具有抗老年痴呆症作用的新環烯醚萜類化合物的製作方法

2023-05-26 09:50:11

專利名稱：具有抗老年痴呆症作用的新環烯醚萜類化合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及一系列環烯醚萜類化合物在防止老年痴呆症等神經退行性疾病中的應用。分別以梔子和玄參為原料，通過多種分離方法得到一系列環烯醚萜類化合物，以轉基因果蠅為模型進行抗老年痴呆藥的活性篩選，結果表明，這些化合物能有效地提高老年痴呆轉基因果蠅的學習記憶能力，表明這些化合物具有明顯的治療老年痴呆症等神經系統退行性疾病的作用和良好的研究開發前景。

背景技術：
老年痴呆症是一種以進行性認知障礙和記憶力損害為主的中樞神經系統退行性疾病[1]。患者的生活質量低下，病程長且患病期間需要專人始終看護，加上患者情緒和行為貧乏的異常變化，給家屬和社會造成極大的經濟和心裡負擔[1]。抗老年痴呆症藥物的研製已引起全世界的高度重視。現在已建立了許多相關的生物活性篩選和評價體系，整體動物模型中的果蠅是人們最為熟知的模式生物之一。有著其他動物模型不能比擬的優勢，如個體空間佔位極小(一般一個試劑瓶中可培養上千隻果蠅)、飼養成本低、易培養、繁殖速度快且繁殖力強(篩選通量高)、樣品消耗量少(5-50mg)、壽命周期短(約50天，活性測試周期短)、與年齡相關的神經元退化明顯，是老年痴呆症等神經退行性疾病研究和藥物篩選的理想模型[3]。
環烯醚萜類化合物屬單萜類化合物，廣泛分布於玄參、梔子、杜仲、車前草、秦艽等雙子葉植物中，由於其多樣的藥理活性備受研究者的關注。文獻報導，京尼平苷酸對大鼠心臟有明顯的負性肌力作用、負性變時作用及負性冠狀動脈注率作用，提示環烯醚萜類化合物在心血管疾病的治療中很可能發揮顯著的作用[4]。馬鞭草屬植物Verbenalittoralis中有一新的環烯醚萜苷類化合物gelsemiol-6』-trans-cageoyl-glucoside，對PC12D細胞實驗顯示，30μmol·L-1的該化合物對神經生長因子(2ng·mL-1)介導的PC12D細胞軸突生長有10％的增強作用[5]。從北玄參Scrophularia buergerianaMiquel的根中提取的4個新的環烯醚萜苷8-O-E-p-甲氧基肉桂醯哈帕苷、8-O-Z-p-甲氧基肉桂醯哈帕苷、6』-O-E-p-甲氧基肉桂醯哈帕苷和6』-O-Z-p-甲氧基肉桂醯哈帕苷，均顯著阻止乳酸脫氫酶(LDH)的釋放，起到神經保護作用[6]。沿海馬鞭草種也發現了具有促進神經生長因子活性的環烯醚萜類化合物。近期有研究報導以梔子組方的黃連解毒湯(黃連、黃柏、黃芩、梔子)具有抗老年痴呆的作用[7，8]，但是黃連解毒湯抗老年痴呆的活性物質尚不清楚，有待進一步研究。基於前人的研究和完備的篩選體系，我們對梔子和玄參等植物進行了抗老年痴呆活性先導或合物的研究，發現了一系列具有顯著活性的環烯醚萜類化合物。
[1]陳奇中藥藥效研究思路與方法北京人民衛生出版社2005 [2]韓濟生神經科學原理北京北京醫科大學出版社1999 [3]Rubin GM等人.Comparative genomics of the eukaryotes.Science2000，287(5461)，2204-2215 [4]董娟娥張靖植物中環烯醚萜類化合物的研究進展西北林學院學報2004，19(3)，131-135 [5]段靜雨馬鞭草屬植物Verbena littoralis中一新的環烯醚萜苷類患合物寄去對神經生長因子的增強活性國外醫藥植物分冊，2004，19(5)207 [6]Kim S R，Koo K A，Sung S H，et al，Iridoids from Scrphulariabuergeriana attenuate glutamate-include neurotoxicity in rat corticalcultures[J].J Neurosci Res，2003，74(6)948-955 [7]邢秀吉老年痴呆症研究現狀及中醫治療對策福建中醫學院學報2002，12(1)，58-60 [8]陳建鴻，等益氣解毒法治療老年性痴呆的臨床研究福建中醫學院學報2006，16(5)，7-8 發明概述 本發明涉及通式(I)所示的環烯醚萜類化合物

通式(I) 或其可藥用鹽 其中 3—4位、6—7位和7—8位為雙鍵或單鍵。
R1為H、OH、OCH3、直鏈糖基或支鏈糖基，所述糖基選自葡萄糖基、半乳糖基、甘露糖基、阿拉伯糖基、木糖基、核糖基、來蘇糖基和夫糖基，所述糖基的糖鏈中的羥基任選被選自下列的醯化基團醯化CH3(CH2)nCO、HOOC(CH2)n CO、苯甲醯基、苯乙醯基、苯丙醯基、雜環甲醯基、雜環乙醯基和雜環丙醯基，所述雜環選自吡喃、噻喃、吡啶、嘧啶、吡嗪、三嗪、噠嗪、噁嗪和異噁嗪，其中所述苯環和雜環可任選被一個或多個選自氟、氯、溴、碘、羥基和烷氧基的取代基取代，n＝0、1、2、3、4、5或6； R3、R7和R8獨立地為H、CH3、CHO、COOCH3、COOH、CH2OH、OH、直鏈糖基或支鏈糖基，所述糖基選自葡萄糖基、半乳糖基、甘露糖基、阿拉伯糖基、木糖基、核糖基、來蘇糖基和夫糖基，所述糖基的糖鏈中的羥基任選被選自下列的醯化基團醯化CH3(CH2)nCO、HOOC(CH2)nCO、苯甲醯基、苯乙醯基、苯丙醯基、雜環甲醯基、雜環乙醯基和雜環丙醯基，所述雜環選自吡喃、噻喃、吡啶、嘧啶、吡嗪、三嗪、噠嗪、噁嗪和異噁嗪，其中所述苯環和雜環可任選被一個或多個選自氟、氯、溴、碘、羥基和烷氧基的取代基取代，n＝0、1、2、3、4、5或6； R2、R4、R5和R6獨立地為H、OCH3、OH、直鏈糖基或支鏈糖基，所述糖基選自葡萄糖基、半乳糖基、甘露糖基、阿拉伯糖基、木糖基、核糖基、來蘇糖基和夫糖基，所述糖基的糖鏈中的羥基任選被選自下列的醯化基團醯化CH3(CH2)nCO、HOOC(CH2)n CO、苯甲醯基、苯乙醯基、苯丙醯基、雜環甲醯基、雜環乙醯基和雜環丙醯基，所述雜環選自吡喃、噻喃、吡啶、嘧啶、吡嗪、三嗪、噠嗪、噁嗪和異噁嗪，其中所述苯環和雜環可任選被一個或多個選自氟、氯、溴、碘、羥基和烷氧基的取代基取代，n＝0、1、2、3、4、5或6； 或者在6位與7位和/或7位與8位間存在三元氧環， 條件是，所述通式(I)化合物不包括以下化合物


和
在優選的實施方案中，在通式(I)中，3—4位為雙鍵，R2、R3和R6均為氫，R4和R5均為羥基，且R8為甲基。
在一個更優選的實施方案中，所述化合物是
在另一個更優選的實施方案中，所述化合物是
在另一個更優選的實施方案中，所述化合物是
在另一個更優選的實施方案中，所述化合物是
在另一個優選的實施方案中，在通式(I)中，3—4位和7—8位均為雙鍵，R2、R4、R5、R6和R8均為氫，且R3為COOCH3。
在一個更優選的實施方案中，所述化合物是
在另一個更優選的實施方案中，所述化合物是
在另一個更優選的實施方案中，所述化合物是
在另一個更優選的實施方案中，所述化合物是
本發明還涉及通式(I)所示的環烯醚萜類化合物或其可藥用鹽在製備用於預防或治療神經退行性疾病的藥物中的用途

通式(I) 其中 3—4位、6—7位和7—8位為雙鍵或單鍵。
R1為H、OH、OCH3、直鏈糖基或支鏈糖基，所述糖基選自葡萄糖基、半乳糖基、甘露糖基、阿拉伯糖基、木糖基、核糖基、來蘇糖基和夫糖基，所述糖基的糖鏈中的羥基任選被選自下列的醯化基團醯化CH3(CH2)nCO、HOOC(CH2)n CO、苯甲醯基、苯乙醯基、苯丙醯基、雜環甲醯基、雜環乙醯基和雜環丙醯基，所述雜環選自吡喃、噻喃、吡啶、嘧啶、吡嗪、三嗪、噠嗪、噁嗪和異噁嗪，其中所述苯環和雜環可任選被一個或多個選自氟、氯、溴、碘、羥基和烷氧基的取代基取代，n＝0、1、2、3、4、5或6； R3、R7和R8獨立地為H、CH3、CHO、COOCH3、COOH、CH2OH、OH、直鏈糖基或支鏈糖基，所述糖基選自葡萄糖基、半乳糖基、甘露糖基、阿拉伯糖基、木糖基、核糖基、來蘇糖基和夫糖基，所述糖基的糖鏈中的羥基任選被選自下列的醯化基團醯化CH3(CH2)nCO、HOOC(CH2)n CO、苯甲醯基、苯乙醯基、苯丙醯基、雜環甲醯基、雜環乙醯基和雜環丙醯基，所述雜環選自吡喃、噻喃、吡啶、嘧啶、吡嗪、三嗪、噠嗪、噁嗪和異噁嗪，其中所述苯環和雜環可任選被一個或多個選自氟、氯、溴、碘、羥基和烷氧基的取代基取代，n＝0、1、2、3、4、5或6； R2、R4、R5和R6獨立地為H、OCH3、OH、直鏈糖基或支鏈糖基，所述糖基選自葡萄糖基、半乳糖基、甘露糖基、阿拉伯糖基、木糖基、核糖基、來蘇糖基和夫糖基，所述糖基的糖鏈中的羥基任選被選自下列的醯化基團醯化CH3(CH2)nCO、HOOC(CH2)n CO、苯甲醯基、苯乙醯基、苯丙醯基、雜環甲醯基、雜環乙醯基和雜環丙醯基，所述雜環選自吡喃、噻喃、吡啶、嘧啶、吡嗪、三嗪、噠嗪、噁嗪和異噁嗪，其中所述苯環和雜環可任選被一個或多個選自氟、氯、溴、碘、羥基和烷氧基的取代基取代，n＝0、1、2、3、4、5或6； 或者在6位與7位和/或7位與8位間存在三元氧環。
在一個優選的實施方案中，所述神經退行性疾病是血管性痴呆、血管性認知障礙、老年痴呆症、記憶力減退、腦組織退行性病變症候群或膽鹼能神經退行性病變。
在一個優選的實施方案中，在通式(I)中，3—4位和7—8位均為雙鍵，R2、R4、R5、R6和R8均為氫，且R3為COOCH3。
在一個更優選的實施方案中，所述化合物是
在另一個更優選的實施方案中，所述化合物是
在另一個更優選的實施方案中，所述化合物是
在另一個更優選的實施方案中，所述化合物是
在一個優選的實施方案中，在通式(I)中，3—4位和7—8位均為雙鍵，R2、R4、R5、R6和R8均為氫，且R3為COOCH3。
在一個更優選的實施方案中，所述化合物是
在另一個更優選的實施方案中，所述化合物是
在另一個更優選的實施方案中，所述化合物是
在另一個更優選的實施方案中，所述化合物是
在另一個實施方案中，所述化合物選自



和
本發明還涉及一種藥物組合物，所述藥物組合物包含如上所述的通式(I)的環烯醚萜類化合物與可藥用載體。
本發明還涉及製備如上所述的通式(I)的環烯醚萜類化合物的方法，所述方法包括採用中藥玄參和梔子作為原料，用溶劑進行提取並且進行分離。
所述溶劑優選為有機溶劑和/或水。所述有機溶劑優選為低級醇。優選地，所述低級醇選自甲醇和乙醇。所述有機溶劑也可以選自丙酮和乙酸乙酯。
所述分離優選通過層析法和/或萃取法來進行。
發明詳述 本發明涉及一系列環烯醚萜類化合物及其中任意一種或一種以上化合物構成的組合物在拮抗和防治老年痴呆症等神經系統退行性疾病中的應用。
發明者通過多種化學手段從中藥玄參和梔子中得到了一系列環烯醚萜類化合物(由以下通式I表示)，並通過轉基因果蠅活性篩選體系證明了其預防/治療老年痴呆症的作用。


通式(I) 其中各基團的定義如前文所述。
第一組優選的化合物，其中3，4位間存在雙鍵，R2，R3，R6均為氫，R4，R5，羥基，R8為甲基。
優選R1為O-β-D-Glu-6-O-caffeoyl，R7為OH，化學名為6」-O-咖啡醯基哈帕苷(6」-O-caffeoylharpagide)的新化合物，簡稱(SN-1)。

優選R1為O-β-D-Glu-6-O-feruloyl，R7為OH，化學名為6」-O-阿魏醯基哈帕苷(6」-O-feruloyl harpagide)的新化合物，簡稱(SN-2)。

優選R1為O-β-D-Glu-6-O-β-D-Glu，R7為O-cinnamoyl，化學名為6」-O-β-D-吡喃葡萄基哈帕俄苷(6」-O-β-glucopyranosylharpagoside)的新化合物，簡稱(SN-3)。

優選R1為O-β-D-Glu-6-O-a-D-Glu，R7為O-cinnamoyl，化學名為6」-O-α-D-吡喃葡萄基哈帕俄苷(6」-O-α-glucopyranosylharpagoside)的新化合物，簡稱(SN-4)。

第二組優選的化合物，其中3和4位，7和8位間存在雙鍵，R2，R4，R5，R6，R8均為氫，R3為COOCH3。
優選R1為O-β-D-Glu，R7為CH2OCOCH2CH2COOH，化學名為丁二酸單京尼平苷酯(geniposide 10-succinate)的新化合物，簡稱(GJ-1)。

優選R1為O-β-D-Glu-6-O-sinapoyl，R7為CH2OH，化學名為6』-O-芥子醯基京尼平苷(6』-O-sinapoyl geniposide)的新化合物，簡稱(GJ-2)。

優選R1為O-β-D-Glu-6-O-p-hydroxy cinnamoyl，R7為CH2OH，化學名6』-O-對羥基桂皮醯基京尼平苷(6』-O-p-hydroxy cinnamoyl geniposide)的新化合物，簡稱(GJ-3)。

優選R1為O-β-D-Glu-6-O-Ac，R7為CH2OH，化學名6』-乙醯基京尼平苷(6』-acetyl geniposide)的新化合物，簡稱(GJ-4)。

此外，在通式(I)範圍內的以下化合物是已知的 簡稱 化合物結構式

本發明所提供的化合物，具有顯著的改善轉基因老年痴呆果蠅學習記憶的作用，可用於包括血管性痴呆、血管性認知障礙，老年痴呆症(又稱為阿爾茨海默症)，膽鹼能神經退行病變，學習記憶能力減退等神經系統退行性疾病的預防和治療。
上述的環烯醚萜化合物通式I，包括所優選的任何一個化合物應用於老年痴呆等神經退行性疾病的預防和治療。並且，可用上述的化合物組成組合物，任何一種或一種以上，與藥學意義上可用的各種輔料，製成各種製劑和劑型應用於預防和治療老年痴呆症等神經退行性疾病。
具體說，本發明中提供的環烯醚萜化合物是從中藥玄參和梔子中提取分離得到的。用於提取的溶劑可採用通常用於植物提取的溶劑，例如，可單獨或組合使用甲醇、乙醇等低級醇、丙酮、乙酸乙酯等有機溶劑及水。提取的方法可採用常規方法，一般提取溫度為20-100℃，總提取時間可1-48小時，可採用熱提取或冷提取。所得提取物經過減壓濃縮的到浸膏。總浸膏可通過多種化學方法，如柱層析法、萃取法等多種方法富集得到總環烯醚萜苷。隨後，採用多種分離手段分離精製得到單體環烯醚萜化合物。
本發明的結果是提供了具有預防/治療老年痴呆病等神經推行性疾病作用的總環烯醚萜苷、單體化合物及其組合物。
在本申請說明書和權利要求書中使用的術語「可藥用鹽」是指其中母體化合物通過形成其酸或者鹼鹽而得到修飾的衍生物。可藥用鹽的實例包括但不限於，鹼性殘基(比如胺)的無機或者有機酸鹽；酸性殘基(比如羧酸)的鹼金屬或者有機鹽；等等。可藥用鹽包括母體化合物形成的常規無毒鹽或者季銨鹽，例如，由無毒無機酸或者有機酸形成的鹽。例如，所述常規的無毒鹽包括由無機酸得到的鹽，例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、胺磺酸鹽、磷酸鹽和硝酸鹽等等；以及由有機酸製備的鹽，例如醋酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、乙醇酸鹽、硬脂酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、抗壞血酸鹽、雙羥萘酸鹽、馬來酸鹽、羥基馬來酸鹽、苯基馬來酸鹽、穀氨酸鹽、安息香酸鹽、水楊酸鹽、磺胺酸鹽、2-乙醯氧基-安息香酸鹽、富馬酸鹽、甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、乙基二磺酸鹽、草酸鹽和羥乙磺酸鹽等等。
當本發明化合物為鹼性時，所述鹽可以由可藥用無毒酸進行製備，包括無機或者有機酸。所述酸包括乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟腦磺酸、檸檬酸、乙磺酸、富馬酸、葡糖酸、穀氨酸、氫溴酸、鹽酸、羥乙磺酸、乳酸、馬來酸、蘋果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、硝酸、雙羥萘酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸和對甲苯磺酸等等。在本發明的一方面中，所述鹽為檸檬酸、氫溴酸、鹽酸、馬來酸、磷酸、硫酸、富馬酸和酒石酸鹽。應當理解，如本文中所應用，對通式(I)化合物的參照還意指包括可藥用鹽。
在本申請說明書和權利要求書中使用的術語烷氧基優選是C1-C6烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基等等。
在本申請說明書和權利要求書中使用的術語「組合物」意指包括含有特定量的特定成分的產品，以及任何由指定量的指定成分組合直接或者間接得到的產品。涉及藥物組合物的該術語意指包括含有活性成分和組成載體的惰性成分的產品，以及任何由組合、配合或者聚集任何兩種或更多種成分、分解一種或多種成分、或者由一種或多種成分的其它類型反應或相互作用直接或者間接得到的產品。據此，本發明的藥物組合物包括任何通過混合本發明化合物和可藥用載體而製備的組合物。「可藥用」意指載體、稀釋劑或者賦形劑必須與其它製劑成分相容並且對其受者無害。
本發明化合物可以通過口服、胃腸外(例如，肌內、腹膜內、靜脈內、ICV、腦池內注射或者輸注、皮下注射或者植入)、通過吸入噴霧劑、經鼻、陰道、直腸、舌下或者局部給藥途徑給藥，並且可以將它們單獨或者一起配製成含有適用於各種給藥途徑的常規無毒可藥用載體、助劑和賦形劑的適宜劑量單元製劑。
用於給藥本發明化合物的藥物組合物可以適宜地以劑量單元形式存在，並且可以通過藥學領域任何熟知的方法進行製備。所有方法都包括使活性成分與包括一種或者多種可藥用載體混合的步驟。通常，藥物組合物通過以下方式進行製備使活性成分與液體載體或者細碎的固體載體或者二者均勻和密切混合，和然後，如果必要，將產品成形為期望的製劑。在藥物組合物中，所述活性成分以足以對疾病過程或者症狀產生預期效果的量包含在其中。在本文中使用的術語「組合物」意圖包括含有指定量的指定成分的產品，以及任何由指定量的指定成分組合直接或者間接得到的產品。
含有活性成分的藥物組合物可以為適用於口服應用的形式，例如，為片劑、藥片、錠劑、含水或者含油混懸劑、可分散性粉劑或者粒劑、乳劑、液劑、硬膠囊或者軟膠囊、或者糖漿劑或者酏劑。設計用於口服應用的組合物可以根據製造藥物組合物領域熟知的任何方法進行製備，並且為了提供藥學上精美並且可口的製劑，所述組合物可以含有一種或者多種選自甜味劑、增香劑、著色劑和防腐劑的試劑。片劑含有與適用於製造片劑的無毒可藥用賦形劑混合的活性成分。這些賦形劑可以為，例如，惰性稀釋劑，比如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或者磷酸鈉；粒化和崩解劑，例如玉米澱粉或者藻酸；粘合劑，例如澱粉、凝膠或者阿拉伯膠；和潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或者滑石。所述片劑可以未經包衣或者它們可以通過已知工藝進行包衣以延遲崩解和吸收在胃腸道內，從而提供較長時間內的持續作用。例如，可以使用延時材料，比如單硬脂酸甘油酯或者二硬脂酸甘油酯。它們還可以進行包衣，從而形成用於控釋的滲透治療學片劑。還可以將口服片劑配製用於速釋，比如緻密融化片劑或者幹膠片、快速溶解片劑或者緻密溶解膜劑。
用於口服應用的製劑還可以作為硬膠囊存在，其中活性成分與惰性固體稀釋劑(例如碳酸鈣、磷酸鈣或者高嶺土)混合，或者作為軟膠囊存在，其中活性成分與含水或者含油介質(例如花生油、液體石蠟或者橄欖油)混合。
含水混懸劑含有與適用於製造含水混懸劑的無毒可藥用賦形劑混合的活性物質。所述賦形劑為助懸劑，例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥基-丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍樹膠和阿拉伯樹膠；分散或者潤溼劑可以是天然存在的磷脂(例如卵磷脂)、或者氧化烯與脂肪酸的縮合產物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)、或者乙烯化氧與長鏈脂族醇的縮合產物(例如十七烷乙烯氧基十六醇)、或者乙烯化氧與源於脂肪酸和己糖醇的偏酸的縮合產物(比如聚氧乙烯山梨醇單油酸酯)或者乙烯化氧與源於脂肪酸的偏酯和己糖醇酸酐的縮合產物(例如聚乙烯單油酸山梨醇酐酯)。所述含水混懸劑還可以含有一種或者多種防腐劑(例如對羥基苯甲酸乙酯或者對羥基苯甲酸正丙酯)、一種或者多種著色劑、一種或者多種增香劑和一種或者多種甜味劑(比如蔗糖或者糖精)。
含油混懸劑可以通過將活性成分懸浮在植物油(例如花生油、橄欖油、芝麻油或者椰子油)中或者懸浮在礦物油(比如液體石蠟)中進行製備。所述含油混懸劑可以含有增稠劑，例如蜂蠟、硬石蠟或者鯨蠟醇。可以將比如如上所述的那些甜味劑和增香劑加入其中，從而提供可口的口服製劑。這些組合物可以通過加入抗氧化劑(比如抗壞血酸)得到保持。
適用於製備含水混懸劑的可分散性粉劑和粒劑通過加入水，提供了與分散劑或者潤溼劑、助懸劑和一種或者多種防腐劑混合的活性成分。適宜的分散劑或者潤溼劑和助懸劑為上述例證說明的那些試劑。其中還可以存在其它賦形劑(例如甜味劑、增香劑和著色劑)。
本發明藥物組合物還可以為水包油乳化劑形式。所述油相可以為植物油(例如橄欖油或者花生油)或者礦物油(例如液體石蠟)或者它們的混合物。適宜的乳化劑可以為天然存在的樹膠(例如阿拉伯樹膠或者黃蓍樹膠)、天然存在的磷脂(例如大豆、卵磷脂)和源於脂肪酸與己糖醇酸酐的酯或者偏酯(例如單油酸山梨醇酐酯)以及所述偏酯與乙烯化氧的縮合產物(例如聚氧乙烯單油酸山梨醇酐酯)。所述乳劑還可以含有甜味劑或者增香劑。
糖漿劑和酏劑可以利用甜味劑(例如，甘油、丙二醇、山梨醇或者蔗糖)進行配製。所述製劑還可以含有潤溼劑、防腐劑和增香劑以及著色劑。
藥物組合物可以為無菌可注射含水或者含油混懸劑的形式。所述混懸劑可以根據本領域熟知的工藝，利用上述適宜的分散劑或者潤溼劑和助懸劑進行配製。所述可注射的無菌製劑還可以是在無毒的胃腸外可接受的稀釋劑或者溶劑中的可注射無菌溶液或者懸浮液，例如為1，3-丁二醇溶液。在可接受的賦形劑和溶劑中，可以使用的為水、生理鹽水和等滲氯化鈉溶液。此外，通常將無菌、固定油類用作溶劑或者懸浮介質。基於上述目的，任何無味的固定油都可以使用，包括合成單或者甘油二酯。此外，在可注射製劑中可以應用比如油酸的脂肪酸。
本發明化合物還可以為用於直腸給藥藥物的栓劑形式。這些組合物可以通過將藥物與在常溫下為固體但是在直腸溫度下為液體並且由此將在直腸中熔化從而釋放藥物的適宜無刺激性賦形劑混合得到製備。所述物質為可可脂和聚乙二醇。
對於局部應用，可以使用含有本發明化合物的乳膏劑、膏劑、膠狀物、液劑或者混懸劑等等。類似地，透皮貼片也可以用於局部給藥。
提供下列實施例來進一步舉例說明本發明，但這不是對本發明的限制。
實施例 實施例1 第一部分玄參中環烯醚萜類化合物的提取分離 取玄參科植物玄參(Scrophularia ningpoensis Hemsl)乾燥根18kg，用60％乙醇加熱回流提取，濃縮提取物，分別採用乙酸乙酯，正丁醇進行等體積萃取3次，正丁醇萃取部分通過D101大孔樹脂柱，用水、30％乙醇、50％乙醇和95％乙醇進行梯度洗脫。50％乙醇洗脫部分50.2g經矽膠柱色譜，氯仿-甲醇955-70∶30梯度洗脫，得到SN-9(14g)；將子餾分Fr.1-Fr.7(3.9g)，經ODS柱，甲醇-水40∶60洗脫，再經過反向HPLC，甲醇-水35:65洗脫，得到SN-2(117.1mg)，SN-6(17.9mg)，SN-7(10.1mg)，SN-8(28.2mg)，子餾分Fr.5(6.1g)經反向HPLC，甲醇-水50:50洗脫，得到化合物SN-3(237.6mg)，SN-4(110.1mg)，SN-5(13.0mg)。30％乙醇洗脫部分51.4g經矽膠柱色譜，氯仿-甲醇90:10-60:40梯度洗脫，子餾分Fr.4(13g)經ODS反向柱色譜，甲醇-水20:80-60:40梯度洗脫，再經過HPLC純化，甲醇-水25:75洗脫，得到SN-1(27.2mg)。子餾分Fr.6(5.6g)，經ODS反向柱色譜，甲醇-水20:80-60:40梯度洗脫，再經過HPLC純化，甲醇-水25:75洗脫，得到SN-10(21.7mg)。
所獲得的各化合物的純度以及量如下表A所示 表A No.編號純度重量 結構 1* SN-195％ 27.2mg
2* SN-2 95％ 117.1mg
3* SN-3 95％ 237.6mg
4* SN-4 95％ 110.1mg
5 SN-5 95％ 13.0mg
6 SN-6 95％ 17.9mg
7 SN-7 95％ 10.1mg
8 SN-8 95％ 28.2mg
9 SN-9 90％ 14g
10 SN-10 75％ 21.7mg
注有*號者為新化合物 所獲得的各化合物的物理化學常數如下 化合物SN-1(6＂-O-咖啡醯基哈帕苷)淺棕色不定型粉末，

-37.6°(c＝1.0，MeOH)。Molish和FeCl3反應均為陽性。UV(MeOH)λmax nm(logε)203(2.56)，227(2.48)，312(2.60)；IR(KBr)cm-13394(OH)，1605，1520(phenyl nucleus)。HR-ESI-MSm/z 549.1592[M+Na]+(Calcd for549.1584)，確認化合物SN-1的分子式為C24H30O13。13C及1H NMR數據見表1。
化合物SN-2(6＂-O-阿魏醯基哈帕苷)淺棕色不定型粉末。Molish和FeCl3反應均為陽性。

-35.2°(MeOH，c＝1.0)；UV(MeOH)λmaxnm(log ε)204(2.58)，235(2.48)，325(2.61)；IR(KBr)cm-13417(OH)，1601，1516(phenyl nucleus)。HR-ESI-MSm/z 563.1752[M+Na]+(Calcdfor563.1741)，確認化合物SN-2的分子式為C25H32O13。13C及1H NMR數據見表1。
化合物SN-3(6＂-O-β-D-吡喃葡萄基哈帕俄苷)淺棕色不定型粉末。Molish反應陽性。

-81.6°(c＝1.0，MeOH)；UV(MeOH)λmaxnm(log ε)206(2.16)，281(1.50)，325(1.18)；IR(KBr)cm-13337(OH)，1635，1516(phenyl nucleus)。HR-ESI-MSm/z 679.2192[M+Na]+(Calcdfor679.2214)，確認化合物SN-3的分子式為C26H40O16。13C及1H NMR數據見表2。
化合物SN-4(6＂-O-α-D-吡喃葡萄基哈帕俄苷)淺棕色不定型粉末。Molish反應陽型。

-82.3°(c＝1.0，MeOH)；IR(KBr)cm-13421(OH)，1700(-C＝O)，1508，1454(phenyl nucleus)。HR-ESI-MSm/z679.2164[M+Na]+(Calcd for679.2214)，確認化合物SN-4的分子式為C26H40O16。13C及1H NMR數據見表2。
化合物SN-5(6＂-O-α-D-吡喃半乳糖基哈帕苷)淺棕色不定型粉末。Molish反應陽性。ESI-MSm/z 679[M+Na]+，655[M-H]-，提示化合物SN-5的分子量為656。13C及1H NMR數據見表2。
化合物SN-6(6＂-O-對羥基肉桂醯基哈帕苷)淺棕色不定型粉末，Molish和FeCl3反應均為陽性。ESI-MSm/z 533[M+Na]+，519[M-H]-，提示化合物SN-6的分子量為520。13C及1H NMR數據見表3。
化合物SN-7(8-O-對羥基肉醯基哈帕苷)淺棕色不定型粉末，Molish和FeCl3反應均為陽性。ESI-MSm/z 533[M+Na]+，519[M-H]-，提示化合物SN-7的分子量為520。13C及1H NMR數據見表3。
化合物SN-8(8-O-阿魏醯基哈帕苷)淺棕色不定型粉末，Molish和FeCl3反應均為陽性。ESI-MSm/z 563[M+Na]+，539[M-H]-，提示化合物SN-8的分子量為540。13C及1H NMR數據見表3。
化合物SN-9(哈帕俄苷)淺棕色不定型粉末，Molish和反應陽性。ESI-MSm/z 517[M+Na]+，493[M-H]-，提示化合物SN-9的分子量為494。13C及1H NMR數據見表4。
化合物SN-10(哈帕苷)白色不定型粉末，Molish反應陽性。ESI-MSm/z 387[M+Na]+，363[M-H]-，提示化合物SN-10的分子量為364。13C及1H NMR數據見表

表1化合物SN-1和SN-2的NMR數據(400和100MHz，CD3OD) 1 2 No. δH，J(Hz) δc δH，J(Hz) δc 1 5.65，d(1.2)93.1 5.65，d(1.2) 93.1 2 3 6.32，d(6.4)142.56.30，d(6.4) 1425 4 4.93，dd(6.4，1.4) 108.44.93，dd(6.4，1.5) 108.4 5 72.872.7 6 3.67，t(3.9)783 3.67，t(3.9) 783 1.85，dd(13.7，4.6)；1.84，dd(13.7，4.6) 7 46.946.9 1.75dd(13.8，3.0)1.73dd(13.73.2) 8 78.478.4 9 254，s 59.5 2.54，s59.5 10 1.18，s 25.0 1.17，s25.0 1』127.7 127.6 2』7.03，d(2.0)115.27.16，d(1.9) 117.7 3』146.8 149.3 4』149.6 150.6 5』6.76，d(8.2)116.56.79，d(8.2) 116.5 6』6.93，dd(8.2，2.0) 123.17.05，dd(8.2，1.9) 124.2 α 6.28，d(15.9) 114.86.38，d(15.9) 115.2 β 7.56，d(15.9) 147.27.62，d(15.9) 147.1 -C＝O 169.1 169.1 1」4.59，d(7.9)99.2 4.59，d(7.9) 99.2 2」3.25，t(8.9)74.4 3.24，t(9.0) 74.4 3」3.39，t(7.4)774 3.41，t(6.2) 77.4 4」3.40，t(7.4)71.7 3.40，t(6.2) 71.7 5」3.56，m 75.7 3.55，m75.6 4.48，dd(12.02.1)4.48，dd(12.0，2.2)； 6」64.5645 4.35，dd(12.0，5.8) 4.36，dd(12.0，5.8) 表2化合物SN-3，SN-4和SN-5的NMR數據(400和100MHz，CD3OD)3 4 5 NoδH，J(Hz)δc δH，J(Hz) δcδH，J(Hz)δc 16.19，d(1.2)94.3 6.19，d(1.2) 94.2 6.20，d(1.2) 94.4 2 36.39，d(6.4)143.86.39，d(6.4) 143.86.40，d(6.4) 143.8 44.93，dd(6.4，1.6) 107.04.93，dd(6.4，1.6) 107.14.93，dd(6.4，2.0)107.1 573.673.7 73.5 63.74，t(34) 77.7 3.75，m77.8 3.74，m 77.8 72.24，d(15.1)2.24，d(15.1) 2.34，d(15.1)46.3 46.3 46.31.99dd(15.14.4) 1.98dd(15.14.4) 2.00dd(15.14.4) 888.588.5 88.5 92.92，s 55.4 2.92，s55.5 2.93，s 55.5 10 1.53，s 22.9 1.53，s22.8 1.53，s 22.8 1』 136.0 136.0 136.0 2』 7.58，m 129.27.60，m129.37.59，m 129.3 3』 7.37，m 130.07.37，m130.07.38，m 130.0 4』 7.39，m 131.37.39，m131.37.38，m 131.4 5』 7.37，m 130.07.37，m130.07.38，m 130.0 6』 7.58，m 129.27.60，m129.37.59，m 129.3 α 6.50，d(16.0)120.36.49，d(16.0) 120.46.49，d(16.0)120.2 β 7.70，d(16.0)146.07.68，d(16.0) 145.97.68，d(16.0)146.0 -C＝O168.3 168.2 -OCH3 1」 4.63，d(7.9)99.3 4.63，d(7.9) 99.3 4.64，d(7.9) 99.6 2」 3.23，t(9.1)74.4 3.23，t(8.6) 74.5 3.23，t(8.9) 74.0 3」 3.45，m 77.7 3.45，m77.8 3.40，m 77.8 4」 3.38，t(7.4)71.7 3.38，m71.7 5」 3.55，m 77.7 3.57，m76.8 6」 4.20，dd(12.0，1.8)；69.6 3.96，m；3.85，m 67.83.89，dd(12.0，6.5) 1」 4.59，d(7.9)104.64.98，d(3.5) 100.3 2」 3.23，t(9.1)75.4 3.57，m71.9 3」 3.41，m 77.7 3.40，t(6.2) 72.4 4」 3.38，t(7.4)71.7 3.36，m70.6 5」 3.53d(9.1) 77.7 3.95m 71.3 6」 3.90，dd(12.0，2.3)62.8 3.78，m63.13.68，dd(12.0，5.8) 表3化合物SN-6，SN-7和SN-8的NMR數據(400和100MHz，CD3OD)
表4化合物SN-9和SN-10的NMR數據(400和100MHz，CD3OD)
第二部分從玄參中分離的環烯醚萜類化合物抗老年痴呆作用測試 老年痴呆果蠅的培育 通過將攜帶有elav啟動基因的親本果蠅，和攜帶有Aβ42蛋白基因的親本果蠅雜交，獲得整合有elav啟動基因和Aβ42蛋白基因的子代疾病果蠅。
老年痴呆果蠅的給藥 試驗設置健康蠅無藥對照、疾病蠅無藥對照和疾病蠅給不同的藥三種組合。每種組合(健康蠅無藥對照、疾病蠅無藥對照、疾病蠅餵某一個藥)有250隻果蠅，分置於2個玻璃指瓶中(每個玻璃指瓶裝125隻果蠅)，每天先空腹2小時，然後在仍隔離食物的條件下給藥40μl，強制餵藥4小時(此時40μl的藥已被吃盡)，最後再將吃完藥的果蠅轉移到有食物的玻璃指瓶中。餵藥方法(專利申請號2005100117054)已經獲得專利授權(專利名稱一種昆蟲給藥方法和裝置及其在大規模藥物篩選中的用途)。
每個藥重複試驗8組，餵藥連續進行6天。
果蠅給藥後記憶障礙修復效果評價 果蠅置於自動訓練儀接受訓練，訓練時先後通入氣味(1.5‰辛醇octanol，溶劑為二甲基矽油，發泡散發的氣味)伴隨電擊(CS+)，然後通入另一種氣味(1‰甲基環己醇methylcyclohexanol，溶劑為二甲基矽油)，但不伴隨電擊(CS-)，1個周期訓練結束後立即檢測其記憶，檢測時將果蠅置於相對而吹的兩種氣味(1.5‰辛醇octanol和1‰甲基環己醇methylcyclohexanol，分別發泡散發的氣味)中央，任其自由選擇120秒，根據選擇每種氣味的果蠅數目計算出每次實驗的學習記憶指數PI(Performance Index)，辛醇octanol伴隨氣味刺激產生的學習指數以PIOCT表示，計算公式為PIOCT＝{2[MCH/(OCT*+MCH)]-1}*100 果蠅置於自動訓練儀接受訓練，訓練時先後通入氣味(1‰甲基環己醇methylcyclohexanol，溶劑為二甲基矽油)伴隨電擊(CS+)，然後通入另一種氣味(1.5‰辛醇octanol，溶劑為二甲基矽油，發泡散發的氣味)，但不伴隨電擊(CS-)，1個周期訓練結束後立即檢測其記憶，檢測時將果蠅置於相對而吹的兩種氣味(1.5‰辛醇octanol和1‰甲基環己醇methylcyclohexanol，分別發泡散發的氣味)中央，任其自由選擇120秒，根據選擇每種氣味的果蠅數目計算出每次實驗的學習記憶指數PI(Performance Index)，甲基環己醇methylcyclohexanol伴隨氣味刺激產生的學習指數以PIMCH表示，計算公式為PIMCH＝{2[OCT/(MCH*+OCT)]-1}*100 最終結果以總學習記憶指數(PITOTAL)表示，計算公式為PITOTAL＝0.5(PIMCH+PIOCT)。
進行活性測試時，同時進行不餵藥的同遺傳背景健康蠅、不餵藥的老年痴呆疾病蠅，餵測試藥的老年痴呆疾病蠅的嗅覺短期記憶缺陷測試，分別計算它們的總學習記憶指數，將餵測試藥的老年痴呆疾病蠅學習記憶指數與同遺傳背景健康蠅學習記憶指數、老年痴呆疾病蠅學習記憶指數相比較，評價測試物抗老年痴呆的作用。餵食測試物的老年痴呆疾病蠅學習記憶指數相對越高則說明測試物抗老年痴呆作用越強。
採用T檢驗比較，餵食測試物的老年痴呆疾病蠅學習記憶指數，和不餵藥(僅給不含藥樣品的溶劑)的老年痴呆疾病蠅學習記憶指數，P小於0.05為有差別，P小於0.01為有顯著差別，P小於0.001為有極顯著差別。
玄參中分離的環烯醚萜類化合物測試結果疾病蠅不給藥和給藥的T檢驗對比為SN-1的T檢驗P＝0.000010、SN-2的T檢驗P＝0.000041、SN-3的T檢驗P＝0.001297、SN-4的T檢驗P＝0.000777、SN-5的T檢驗P＝0.000177、SN-6的T檢驗P＝0.000172、SN-7的T檢驗P＝0.031647、SN-8的T檢驗P＝0.000063、SN-9的T檢驗P＝0.000001、SN-10的T檢驗P＝0.000000。表明SN1-10對果蠅老年痴呆疾病短期記憶衰退都有不同程度的阻斷活性效果。具體每個化合物的試驗數據見下列各對應表 (1)SN-1活性測試結果 (1-1)SN-1背景信息和測試結果
(1-2)同背景健康蠅學習指數測試結果
(1-3)疾病蠅不給藥對照學習指數測試結果
(1-4)疾病蠅餵0.050‰SN-1學習指數測試結果
(2)SN-2活性測試結果 (2-1)SN-2背景信息和測試結果
(2-2)同背景健康蠅學習指數測試結果
(2-3)疾病蠅不給藥對照學習指數測試結果
(2-4)疾病蠅餵0.050‰SN-2學習指數測試結果
(3)SN-3活性測試結果 (3-1)SN-3背景信息和測試結果
(3-2)同背景健康蠅學習指數測試結果
(3-3)疾病蠅不給藥對照學習指數測試結果
(3-4)疾病蠅餵0.050‰SN-3學習指數測試結果
(4)SN-4活性測試結果 (4-1)SN-4背景信息和測試結果
(4-2)同背景健康蠅學習指數測試結果
(4-3)疾病蠅不給藥對照學習指數測試結果
(4-4)疾病蠅餵0.050‰SN-4學習指數測試結果
(5)SN-5活性測試結果 (5-1)SN-5背景信息和測試結果
(5-2)同背景健康蠅學習指數測試結果
(5-3)疾病蠅不給藥對照學習指數測試結果
(5-4)疾病蠅餵0.050‰SN-5學習指數測試結果
(6)SN-6活性測試結果 (6-1)SN-6背景信息和測試結果
(6-2)同背景健康蠅學習指數測試結果
(6-3)疾病蠅不給藥對照學習指數測試結果
(6-4)疾病蠅餵0.050‰SN-6學習指數測試結果
(7)SN-7活性測試結果 (7-1)SN-7背景信息和測試結果
(7-2)同背景健康蠅學習指數測試結果
(7-3)疾病蠅不給藥對照學習指數測試結果
(7-4)疾病蠅餵0.050‰SN-7學習指數測試結果
(8)SN-8活性測試結果 (8-1)SN-8背景信息和測試結果
(8-2)同背景健康蠅學習指數測試結果
(8-3)疾病蠅不給藥對照學習指數測試結果
(8-4)疾病蠅餵0.050‰SN-8學習指數測試結果
(9)SN-9活性測試結果 (9-1)SN-9背景信息和測試結果
(9-2)同背景健康蠅學習指數測試結果
(9-3)疾病蠅不給藥對照學習指數測試結果
(9-4)疾病蠅餵0.050‰SN-9學習指數測試結果
(10)SN-10活性測試結果 (10-1)SN-10背景信息和測試結果
(10-2)同背景健康蠅學習指數測試結果
(10-3)疾病蠅不給藥對照學習指數測試結果
(10-4)疾病蠅餵0.050‰SN-10學習指數測試結果
實施例2 第一部分梔子中環烯醚萜類化合物的提取分離 取茜草科梔子屬植物梔子(Gardenia jasminoides Ellis)乾燥果實5kg，用60％乙醇加熱回流提取，濃縮提取物，所得提取物懸浮水中，通過D101大孔樹脂柱，用水、30％、50％、70％及95％乙醇梯度洗脫。50％乙醇洗脫部分，經矽膠柱色譜(200-300目)，以氯仿-甲醇-水(100:0:0)至甲醇梯度洗脫。子餾分Fr7(9g)經ODS柱色譜，甲醇-水(10:90-90:10)梯度洗脫，子餾分Fr.1經Toyopearl HW-40柱，甲醇-水(2080-80:20)梯度洗脫，再經反向HPLC，甲醇-水40:60洗脫，純化得到GJ-1(6mg)，GJ-4(28.9mg)，GJ-5(45mg)，GJ-6(22.0mg)；子餾分Fr.3經Toyopearl HW-40柱，甲醇-水(20∶80-80:20)梯度洗脫，反向HPLC純化得到GJ-2(35.7mg)；子餾分Fr.4經Toyopearl HW-40柱，甲醇-水(20:80-80:20)梯度洗脫，反向HPLC純化得到GJ-3(28.5mg)。
所獲得的各化合物的純度以及量如下表A所示 表B No.編號 純度 重量結構 1* GJ-1 90％ 6mg
2* GJ-2 90％ 35.7mg
3* GJ-395％28.5mg
4* GJ-488％28.9mg
5GJ-5 90％ 45mg
6GJ-6 95％22.0mg
注有*號者為新化合物 所獲得的各化合物的物理化學常數如下 化合物GJ-1(丁二酸單京尼平苷酯)淡黃色無定型粉末，Molish反應陽性。

+15.0°(c＝0.4，MeOH)；UV(MeOH)λmax nm(logε)202.0(3.99)，238.0(4.01)；IR(KBr)cm-13414(OH)，1700(C＝O)，2927(CH3)；HR-ESI-MSm/z 511.1400[M+Na]+(calcd for C21H28O13)；確認化合物GJ-1的分子式為C21H28O13。13C及1H NMR數據見表5。
化合物GJ-2(6』-O-芥子醯基京尼平苷)黃色油狀物，Molish反應陽性。

-21.0°(c＝0.4，MeOH)；UV(MeOH)λmax nm(log ε)203.5(3.85)，238.0(3.81)，329(3.66)；IR(KBr)cm-13425(OH)，1700(C＝O)，2927(CH3)；HR-ESI-MSm/z 617.1829[M+Na]+(calcd forC28H34O14)；確認化合物GJ-2的分子式C28H34O14。13C及1H NMR數據見表5。
化合物GJ-3(6』-O-對羥基桂皮醯基京尼平苷)黃色油狀物，Molish反應陽性。

-16.0°(c＝0.4，MeOH)；UV(MeOH)λmax nm(logε)203.5(4.06)，238(4.02)，329(3.86)；IR(KBr)cm-13425(OH)，1708(C＝O)，2927(CH3)。HR-ESI-MSm/z 557.1641[M+Na]+(calcd for C26H30O12)；確認化合物GJ-3的分子式為C26H30O12。13C及1H NMR數據見表5。
化合物GJ-4(6』-乙醯基京尼平苷)淡黃色無定型粉末，Molish反應陽性。

+10.0°(c＝0.4，MeOH)；UV(MeOH)λmaxnm(logε)203.5(3.59)，237(3.70)；IR(KBr)cm-13438(OH)，1645(C＝C)，2925(CH3)；HR-ESI-MSm/z 453.1394[M+Na]+(calcd for C19H26O11，)；確認化合物GJ-4的分子式為C19H26O11。13C及1H NMR數據見表6。
化合物GJ-5(京尼平苷)白色無定型粉末，分子式為C17H24O10，Molish反應陽性。ESI-MSm/z 799(2M+Na)+，411(M+Na)+，775(2M-H)-，387(M-H)-，提示化合物分子量388。13C及1H NMR數據見表6。
化合物GJ-6(10-乙醯基京尼平苷)白色無定型粉末，分子式為C19H26O11，Molish反應陽性。ESI-MSm/z 453[M+Na]+，429[M-H]-，提示化合物分子量430。13C及1H NMR數據見表6。

表5化合物GJ-1，GJ-2和GJ-3的NMR數據(400和100MHz，CD3OD)
表6化合物GJ-4，GJ-5和GJ-6的NMR數據(400和100MHz，CD3OD)
第二部分從梔子中分離的環烯醚萜類化合物抗老年痴呆作用測試 老年痴呆果蠅的培育 通過將攜帶有elav啟動基因的親本果蠅，和攜帶有Aβ42蛋白基因的親本果蠅雜交，獲得整合有elav啟動基因和Aβ42蛋白基因的子代疾病果蠅。
老年痴呆果蠅的給藥 試驗設置健康蠅無藥對照、疾病蠅無藥對照和疾病蠅給不同的藥三種組合。每種組合(健康蠅無藥對照、疾病蠅無藥對照、疾病蠅餵某一個藥)有250隻果蠅，分置於2個玻璃指瓶中(每個玻璃指瓶裝125隻果蠅)，每天先空腹2小時，然後在仍隔離食物的條件下給藥40μl，強制餵藥4小時(此時40μl的藥已被吃盡)，最後再將吃完藥的果蠅轉移到有食物的玻璃指瓶中。餵藥方法(專利申請號2005100117054)已經獲得專利授權(專利名稱一種昆蟲給藥方法和裝置及其在大規模藥物篩選中的用途)。
每個藥重複試驗8組，餵藥連續進行6天。
果蠅給藥後記憶障礙修復效果評價 果蠅置於自動訓練儀接受訓練，訓練時先後通入氣味(1.5‰辛醇octanol，溶劑為二甲基矽油，發泡散發的氣味)伴隨電擊(CS+)，然後通入另一種氣味(1‰甲基環己醇methylcyclohexanol，溶劑為二甲基矽油)，但不伴隨電擊(CS-)，1個周期訓練結束後立即檢測其記憶，檢測時將果蠅置於相對而吹的兩種氣味(1.5‰辛醇octanol和1‰甲基環己醇methylcyclohexanol，分別發泡散發的氣味)中央，任其自由選擇120秒，根據選擇每種氣味的果蠅數目計算出每次實驗的學習記憶指數PI(Performance Index)，辛醇octanol伴隨氣味刺激產生的學習指數以PIOCT表示，計算公式為PIOCT＝{2[MCH/(OCT*+MCH)]-1}*100 果蠅置於自動訓練儀接受訓練，訓練時先後通入氣味(1‰甲基環己醇methylcyclohexanol，溶劑為二甲基矽油)伴隨電擊(CS+)，然後通入另一種氣味(1.5‰辛醇octanol，溶劑為二甲基矽油，發泡散發的氣味)，但不伴隨電擊(CS-)，1個周期訓練結束後立即檢測其記憶，檢測時將果蠅置於相對而吹的兩種氣味(1.5‰辛醇octanol和1‰甲基環己醇methylcyclohexanol，分別發泡散發的氣味)中央，任其自由選擇120秒，根據選擇每種氣味的果蠅數目計算出每次實驗的學習記憶指數PI(Performance Index)，甲基環己醇methylcyclohexanol伴隨氣味刺激產生的學習指數以PIMCH表示，計算公式為PIMCH＝{2[OCT/(MCH*+OCT)]-1}*100 最終結果以總學習記憶指數(PITOTAL)表示，計算公式為PITOTAL＝0.5(PIMCH+PIOCT)。
進行活性測試時，同時進行不餵藥的同遺傳背景健康蠅、不餵藥的老年痴呆疾病蠅，餵測試藥的老年痴呆疾病蠅的嗅覺短期記憶缺陷測試，分別計算它們的總學習記憶指數，將餵測試藥的老年痴呆疾病蠅學習記憶指數與同遺傳背景健康蠅學習記憶指數、老年痴呆疾病蠅學習記憶指數相比較，評價測試物抗老年痴呆的作用。餵食測試物的老年痴呆疾病蠅學習記憶指數相對越高則說明測試物抗老年痴呆作用越強。
採用T檢驗比較，餵食測試物的老年痴呆疾病蠅學習記憶指數，和不餵藥(僅給不含藥樣品的溶劑)的老年痴呆疾病蠅學習記憶指數，P小於0.05為有差別，P小於0.01為有顯著差別，P小於0.001為有極顯著差別。
梔子中分離的環烯醚萜類化合物測試結果疾病蠅不給藥和給藥的T檢驗對比為GJ-1的T檢驗P＝0.000747、GJ-2的T檢驗P＝0.000031、GJ-3的T檢驗P＝0.000002、GJ-4的T檢驗P＝0.000004、GJ-5的T檢驗P＝0.000289、GJ-6的T檢驗P＝0.000000。表明GJ1-6對果蠅老年痴呆疾病短期記憶衰退都有不同程度的阻斷活性效果。具體每個化合物的試驗數據見下列各對應表 (1)GJ-1活性測試結果 (1-1)GJ-1背景信息和測試結果
(1-2)同背景健康蠅學習指數測試結果
(1-3)疾病蠅不給藥對照學習指數測試結果
(1-4)疾病蠅餵0.050‰GJ-1學習指數測試結果
(2)GJ-2活性測試結果 (2-1)GJ-2背景信息和測試結果
(2-2)同背景健康蠅學習指數測試結果
(2-3)疾病蠅不給藥對照學習指數測試結果
(2-4)疾病蠅餵0.050‰GJ-2學習指數測試結果
(3)GJ-3活性測試結果 (3-1)GJ-3背景信息和測試結果
(3-2)同背景健康蠅學習指數測試結果
(3-3)疾病蠅不給藥對照學習指數測試結果
(3-4)疾病蠅餵0.050‰GJ-3學習指數測試結果
(4)GJ-4活性測試結果 (4-1)GJ-4背景信息和測試結果
(4-2)同背景健康蠅學習指數測試結果
(4-3)疾病蠅不給藥對照學習指數測試結果
(4-4)疾病蠅餵0.050‰GJ-4學習指數測試結果
(5)GJ-5活性測試結果 (5-1)GJ-5背景信息和測試結果
(5-2)同背景健康蠅學習指數測試結果
(5-3)疾病蠅不給藥對照學習指數測試結果
(5-4)疾病蠅餵0.050‰GJ-5學習指數測試結果
(6)GJ-6活性測試結果 (6-1)GJ-6背景信息和測試結果
(6-2)同背景健康蠅學習指數測試結果
(6-3)疾病蠅不給藥對照學習指數測試結果
(6-4)疾病蠅餵0.050‰GJ-6學習指數測試結果
實施例3片劑形式的藥物組合物的製備 組成 化合物SN-10.5克 化合物SN-20.5克 可壓性澱粉150克 17％澱粉漿適量 硬脂酸鎂 1.8克 製備步驟將SN-1與SN-2同澱粉混合均勻，加入澱粉漿製成軟材，制粒後置於80℃下乾燥後於12目篩整粒，加入硬脂酸鎂混合後，單衝壓片機壓片，即得。
實施例4膠囊劑形式的藥物組合物的製備 組成 化合物SN-9 1克 化合物GJ-2 0.5克 澱粉 150克 17％澱粉漿 適量 硬脂酸鎂 1.8克 製備步驟將SN-9與GJ-2同澱粉混合均勻，加入澱粉漿製成軟材，制粒後置於80℃下乾燥後於12目篩整粒，灌裝膠囊，即得。實施例5注射劑形式的藥物組合物的製備 組成 化合物SN-9 2克 化合物SN-101克 化合物GJ-5 1克 化合物GJ-6 1克 氯化鈉 430毫克 吐溫80 0.05毫升 注射用水 加至5毫升 製備步驟將四種化合物和氯化鈉用80％的注射用水及吐溫80混合均勻，使其全部溶解，再將注射用水加至5毫升，過濾，灌封，100℃滅菌30分鐘即得。
已經參考某些具體實施例對本發明進行了描述和說明，但是本領域熟練技術人員應當理解，可以對所述方法和方案進行多種修改、改變、變型、替換、刪除或者添加，這並不背離本發明的實質和範圍。本發明的範圍由權利要求書限定，並且應當將這些權利要求書解釋為合理寬的範圍。
權利要求
1.通式(I)所示的環烯醚萜類化合物
通式(I)
或其可藥用鹽
其中
3—4位、6—7位和7—8位為雙鍵或單鍵。
R1為H、OH、OCH3、直鏈糖基或支鏈糖基，所述糖基選自葡萄糖基、半乳糖基、甘露糖基、阿拉伯糖基、木糖基、核糖基、來蘇糖基和夫糖基，所述糖基的糖鏈中的羥基任選被選自下列的醯化基團醯化CH3(CH2)nCO、HOOC(CH2)nCO、苯甲醯基、苯乙醯基、苯丙醯基、雜環甲醯基、雜環乙醯基和雜環丙醯基，所述雜環選自吡喃、噻喃、吡啶、嘧啶、吡嗪、三嗪、噠嗪、噁嗪和異噁嗪，其中所述苯環和雜環可任選被一個或多個選自氟、氯、溴、碘、羥基和烷氧基的取代基取代[MS3]，n＝0、1、2、3、4、5或6；
R3、R7和R8獨立地為H、CH3、CHO、COOCH3、COOH、CH2OH、OH、直鏈糖基或支鏈糖基，所述糖基選自葡萄糖基、半乳糖基、甘露糖基、阿拉伯糖基、木糖基、核糖基、來蘇糖基和夫糖基，所述糖基的糖鏈中的羥基任選被選自下列的醯化基團醯化CH3(CH2)nCO、HOOC(CH2)n CO、苯甲醯基、苯乙醯基、苯丙醯基、雜環甲醯基、雜環乙醯基和雜環丙醯基，所述雜環選自吡喃、噻喃、吡啶、嘧啶、吡嗪、三嗪、噠嗪、噁嗪和異噁嗪，其中所述苯環和雜環可任選被一個或多個選自氟、氯、溴、碘、羥基和烷氧基的取代基取代，n＝0、1、2、3、4、5或6；
R2、R4、R5和R6獨立地為H、OCH3、OH、直鏈糖基或支鏈糖基，所述糖基選自葡萄糖基、半乳糖基、甘露糖基、阿拉伯糖基、木糖基、核糖基、來蘇糖基和夫糖基，所述糖基的糖鏈中的羥基任選被選自下列的醯化基團醯化CH3(CH2)nCO、HOOC(CH2)n CO、苯甲醯基、苯乙醯基、苯丙醯基、雜環甲醯基、雜環乙醯基和雜環丙醯基，所述雜環選自吡喃、噻喃、吡啶、嘧啶、吡嗪、三嗪、噠嗪、噁嗪和異噁嗪，其中所述苯環和雜環可任選被一個或多個選自氟、氯、溴、碘、羥基和烷氧基的取代基取代，n＝0、1、2、3、4、5或6；
或者在6位與7位和/或7位與8位間存在三元氧環，
條件是，所述通式(I)化合物不包括以下化合物
和
2.權利要求1的化合物，其中在通式(I)中，3—4位為雙鍵，R2、R3和R6均為氫，R4和R5均為羥基，且R8為甲基。
3.權利要求2的化合物，其中所述化合物是
4.權利要求2的化合物，其中所述化合物是
5.權利要求2的化合物，其中所述化合物是
6.權利要求2的化合物，其中所述化合物是
7.權利要求1的化合物，其中在通式(I)中，3—4位和7—8位均為雙鍵，R2、R4、R5、R6和R8均為氫，且R3為COOCH3。
8.權利要求7的化合物，其中所述化合物是
9.權利要求7的化合物，其中所述化合物是
10.權利要求7的化合物，其中所述化合物是
11.權利要求7的化合物，其中所述化合物是
12.通式(I)所示的環烯醚萜類化合物或其可藥用鹽在製備用於預防或治療神經退行性疾病的藥物中的用途
通式(I)
其中
3—4位、6—7位和7—8位為雙鍵或單鍵。
R1為H、OH、OCH3、直鏈糖基或支鏈糖基，所述糖基選自葡萄糖基、半乳糖基、甘露糖基、阿拉伯糖基、木糖基、核糖基、來蘇糖基和夫糖基，所述糖基的糖鏈中的羥基任選被選自下列的醯化基團醯化CH3(CH2)nCO、HOOC(CH2)n CO、苯甲醯基、苯乙醯基、苯丙醯基、雜環甲醯基、雜環乙醯基和雜環丙醯基，所述雜環選自吡喃、噻喃、吡啶、嘧啶、吡嗪、三嗪、噠嗪、噁嗪和異噁嗪，其中所述苯環和雜環可任選被一個或多個選自氟、氯、溴、碘、羥基和烷氧基的取代基取代，n＝0、1、2、3、4、5或6；
R3、R7和R8獨立地為H、CH3、CHO、COOCH3、COOH、CH2OH、OH、直鏈糖基或支鏈糖基，所述糖基選自葡萄糖基、半乳糖基、甘露糖基、阿拉伯糖基、木糖基、核糖基、來蘇糖基和夫糖基，所述糖基的糖鏈中的羥基任選被選自下列的醯化基團醯化CH3(CH2)nCO、HOOC(CH2)n CO、苯甲醯基、苯乙醯基、苯丙醯基、雜環甲醯基、雜環乙醯基和雜環丙醯基，所述雜環選自吡喃、噻喃、吡啶、嘧啶、吡嗪、三嗪、噠嗪、噁嗪和異噁嗪，其中所述苯環和雜環可任選被一個或多個選自氟、氯、溴、碘、羥基和烷氧基的取代基取代，n＝0、1、2、3、4、5或6；
R2、R4、R5和R6獨立地為H、OCH3、OH、直鏈糖基或支鏈糖基，所述糖基選自葡萄糖基、半乳糖基、甘露糖基、阿拉伯糖基、木糖基、核糖基、來蘇糖基和夫糖基，所述糖基的糖鏈中的羥基任選被選自下列的醯化基團醯化CH3(CH2)nCO、HOOC(CH2)n CO、苯甲醯基、苯乙醯基、苯丙醯基、雜環甲醯基、雜環乙醯基和雜環丙醯基，所述雜環選自吡喃、噻喃、吡啶、嘧啶、吡嗪、三嗪、噠嗪、噁嗪和異噁嗪，其中所述苯環和雜環可任選被一個或多個選自氟、氯、溴、碘、羥基和烷氧基的取代基取代，n＝0、1、2、3、4、5或6；
或者在6位與7位和/或7位與8位間存在三元氧環。
13.權利要求12的用途，其中所述神經退行性疾病是血管性痴呆、血管性認知障礙、老年痴呆症、記憶力減退、腦組織退行性病變症候群或膽鹼能神經退行性病變。
14.權利要求12或13的用途，其中在通式(I)中，3—4位和7—8位均為雙鍵，R2、R4、R5、R6和R8均為氫，且R3為COOCH3。
15.權利要求14的用途，其中所述化合物是
16.權利要求14的用途，其中所述化合物是
17.權利要求14的用途，其中所述化合物是
18.權利要求14的用途，其中所述化合物是
19.權利要求12或13的用途，其中在通式(I)中，3—4位和7—8位均為雙鍵，R2、R4、R5、R6和R8均為氫，且R3為COOCH3。
20.權利要求19的用途，其中所述化合物是
21.權利要求19的用途，其中所述化合物是
22.權利要求19的用途，其中所述化合物是
23.權利要求19的用途，其中所述化合物是
24.權利要求12或13的用途，其中所述化合物選自
和
25.一種藥物組合物，所述藥物組合物包含如權利要求1中所述的通式(I)的環烯醚萜類化合物與可藥用載體。
26.製備權利要求25所述的藥物組合物的方法，所述方法包括將如權利要求1中所述的通式(I)的環烯醚萜類化合物與可藥用載體混合。
27.製備如權利要求1中所述的通式(I)的環烯醚萜類化合物的方法，所述方法包括採用中藥玄參和梔子作為原料，用溶劑進行提取並且進行分離。
28.權利要求27的方法，其中所述溶劑為有機溶劑和/或水。
29.權利要求28的方法，其中所述有機溶劑為低級醇。
30.權利要求29的方法，其中所述低級醇選自甲醇和乙醇。
31.權利要求28的方法，其中所述有機溶劑選自丙酮和乙酸乙酯。
32.權利要求27的方法，其中所述分離是通過層析法和/或萃取法來進行的。
全文摘要
本發明公開了一系列具有結構通式(I)的環烯醚萜類化合物，所述化合物在製備用於預防或治療老年痴呆症等神經系統退行性疾病的藥物中的用途，包含所述化合物的藥物組合物，以及製備所述化合物的方法。結構式如上所示，其中各基團的定義如說明書所述。
文檔編號C07H17/04GK101486743SQ20081005645
公開日2009年7月22日 申請日期2008年1月18日 優先權日2008年1月18日
發明者姚新生, 毅 鍾, 昊 高, 謝作磊, 洋 於, 婷 柳, 斌 陳, 野 袁, 毅 戴, 藍 黃 申請人:北京卓凱生物技術有限公司