。IC50結果被歸入3個範圍之一，如下範圍A:IC5(K330nM，範圍B:IC50從330nM到3300nM;範圍C:IC50>3301nM。NT=未檢測實施例的化合物在該試驗中的測試結果給在下面的表2的第3-5列中。表2tableseeoriginaldocumentpage143tableseeoriginaldocumentpage144tableseeoriginaldocumentpage145tableseeoriginaldocumentpage146tableseeoriginaldocumentpage147破碎細胞羧酸酯酶試驗製備細胞提取物U937或Hctl16腫瘤細胞(約109，用4倍體積的DulbeccosPBS(約1升)洗滌並在4°。以160g離心IO分鐘使其沉澱)。重複兩次，然後在25"C將最終的細胞沉澱物重懸於35ml冷的勻漿緩衝液(Trizma10mM、NaCl130mM、CaCl20.5mMPH7.0)。通過氮氣氣蝕製備勻漿(700psi，50分鐘，4°C)。將勻漿保持在冰上並用設計的抑制劑混合物補足以得到以下最終濃度亮肽素lpM抑肽酶0.1pME648jiM胃酶抑素1.5nM胰凝乳蛋白酶抑制劑33pM將細胞勻漿在360rpm離心10分鐘以使其澄清，所得上清液被用作酯酶活性來源並可儲存於-8(TC直至使用。測量酯的切除用這種細胞提取物可測量酯變為相應的羧酸的水解作用。為達到這種效果，將細胞提取物(約30ug/0.5ml總測試體積)在Tris-HCl25mM、125mMNaCl、緩衝液(25°。時PH為7.5)中於37"C孵育。在0時刻加入最終濃度為2.5pM的相應的酯(底物)並將樣品在37。C孵育適當時間(通常為0或80分鐘)。加入3倍體積的乙腈終止反應。對於0時刻樣品，在加入酯化合物之前加入乙腈。12000g離心5分鐘後，在室溫下通過LCMS(SciexAPI3000，HP1100二元泵，CTCPAL)分析母體酯及其相應的羧酸。採用的色譜條件基於AceCN(75X2.1mm)柱和流動相，流動相為5-95%乙腈水溶液/0.1%甲酸。權利要求1.式(I)的化合物或其鹽、N-氧化物、水合物或溶劑合物其中，R1是羧酸基(-COOH)或是可被一種或多種細胞內羧酸酯酶水解成羧酸基的酯基；R2是天然或非天然α胺基酸的側鏈；Y是鍵、-C(＝O)-、-S(＝O)2-、-C(＝O)O-、-C(＝O)NR3-、-C(＝S)-NR3、-C(＝NH)NR3或-S(＝O)2NR3-，其中R3是氫或任選取代的C1-C6烷基；L1是式-(Alk1)m(Q)n(Alk2)p-的二價基團，其中，m、n和p獨立為0或1，Q是(i)具有5-13個環成員的任選取代的二價單環或雙環碳環或雜環基團，或(ii)，當m和p都是0時是式為-X2-Q1-或-Q1-X2-的二價基團，其中X2是-O-，S-或NRA-，其中RA是氫或任選取代的C1-C3烷基，Q1是具有5-13個環成員的任選取代的二價單環或雙環碳環或雜環基團，Alk1和Alk2獨立代表任選取代的二價C3-C7環烷基，或任選取代的直鏈或支鏈的C1-C6亞烷基、C2-C6亞烯基或C2-C6亞炔基，所述基團可任選含有或終止於醚(-O-)、硫醚(-S-)或氨基(-NRA-)連接，其中，RA是氫或任選取代的C1-C3烷基；X1代表鍵；-C(＝O)；或-S(＝O)2-；-NR4C(＝O)-、-C(＝O)NR4-、-NR4C(＝O)NR5-、-NR4S(＝O)2-或-S(＝O)2NR4-，其中R4和R5獨立為氫或任選取代的C1-C6烷基；z是0或1；A代表任選取代的單環、二環或三環碳環或雜環環系統，其中，基團R1R2NH-Y-L1-X1-[CH2]z-和HONHCO-[鍵合基]-結合於不同的環原子；和-[鍵合基]-代表連接A中的環原子與異羥肟酸基CONHOH的二價鍵合基，該鍵合基的長度，即從連接A的環原子的最後一個原子到連接異羥肟酸基的最後一個原子的長度，等於含有3-10個碳原子的無支鏈飽和烴鏈的長度。2.如權利要求1所述的化合物，其特徵在於，所述鍵合基的長度等於含有4-9個:鍵合基1—CONHOH(I)碳原子的無支鏈飽和烴鏈的長度。3.如權利要求1或權利要求2所述的化合物，其特徵在於，-[鍵合基]-代表式為-(012))^丄2-的二價基團，其中X是0或1;Z是鍵、-NR3C(=0)-、-C(=0)NR3-、-NR4C(=0)-NRr、-C(=S)-NR3、-C^NH)-NR3-NR3S(K))2-或-S^O)2NRr，其中R3是氫或C-C6烷基；-C(=0);或-S(=0)2-;和LM戈表任選取代的直鏈或支鏈的CVC7亞垸基、CVC6亞烯基或C4-C6亞炔基，所述基團可任選含有或終止於醚(-O-)、硫醚(-S-)或氨基(-NRA-)連接，其中，RA是氫或任選取代的C,-C3烷基。4.如權利要求2或權利要求3所述的化合物，其特徵在於，x是0。5.如權利要求2-4中任一項所述的化合物，其特徵在於，Z是-C(^0)-、-NHC(K))-或-C—0)NH-。6.如權利要求2-5中任一項所述的化合物，其特徵在於，1^是-(CH2)5-、-(CH2)6-或-(CH2)7陽。7.如權利要求1所述的化合物，其特徵在於，-[鍵合基]-代表式為-(<:!12))4丄3-^1丄4-的二價基團，其中x是0或1;L^是Z或I^或Z-L2，其特徵在於，Z如權利要求3中的定義，1^是鍵或任選取代的二價C,-C3亞垸基；Ar1是二價苯基或具有5-13個環成員的二價單環或二環雜芳基，和L4是鍵或任選取代的-CH2-或-CHK:H-。8.如權利要求7所述的化合物，其特徵在於，x是0。9.如權利要求7或權利要求8所述的化合物，其特徵在於，1^是Z或Z-L2，其中Z是-NH-、-NHS(=0)2-、-8(=0)2,-或-3(=0)2-;L2是-CHr和L4是鍵或-CHr。10.如權利要求7或權利要求8所述的化合物，其特徵在於，！^是L2，其中L2是直鏈CVC5亞垸基，所述基團可任選含有醚(-O-)、硫醚(-S-)或氨基(-NRA-)連接，其中，RA是氫或任選取代的CVC3垸基，例如羥乙基。11.如權利要求7-10中任一項所述的化合物，其特徵在於，"是-CI^CH-。12.如權利要求7-10中任一項所述的化合物，其特徵在於，L^是-CH2-。13.如權利要求7-12中任一項所述的化合物，其特徵在於，A^是選自下組的二價基團formulaseeoriginaldocumentpage4其中，X是O、S或NH。14.如權利要求7所述的化合物，其特徵在於，x是0，1^和"是鍵，A^是二價苯基或具有9-13個環成員的二價二環雜芳基。15.如權利要求7所述的化合物，其特徵在於，Ar1是二價苯基或下式所示的二價苯並[b]噻吩基16.如權利要求1所述的化合物，其特徵在於，-[鍵合基]-代表式為-((^2))(丄3-8-/^1丄4-的二價基團，其中x、Ar1、1^3和"如權利要求7-13中任一項中的定義；B是單環或二環雜環系統。17.如權利要求16所述的化合物，其特徵在於，B選自下組.-formulaseeoriginaldocumentpage5其中，X是N，W是NH、O或S。18.如上述權利要求中任一項所述的化合物，其特徵在於，A是任選被取代的以下基團之一formulaseeoriginaldocumentpage5其中，RH)是氫或任選取代的CrCV烷基，顯示為連接到固定原子的被波浪線貫穿的鍵連接化合物(I)中的鍵合基，而顯示為浮動的另一個鍵將所示的環系統中任何方便的環原子連接到R,R2CHNHYi;xi[CH2]z基團。19.如上述權利要求中任一項所述的化合物，其特徵在於，z是0。20.如上述權利要求中任一項所述的化合物，其特徵在於，Y是-S(K))2-、-C(=S)-NR3、《(=順)-順3或-8(=0)2服3-，其中R3是氫或C廣C6烷基。21.如權利要求1-19中任一項所述的化合物，其特徵在於，Y是鍵。22.如上述權利要求中任一項所述的化合物，其特徵在於，在基團L'中，當Alk1和Alk2存在時其選自-CHr、-CH2CHr、-CH2CH2CH2-、以及二價環丙基、環戊基和環己基。23.如上述權利要求中任一項所述的化合物，其特徵在於，在基團lJ中，Q是二價苯基或具有5-13個環成員的單環或二環雜芳基。24.如權利要求22所述的化合物，其特徵在於，Q是l,4-亞苯基。25.如上述權利要求中任一項所述的化合物，其特徵在於，在基團L'中，m和p是0。26.如權利要求1-24中任一項所述的化合物，在基團I^中，n和p是0，m是l。27.如權利要求1-24中任一項所述的化合物，在基團U中，m、n和p都是0。28.如上述權利要求中任一項所述的化合物，其特徵在於，基團-Y-LLxL[CH2;^選自-C(=0)-、-C(=0)NH-、-(CH2)v-、-(CH2)vO-、-C(=0)-(CH2)v-、-C(=0)-(CH2)vO-、-C(=0)-NH-(CH2)w-、-C(=0)-NH-(CH2)wO-、^H^^~(CH2)wO卜TO^(CH2)w01"其中，v是l、2、3或4，w是l、2或3。29.如權利要求1-27中任一項所述的化合物，其特徵在於，基團-￥丄1-乂1-[(:112]2-是-<:12-、-ch2o-、-c(=o)-ch2-、-c(=o)-ch2o-、-<:(=0)-則陽012-或-(:(=0)-順-0120-。30.如上述權利要求中任一項所述的化合物，其特徵在於，R,是式-(CK))OR9的酯基，其中，R9是(i)R7R8CH-，其中R7是任選取代的(CrC3)烷基-(Z、-(d-C3)烷基-或(CrC3)烯基-^、-(€:1-(:3)烷基-，其中，a是o或i，z'是-o-、-s-或-nh-，仗8是氫或((:1-(:3)烷基-或R7和R8與它們所結合的碳原子一起形成任選取代的C3-C7環垸基環或含有5個或6個環原子的任選取代的雜環；或(ii)任選取代的苯基或含有5或6個環原子的單環雜環。31.如權利要求30所述的化合物，其特徵在於，R9是甲基、乙基、正或異丙基，正或仲丁基、環己基、烯丙基、苯基、苄基、2-、3-或4-吡啶基甲基、N-甲基哌啶-4-基、四氫呋喃-3-基或甲氧基乙基。32.如權利要求30所述的化合物，其特徵在於，R9是環戊基。33.如上述權利要求中任一項所述的化合物，其特徵在於，R2是環己基甲基、環己基、吡啶-3-基甲基、仲丁基、叔丁基、l-苄硫基-l-甲基乙基、l-甲硫基-l-甲基乙基或l-巰基-l-甲基乙基。34.如權利要求1-32中任一項所述的化合物，其特徵在於，R2是氫。35.如權利要求1-32中任一項所述的化合物，其特徵在於，R2是苯基、苄基、苯基乙基、叔丁氧基甲基或異丁基。36.如權利要求1所述的具有文中具體實施例中的任何化合物的結構的化合物。37.—種藥物組合物，所述藥物組合物含有如上述任一權利要求所述的化合物以及藥學上可接受的載體。38.如權利要求1-36中任一項所述的式(I)的化合物在製備用於抑制HDAC酶活性的組合物中的應用。39.如權利要求38所述的應用，用於在體外或體內抑制HDAC1活性。40.—種抑制HDAC酶活性的方法，所述方法包括使該酶接觸有效產生這種抑制的量的如權利要求1-36中任一項所述的化合物。41.一種相對於其它細胞類型在巨噬細胞和/或單核細胞中選擇性抑制HDAC酶活性的方法，所述方法包括使該酶接觸有效產生這種抑制的量的如權利要求1-36中任一項所述的化合物，其中，Y是鍵、-S(=0)2或-S^O)2NR3-，其中R3是氫或任選取代的d-C6烷基。42.如權利要求40或權利要求41所述的方法，用於在體外或體內抑制HDAC1活性。43.—種治療細胞增殖疾病、聚穀氨醯胺病、神經變性疾病、自身免疫性疾病、炎性疾病、器官移植排斥、糖尿病、血液學疾病和感染的方法，所述方法包括給予患有這種疾病的對象有效量的如權利要求1-36中任一項所述的式(I)的化合物。44.如權利要求43所述的方法，用於治療癌細胞增殖、亨廷頓病或阿耳茨海默病。45.如權利要求43所述的方法，用於治療類風溼性關節炎。46.—種相對於其它細胞類型在巨噬細胞和/或單核細胞中選擇性抑制aurora激酶活性的方法，所述方法包括使所述酶接觸有效產生這種抑制的量的如權利要求1-36中任一項所述的化合物，其中，Y是鍵、-3(=0)2或-3(=0)2順3-，其中R3是氫或任選取代的CVCV烷基。47.如權利要求37所述的藥物組合物，所述藥物組合物適合局部給藥，且在如權利要求1-36中任一項所述的化合物中，R2通過亞甲基-CH2-連接到碳原子上。全文摘要式(I)的化合物是組蛋白脫乙醯酶活性的抑制劑，並可用於治療例如癌症，其中，R1是羧酸基(-COOH)或是可被一種或多種細胞內羧酸酯酶水解成羧酸基的酯基；R2是天然或非天然α胺基酸的側鏈；Y是鍵、-C(＝O)-、-S(＝O)2-、-C(＝O)O-、-C(＝O)NR3-、-C(＝S)-NR3、-C(＝NH)NR3或-S(＝O)2NR3-，其中R3是氫或任選取代的C1-C6烷基；L1是式-(Alk1)m(Q)n(Alk2)p-的二價基團，其中，m、n和p獨立為0或1，Q是(i)具有5-13個環成員的任選取代的二價單環或雙環碳環或雜環基團，或(ii)，當m和p都是0時是式-X2-Q1-或-Q1-X2-的二價基團，其中X2是-O-，S-或NRA-，其中RA是氫或任選取代的C1-C3烷基，Q1是具有5-13個環成員的任選取代的二價單環或雙環碳環或雜環基團，Alk1和Alk2獨立代表任選取代的二價C3-C7環烷基，或任選取代的直鏈或支鏈的C1-C6亞烷基、C2-C6亞烯基或C2-C6亞炔基，所述基團可任選含有或終止於醚(-O-)、硫醚(-S-)或氨基(-NRA-)連接，其中，RA是氫或任選取代的C1-C3烷基；X1代表鍵；-C(＝O)；或-S(＝O)2-；-NR4C(＝O)-、-C(＝O)NR4-、-NR4C(＝O)NR5-、-NR4S(＝O)2-或-S(＝O)2NR4-，其中R4和R5獨立為氫或任選取代的C1-C6烷基；z是0或1；A代表任選取代的單環、二環或三環碳環或雜環環系統，其中，基團R1R2NH-Y-L1-X1-[CH2]z-和HONHCO-[鍵合基]-結合於不同的環原子；和-[鍵合基]-代表連接A中的環原子與異羥肟酸基CONHOH的二價鍵合基，該鍵合基的長度，即從連接A的環原子的最後一個原子到連接異羥肟酸基的最後一個原子的長度，等於含有3-10個碳原子的無支鏈飽和烴鏈的長度。文檔編號C07D207/40GK101133060SQ200680006916公開日2008年2月27日申請日期2006年5月4日優先權日2005年5月5日發明者A·D·G·唐納爾德,A·H·德呂蒙,A·H·戴維森,D·F·C·莫法特,F·A·馬塞,K·W·J·貝克,S·J·戴維斯,S·R·佩特爾申請人:色品療法有限公司