用於治療HCV感染的新型氨基磷酸酯的製作方法

2023-05-27 17:11:11 5

本申請要求2015年2月6日提交的國際專利申請PCT/CN2015/072391的優先權。據此通過引用將上述申請的內容完整地併入。發明背景C型肝炎病毒(HCV)感染是一個嚴重的健康問題，感染HCV會導致慢性肝臟疾病，如肝硬化和肝癌。HCV感染人群眾多，據估計，約佔全世界人口的2-15％。根據美國疾病控制中心估計，僅美國就有四百五十萬感染者。按照世界衛生組織的統計，全世界有超過2億的感染者，每年至少新增300萬-400萬感染者。在感染人群中，約20％患者可以自動清除HCV病毒，但其餘患者體內駐紮的HCV病毒將會伴隨他們一生。10-20％的慢性感染者最終發展成肝硬化或肝癌。HCV疾病為非腸道傳播，它通過汙染的血液和血液製品、汙染針頭、性傳播或直接由被感染或攜帶者母親傳播給其子女。當前用於HCV感染的治療僅限於單獨使用重組幹擾素α或與核苷類似物利巴韋林聯合的免疫療法，但療效有限。此外，還沒有批准的HCV疫苗。因此，迫切需要能夠有效治療HCV感染的改進藥物。本發明提供了一種有望滿足該需求的化合物。發明概述本發明提供了一種式I化合物其中，R1是芳基或雜芳基；每一個R2和R3獨立地選自於氫、烷基、雜芳基，當R2和R3中的一個為氫或烷基時，另一個必須為雜芳基；或R2、R3與它們相連的氮原子一起組成一個5‐7元的雜環，且可含有1‐2個除與R2、R3相連的氮原子外的雜原子，所述的雜原子獨立地選自於O、S或NR6；所述的R6為氫、烷基、醯基、芳基或雜芳基；所述的雜環可以在它的碳原子上被烷基、滷素或烷氧羰基取代；或R4是氫或烷基；R5是氫或烷基；X是一個鍵、O、NH或N‐烷基；和n是1、2、3或4。在本發明的一方面，R1是芳基或雜芳基。例如，R1可以是苯基，所述苯基可被1‐3個獨立選自於滷素或烷基的取代基取代。在本發明的一方面，R1是苯基或萘基。在本發明的另一方面，R2是氫，R3是雜芳基。例如，R3可以是吡啶或異喹啉。R3的具體例子包括在本發明的一方面，R2、R3與它們相連的氮原子一起組成一個5‐6元的雜環，且可含有1‐2個除與R2、R3相連的氮原子外的雜原子，所述的雜原子獨立地選自於O、S或NR6；所述的R6為氫、烷基或醯基；所述的雜環可以在它的碳原子上被1個或多個烷氧羰基取代；具體的例子中雜環可以是在本發明的一方面，R2、R3與它們相連的氮原子一起組成一個取代或未取代的雜芳基；具體的例子中雜芳基可以是在本發明的另一方面，R4是甲基或乙基。在本發明的另一方面，R5是甲基、乙基或異丙基。在本發明的另一方面，X是一個鍵、O、NH或N‐烷基。在本發明的另一方面，磷原子是手性的，且至少有90％(如至少97％)的S立體異構體。在本發明的另一方面，n是1、2、3或4。在本發明的另一方面，本發明中的化合物是式I化合物藥學上可接受的鹽。這種鹽的例子包括醋酸鹽、4‐甲苯磺酸鹽、氫溴酸鹽或鹽酸鹽。本發明中的化合物的具體例子包括但不限於，((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐(2‐嗎啡啉乙醯氧基)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐丙氨酸異丙酯；((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐(2‐嗎啡啉乙醯氧基)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐丙氨酸異丙酯4‐甲基苯磺酸鹽；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位3‐嗎啡啉丙酸酯；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位3‐嗎啡啉丙酸酯4‐甲基苯磺酸鹽；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐嗎啡啉丁酸酯；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐嗎啡啉丁酸酯4‐甲基苯磺酸鹽；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐(二甲基氨基)丁酸酯；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐(吡啶‐2‐位氨基)丁酸酯鹽酸鹽；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐(異喹啉‐1‐位氨基)丁酸酯鹽酸鹽；((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐3‐(2‐(7H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐7‐位)乙醯氧基)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐丙氨酸異丙酯；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)丁酸酯；((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐3‐(2‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)乙醯氧基)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐丙氨酸異丙酯；((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐((3‐嗎啡啉丙醯)氧基)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐纈氨酸甲酯；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐乙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位3‐嗎啡啉丙酸酯；((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐(((3‐嗎啡啉丙基)氨基甲醯)氧)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐丙氨酸異丙酯；((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐(((3‐嗎啡啉丙基)氨基甲醯)氧)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐丙氨酸乙酯；((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐3‐(((2‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)乙基)氨基甲醯)氧)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐丙氨酸異丙酯；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位3‐嗎啡啉丙酸酯鹽酸鹽；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位3‐嗎啡啉丙酸酯氫溴酸鹽；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位3‐嗎啡啉丙酸酯甲磺酸鹽；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐嗎啡啉丁酸酯鹽酸鹽；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐嗎啡啉丁酸酯氫溴酸鹽；(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐嗎啡啉丁酸酯甲磺酸鹽；((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐3‐(2‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)乙醯氧基)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐丙氨酸異丙酯鹽酸鹽；((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐3‐(2‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)乙醯氧基)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐丙氨酸異丙酯氫溴酸鹽；和((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐3‐(2‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)乙醯氧基)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐丙氨酸異丙酯甲磺酸鹽。在另一方面，本發明提供了一種包含至少一個上述的化合物與藥學上可接受的基質組成的藥用製劑。所述的藥用製劑可用於治療人類HCV感染。在另一方面，本發明還提供了治療HCV感染的方法，該方法包括給予HCV感染病人一種本發明的化合物或其藥學上可接受的鹽。一方面，該方法還可進一步給予HCV感染病人另一種不同於本發明化合物的其他抗病毒試劑。在另一方面，本發明還與本發明中的化合物用途有關，用於製造一種治療HCV感染的藥物。相比於已經報導的可潛在治療HCV感染的其他化合物，本發明中的化合物有意想不到的優勢，在臨床應用上本發明中的化合物是更理想的。這些優勢包括但不限於：能形成藥學上可接受的鹽使得化合物的水溶性和穩定性提高、顯示了類似的或更好的藥學作用，因此本發明中的化合物更容易做成製劑用於臨床治療。本發明的具體描述如果無另外說明，這裡引用的所有術語具有與那些本領域的熟練人員理解本發明相同的含義。如本文所使用的用語「一(a)」或「一(an)」實體是指一個或多個所述實體，例如，一化合物是指一個或多個化合物或者至少一個化合物。同樣地，術語「(a)」(或「an」)、「一個或多個」以及「至少一個」在本文可互換使用。如無其他與特定的含義相背的，以複數形式表示的詞語也包括一個單數詞語的含義。例如，詞語「化合物」也指「一個化合物」，除非一個單數可能與特定的含義相背。如本文所使用的術語「任選的」或「任選地」是指其後描述的事件或情況可以出現但不是必須出現，並且該描述包括該事件或情況出現的例子和不出現的例子。例如，「任選的鍵」是指該鍵可以存在或不存在，並且該鍵包括單鍵、雙鍵或三鍵。又比如，一個「任選取代的」基團是指該基團可以被適當的取代基取代或不被取代。術語「P*」是指磷原子是手性的，且它有一個相應的Cahn‐Ingold‐Prelog命名的「R」或「S」，它有可接受的常見含義。如本文所使用的術語「純化的」是指一個給定的化合物的純度。例如，當給定化合物是組分中的一個主要成分時該化合物被純化，意即至少50％重量比純度。因此，「純化的」包括至少50％重量比純度，至少60％重量比純度，至少70％純度，至少80％純度，至少85％純度，至少90％純度，至少92％純度，至少94％純度，至少96％純度，至少97％純度，至少98％純度，至少99％純度，至少99.5％純度，至少99.9％純度，其中「基本上純的」包括至少97％純度，至少98％純度，至少99％純度，至少99.5％純度，至少99.9％純度。如本文所使用的術語「代謝物」是指給予一個客體需要的藥物後在體內產生的一個化合物。如本文所使用的術語「大約」(也可表示為～)是指援引的數值是一個在標準實驗誤差內變化的部分範圍。如本文所使用的術語「基本上無水的」是指一種物質最多含10％的水，優選最多1％的水，更優選最多0.5％的水，最優選最多0.1％的水，所述百分數指重量百分數。如本文所使用的術語「前藥」是指一個藥物分子的生物轉化衍生物，它在體內經過酶或化學的轉化釋放出活性母藥，然後活性母藥發揮期望的藥效。關於前藥也有其他的描述，例如J.Rautio等的文獻(NatRevDrugDiscov.,2008Mar；7(3):255‐70)，據此通過引用將上述文獻完整地併入。一種溶劑或反相溶劑(在反應、結晶等中使用或晶格和/或吸收的溶劑)包括至少一個C1‐C8的醇，C2‐C8的醚，C3‐C7的酮，C3‐C7的酯，C1‐C2的氯碳化合物，C2‐C7的腈，其他溶劑，C5‐C12的飽和碳氫化合物，C6‐C12的芳基碳氫化合物。C1‐C8的醇是指一種直鏈/支鏈和/或環狀/非環狀的有那樣的數量的碳的醇。C1‐C8的醇包括但不限於，甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、異丁醇、己醇和環己醇。C2‐C8的醚指一種直鏈/支鏈和/或環狀/非環狀的有那樣的數量的碳的醚。C2‐C8的醚包括但不限於，二甲醚、二乙醚、二異丙醚、二丁醚、甲基叔丁基醚(MTBE)，四氫呋喃和二氧六環。C3‐C7的酮指一種直鏈/支鏈和/或環狀/非環狀的有那樣的數量的碳的酮。C3‐C7的酮包括但不限於，丙酮、甲基乙基酮、丙酮、丁酮、甲基叔丁基酮、甲基丁基酮和環己酮。C3‐C7的酯指一種直鏈/支鏈和/或環狀/非環狀的有那樣的數量的碳的酯。C3‐C7的酯包括但不限於，乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸正丁酯等。C1‐C2的氯碳化合物指一種有那樣的數量的碳的氯碳化合物。C1‐C2的氯碳化合物包括但不限於，氯仿、二氯甲烷(DCM)、四氯化碳、1,2‐二氯乙烷和四氯乙烷。C2‐C7的腈指一種直鏈/支鏈和/或環狀/非環狀的有那樣的數量的碳的腈。C2‐C7的腈包括但不限於，乙腈、丙腈等。其他的溶劑指通常在有機化學中使用的溶劑，包括但不限於，二乙二醇、二甘醇二甲醚(二乙二醇二甲醚)、1,2‐二甲氧基‐乙烷、二甲基甲醯胺、二甲基亞碸、乙二醇、丙三醇、六甲基磷醯胺、六甲基亞磷醯三胺、N‐甲基‐2‐吡咯烷酮、硝基甲烷、吡啶、三乙胺和乙酸。C5‐C12的飽和碳氫化合物指一種直鏈/支鏈和/或環狀/非環狀的碳氫化合物。C5‐C12的飽和碳氫化合物包括但不限於，正戊烷、石油醚(石油英)、正己烷、正庚烷、環己烷和環庚烷。C6‐C12的芳基碳氫化合物指取代和未取代的有苯基在其骨架上的碳氫化合物。優選的碳氫化合物包括苯、二甲苯、甲苯、氯苯、鄰二甲苯、間二甲苯、對二甲苯，更優選的是甲苯。如本文所使用的術語「滷素」包括氯、溴、碘和氟。術語「封端基團」指表現出下列特點的化學基團。「基團」衍生自一個「保護的化合物」。該基團對伯羥基的選擇性超過仲羥基、可以在與氨基磷酸酯(pH2‐8)的穩定性一致的條件下加上並賦予所得產物顯著不同的物理性質，因此，允許3』‐磷醯胺‐5』‐新基團的產品更容易從未反應的目標化合物中分離。這個基團必須選擇性的反應並以良好的收率得到保護的產物，且該產物在設計的反應中是穩定的(見ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,3nded.T.W.GreeneandP.G.M.Wuts,JohnWiley&Sons,NewYork,N.Y.,1999)。基團的例子包括但不限於：苯甲醯基、乙醯基、苯基取代的苯甲醯基、四氫吡喃、三苯甲基、DMT(4,4』‐二甲氧基三苯甲基)、MMT(4‐單甲氧基三苯甲基)、三甲氧基三苯甲基、苯基呫噸基(9‐苯基氧雜蒽‐9‐位)、苯基硫雜呫噸基(9‐苯基硫雜蒽‐9‐位)或9‐(p‐甲氧基苯基)氧雜蒽‐9‐位(MOX)等；C(O)‐烷基、C(O)Ph、C(O)芳基、CH2O‐烷基、CH2O‐芳基、SO2‐烷基、SO2‐芳基、叔丁基二甲基矽基、叔丁基二苯基矽基。縮醛，如MOM或THP等等被認為是可能的基團。氟代化合物也是涵蓋的，目前它們能夠連接到化合物上且能夠通過傳遞一個氟固相提取基質選擇性脫除。具體例子包括氟化三苯甲基類似物、三苯甲基類似物1‐[4‐(1Η,1H,2H,2H‐全氟癸基)苯基]‐1,1‐二苯基甲醇。還涵蓋三苯甲基、BOC、FMOC、CBz等其他氟代類似物。磺醯氯(如對甲苯磺醯氯)可在5』位置選擇性反應。可選擇性形成酯諸如乙酸酯和苯甲酸酯。二羧基酸酐諸如琥珀酸酐和其衍生物可與游離羧酸產生酯鍵，這種例子包括但不限於，草醯基、丙二醯基、琥珀醯基、戊二醯基、己二醯基、庚二醯基、辛二醯基、壬二醯基、癸二醯基、鄰苯二甲醯基、異鄰苯二甲醯基、對鄰苯二甲醯基等。游離羧酸極大地增加了極性且還可將其用於將反應產物萃取到溫和鹼性水相(如碳酸氫鈉溶液)中。磷醯胺基團在酸性介質中是相對穩定的，因此還可使用需要酸性反應條件的基團(如四氫吡喃基)。術語「保護基團」衍生自「保護化合物」，具有其常見和普通的含義，意即至少一個保護基或封端基結合到至少一個允許化學修飾至少一個其他官能團的官能團(如‐OH、‐NH2等)上。保護基團的實例包括但不限於，苯甲醯基、乙醯基、苯基取代的苯甲醯基、四氫吡喃基、三苯甲基、DMT(4,4』‐二甲氧基三苯甲基)、MMT(4‐單甲氧基三苯甲基)、三甲氧基三苯甲基、苯基呫噸基(9‐苯基氧雜蒽‐9‐位)、苯基硫雜呫噸基(9‐苯基硫雜蒽‐9‐位)或9‐(p‐甲氧基苯基)氧雜蒽‐9‐位(MOX)等；C(O)‐烷基、C(O)Ph、C(O)芳基、C(O)O(低級烷基)、C(O)O(低級亞烷基)芳基(如，‐C(O)OCH2Ph)、C(O)O芳基、CH2O‐烷基、CH2O‐芳基、SO2‐烷基、SO2‐芳基、包含至少一個矽原子的保護基團，諸如叔丁基二甲基矽基、叔丁基二苯基矽基、Si(低級燒基)2OSi(低級燒基)2OH(如，‐Si(iPr)2OSi(iPr)2OH)。如本文所用的術語「保護的化合物」，如無另外指明，指含有「保護基團」並且能夠與含有需被保護的官能團的化合物反應的化合物。如本文所用的術語「離去基團」，具有對於本領域技術人員而言相同的意思(AdvancedOrganicChemistry:reactions,mechanismsandstructure—FourthEditionbyJerryMarch,JohnWileyandSonsEd.；1992pages351‐357)，它是底物分子的一部分並與之連接的基團；在底物分子進行取代反應的反應中(例如親核試劑)，離去基團隨之被取代。離去基團的例子包括但不限於：滷素(F、Cl、Br和I)，優選Cl、Br或I；甲苯磺酸酯基、甲磺酸酯基、三氟甲基磺酸酯基、乙酸酯基、、樟腦磺酸酯基、芳氧基和至少一個吸電子基團取代的芳氧基(例如對硝基苯氧基、2‐氯苯氧基、4‐氯苯氧基、2,4‐二硝基苯氧基、五氟苯氧基等)等。術語「吸電子基團」此處具有其通常含義。吸電子基團的例子包括但不限於滷素、‐NO2、‐C(O)(低級烷基)、‐C(O)(芳基)‐C(O)O(低級烷基)、C(O)O(芳基)等。如本文所用的術語「鹼性試劑」是能夠使羥基去質子化的化合物。鹼性試劑的例子包括但不限於(低級烷)氧化物((低級烷基)OM)並聯合醇溶劑，其中(低級烷)氧化物包括但不限於MeO‐、EtO‐、nPrO‐、iPrO‐、tBuO‐、iAmO‐(異戊氧化物)等，且其中M是鹼金屬陽離子，例如Li+，Na+,K+等。醇溶劑包括(低級烷基)OH，例如MeOH、EtOH、nPrOH、iPrOH、tBuOH、iAmOH等。還可以使用非‐烷氧基鹼，例如氫化鈉、六甲基二甲矽基胺鈉、六甲基二甲矽基胺鋰、二異丙基醯胺鋰、氫化鈣、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸銫、DBU、DBN、Grignard試劑，例如(低級烷基)Mg(滷素)，其包括但不限於MeMgCl、MeMgBr、tBuMgCl、tBuMgBr等。術語「鹼」(包括術語「鹼性試劑」)，是指能夠將含質子的化合物去質子化的化合物，即Bronsted鹼。除了上述援引例子，鹼的其他例子包括但不限於吡啶、三甲基吡啶、2,6‐(低級烷基)‐吡啶、二甲基‐苯胺、咪唑、N‐甲基‐咪唑、吡唑、N‐甲基‐吡唑、三乙胺、二異丙基乙基胺等。術語「吸電子基團」具有其平常含義。吸電子基團的例子包括但不限於滷素(F、Cl、Br或I)、‐NO2、‐C(O)(低級烷基)、‐C(O)(芳基)、‐C(O)O(低級烷基)、‐C(O)O(芳基)等。術語「共晶」包括4、RP‐4或SP‐4與鹽結合的共晶，所述鹽包括藥學上可接受的鹽。如本文所用的術語「鹽」是指含陽離子和陰離子的化合物，其可通過可接受質子部位的質子化和/或可供質子部位的去質子化來產生。值得注意的是，可接受質子部位的質子化導致形成陽離子類物質，其電荷通過生理陰離子的存在而平衡，而可供質子部位的去質子化導致形成陰離子類物質，其電荷通過生理陽離子的存在而平衡。術語「藥學上可接受的鹽」指鹽是藥學上可接受的。藥學上可接受的鹽的例子包括但不限於：(1)酸加成鹽，與無機酸形成，如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等等；或與有機酸形成，如羥基乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、蘋果酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、3‐(4‐羥基苯甲醯基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2‐乙烷‐二磺酸、2‐羥基乙烷磺酸、苯磺酸、4‐氯苯磺酸、2‐萘磺酸、4對甲苯磺酸、樟腦酸、十二烷基硫酸、葡萄糖酸、穀氨酸、水楊酸、順式‐已二烯二酸等等；或(2)鹼加成鹽，和上述無機酸的任一種的共軛鹼形成，其中共軛鹼包含選自Na+、K+、Mg2+、Ca2+、NHgR」』4‐g+中的陽離子組分，其中R」』是C1‐3烷基，g是選自0、1、2、3或4的整數。應該理解，所有涉及藥學上可接受的鹽都包括相同酸加成鹽的本文中所定義的溶劑加成形式(溶劑化物)或晶體形式(多晶型物)。術語「烷基」是指含有1至30個碳原子的非支鏈或支鏈、飽和、單價烴基。術語「C1‐M烷基」是指包含1至M個碳原子的烷基，其中M是具有下列數值的整數：2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30。術語「C1‐4烷基」是指含有1至4個碳原子的烷基。術語「低級烷基」表示包含1至6個碳原子的直鏈或支鏈烴基。本文中使用的「C1‐20烷基」是指包含1至20個碳原子的烷基。本文中使用的「C1‐10烷基」是指包含1至10個碳原子的烷基。烷基的例子包括但不限於低級烷基，包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基或戊基、異戊基、新戊基、己基、庚基和辛基。術語「(芳)烷基」或「(雜芳基)烷基」是指烷基任選地分別被芳基或雜芳基取代。術語「更低級的烷基」是指包含1至8個碳原子的烷基。這裡所用的術語烷氧基指「烷基‐O‐」。術語「烯基」指具有一個或兩個烯雙鍵、優選一個烯雙鍵的、具有2至10個碳原子的不飽和烴鏈基團。術語「C2‐N烯基」是指包含2至N個碳原子的烯基，其中N是具有下列數值的整數：3、4、5、6、7、8、9或10。術語「C2‐10烯基」是指包含2至10個碳原子的烯基。術語「C2‐4烯基」是指包含2至4個碳原子的烯基，例如包括但不限於乙烯基、1‐丙烯基、2‐丙烯基(烯丙基)或2‐丁烯基(巴豆基)。本文中使用的術語「雜環」是指至少具有一個選自於O、S、N或P的雜原子的單環或多環化合物。雜環化合物可以是芳香族的或非芳香族的、飽和的或不飽和的；它包括單環的3‐8元環、雙環或三環融合環系統。例如，雜環化合物包括環乙胺、環氧乙烷、硫雜丙環、氮丙啶、環氧乙烯、噻丙烯、氮雜環丁烷、氧雜環丁烷、硫雜環丁烷、氮雜環丁烯、氧雜環丁烯、硫雜環丁烯、吡咯烷、氧雜環戊烷、硫雜環戊烷、吡咯、呋喃、噻吩、哌啶、氧雜環己烷、硫雜環己烷、吡啶、吡喃、噻喃、高哌啶、氧雜環庚烷、硫雜環庚烷、氮雜環庚三烯、氧雜環庚三烯、硫雜環庚三烯、吲哚、喹諾酮、咔唑、吖啶和二苯並氮雜卓。如無另外說明，本文中使用的術語「芳基」是指取代或未取代的單環或多環融合系統，如苯基(Ph)、聯苯基或萘基，術語芳基，如無特別說明，包括取代或未取代的芳基(苯基或取代苯基)。芳基可被一或多個選自以下的部分取代：羥基、F、Cl、Br、I、氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸基、硫酸酯基、膦酸基、磷酸酯基以及膦酸酯基，其根據需要可保護或不保護，如本領域的技術人員所知，例如，如T.W.Greene及P.G.M.Wuts，「ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis」第三版，JohnWiley&Sons，1999中所指導。本文中使用的術語「雜芳基」是指含碳原子、氫原子以及一個或多個雜原子(如1‐3個雜原子)的一個單環或多環的芳香環，其中雜原子獨立選自於氮、氧和硫。如本領域的技術人員所知，雜芳環相比它們的全碳環有更少的芳香特徵。雜芳基的說明性例子包括但不限於吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡唑基、三嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、(1,2,3,)‐和(1,2,4)‐三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、異噁唑、噻唑和噁唑。雜芳基可以是未取代的也可以被一個或兩個適合的取代基取代。在本發明的實例中，雜芳基是一個單環，其中該環含有2‐5個碳原子和1‐3個雜原子，此處引用為「(C2‐C5)雜芳基」。除非另有說明，本文中使用的術語"芳氧基"是指取代或未取代的苯氧基(PhO‐)、對苯基‐苯氧基(p‐Ph‐PhO‐)或萘氧基，優選術語芳氧基是指取代或未取代的苯氧基。芳氧基可被選自下列的一個或多個部分所取代：羥基、F、Cl、Br、I、‐C(O)(低級烷基)、‐C(O)O(低級烷基)、氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸基、硫酸酯基、膦酸基、磷酸酯基以及膦酸酯基，根據需要不保護或保護，這是本領域技術人員所熟知的，例如在T.W.GreeneandP.G.Μ.Wuts,「ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis」第三版，JohnWiley&Sons，1999中所指導。術語「製劑」或「劑型」特指包括活性化合物的固體和液體配方且本領域的技術人員將了解活性成分可以不同製劑形式存在，這取決於所需劑量及藥代動力學參數。本文中所用的術語「賦形劑」指的是用於製備藥物組合物的化合物，一般安全無毒且生物學或其他方面都不需要，且包括為獸用及人類藥用所接受的賦形劑。術語「結晶的」指的是SP‐4或RP‐4的固體樣品當通過X射線粉末衍射或單晶X射線技術測定時具有結晶特徵的情況。術語「晶體樣」指的是SP‐4或Rp‐4的固體樣品當通過一種手段(例如肉眼或通過光學或偏振顯微鏡)測定時具有結晶特徵，但當通過另一手段(例如X射線粉末衍射)測定時不具有結晶特徵的情況。通過肉眼或通過光學或偏振顯微鏡肉眼確定固體樣品的結晶度的方法公開於USP和中，兩篇文獻皆以引用方式併入。呈「晶體樣」的SP‐4或RP‐4的固體樣品在某些條件下可變為晶型的，但當經受其他條件時可變成非晶型的。術語「無定形的」是指其中Sp‐4或RP‐4的固體樣品既不是晶體的也不是晶體樣的情形。下述實施例是為了更好的闡釋本發明的某些具體體現而不能被解釋為以任何方式限定本發明的範圍。實施例1.製備((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐(2‐嗎啡啉乙醯氧基)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐丙氨酸異丙酯(I‐1)化合物1(0.30g,0.57mmol)，化合物2(0.12g,0.68mmol)和DiPEA(0.22g,1.70mmol)溶解在DCM(15mL)中。室溫下攪拌5分鐘後，加入TBTU(0.22g,0.68mmol)，混合物繼續攪拌20hrs。旋幹溶劑，EA(100mL)萃取，合併的有機層依次用水洗(2x50mL)和飽和食鹽水洗(50mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮後柱層析純化得到目標產物I‐1(0.28g,76％)。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.59(s,1H),7.50(d,J＝8.4Hz,1H),7.34(t,J＝8.0Hz,2H),7.23(d,J＝8.4Hz,2H),7.18(t,J＝7.2Hz,1H),6.19(d,J＝18.8Hz,1H),5.58(d,J＝8.0Hz,1H),5.24(dd,J1＝9.2Hz,J2＝20.0Hz,1H),5.05‐4.95(m,1H),4.55‐4.50(m,1H),4.34(dd,J1＝1.2Hz,J2＝7.2Hz,1H),4.27‐4.22(m,1H),4.02‐3.92(m,1H),3.85(t,J＝10.4Hz,1H),3.75(t,J＝4.4Hz,3H),3.37(d,J＝3.6Hz,2H),2.65‐2.58(m,4H),1.40‐1.38(m,6H),1.24(d,J＝6.4Hz,6H).實施例2.製備((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐(2‐嗎啡啉乙醯氧基)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐丙氨酸異丙酯4‐甲基苯磺酸鹽(I‐2)化合物I‐1(0.500g,0.76mmol)溶解在DCM(12mL)中，然後加入對甲基苯磺酸(0.145g,0.76mmol)。反應液繼續攪拌0.5h後濃縮，重結晶得到目標鹽(0.450g)。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.71(d,J＝7.2Hz,2H),7.50(d,J＝7.2Hz,1H),7.30‐7.27(m,2H),7.21‐7.14(m,6H),6.05(brs,1H),5.63(d,J＝7.8Hz,1H),5.30(brs,1H),4.95‐4.91(m,1H),4.52‐4.28(m,3H),3.95‐3.65(m,6H),3.25‐3.08(m,2H),2.82(s,4H),2.32(s,3H),1.44‐1.35(m,6H),1.18(d,J＝6.0Hz,6H).實施例3.製備(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位3‐嗎啡啉丙酸酯(I‐3)按照合成化合物I‐1的方法，將2‐嗎啡啉乙酸換成3‐嗎啡啉乙酸可製備得到化合物I‐3。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.43(s,1H),7.57(d,J＝8.0Hz,1H),7.36(t,J＝8.0Hz,2H),7.26‐7.23(m,2H),7.20(t,J＝7.6Hz,1H),6.24(d,J＝18.8Hz,1H),5.54(d,J＝8.4Hz,1H),5.28(dd,J1＝9.2Hz,J2＝20.8Hz,1H),5.05‐4.99(m,1H),4.60‐4.55(m,1H),4.34(d,J＝9.6Hz,1H),4.30‐4.25(m,1H),4.03‐3.95(m,1H),3.87(t,J＝6.4Hz,1H),3.69‐3.67(m,4H),2.74‐2.70(m,2H),2.65‐2.62(m,2H),2.48(br,4H),1.40‐1.37(m,6H),1.26(d,J＝6.4Hz,6H).實施例4.製備(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位3‐嗎啡啉丙酸酯4‐甲基苯磺酸鹽(I‐4)化合物I‐3(0.500g,0.75mmol)溶解在DCM(12mL)中，然後加入對甲基苯磺酸(0.142g,0.75mmol)。反應液繼續攪拌0.5h後濃縮，重結晶得到目標鹽(0.465g)。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:10.85(s,1H),7.74(d,J＝8.0Hz,2H),7.48(t,J＝8.4Hz,1H),7.34(t,J＝8.4Hz,2H),7.30‐7.14(m,5H),6.21‐6.06(m,1H),5.67(d,J＝8.4Hz,1H),5.36‐5.22(m,1H),5.03‐4.93(m,1H),4.56‐4.32(m,3H),4.13‐3.85(m,6H),3.60‐3.43(m,6H),3.02‐2.99(m,2H),2.35(s,3H),1.39‐1.32(m,6H),1.21(d,J＝6.4Hz,6H).實施例5.製備(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐嗎啡啉丁酸酯(I‐5)按照合成化合物I‐1的方法，將2‐嗎啡啉乙酸換成4‐嗎啡啉乙酸可製備得到化合物I‐5。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.53(d,J＝8.4Hz,1H),7.33(t,J＝7.6Hz,2H),7.23‐7.19(m,3H),6.21(d,J＝18.4Hz,1H),5.57(d,J＝8.0Hz,1H),5.21(dd,J1＝8.8Hz,J2＝20.0Hz,1H),5.04‐4.97(m,1H),4.56‐4.51(m,1H),4.33‐4.30(m,1H),4.26‐4.21(m,1H),4.06‐3.96(m,1H),3.72‐3.70(m,4H),2.48‐2.46(m,4H),2.42‐2.36(m,2H),1.89‐1.81(m,2H),1.38‐1.32(m,6H),1.24(d,J＝6.4Hz,6H).實施例6.製備(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐嗎啡啉丁酸酯4‐甲基苯磺酸鹽(I‐6)化合物I‐5(0.277g,0.40mmol)溶解在DCM(10mL)中，然後加入對甲基苯磺酸(0.077g,0.40mmol)。反應液繼續攪拌0.5h後濃縮，重結晶得到目標鹽I‐6(0.310g,89％)。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:10.44(s,1H),9.05(s,1H),7.73(d,J＝8.0Hz,2H),7.50(t,J＝8.4Hz,1H),7.33(t,J＝8.4Hz,2H),7.30‐7.11(m,5H),6.14(d,J＝16.4Hz,1H),5.68(d,J＝8.0Hz,1H),5.30‐5.20(m,1H),4.99‐4.96(m,1H),4.45‐4.25(m,4H),3.95‐3.87(m,5H),3.56‐3.47(m,2H),3.21‐3.10(m,2H),2.83‐2.69(m,2H),2.51‐2.34(m,2H),2.25(s,3H),2.12‐2.10(m,2H),1.37‐1.31(m,6H),1.21(d,J＝5.6Hz,6H).實施例7.製備(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐(二甲基氨基)丁酸酯(I‐7)按照合成化合物I‐1的方法，將2‐嗎啡啉乙酸換成4‐(二甲基氨基)丁酸可製備得到化合物I‐7。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.52(d,J＝8.0Hz,1H),7.35(t,J＝7.2Hz,2H),7.23(t,J＝8.4Hz,2H),7.19(d,J＝7.2Hz,1H),6.22(d,J＝18.8Hz,1H),5.54(d,J＝8.0Hz,1H),5.22(dd,J1＝9.2Hz,J2＝20.4Hz,1H),5.03‐4.97(m,1H),4.56‐4.52(m,1H),4.32‐4.31(m,1H),4.26‐4.21(m,1H),4.13‐4.11(m,1H),4.08‐4.03(m,1H),4.00‐3.95(m,1H),2.50(t,J＝7.2Hz,2H),2.42‐2.36(m,3H),2.26(s,6H),1.89‐1.81(m,2H),1.37‐1.32(m,6H),1.23(d,J＝6.4Hz,6H).實施例8.製備(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐(吡啶‐2‐位氨基)丁酸酯鹽酸鹽(I‐8)按照合成化合物I‐1和化合物I‐2的方法，將2‐嗎啡啉乙酸換成4‐((叔丁氧羰基)(吡啶‐2‐位)氨基)丁酸、對甲基苯磺酸換成鹽酸氣可製備得到化合物I‐8。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.00(brs,1H),7.66‐7.64(m,1H),7.55(d,J＝8.0Hz,1H),7.33(t,J＝7.6Hz,2H),7.24(t,J＝8.4Hz,2H),7.17(t,J＝7.6Hz,1H),7.02(dd,J1＝5.6Hz,J2＝6.8Hz,1H),6.22(d,J＝18.4Hz,1H),5.47(dd,J1＝1.2Hz,J2＝20.8Hz,1H),5.20(dd,J1＝9.2Hz,J2＝20.8Hz,1H),5.03‐4.94(m,1H),4.57‐4.54(m,1H),4.31‐4.29(m,1H),4.27‐4.22(m,1H),4.01‐3.98(m,2H),3.96‐3.88(m,1H),2.51(t,J＝8.4Hz,2H),2.05‐1.96(m,2H),1.38‐1.32(m,6H),1.22(d,J＝6.4Hz,6H).實施例9.製備(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐(異喹啉‐1‐位氨基)丁酸酯鹽酸鹽(I‐9)按照合成化合物I‐1和化合物I‐2的方法，將2‐嗎啡啉乙酸換成4‐((叔丁氧羰基)(異喹啉‐1‐位)氨基)丁酸、對甲基苯磺酸換成鹽酸氣可製備得到化合物I‐9。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.38(d,J＝6.0Hz,1H),8.08(d,J＝1.6Hz,1H),7.92(d,J＝8.4Hz,1H),7.86(d,J＝8.0Hz,1H),7.72‐7.68(m,1H),7.63‐7.59(m,2H),7.55(d,J＝8.0Hz,1H),7.33(t,J＝8.8Hz,2H),7.23(t,J＝8.8Hz,2H),7.16(t,J＝7.6Hz,1H),6.21(d,J＝18.4Hz,1H),5.44‐5.42(m,1H),5.21‐5.13(m,1H),5.01‐4.94(m,1H),4.56‐4.52(m,1H),4.29‐4.24(m,2H),4.10‐4.07(m,1H),4.01‐3.93(m,2H),2.60‐2.57(m,2H),2.00‐1.98(m,2H),1.38‐1.34(m,6H),1.21(d,J＝6.4Hz,6H).實施例10.製備((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐3‐(2‐(7H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐7‐位)乙醯氧基)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐丙氨酸異丙酯(I‐10)按照合成化合物I‐1的方法，將2‐嗎啡啉乙酸換成2‐(7H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐7‐位)乙酸可製備得到化合物I‐10。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:9.59(brs,1H),7.49(d,J＝8.0Hz,1H),7.31(t,J＝8.4Hz,2H),7.23‐7.17(m,3H),6.20(d,J＝18.4Hz,1H),5.71(d,J＝7.6Hz,1H),5.03‐4.97(m,1H),4.56‐4.51(m,1H),4.47‐4.43(m,1H),4.36‐4.30(m,1H),4.15‐4.09(m,1H),3.98‐3.90(m,2H),1.40‐1.35(m,6H),1.24(d,J＝6.4Hz,6H).實施例11.製備(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐異丙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位4‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)丁酸酯(I‐11)按照合成化合物I‐1的方法，將2‐嗎啡啉乙酸換成4‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)丁酸可製備得到化合物I‐11。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:9.73(brs,1H),8.30(dd,J1＝4.8Hz,J2＝1.6Hz,1H),7.91(dd,J1＝1.6Hz,J2＝8.0Hz,1H),7.54(d,J＝8.0Hz,1H),7.34(t,J＝8.0Hz,2H),7.23‐7.21(m,3H),7.17(t,J＝7.6Hz,1H),7.07(dd,J1＝4.8Hz,J2＝8.0Hz,1H),6.46(d,J＝3.6Hz,1H),6.22(d,J＝18.4Hz,1H),5.55(d,J＝8.0Hz,1H),5.23(dd,J1＝8.8Hz,J2＝20.4Hz,1H),5.02‐4.92(m,1H),4.57‐4.53(m,1H),4.40‐4.36(m,2H),4.29‐4.24(m,2H),4.13‐4.08(m,1H),4.03‐3.93(m,1H),2.44(t,J＝6.8Hz,2H),2.26‐2.20(m,2H),1.38‐1.35(m,6H),1.21(d,J＝6.4Hz,6H).實施例12.製備((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐3‐(2‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)乙醯氧基)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐丙氨酸異丙酯(I‐12)按照合成化合物I‐1的方法，將2‐嗎啡啉乙酸換成2‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)乙酸可製備得到化合物I‐12。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.68(brs,1H),8.29(dd,J1＝4.8Hz,J2＝1.6Hz,1H),7.93(dd,J1＝1.6Hz,J2＝7.6Hz,1H),7.47(d,J＝8.8Hz,1H),7.31(t,J＝8.0Hz,2H),7.25‐7.14(m,4H),7.09(dd,J1＝4.8Hz,J2＝8.0Hz,1H),6.54(d,J＝3.6Hz,1H),6.18(d,J＝18.4Hz,1H),5.50(d,J＝8.4Hz,1H),5.20(s,2H),4.96‐4.90(m,1H),4.53‐4.48(m,1H),4.30‐4.23(m,2H),3.94‐3.89(m,2H),1.36‐1.31(m,6H),1.17(d,J＝6.0Hz,6H).實施例13.製備((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐((3‐嗎啡啉丙醯)氧基)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐纈氨酸甲酯(I‐13)化合物I‐13按照下列流程製備：在‐50℃下向苯基二氯磷酸酯(2.005g,9.5mmol)的DCM(15mL)溶液中加入三乙胺(5.235g,51.8mmol)和五氟苯酚(1.595g,8.6mmol)的DCM(20mL)溶液。反應液攪拌20分鐘後滴加化合物13‐1(0.980g,8.6mmo和三乙胺(0.872g,8.6mmol)的DCM(15mL)溶液。加畢繼續在‐50℃攪拌3小時。旋幹溶劑，EA(50mL)萃取，合併的有機層依次用水洗(2x50mL)和飽和食鹽水洗(50mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮後柱層析純化得到油狀的目標中間體13‐2(3.100g)。0℃攪拌下，向起始原料13‐3(0.200g,0.77mmol,J.Med.Chem.2005,48,5504‐5508)的無水THF(10mL)溶液中滴加叔丁基氯化鎂(1.62mL,1.6mmol)。繼續攪拌30分鐘後，滴加中間體13‐2(0.350g,0.77mmol)的無水THF(5mL)溶液。0℃繼續攪拌1小時後自然升至室溫攪拌18小時。加入飽和氯化銨溶液(50mL)淬滅後用EA(2x50mL)萃取。合併的有機層依次用水洗、飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮後柱層析純化得到目標化合物13‐4(0.165g,40％)。化合物13‐4(0.165g,0.31mmol)，化合物2(0.051g,0.31mmol)和DiPEA(0.080g,0.62mmol)溶解在DCM(8mL)中。室溫下攪拌5分鐘後，加入TBTU(0.119g,0.37mmol)，反應液攪拌20小時。旋幹溶劑，EA(50mL)萃取，合併的有機層依次用水洗(2x30mL)和飽和食鹽水洗(30mL)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮後柱層析純化得到目標產物I‐13(0.108g,54％)。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.12(s,1H),7.52(d,J＝8.0Hz,1H),7.31(t,J＝8.0Hz,2H),7.23‐7.15(m,3H),6.21(d,J＝19.2Hz,1H),5.52(d,J＝8.4Hz,1H),5.24(dd,J1＝9.2Hz,J2＝20.8Hz,1H),4.58‐4.54(m,1H),4.32‐4.23(m,2H),3.81‐3.77(m,1H),3.67‐3.65(m,7H),2.72‐2.69(m,2H),2.63‐2.60(m,2H),2.46(br,4H),2.07‐2.02(m,1H),1.37(d,J＝22.4Hz,3H),0.93‐0.85(m,6H).實施例14.製備(2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐2‐((((S)‐(((S)‐1‐乙氧基‐1‐酮丙烷‐2‐位)氨基)(苯氧基)磷醯)氧)甲基)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐3‐位3‐嗎啡啉丙酸酯(I‐14)按照合成化合物I‐13的方法，將化合物13‐1換成L‐丙氨酸乙酯可製備得到化合物I‐14。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.45(s,1H),7.53(d,J＝8.0Hz,1H),7.35‐7.32(m,2H),7.26‐7.23‐7.16(m,3H),6.21(d,J＝18.8Hz,1H),5.53(d,J＝8.4Hz,1H),5.25(dd,J1＝9.2Hz,J2＝20.4Hz,1H),4.57‐4.52(m,1H),4.35‐4.24(m,2H),4.20‐4.11(m,2H),4.06‐3.96(m,1H),3.87‐3.81(m,1H),3.69‐3.65(m,4H),2.71‐2.69(m,2H),2.64‐2.61(m,2H),2.42(brs,4H),1.42‐1.37(m,6H),1.26(t,J＝7.2Hz,3H).實施例15.製備((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐(((3‐嗎啡啉丙基)氨基甲醯)氧)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐丙氨酸異丙酯(I‐15)化合物I‐15按照下列流程製備：化合物15‐1(0.144g,1.0mmol)和DiPEA(0.300g,2.3mmol)溶解在DCM(12mL)中。0℃下分批加入固體三光氣(0.158g,0.53mmol)後繼續攪拌3小時。旋幹溶劑後將殘餘物重新溶解在DCM(10mL)中。0℃下將叔丁基氯化鎂(0.20ml,0.2mmol)滴加到起始原料1(0.085g,0.16mmol)的無水DCM(10mL)中。攪拌30分鐘後，將上述中間體15‐2的DCM(10mL)溶液滴加到反應液中。保溫繼續攪拌一小時後自然升至室溫反應過夜。加入飽和氯化銨溶液(30mL)淬滅後用EA(2x30mL)萃取。合併的有機層依次用水洗、飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮後柱層析純化得到目標化合物I‐15(0.068g,61％)。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.53(d,J＝8.0Hz,1H),7.34‐7.30(m,2H),7.22(d,J＝8.0Hz,2H),7.15(t,J＝7.2Hz,1H),6.50(t,J＝5.2Hz,1H),6.22(d,J＝18.8Hz,1H),5.44(d,J＝8.0Hz,1H),5.09(dd,J1＝9.2Hz,J2＝21.2Hz,1H),5.02‐4.95(m,1H),4.57‐4.53(m,1H),4.33‐4.24(m,3H),4.05‐3.97(m,1H),3.75‐3.72(m,4H),3.38‐3.31(m,1H),3.29‐3.21(m,1H),2.58‐2.46(m,6H),1.75‐1.72(m,2H),1.38‐1.32(m,6H),1.22(d,J＝6.0Hz,6H).實施例16.製備((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基‐3‐(((3‐嗎啡啉丙基)氨基甲醯)氧)四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐丙氨酸乙酯(I‐16)按照合成化合物I‐15的方法，將化合物1換成((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐3‐羥基‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐丙氨酸乙酯可製備得到化合物I‐16。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.29(brs,1H),7.54(d,J＝8.4Hz,1H),7.35‐7.31(m,2H),7.22(d,J＝8.4Hz,2H),7.16(t,J＝7.6Hz,1H),6.48(t,J＝4.8Hz,1H),6.22(d,J＝18.8Hz,1H),5.40(d,J＝8.4Hz,1H),5.09(dd,J1＝8.8Hz,J2＝20.8Hz,1H),4.57‐4.53(m,1H),4.28‐4.24(m,2H),4.18‐4.11(m,3H),4.08‐4.01(m,1H),3.72‐3.70(m,4H),3.41‐3.33(m,1H),3.30‐3.23(m,1H),2.55‐2.40(m,6H),1.71‐1.65(m,2H),1.39‐1.33(m,6H),1.24(t,J＝7.2Hz,3H).實施例17.製備((S)‐(((2R,3R,4R,5R)‐3‐(((2‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)乙基)氨基甲醯)氧)‐5‐(2,4‐二酮‐3,4‐二氫嘧啶‐1(2H)‐位)‐4‐氟‐4‐甲基四氫呋喃‐2‐位)甲氧基)(苯氧基)磷醯)‐L‐丙氨酸異丙酯(I‐17)按照合成化合物I‐15的方法，將3‐嗎啡啉丙烷‐1‐胺換成2‐(1H‐吡咯[2,3‐b]吡啶‐1‐位)乙烷‐1‐胺可製備得到化合物I‐17。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:9.06(brs,1H),8.29(dd,J1＝1.2Hz,J2＝4.8Hz,1H),7.91(dd,J1＝1.2Hz,J2＝8.0Hz,1H),7.49(d,J＝8.4Hz,1H),7.34‐7.30(m,2H),7.24‐7.09(m,4H),7.07‐7.05(m,1H),6.46(d,J＝3.6Hz,1H),6.14(t,J＝5.2Hz,1H),5.40(d,J＝8.4Hz,1H),5.01‐4.94(m,1H),4.53‐4.43(m,3H),4.24‐4.16(m,3H),4.03‐3.97(m,1H),3.68‐3.65(m,2H),1.37‐1.30(m,6H),1.21(d,J＝6.4Hz,6H).實施例18.製備化合物I‐3鹽酸鹽(I‐18)化合物I‐3(0.500g,0.75mmol)溶解在iPrOH(2mL)中，然後加入濃鹽酸(0.09ml,1.12mmol)。反應液繼續攪拌1小時後過濾得到目標鹽(0.350g)。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:13.16(brs,1H),8.63(s,1H),7.41(d,J＝8.0Hz,2H),7.28(t,J＝7.6Hz,2H),7.19‐7.09(m,3H),6.07(d,J＝18.0Hz,1H),5.61(d,J＝6.8Hz,1H),5.21(dd,J1＝8.0Hz,J2＝18.4Hz,1H),4.97‐4.88(m,1H),4.41‐4.28(m,3H),4.17‐3.85(m,6H),3.39‐3.09(m,6H),2.98‐2.69(m,2H),1.34‐1.30(m,6H),1.17(d,J＝6.0Hz,6H).實施例19.製備化合物I‐3氫溴酸鹽(I‐19)化合物I‐3(0.500g,0.75mmol)溶解在iPrOH(2mL)中，然後加入氫溴酸(0.07ml,1.12mmol)。反應液繼續攪拌1小時後過濾得到目標鹽(0.400g)。1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:11.96(brs,1H),8.56(s,1H),7.41(d,J＝8.0Hz,2H),7.29(t,J＝7.6Hz,2H),7.19‐7.10(m,3H),6.07(d,J＝18.8Hz,1H),5.64(dd,J1＝2.0Hz,J2＝8.4Hz,1H),5.22(dd,J1＝8.4Hz,J2＝17.2Hz,1H),4.97‐4.87(m,1H),4.43‐4.29(m,3H),4.25‐4.12(m,2H),3.97‐3.82(m,4H),3.42‐3.11(m,6H),2.98‐2.77(m,2H),1.34‐1.29(m,6H),1.17(d,J＝6.4Hz,6H).實施例20.製備化合物I‐3甲磺酸鹽(I‐20)化合物I‐3(0.500g,0.75mmol)溶解在iPrOH(2mL)中，然後加入甲磺酸(0.07ml,1.12mmol)。反應液繼續攪拌1小時後過濾得到目標鹽(0.385g).1H‐NMR(400MHz,DMSO‐d6)δ:11.56(brs,1H),9.74(s,1H),7.72(d,J＝8.0Hz,2H),7.40(t,J＝8.0Hz,2H),7.22‐7.17(m,3H),6.06‐6.00(m,1H),5.68(dd,J1＝2.0Hz,J2＝8.0Hz,1H),5.33(br,1H),4.90‐4.81(m,1H),4.34‐4.24(m,3H),3.99‐3.84(m,2H),3.74‐3.63(m,4H),3.40‐3.30(m,4H),3.12‐2.99(m,4H),2.36(s,3H),1.37‐1.31(m,6H),1.22(d,J＝6.4Hz,3H),1.17(d,J＝6.4Hz,3H).實施例21.製備化合物I‐5鹽酸鹽(I‐21)化合物I‐5(0.500g,0.73mmol)溶解在iPrOH(2mL)中，然後加入濃鹽酸(0.09ml,1.12mmol)。反應液繼續攪拌1小時後過濾得到目標鹽(0.370g).1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:13.55(brs,1H),7.37(d,J＝8.0Hz,2H),7.26(t,J＝7.6Hz,2H),7.16‐7.11(m,3H),6.05(d,J＝18.4Hz,1H),5.64(d,J＝7.2Hz,1H),5.15(dd,J1＝8.4Hz,J2＝18.8Hz,1H),4.97‐4.89(m,1H),4.30‐4.15(m,4H),3.99‐3.85(m,5H),3.40‐3.35(m,2H),3.21‐3.10(m,2H),2.80‐2.30(m,4H),2.05‐1.90(m,2H),1.37‐1.31(m,6H),1.17(d,J＝6.0Hz,6H).實施例22.製備化合物I‐5氫溴酸鹽(I‐22)化合物I‐5(0.500g,0.73mmol)溶解在iPrOH(2mL)中，然後加入氫溴酸(0.07ml,1.12mmol)。反應液繼續攪拌1小時後過濾得到目標鹽(0.410g).1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:11.56(brs,1H),7.37(d,J＝8.0Hz,2H),7.25(t,J＝8.0Hz,2H),7.17‐7.10(m,3H),6.07(d,J＝18.4Hz,1H),5.65(d,J＝7.6Hz,1H),5.17‐5.14(m,1H),4.99‐4.87(m,1H),4.32‐4.13(m,4H),3.98‐3.83(m,5H),3.43‐3.30(m,2H),3.25‐3.08(m,2H),2.83‐2.35(m,4H),2.06‐1.93(m,2H),1.37‐1.30(m,6H),1.17(d,J＝6.0Hz,6H).實施例23.製備化合物I‐5甲磺酸鹽(I‐23)化合物I‐5(0.500g,0.73mmol)溶解在iPrOH(2mL)中，然後加入甲磺酸(0.07ml,1.12mmol)。反應液繼續攪拌1小時後過濾得到目標鹽(0.370g).1H‐NMR(400MHz,DMSO‐d6)δ:11.10(brs,1H),9.70(s,1H),7.67(d,J＝8.0Hz,2H),7.36(t,J＝8.0Hz,2H),7.20‐7.13(m,3H),6.06‐6.01(m,1H),5.69(d,J＝7.6Hz,1H),5.26‐5.20(m,1H),4.92‐4.80(m,1H),4.25‐4.05(m,4H),3.83‐3.65(m,5H),3.42‐3.03(m,4H),2.90‐2.43(m,4H),2.39(s,3H),2.10‐1.90(m,2H),1.37‐1.31(m,6H),1.17(d,J＝6.0Hz,6H)實施例24.製備化合物I‐12鹽酸鹽(I‐24)化合物I‐12(0.500g,0.73mmol)溶解在iPrOH(2mL)中，然後加入濃鹽酸(0.09ml,1.12mmol)。反應液繼續攪拌1小時後過濾得到目標鹽(0.355g).1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.39‐8.34(m,3H),7.45‐7.39(m,3H),7.24‐7.20(m,4H),7.10‐7.04(m,1H),6.80(d,J＝2.8Hz,1H),6.19(d,J＝18.8Hz,1H),5.43‐5.39(m,2H),5.29(dd,J1＝8.4Hz,J2＝18.8Hz,1H),4.98‐4.91(m,1H),4.63‐4.56(m,2H),4.45‐4.43(m,2H),4.03‐3.97(m,1H),1.36‐1.30(m,6H),1.18(d,J＝6.4Hz,6H).實施例25.製備化合物I‐12氫溴酸鹽(I‐25)化合物I‐12(0.500g,0.73mmol)溶解在iPrOH(2mL)中，然後加入氫溴酸(0.07ml,1.12mmol)。反應液繼續攪拌1小時後過濾得到目標鹽(0.390g).1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.54(d,J＝7.6Hz,1H),8.39‐8.37(m,1H),7.56(t,J＝6.0Hz,2H),7.48(d,J＝8.0Hz,1H),7.26‐7.20(m,4H),7.12(t,J＝7.2Hz,1H),6.89(s,1H),6.16‐6.05(m,2H),5.62(d,J＝18.4Hz,1H),5.51(d,J＝8.4Hz,1H),5.32‐5.26(m,2H),5.00‐4.91(m,1H),4.80‐4.72(m,1H),4.64‐4.60(m,1H),4.51‐4.49(m,1H),4.02‐3.98(m,1H),1.39‐1.32(m,6H),1.19(d,J＝6.4Hz,6H).實施例26.製備化合物I‐12甲磺酸鹽(I‐26)化合物I‐12(0.500g,0.73mmol)溶解在iPrOH(2mL)中，然後加入甲磺酸(0.07ml,1.12mmol)。反應液繼續攪拌1小時後過濾得到目標鹽(0.386g).1H‐NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.54‐8.48(m,2H),7.51‐7.44(m,3H),7.30‐7.21(m,4H),7.14‐7.11(m,1H),6.84(d,J＝2.8Hz,1H),6.13(d,J＝18.4Hz,1H),5.65‐5.45(m,2H),5.33‐5.25(m,1H),5.02‐4.88(m,1H),4.56‐4.53(m,2H),4.45‐4.43(m,2H),3.99‐3.89(m,1H),2.89(s,3H),1.41‐1.31(m,6H),1.19(d,J＝6.4Hz,6H).實施例27.Caco‐2透膜性本試驗的目的是利用Caco‐2細胞單層來評價受試化合物的腸透膜性。試驗步驟按照實際測試方法描述如下：1)在37℃水浴中預熱HBSSBuffer；2)從‐20℃冰箱裡取出化合物，超聲幾分鐘(不少於1分鐘)；3)溶液製備：給體溶液緩衝液：含0.3％DMSO和5μMLY的HBSS緩衝液：將150μLDMSO和50μLLY(5mM)加入到50mlHBSS緩衝液(pH7.4)中；含0.1％DMSO和5μMLYHBSS的緩衝液：將50μLDMSO和50μLLY(5mM)加入到50mLHBSS緩衝液(pH7.4)中。受體溶液緩衝液：製備含0.4％DMSO的緩衝液：將200μLDMSO加入到50mlHBSS緩衝液(pH7.4)中。4)將細胞培養皿從培養箱中取出，用HBSS緩衝液清洗細胞單層，然後在室溫條件下測試TEER值。5)在4000rpm下將化合物溶液離心5分鐘，然後載入到受體室；6)基於下表列出的溶劑量添加溶液(確保吸取額外的100uL給體樣品作為T0備份)；7)為了測試頂室LY濃度，從頂室吸取100μL樣品注入一個不透明培養皿作為LYT0；8)37℃預熱頂面培養皿和底面培養皿約5分鐘，然後將頂面培養皿放到底面培養皿上開始轉運；9)培養皿放在37℃培養箱中90分鐘；10)標曲製備；11)培養90分鐘後將頂面培養皿從底面培養皿中分離；12)從底面培養皿中吸取100μL樣品注入到一個不透明培養皿作為LYT90；13)用螢光計測量LYT0和LYT90的LY濃度(485nm激發/535nm輻射)；14)製備LC‐MS/MS樣品:給體樣品(1:10稀釋)：6μL給體樣品+54μL0.4％DMSOHBSS+60μLACN(帶內標利膽酚或丙咪嗪)；受體樣品：60μL受體樣品+60μLCAN(帶內標利膽酚或丙咪嗪)。化合物SofosbuvirI‐1I‐3I‐5I‐8I‐12Papp×106/cm·s‐1(A‐B)0.190.851.161.530.920.63上表總結表明，許多受試化合物顯示了不可預見的優於sofosbuvir的透膜性。實施例28.熱力學水溶性將足夠量的化合物懸浮在水中得到化合物的游離形式的最大終濃度≥10mg·ml-1來測試水溶性。測量pH值前將懸浮液放在25℃下平衡24小時。然後用玻璃纖維C過濾器將懸浮液過濾到96孔板。濾液稀釋101倍。將0.1mg·ml-1DMSO標準溶液做參照，HPLC定量。注射不同體積的標準溶液、稀釋溶液和未稀釋溶液。按照標準注射中主峰相同保留時間來積分峰，用峰面積來計算溶解度。相比於報導的有效治療HCV感染的其他化合物，本發明的化合物顯示了不可預見的更高的溶解度，這使得本發明的化合物可以更理想的用於製備藥物製劑和臨床治療感染HCV的病人。化合物SofosbuvirI‐2I‐4I‐6I‐8I‐9I‐18溶解度(mg/mL)2.06.05.24.7>2.0>2.0>7.0化合物SofosbuvirI‐19I‐20I‐21I‐22I‐23溶解度(mg/mL)2.0>7.03.95.14.23.8實施例29.生物活性在96孔白色/不透明板內，將1breplicon細胞系按照3000個細胞/孔(50μL)鋪板，或在384孔白色/不透明板內，將1breplicon細胞系按照1500個細胞/孔(25μL)鋪板。將50μL化合物(2復孔)加入96孔板或25μL化合物(2復孔)加入384孔板，37℃、5％溼度CO2氣體的細胞培養箱內培養4天。培養後，加入Bright‐Glo試劑(96孔板50μL；384孔板25μL)，螢火蟲螢光素酶報告測試HCV複製。相對空白對照計算抑制百分率。相比於報導的有效治療HCV感染的其他化合物，本發明的化合物不可預見的顯示了低的EC50值，其小於0.2uM甚至0.15uM或0.10uM。所有受試化合物(CC50>100uM)相比於市場上抑制HCV病毒的對照藥物(CC50＝63uM)顯示了更低的細胞毒性。化合物EC50(uM)化合物EC50(uM)化合物EC50(uM)I‐10.312I‐20.235I‐30.156I‐40.083I‐50.145I‐60.099I‐70.075I‐80.187I‐90.290I‐100.133I‐110.539I‐120.082I‐133.28I‐140.159I‐154.87I‐160.694I‐179.86Sofosbuvir0.134實施例30.大鼠PK研究在體內評價了本發明的化合物，口服後測試了肝中活性尿嘧啶三磷酸代謝物的水平。每一個化合物大鼠口服劑量為30mg/kg，肝摘除後肝提取液用於分析其NTP(2』‐脫氧‐2』‐α‐F‐2』‐β‐C‐甲基尿嘧啶三磷酸)水平。下表列出了PK研究結果。相比於報導的有效治療HCV感染的其他化合物，本發明的化合物不可預見的顯示了比sofosbuvir更高的Cmax值。更重要的是，所有受試化合物在肝內有更高的活性NTP代謝物藥物暴露。所有上述結果表明，本發明提供了一種有優秀PK性質的新型抗HCV的抑制劑化合物。上述實例只為說明本發明的技術構思及特點，其目的在於讓熟悉本領域的人能夠了解本發明的內容並據以實施，並不能以此限制本發明的保護範圍。此處提及的所有出版物據此通過引用完整地併入。凡根據本發明精神實質所做的等效變換或修飾，都應涵蓋在本發明的保護範圍之內。當前第1頁1&nbsp2&nbsp3&nbsp