抑制基因表達的方法和組合物的製作方法

2023-06-07 16:42:21

專利名稱：：抑制基因表達的方法和組合物的製作方法
技術領域：
：本發明涉及抑制基因表達的方法和組合物。具體的說，本發明提供基於寡核苷酸的治療藥物以抑制與癌症相關的癌基因。
背景技術：
：癌基因已成為理解癌症生物學的主要概念，可為治療藥物提供有價值的靶標。所有的癌基因及其產物都在細胞內部起作用。這使得基於蛋白質的藥物因其特異性涉及配體-受體識別而無效。反義寡脫氧核苷酸(寡核苷酸)正作為特異性地靶向癌基因的治療化合物而得到研究(Wickstrom，E.(編輯).ProspectsforantisensenucleicacidtherapyofcancerandAids.NewYorkWiley-Liss，Inc.1991；Murray，J.A.H.(編輯).AntisenseRNAandDNANewYorkWiley-Liss，Inc.1992)。反義藥物是修飾的合成寡核苷酸，通過幹擾靶mRNA的核糖體翻譯而起作用。迄今所開發的反義藥物是通過結合靶mRNA並觸發核糖核酸酶H(RNA酶H)降解mRNA來破壞靶mRNA。寡核苷酸的半壽期約為20分鐘，因此它們在大多數細胞中被快速降解(Fisher，T.L.等，NucleicAcidsRes.213857-3865(1993))。為提高寡核苷酸的穩定性，通常對它們進行化學修飾，例如用硫替代其骨架中一個磷酸酯中的氧(硫代磷酸酯)來保護它們(Milligan，J.F.等，J.Med.Chem.361923-1937(1993)；Wagner，R.W.等，Science2601510-1513(1993))。但是，這種修飾只能減慢反義藥物的降解，因此反義藥物需要大劑量才能有效。儘管人們對反義療法的應用充滿樂觀，但反義藥物的使用存在許多嚴重問題，如難以使足量的反義藥物進入細胞中，存在非序列特異性作用，因大量含硫的硫代磷酸酯寡核苷酸和它們不能進入其靶細胞而造成毒性，以及因連續大劑量傳遞而費用高。反義藥物已有的另一問題是它們的活性無特異性。故另外需要不基於蛋白質的靶向癌基因的癌症治療藥物。特別需要在低劑量下有效和對對象無毒的治療藥物。發明概述本發明涉及抑制基因表達的方法和組合物。具體的說，本發明提供基於寡核苷酸的治療藥物以抑制與癌症相關的癌基因。在某些實施方案中，本發明提供包含能在生理條件下與bcl-3基因啟動子區雜交的第一寡核苷酸(例如SEQIDNO1438，3，7，8或9)的組合物。在某些實施方案中，第一寡核苷酸中的至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，第一寡核苷酸中的所有胞嘧啶鹼基都是5-甲基胞嘧啶。在某些優選的實施方案中，第一寡核苷酸與bcl-2基因啟動子區的雜交抑制bcl-2基因的表達。在某些實施方案中，bcl-2基因在細胞的染色體上，第一寡核苷酸與bcl-2基因啟動子區的雜交減少細胞的增殖。在某些實施方案中，所述組合物還包含第二寡核苷酸。在某些實施方案中，第二寡核苷酸中的至少一個(例如所有的)胞嘧啶是5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，所述第二寡核苷酸包括SEQIDNO3，7，8或9，且與第一寡核苷酸不同(例如如果第二寡核苷酸具有SEQIDNO3的序列，則第一寡核苷酸具有SEQIDNO3以外的序列等等)。在某些實施方案中，第二寡核苷酸能與第二基因啟動子區雜交，其中所述第二基因不是bcl-2。在某些實施方案中，第二基因是癌基因(例如c-ki-Ras、c-Ha-Ras、c-myc、Her-2或TGF-α)。在其它實施方案中，本發明提供包含寡核苷酸的組合物，所述寡核苷酸能在包括SEQIDNO1的核苷酸1-40之間、SEQIDNO1的核苷酸161-350之間、SEQIDNO1的核苷酸401-590之間或SEQIDNO1的核苷酸1002-1260之間的位置與bcl-2基因啟動子區雜交。在另外其它實施方案中，本發明提供方法，該方法包括提供寡核苷酸(例如SEQIDNO1438，3，7，8或9)及能夠增殖和包含能夠表達的bcl-2基因的細胞；將寡核苷酸引入到細胞中。在某些實施方案中，引入的結果導致細胞增殖減少。在某些實施方案中，引入的結果導致bcl-2基因表達的抑制。在某些實施方案中，細胞是癌細胞。在其它實施方案中，細胞在宿主動物(例如非人哺乳動物或人)中。在某些實施方案中，寡核苷酸以每公斤體重0.01μg-100g的劑量，優選以每公斤體重1mg-100mg的劑量引入到宿主動物中。在某些實施方案中，寡核苷酸每天一次或多次引入到宿主動物中。在其它實施方案中，寡核苷酸連續引入到宿主動物中。在還其它實施方案中，細胞在細胞培養物中。在某些實施方案中，該方法還包括將試驗化合物引入到細胞中的步驟。在某些實施方案中，試驗化合物是公知的化療藥物。在某些實施方案中，癌症是胰腺癌、結腸癌、乳腺癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前列腺癌、淋巴瘤、卵巢癌或黑素瘤。在某些實施方案中，寡核苷酸中的至少一個(例如所有的)胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，該方法還提供藥物傳遞系統。在某些實施方案中，藥物傳遞系統包含脂質體(例如包含中性脂質或脂質樣化合物的脂質體)。在某些實施方案中，藥物傳遞系統包含細胞靶向成分(例如細胞表面受體或核受體的配體或配體樣分子)。在某些實施方案中，藥物傳遞系統供在體內使用，寡核苷酸和脂質體存在的比例為2∶1-1∶3/1μg-100mg每公斤體重。本發明還提供方法，該方法包括提供能與bcl-2基因啟動子區雜交的寡核苷酸及包含bcl-2基因的細胞；將寡核苷酸引入到細胞中。在某些實施方案中，寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，核苷酸與bcl-2基因啟動子區完全互補。在其它實施方案中，寡核苷酸與bcl-2基因啟動子區部分互補。例如，在某些實施方案中，寡核苷酸含有bcl-2基因啟動子區的一個錯配。在某些優選的實施方案中，寡核苷酸只與bcl-2基因啟動子區互補，不與人基因組的其它區域完全互補。在某些實施方案中，寡核苷酸的長度在10至60個核苷酸之間，優選在15至35個核苷酸之間。在某些實施方案中，該方法還提供藥物傳遞系統。在某些實施方案中，藥物傳遞系統包含脂質體(例如包含中性脂質或脂質樣化合物的脂質體)。在某些實施方案中，藥物傳遞系統包含細胞靶向成分(例如細胞表面受體或核受體的配體或配體樣分子)。在某些實施方案中，藥物傳遞系統供在體內使用，寡核苷酸和脂質體存在的比例為2∶1-1∶3/1μg-100mg每公斤體重。在還其它實施方案中，本發明提供包含寡核苷酸的組合物，該寡核苷酸能在生理條件下與bcl-2基因啟動子區雜交。在某些實施方案中，寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，寡核苷酸與bcl-2基因啟動子區完全互補。在其它實施方案中，寡核苷酸與bcl-2基因啟動子區部分互補。例如，在某些實施方案中，寡核苷酸含有bcl-2基因啟動子區的一個錯配。在某些優選的實施方案中，寡核苷酸只與bcl-2基因啟動子區互補，不與人基因組的其它區域完全互補。在某些實施方案中，寡核苷酸的長度在10至60個核苷酸之間，優選在15至35個核苷酸之間。本發明還在使得bcl-2基因表達被抑制的條件下提供包含能在生理條件下與bcl-2基因啟動子區雜交的寡核苷酸的組合物。本發明另外在使得細胞增殖減少的條件下提供包含寡核苷酸的組合物，該寡核苷酸能在生理條件下與位於細胞染色體上的bcl-2基因啟動子區雜交。本發明也提供包含第一寡核苷酸和第二寡核苷酸的組合物，所述第一寡核苷酸能在生理條件下與bcl-2基因啟動子區雜交，包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶；所述第二寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，本發明提供包含能在生理條件下與bcl-2基因啟動子區雜交的寡核苷酸和說明書的試劑盒，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶；所述說明書說明如何使用試劑盒來減少在染色體上包含bcl-2基因的細胞的增殖或者抑制基因表達。在某些實施方案中，試劑盒中的組合物用以治療對象的癌症，所述說明書包括如何使用試劑盒來治療對象的癌症的說明。在某些實施方案中，說明書是美國食品和藥物管理局(U.S.FoodandDrugAgency)所要求的醫藥品標籤說明。本發明也提供方法，該方法包括提供來自確診患有癌症的對象的生物樣品及用以檢測樣品中是否存在癌基因表達的試劑；檢測樣品中是否存在癌基因表達；向對象中引入能在生理條件下與生物樣品中所表達的癌基因啟動子區雜交的寡核苷酸，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。本發明另外提供抑制對象中的基因表達的方法(例如用以治療癌症或其它高增殖性疾病)，該方法包括提供能在生理條件下與生物樣品中所表達的與癌症或高增殖性疾病相關的基因啟動子區雜交的寡核苷酸，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶；在使得基因表達被抑制的條件下將寡核苷酸給予對象。在某些實施方案中，對象是人。在又其它實施方案中，本發明提供篩選化合物的方法，所述方法包括提供包含可疑癌基因的細胞及能與該基因啟動子區雜交的寡核苷酸；將寡核苷酸引入到細胞中；確定在寡核苷酸存在下相對於寡核苷酸不存在時細胞的增殖是否被抑制。在某些實施方案中，細胞在細胞培養物(例如癌細胞系)中。在其它實施方案中，細胞在宿主動物(例如非人哺乳動物)中。在某些實施方案中，該方法是高通量篩選方法。因此，在某些實施方案中，本發明提供包含能在生理條件下與c-ki-Ras基因啟動子區雜交的第一寡核苷酸(例如SEQIDNO47，48，50或53)的組合物。在某些實施方案中，第一寡核苷酸的至少一個(例如所有的)胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，第一寡核苷酸與c-ki-Ras基因啟動子區的雜交能抑制c-ki-Ras基因的表達。在某些實施方案中，c-ki-Ras基因在細胞的染色體上，第一寡核苷酸與c-ki-Ras基因啟動子區的雜交能減少細胞的增殖。在某些實施方案中，組合物還包含第二寡核苷酸。在某些實施方案中，第二寡核苷酸中的至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。在其它實施方案中，第二寡核苷酸中的所有胞嘧啶鹼基都是5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，第二寡核苷酸包括SEQIDNO47，48，50或53，其中所述第二寡核苷酸與第一寡核苷酸不同(例如如果第二寡核苷酸具有SEQIDNO47的序列，則第一寡核苷酸具有SEQIDNO47以外的序列等等)。在某些實施方案中，第二寡核苷酸能與第二基因啟動子區雜交，其中所述第二基因不是c-ki-Ras。在某些實施方案中，第二基因是癌基因(例如包括但不限於c-Ha-Ras、c-myc、Her-2、TGF-α和bcl-2)。在另外其它實施方案中，本發明提供包含寡核苷酸的組合物，該寡核苷酸能在包括SEQIDNO46的核苷酸1-289之間或SEQIDNO46的核苷酸432-658之間的位置與c-ki-Ras基因啟動子區雜交。在其它實施方案中，本發明提供方法，所述方法包括提供能與c-ki-Ras基因啟動子區雜交的寡核苷酸(例如包含SEQIDNO47，48，50或53的寡核苷酸)及包含能夠表達的c-ki-Ras基因的細胞，其中所述細胞能夠增殖；將寡核苷酸引入到細胞中。在某些實施方案中，寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。在其它實施方案中，寡核苷酸的CG二核苷酸對中的所有胞嘧啶鹼基都是5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，寡核苷酸能在包括SEQIDNO46的核苷酸1-289之間或SEQIDNO46的核苷酸432-658之間的位置與c-ki-Ras基因啟動子區雜交。在某些實施方案中，寡核苷酸的長度在15-30個鹼基之間。在某些優選的實施方案中，引入的結果導致細胞的增殖減少。在某些實施方案中，引入的結果導致c-ki-Ras基因表達的抑制。在某些實施方案中，細胞是癌細胞(例如包括但不限於胰腺癌、結腸癌、乳腺癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前列腺癌、淋巴瘤、卵巢癌和黑素瘤)。在某些實施方案中，細胞是在宿主動物中。在某些實施方案中，宿主動物是非人哺乳動物。在某些實施方案中，寡核苷酸以每公斤體重0.01μg-100g的劑量，優選以每公斤體重1mg-100mg的劑量引入到宿主動物中。在某些實施方案中，寡核苷酸每天一次或多次引入到宿主動物中。在其它實施方案中，寡核苷酸連續引入到宿主動物中(例如持續2小時至2周之間的時間)。在其它實施方案中，細胞在細胞培養物中。在某些實施方案中，該方法還包括將試驗化合物引入到細胞中的步驟。在某些實施方案中，試驗化合物是公知的化療藥物。在某些實施方案中，該方法還提供藥物傳遞系統。在某些實施方案中，藥物傳遞系統包含脂質體(例如包含中性脂質或脂質樣化合物的脂質體)。在某些實施方案中，藥物傳遞系統包含細胞靶向成分(例如細胞表面受體或核受體的配體或配體樣分子)。在某些實施方案中，藥物傳遞系統供在體內使用，寡核苷酸和脂質體存在的比例為2∶1-1∶3/1μg-100mg每公斤體重。在還其它實施方案中，本發明提供包含能在生理條件下與c-ki-Ras基因啟動子區雜交的寡核苷酸的組合物，其中寡核苷酸中的至少一個(例如所有的)胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，寡核苷酸與c-ki-Ras基因啟動子區完全互補。在其它實施方案中，寡核苷酸與c-ki-Ras基因啟動子區部分互補。例如，在某些實施方案中，寡核苷酸含有c-ki-Ras基因啟動子區的一個錯配。在某些優選的實施方案中，寡核苷酸只與c-ki-Ras基因啟動子區互補，不與人基因組的其它區域完全互補。在某些實施方案中，寡核苷酸的長度在10至60個核苷酸之間，優選在15至35個核苷酸之間。本發明還在使得c-ki-Ras基因表達被抑制的條件下提供包含能在生理條件下與c-ki-Ras基因啟動子區雜交的寡核苷酸的組合物。本發明另外在使得細胞增殖減少的條件下提供包含能在生理條件下與位於細胞染色體上的c-ki-Ras基因啟動子區雜交的寡核苷酸的組合物。本發明也提供包含第一寡核苷酸和第二寡核苷酸的組合物，所述第一寡核苷酸能在生理條件下與c-ki-Ras基因啟動子區雜交，包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶；所述第二寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，本發明提供包含能在生理條件下與c-ki-Ras基因啟動子區雜交的寡核苷酸和說明書的試劑盒，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶；所述說明書說明如何使用試劑盒來減少在染色體上包含c-ki-Ras基因的細胞的增殖或者抑制基因表達。在某些實施方案中，試劑盒中的組合物用以治療對象的癌症，所述說明書包括如何使用試劑盒來治療對象的癌症的說明。在某些實施方案中，說明書是美國食品和藥物管理局所要求的醫藥品標籤說明。本發明也提供方法，該方法包括提供來自確診患有癌症的對象的生物樣品及用以檢測樣品中是否存在癌基因表達的試劑；檢測樣品中是否存在癌基因表達；給予對象能在生理條件下與生物樣品中所表達的癌基因啟動子區雜交的寡核苷酸，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。本發明另外提供抑制對象中的基因表達的方法(例如用以治療癌症或其它高增殖性疾病)，該方法包括提供能在生理條件下與生物樣品中所表達的與癌症或高增殖性疾病相關的基因啟動子區雜交的寡核苷酸，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶；在使得基因表達被抑制的條件下將寡核苷酸給予對象。在某些實施方案中，對象是人。在又其它實施方案中，本發明提供篩選化合物的方法，所述方法包括提供包含可疑癌基因的細胞及能與該基因啟動子區雜交的寡核苷酸；將寡核苷酸給予細胞；確定在寡核苷酸存在下相對於寡核苷酸不存在時細胞的增殖是否被抑制。在某些實施方案中，細胞在細胞培養物(例如癌細胞系)中。在其它實施方案中，細胞在宿主動物(例如非人哺乳動物)中。在某些實施方案中，該方法是高通量篩選方法。在某些實施方案中，本發明提供包含能在生理條件下與c-myc基因啟動子區雜交的第一寡核苷酸(例如SEQIDNO110，111，112，113，114或115)的組合物。在某些實施方案中，第一寡核苷酸中的至少一個(例如所有的)胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。在某些優選的實施方案中，第一寡核苷酸與c-myc基因啟動子區的雜交能抑制c-myc基因的表達。在某些實施方案中，c-myc基因在細胞的染色體上，第一寡核苷酸與c-myc基因啟動子區的雜交能減少細胞的增殖。在某些實施方案中，組合物還包含第二寡核苷酸。在某些實施方案中，第二寡核苷酸中的至少一個(例如所有的)胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，第二寡核苷酸包括SEQIDNO110，111，112，113，114或115，其中所述第二寡核苷酸與第一寡核苷酸不同(例如如果第二寡核苷酸具有SEQIDNO110的序列，則第一寡核苷酸具有SEQIDNO110以外的序列等等)。在某些實施方案中，第二寡核苷酸能與第二基因啟動子區雜交，其中所述第二基因不是c-myc。在某些實施方案中，第二基因是癌基因(例如c-ki-Ras、c-Ha-Ras、bcl-2、Her-2或TGF-α)。本發明還提供包含寡核苷酸的組合物，該寡核苷酸能在包括SEQIDNO108的核苷酸3-124之間或SEQIDNO108的核苷酸165-629之間的位置與c-myc基因啟動子區雜交。本發明還提供方法，該方法包括提供能在生理條件下與c-myc基因啟動子區雜交的寡核苷酸(例如SEQIDNO110，111，112，113，114或115)及包含c-myc基因、能夠表達c-myc基因的細胞，其中所述細胞能夠增殖；將寡核苷酸引入到細胞中。在某些實施方案中，引入的結果導致細胞增殖減少。在某些實施方案中，引入的結果導致c-myc基因表達的抑制。在某些實施方案中，細胞是癌細胞。在其它實施方案中，細胞在宿主動物(例如非人哺乳動物或人)中。在某些實施方案中，寡核苷酸以每公斤體重0.01μg-100g的劑量，優選以每公斤體重1mg-100mg的劑量引入到宿主動物中。在某些實施方案中，寡核苷酸每天一次或多次引入到宿主動物中。在其它實施方案中，寡核苷酸連續引入到宿主動物中。在還其它實施方案中，細胞在細胞培養物中。在某些實施方案中，該方法還包括將試驗化合物引入到細胞中的步驟。在某些實施方案中，試驗化合物是公知的化療藥物。在某些實施方案中，癌症是胰腺癌、結腸癌、乳腺癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前列腺癌、淋巴瘤、卵巢癌或黑素瘤。在某些實施方案中，該方法還提供藥物傳遞系統。在某些實施方案中，藥物傳遞系統包含脂質體(例如包含中性脂質或脂質樣化合物的脂質體)。在某些實施方案中，藥物傳遞系統包含細胞靶向成分(例如細胞表面受體或核受體的配體或配體樣分子)。在某些實施方案中，藥物傳遞系統供在體內使用，寡核苷酸和脂質體存在的比例為2∶1-1∶3/1μg-100mg每公斤體重。在某些實施方案中，寡核苷酸中的至少一個、優選所有的胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，寡核苷酸的長度在10至60個核苷酸之間，優選在15至35個核苷酸之間。在某些實施方案中，寡核苷酸在包括SEQIDNO108的核苷酸3-124之間或SEQIDNO108的核苷酸165-629之間的位置與c-myc基因啟動子區雜交。在還其它實施方案中，本發明提供包含能在生理條件下與c-myc基因啟動子區雜交的寡核苷酸的組合物，所述寡核苷酸包含至少一個GC二核苷酸對，其中GC二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，寡核苷酸與c-myc基因啟動子區完全互補。在其它實施方案中，寡核苷酸與c-myc基因啟動子區部分互補。例如，在某些實施方案中，寡核苷酸含有c-myc基因啟動子區的一個錯配。在某些優選的實施方案中，寡核苷酸只與c-myc基因啟動子區互補，不與人基因組的其它區域完全互補。在某些實施方案中，寡核苷酸的長度在10至60個核苷酸之間，優選在15至35個核苷酸之間。本發明還在使得c-myc基因表達被抑制的條件下提供包含能在生理條件下與c-myc基因啟動子區雜交的寡核苷酸的組合物。本發明另外在使得細胞增殖減少的條件下提供包含能在生理條件下與位於細胞染色體上的c-myc基因啟動子區雜交的寡核苷酸的組合物。本發明也提供包含第一寡核苷酸和第二寡核苷酸的組合物，所述第一寡核苷酸能在生理條件下與c-myc基因啟動子區雜交，包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶；所述第二寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，本發明提供包含能在生理條件下與c-myc基因啟動子區雜交的寡核苷酸和說明書的試劑盒，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶；所述說明書說明如何使用試劑盒來減少在染色體上包含c-myc基因的細胞的增殖或者抑制基因表達。在某些實施方案中，試劑盒中的組合物用以治療對象的癌症，所述說明書包括如何使用試劑盒來治療對象的癌症的說明。在某些實施方案中，說明書是美國食品和藥物管理局所要求的醫藥品標籤說明。本發明也提供方法，該方法包括提供來自確診患有癌症的對象的生物樣品及用以檢測樣品中是否存在癌基因表達的試劑；檢測樣品中是否存在癌基因表達；給予對象能在生理條件下與生物樣品中所表達的癌基因啟動子區雜交的寡核苷酸，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。本發明另外提供抑制對象中的基因表達的方法(例如用以治療癌症或其它高增殖性疾病)，該方法包括提供能在生理條件下與生物樣品中所表達的與癌症或高增殖性疾病相關的基因啟動子區雜交的寡核苷酸，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶；在使得基因表達被抑制的條件下將寡核苷酸給予對象。在某些實施方案中，對象是人。在又其它實施方案中，本發明提供篩選化合物的方法，所述方法包括提供包含可疑癌基因的細胞及能與該基因啟動子區雜交的寡核苷酸；將寡核苷酸給予細胞；確定在寡核苷酸存在下相對於寡核苷酸不存在時細胞的增殖是否被抑制。在某些實施方案中，細胞在細胞培養物(例如癌細胞系)中。在其它實施方案中，細胞在宿主動物(例如非人哺乳動物)中。在某些實施方案中，該方法是高通量篩選方法。在某些實施方案中，本發明提供包含能在生理條件下與c-Ha-ras基因啟動子區雜交的第一寡核苷酸(例如SEQIDNO67，68，69，71，73，74，76，78，84，160，161或162)的組合物。在某些實施方案中，第一寡核苷酸中的至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，第一寡核苷酸中的所有胞嘧啶鹼基都是5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，第一寡核苷酸能在生理條件下與c-Ha-ras基因啟動子區雜交。在某些優選的實施方案中，第一寡核苷酸與c-Ha-ras基因啟動子區的雜交能抑制c-Ha-ras基因的表達。在某些實施方案中，c-Ha-ras基因在細胞的染色體上，第一寡核苷酸與c-Ha-ras基因啟動子區的雜交能減少細胞的增殖。在某些實施方案中，組合物還包含第二寡核苷酸。在某些實施方案中，第二寡核苷酸中的至少一個(例如所有的)胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，第二寡核苷酸包括SEQIDNO67，68，69，71，73，74，76，78，84，160，161或162，其中所述第一寡核苷酸與第二寡核苷酸不同(例如如果第二寡核苷酸具有SEQIDNO67的序列，則第一寡核苷酸具有SEQIDNO67以外的序列等等)。在某些實施方案中，第二寡核苷酸能與第二基因啟動子區雜交，其中所述第二基因不是c-Ha-ras。在某些實施方案中，第二基因是癌基因(例如c-ki-Ras、c-myc、bcl-2、Her-2或TGF-α)。在其它實施方案中，本發明提供包含寡核苷酸的組合物，該寡核苷酸能在包括SEQIDNO66的核苷酸21-220之間、SEQIDNO66的核苷酸233-860之間、SEQIDNO66的核苷酸1411-1530之間或SEQIDNO66的核苷酸1631-1722之間的位置與c-Ha-ras基因啟動子區雜交。在另外其它實施方案中，本發明提供方法，該方法包括提供能在生理條件下與c-Ha-ras基因啟動子區雜交的寡核苷酸(例如SEQIDNO67，68，69，71，73，74，76，78，84，160，161或162)及包含能夠表達的c-Ha-ras基因的細胞，其中所述細胞能夠增殖；將寡核苷酸引入到細胞中。在某些實施方案中，寡核苷酸的長度在15-30個鹼基之間。在某些實施方案中，寡核苷酸能在包括SEQIDNO66的核苷酸21-220之間、SEQIDNO66的核苷酸233-860之間、SEQIDNO66的核苷酸1411-1530之間或SEQIDNO66的核苷酸1631-1722之間的位置與c-Ha-ras基因啟動子區雜交。在某些實施方案中，引入的結果導致細胞的增殖減少。在某些實施方案中，引入的結果導致c-Ha-ras基因表達的抑制。在某些實施方案中，細胞是癌細胞。在某些實施方案中，癌症是胰腺癌、結腸癌、乳腺癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前列腺癌、淋巴瘤、卵巢癌和黑素瘤。在其它實施方案中，細胞是在宿主動物(例如非人哺乳動物或人)中。在某些實施方案中，寡核苷酸以每公斤體重0.01μg-100g的劑量，優選以每公斤體重1mg-100mg的劑量引入到宿主動物中。在某些實施方案中，寡核苷酸每天一次或多次引入到宿主動物中。在其它實施方案中，寡核苷酸連續引入到宿主動物中(例如持續2小時至2周之間的時間)。在其它實施方案中，細胞在細胞培養物中。在某些實施方案中，該方法還包括將試驗化合物引入到細胞中的步驟。在某些實施方案中，試驗化合物是公知的化療藥物。在某些實施方案中，該方法還提供藥物傳遞系統。在某些實施方案中，藥物傳遞系統包含脂質體(例如包含中性脂質或脂質樣化合物的脂質體)。在某些實施方案中，藥物傳遞系統包含細胞靶向成分(例如細胞表面受體或核受體的配體或配體樣分子)。在某些實施方案中，藥物傳遞系統供在體內使用，寡核苷酸和脂質體存在的比例為2∶1-1∶3/1μg-100mg每公斤體重。在還其它實施方案中，本發明提供包含能在生理條件下與c-Ha-ras基因啟動子區雜交的寡核苷酸的組合物。在某些實施方案中，寡核苷酸中的至少一個(例如所有的)胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，寡核苷酸與c-Ha-ras基因啟動子區完全互補。在其它實施方案中，寡核苷酸與c-Ha-ras基因啟動子區部分互補。例如，在某些實施方案中，寡核苷酸含有c-Ha-ras基因啟動子區的一個錯配。在某些優選的實施方案中，寡核苷酸只與c-Ha-ras基因啟動子區互補，不與人基因組的其它區域完全互補。在某些實施方案中，寡核苷酸的長度在10至60個核苷酸之間，優選在15至35個核苷酸之間。本發明還在使得c-Ha-ras基因表達被抑制的條件下提供包含能在生理條件下與c-Ha-ras基因啟動子區雜交的寡核苷酸的組合物。本發明另外在使得細胞增殖減少的條件下提供包含能在生理條件下與位於細胞染色體上的c-Ha-ras基因啟動子區雜交的寡核苷酸的組合物。本發明也提供包含第一寡核苷酸和第二寡核苷酸的組合物，所述第一寡核苷酸能在生理條件下與c-Ha-ras基因啟動子區雜交，包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶；所述第二寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，本發明提供包含能在生理條件下與c-Ha-ras基因啟動子區雜交的寡核苷酸和說明書的試劑盒，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶；所述說明書說明如何使用試劑盒來減少在染色體上包含c-Ha-ras基因的細胞的增殖或者抑制基因表達。在某些實施方案中，試劑盒中的組合物用以治療對象的癌症，所述說明書包括如何使用試劑盒來治療對象的癌症的說明。在某些實施方案中，說明書是美國食品和藥物管理局所要求的醫藥品標籤說明。本發明也提供方法，該方法包括提供來自確診患有癌症的對象的生物樣品及用以檢測樣品中是否存在癌基因表達的試劑；檢測樣品中是否存在癌基因表達；給予對象能在生理條件下與生物樣品中所表達的癌基因啟動子區雜交的寡核苷酸，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。本發明另外提供抑制對象中的基因表達的方法(例如用以治療癌症或其它高增殖性疾病)，該方法包括提供能在生理條件下與生物樣品中所表達的與癌症或高增殖性疾病相關的基因啟動子區雜交的寡核苷酸，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶；在使得基因表達被抑制的條件下將寡核苷酸給予對象。在某些實施方案中，對象是人。在又其它實施方案中，本發明提供篩選化合物的方法，所述方法包括提供包含可疑癌基因的細胞及能與該基因啟動子區雜交的寡核苷酸；將寡核苷酸給予細胞；確定在寡核苷酸存在下相對於寡核苷酸不存在時細胞的增殖是否被抑制。在某些實施方案中，細胞在細胞培養物(例如癌細胞系)中。在其它實施方案中，細胞在宿主動物(例如非人哺乳動物)中。在某些實施方案中，該方法是高通量篩選方法。在某些實施方案中，本發明提供包含包括SEQIDNO31，32，35，36，37或38的寡核苷酸的組合物。在某些實施方案中，寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，寡核苷酸的所有CG二核苷酸對中的所有胞嘧啶鹼基都是5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，寡核苷酸能在生理條件下與Her-2基因啟動子區雜交。在某些優選的實施方案中，寡核苷酸與Her-2基因啟動子區的雜交能抑制Her-2基因的表達。在某些實施方案中，Her-2基因在細胞的染色體上，寡核苷酸與Her-2基因啟動子區的雜交能減少細胞的增殖。在某些實施方案中，組合物還包含第二寡核苷酸。在某些實施方案中，第二寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，第二寡核苷酸包括SEQIDNO31，32，35，36，37或38。在某些實施方案中，第二寡核苷酸能與第二基因啟動子區雜交，其中所述第二基因不是Her-2。在某些實施方案中，第二基因是癌基因(例如c-ki-Ras，c-myc，bcl-2，c-Ha-ras或TGF-α)。在其它實施方案中，本發明提供包含寡核苷酸的組合物，該寡核苷酸能在包括SEQIDNO29的核苷酸205-344之間或SEQIDNO29的核苷酸382-435之間的位置與c-myc基因啟動子區雜交。在還其它實施方案中，本發明提供包含能在生理條件下與Her-2基因啟動子區雜交的寡核苷酸的組合物。在另外其它實施方案中，本發明還提供方法，該方法包括提供寡核苷酸(例如SEQIDNO31，32，35，36，37或38)及包含Her-2基因的細胞；將寡核苷酸給予細胞。在某些實施方案中，給予的結果導致細胞增殖減少。在某些實施方案中，給予的結果導致Her-2基因表達的抑制。在某些實施方案中，細胞是癌細胞。在其它實施方案中，細胞在宿主動物(例如非人哺乳動物或人)中。在某些實施方案中，寡核苷酸以每公斤體重0.01μg-100g的劑量，優選以每公斤體重1mg-100mg的劑量引入到宿主動物中。在某些實施方案中，寡核苷酸每天一次或多次引入到宿主動物中。在其它實施方案中，寡核苷酸連續引入到宿主動物中。在還其它實施方案中，細胞在細胞培養物中。在某些實施方案中，該方法還包括給予細胞試驗化合物的步驟。在某些實施方案中，試驗化合物是公知的化療藥物。在某些實施方案中，癌症是胰腺癌、結腸癌、乳腺癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前列腺癌、淋巴瘤、卵巢癌或黑素瘤。在某些實施方案中，寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個、優選所有的胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。本發明還提供方法，所述方法包括提供能與Her-2基因啟動子區雜交的寡核苷酸及包含Her-2基因的細胞；將寡核苷酸給予細胞。在還其它實施方案中，本發明提供包含能在生理條件下與Her-2基因啟動子區雜交的寡核苷酸的組合物，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，寡核苷酸與Her-2基因啟動子區完全互補。在其它實施方案中，寡核苷酸與Her-2基因啟動子區部分互補。例如，在某些實施方案中，寡核苷酸含有Her-2基因啟動子區的一個錯配。在某些優選的實施方案中，寡核苷酸只與Her-2基因啟動子區互補，不與人基因組的其它區域完全互補。在某些實施方案中，寡核苷酸的長度在10至60個核苷酸之間，優選在15至35個核苷酸之間。本發明還在使得Her-2基因表達被抑制的條件下提供包含能在生理條件下與Her-2基因啟動子區雜交的寡核苷酸的組合物。本發明另外在使得細胞增殖減少的條件下提供包含能在生理條件下與位於細胞染色體上的Her-2基因啟動子區雜交的寡核苷酸的組合物。本發明也提供包含第一寡核苷酸和第二寡核苷酸的組合物，所述第一寡核苷酸能在生理條件下與Her-2基因啟動子區雜交，包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶；所述第二寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，本發明提供包含能在生理條件下與Her-2基因啟動子區雜交的寡核苷酸和說明書的試劑盒，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶；所述說明書說明如何使用試劑盒來減少在染色體上包含Her-2基因的細胞的增殖或者抑制基因表達。在某些實施方案中，試劑盒中的組合物用以治療對象的癌症，所述說明書包括如何使用試劑盒來治療對象的癌症的說明。在某些實施方案中，說明書是美國食品和藥物管理局所要求的醫藥品標籤說明。本發明也提供方法，該方法包括提供來自確診患有癌症的對象的生物樣品及用以檢測樣品中是否存在癌基因表達的試劑；檢測樣品中是否存在癌基因表達；給予對象能在生理條件下與生物樣品中所表達的癌基因啟動子區雜交的寡核苷酸，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。本發明另外提供抑制對象中的基因表達的方法(例如用以治療癌症或其它高增殖性疾病)，該方法包括提供能在生理條件下與生物樣品中所表達的與癌症或高增殖性疾病相關的基因啟動子區雜交的寡核苷酸，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶；在使得基因表達被抑制的條件下將寡核苷酸給予對象。在某些實施方案中，對象是人。在又其它實施方案中，本發明提供篩選化合物的方法，所述方法包括提供包含可疑癌基因的細胞及能與該基因啟動子區雜交的寡核苷酸；將寡核苷酸給予細胞；確定在寡核苷酸存在下相對於寡核苷酸不存在時細胞的增殖是否被抑制。在某些實施方案中，細胞在細胞培養物(例如癌細胞系)中。在其它實施方案中，細胞在宿主動物(例如非人哺乳動物)中。在某些實施方案中，該方法是高通量篩選方法。在某些實施方案中，本發明提供包含包括SEQIDNO134，136，139，140，141，142，143或144的寡核苷酸的組合物。在某些實施方案中，寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，寡核苷酸的所有CG二核苷酸對中的所有胞嘧啶鹼基都是5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，寡核苷酸能在生理條件下與TGF-α基因啟動子區雜交。在某些實施方案中，寡核苷酸與TGF-α基因啟動子區的雜交能抑制TGF-α基因的表達。在某些實施方案中，TGF-α基因在細胞的染色體上，寡核苷酸與TGF-α基因啟動子區的雜交能減少細胞的增殖。在某些實施方案中，組合物還包含第二寡核苷酸。在某些實施方案中，第二寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，第二寡核苷酸選自SEQIDNO134，136，139，140，141，142，143或144。在其它實施方案中，第二寡核苷酸能與第二基因啟動子區雜交，其中所述第二基因不是TGF-α。在還其它實施方案中，第二基因是癌基因(例如c-ki-Ras，c-Ha-Ras，bcl-2，Her-2或c-myc)。在其它實施方案中，本發明提供包含寡核苷酸的組合物，該寡核苷酸能在包括SEQIDNO131的核苷酸1-90之間、SEQIDNO131的核苷酸175-219之間、SEQIDNO131的核苷酸261-367之間、SEQIDNO131的核苷酸431-930之間或SEQIDNO131的核苷酸964-1237之間的位置與c-myc基因啟動子區雜交。在另外其它實施方案中，本發明提供包含能在生理條件下與TGF-α基因啟動子區雜交的寡核苷酸的組合物。在還其它實施方案中，本發明提供方法，該方法包括提供寡核苷酸(例如SEQIDNO134，136，139，140，141，142，143或144)及包含TGF-α基因的細胞；將寡核苷酸給予細胞。在某些實施方案中，給予的結果導致細胞增殖減少。在某些實施方案中，給予的結果導致TGF-α基因表達的抑制。在某些實施方案中，細胞是癌細胞。在其它實施方案中，細胞在宿主動物(例如非人哺乳動物或人)中。在某些實施方案中，寡核苷酸以每公斤體重0.01μg-100g的劑量，優選以每公斤體重1mg-100mg的劑量引入到宿主動物中。在某些實施方案中，寡核苷酸每天一次或多次引入到宿主動物中。在其它實施方案中，寡核苷酸連續引入到宿主動物中。在還其它實施方案中，細胞在細胞培養物中。在某些實施方案中，該方法還包括給予細胞試驗化合物的步驟。在某些實施方案中，試驗化合物是公知的化療藥物。在某些實施方案中，癌症是胰腺癌、結腸癌、乳腺癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前列腺癌、淋巴瘤、卵巢癌或黑素瘤。在某些實施方案中，寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個、優選所有的胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。本發明還提供方法，所述方法包括提供能與TGF-α基因啟動子區雜交的寡核苷酸及包含TGF-α基因的細胞；將寡核苷酸給予細胞。在還其它實施方案中，本發明提供包含能在生理條件下與TGF-α基因啟動子區雜交的寡核苷酸的組合物，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，寡核苷酸與TGF-α基因啟動子區完全互補。在其它實施方案中，寡核苷酸與TGF-α基因啟動子區部分互補。例如，在某些實施方案中，寡核苷酸含有TGF-α基因啟動子區的一個錯配。在某些優選的實施方案中，寡核苷酸只與TGF-α基因啟動子區互補，不與人基因組的其它區域完全互補。在某些實施方案中，寡核苷酸的長度在10至60個核苷酸之間，優選在15至35個核苷酸之間。本發明還在使得TGF-α基因表達被抑制的條件下提供包含能在生理條件下與TGF-α基因啟動子區雜交的寡核苷酸的組合物。本發明另外在使得細胞增殖減少的條件下提供包含能在生理條件下與位於細胞染色體上的TGF-α基因啟動子區雜交的寡核苷酸的組合物。本發明也提供包含第一寡核苷酸和第二寡核苷酸的組合物，所述第一寡核苷酸能在生理條件下與TGF-α基因啟動子區雜交，包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶；所述第二寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。在某些實施方案中，本發明提供包含能在生理條件下與TGF-α基因啟動子區雜交的寡核苷酸和說明書的試劑盒，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶；所述說明書說明如何使用試劑盒來減少在染色體上包含TGF-α基因的細胞的增殖或者抑制基因表達。在某些實施方案中，試劑盒中的組合物用以治療對象的癌症，所述說明書包括如何使用試劑盒來治療對象的癌症的說明。在某些實施方案中，說明書是美國食品和藥物管理局所要求的醫藥品標籤說明。本發明也提供方法，該方法包括提供來自確診患有癌症的對象的生物樣品及用以檢測樣品中是否存在癌基因表達的試劑；檢測樣品中是否存在癌基因表達；給予對象能在生理條件下與生物樣品中所表達的癌基因啟動子區雜交的寡核苷酸，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。本發明另外提供抑制對象中的基因表達的方法(例如用以治療癌症或其它高增殖性疾病)，該方法包括提供能在生理條件下與生物樣品中所表達的與癌症或高增殖性疾病相關的基因啟動子區雜交的寡核苷酸，所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶；在使得基因表達被抑制的條件下將寡核苷酸給予對象。在某些實施方案中，對象是人。在又其它實施方案中，本發明提供篩選化合物的方法，所述方法包括提供包含可疑癌基因的細胞及能與該基因啟動子區雜交的寡核苷酸；將寡核苷酸給予細胞；確定在寡核苷酸存在下相對於寡核苷酸不存在時細胞的增殖是否被抑制。在某些實施方案中，細胞在細胞培養物(例如癌細胞系)中。在其它實施方案中，細胞在宿主動物(例如非人哺乳動物)中。在某些實施方案中，該方法是高通量篩選方法。在其它實施方案中，本發明涉及用於癌症治療的方法和組合物。具體的說，本發明提供基於脂質體的癌症治療藥物。因此，在某些實施方案中，本發明提供包含陽離子脂質體、中性脂質體或陰離子脂質體及寡核苷酸(例如由它們組成)的藥物組合物。在某些優選的實施方案中，脂質體是基於心磷脂的陽離子脂質體(例如NEOPHECTIN)。在某些優選的實施方案中，NEOPHECTIN與寡核苷酸的電荷比是6∶1。在其它實施方案中，脂質體包括N-[1-(2，3-二油醯氧基)丙基]-N，N，N-三甲基銨硫酸甲酯(DOTAP)。在某些實施方案中，本發明提供包含寡核苷酸(例如能與癌基因啟動子區雜交的寡核苷酸)和第一藥物組合物及包含任選的第二藥物組合物的試劑盒，所述第一藥物組合物包含陽離子脂質體、中性脂質體或陰離子脂質體(例如由它們組成)，其中所述第二藥物組合物包含公知的化療藥物(例如TAXOTERE、TAXOL或長春新鹼)，且其中所述公知的化療藥物與第一藥物組合物分開配製。在某些實施方案中，化療藥物的存在量小於標準劑量的二分之一，更優選小於三分之一、甚至更優選小於四分之一、還更優選小於十分之一、再更優選小於標準劑量的一百分之一。在另外其它實施方案中，本發明提供方法，所述方法包括提供由陽離子脂質體、中性脂質體或陰離子脂質體和寡核苷酸(例如能與癌基因啟動子區雜交的寡核苷酸)組成的藥物組合物；將藥物組合物暴露給癌細胞。在某些優選的實施方案中，脂質體是基於心磷脂的陽離子脂質體(例如NEOPHECTIN)。在某些優選的實施方案中，NEOPHECTIN與寡核苷酸的電荷比是6∶1。在其它實施方案中，脂質體包含N-[1-(2，3-二油醯氧基)丙基]-N，N，N-三甲基銨硫酸甲酯(DOTAP)。在某些實施方案中，癌細胞是前列腺癌細胞、卵巢癌細胞、乳腺癌細胞、白血病細胞或淋巴瘤細胞。在某些實施方案中，細胞在宿主動物(例如人)中。在某些實施方案中，藥物組合物每天一次或多次引入到宿主動物中(例如連續引入)。在某些實施方案中，該方法還包括給予對象公知的化療藥物(例如TAXOTERE、TAXOL或長春新鹼)的步驟，其中所述公知的化療藥物與陽離子脂質體、中性脂質體或陰離子脂質體分開配製。在優選的實施方案中，所述公知的化療藥物與藥物組合物分開給予。在某些實施方案中，化療藥物的存在量小於標準劑量的二分之一，更優選小於三分之一、甚至更優選小於四分之一、還更優選小於十分之一、再更優選小於標準劑量的一百分之一。附圖簡述圖1顯示bcl-2基因的核酸序列(SEQIDNO1)。圖2顯示用於本發明某些實施方案的bcl-2反義基因的序列。X指甲基化的C核苷酸。圖3顯示c-erbB-2(Her-2)基因的核酸序列(SEQIDNO29)。圖4顯示用於本發明某些實施方案的c-erbB-2反義基因的序列。X指甲基化的C核苷酸。圖5顯示c-ki-Ras基因的核酸序列(SEQIDNO46)。圖6顯示用於本發明某些實施方案的c-ki-Ras反義基因的序列。X指甲基化的C核苷酸。圖7顯示c-Ha-Ras基因的核酸序列(SEQIDNO66)。圖8顯示用於本發明某些實施方案的c-Ha-Ras反義基因的序列。X指甲基化的C核苷酸。圖9顯示c-myc基因的核酸序列(SEQIDNO108)。圖10顯示用於本發明某些實施方案的c-myc反義基因的序列。X指甲基化的C核苷酸。圖11顯示TGF-α基因的核酸序列(SEQIDNO131)。圖12顯示用於本發明某些實施方案的TGF-α反義基因的序列。X指甲基化的C核苷酸。圖13顯示用於本發明某些實施方案的c-ki-Ras反義基因對細胞生長的表達的抑制作用。圖14顯示用於本發明某些實施方案的bcl-2反義基因對細胞生長的表達的抑制作用。圖15顯示用於本發明某些實施方案的c-erb-2反義基因對細胞生長的表達的抑制作用。圖16顯示用於本發明某些實施方案的c-Ha-Ras反義基因對細胞生長的表達的抑制作用。圖17顯示用於本發明某些實施方案的c-myc反義基因對細胞生長的表達的抑制作用。圖18顯示用於本發明某些實施方案的TGF-α反義基因對細胞生長的表達的抑制作用。圖19顯示c-ki-Ras反義基因對細胞生長的表達的抑制作用的劑量反應曲線。圖20顯示bcl-2反義基因對FSCCL細胞(A)和MCF-7細胞(B)細胞生長的表達的抑制作用的劑量反應曲線。圖21顯示c-erb-2反義基因對細胞生長的表達的抑制作用的劑量反應曲線。圖22顯示c-Ha-Ras反義基因對細胞生長的表達的抑制作用的劑量反應曲線。圖23顯示c-myc反義基因對細胞生長的表達的抑制作用的劑量反應曲線。圖24顯示TGF-α反義基因對T47D細胞(A)和MDA-MB-231細胞(B)細胞生長的表達的抑制作用的劑量反應曲線。圖25顯示c-ki-Ras反義基因的代表性變體。圖26顯示bcl-2反義基因的代表性變體。圖27顯示c-erb-2反義基因的代表性變體。圖28顯示c-ha-ras反義基因的代表性變體。圖29顯示c-myc反義基因的代表性變體。圖30顯示TGF-α反義基因的代表性變體。圖31顯示靶向Bcl-2的非甲基化寡核苷酸對淋巴瘤細胞的抑制作用。圖32顯示PC-3GFP前列腺癌皮下模型中的腫瘤用本發明組合物處理後的平均腫瘤體積。圖33顯示PC-3GFP前列腺癌皮下模型中的腫瘤用本發明組合物處理後的平均重量。圖34顯示PC-3GFP前列腺癌皮下模型中的腫瘤用本發明組合物處理後的平均腫瘤體積。圖35顯示PC-3GFP前列腺癌皮下模型中的腫瘤用本發明組合物處理後的平均最終腫瘤體積。圖36顯示WSU-DLCL2移植後20天的腫瘤負荷。圖37顯示WSU-DLCL2移植後20天的腫瘤負荷。定義為幫助理解本發明，以下對許多術語和短語進行定義本文所用的術語「其中所述化療藥物的存在量低於標準劑量的二分之一」指低於用以給藥於人的標準劑量範圍的最低值二分之一(例如低於50％，優選低於40％，甚至更優選低於10％，還更優選低於1％)的劑量。在某些實施方案中，標準劑量範圍是生產商所推薦的劑量範圍。在其它實施方案中，標準劑量範圍是本領域的醫師所採用的範圍。在還其它實施方案中，標準劑量範圍是本領域認為屬常規治療標準(normalstandardofcare)的範圍。劑量範圍內的具體劑量由例如對象的年齡、體重和健康情況以及所治療癌症的類型來決定。本文所用的術語「在使得所述基因表達被抑制的條件下」指本發明寡核苷酸能與基因(例如該基因啟動子區)雜交，並相對於不存在寡核苷酸時的轉錄水平能抑制該基因的轉錄達至少10％，優選至少25％，甚至更優選至少50％，還更優選至少90％的條件。本發明並不限於對具體基因的表達的抑制作用。代表性的基因包括但不限於c-ki-Ras、c-Ha-Ras、c-myc、Her-2、TGF-α和bcl-2。本文所用的術語「在使得所述細胞增殖減少的條件下」指當將本發明的寡核苷酸給予細胞(例如癌細胞)時，相對於不存在寡核苷酸時的細胞生長速度能減少細胞生長速度達至少10％，優選至少25％，甚至更優選至少50％，還更優選至少90％的條件。本文所用的術語「表位」指與特定抗體發生接觸的抗原部分。當用蛋白質或蛋白質的片段來免疫宿主動物時，該蛋白質的許多區域都可誘導產生能特異性結合該蛋白質上的特定區域或三維結構的抗體；這些區域或結構稱作「抗原決定簇」。抗原決定簇可與完整抗原(即用以引起免疫反應的「免疫原」)一起競爭與抗體的結合。本文所用的術語「對象」指將成為特定治療的接受者的任何動物(例如哺乳動物)，包括但不限於人類、非人靈長類動物、嚙齒類動物等。通常，在本文中當指人類對象時，術語「對象」和「患者」可互換使用。本文所用的術語「計算機存儲器」和「計算機存儲設備」指計算機處理器可讀的任何存儲介質。計算機存儲器的實例包括但不限於RAM、ROM、計算機晶片、數字視頻光碟(DVD)、壓縮光碟(CD)、硬碟驅動器(HDD)和磁帶。本文所用的術語「計算機可讀介質」指用以存儲和向計算機處理器提供信息(例如數據和指令)的任何設備或系統。計算機可讀介質的實例包括但不限於DVD、CD、硬碟驅動器、磁帶和網絡上流式傳輸媒體的伺服器。本文所用的術語「處理器」和「中央處理器」或「CPU」可互換使用，指能夠從計算機存儲器(例如ROM或其它計算機存儲器)讀取程序並按程序執行一組步驟的設備。本文所用的術語「非人動物」指所有的非人動物，包括但不限於脊椎動物如嚙齒類動物、非人靈長類、綿羊、牛、反芻動物、兔、豬、山羊、馬、犬、貓、猿(ave)等，以及無脊椎動物如果蠅和線蟲。在某些實施方案中，「非人動物」還指原核生物和病毒，如細菌病原體和病毒病原體。本文所用的術語「核酸分子」指任何含核酸的分子，包括但不限於DNA或RNA。該術語涵括了包含任何公知的DNA和RNA鹼基類似物的序列，所述鹼基類似物包括但不限於4-乙醯胞嘧啶、8-羥基-N6-甲基腺苷、吖丙啶基胞嘧啶、假異胞嘧啶、5-(羧基羥基甲基)尿嘧啶、5-氟尿嘧啶、5-溴尿嘧啶、5-羧甲基氨基甲基-2-硫尿嘧啶、5-羧甲基氨基甲基尿嘧啶、二氫尿嘧啶、肌苷、N6-異戊烯基腺嘌呤、1-甲基腺嘌呤、1-甲基假尿嘧啶、1-甲基鳥嘌呤、1-甲基肌苷、2，2-二甲基鳥嘌呤、2-甲基腺嘌呤、2-甲基鳥嘌呤、3-甲基胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶、N6-甲基腺嘌呤、7-甲基鳥嘌呤、5-甲基氨基甲基尿嘧啶、5-甲氧基氨基甲基-2-硫尿嘧啶、β-D-甘露糖基Q核苷(mannosylqueosine)、5′-甲氧基羰基甲基尿嘧啶、5-甲氧基尿嘧啶、2-甲基硫代-N6-異戊烯基腺苷、尿嘧啶-5-羥基乙酸甲酯、尿嘧啶-5-羥基乙酸、oxybutoxosine、假尿嘧啶、Q核苷(queosine)、2-硫代胞嘧啶、5-甲基-2-硫尿嘧啶、2-硫尿嘧啶、4-硫尿嘧啶、5-甲基尿嘧啶、N-尿嘧啶-5-羥基乙酸甲酯、尿嘧啶-5-羥基乙酸、假尿嘧啶、Q核苷、2-硫代胞嘧啶和2，6-二氨基嘌呤。術語「基因」指包含為產生多肽、前體或RNA(例如rRNA、tRNA)所必需的編碼序列的核酸(例如DNA)序列。多肽可由全長編碼序列編碼，或者由編碼序列的任何部分編碼，只要全長多肽或其片段的所需活性或功能特性(例如酶活性、配體結合力、信號轉導、免疫原性等)得以保留。該術語還涵括結構基因的編碼區和在5′和3′末端上位於編碼區附近、距離任一末端約1kb或更長以使該基因符合全長mRNA的長度的各序列。位於編碼區的5′且存在於mRNA上的序列稱為5′非翻譯序列。位於編碼區的3′且存在於mRNA上的序列稱為3′非翻譯序列。術語「基因」涵括cDNA形式和基因組形式兩者的基因。基因組形式或克隆的基因含有被稱為「內含子」或「間插區(interveningregion)」或「間插序列」的非編碼序列隔開的編碼區。內含子是被轉錄成核RNA(hnRNA)的基因區段；內含子可含有調節元件如增強子。內含子被移出或「剪接出」核轉錄物或者說初級轉錄物；因此內含子在信使RNA(mRNA)轉錄物中不存在。mRNA在翻譯過程中起到確定新生多肽的胺基酸序列或順序的作用。本文所用的術語「異源基因」指不在其天然環境中的基因。例如，異源基因包括從一個物種引入到另一物種中的基因。異源基因還包括生物天然所有、但已被以某種方式改變(例如突變、以多重拷貝添加、連接到非天然調節序列等)的基因。異源基因與內源基因的區別在於，異源基因序列通常連接的DNA序列沒有發現與染色體中的基因序列有天然聯繫，或者與在自然界沒有發現的染色體的某些部分有聯繫(例如在通常不表達基因的基因座中表達的基因)。本文所用的術語「基因表達」指將編碼於基因中的遺傳信息通過基因的「轉錄」(例如通過RNA聚合酶的酶促作用)轉變成RNA(例如mRNA、rRNA、tRNA或snRNA)的過程，對於蛋白質編碼基因來說指通過mRNA的「翻譯」轉變成蛋白質的過程。基因表達可在過程中的許多階段進行調節。「上調」或「激活」指能增加基因表達產物(即RNA或蛋白質)的產生的調節，而「下調」或「阻遏」指能減少產生的調節。參與上調或下調的分子(例如轉錄因子)通常分別稱作「激活物」和「阻遏物」。基因組形式的基因除含有內含子外，還可包含位於出現在RNA轉錄物上的序列的5′和3′兩末端上的序列。這些序列稱為「側翼」序列或區域(這些側翼序列位於出現在mRNA轉錄物上的非翻譯序列的5′或3′)。5′側翼區可含有控制或影響基因轉錄的調節序列如啟動子和增強子。3′側翼區可含有指導轉錄的終止、翻譯後切割和聚腺苷酸化的序列。術語「野生型」指從天然來源分離的基因或基因產物。野生型基因是種群中最常觀察到的基因，因此被人為指定為「正常」或「野生型」形式的基因。相反，術語「修飾的」或「突變的」指當與野生型基因或基因產物比較時顯示出序列或功能特性上的修改(即改變的特徵)的基因或基因產物。應指出的是，天然突變體可被分離；這些突變體可通過當與野生型基因或基因產物比較時發現它們具有改變的特徵(包括改變的核酸序列)這一事實來鑑定。本文所用的術語「核酸分子編碼的」、「DNA序列編碼的」和「DNA編碼的」指脫氧核糖核酸鏈上的脫氧核糖核苷酸的順序或序列。這些脫氧核糖核苷酸的順序決定了多肽(蛋白質)鏈上的胺基酸的順序。因此DNA序列編碼胺基酸序列。本文所用的術語「具有編碼基因的核苷酸序列的寡核苷酸」和「具有編碼基因的核苷酸序列的多核苷酸」指包含基因的編碼區的核酸序列，或者換句話說指編碼基因產物的核酸序列。編碼區可以以cDNA、基因組DNA或RNA的形式存在。寡核苷酸或多核苷酸當以DNA形式存在時可以是單鏈(即有義鏈)或雙鏈。如有需要，可將合適的調控元件如增強子/啟動子、剪接點、聚腺苷酸化信號等置於基因編碼區的近鄰，以便於轉錄的適當引發和/或初級RNA轉錄物的正確加工。或者，本發明的表達載體所採用的編碼區可含有內源增強子/啟動子、剪接點、間插序列、聚腺苷酸化信號等，或含有內源和外源控制元件的組合。本文所用的術語「寡核苷酸」指短長度的單鏈多核苷酸鏈。寡核苷酸的長度通常不到200個殘基(例如8-100個)，但是本文所用的該術語也有意涵括更長的多核苷酸鏈(例如長至5000個殘基)。寡核苷酸通常按其長度來稱謂。例如24個殘基的寡核苷酸稱為「24聚體」。寡核苷酸能通過自身雜交或通過與其它多核苷酸雜交形成二級結構和三級結構。這種結構可包括但不限於雙鏈體、髮夾結構、十字形結構、轉角結構和三鏈體。在某些實施方案中，寡核苷酸是「反義基因」。本文所用的術語「反義基因」指能與基因啟動子區雜交的寡核苷酸。在某些實施方案中，反義基因與啟動子的雜交抑制該基因的表達。本文所用的術語「互補」或「互補性」用於指按鹼基配對規則發生聯繫的多核苷酸(即核苷酸的序列)。例如序列「A-G-T」與序列「T-C-A」互補。互補性可以是「部分的」，其中只有某些核酸鹼基根據鹼基配對規則進行配對。或者，核酸之間可存在「完全的」或「總體的」互補性。核酸鏈之間互補的程度對核酸鏈之間雜交的效率和強度具有顯著的影響。這在依賴於核酸之間的結合的擴增反應以及檢測方法中特別重要。本文所用的術語「完全互補」例如當用以指本發明的寡核苷酸時，指其中所有的核苷酸都與靶序列(例如基因)互補的寡核苷酸。本文所用的術語「部分互補」例如當用以指本發明的寡核苷酸時，指其中至少有一個核苷酸不與靶序列互補的寡核苷酸。優選的部分互補寡核苷酸是在生理條件下仍可與靶序列雜交的寡核苷酸。術語「部分互補」指在其內部或任一端具有一個或多個非互補核苷酸的區域的寡核苷酸。在兩端有錯配的寡核苷酸仍可與靶序列雜交。術語「同源性」指互補的程度。可存在部分同源性或完全同源性(即同一性)。部分互補序列是至少部分抑制完全互補核酸分子與靶核酸雜交的核酸分子，是「基本同源的」。完全互補序列與靶序列雜交的抑制情況可用雜交試驗(DNA印跡法或RNA印跡法、溶液雜交等)在低嚴格條件下來檢查。基本同源的序列或探針在低嚴格條件下會與完全同源的核酸分子競爭與靶標的結合(即雜交)並抑制後者與靶標的結合。這並不是說低嚴格條件是允許發生非特異性結合的條件；低嚴格條件要求兩個序列相互間的結合是特異型(即選擇性)相互作用。可用基本不互補(例如同一性低於約30％)的第二靶標來測試非特異性結合的不存在；在不存在非特異性結合時探針不會與第二不互補靶標雜交。術語「基本同源」當用以指雙鏈核酸序列如cDNA或基因組克隆時，指可在上述低嚴格條件下與雙鏈核酸序列的任一鏈或兩條鏈雜交的任何探針。基因可產生多種RNA類型，這是通過初級RNA轉錄物的差別剪接而產生的。屬相同基因的剪接變體的各cDNA會含有具序列同一性或完全同源性的區域(意味著兩條cDNA上存在相同外顯子或相同外顯子的部分)和具完全非同一性的區域(例如意味著在cDNA1上存在外顯子「A」，而cDNA2卻含有外顯子「B」)。由於兩條cDNA含有具序列同一性的區域，它們可能都會與衍生自整個基因或基因部分、含有兩種cDNA上發現的序列的探針雜交；兩種剪接變體因此與這種探針基本同源，且互相基本同源。術語「基本同源」當用以指單鏈核酸序列時，指能在上述低嚴格條件下與單鏈核酸序列雜交的任何探針(即它與單鏈核酸序列互補)。本文所用的術語「雜交」用於指互補核酸的配對。雜交和雜交的強度(即核酸之間發生關聯的強度)受核酸之間的互補程度、所涉及的條件的嚴格性、所形成的雜交體的Tm和核酸內部的G∶C比等因素的影響。將在其結構內部具有互補核酸配對現象的單個分子稱作是「自雜交的」。本文所用的術語「Tm」用於指「解鏈溫度」。解鏈溫度是雙鏈核酸分子群體有一半解離成單鏈的溫度。計算核酸的Tm的方程式是本領域公知的。如標準的參考文獻所指出，當核酸在1MNaCl水溶液中時，通過以下方程式Tm＝81.5+0.41(％G+C)，可簡單計算Tm值的估計值(參見例如Anderson和Young，QuantitativeFilterHybridization，NucleicAcidHybridization)。其它的參考文獻涉及更為複雜的計算法，在Tm的計算中考慮了結構特性以及序列特性。本文所用術語「嚴格」用於指進行核酸雜交的溫度、離子強度、其它化合物如有機溶劑的存在等條件。在「低嚴格條件」下目的核酸序列會與其精確互補序列、有單個鹼基錯配的序列、緊密相關序列(例如有90％或更高同源性的序列)和只有部分同源性的序列(例如有50-90％同源性的序列)雜交。在「中等嚴格條件」下，目的核酸序列只會與其精確互補序列、有單個鹼基錯配的序列和緊密相關序列(例如有90％或更高同源性)雜交。在「高嚴格條件」下，目的核酸序列只會與其精確互補序列和(取決於溫度等條件)有單個鹼基錯配的序列雜交。換句話說，在高嚴格條件下，可提高溫度以排除與有單個鹼基錯配的序列的雜交。「高嚴格條件」當用以指核酸雜交時，包括相當於以下的條件在由5XSSPE(43.8g/lNaCl、6.9g/lNaH2PO4H2O和1.85g/lEDTA，pH用NaOH調至7.4)、0.5％SDS、5XDenhardt試劑和100μg/ml變性鮭精DNA組成的溶液中於42℃下進行結合或雜交，然後在包含0.1XSSPE、1.0％SDS的溶液中於42℃下進行洗滌，使用的探針長度約為500個核苷酸。「中等嚴格條件」當用以指核酸雜交時，包括相當於以下的條件在由5XSSPE(43.8g/lNaCl、6.9g/lNaH2PO4H2O和1.85g/lEDTA，pH用NaOH調至7.4)、0.5％SDS、5XDenhardt試劑和100μg/ml變性鮭精DNA組成的溶液中於42℃下進行結合或雜交，然後在包含1.0XSSPE、1.0％SDS的溶液中於42℃下進行洗滌，使用的探針長度約為500個核苷酸。「低嚴格條件」包括相當於以下的條件在由5XSSPE(43.8g/lNaCl、6.9g/lNaH2PO4H2O和1.85g/lEDTA，pH用NaOH調至7.4)、0.1％SDS、5XDenhardt試劑[50XDenhardt試劑每500ml含5gFicoll(Type400，Pharamcia)、5gBSA(FractionV；Sigma)]和100μg/ml變性鮭精DNA組成的溶液中於42℃下進行結合或雜交，然後在包含5XSSPE、0.1％SDS的溶液中於42℃下進行洗滌，使用的探針長度約為500個核苷酸。本發明不限於長度約500個核苷酸的探針的雜交。本發明還設想使用長度在大約8個核苷酸到數千個(例如至少5000個)核苷酸之間的探針。相關領域的技術人員懂得，可改變嚴格條件用於其它大小的探針(參見例如Anderson和Young，QuantitaiveFilterHybridization，NucleicAcidHybridization及Sambrook等，MolecularCloningALaboratoryManual，ColdSpringHarborPress，NY)。本領域熟知，可採用多種等價條件來組成低嚴格條件；要考慮諸如探針的長度和性質(DNA、RNA、鹼基組成)、靶標的性質(DNA、RNA、鹼基組成、在溶液中存在或固定化等)以及鹽和其它成分(例如是否存在甲醯胺、硫酸葡聚糖、聚乙二醇)的濃度之類的因素，可對雜交溶液加以改變，以產生不同於但等價於以上所列條件的低嚴格雜交條件。另外，本領域知道能促進在高嚴格條件下的雜交的條件(例如提高雜交和/或洗滌步驟的溫度、在雜交溶液中使用甲醯胺等)(參見上文對「嚴格」的定義)。本文所用的術語「生理條件」指近似於或就是動物(例如人)體內條件的具體嚴格條件。代表性的體外用生理條件包括但不限於37℃、95％空氣、5％CO2、哺乳動物細胞培養用的市售培養基(例如可獲自美國馬裡蘭州Gibco公司的DMEM培養基)、5-10％血清(例如牛血清或馬血清)、另外的緩衝液和任選的激素(例如胰島素和表皮生長因子)。術語「分離的」當用以指核酸，如在「分離的寡核苷酸」或「分離的多核苷酸」中時，指鑑別並與其天然來源中通常相關的至少一種成分或汙染物分離的核酸序列。分離核酸所存在的形式或環境不同於其在自然界中發現的形式或環境。相反，非分離核酸作為核酸如DNA和RNA以它們在自然界中存在的狀態被發現。例如，特定DNA序列(例如基因)被發現在宿主細胞染色體上靠近鄰近的基因；RNA序列，如編碼特定蛋白質的特定mRNA序列被發現在細胞中作為與編碼眾多蛋白質的許多其它mRNA的混合物。但是，編碼特定蛋白質的分離核酸舉例來說包括細胞中通常表達特定蛋白質的核酸，該核酸所在的染色體位置與其在天然細胞中所在的位置不同，或者其側翼核酸序列不同於天然所見的側翼核酸序列。分離核酸、分離寡核苷酸或分離多核苷酸可以以單鏈或雙鏈的形式存在。當分離核酸、分離寡核苷酸或分離多核苷酸要用來表達蛋白質時，寡核苷酸或多核苷酸須至少含有有義鏈或編碼鏈(即寡核苷酸或多核苷酸可以是單鏈的)，但可以同時含有有義鏈和反義鏈(即寡核苷酸或多核苷酸可以是雙鏈的)。本文所用的術語「純化的」或「純化」指從樣品中除去某些成分(例如汙染物)。例如，抗體可通過除去汙染性非免疫球蛋白的蛋白質來純化；也可通過除去不能與靶分子結合的免疫球蛋白來純化。非免疫球蛋白的蛋白質的除去和/或不能與靶分子結合的免疫球蛋白的除去，導致樣品中靶標反應性免疫球蛋白的百分比提高。在另一個實例中，重組多肽在細菌宿主細胞中表達，該多肽通過除去宿主細胞蛋白質來純化；樣品中重組多肽的百分比因而提高。「胺基酸序列」和例如「多肽」或「蛋白質」的術語並不意在將胺基酸序列限制於與列舉到的蛋白質分子有關的完全、天然胺基酸序列。術語「天然蛋白質」在本文中用於表示蛋白質不含載體序列所編碼的胺基酸殘基；也就是說，天然蛋白質只含見於天然出現的蛋白質的胺基酸。天然蛋白質可通過重組方法產生，或者可從天然來源分離。術語「部分」在本文中當用以指蛋白質時(如在「特定蛋白質的部分」)，指該蛋白質的片段。片段的大小可在從四個胺基酸殘基到整個胺基酸序列減去一個胺基酸的範圍。術語「DNA印跡」指如下的DNA分析將DNA在瓊脂糖凝膠或丙烯醯胺凝膠上按其大小進行分級，接著將其從凝膠轉移到固相載體如硝基纖維素或尼龍膜上。然後將固定化的DNA用標記探針進行探測，以檢測與所用探針互補的DNA類型。DNA在進行電泳之前可先用限制酶切割。DNA電泳後可在轉移到固相載體之前或轉移過程中進行部分脫嘌呤和變性。DNA印跡是分子生物學家的一種標準工具(J.Sambrook等，MolecularCloningALaboratoryManual，ColdSpringHarborPress，NY，第9.31-9.58頁)。本文所用術語「RNA印跡」指如下的RNA分析將RNA在瓊脂糖凝膠上按其大小進行分級，接著將RNA從凝膠轉移到固相載體如硝基纖維素或尼龍膜上。然後將固定化的RNA用標記探針進行探測，以檢測與所用探針互補的RNA類型。RNA印跡是分子生物學家的一種標準工具(J.Sambrook等，出處同上，第7.39-7.52頁)。術語「蛋白質印跡」指對固定化到載體如硝基纖維素和尼龍膜上的蛋白質(或多肽)的分析。將蛋白質在丙烯醯胺凝膠上跑膠以分離蛋白質，接著將蛋白質從凝膠轉移到固相載體如硝基纖維素或尼龍膜上。然後將固定化的蛋白質暴露於對目的抗原具有反應性的抗體。抗體的結合情況可通過各種方法來檢測，包括使用放射性標記的抗體。本文所用的術語「細胞培養物」指細胞的任何體外培養物。這一術語包括傳代細胞系(例如具有永生表型)、原代細胞培養物、轉化細胞系、有限細胞系(例如非轉化細胞)和體外維持的其它任何細胞群。本文所用術語「真核生物」指可與「原核生物」區別開來的生物。該術語意在涵括所有具有顯示出真核生物的通常特性的細胞的生物，所述通常特性如存在被核膜包圍、內含染色體的真細胞核，存在被細胞膜包圍的細胞器，以及在真核生物中通常觀察到的其它特性。因此，該術語包括但不限於真菌、原生動物和動物(例如人類)。本文所用的術語「體外」指人工環境和指人工環境中發生的過程和反應。體外環境可包括但不限於試管和細胞培養物。「體內」指自然環境(例如動物或細胞)和指自然環境中發生的過程和反應。術語「試驗化合物」和「候選化合物」指作為候選者供用以治療或預防身體功能疾病、病症、障礙或失調(例如癌症)的任何化學實體(chemicalentity)、藥品、藥物等。試驗化合物包括已知和潛在的治療化合物兩者。試驗化合物可通過用本發明的篩選方法進行篩選來確定具有治療作用。在本發明的某些實施方案中，試驗化合物包括反義化合物。本文所用的術語「已知的化療藥物」指已知可用於治療疾病(例如癌症)的化合物。對癌症有效的代表性化療藥物包括但不限於柔紅黴素、放線菌素D、多柔比星、博來黴素、絲裂黴素、氮芥、苯丁酸氮芥、美法侖、環磷醯胺、6-巰基嘌呤、6-硫代鳥嘌呤、阿糖胞苷(CA)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、氟尿苷(5-FUdR)、甲氨喋呤(MTX)、秋水仙鹼、長春新鹼、長春鹼、依託泊苷、替尼泊苷、順鉑和乙烯雌酚(DES)。本文所用的術語「樣品」以其最廣泛的意義使用。在一個意義上，它意在包括從任何來源獲得的樣本或培養物，以及生物樣品和環境樣品。生物樣品可從動物(包括人類)獲得，涵括液體、固體、組織和氣體。生物樣品包括血液製品如血漿、血清等。環境樣品包括環境材料如表面物質、土壤、水、晶體和工業樣品。但這些樣品不能被解釋為對適用於本發明的樣品類型的限制。發明詳述本發明涉及治療癌症的方法和組合物。具體的說，本發明提供基於寡核苷酸的治療藥物以抑制與多種癌症有關的癌基因。本發明並不限於治療特定的癌症。可靶向任何癌症都，包括但不限於乳腺癌。本發明也不限於靶向癌症或癌基因。本發明的方法和組合物適合用於需要抑制其表達的任何基因(例如供治療用或研究用)。I.癌基因靶標在某些實施方案中，本發明提供癌基因的反義基因抑制劑。本發明並不限於抑制特定的癌基因。實際上，本發明涵括許多癌基因(包括但不限於本文所公開的癌基因)的反義基因抑制劑。A.Ras一個已引起許多科學家注意的基因是人原癌基因c-Ha-ras。c-H-ras啟動子區的核酸序列在圖7中顯示。這個基因充當中心調度者的角色，向細胞中傳播化學信號和控制細胞分裂。Ras基因的改變可造成該基因停留在「開」的位置。據認為多達30％的癌症是由ras癌基因造成的，包括結腸癌、肺癌、膀胱癌和乳腺癌(Bos，CancerRes.494682-4689)。因此ras癌基因已成為治療藥物的靶標。有幾份報告顯示，與rasmRNA的多個不同位點互補的寡核苷酸可抑制ras蛋白(ρ21)的合成，造成細胞培養物中細胞增殖速度下降(美國專利第5,576,208號；美國專利第5,582,986號；Daska等，OncogeneRes.5267-275；Brown等，OncogeneRes.4243-252；Saison-Behmoaras等，EMBOJ.101111-1116[1991)]。已證實與c-Ha-rasRNA轉錄物的5′側翼區互補的寡核苷酸能抑制裸鼠的腫瘤生長達14天(Gray等，CancerRes.53577-580)。最近有報告指出，導向c-Ha-rasmRNA的密碼子12中的點突變(G＞C)的反義寡核苷酸抑制細胞增殖，當皮下注射時抑制裸鼠中的腫瘤生長(美國專利第5,576,208號；美國專利第5,582,986號；Schwab等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA9110460-10464；以上各文獻通過引用結合到本文中)。研究者們還報告，在小型臨床試驗中反義藥物能使卵巢腫瘤縮小(Roush等，Science2761192-1194)。B.Her-2HER-2(也稱neu癌基因或erbB-2)癌基因編碼受體樣酪氨酸激酶(RTK)，該激酶因其在幾種人類癌症(Hynes和Stern，Biochim.etBiophy.Acta1198165-184；Dougall等，Oncogene92109-2123)和在哺乳動物發育(Lee等，Nature378394-398)中的作用而得到廣泛的研究。Her-2的啟動子區的核酸序列在圖3中顯示。HER-2蛋白的序列由cDNA測定，該cDNA通過與來自胎盤(Coussens等，Science2301132-1139)和胃癌細胞系(Yamamoto等，Nature319230-234)的表皮生長因子受體(EGFR)mRNA的同源性而得到克隆。已顯示HER-2mRNA長約4.5kb(Coussens等，Science2301132-1139；Yamamoto等，Nature319230-234)，編碼正常和惡性人組織中的185kDa的跨膜糖蛋白(p185HER-2)(Hynes和Steen，Biochim.etBiophys.Acta1198165-184；Dougall等，Oncogene92109-2123)。HER-2的過量表達會引起培養細胞的表型轉化(DiFiore等，Science237178-182；Hudziak等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA847159-7163)，且已將其與乳腺癌和卵巢癌的侵略性臨床進展相關聯(Slamon等，Science235177-182；Slamon等，Science244707-712)。HER-2是癌症中最常發生改變的基因之一。它編碼具有酪氨酸激酶活性的跨膜受體(也稱p185)，是表皮生長因子(EGF)家族成員之一，因此與表皮生長因子受體(EGFR或HER-1)相關。異常HER-2基因表達在很多癌症中都存在，在乳腺癌、卵巢癌和胃癌中最為常見。在所有的人類乳腺癌和卵巢癌中有25-30％存在HER-2過量表達。HER-2過量表達水平與乳腺癌臨床階段、預後和轉移潛能的相關性良好。HER-2過量表達與存活率較低、復發率增高和轉移潛能增加有關。Tan等(CancerRes.，571199)證實，HER-2基因的過量表達會增加乳腺癌細胞的轉移潛能而不提高它們的轉化能力。HER-2的異常表達包括正常HER-2表達的增加和突變型HER-2的表達這兩方面。HER-2原癌基因的激活可通過以下三種機制之任一種而發生點突變、基因擴增和過量表達。基因擴增是最常見的機制。與還需要配體激活以促進轉化的其它EGF家族成員不同，單獨的HER-2過量表達就足以進行轉化(Cohen等，J.Biol.Chem.，27130897)。已採用幾種治療方法來降低HER-2基因產物水平。已用裸鼠乳腺癌模型將5型腺病毒基因產物E1A作為潛在的治療藥物進行研究。該基因產物能通過阻遏HER-2/neu啟動子活性來阻遏HER-2/neu過量表達，並抑制過量表達HER-2/neu的卵巢癌細胞的致瘤潛能。在帶有過量表達HER-2/neu的乳腺癌異種移植物的小鼠中，與對照小鼠相比，通過腺病毒或脂質體傳遞的E1A能顯著抑制腫瘤生長，延遲小鼠存活時間(Chang等，Oncogene14561)。已進行臨床試驗，評估靶向HER-2/neu蛋白產物和FcγRIII(CD16)兩者的胞外域的雙特異性抗體，FcγRIII(CD16)是由人天然殺傷細胞、嗜中性粒細胞和分化的單核吞噬細胞表達的Fcγ受體(Weiner等，J.Hematotherapy，4471)。已發現HER-2的過量表達與對化療抗性的提高有關。因此，HER-2水平高的患者對許多藥物的反應都很差。已將用以抑制HER-2表達的方法與常用的化療藥物結合起來(Ueno等，Oncogene15953)。將5型腺病毒基因產物E1A與紫杉醇結合，在人乳腺癌細胞中顯示出協同作用。Zhang等(Oncogene，12571)證明大黃素(酪氨酸特異性抑制劑)能使非小細胞肺癌(NSCLC)細胞對多種化療藥物敏感，包括順鉑、多柔比星和依託泊苷。發現HER-2抗體可提高他莫昔芬在人乳腺癌細胞中的效力(Witters等，BreastCancerRes.andTreatment，421)。也使用寡核苷酸來研究HER-2的功能。發現靶向HER-2啟動子(mRNA轉錄起始位點上遊的42-69個核苷酸)的三鏈形成寡核苷酸在體外抑制HER-2表達(Ebbinghaus等，J.Clin.Invest.，922433)。Porumb等(CancerRes.，56515)也使用了靶向相同的HER-2啟動子區的三鏈形成寡核苷酸。在培養細胞中觀察到HER-2mRNA和蛋白質水平下降。Juhl等(J.Biol.Chem.，27229482)使用靶向正好位於蛋白質跨膜區下遊的HER-2RNA中心區域的抗HER-2核酶，表現出人卵巢癌細胞中HER-2mRNA和蛋白質水平下降。還觀察到裸鼠的腫瘤生長減少。已將反義方法用作過量表達HER-2的癌症的潛在治療方法。Pegues等(CancerLett.，11773)將反義方向的1.5kbHER-2片段克隆到表達載體中；將此構建物轉染到卵巢癌細胞中導致貼壁不依賴性生長減少。Casalini等(Int.J.Cancer72631)使用幾種含有長度在151bp-415bp之間的HER-2片段的人HER-2反義載體構建物，證明肺腺癌細胞中HER-2蛋白水平和貼壁不依賴性生長得以減少。Colomer等(Br.J.Cancer，70819)證實，靶向翻譯起始密碼子或其緊接下遊的磷酸二酯反義寡核苷酸能抑制人乳腺癌細胞的增殖達60％。Wiechen等(Int.J.Cancer63604)證明，靶向HER-2編碼區(位於翻譯起始密碼子下遊33個核苷酸)的18核苷酸的硫代磷酸酯寡核苷酸能減少卵巢癌細胞的貼壁不依賴性生長。Bertram等(Biochem.Biophys.Res.Commun.，200661)使用靶向翻譯起始區和mRNA翻譯區3′部分序列(其與酪氨酸激酶共有序列具有高度同源性)的反義硫代磷酸酯寡核苷酸，證明人乳腺癌細胞中HER-2蛋白水平下降75％。Liu等(AntisenseandNucleicAcidDevelop.，69)使用了靶向5′加帽位點和編碼區的反義硫代磷酸酯寡核苷酸。靶向5′加帽位點的最有效寡核酸使HER-2蛋白表達減少90％。細胞增殖的減少量也相當。Vaughn等(Nuc.Acids.Res.，244558)使用了靶向HER-2翻譯起始區或其鄰近(在任一側)的硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯和嵌合反義寡核苷酸。靶向翻譯起始區的交替二硫代酯/二酯寡核苷酸的效果比全部硫代磷酸酯寡核苷酸稍好。Brysch等(CancerGeneTher.，199)使用靶向HER-2的翻譯起始密碼子的化學修飾反義寡核苷酸，以減少蛋白質水平並造成人乳腺癌細胞系的生長停滯。C.C-Mycc-myc基因產物由即時早期應答基因編碼，該基因的表達可由多種不同的促細胞分裂劑誘導。c-myc基因啟動子區的核酸序列在圖9中顯示。C-myc表達與導致細胞分裂的信號轉導途徑相關。研究證明，增殖細胞的c-mycmRNA和c-myc蛋白水平比休眠細胞更高。導向人c-myc蛋白的抗體已知能抑制從人細胞分離的細胞核中的DNA合成。相反，基因轉移產生的c-myc組成型表達抑制幾種細胞系的誘導分化。c-myc的組成型表達會使轉基因小鼠易於產生腫瘤。某些研究提示，c-myc基因產物可能在SMC中起促增殖作用。已知大鼠主動脈球囊(balloon)去內皮和損傷會增加血管SMC的c-mycmRNA表達，之後血管SMC才增殖和遷移。同樣，培養物中的SMC當暴露於幾種促細胞分裂劑(包括PDGF、FGF、EGF、IGF-I)和血清時會發生增殖。已發現這些促細胞分裂劑的每一種都能夠增加c-myc蛋白、c-mycmRNA或其兩者在其它細胞系中的表達。另外，已發現血清能提高SMC中的c-mycmRNA水平。Harel-Bellan等(J.Immun.140；2431-2435(1988))證明，與c-mycmRNA互補的反義寡核苷酸能有效抑制其在人T細胞中的翻譯。這些T細胞被妨礙進入細胞分裂的S期。c-myc原癌基因序列在Marcu等，Ann.Rev.Biochem.，61809-860；Watt等，Nature，303725-728[1983)]；Battey等，Cell，34779-787(1983)和Epstein等，NTIS出版物PB93-100576中有描述。D.Bcl2在許多類型的人腫瘤中，包括淋巴瘤和白血病，人bcl-2基因過量表達，且可能與致瘤性有關(Tsujimoto等，Science2281440-1443)。bcl-2啟動子區的核酸序列在圖1中顯示。在所有存在t(14；18)染色體易位的淋巴瘤中，包括大多數濾泡型B細胞淋巴瘤和許多大細胞非何杰金氏淋巴瘤，已發現人bcl-2基因的表達水平很高。在某些不存在t(14；18)染色體易位的白血病中，包括大多數情形的慢性淋巴細胞性白血病，許多前B細胞類型的淋巴細胞性白血病，成神經細胞瘤，鼻咽癌以及前列腺、乳腺和結腸的許多腺癌，也已發現bcl-2基因的表達水平很高。(Reed等，CancerRes.516529；Yunis等，NewEnglandJ.Med.3201047；Campos等，Blood813091-3096；McDonnell等，CancerRes.526940-6944[1992)；Lu等，Int.JCancer5329-35；Bonner等，LabInvest.6843A)。E.TGF-α轉化生長因子-α(TGF-α)是50個胺基酸的多肽。TGF-α啟動子的核酸序列在圖11中顯示。它最初從反轉錄病毒轉化的小鼠細胞系中分離出來，隨後在人腫瘤細胞、在大鼠早期胚胎細胞中和在來自人腦垂體的細胞培養物中鑑定出來。TGF-α與表皮生長因子(EGF)在結構上和功能上兩方面都密切相關，兩者都能結合相同的受體，即表皮生長因子受體(EGFR)。已測定了EGF和TGF-α兩者的序列和三維結構(Campbell等，Prog.GrowthFactorRes.113)。TGF-α是50個胺基酸多肽，與EGF具有約40％的殘基同源性。這兩種肽的特徵都是有三個完好的環(分別表示為A、B和C)，且具有三個分子內二硫鍵。據認為幾種生長因子(包括TGF-α和EGF)通過與表皮生長因子受體(EGF受體)的相互作用來發揮其生物作用。EGF受體屬I型受體酪氨酸激酶。EGF受體及其配體因它們在正常生理過程以及在高增殖性疾病和腫瘤病中的作用而備受關注。TGF-α的體內前體是160個胺基酸殘基的膜結合蛋白(pro-TGF-alpha)，其被切割可產生可溶性化合物(Massague，J.Biol.Chem.，26521393-21396)。這種切割作用能切除由50個胺基酸組成、分子量為6Kd的胞外部分，被認為是一種重要的調節事件(Pandiella等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，881726-1730)，該事件可由佛波酯通過蛋白激酶C作用來刺激(Pandiella等，J.Biol.Chem.，2665769-5773)。培養的人前列腺腫瘤系含有高水平的TGF-αmRNA，能響應TGF-α而增殖(Wilding等，TheProstate，151-12)。TGF-α似乎同時具有自分泌和旁分泌功能，能刺激生理活動如細胞分裂和血管發生。當在轉基因小鼠中被誘導時，TGF-α能產生類似原位癌的上皮增生和病灶性發育異常變化(focaldysplasticchange)(Sandgren等，Cell，611121-1135)。F.c-ki-RASc-Ki-RAS(KRAS)癌基因是遍在表達的。長度超過30kb的KRAS比HRAS或NRAS大得多。c-ki-ras啟動子區的序列在圖5中顯示。雖然HRAS、KRAS和NRAS這三個ras基因具有不同的遺傳結構，但它們都編碼189個胺基酸殘基的蛋白質(一般叫做p21蛋白)。這些基因通過影響它們各自p21的第12個或第61個胺基酸殘基摻入的單點突變來取得惡性特性。KRAS涉及惡性腫瘤比HRAS更為普遍。在一項於NIH3T3轉化系統中對96個人腫瘤或腫瘤細胞系進行的研究中，(Pulciani等，Nature300539(1982)只在T24膀胱癌細胞中發現突變的HRAS基因座，而轉化KRAS基因在8種不同的癌和肉瘤中得到鑑定。Feig等(Science223698(1984))證實在卵巢漿液性囊腺癌中存在激活的KRAS癌基因，該基因在同一患者的正常細胞中不被激活。該轉化基因產物在SDS-聚丙烯醯胺凝膠上顯示的電泳遷移率與其它腫瘤中的KRAS轉化蛋白的遷移率不同。因此，之前未被描述過的突變是造成這一卵巢癌中KRAS激活的原因。為研究癌基因在肺癌中的作用，Rodenhuis等(NewEng.J.Med.317929(1987))在體外擴增步驟之後使用了基於寡核苷酸雜交的試驗。對由胸廓切開術獲得的39個腫瘤樣本的基因組DNA進行了檢查。發現KRAS基因在10個腺癌樣本中有5個是通過密碼子12的點突變激活的。這些腫瘤中有兩個大小在2cm以下，不發生轉移。在15個鱗狀細胞癌、10個大細胞癌、1個類癌瘤、2個肺外原發腫瘤的轉移腺癌和1個小細胞癌中，都沒有觀察到HRAS、KRAS或NRAS突變。在證明是直腸癌的單獨肺轉移的腫瘤中觀察到未突變KRAS基因有大約20倍的擴增。Yanez等(Oncogene1315(1987))在16例結腸癌中的4例、27例肺癌中的2例和8例乳腺癌中的1例中發現了KRAS基因的密碼子12突變；在位置61沒有發現突變。密碼子12的6個可能的胺基酸置換除一個外其它都在鑑定出的7個突變有體現。G.其它癌基因靶標本發明並不限於上述癌基因。本發明的方法適合用於有公知啟動子區的任何癌基因。代表性的癌基因包括但不限於BCR/ABL、ABL1/BCR、ABL、BCL1、CD24、CDK4、EGFR/ERBB-1、HSTF1、INT1/WNT1、INT2、MDM2、MET、MYB、MYC、MYCN、MYCL1、RAF1、NRAS、REL、AKT2、APC、BCL2-ALPHA、BCL2-BETA、BCL3、BCR、BRCA1、BRCA2、CBL、CCND1、CDKN1A、CDKN1C、CDKN2A、CDKN2B、CRK、CRK-II、CSF1R/FMS、DBL、DDOST、DCC、DPC4/SMAD4、E-CAD、E2F1/RBAP、ELK1、ELK3、EPH、EPHA1、E2F1、EPHA3、ERG、ETS1、ETS2、FER、FGR、FLI1/ERGB2、FOS、FPS/FES、FRA1、FRA2、FYN、HCK、HEK、HER3/ERBB-2、ERBB-3、HER4/ERBB-4、HST2、INK4A、INK4B、JUN、JUNB、JUND、KIP2、KIT、KRAS2A、KRAS2B、LCK、LYN、MAS、MAX、MCC、MLH1、MOS、MSH2、MYBA、MYBB、NF1、NF2、P53、PDGFB、PIM1、PTC、RB1、RET、ROS1、SKI、SRC1、TAL1、TGFBR2、THRA1、THRB、TIAM1、TRK、VAV、VHL、WAF1、WNT2、WT1、YES1、ALK/NPM1、AMI1、AXL、FMS、GIP、GLI、GSP、HOXI1、HST、IL3、INT2、KS3、K-SAM、LBC、LMO-1、LMO-2、L-MYC、LYL1、LYT-10、MDM-2、MLH1、MLL、MLM、N-MYC、OST、PAX-5、PMS-1、PMS-2、PRAD-1、RAF、RHOM-1、RHOM-2、SIS、TAL2、TAN1、TIAM1、TSC2、TRK、TSC1、STK11、PTCH、MEN1、MEN2、P57/KIP2、PTEN、HPC1、ATM、XPA/XPG、BCL6、DEK、AKAP13、CDH1、BLM、EWSR1/FLI1、FES、FGF3、FGF4、FGF6、FANCA、FLI1/ERGB2、FOSL1、FOSL2、GLI、HRAS1、HRX/MLLT1、HRX/MLLT2、KRAS2、MADH4、MAS1、MCF2、MLLT1/MLL、MLLT2/HRX、MTG8/RUNX1、MYCLK1、MYH11/CBFB、NFKB2、NOTCH1、NPM1/ALK、NRG/REL、NTRK1、PBX1/TCF3、PML/RARA、PRCA1、RUNX1、RUNX1/CBFA2T1、SET、TCF3/PBX1、TGFB1、TLX1、P53、WNT1、WNT2、WT1、αν-β3、PKCα、TNFα、簇蛋白、存活蛋白、TGFβ、c-fos、c-SRC和INT-I。II.非癌基因靶標本發明並不限於對癌基因的靶向。本發明的方法和組合物可在需要下調其表達的任何基因的靶向中有用。例如，在某些實施方案中，要靶向的基因包括但不限於免疫球蛋白或抗體基因、凝血因子基因、蛋白酶、垂體激素、蛋白酶抑制劑、生長因子、生長調節素(somatomedian)、促性腺素、趨化因子(chemotactin)、趨化因子(chemokine)、血漿蛋白質、血漿蛋白酶抑制劑、白介素、幹擾素、細胞因子、轉錄因子或病原體靶標(例如病毒基因、細菌基因、微生物基因、真菌基因)。具體基因的實例包括但不限於ADAMTS4、ADAMTS5、APOA1、APOE、APP、B2M、COX2、CRP、DDX25、DMC1、FKBP8、GH1、GHR、IAPP、IFNA1、IFNG、IL1、I110、IL12、IL13、IL2、IL4、IL7、IL8、IPW、MAPK14、Mei1、MMP13、MYD88、NDN、PACE4、PRNP、PSEN1、PSEN2、RAD51、RAD51C、SAP、SNRPN、TLR4、TLR9、TTR、UBE3A、VLA-4以及PTP-IB、c-RAF、m-TOR、LDL、VLDL、ApoB-100、HDL、VEGF、rhPDGF-BB、NADs、ICAM-I、MUC1、2-dG、CTL、PSGL-1、E2F、NF-kB、HIF和GCPRs。在其它實施方案中，靶向病原體的基因。代表性的病原體包括但不限於人免疫缺陷病毒、B肝病毒、C肝病毒、A肝病毒、呼吸道合胞病毒、與嚴重急性呼吸症候群相關的的病原體、西尼羅病毒和食物病原體(例如大腸桿菌)。III.DNA甲基化在某些實施方案中，本發明提供在特定位點被甲基化的寡核苷酸治療藥物。本發明並不限於具體的機制。實際上，實施本發明並不需要了解有關機制。但儘管如此，還是設想基因活性調節的一種機制是DNA中胞嘧啶殘基的甲基化。5-甲基胞嘧啶(5-MeC)是DNA中檢測出的唯一一種天然修飾鹼基(Ehrlick等，Science2121350-1357(1981))。雖然不是所有的基因都通過甲基化進行修飾，但許多基因中特定位點或特定區域的低甲基化與活性轉錄相關(Doerfler，Annu.Rev.Biochem.5293-124；Christman，Curr.Top.Microbiol.Immunol.10849-78；Cedar，Cell345503-5513)。體外DNA甲基化能防止無細胞系統中的基因的有效轉錄或轉染基因的瞬時表達。某些特定順式調節區中的胞嘧啶殘基甲基化還可阻斷或增強轉錄因子或阻遏物的結合(Doerfler，出處同上；Christman，出處同上；Cedar，Cell345503-5513(1988)；Tate等，Curr.Opin.Genet.Dev.3225-231；Christman等，VirusStrategies，Doerfler，W.和Bohm，P.(編輯)(VCH，Weinheim，N.Y.)第319-333頁)。已將正常模式的DNA甲基化的破壞與癌症的發展聯繫起來(Christman等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA927347-7351)。腫瘤和腫瘤衍生細胞系的DNA的5-MeC含量通常比正常組織要低(Jones等，Adv.CancerRes401-30)。在多種人腫瘤和動物腫瘤中已檢測出特定癌基因如c-myc、c-Ki-ras和c-Ha-ras的低甲基化現象(Nambu等，Jpn.J.Cancer(Gann)78696-704；Feinberg等，Biochem.Biophys.Res.Commun.11147-54；Cheah等，JNCI731057-1063；Bhave等，Carcinogenesis(Lond)9343-348。在有關人腫瘤進展的一個研究得最多的實例中，證實DNA的低甲基化是結腸癌發展中的早期事件(Goetz等，Science228187-290)。對體內甲基化的幹擾會導致腫瘤形成。已有報告說，給大鼠餵食甲基化抑制劑如L-甲硫氨酸或5-氮雜胞苷(cytodine)，或者通過餵食缺乏lipotrope的飲食造成大鼠5-腺苷甲硫氨酸嚴重不足，會引起大鼠中肝腫瘤的形成(Wainfan等，CancerRes.522071s～2077s)。研究表明，lipotrope極端不足的飲食會造成c-myc、ras和c-fos等基因中的特定位點失去甲基(Dizik等，Carcinogenesis121307-1312)。儘管存在著高水平的DNAMT酶活性，但仍會發生低甲基化(Wainfan等，CancerRes.494094-4097)。持續活性增殖所需的基因在分化過程中隨著甲基化的發生而變得無活性，而組織特異型基因發生低甲基化而有活性。這樣，低甲基化作用可以移動無活性和有活性這兩種狀態之間的平衡。在某些實施方案中，本發明因此利用這種天然現象來提供用以進行特定基因啟動子的位點特異性甲基化的組合物和方法，從而防止某些基因的轉錄和翻譯。在其它實施方案中，本發明提供通過改變基因的甲基化型式來上調目的基因(例如腫瘤抑制基因)的表達的方法和組合物。本發明並不限於使用甲基化寡核苷酸。實際上，本發明也特地設想使用非甲基化寡核苷酸來抑制基因表達。在開發本發明的過程中進行的實驗(參見例如實施例8)證明，靶向Bcl-2的未甲基化寡核苷酸對淋巴瘤細胞生長的抑制水平與甲基化寡核苷酸相當。IV.寡核苷酸在某些實施方案中，本發明提供反義基因寡核苷酸以抑制癌基因的表達。反義基因的代表性設計和生產策略在下文描述。以下描述並不意在限制適合用於本發明的反義基因化合物的範圍。相關領域的技術人員會認識到，其它另外的反義基因也在本發明的範圍之內。A.寡核苷酸設計在某些實施方案中，寡核苷酸根據優選的設計標準進行設計。然後可用本文公開的方法測試這種寡核苷酸的效力。例如，在某些實施方案中，寡核苷酸在至少一個、優選至少兩個、甚至更優選所有的CpG島發生甲基化。在其它實施方案中，寡核苷酸不被甲基化。本發明並不限於具體的機制。實際上，實施本發明並不需要了解有關機制。但儘管如此，還是設想優選的寡核苷酸是具有至少50％GC含量和至少2個GC二核苷酸的寡核苷酸。優選寡核苷酸不發生自雜交。在某些實施方案中，寡核苷酸設計成具有至少1個A或T，以使自雜交現象減至最低。在某些實施方案中，用市售的電腦程式來調查寡核苷酸自雜交的能力。優選的寡核苷酸長度為至少10個、優選至少15個核苷酸，且不超過100個核苷酸。特別優選的寡核苷酸長度為18-24個核苷酸。在某些實施方案中，寡核苷酸包含通用蛋白質結合序列CGCCC和CGCG或其互補序列。也優選寡核苷酸與位於啟動子TATA框上遊的基因啟動子區雜交。還優選寡核苷酸化合物與人基因組的其它區域不完全同源。本發明寡核苷酸化合物與基因組其它區域的同源性可使用可獲得的搜索工具(例如BLAST，可獲自NCBI的網際網路站點)來測定。在某些實施方案中，寡核苷酸設計成可與已知被蛋白質(例如轉錄因子)結合的癌基因啟動子區雜交。本發明的代表性寡核苷酸化合物在圖2、4、6、8、10和12中顯示。本發明並不限於本文描述的寡核苷酸。也可鑑定其它合適的寡核苷酸(例如使用上述標準)。本文所公開寡核苷酸的代表性寡核苷酸變體在圖25-30中顯示。可用任何合適的方法，包括但不限於以下說明性實施例中所述的方法，來測試候選寡核苷酸的效力。使用以下實施例1和2中描述的體外試驗，可評估候選寡核苷酸在各個濃度下防止細胞增殖的能力。特別優選的寡核苷酸是能在低濃度下(例如在本文公開的體外試驗中低於20μM，優選低於10μM)抑制細胞增殖的基因表達的寡核苷酸。B.優選的寡核苷酸區在某些實施方案中，癌基因啟動子區當中的某些區域還進一步確定為用於寡核苷酸雜交的優選區域。在某些實施方案中，這些優選區域稱為「熱區(hotzone)」。在某些優選的實施方案中，根據被證明為有效(參見上文關於寡核苷酸的節)的寡核苷酸化合物和根據上述寡核苷酸優選標準被設想為有效的寡核苷酸化合物，確定熱區。優選的熱區包括包含在各熱區中的各化合物的上遊和下遊10bp，在各化合物的再上遊或下遊40bp增量中具有至少1個或多個CG。在優選的實施方案中，熱區包括包含在熱區中的各寡核苷酸化合物上遊和下遊的最多100bp。在另外的實施方案中，熱區確定在在各啟動子的開始區域。這些熱區根據有效序列或設想序列來確定，優選的最大長度為200bp。根據上述標準，設計了代表性的熱區。這些熱區在表1中顯示。編號基於本發明各圖中描述的序列。C.寡核苷酸的製備和配製任何公知的寡核苷酸合成方法都可用於製備本發明的修飾寡核苷酸。如本發明所教導，在某些實施方案中，在適當情況下通過使用甲基化寡核苷酸將核苷酸dC用5-甲基-dC置換。本發明的修飾或未修飾寡核苷酸可最方便地用任何市售的自動核酸合成儀製備。它們也可從按照客戶規格合成定製寡核苷酸的商業渠道獲得。雖然寡核苷酸是優選的化合物形式，但本發明還包括其它寡聚寡核苷酸化合物，包括但不限於如下文所描述的寡核苷酸模擬物。根據本發明的寡核苷酸化合物優選包含約18至約30個核鹼基(即約18至約30個連接在一起的鹼基)，不過更長或更短的序列也都可用於本發明。可用於本發明的優選化合物的具體實例包括含有修飾骨架或非天然核苷酸間鍵的寡核苷酸。如本說明書所定義，具有修飾骨架的寡核苷酸包括骨架中保留磷原子的寡核苷酸和骨架中沒有磷原子的寡核苷酸。對於本說明書的目的，在其核苷間骨架中沒有磷原子的修飾寡核苷酸也認為是寡核苷酸。優選的修飾寡核苷酸骨架包括例如硫代磷酸酯、手性硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、磷酸三酯、氨基烷基磷酸三酯、甲基和其它烷基膦酸酯(包括3′-亞烷基膦酸酯和手性膦酸酯)、亞膦酸酯、氨基磷酸酯(包括3′-氨基氨基磷酸酯和氨基烷基氨基磷酸酯)、硫羰基氨基磷酸酯、硫羰基烷基膦酸酯、硫羰基烷基磷酸三酯和具有正常3′-5′鍵的硼烷磷酸酯、這些骨架的2′-5連結類似物以及具有反極性即其中鄰近的核苷單元對以3′-5′～5′-3′或2′-5′～5′-2′連接的骨架。還包括各種鹽形式、混合鹽形式和游離酸形式。其中不包含磷原子的優選修飾寡核苷酸骨架，具有通過短鏈烷基或環烷基核苷間鍵、混合雜原子和烷基或環烷基核苷間鍵、或者一個或多個短鏈雜原子或雜環核苷間鍵所形成的骨架。這些骨架包括具有嗎啉代鍵(部分由核苷的糖部分形成)的骨架；矽氧烷骨架；硫化物、亞碸和碸骨架；formacetyl和thioformacetyl骨架；methyleneformacetyl和thioformacetyl骨架；含有烯烴的骨架；氨基磺酸酯骨架；亞甲基亞胺和亞甲基肼骨架；磺酸酯和氨磺醯骨架；醯胺骨架；以及具有混合N、O、S和CH2組成部分的其它骨架。在其它優選的寡核苷酸模擬物中，核苷酸單元的糖和核苷間鍵(即骨架)均被新型基團所置換。鹼基單元被保留，以供與適當的核酸靶化合物雜交。一種這樣的寡聚化合物——一種已證實具有優異的雜交性能的寡核苷酸模擬物，被稱為肽核酸(PNA)。在PNA化合物中，寡核苷酸的糖-骨架被含醯胺的骨架特別是氨基乙基甘氨酸骨架所置換。核鹼基被保留，且與骨架的醯胺部分的氮雜氮原子直接或間接結合。教導如何製備PNA化合物的代表性美國專利包括但不限於美國專利第5,539,082號；第5,714,331號和第5,719,262號，所述每一個都通過引用結合到本文中。PNA化合物的更多教導可參見Nielsen等，Science2541497(1991)。在某些實施方案中，本發明的寡核苷酸是具有硫代磷酸酯骨架的寡核苷酸和具有雜原子骨架的寡核苷，具體的說是以上引用的美國專利第5,489,677號的--CH2、--NH--O--CH2--、--CH2--N(CH3)--O--CH2--[稱為亞甲基(甲基亞胺)或MMI骨架]、--CH2--O--N(CH3)--CH2--、-CH2--N(CH3)--N(CH3)--CH2--和--O--N(CH3)--CH2--CH2--[其中天然磷酸二酯骨架表示為--O--P--O--CH2--]，以及以上引用的美國專利第5,602,240號的醯胺骨架。還優選的是具有以上引用的美國專利第5,034,506號的嗎啉代骨架結構的寡核苷酸。修飾寡核苷酸還可含有一個或多個取代的糖部分。優選的寡核苷酸在2′位包含以下之一OH；F；O-烷基、S-烷基或N-烷基；O-烯基、S-烯基或N-烯基；O-炔基、S-炔基或N-炔基；或O-烷基-O-烷基，其中所述烷基、烯基和炔基可為取代或未取代的C1-C10烷基或者C2-C10烯基和炔基。特別優選O[(CH2)nO]mCH3、O(CH2)nOCH3、O(CH2)nNH2、O(CH2)nCH3、O(CH2)nONH2和O(CH2)nON[(CH2)nCH3)]2，其中n和m為1至約10。其它優選的寡核苷酸在2′位包含以下之一C1-C10低級烷基、取代的低級烷基、烷芳基、芳烷基、O-烷芳基或O-芳烷基、SH、SCH3、OCN、Cl、Br、CN、CF3、OCF3、SOCH3、SO2CH3、ONO2、NO2、N3、NH2、雜環烷基、雜環烷芳基、氨基烷基氨基、多烷基氨基、取代的甲矽烷基、RNA切割基團、報導基團、嵌入劑、用以改善寡核苷酸的藥物動力學性能的基團或者用以改善寡核苷酸的藥效學性能的基團以及具有類似性能的其它取代基。優選的修飾包括2′-甲氧基乙氧基(2′-O--CH2CH2OCH3，也稱′-O-(2-甲氧基乙基)或2′-MOE)(Martin等，Helv.Chim.Acta78486)，即烷氧基烷氧基基團。另外優選的修飾包括2′-二甲基氨基氧基乙氧基(即O(CH2)2ON(CH3)2基團，也稱2′-DMAOE)和2′-二甲基氨基乙氧基乙氧基(本領域也稱2′-O-二甲基氨基乙氧基乙基或2′-DMAEOE，即2′-O--CH2--O--CH2--N(CH2)2)。其它優選的修飾包括2′-甲氧基(2′-O--CH3)、2′-氨基丙氧基(2′-OCH2CH2CH2NH2)和2′-氟(2′-F)。還可在寡核苷酸上的其它位置，特別是在3′末端核苷酸上的糖的3′位置，或者在2′-5′連接寡核苷酸和在5′末端核苷酸的5′位置，造成類似的修飾。寡核苷酸還可具有替換呋喃戊糖(pentofuranosylsugar)的糖類似物如環丁基部分。寡核苷酸還可包含核鹼基(本領域通常簡稱為「鹼基」)修飾或取代。本文所用的「未修飾的」或「天然的」核鹼基包括嘌呤鹼基即腺嘌呤(A)和鳥嘌呤(G)以及嘧啶鹼基即胸腺嘧啶(T)、胞嘧啶(C)和尿嘧啶(U)。修飾的核鹼基包括其它合成核鹼基和天然核鹼基，如5-甲基胞嘧啶(5-me-C)、5-羥基甲基胞嘧啶、黃嘌呤、次黃嘌呤、2-氨基腺嘌呤、腺嘌呤和鳥嘌呤的6-甲基和其它烷基衍生物、腺嘌呤和鳥嘌呤的2-丙基和其它烷基衍生物、2-硫尿嘧啶、2-硫代胸腺嘧啶和2-硫代胞嘧啶、5-滷代尿嘧啶和胞嘧啶、5-丙炔基尿嘧啶和胞嘧啶、6-氮雜尿嘧啶、胞嘧啶和胸腺嘧啶、5-尿嘧啶(假尿嘧啶)、4-硫尿嘧啶，8-滷代、8-氨基、8-硫羥、8-硫代烷基、8-羥基和其它8-取代的腺嘌呤和鳥嘌呤，5-滷代特別是5-溴、5-三氟甲基和其它5-取代的尿嘧啶和胞嘧啶，7-甲基鳥嘌呤和7-甲基腺嘌呤、8-氮雜鳥嘌呤和8-氮雜腺嘌呤、7-去氮雜鳥嘌呤和7-去氮雜腺嘌呤以及3-去氮雜鳥嘌呤和3-去氮雜腺嘌呤。另外的核鹼基包括美國專利第3,687,808號中公開的核鹼基。這些核鹼基中有某些對於提高本發明的寡聚化合物的結合親和力特別有用。這些核鹼基包括5-取代的嘧啶、6-氮雜嘧啶以及N-2、N-6和O-6取代的嘌呤，包括2-氨基丙基腺嘌呤、5-丙炔基尿嘧啶和5-丙炔基胞嘧啶。5-甲基胞嘧啶取代已證實能提高核酸雙鏈體穩定性達0.6-1.2℃，是目前優選的鹼基取代，當與2′-O-甲氧基乙基糖修飾作用結合時尤為如此。本發明寡核苷酸的另一種修飾涉及將一種或多種能增強寡核苷酸的活性、細胞分布或細胞攝取的部分或綴合物化學連接到寡核苷酸上。這種部分包括但不限於脂質部分如膽固醇部分、膽酸、硫醚(例如己基-S-三苯甲基硫醇)、硫代膽固醇、脂族鏈(例如十二烷二醇殘基或十一烷基殘基)、磷脂(例如二-十六烷基-rac-甘油或1，2-二-O-十六烷基-rac-甘油基-S-H-膦酸三乙銨)、聚胺或聚乙二醇鏈或者金剛烷乙酸、棕櫚基部分、或者十八胺或己基氨基-羰基-羥膽甾醇部分。相關領域的技術人員熟知如何產生含有上述修飾的寡核苷酸。本發明並不限於上述反義寡核苷酸。可採用任何合適的修飾或取代。沒有必要讓特定化合物中的所有位置被一致地修飾，事實上，在單個寡核苷酸化合物中乃至在寡核苷酸當中的單個核苷上都可摻入不止一種的上述修飾。本發明還包括包含如下所述的本發明反義化合物的藥物組合物和製劑。D.雞尾酒藥物在某些實施方案中，本發明提供包含兩種或更多種導向基因(例如癌基因)啟動子區的寡核苷酸的雞尾酒藥物。在某些實施方案中，所述兩種寡核苷酸與同一基因的啟動子的不同區域雜交。在其它實施方案中，所述兩種或更多種寡核苷酸與兩種不同的基因的啟動子雜交。本發明並不限於具體的機制。實際上，實施本發明並不需要了解有關機制。但儘管如此，還是設想兩種或更多種本發明化合物的組合所提供的抑制作用比單獨給予各化合物所累積的抑制作用要高。V.研究用途本發明並不限於治療應用。例如，在某些實施方案中，本發明提供將寡核苷酸用作研究工具的組合物和方法。A.試劑盒例如，在某些實施方案中，本發明提供試劑盒，其包含能特異性抑制目的基因的寡核苷酸和任選的已知能表達該基因的細胞系(例如癌細胞系)。這種試劑盒在例如對代謝途徑或對基因在疾病(例如癌症)中的涉及的鑑定上以及在診斷應用上有用。在某些實施方案中，試劑盒還包含緩衝劑和其它必需的試劑以及使用說明書。B.靶標確認在某些實施方案中，本發明提供用於確認基因靶標(例如懷疑與疾病相關的基因)的方法和組合物。例如，在某些實施方案中，用本發明的方法和組合物來下調在大規模篩選應用(例如基因表達陣列)中被鑑定為與疾病相關的基因的表達。對於靶標確認的目的，本發明的方法和組合物適合在體外和體內(例如在非人動物中)使用。在其它實施方案中，本發明化合物在移植研究(例如HLA抑制)中有用。C.藥物篩選在其它實施方案中，本發明的方法和組合物用於藥物篩選應用。例如，在某些實施方案中，將本發明的寡核苷酸給予細胞(例如在培養物中或在非人動物中)，以抑制目的基因的表達。在某些實施方案中，對目的基因的抑制是對生理或疾病狀況的模擬。在其它實施方案中，抑制癌基因。然後將試驗化合物(例如小分子藥物或寡核苷酸模擬物)給予試驗細胞並測試試驗化合物的作用。本發明的試驗化合物可用本領域公知的組合文庫方法中的任何方法來獲得，所述組合文庫方法包括生物文庫；擬肽文庫(具有肽的官能度、可是卻有新型非肽骨架的分子的文庫，所述分子能抵抗酶促降解而仍保持生物活性；參見例如Zuckennann等，J.Med.Chem.372678-85)；空間可定位平行固相或溶液相文庫；需要重疊合(deconvolution)的合成文庫方法；『一珠一化合物』文庫方法；和使用親和層析選擇的合成文庫方法。生物文庫和擬肽文庫方法優選用於肽文庫，而其它四種方法則適用於肽、非肽寡聚物或小分子化合物文庫(Lam(1997)AnticancerDrugDes.12145)。分子文庫的合成方法的實例可在本領域中找到，例如在以下文獻中找到DeWitt等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.SA.906909；Erb等，Proc.Nad.Acad.Sci.USA9111422；Zuckermann等，J.Med.Chem.372678；Cho等，Science2611303；Carrell等，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.33.2059；Carell等，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.332061；和Gallop等，J.Med.Chem.371233。化合物文庫可存在在溶液中(例如Houghten，Biotechniques13412-421)，或者在珠(Lam，Nature35482-84)、晶片(Fodor，Nature364555-556)、細菌或孢子(美國專利第5,223,409號；通過引用結合到本文中)、質粒(Cull等，Proc.Nad.Acad.Sci.USA8918651869)或噬菌體(Scott和Smith，Science249386-390；DevlinScience249404-406；Cwirla等，Proc.Natl.Acad.Sci.876378-6382；Felici，J.Mol.Biol.222301)上。VI.組合物和傳遞在某些實施方案中，本發明的寡核苷酸化合物配製成藥物組合物，以作為藥物傳遞給對象。本發明的新型抗原化合物在治療各種需要抑制基因表達或細胞生長的疾病狀態和狀況中有用。在某些優選的實施方案中，所述化合物用來治療由無控細胞生長導致的疾病狀態，例如包括但不限於癌症。本發明並不限於治療具體的癌症。本發明的寡核苷酸化合物適合於治療各種癌症，包括但不限於乳腺癌、結腸癌、肺癌、胃癌、胰腺癌、膀胱癌、白血病和淋巴瘤。以下討論提供了劑型和劑量的代表性、非限制性實例。A.藥物組合物本發明還提供藥物組合物(例如包含上述寡核苷酸化合物)。根據需要進行局部治療還是全身治療以及根據待治療的區域，本發明的藥物組合物可以以多種方式給藥。給藥可以是局部給藥(包括眼內給藥和黏膜給藥，包括陰道和直腸傳遞)、肺部給藥(例如通過吸入或吹入粉末或氣霧劑給藥，包括通過噴霧器給藥；氣管內、鼻內、表皮和透皮給藥)、口服給藥或胃腸外給藥。胃腸外給藥包括靜脈內、動脈內、皮下、腹膜內給藥或者肌肉內注射或輸注；或者顱內(例如鞘內)或心室內的給藥。用於局部給藥的藥物組合物和製劑可包括透皮貼劑、軟膏劑、洗劑、乳膏劑、凝膠劑、滴劑、栓劑、噴霧劑、液體劑和散劑。常規的藥物載體、含水基料、粉末基料、含油基料、增稠劑等也是必需或適宜的。用於口服給藥的組合物和製劑包括散劑或顆粒劑、水介質或非水介質中的混懸劑或溶液劑、膠囊劑、扁囊劑(sachet)或片劑。增稠劑、矯味劑、稀釋劑、乳化劑、分散助劑或粘合劑也是適宜的。用於胃腸外、鞘內或心室內給藥的組合物和製劑可包括無菌水溶液劑，其中可含有緩衝劑、稀釋劑和其它合適的添加劑，例如但不限於滲透促進劑、載體化合物和其它藥物可接受的載體或賦形劑。本發明的藥物組合物包括但不限於溶液劑、乳劑和含脂質體的製劑。這些組合物可由多種成分形成，包括但不限於預配液體、自乳化固體和自乳化半固體。本發明的藥物製劑可按照醫藥工業公知的常規技術製備，可方便的以單位劑量形式存在。這種技術包括使活性成分與藥物載體或賦形劑結合的步驟。一般如下製備製劑使活性成分與液體載體或微細固體載體或兩者均勻地和緊密地結合，然後如有需要則使產品成型。本發明的組合物可配製成任何多種可能的劑型，例如但不限於片劑、膠囊劑、液體糖漿劑、軟膠囊劑、栓劑和灌腸劑。本發明的組合物還可配製成在水介質、非水介質或混合介質中的混懸劑。水混懸劑還可含有能增加混懸劑的粘度的物質，包括例如羧甲基纖維素鈉、山梨糖醇和/或葡聚糖。混懸劑也可含有穩定劑。在本發明的一個實施方案中，藥物組合物可配製成泡沫劑並以泡沫劑形式使用。藥物泡沫劑包括例如但不限於以下製劑乳劑、微乳劑、乳膏劑、膠凍劑和脂質體劑。這些製劑雖然在性質上基本相似，但在最終產品的成分和稠度上不同。也可將能增強寡核苷酸在細胞水平的攝取的物質加入到本發明的藥物和其它組合物中。例如，陽離子脂質如Lipofectin(美國專利第5,705,188號)、陽離子甘油衍生物和聚陽離子分子如聚賴氨酸(WO97/30731)也能增強細胞對寡核苷酸的攝取。本發明的組合物還可另外含有其它通常見於藥物組合物中的輔助成分。因此，例如，組合物可含有其它另外的相容性藥物活性材料，如止癢劑、收斂劑、局部麻醉劑或抗炎劑，或者可含有其它另外的可用於物理配製本發明組合物各種不同劑型的材料，如染料、矯味劑、防腐劑、抗氧化劑、遮光劑、增稠劑和穩定劑。但這種材料加入時不應對本發明組合物各成分的生物活性造成不適當的幹擾。各製劑可進行滅菌，且如有需要可與例如以下不會與製劑中的核酸發生有害相互作用的助劑混合潤滑劑、防腐劑、穩定劑、溼潤劑、乳化劑、用以影響滲透壓的鹽類、緩衝劑、著色劑、矯味劑和/或芳香物質等。供口服給藥的組合物和製劑包括散劑或顆粒劑、微顆粒劑、納米顆粒劑、水介質或非水介質中的混懸劑或溶液劑、膠囊劑、凝膠膠囊劑、扁囊劑、片劑或小片劑。增稠劑、矯味劑、稀釋劑、乳化劑、分散助劑或粘合劑也是適宜的。優選的口服製劑是其中本發明的寡核苷酸與一種或多種滲透促進劑、表面活性劑和螯合劑一起給藥的製劑。優選的表面活性劑包括脂肪酸和/或其酯或鹽、膽汁酸和/或其鹽。優選的膽汁酸/鹽包括鵝脫氧膽酸(CDCA)和熊脫氧鵝脫氧膽酸(UDCA)、膽酸、去氫膽酸、脫氧膽酸、丙烯醇酸(glucholicacid)、甘氨膽酸(glycholicacid)、甘氨脫氧膽酸、牛磺膽酸、牛磺脫氧膽酸、牛磺-24，25-二氫-夫西地酸鈉、乙二醇二氫夫西地酸鈉。優選的脂肪酸包括花生四烯酸、十一烷酸、油酸、月桂酸、辛酸、癸酸、豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、亞油酸、亞麻酸、二癸酸、三癸酸、一油精、二月桂精、甘油-1-癸酸酯、1-十二烷基氮雜環庚-2-酮、醯基肉鹼、醯基膽鹼或單甘油酯、甘油二酯或其藥物可接受的鹽(例如鈉鹽)。還優選的幾種滲透促進劑的組合，例如脂肪酸/鹽與膽汁酸/鹽的組合。特別優選的組合是月桂酸、癸酸和UDCA的鈉鹽。更多的滲透促進劑包括聚氧乙烯-9-月桂基醚、聚氧乙烯-20-鯨蠟基醚。本發明的寡核苷酸可以顆粒形式(包括噴幹顆粒)口服傳遞，或者可絡合形成微顆粒或納米顆粒。寡核苷酸絡合劑包括聚胺基酸；聚亞胺；聚丙烯酸酯；聚丙烯酸烷酯；polyoxethane；聚氰基丙烯酸烷酯；陽離子化明膠；白蛋白；澱粉；丙烯酸酯；聚乙二醇(PEG)和澱粉；聚氰基丙烯酸烷酯；DEAE衍生化聚亞胺；普魯蘭多糖(pollulan)；纖維素和澱粉。特別優選的絡合劑包括殼聚糖、N-三甲基殼聚糖、聚-L-賴氨酸、聚組氨酸、聚鳥氨酸、聚精胺、魚精蛋白、聚乙烯吡啶、聚硫代二乙氨基-甲基乙烯(PTDAE)、聚氨基苯乙烯(例如p-氨基)、聚(氰基丙烯酸乙酯甲酯)、聚(氰基丙烯酸乙酯)、聚(氰基丙烯酸丁酯)、聚(氰基丙烯酸異丁酯)、聚(氰基丙烯酸異己酯)、DEAE-甲基丙烯酸酯、DEAE-丙烯酸己酯、DEAE-丙烯醯胺、DEAE-白蛋白和DEAE-葡聚糖、聚丙烯酸甲酯、聚丙烯酸己酯、聚(D，L-乳酸)、聚DL-乳酸乙醇酸共聚物(PLGA)、海藻酸鹽和聚乙二醇(PEG)。本發明的某些實施方案提供含有(a)一種或多種寡核苷酸化合物和(b)一種或多種通過非寡核苷酸機制起作用的其它化療藥物的藥物組合物。這種化療藥物的實例包括但不限於抗癌藥物如柔紅黴素、放線菌素D、多柔比星、博來黴素、絲裂黴素、氮芥、苯丁酸氮芥、美法侖、環磷醯胺、6-巰基嘌呤、6-硫代鳥嘌呤、阿糖胞苷(CA)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、氟尿苷(5-FUdR)、甲氨喋呤(MTX)、秋水仙鹼、長春新鹼、長春鹼、依託泊苷、替尼泊苷、順鉑和乙烯雌酚(DES)。抗炎藥物(包括但不限於非甾體類抗炎藥物和皮質類固醇)及抗病毒藥物(包括但不限於利巴韋林(ribivirin)、阿糖腺苷、阿昔洛韋和更昔洛韋)也可結合到本發明的組合物中。其它的非寡核苷酸化療藥物也在本發明的範圍之內。兩種或更多種組合的化合物可一起使用或依次使用。B.傳遞本發明的寡核苷酸化合物可用任何合適的方法傳遞。在某些實施方案中，給予的是裸DNA。在其它實施方案中，採用脂質轉染法將核酸傳遞給對象。在還其它實施方案中，寡核苷酸用硫代磷酸酯(phosphothiolate)修飾以便傳遞(參見例如美國專利第6,169,177號，該專利通過引用結合到本文中)。在某些實施方案中，壓縮所要傳遞的核酸，以幫助其攝取。(參見例如美國專利第6,008,366號、第6,383,811號，其通過引用結合到本文中)。在某些實施方案中，將壓縮的核酸通過靶細胞結合部分(參見例如美國專利第5,844,107號、第6,077,835號，其各自通過引用結合到本文中)靶向特定細胞類型(例如癌細胞)。在某些實施方案中，將寡核苷酸綴合到其它化合物上，以幫助其傳遞。例如，在某些實施方案中，將核酸綴合到聚乙二醇上幫助傳遞(參見例如美國專利第6,177,274號、第6,287,591號、第6,447,752號、第6,447,753號和第6,440,743號，其各自通過引用結合到本文中)。在另外其它實施方案中，將核酸綴合到保護的接枝共聚物上，該接枝共聚物是可充電的藥物納米載體(PharmaIn)。在還其它實施方案中，通過將寡核苷酸綴合到維生素上來促進寡核苷酸向細胞內的運輸(Endocyte，Inc；WestLafayette，IN；參見例如美國專利第5,108,921號、第5,416,016號、第5,635,382號、第6,291,673號和WO02/085908；其各自通過引用結合到本文中)。在其它實施方案中，將寡核苷酸綴合到納米顆粒上(例如NanoMedPharmaceuticals；Kalamazoo，MI)。在優選的實施方案中，將寡核苷酸包封入脂質(例如脂質體或膠束)中幫助傳遞(參見例如美國專利第6,458,382號、第6,429,200號；其各自通過引用結合到本文中)。優選的脂質體包括但不限於基於心磷脂的陽離子脂質體(例如NEOPHECTIN，可獲自NeoPharm，ForestLake，IL)。在某些優選的實施方案中，NEOPHECTIN與寡核苷酸的電荷比是6∶1。在還其它實施方案中，將寡核苷酸與其它另外的聚合物絡合，以幫助傳遞(參見例如美國專利第6,379,966號、第6,339,067號、第5,744,335號，其各自通過引用結合到本文中；及IntradigmCorp.，Rockville，MD)。在還其它實施方案中，採用Minis(Madison，WI)開發的可控高壓傳遞系統來傳遞寡核苷酸。C.劑量給藥根據所要治療的疾病狀態的嚴重程度和反應來進行，療程可持續幾天到幾個月，或者直到達到治癒目的或實現疾病狀態的消減為止。最佳給藥方案可從對患者體內的藥物積累的測量結果計算得出。給藥醫師能容易地確定最佳劑量、給藥方法和重複給藥次數。最佳劑量可根據各單個寡核苷酸的相對效價、傳遞方式而變化，通常可根據在體外和體內動物模型中發現有效的EC50或根據本文描述的實施例來估計。一般來說，劑量為每公斤體重0.01μg-100g，且可每天、每周、每月或每年一次或多次給予。在某些實施方案中，劑量連續給予(例如靜脈內給予)，持續幾個小時到幾天或幾周的時間。在某些實施方案中，治療連續進行確定的時間，接著是無治療時間。在某些實施方案中，將連續給藥後跟著無治療時間的這種治療模式重複幾次(例如直到疾病狀態消減)。主治醫師能根據測出的藥物在體液或組織中的停留時間和濃度估計重複給藥速度。治療獲得成功後，需要讓對象進行維持治療，以防止疾病狀態的復發，在維持治療中寡核苷酸以維持劑量給予，為每公斤體重0.01μg-100g，優選1mg-50mg，甚至更優選6mg-30mg，每天一次或多次至每20年一次。VII.聯合療法在某些實施方案中，本發明的組合物與現有治療一起聯合提供。在其它實施方案中，兩種或更多種本發明化合物聯合提供。在某些實施方案中，本發明的化合物與公知的癌症化療藥物一起聯合提供。本發明並不限於具體的化療藥物。設想將各種不同類別的抗腫瘤藥(例如抗癌)藥物用於本發明的某些實施方案中。適合用於本發明的抗癌藥物包括但不限於誘導凋亡的藥物、抑制腺苷脫氨酶功能的藥物、抑制嘧啶生物合成的藥物、抑制嘌呤環生物合成的藥物、抑制核苷酸相互轉化的藥物、抑制核糖核苷酸還原酶的藥物、抑制一磷酸胸苷(TMP)合成的藥物、抑制二氫葉酸還原的藥物、抑制DNA合成的藥物、與DNA形成加合物的藥物、損害DNA的藥物、抑制DNA修復的藥物、嵌入DNA的藥物、使天冬醯胺脫氨的藥物、抑制RNA合成的藥物、抑制蛋白質合成或穩定性的藥物、抑制微管合成或功能的藥物等。在某些實施方案中，適合用於本發明組合物和方法中的代表性抗癌藥物包括但不限於1)生物鹼，包括微管抑制劑(例如長春新鹼、長春鹼和長春地辛等)、微管穩定劑(例如紫杉醇(TAXOL)和多西他賽等)及染色質功能抑制劑，包括拓撲異構酶抑制劑如表鬼臼毒素(例如依託泊苷(VP-16)和替尼泊苷(VM-26)等)和靶向拓撲異構酶I的藥物(例如喜樹鹼和伊立替康(CPT-11)等)；2)共價DNA結合藥物(烷化劑)，包括氮芥(例如氮芥、苯丁酸氮芥、磷醯胺、異環磷醯胺和白消安(MYLERAN)等)、亞硝基脲(例如卡莫司汀、洛莫司汀和司莫司汀等)及其它烷化劑(例如達卡巴嗪、羥基甲基蜜胺、塞替派和絲裂黴素等)；3)非共價DNA結合藥物(抗腫瘤抗生素)，包括核酸抑制劑(例如更生黴素(放線菌素D)等)、蒽環黴素(例如柔紅黴素(道諾黴素和Cerubidine)、多柔比星(阿黴素)和伊達比星(Idamycin)等)、蒽二酮(例如蒽環黴素類似物如米託蒽醌等)、博來黴素(BLENOXANE)等及普卡黴素(光輝黴素)等；4)抗代謝物，包括葉酸抗代謝物(例如甲氨喋呤、FOLEX和MEXATE等)、嘌呤抗代謝物(例如6-巰基嘌呤(6-MP，PURINETHOL)、6-硫代鳥嘌呤(6-TG)、硫唑嘌呤、阿昔洛韋、更昔洛韋、氯脫氧腺苷、2-氯脫氧腺苷(CdA)和2′-脫氧考福黴素(噴司他丁)等)、嘧啶拮抗劑(例如氟嘧啶(例如5-氟尿嘧啶(ADRUCIL)、5-氟脫氧尿苷(FdUrd)(氟尿苷))等)及胞嘧啶阿拉伯糖苷(例如CYTOSAR(ara-C)和氟達拉濱等)；5)酶類，包括L-天冬醯胺酶和羥基脲等；6)激素，包括糖皮質類固醇、抗雌激素藥(例如他莫昔芬等)、非甾體類抗雄激素藥(例如氟他胺等)及芳化酶抑制劑(例如阿那曲唑(ARIMIDEX)等)；7)鉑化合物(例如順鉑和卡鉑等)；8)與抗癌藥物、毒素和/或放射性核素等綴合的單克隆抗體；9)生物反應調節物(例如幹擾素(例如IFN-α等)及白介素(例如IL-2等)等)；10)過繼免疫治療；11)造血生長因子；12)誘導腫瘤細胞分化的藥物(例如全反式維A酸等)；13)基因治療技術；14)反義治療技術；15)腫瘤疫苗；16)導向腫瘤轉移的治療(例如巴馬司他等)；17)血管發生抑制劑；18)蛋白體抑制劑(例如VELCADE)；19)乙醯化作用和/或甲基化作用抑制劑(例如HDAC抑制劑)；20)NFκB調節劑；21)細胞周期調節抑制劑(例如CDK抑制劑)；22)p53蛋白功能調節劑；以及23)輻射。日常用於癌症治療場合的任何溶瘤細胞藥物均可用於本發明的組合物和方法。例如，美國食品和藥物管理局保持著被批准在美國使用的溶瘤細胞藥物的處方集。美國食品和藥物管理局的國際對等機構也保持著類似的處方集。表3提供被批准在美國使用的代表性抗腫瘤藥列表。本領域技術人員會意識到，所有美國批准的化療藥物上要求貼附的「產品標籤」，均對所述代表性藥物描述了適應症、給藥信息、毒性數據等。表3VIII.定製患者護理在某些實施方案中，本發明提供定製患者護理。可將本發明的組合物靶向患者疾病(例如癌症)所獨有的特定基因。例如，在某些實施方案中，首先獲得患者癌症組織或其它受疾病侵襲的組織(例如活檢組織)的樣本。分析活檢組織是否存在特定基因(例如癌基因)的表達。在某些優選的實施方案中，對患者中的基因表達水平進行分析。可通過監測是否存在與特定癌基因對應的RNA或DNA來檢測表達情況。可採用任何合適的檢測方法，包括但不限於下文描述的方法。鑑定了患者的目的基因的基因表達模式後，可為每一位患者產生定製治療方案。在優選的實施方案中，將對患者中(例如腫瘤中)異常表達的基因具有特異性的各寡核苷酸化合物與雞尾酒療法聯合。在某些實施方案中，雞尾酒療法還包括其它另外的化療藥物(例如上述化療藥物)。然後如上所述將雞尾酒藥物給予患者。在某些實施方案中，癌症樣本的分析和挑選寡核苷酸用作治療化合物是自動進行的。例如，在某些實施方案中，採用能分析一系列癌基因的表達水平以獲得寡核苷酸的最佳選擇方案和濃度的軟體程序。在某些實施方案中，由臨床實驗室分析患者樣本來進行所述分析，然後將分析結果傳輸到另一治療提供者以制定雞尾酒治療方案。在某些實施方案中，信息通過網際網路傳輸，從而使診斷與治療開始之間的時間儘可能最短。A.RNA的檢測在某些實施方案中，癌基因(例如包括但不限於本文所公開的癌基因)通過測量組織樣本(例如癌組織)中的相應mRNA的表達來檢測。在其它實施方案中，對體液中的mRNA表達進行測量，所述體液包括但不限於血液、血清、黏液和尿液。在某些優選的實施方案中，對mRNA的表達水平進行定量測量。RNA表達可通過任何合適的方法測量，包括但不限於下文公開的方法。在某些實施方案中，RNA通過RNA印跡分析來檢測。RNA印跡分析涉及RNA的分離和互補標記探針的雜交。在其它實施方案中，RNA表達通過對特定結構的酶促切割來檢測(INVADER測定法，ThirdWaveTechnologies；參見例如美國專利第5,846,717號；第6,090,543號；第6,001,567號；第5,985,557號和第5,994,069號，其各自通過引用結合到本文中)。INVADER測定法通過用結構特異性酶類切割重疊寡核苷酸探針的雜交所形成的複合物來檢測特定的核酸(例如RNA)。在還其它實施方案中，RNA(或相應的cDNA)通過與寡核苷酸探針雜交來檢測。可獲得多種使用各種雜交和檢測技術的雜交測定。例如，在某些實施方案中，採用了TaqMan測定法(PEBiosystems，FosterCity，CA；參見例如美國專利第5,962,233號和第5,538,848號，其各自通過引用結合到本文中)。該分析方法在PCR反應過程中進行。TaqMan測定法利用了AMPLITAQGOLDDNA聚合酶的5′-3′外切核酸酶活性。將由寡核苷酸及5′-報導染料(例如螢光染料)和3′-猝滅染料組成的探針納入到PCR反應中。在PCR過程中，如果探針與其靶標發生結合，AMPLITAQGOLDDNA聚合酶的5′-3′溶核活性將切割報導染料和猝滅染料之間的探針。報導染料與猝滅染料的分離導致螢光增強。該信號隨PCR的每一個循環而累積，可用螢光計來監測。在另外其它實施方案中，用反轉錄酶PCR(RT-PCR)來檢測RNA的表達。在RT-PCR中，用反轉錄酶將RNA酶促轉化成互補DNA或「cDNA」。然後將cDNA用作PCR反應的模板。PCR產物可用任何合適的方法來檢測，包括但不限於凝膠電泳及用DNA特異性染料染色或與標記探針雜交。在某些實施方案中，採用了美國專利第5,639,606號、第5,643,765號和第5,876,978號(其各自通過引用結合到本文中)所描述的定量反轉錄酶PCR加標準化競爭性模板混合物的方法。B.蛋白質的檢測在其它實施方案中，癌基因的基因表達通過測量相應的蛋白質或多肽的表達來檢測。在某些實施方案中，對組織樣本中的蛋白質表達進行檢測。在其它實施方案中，對體液中的蛋白質表達進行檢測。在某些實施方案中，對蛋白質表達水平進行定量。蛋白質表達可用任何合適的方法來檢測。在某些實施方案中，蛋白質通過其與針對其產生的抗體的結合來檢測。抗體的產生方法是本領域技術人員公知的。抗體結合通過本領域公知的技術來檢測，例如放射免疫測定、ELISA(酶聯免疫吸附測定)、「夾心」免疫測定、免疫放射測定、凝膠擴散沉澱反應、免疫擴散測定、原位免疫測定(例如使用膠體金、酶或放射性同位素標記)、蛋白質印跡、沉澱反應、凝集試驗(例如凝膠凝集試驗、血細胞凝集試驗等)、補體結合試驗、免疫螢光測定、A蛋白試驗及免疫電泳試驗等。在一個實施方案中，抗體結合通過檢測第一抗體上的標記來檢測。在另一個實施方案中，第一抗體通過檢測第二抗體或試劑與第一抗體的結合來檢測。在又一實施方案中，第二抗體被標記。許多用以在免疫測定中檢測結合情況的方法是本領域公知的，也落入本發明的範圍之內。在某些實施方案中，採用了自動檢測方法。免疫測定自動化的方法包括美國專利第5,885,530號、第4,981,785號、第6,159,750號和第5,358,691號中描述的方法，其各自通過引用結合到本文中。在某些實施方案中，結果的分析和展示也自動進行。例如，在某些實施方案中，採用了能根據一系列對應於癌基因的蛋白質的存在或不存在情況來生成表達型的軟體。在其它實施方案中，採用了美國專利第5,599,677號和第5,672,480號中描述的免疫測定；其各自通過引用結合到本文中。實驗提供以下實施例是為了證明和進一步說明本發明某些優選的實施方案和方面，這些實施例不應被解釋為限制本發明的範圍。在下文的實驗公開內容中，應用了以下縮寫N(當量)；M(摩爾濃度)；mM(毫摩爾濃度)；μM(微摩爾濃度)；mol(摩爾)；mmol(毫摩爾)；μmol(微摩爾)；nmol(納摩爾)；pmol(皮摩爾)；g(克)；mg(毫克)；μg(微克)；ng(納克)；l或L(升)；ml(毫升)；μl(微升)；cm(釐米)；mm(毫米)；μm(微米)；nm(納米)；和℃(攝氏度)。實施例1材料和方法本實施例描述以下實施例中所採用的實驗方法。A.細胞系以下描述用於本發明實驗的細胞系。MDA-MB-231組織腺癌；乳腺；乳房；胸腔積液致瘤潛能形成III級腺癌所表達的受體表皮生長因子(EGF)和轉化生長因子(TGF-α)癌基因wnt3+和wnt7h+參考文獻SicilianoMJ，BarkerPE，CailleauR.Mutuallyexclusivegeneticsignaturesofhumanbreasttumorcelllineswithacommonchromosomalmarker(帶共同染色體標記的人乳腺腫瘤細胞系的互斥基因籤名)。CancerRes.1979年3月；39(3)919-22。CalleauR，OliveM，CrucigerQV.Long-termhumanbreastcarcinomacelllinesofmetastaticoriginpreliminarycharacterization(轉移來源的長期人乳腺癌細胞系初步鑑定)。Invitro.1978年11月；14(11)9115。CrucigerQV，PathakS，CalleauR.HumanbreastcarcinomasmarkerchromosomesinvolvingIqinsevencases(人乳腺癌七個病例中涉及1q的標記染色體)。CytogenetCellGenet.1976年；17(4)231-5。Satya-PrakashKL，PathakS，HsuTC，OliveM，CailleauR.Cytogeneticanalysisoneighthumanbreasttumorcelllineshighfrequenciesof1q，11qandHeLa-likemarkerchromosomes(對八個人乳腺腫瘤細胞系的細胞遺傳學分析1q、11q和HeLa標記染色體)。CancerGenetCytogenet1981年1月；3(11)61-73。MCF7組織腺癌；乳腺；乳房轉移部位胸腔積液受體雌激素受體+癌基因wnt7h+還已知該細胞系能適度表達c-erbB-2癌基因和過量表達c-myc癌基因細胞產物胰島素樣生長因子結合蛋白(IGFBP)參考文獻SouleHD等，Ahumancelllinefromapleuraleffusionderivedfromabreastcarcinoma(來自衍生於乳腺癌的胸腔積液的人細胞系).J.Natl.CancerInst.511409-1416，1973LandersJE等，Translationalenhancementofmdm2oncogeneexpressioninhumantumorcellcontainingastabilizedwild-typep53protein(含穩定化野生型p53蛋白的人腫瘤細胞中mdm2癌基因表達的翻譯增強).CancerRes.573562-3568，1997BacusSS等，Differentiationofculturedhumancancercells(AU-565andMCF7)associatedwithlossofcellsurfaceHER-2/neuoligonucleotide(與細胞表面HER-2/neu寡核苷酸損失有關的培養人癌細胞(AU-565和MCF7)的分化).Mol.Carcinog.3350-362，1990MCF10CA1MCF10細胞衍生自患纖維囊腫病婦女的良性乳腺組織。MCF10細胞系由幾種細胞系組成，其中之一是MCF10A，這是一種無限增殖化的正常人乳腺細胞系。MCF10A用T24Ha-ras轉化產生MCF10AneoT細胞。具有瘤形成進展潛力的MCF10AT衍生自異種移植傳代的MCF10-AneoT。MCF10AT在大約25％的異種移植物中產生癌。完全惡性的MCF10CA1細胞系衍生自幾次異種移植傳代的MCF10AT。MCF10CA1a會100％形成腫瘤並發生轉移。MCF10CA1a的核型顯示染色體1存在額外拷貝。MCF10CA1a會在靜脈注射細胞36天後轉移到肺部中。參考文獻SantnerSJ等，MalignantMCF10CA1celllinesderivedfrompremalignanthumanbreastepithelialMCF10ATcells(衍生自惡化前人乳腺上皮MCF10AT細胞的惡性MCF10CA1細胞系).BreastCancerResearchandtreatment65101-110，2001。MYC-MT-1一雌性MMTV-C-MYC轉基因小鼠發展了乳腺腫瘤。將腫瘤分離，取少量新鮮組織放入由卡馬諾斯癌症學會(KarmanosCancerInstitute)的JushoaLiao博士調理的培養基中培養。此腫瘤細胞系在10次傳代後得以建立。NMuMG組織小鼠正常乳腺，上皮品系NAMRU，雌性致瘤潛能在小鼠中產生良性腫瘤參考文獻OwensRB.Glandularepithelialcellsfrommiceamethodforselectivecultivation(小鼠腺上皮細胞選育方法).J.Natl.CancerInst.521375-1378，1974OwensRB等，Epithelialcellculturesfromnormalglandulartissueofmice(來自小鼠正常腺組織的上皮細胞培養物).J.Natl.CancerInst.53261-269，1974YinglingJM等，Mammaliandwarfinsarephosphorylatedinresponsetotransforming，growthfactorbetaandareimplicatedincontrolofcellgrowth(哺乳動物侏蛋白響應轉化生長因子-β發生磷酸化並牽連到對細胞生長的控制).Proc.Natl.Acad.Sci.USA938940-8944，1996BxPC-3組織腺癌；胰腺細胞產物黏蛋白，胰腺癌特異性抗原；CEA，癌胚抗原來源61歲女性致瘤潛能有癌基因c-Ki-ras參考文獻TanMH等，Characterizationofanewprimaryhumanpancreatictumorline(新初級人胰腺腫瘤系的鑑定).CancerInvest.415-23，1986LoorR等，Useofpancreas-specificantigeninimmunodiagnosisofpancreaticcancer(胰腺特異性抗原在胰腺癌的免疫診斷中的應用).Clin.Lab.Med.2567-578，1982LanMS等，Polypeptidecoreofahumanpancreatictumormucinantigen(人胰腺腫瘤黏蛋白抗原的多肽核心).CancerRes.502997-3001，1990ChambersJAandHarrisA.Expressonofthecysticfibrosisgeneandthemajorpancreaticmucingene，MUC1，inhumanductalepithelialcells(人導管上皮細胞中囊性纖維變性基因和主要胰黏蛋白基因MUC1的表達).J.CellSci.105417-422，1993T-47D組織導管癌，乳腺，乳房，導管轉移部位胸腔積液來源患乳腺浸潤性導管癌的54歲女性的胸腔積液受體表達雌激素、雄激素、降鈣素、孕酮、糖皮質類固醇和催乳素陽性癌基因wnt3+和wnt7h+還已知此細胞系過量表達c-erbB-2參考文獻KeydarI等，Establishmentandcharacterizationofacelllineofhumanbreastcarcinomaorigin(人乳腺癌來源的細胞系的建立和鑑定).Eur.J.Cancer15659-670，1979JudgeSMandChattertonRTJr.Progesterone-specificstimulationoftriglyceridebiosynthesisinabreastcancercellline(T-47D)(對乳腺癌細胞系(T-47D)中甘油三酯生物合成的孕酮特異性刺激).CancerRes.434407-4412，1983LampSJ等Calcitonininductionofapersistentactivatedstateofadenylatecyclaseinhumanbreastcancercell(T-47D)(人乳腺癌細胞(T-47D)中腺苷酸環化酶的持久激活狀態的降鈣素誘導).J.Biol.Chem.25612269-12274，1981SherE等，Whole-celluptakeandnuclearlocalizationof1，25-dhydroxy-cholecalciferolbybreastcancercell(T-47D)inculture(培養物中乳腺癌細胞(T-47D)對1，25-二羥基-膽鈣化甾醇的全細胞攝取和核定位)Biochem.J.200315-320，1981FreakeHC等，1，25-DihydroxyvitaminD3specificallybindstoabreastcancercellline(T-47D)andstimulatesgrowth(1，25-二羥基維生素D3能特異型結合人乳腺癌細胞系(T-47D)並刺激生長).Biochem.Biophys.Res.Commun.1011131-1138，1981FaustJBandMeekerTC.Amplificationandexpressionofthebcl-1geneinhumansolidtumorcellline(人實體瘤細胞系中bcl-1基因的擴增和表達).CancerRes.522460-2463，1992RF33514HuguetEL等，DiffrentialexpressionofhumanWntgenes2，3，4，and7Binhumanbreastcelllineandnormalanddiseasestatesofhumanbreasttissue(人乳腺細胞系中人Wnt基因2、3、4和7B的分化表達與人乳腺組織的正常和疾病狀態).CancerRes.542615-2621，1994BT-474組織導管癌，乳腺，乳房來源60歲女性癌基因c-erbB-2參考文獻LasfarguesEY等，Isolationoftwohumantumorepithelialcelllinesfromsolidbreastcarcinomas(從實體乳腺癌分離兩個人腫瘤上皮細胞系).J.Natl.CancerInst.61967-978，1978LasfarguesEY等，Ahumanbreasttumorcellline(BT-474)thatsupportsmousemammarytumorvirusreplication(支持小鼠乳腺腫瘤病毒複製的人乳腺腫瘤細胞系(BT-474)).Invitro15723-729，1979Littlewood-EvansAJ等，Theosteoclast-associatedproteasecathepsinKisexpressedinhumanbreastcarcinoma(破骨細胞相關組織蛋白酶K在人乳腺癌中表達).CancerRes.575386-5390，1997WSU-FSCCL1993年建立的人B細胞系來源來自患白血病階段的低度濾泡性小裂細胞性淋巴瘤的男性患者的外周血癌基因對於c-myc和bcl-2都顯示染色體易位參考文獻MohammadRM，MohamedAN，SmithMR，JawadiNS，AL-KhatibA.AuniqueEBV-NegativeLowGradeLymphomaLine(WSU-FSCCL)Exhibitingbotht(14；18)andt(8；11)(顯示t(14；18)和t(8；11)的獨特EBV陰性低度淋巴瘤系(WSU-FSCCL)).CancerGenetCytogenet7062-67，1993B.細胞培養人乳腺癌細胞MCF7、MCF10CA1a、MDA-MB231、MDA-MB435.eB和人正常乳腺細胞MCF10A均獲自KarmanosCancerInstitute。所有細胞都在補加10mMHEPES、29mM碳酸氫鈉、青黴素(100單位/ml)和鏈黴素(100μg/ml)的DMEM/F12培養基(Gibco，MD)中培養。另外，還將10％牛血清、10μg/ml胰島素(SigmaChemical，StLouis，MO)和0.5nM雌二醇用於MCF7培養基中。將5％馬血清和胰島素(10μg/ml)用於MCF10CA1a，10％胎牛血清用於MDA-MB231和435細胞系。MCF1.0A培養物補加5％馬血清、胰島素(10μg/ml)、100ng/ml霍亂腸毒素(Calbiochem，CA)、0.5μg/ml氫化可的松(SigmaChemical)和20ng/ml表皮生長因子(SigmaChemical)。所有的燒瓶和培養板都37℃下95％空氣和5％CO2的溼潤環境中溫育。還將MYC-MT-1細胞培養於含有10ng/mlEGF(上皮生長因子)、1nM雌二醇、10μg/ml胰島素和10％FBS(胎牛血清)的DMEM/F12培養基中。將BxPC-3胰腺癌細胞系和BT-474乳腺腫瘤細胞系培養於補加10％FBS的RPMI1640中。將乳腺腫瘤細胞系T-47D培養於與BT-474相同的培養基，但補加2.5μg/ml胰島素。將NMuMG(正常小鼠乳腺細胞)細胞系生長於補加4.5g/l葡萄糖、10μg/ml胰島素和10％FBS的DMEM培養基中。將所有上述細胞都以2500-5,000細胞/孔的密度接種於96孔板中。細胞接種24小時後用溶於新鮮培養基(100μl總體積)的寡核苷酸化合物處理。在處理後24小時及每隔48小時連續6-7天或直到對照細胞達到80-100％鋪滿，用不含寡核苷酸的新鮮培養基替換培養基。使用MTT染色技術評估寡核苷酸的抑制作用。用人濾泡性淋巴瘤細胞系WSU-FSCCL評估抗c-myc寡核苷酸及抗Bcl-2寡核苷酸的作用。FSCCL細胞在組織培養中生長成單細胞懸液。培養物維持在補加10％胎牛血清、1％L-穀氨醯胺、100單位/ml青黴素和1.00μg/ml鏈黴素的RPMI1640中。FSCCL細胞在24孔板(2x105細胞/孔/ml)中用寡核苷酸化合物處理，並在37℃下95％空氣和5％CO2的溼潤環境中溫育。每隔24小時用血細胞計數器對細胞進行計數。C.寡核苷酸製備所有的寡核苷酸均由BIOSYNTHESIS(Lewisville，Texas)或Qiagen(Valencia，CA)進行合成、凝膠純化和凍幹。甲基化寡核苷酸在所有的CpG位點進行甲基化。將甲基化寡核苷酸溶於純無菌水(Gibco，InvitrogenCorporation)中，用以處理培養物中的細胞。D.Lipofectin包封將20μglipofectin(Invitrogen)和16μg寡核苷酸各自用200μlOpti-MEM(Invitrogen)培養基在單獨的無菌管中室溫下溫育45分鐘。接著將它們合併，再溫育15分鐘。然後加入1.6mlOpti-MEM培養基，至2ml的最終體積和1μM寡核苷酸的最終濃度。lipofectin和寡核苷酸的濃度可根據它們的分子量和所需的化合物濃度來調整。在此濃度水平下不存在細胞毒性作用。E.細胞生長抑制的測定細胞生長抑制情況用購自SigmaChemical(StLouis，MO)的溴化3-[4，5-二甲基-噻唑-2-基]-2，5-二苯基四唑(MTT)進行評估。將細胞以50,000個細胞/ml的密度重懸於培養基中，向96孔平底培養板(CostarCorning，NY，USA)的每一個孔分配100μl，溫育24小時。將培養基改成100μl含所需濃度的寡核苷酸的新鮮培養基，溫育24小時。對照培養物的培養基為與寡核苷酸溶液等體積的純無菌水。每隔24小時更換培養基，但不再添加寡核苷酸，直到對照培養物鋪滿(6-7天)。之後除去培養基，培養板用磷酸緩衝鹽水(PBS)洗滌兩次，向每孔加入100μl含0.5mg/mlMTT染料的無血清培養基，37℃下溫育1小時。除去含染料的培養基，用PBS洗滌，加入100μl二甲亞碸(DMSO)使活性染料增溶。用自動多孔分光光度計(Bio-TekMicroplateAutoreader，Winooski，VT，USA)讀取吸光值。每個處理每次用8個獨立的孔重複至少3次。F.蛋白質提取和蛋白質印跡分析將細胞以200,000個細胞/燒瓶的密度接種和培養於T25組織培養燒瓶(Costar，Coming，NY，USA)中。讓細胞進行貼壁24小時。培養基用含有10-20μM寡核苷酸的新鮮培養基替換，溫育24小時。每隔48小時更換培養基，但不再添加抑制劑，繼續進行細胞培養，直到對照燒瓶鋪滿(6-7天)。用1x胰蛋白酶EDTA(Invitrogen，Gibco，MD)收穫細胞，2000rpm離心5分鐘進行收集。將細胞重懸於125mMTris-HCl緩衝液(pH6.8)中，超聲處理得10-20％產量，然後在等體積的8％SDS中(使SDS終濃度為4％)裂解。將細胞提取物煮沸10分鐘，置冰上冷卻，2000rpm離心5分鐘，然後收集上清液。用BCA蛋白質測定試劑盒(Pierce，Rockford，IL)對蛋白質進行定量。取50-100μg蛋白質進行10-15％凝膠(取決於每種蛋白質的分子量)電泳，然後轉移到硝基纖維素膜(SchleicherSchuell，Kence，NH)上。每張膜用溶於TBSTe(Tris緩衝鹽水，吐溫20)的10％乳粉封閉2小時，然後與第一抗體一起在TBST中溫育過夜。抗人c-myc、c-ha-ras和erbB-2的抗體是小鼠IgG(Pharmingen，SanDiego，CA)。將膜在TBST中洗滌3次，每次15分鐘，然後與用過氧化物酶綴合的第二抗體一起溫育1小時。將膜在TBST中洗滌5次，每次10分鐘，然後與各2ml的Lumino/Enhancer和StablePeroxideSolution(PIERCE)一起溫育1分鐘。將膜曝光於X射線片2分鐘(如有必要，曝光時間在10秒直至24小時之間調整)，實施例2c-ki-RAS本實施例描述靶向c-ki-Ras基因啟動子的寡核苷酸化合物抑制癌細胞系生長的能力。實驗按實施例1的描述進行。結果在圖13和19中顯示。靶向c-ki-Ras的寡核苷酸的序列以及c-ki-Ras基因的序列在圖5和6中顯示。實施例3Bcl-2本實施例描述靶向bcl-2基因啟動子的寡核苷酸化合物抑制癌細胞系生長的能力。實驗按實施例1的描述進行。結果在圖14和20中顯示。靶向bcl-2的寡核苷酸的序列以及bcl-2基因的序列在圖1和2中顯示。實施例4c-ha-RAS本實施例描述靶向c-ha-Ras基因啟動子的寡核苷酸化合物抑制癌細胞系生長的能力。實驗按實施例1的描述進行。結果在圖16和22中顯示。靶向c-ha-Ras的寡核苷酸的序列以及c-ha-Ras基因的序列在圖7和8中顯示。實施例5c-erbB-2本實施例描述靶向c-erbB-2基因啟動子的寡核苷酸化合物抑制癌細胞系生長的能力。實驗按實施例1的描述進行。結果在圖15和21中顯示。靶向c-erbB-2的寡核苷酸的序列以及c-erbB-2基因的序列在圖3和4中顯示。實施例6c-myc本實施例描述靶向c-myc基因啟動子的寡核苷酸化合物抑制癌細胞系生長的能力。實驗按實施例1的描述進行。結果在圖17和23中顯示。靶向c-myc的寡核苷酸的序列以及c-myc基因的序列在圖9和10中顯示。實施例7TGF-α本實施例描述靶向TGF-α基因啟動子的寡核苷酸化合物抑制癌細胞系生長的能力。實驗按實施例1的描述進行。結果在圖18和24中顯示。靶向TGF-α的寡核苷酸的序列以及TGF-α基因的序列在圖11和12中顯示。實施例8非甲基化寡核苷酸對細胞生長的抑制本實施例描述靶向Bcl-2的非甲基化寡核苷酸對淋巴瘤細胞系生長的抑制作用。在t＝-24小時，將WSU-FSCCL細胞以2×105個細胞/孔的密度接種於24孔板中。對於每個收穫時間點，在t＝0用指示濃度的寡核苷酸處理三個重複孔。對照樣本接種三份。將各板在37℃下溫育。用臺盼藍染色法和血細胞計數器，通過連續4天每隔24小時的細胞計數和生存力，監測實驗過程中的所有培養物。MABL2寡核苷酸靶向Bcl-2的啟動子區[5′-CAXGCAXGXGCATCCCXGCCXGTG-3′]。Pho-Mabl-2是未甲基化形式的MABL-2[5′-CACGCACGCGCATCCCCGCCCGTG-3′]。WSU-FSCCL從人B細胞淋巴瘤(低度濾泡性小裂細胞性淋巴瘤)衍生。實驗方案顯示於表2。結果在圖31中顯示。結果證明，導向Bcl-2的未甲基化寡核苷酸與甲基化寡核苷酸一樣能有效抑制細胞生長。實施例9腫瘤生長的體內抑制本實施例描述本發明寡核苷酸在人前列腺癌模型中對腫瘤生長的抑制作用。動物採用了人PC-3GFP前列腺癌皮下模型(參見例如Yang等，CancerResearch59，781-786，；Glinskii等，CancerResearch63，4239-4243，和Kalikin等，CancerBiologyandTherapy26，17-21)。使用5-6周齡的雄性無胸腺NCr裸鼠。將動物飼養和維持在HEPA過濾環境中，籠子、食物和草墊均高壓滅菌。繁殖對獲自TaconicQualityLaboratoryAnimalsandServicesforResearch(Germantown，NY)。動物食物(5010可高壓滅菌齧齒動物飼糧)獲自PMInutritionInternationalInc.(Brentwood，MO)。本研究共使用了60隻雄性動物。研究用藥物基於核酸的寡核苷酸化合物PNT100和雜(scrambled)寡核苷酸對照PNT-C用陽離子脂質體傳遞系統(LDV)配製。GFP表達載體pLEIN購自Clontech(PaloAlto，CA)。該載體根據含有內部核糖體進入位點的雙順反子信息表達增強型GFP(綠色螢光蛋白)和新黴素抗性基因。細胞培養、載體產生、轉染和亞克隆表達10AI病毒包膜的NIH3T3衍生包裝細胞系PT67購自Clontech。將PT67細胞培養於補加10％胎牛血清的DMEM中。為進行載體產生，將70％鋪滿的包裝細胞(PT67)與硫酸甲酯N-[1-(2，3-二油醯氧基)丙基]-N，N，N-三甲基銨試劑和飽和量的pLEIN質粒的沉澱混合物一起溫育18小時。在此時補充新鮮培養基。轉染後48小時通過螢光顯微鏡檢術檢查細胞。將細胞在200-1000μg/mlG418存在下培養7天，以進行選擇。PC-3-GFP細胞的GFP基因轉導為進行GFP基因轉導，將20％鋪滿的PC-3細胞(ATCC，CRL1435)與PT67細胞的反轉錄病毒上清液和含7％胎牛血清的Ham′sF-12K的1∶1沉澱混合物一起溫育72小時。在此時再裝滿新鮮培養基。PC-3細胞在轉導後72小時用胰蛋白酶EDTA收穫，以1∶15的比例傳代培養於含200μg/ml6418的選擇性培養基中。將6418水平逐步增加至1000Ng/ml。挑選出表達GFP的最亮PC-3細胞克隆，合併，然後通過常規的培養方法擴增和轉移。皮下腫瘤生長將PC-3-GFP細胞以5×106個細胞/200μl的濃度皮下注射入裸鼠脅腹，產生瘤株。在收穫前先確認生長於小鼠皮下組織的腫瘤強烈表達GFP。對在裸鼠皮下生長後收穫的腫瘤組織進行檢查，除去任何明顯壞死或懷疑壞死的或者非GFP的腫瘤組織。隨後將腫瘤組織切成大約2mm3的小碎片。皮下組織碎片移植通過將PC-3GFP細胞皮下注射入裸鼠脅腹，建立前列腺癌瘤株PC-3GFP。該腫瘤在使用前作為瘤株維持在裸鼠皮下。在移植前，先用螢光確認PC-3GFP腫瘤組織強烈表達GFP。在移植當天，從裸鼠皮下部位收穫腫瘤，放入RPMI-1640培養基中。除去壞死組織，活組織切成2mm3小塊。然後將組織碎片皮下移植到裸鼠的右側脅腹。對表達綠色螢光蛋白的腫瘤及其轉移的整體光學成像使用了裝有汞燈電源的LeicaLZ12型立體螢光顯微鏡。通過D425/60帶通濾波器和470DCXR二向色鏡產生GFP的選擇性激發。在帶1317x1035像素晶片的ST-133Micromax高速TEA/CCD-1317K1熱電冷卻照相機(PrincetonInstruments，Trenton，NJ)上通過長通濾波器GG475(ChromaTechnology，Brattleboro，VT)收集發射螢光。同時進行對照實驗，圖像作對比度和亮度處理，藉助ImageProPlus3.1軟體(MediaCybemetics，SilverSpring，Maryland)進行分析。高解析度圖像直接捕捉到計算機上，或者通過視頻輸出連續進行捕捉。研究用動物本研究共使用60隻小鼠，在外科手術後12天分成6組。隨機選擇各同期條件的組。治療的開始當估計初級腫瘤達到50-100mm3的體積時開始。研究的設計方案在表4中顯示。表4數據收集腫瘤大小每周一次通過卡尺測量檢查每隻動物的腫瘤生長情況，直到研究結束。進行為時40天的測量工作，以計算腫瘤體積隨時間的變化。用公式1/2(axb)計算腫瘤的近似體積，其中b是兩個相互垂直的直徑較小者。腫瘤的近似體積通過公式(WxL)x1/2計算。GFP成像移植後12天，對表達GFP的腫瘤每周進行一次整體光學成像。體重在研究過程中所有動物每周稱重一次。用電子天平進行體重測量。結束在研究的第46天將動物處死後獲得最終腫瘤重量。用電子天平稱量每個腫瘤的重量。效力評估所用的統計方法所有6個組的腫瘤體積和最終腫瘤重量均用Studentt2檢驗進行分析，p＝0.05(雙側)。結果結果在圖32-35中顯示。圖32顯示PC3GFP前列腺癌皮下模型中的腫瘤用PNT-100和/或TAXOTERE處理後的平均腫瘤體積。圖33顯示PC-3GFP前列腺癌皮下模型中的腫瘤用PNT-100和/或TAXOTERE處理後的平均體重。圖34顯示PC-3GFP前列腺癌皮下模型中的腫瘤用PNT-100和/或TAXOTERE處理後的平均腫瘤體積。圖35顯示PC-3GFP前列腺癌皮下模型中的腫瘤用PNT-100和/或TAXOTERE處理後的平均最終腫瘤體積。結果表明PNT-100能使腫瘤大小降低。該作用在TAXOTERE存在下得到增強。實施例10腫瘤生長的體內抑制本實施例描述人前列腺癌模型中體內傳遞本發明寡核苷酸對腫瘤生長的抑制作用。1)用在不同新生血管化狀態的隨機化異種移植物，研究了PC-3前列腺癌異種移植腫瘤對靜脈內給藥的PNT100的反應。本實驗用兩步Neophectin製劑進行，分五個1mg/kgPNT100的日劑量。所有小鼠對給藥方案均能存活，無明顯的毒性反應。II)WSU-DLCL2異種移植物靜脈內注射PNT100研究進行了第二項研究，以確定PNT100-Neophectin在非何杰金氏淋巴瘤模型(NHL)中的靜脈內傳遞和效力。本研究設計為給予五個5mg/kgPNT100的日劑量，在某些同期組中，與長春新鹼進行聯合治療。觀察到注射PNT100和PNT-C(雜對照)的動物在一劑量的PNT100後體重顯著減輕。數據證實PNT100和PNT-C聯合治療作用甚大。結果在圖1和2中顯示。圖36和37顯示WSU-DLCL2移植20天後的腫瘤負荷。結果表明，PNT-100單獨及與長春新鹼聯合能使小鼠腫瘤縮小。以上說明書提到的所有出版物和專利都通過引用結合到本文中。本發明所描述的方法和系統的各種修改和變化對本領域技術人員來說會是顯而易見的，而不偏離本發明的範圍和精神。雖然已通過具體的優選實施方案對本發明進行了描述，但應認識到，要求保護的本發明不應不適當地受限於這種具體實施方案。實際上，已描述的本發明實施方式的各種修改方案對相關領域的技術人員來說是顯而易見的，有意將其納入以下權利要求書的範圍內。權利要求1.一種組合物，所述組合物包含能在生理條件下與bcl-2基因啟動子區雜交的第一寡核苷酸。2.權利要求1的組合物，其中所述第一寡核苷酸選自SEQIDNO3，7，8和9。3.權利要求1的組合物，其中所述第一寡核苷酸中的至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。4.權利要求3的組合物，其中所述第一寡核苷酸中的所有所述胞嘧啶鹼基都是5-甲基胞嘧啶。5.權利要求1的組合物，其中所述第一寡核苷酸與所述bcl-2基因啟動子區的所述雜交抑制所述bcl-2基因的表達。6.權利要求1的組合物，其中所述bcl-2基因在細胞染色體上，且其中所述第一寡核苷酸與所述bcl-2基因啟動子區的所述雜交減少所述細胞的增殖。7.權利要求1的組合物，所述組合物還包含第二寡核苷酸。8.權利要求7的組合物，其中所述CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。9.權利要求7的組合物，其中所述第二寡核苷酸選自SEQIDNO3，7，8和9，且其中所述第二寡核苷酸不同於所述第一寡核苷酸。10.權利要求7的組合物，其中所述第二寡核苷酸能與第二基因啟動子區雜交，其中所述第二基因不是bcl-2。11.權利要求10的組合物，其中所述第二基因是癌基因。12.權利要求11的組合物，其中所述癌基因選自c-ki-Ras、c-Ha-Ras、c-myc、Her-2和TGF-α。13.一種組合物，所述組合物包含能在選自SEQIDNO1的核苷酸1-40之間、SEQIDNO1的核苷酸161-350之間、SEQIDNO1的核苷酸401-590之間或SEQIDNO1的核苷酸1002-1260之間的位置與bcl-2基因啟動子區雜交的寡核苷酸。14.一種方法，所述方法包括a)提供i)選自SEQIDNO3，7，8和9的寡核苷酸；ii)能夠表達bcl-2基因的細胞，其中所述細胞能夠增殖；b)將所述寡核苷酸引入到所述細胞中。15.權利要求14的方法，其中所述給予導致所述細胞的增殖減少。16.權利要求14的方法，其中所述給予導致所述bcl-2基因表達的抑制。17.權利要求14的方法，其中所述細胞是癌細胞。18.權利要求14的方法，其中所述細胞在宿主動物中。19.權利要求18的方法，其中所述宿主動物是非人哺乳動物。20.權利要求18的方法，其中所述宿主動物是人。21.權利要求18的方法，其中所述寡核苷酸以0.01μg-100g的劑量引入到所述宿主動物中。22.權利要求18的方法，其中所述寡核苷酸以每公斤體重1mg-100mg的劑量引入到所述宿主動物中。23.權利要求18的方法，其中所述寡核苷酸每天一次或多次引入到所述宿主動物中。24.權利要求18的方法，其中所述寡核苷酸連續引入到所述宿主動物中。25.權利要求14的方法，其中所述細胞在細胞培養物中。26.權利要求14的方法，所述方法還包括將試驗化合物引入到所述細胞中的步驟。27.權利要求27的方法，其中所述試驗化合物是公知的化療藥物。28.權利要求17的方法，其中所述癌症選自胰腺癌、結腸癌、乳腺癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前列腺癌、淋巴瘤、卵巢癌和黑素瘤。29.權利要求19的方法，所述方法還包括提供藥物傳遞系統以將所述寡核苷酸引入到所述細胞中。30.權利要求29的方法，其中所述藥物傳遞系統包括脂質體，所述脂質體選自中性脂質和脂質樣化合物。31.權利要求29的方法，其中所述藥物傳遞系統包括細胞靶向成分。32.權利要求31的方法，其中所述細胞靶向化合物選自細胞表面受體的配體和核受體的配體。33.權利要求29的方法，其中所述藥物傳遞系統供在體內使用，且其中寡核苷酸和所述脂質體存在的比例為2∶1-1∶3/1μg-100mg每公斤體重。34.一種方法，所述方法包括a)提供i)能與bcl-2基因啟動子區雜交的寡核苷酸；ii)包含bcl-2基因的細胞；b)將所述寡核苷酸引入到所述細胞中。35.權利要求34的方法，其中所述寡核苷酸能在選自SEQIDNO1的核苷酸1-40之間、SEQIDNO1的核苷酸161-350之間、SEQIDNO1的核苷酸401-590之間或SEQIDNO1的核苷酸1002-1260之間的位置與所述bcl-2基因的所述啟動子區雜交。36.權利要求34的方法，其中所述寡核苷酸的長度在15-30個鹼基之間。37.權利要求34的方法，其中所述寡核苷酸中的所述至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。38.權利要求34的方法，其中所述寡核苷酸中的所有所述胞嘧啶鹼基都是5-甲基胞嘧啶。39.一種組合物，所述組合物包含能在生理條件下與c-ki-Ras基因啟動子區雜交的第一寡核苷酸。40.權利要求39的組合物，其中所述第一寡核苷酸選自SEQIDNO47，48，50和53。41.權利要求39的組合物，其中所述寡核苷酸中的所述至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。42.權利要求41的組合物，其中所述寡核苷酸中的所有所述胞嘧啶鹼基都是5-甲基胞嘧啶。43.權利要求42的組合物，其中所述第一寡核苷酸與所述c-ki-Ras基因啟動子區的所述雜交抑制所述c-ki-Ras基因的表達。44.權利要求43的組合物，其中所述c-ki-Ras基因在細胞染色體上，且其中所述第一寡核苷酸與所述c-ki-Ras基因啟動子區的所述雜交減少所述細胞的增殖。45.權利要求39的組合物，所述組合物還包含第二寡核苷酸。46.權利要求45的組合物，其中所述第二寡核苷酸中的至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。47.權利要求45的組合物，其中所述第二寡核苷酸選自SEQIDNO47，48，50和53，且其中所述第二寡核苷酸不同於所述第一寡核苷酸。48.權利要求45的組合物，其中所述第二寡核苷酸能與第二基因啟動子區雜交，其中所述第二基因不是c-ki-Ras。49.權利要求48的組合物，其中所述第二基因是癌基因。50.權利要求49的組合物，其中所述癌基因選自c-Ha-Ras、c-myc、Her-2、TGF-α和bcl-2。51.一種組合物，所述組合物包含能在選自SEQIDNO46的核苷酸1-289之間或SEQIDNO46的核苷酸432-658之間的位置與c-ki-Ras基因啟動子區雜交的寡核苷酸。52.一種方法，所述方法包括a)提供i)選自SEQIDNO47，48，50和53的寡核苷酸；ii)包含c-ki-Ras基因的細胞，其中所述c-ki-ras基因能夠表達，且其中所述細胞能夠增殖；b)將所述寡核苷酸引入到所述細胞中。53.權利要求52的方法，其中所述引入導致所述細胞的增殖減少。54.權利要求52的方法，其中所述給予導致所述c-ki-Ras基因表達的抑制。55.權利要求53的方法，其中所述細胞是癌細胞。56.權利要求53的方法，其中所述細胞在宿主動物中。57.權利要求56的方法，其中所述宿主動物是非人哺乳動物。58.權利要求56的方法，其中所述宿主動物是人。59.權利要求56的方法，其中所述寡核苷酸以0.01μg-100g的劑量引入到所述宿主動物中。60.權利要求56的方法，其中所述寡核苷酸以每公斤體重1mg-100mg的劑量引入到所述宿主動物中。61.權利要求56的方法，其中所述寡核苷酸每天一次或多次引入到所述宿主動物中。62.權利要求56的方法，其中所述寡核苷酸連續引入到所述宿主動物中。63.權利要求52的方法，其中所述細胞在細胞培養物中。64.權利要求52的方法，所述方法還包括將試驗化合物引入到所述細胞中的步驟。65.權利要求64的方法，其中所述試驗化合物是公知的化療藥物。66.權利要求55的方法，其中所述癌症選自胰腺癌、結腸癌、乳腺癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前列腺癌、淋巴瘤、卵巢癌和黑素瘤。67.權利要求57的方法，所述方法還包括提供藥物傳遞系統以將所述寡核苷酸引入到所述細胞中。68.權利要求67的方法，其中所述藥物傳遞系統包括脂質體，所述脂質體選自中性脂質和脂質樣化合物。69.權利要求67的方法，其中所述藥物傳遞系統包括細胞靶向成分。70.權利要求69的方法，其中所述細胞靶向化合物選自細胞表面受體的配體和核受體的配體。71.權利要求67的方法，其中所述藥物傳遞系統供在體內使用，且其中寡核苷酸和所述脂質體存在的比例為2∶1-1∶3/1μg-100mg每公斤體重。72.一種方法，所述方法包括a)提供i)能與c-ki-Ras基因啟動子區雜交的寡核苷酸；ii)包含c-ki-Ras基因的細胞；b)將所述寡核苷酸引入到所述細胞中。73.權利要求72的方法，其中所述寡核苷酸能在選自SEQIDNO46的核苷酸1-289之間或SEQIDNO46的核苷酸432-658之間的位置與c-ki-Ras基因啟動子區雜交。74.權利要求72的方法，其中所述寡核苷酸的長度在15-30個鹼基之間。75.權利要求72的方法，其中所述寡核苷酸中的所述至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。76.權利要求72的方法，其中所述寡核苷酸中的所有所述胞嘧啶鹼基都是5-甲基胞嘧啶。77.一種組合物，所述組合物包含能在生理條件下與c-myc基因啟動子區雜交的第一寡核苷酸。78.權利要求77的組合物，其中所述第一寡核苷酸選自SEQIDNO110，111，112，113，114和115。79.權利要求77的組合物，其中所述第一寡核苷酸中的至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。80.權利要求79的組合物，其中所述第一寡核苷酸中的所有所述胞嘧啶鹼基都是5-甲基胞嘧啶。81.權利要求80的組合物，其中所述第一寡核苷酸與所述c-myc基因啟動子區的所述雜交抑制所述c-myc基因的表達。82.權利要求81的組合物，其中所述c-myc基因在細胞染色體上，且其中所述第一寡核苷酸與所述c-myc基因啟動子區的所述雜交減少所述細胞的增殖。83.權利要求77的組合物，所述組合物還包含第二寡核苷酸。84.權利要求83的組合物，其中所述第二寡核苷酸中的至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。85.權利要求83的組合物，其中所述第二寡核苷酸選自SEQIDNO110，111，112，113，114和115，且其中所述第二寡核苷酸不同於所述第一寡核苷酸。86.權利要求83的組合物，其中所述第二寡核苷酸能與第二基因啟動子區雜交，其中所述第二基因不是c-myc。87.權利要求86的組合物，其中所述第二基因是癌基因。88.權利要求87的組合物，其中所述癌基因選自c-ki-Ras、c-Ha-Ras、bcl-2、Her-2和TGF-α。89.一種組合物，所述組合物包含能在選自SEQIDNO108的核苷酸3-124之間或SEQIDNO108的核苷酸165-629之間的位置與c-myc基因啟動子區雜交的寡核苷酸。90.一種方法，所述方法包括a)提供i)選自SEQIDNO110，111，112，113，114和115的寡核苷酸；ii)包含c-myc基因的細胞，其中所述c-myc基因能夠被表達，且其中所述細胞能夠增殖；b)將所述寡核苷酸引入到所述細胞中。91.權利要求90的方法，其中所述引入導致所述細胞的增殖減少。92.權利要求90的方法，其中所述給予導致所述c-myc基因表達的抑制。93.權利要求90的方法，其中所述細胞是癌細胞。94.權利要求90的方法，其中所述細胞在宿主動物中。95.權利要求94的方法，其中所述宿主動物是非人哺乳動物。96.權利要求94的方法，其中所述宿主動物是人。97.權利要求94的方法，其中所述寡核苷酸以0.01μg-100g的劑量引入到所述宿主動物中。98.權利要求94的方法，其中所述寡核苷酸以每公斤體重1mg-100mg的劑量引入到所述宿主動物中。99.權利要求94的方法，其中所述寡核苷酸每天一次或多次引入到所述宿主動物中。100.權利要求94的方法，其中所述寡核苷酸連續引入到所述宿主動物中。101.權利要求90的方法，其中所述細胞在細胞培養物中。102.權利要求90的方法，所述方法還包括將試驗化合物引入到所述細胞中的步驟。103.權利要求102的方法，其中所述試驗化合物是公知的化療藥物。104.權利要求94的方法，其中所述癌症選自胰腺癌、結腸癌、乳腺癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前列腺癌、淋巴瘤、卵巢癌和黑素瘤。105.權利要求14的方法，所述方法還包括提供藥物傳遞系統。106.權利要求105的方法，其中所述藥物傳遞系統包括脂質體，所述脂質體選自中性脂質和脂質樣化合物。107.權利要求105的方法，其中所述藥物傳遞系統包括細胞靶向成分。108.權利要求107的方法，其中所述細胞靶向化合物選自細胞表面受體的配體和核受體的配體。109.權利要求105的方法，其中所述藥物傳遞系統供在體內使用，且其中寡核苷酸和所述脂質體存在的比例為2∶1-1∶3/1μg-100mg每公斤體重。110.一種方法，所述方法包括a)提供i)能與c-myc基因啟動子區雜交的寡核苷酸；ii)包含c-myc基因的細胞；b)將所述寡核苷酸引入到所述細胞中。111.權利要求110的方法，其中所述寡核苷酸能在選自SEQIDNO108的核苷酸3-124之間或SEQIDNO108的核苷酸165-629之間的位置與c-myc基因啟動子區雜交。112.權利要求110的方法，其中所述寡核苷酸的長度在15-30個鹼基之間。113.權利要求110的方法，其中所述寡核苷酸中的所述至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。114.權利要求110的方法，其中所述寡核苷酸中的所有所述胞嘧啶鹼基都是5-甲基胞嘧啶。115.一種組合物，所述組合物包含能在生理條件下與c-Ha-ras基因啟動子區雜交的第一寡核苷酸。116.權利要求115的組合物，其中所述第一寡核苷酸選自SEQIDNO67，68，69，71，73，74，76，78，84，160，161和162。117.權利要求115的組合物，其中所述第一寡核苷酸中的至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。118.權利要求115的組合物，其中所述第一寡核苷酸中的所有所述胞嘧啶鹼基都是5-甲基胞嘧啶。119.權利要求118的組合物，其中所述第一寡核苷酸與所述c-Ha-ras基因啟動子區的所述雜交抑制所述c-Ha-ras基因的表達。120.權利要求119的組合物，其中所述c-Ha-ras基因在細胞染色體上，且其中所述第一寡核苷酸與所述c-Ha-ras基因啟動子區的所述雜交減少所述細胞的增殖。121.權利要求115的組合物，所述組合物還包含第二寡核苷酸。122.權利要求121的組合物，其中所述第二核苷酸中的至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。123.權利要求121的組合物，其中所述第二寡核苷酸選自SEQIDNO67，68，69，71，73，74，76，78，84，160，161和162，且其中所述第二寡核苷酸不同於所述第一寡核苷酸。124.權利要求121的組合物，其中所述第二寡核苷酸能與第二基因啟動子區雜交，其中所述第二基因不是c-Ha-ras。125.權利要求124的組合物，其中所述第二基因是癌基因。126.權利要求125的組合物，其中所述癌基因選自c-ki-Ras、c-myc、bcl-2、Her-2和TGF-α。127.一種組合物，所述組合物包含能在選自SEQIDNO66的核苷酸21-220之間、SEQIDNO66的核苷酸233-860之間、SEQIDNO66的核苷酸1411-1530之間或SEQIDNO66的核苷酸1631-1722之間的位置與c-Ha-ras基因啟動子區雜交的寡核苷酸。128.一種方法，所述方法包括a)提供i)選自SEQIDNO67，68，69，71，73，74，76，78，84，160，161和162的寡核苷酸；ii)包含c-Ha-ras基因的細胞，其中所述c-ki-ras基因能夠表達，且其中所述細胞能夠增殖；b)將所述寡核苷酸引入到所述細胞中。129.權利要求128的方法，其中所述引入導致所述細胞的增殖減少。130.權利要求128的方法，其中所述引入導致所述c-Ha-ras基因表達的抑制。131.權利要求128的方法，其中所述細胞是癌細胞。132.權利要求128的方法，其中所述細胞在宿主動物中。133.權利要求132的方法，其中所述宿主動物是非人哺乳動物。134.權利要求132的方法，其中所述宿主動物是人。135.權利要求132的方法，其中所述寡核苷酸以0.01μg-100g的劑量引入到所述宿主動物中。136.權利要求132的方法，其中所述寡核苷酸以每公斤體重1mg-100mg的劑量引入到所述宿主動物中。137.權利要求132的方法，其中所述寡核苷酸每天一次或多次引入到所述宿主動物中。138.權利要求132的方法，其中所述寡核苷酸連續引入到所述宿主動物中。139.權利要求128的方法，其中所述細胞在細胞培養物中。140.權利要求128的方法，所述方法還包括將試驗化合物引入到所述細胞中的步驟。141.權利要求140的方法，其中所述試驗化合物是公知的化療藥物。142.權利要求131的方法，其中所述癌症選自胰腺癌、結腸癌、乳腺癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前列腺癌、淋巴瘤、卵巢癌和黑素瘤。143.權利要求128的方法，所述方法還包括提供藥物傳遞系統以將所述寡核苷酸引入到所述細胞中。144.權利要求143的方法，其中所述藥物傳遞系統包括脂質體，所述脂質體選自中性脂質和脂質樣化合物。145.權利要求143的方法，其中所述藥物傳遞系統包括細胞靶向成分。146.權利要求145的方法，其中所述細胞靶向化合物選自細胞表面受體的配體和核受體的配體。147.權利要求143的方法，其中所述藥物傳遞系統供在體內使用，且其中寡核苷酸和所述脂質體存在的比例為2∶1-1∶3/1μg-100mg每公斤體重。148.一種方法，所述方法包括a)提供i)能與c-Ha-ras基因啟動子區雜交的寡核苷酸；ii)包含c-Ha-ras基因的細胞；b)將所述寡核苷酸引入到所述細胞中。149.權利要求148的方法，其中所述寡核苷酸能在選自SEQIDNO66的核苷酸21-220之間、SEQIDNO66的核苷酸233-860之間、SEQIDNO66的核苷酸1411-1530之間或SEQIDNO66的核苷酸1631-1722之間的位置與所述c-Ha-ras基因的所述啟動子區雜交。150.權利要求148的方法，其中所述寡核苷酸的長度在15-30個鹼基之間。151.權利要求148的方法，其中所述寡核苷酸中的所述至少一個胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。152.權利要求148的方法，其中所述寡核苷酸中的所有所述胞嘧啶鹼基都是5-甲基胞嘧啶。153.一種組合物，所述組合物包含能在生理條件下與Her-2基因啟動子區雜交的第一寡核苷酸。154.權利要求153的組合物，其中所述第一寡核苷酸選自SEQIDNO31，32，35，36，37和38。155.權利要求153的組合物，其中所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中所述CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。156.權利要求153的組合物，其中所述寡核苷酸的所有所述CG二核苷酸對中的所有所述胞嘧啶鹼基都是5-甲基胞嘧啶。157.權利要求153的組合物，其中所述寡核苷酸與所述Her-2基因啟動子區的所述雜交抑制所述Her-2基因的表達。158.權利要求157的組合物，其中所述Her-2基因在細胞染色體上，且其中所述寡核苷酸與所述Her-2基因啟動子區的所述雜交減少所述細胞的增殖。159.權利要求153的組合物，所述組合物還包含第二寡核苷酸。160.權利要求159的組合物，其中所述第二寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中所述CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。161.權利要求159的組合物，其中所述第二寡核苷酸選自SEQIDNO31，32，35，36，37和38。162.權利要求159的組合物，其中所述第二寡核苷酸能與第二基因啟動子區雜交，其中所述第二基因不是Her-2。163.權利要求163的組合物，其中所述第二基因是癌基因。164.權利要求163的組合物，其中所述癌基因選自c-ki-Ras、c-Ha-Ras、bcl-2、c-myc和TGF-α。165.一種組合物，所述組合物包含能在SEQIDNO29的核苷酸205-344之間或SEQIDNO29的核苷酸382-435之間的位置與c-myc基因啟動子區雜交的寡核苷酸。166.一種方法，所述方法包括a)提供i)選自SEQIDNO31，32，35，36，37和38的寡核苷酸；ii)包含Her-2基因的細胞；b)將所述寡核苷酸引入到所述細胞中。167.權利要求166的方法，其中所述給予導致所述細胞的增殖減少。168.權利要求166的方法，其中所述引入導致所述Her-2基因表達的抑制。169.權利要求166的方法，其中所述細胞是癌細胞。170.權利要求166的方法，其中所述細胞在宿主動物中。171.權利要求166的方法，其中所述宿主動物是非人哺乳動物。172.權利要求170的方法，其中所述宿主動物是人。173.權利要求170的方法，其中所述寡核苷酸以0.01μg-100g的劑量給予所述宿主動物。174.權利要求170的方法，其中所述寡核苷酸以每公斤體重1mg-100mg的劑量給予所述宿主動物。175.權利要求170的方法，其中所述寡核苷酸每天一次或多次給予所述宿主動物。176.權利要求170的方法，其中所述寡核苷酸連續給予所述宿主動物。177.權利要求166的方法，其中所述細胞在細胞培養物中。178.權利要求166的方法，所述方法還包括將試驗化合物給予所述細胞的步驟。179.權利要求178的方法，其中所述試驗化合物是公知的化療藥物。180.權利要求169的方法，其中所述癌症選自胰腺癌、結腸癌、乳腺癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前列腺癌、淋巴瘤、卵巢癌和黑素瘤。181.權利要求166的組合物，其中所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中所述CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。182.權利要求166的組合物，其中所述寡核苷酸的所有所述CG二核苷酸對中的所有所述胞嘧啶鹼基都是5-甲基胞嘧啶。183.權利要求166的方法，所述方法還包括提供藥物傳遞系統。184.權利要求183的方法，其中所述藥物傳遞系統包括脂質體，所述脂質體選自中性脂質和脂質樣化合物。185.權利要求183的方法，其中所述藥物傳遞系統包括細胞靶向成分。186.權利要求185的方法，其中所述細胞靶向化合物是特定細胞表面受體或核受體的配體或配體樣組分。187.權利要求183的方法，其中所述藥物傳遞系統供在體內使用，且其中寡核苷酸和所述脂質體存在的比例為2∶1-1∶3/1μg-100mg每公斤體重。188.一種方法，所述方法包括a)提供i)能與Her-2基因啟動子區雜交的寡核苷酸；ii)包含Her-2基因的細胞；b)將所述寡核苷酸引入到所述細胞中。189.一種組合物，所述組合物包含選自SEQIDNO134，136，139，140，141，142，143和144的寡核苷酸。190.權利要求189的組合物，其中所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中所述CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。191.權利要求189的組合物，其中所述寡核苷酸的所有所述CG二核苷酸對中的所有所述胞嘧啶鹼基是5-甲基胞嘧啶。192.權利要求189的組合物，其中所述寡核苷酸能在生理條件下與TGF-α基因啟動子區雜交。193.權利要求192的組合物，其中所述寡核苷酸與所述TGF-α基因啟動子區的所述雜交抑制所述TGF-α基因的表達。194.權利要求193的組合物，其中所述TGF-α基因在細胞染色體上，且其中所述寡核苷酸與所述TGF-α基因啟動子區的所述雜交減少所述細胞的增殖。195.權利要求189的組合物，所述組合物還包含第二寡核苷酸。196.權利要求195的組合物，其中所述第二寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中所述CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。197.權利要求195的組合物，其中所述第二寡核苷酸選自SEQIDNO134，136，139，140，141，142，143和144。198.權利要求195的組合物，其中所述第二寡核苷酸能與第二基因啟動子區雜交，其中所述第二基因不是TGF-α。199.權利要求198的組合物，其中所述第二基因是癌基因。200.權利要求199的組合物，其中所述癌基因選自c-ki-Ras、c-Ha-Ras、bcl-2、Her-2和c-myc。201.一種組合物，所述組合物包含能在選自SEQIDNO131的核苷酸1-90之間、SEQIDNO131的核苷酸175-219之間、SEQIDNO131的核苷酸261-367之間、SEQIDNO131的核苷酸431-930之間和SEQIDNO131的核苷酸964-1237之間的位置與c-myc基因啟動子區雜交的寡核苷酸。202.一種組合物，所述組合物包含能在生理條件下與TGF-α基因啟動子區雜交的寡核苷酸。203.一種方法，所述方法包括a)提供i)選自SEQIDNO134，136，139，140，141，142，143和144的寡核苷酸；ii)包含TGF-α基因的細胞；b)將所述寡核苷酸引入到所述細胞中。204.權利要求203的方法，其中所述給予導致所述細胞的增殖減少。205.權利要求203的方法，其中所述給予導致所述TGF-α基因表達的抑制。206.權利要求203的方法，其中所述細胞是癌細胞。207.權利要求203的方法，其中所述細胞在宿主動物中。208.權利要求207的方法，其中所述宿主動物是非人哺乳動物。209.權利要求207的方法，其中所述宿主動物是人。210.權利要求207的方法，其中所述寡核苷酸以0.01μg-100g的劑量給予所述宿主動物。211.權利要求207的方法，其中所述寡核苷酸以每公斤體重1mg-100mg的劑量給予所述宿主動物。212.權利要求207的方法，其中所述寡核苷酸每天一次或多次給予所述宿主動物。213.權利要求207的方法，其中所述寡核苷酸連續給予所述宿主動物。214.權利要求203的方法，其中所述細胞在細胞培養物中。215.權利要求203的方法，所述方法還包括將試驗化合物給予所述細胞的步驟。216.權利要求215的方法，其中所述試驗化合物是公知的化療藥物。217.權利要求206的方法，其中所述癌症選自胰腺癌、結腸癌、乳腺癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前列腺癌、淋巴瘤、卵巢癌和黑素瘤。218.權利要求203的方法，其中所述寡核苷酸包含至少一個CG二核苷酸對，其中所述CG二核苷酸對中的至少一個胞嘧啶鹼基包括5-甲基胞嘧啶。219.權利要求203的方法，其中所述寡核苷酸的所述CG二核苷酸對中的所有所述胞嘧啶鹼基都是5-甲基胞嘧啶。220.權利要求203的方法，所述方法還包括提供藥物傳遞系統。221.權利要求230的方法，其中所述藥物傳遞系統包括脂質體，所述脂質體包括中性脂質或脂質樣化合物。222.權利要求230的方法，其中所述藥物傳遞系統包括細胞靶向成分。223.權利要求233的方法，其中所述細胞靶向化合物是特定細胞表面受體或核受體的配體或配體樣組分。224.權利要求230的方法，其中所述藥物傳遞系統供在體內使用，且其中寡核苷酸和所述脂質體存在的比例為2∶1-1∶3/1μg-100mg每公斤體重。225.一種方法，所述方法包括a)提供i)能與TGF-α基因啟動子區雜交的寡核苷酸；ii)包含TGF-α基因的細胞；b)將所述寡核苷酸引入到所述細胞中。226.一種組合物，所述組合物包含能在生理條件下與bcl-2基因啟動子區雜交的第一寡核苷酸，其中所述第一寡核苷酸是SEQIDNO1438。227.權利要求236的組合物，其中所述bcl-2基因在細胞染色體上，且其中所述第一寡核苷酸與所述bcl-2基因啟動子區的所述雜交減少所述細胞的增殖。228.權利要求237的組合物，其中所述細胞是腫瘤細胞。229.權利要求238的組合物，其中所述腫瘤細胞是前列腺癌細胞。230.權利要求237的組合物，其中所述細胞在對象中。231.權利要求236的組合物，所述組合物還包含第二寡核苷酸。232.權利要求241的組合物，其中所述第二寡核苷酸能與第二基因啟動子區雜交，其中所述第二基因不是bcl-2。233.權利要求242的組合物，其中所述第二基因是癌基因。234.權利要求243的組合物，其中所述癌基因選自c-ki-Ras、c-Ha-Ras、c-myc、Her-2和TGF-α。235.權利要求236的組合物，所述組合物還包含公知的化療藥物。236.權利要求245的組合物，其中所述化療藥物是TAXOTERE。237.一種方法，所述方法包括a)提供i)包含具有SEQIDNO1438序列的寡核苷酸和脂質體的組合物；ii)能夠表達bcl-2基因的細胞，其中所述細胞能夠增殖；b)將所述寡核苷酸引入到所述細胞中。238.權利要求247的組合物，其中所述給予導致所述細胞增殖減少。239.權利要求248的組合物，其中所述給予導致所述bcl-2基因表達的抑制。240.權利要求247的組合物，其中所述細胞是癌細胞。241.權利要求250的組合物，其中所述癌細胞是前列腺癌細胞。242.權利要求247的組合物，其中所述細胞在宿主動物中。243.權利要求252的組合物，其中所述宿主動物是非人哺乳動物。244.權利要求252的組合物，其中所述宿主動物是人。245.權利要求252的方法，其中所述寡核苷酸以0.01μg-100g的劑量引入到所述宿主動物中。246.權利要求252的方法，其中所述寡核苷酸以每公斤體重1mg-100mg的劑量引入到所述宿主動物中。247.權利要求252的方法，其中所述寡核苷酸每天一次或多次引入到所述宿主動物中。248.權利要求252的方法，其中所述寡核苷酸連續引入到所述宿主動物中。249.權利要求247的方法，其中所述細胞在細胞培養物中。250.權利要求247的方法，所述方法還包括將試驗化合物引入到所述細胞中的步驟。251.權利要求260的方法，其中所述試驗化合物是公知的化療藥物。252.權利要求47的方法，其中所述癌症選自胰腺癌、結腸癌、乳腺癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前列腺癌、淋巴瘤、卵巢癌和黑素瘤。253.權利要求247的方法，其中所述脂質體是基於心磷脂的陽離子脂質體。254.權利要求263的方法，其中所述基於心磷脂的陽離子脂質體製劑是NEOPHECTIN。255.權利要求263的方法，其中所述脂質體包含硫酸甲酯N-[1-(2，3-二油醯氧基)丙基]-N，N，N-三甲基銨(DOTAP)。256.權利要求266的方法，其中所述寡核苷酸和所述脂質體存在的比例為2∶1-1∶3/1μg-100mg每公斤體重。257.權利要求264的方法，其中所述NEOPHECTIN和所述寡核苷酸以6∶1的電荷比存在。258.權利要求247的方法，所述方法還包括將公知的化療藥物給予所述對象的步驟。259.權利要求268的方法，其中所述公知的化療藥物是TAXOTERE。260.一種藥物組合物，所述藥物組合物包含具有SEQIDNO1438核酸序列的寡核苷酸和脂質體。261.權利要求270的組合物，其中所述脂質體是基於心磷脂的陽離子脂質體。262.權利要求271的方法，其中所述基於心磷脂的陽離子脂質體製劑是NEOPHECTIN。263.權利要求270的方法，其中所述脂質體包含硫酸甲酯N-[1-(2，3-二油醯氧基)丙基]-N，N，N-三甲基銨(DOTAP)。264.權利要求272的方法，其中所述NEOPHECTIN和所述寡核苷酸以6∶1的電荷比存在。全文摘要本發明涉及用於抑制基因表達的方法和組合物。具體的說，本發明提供基於寡核苷酸的治療藥物，以抑制與癌症相關的癌基因。文檔編號A61K48/00GK101014608SQ200580025490公開日2007年8月8日申請日期2005年6月1日優先權日2004年6月1日發明者G·謝克內亞德,M·P·索奇,N·古德溫,D·奧爾森申請人:普隆奈治療公司