藥物活性組合物和給藥裝置的製作方法

2023-06-05 04:02:36

專利名稱：藥物活性組合物和給藥裝置的製作方法
本申請引用了不同的公開文獻。這些文獻的內容在此聲明均併入本發明申請中。
本發明涉及藥物活性物質、尤其是抗原物質的組合物，活性物質與一種粘液性的輔料混合，並可用一種構造成噴霧給藥器的給藥裝置這樣地施用於鼻黏膜上，以致能達到至今從未有其它方法達到的效果。
特別地，本申請包括一種進行鼻內給藥的疫苗，它由下列組成(a)流感表面蛋白，它配製成脂性的(病毒體)；(b)粘液性的輔料細菌源；(c)特定的噴霧給藥器，它這樣構造，以可使近100％的噴出物施用到對藥效作用有重要意義的鼻黏膜上。
抗原優選是流感-表面糖蛋白，它配成脂性的(所謂的病毒體)。該病毒體與一種粘液性的輔料相混合，後者是細菌源。理想的是，它來自活性的或非活性的毒素，如熱變性毒素(Heat Labile Toxin)(HLT)、霍亂毒素(CT)或前霍亂原質體(PCG)(Procholeragenoid)。鼻用噴霧器如此構造，使活性物質可主要地寬域地噴施在鼻黏膜上。基於本發明的劑型可用於不同的醫藥適應症，如對抗流感的接種或其它感染性疾病，以及用於治療處理鼻塞、受損鼻黏膜的再造或一般粘液性局部疾病。
不同作者已敘述了脂質體(人造膜)的免疫激活性功能(Gregoriadis，G.免疫輔劑用於脂質體的作用，當代免疫學11(1990)89-97)。當抗原耦接到脂質體表面(Glück R，Mischler R，Finrel B，Que JU，ScarpaB，Cryz SJ Jr在老年人中的病毒性流感疫苗的免疫原性，Lancet344(1994)，160-163)，被包圍在脂質體內部(Gregoriadis G，Davis D，Davis A作為免疫輔料的脂質體抗原植入研究。疫苗5(1987)145-151)或僅與脂質體混合(De Haan A，Geerligs HJ，Huckshorn JP，VanScharrenburg GJM，Palache AM，Wilschut J脂質體的粘液性免疫輔料活性通過採用一種流感病毒亞種疫苗和共服的脂質體對老鼠作內鼻免疫化來誘導系統性IgG和分泌性IgA響應。疫苗13(1995)613-616)時，該免疫激活功能可實現。當這種脂質體用反向膜(transmembranen)和融合基因糖蛋白「刺突化(gespiked)」(例如流感糖蛋白(Glück，R.，Mischler，R.，Brantschen，S.，Just，M.，Althaus，B.，Cryz，S.J.，Jr.使重構的流感病毒性(IRIV)疫苗傳導系統免疫增強化，用於抗肝炎A的免疫化。臨床研究期刊90(1992)2491-2495)或仙臺糖蛋白(Gould-Fogerite，S.，Mazurkiewicz，J.E.，Bhisitkul，D.，Mannino，R.J.將生理活性的糖蛋白重組進大脂質體，用作向動物細胞中的運載器。見於C.H.Kim，J.Diwan，H.Tedeschi und J.J.Salerno(Hrsg)，膜生物化學和生物基因學中的進展，Plenum出版公司，紐約(1987)，569頁)，將觀察到另外的免疫激活作用。
至今為止，這種作用多數是按非腸道用藥而描述為的(i.m.，s.c.或i.p.)。但一些作者發現，這些製劑可用常規方法(點施或常規鼻噴霧)成功給藥。結果幾乎唯一地取決於採用實驗體、多數為老鼠的實驗，與人類相比，它們相對於其體重有很大的鼻黏膜。向它們施用的抗原量如此之高，以致只是出於經濟上的及產品安全性的原因它們幾乎不用在人類身上。還表明，儘管是脂質製劑中採用理智的抗原(流感)劑量且作正確的鼻施用，也不可能獲得滿意的效果。
其它作者因此研究了一種有效的可經鼻施用的疫苗的開發，其中代替脂質製劑的是，抗原與一種粘液性的輔料細菌源混合。其中採用特別是HLT、CT或非毒性的HLT或CT衍生物(Elson CO，Ealding W用霍亂毒素在老鼠身上作粘液性刺激後產生的系統性和粘液性免疫性。免疫學雜誌132(1984)2736-2741)。
文獻中的結果表明了在經鼻施用後事實上很有前景的作用效果，這首先在供試動物身上表現出來。但是，一些少量的在人類身上的臨床研究證實了一定的效果(Tamura S-J，Ishihira K，Miyata K，Aizawa C，Kurata T用霍亂毒素B亞種和微量的海參毒素來提高對流感疫苗的響應的機理。疫苗13(1995)339-341)。但是待採用的抗原量和輔料量很高，這再次引起對產品安全性和商業化可能性的關注。
至今所述的、用於開發一種可經鼻應用的、預防性或治療性活性疫苗的研究的其它缺點是至今採用的不令人滿意的給藥器系統。
至今有以單-、雙-和多劑量給藥器形式存在的鼻用噴霧器。藉助施加色料(甲基藍)和鼻內診鏡檢查的、對至今採用的鼻用噴霧器的詳細研究和檢測已經證實，待噴灑的物質(疫苗、藥物溶液)只有至多25％到達甲介狀體的、與粘液有關的免疫系統的黏膜上。
與黏膜液有關的免疫系統的黏膜存在於鼻道中，在甲介狀體(鼻瓣鰓體)範圍中的鼻的側壁上，例如

圖1所示的人類甲介狀體的狍子甲介狀體，用現今採用的鼻用噴霧器，由於顯著的損失在鼻前庭(鼻前庭)(見圖2)中及在鼻中隔上，只有不夠量的藥物活性物質到達主鼻道中。這種鼻構造用免疫學上非活性的扁平上皮和皮脂腺包覆(Walter Becker，Hans HeinzNaumann，Carl Rudolf Pfaltz頸-鼻-耳-治療學，Thieme出版社，斯圖加特，紐約，1992)。
至今的鼻用給藥器-它將足夠劑量噴灑到呼吸道黏膜上(特異和非特異性防禦的組織)-存在不足的原因是多樣的(1)由於不足夠的解剖知識，噴霧給藥時的噴流主段被引導到一個不正確的方向上。因此，幾乎沒有藥物活性物質到達主鼻道。噴出的流體部分地經過上唇向下流動。
(2)在鼻子部分的噴霧物料的直徑並不適應解剖學關係。內鼻孔是天然地縫隙狀的並具有噴管的功能(見圖2)。通常寬的鼻藥杆(Nasenstücke)並不壓抑這一解剖學上的窄體。在內腔鼻根(Lumen Nasi)之前噴霧時，噴霧柱中僅有相應於內腔鼻根的寬區的一部分到達主鼻孔。
(3)最佳噴霧角至今仍未從科學上予以徹底研究。對於常規的噴霧給藥器而言，對保持正常狀態的頭部，該角度在相對於水平位置相對於或人體縱軸的垂直方向的30°至80°之間任意改變。因此顯著量的損失，即直至施用體積的90％的損失就是顯然的了。我們的系統研究已經表明，最佳噴霧角為50-80℃。
(4)常規的鼻用噴霧器具有一個太短的鼻藥杆。由手指軸環到噴霧器開口的距離太短。用現今的噴霧器，僅用一次動作不能成功到達內部鼻孔。噴霧器的鼻藥杆應該至少0.7釐米長，特別優選有1-1.5cm長。
因此本發明的一個目的是，提供一種改進了的藥理活性物質的組合物以及一個改進了的給藥裝置，尤其是用於預防和治療感染疾病。這些目的將通過權利要求中規定的技術解決方案而達到。下列令人驚異的共激勵效應的組合形式用於取得最佳預防和治療作用，即由脂質體與一種粘液性輔料混合，並用一種新的給藥裝置或一種新的鼻用噴霧器施用。
相應地，本發明複合體由以下部分組成(a)一種活性物質(抗原)；(b)一種稱量出的、由脂質體和粘液性輔料組成的混合物；和(c)一種新的藥用儀器，即一種特定的給藥裝置或鼻用噴霧器。
本發明特別涉及一種鼻內施用的疫苗，包括(a)流感表面蛋白，它配製成脂質的(病毒體)；(b)粘液輔料細菌源；和(c)特定的噴霧給藥器，它這樣構造，以至幾乎100％的噴霧量寬域地施加在對藥效重要的鼻黏膜上。
活性物質為抗原、尤其是流感糖蛋白，它由於其反向膜的區域而易於植入人工膜(脂質體)中。還可能的是，其它抗原單獨地或與流感抗原結合而耦合到脂質體的表面上。根據抗原的化學性質，該耦聯自動地發生或藉助一種化學交聯分子而發生，化學交聯分子如早先已敘及的那些(Martin FJ，Papahadiopoulos DIrreversible coupling ofimmunoglobulin fragments to preformed vesicles.生物化學雜誌257(1982)286-288)。它也可為一種DNS-質體或RNS-質體，它可為抗原編碼並包括在脂質體中。
在本發明範圍內，概念「抗原」既包括完整的分子，也可為該分子的一個片斷，它有抗原的性質和/或可用於免疫化。此外，概念「抗原」包括和/或分子片斷，它們是刺激免疫的。
在本發明疫苗中採用的流感表面蛋白優選包括Hmagglutinin(HA)。此外，該流感表面蛋白可包括與神經氨酸甙酶化合/或組合的Hmagglutinin(HA)。
在一個特別的實施形式中，本發明涉及一種疫苗，它含有其它抗原。特別地，其它的抗原可已經結合在病毒體的表面上。
在另一個優選的實施方案中，涉及按本發明的疫苗，它除了含有由流感表面蛋白組成的抗原外，還含有其它抗原，優選來自致病組織的那些。在此，該致病組織可為一種病毒、一種細菌、一種真菌或一種寄生物。該組織包括不同的疾病病原體，例如為肝炎A-病毒，肝炎B-病毒，呼吸道合胞體-病毒(肺病毒)，副流感病毒，腮腺炎病毒，Mabilli病毒，HIV，白喉細菌(白喉棒狀桿菌)，破傷風桿菌，肺炎球菌，流感嗜血桿菌，大肝桿菌，白色念珠菌，麴黴屬，毛滴蟲屬，錐蟲屬，利什曼蟲屬，鼠弓形體，惡性瘧原蟲，間日瘧原蟲，卵形瘧原蟲，三日瘧原蟲，吸蟲屬和線蟲屬。特別地，吸蟲屬包括埃及血吸蟲，S.mansoni，S.Japoniaum，線蟲屬包括Tricharis trichiura，Ascaris lumbricoides和Trichinellaspiralis。
此外，本發明包括一種疫苗，它是一種流感疫苗。特別地，本發明包括一種疫苗，它可用於預防和/或治療普通的感染/感染性疾病。此外，該疫苗用於預防和/或治療流感類疾病，用於預防和/或治療鼻塞，用於治療鼻黏膜的破損。此外，本發明優選地包括疫苗，其中每個劑量(100μl)含Hmagglutinin的含量在1-30μg之間，優選在3-10μg，最優選為3.75μg。
在一個優選的實施方案中，本發明涉及一種疫苗，其中的粘液輔料為一種活性的毒素，一種無活的毒素和/或一種無毒的毒素。該粘液輔料特別地優選包括熱變性毒素(HTL)，霍亂毒素(CT)和/或前霍亂原質體(PCG)。在一個另外優選的實施方案中，該粘液輔料是(埃氏)大腸桿菌的熱變性毒素(HLT)。在另一個優選的實施方案中，毒素可以是滅活的。該滅活化可通過重組技術來實現。
在另一個實施方案中，本發明包括一種疫苗，它含有熱變性毒素(HLT)和/或霍亂毒素(CT)，其比例為1∶2至20∶1，較好為1∶1至1∶10，最好為7.5∶1。
上述的概念「稱量出的、由脂質體和粘液性輔料」一方面涉及抗原和磷脂及粘液輔料的正確比例，它對提供滿意的效果是重要的。臨床研究已表明以下事實磷脂(例如磷脂醯膽鹼，磷脂醯乙醇胺、中性的、陰離子的或陽離子的磷脂)與流感抗原的理想比例為1∶1-20∶1。最理想的為3∶1。流感抗原與活性粘液輔料(毒素)HLT或CT的比例為1∶2至20∶1，優選為7.5∶1。
如上面提到的那樣，流感抗原與非活性的粘液輔料(無活性的毒素)PCG或HLT和CT的非毒性衍生物的比例在3∶1-1∶20之間，理想的為1∶2。
在用於測量刺激免疫的粘液性作用的體內試驗中已令人驚異地表明，輔藥脂質體和粘液性輔料的混合併不是產生一種作用效果的加和，而是使藥效作用提高到至少5倍。
概念「新的藥用儀器」指噴霧給藥器，它特別適用於鼻內免疫(接種疫苗)。當給藥情況差或給藥不夠時，則一起提供一種粘液性有效物質是不夠的。
新儀器的特徵在於，它充分考慮了鼻子的解剖學狀況(1)從手指軸環到噴頭的距離優選為至少4.0cm。
(2)其鼻藥杆的前部由一種基本上呈園環狀的突出體構成，它例如至少為5mm長和直徑至多為5mm。
(3)在本發明中所述的給藥裝置的噴霧角優選為與水平線呈50°-70°。
(4)給藥裝置或噴霧給藥器的主體方向的軸優選通過一種特定的軸環來確定該軸環是優選地可插在給藥裝置的鼻藥杆前部上的且如此構造，它在鼻用噴霧給藥時可支承在上嘴唇上，以便使噴霧方向基本上朝向鼻孔的側壁上。
這樣一種支承在上唇上的軸環構造是優選的，因此上唇相對地靠近鼻子，且其距離足夠大，以便形成一個進行有利地輸藥的有效操縱杆。此外，敏感的唇部觸摸式傳感器使得使用者在不用在鏡子前觀照就能檢查軸環是否正確放置(中心地或平行地)。除此之外，該軸環也可構造成支持在其它的本體部分或頭部的形式。
該細小的鼻藥杆的最小長度優選為0.5cm，更好為1cm，而後面的較粗的鼻藥杆優選最少長1cm，為2cm更好。從脊部的手指表面到噴霧尖頭的距離應為至少2cm，優選2.5-3cm，或者從手指臺階(軸環)到噴霧尖頭的距離應該至少為3cm，優選為4-5cm。當頭部保持正常的垂直位置時，噴霧器的噴霧角應優選為與水平線保持50°-70°。
噴出霧液的主體部分應達到中間到下部鼻muschel部位。即，它應該達到中部鼻道區。這一般要求給藥器設於幾乎水平方向。一個這樣的方向，如本發明中所述，要通過安上一種特定的給藥器-軸環來設定。同樣可能的是，將該軸環和給藥器構成一體的或集成在一起的。在這種情況下，固定裝置/連接裝置已與給藥器牢固地連接或與它構成一體的。
在一個優選的實施方案中，噴霧給藥器是一種儀器，其帶噴頭的鼻藥杆優選最多5mm粗和至少5mm長，其手指軸環至噴頭尖頭之間的距離為3cm，且它藉助一個可安裝的軸環這樣使得它可插入鼻孔，以使鼻用噴霧器的主體段與水平方向呈約15-20°的角。
在另一個優選的實施方案中，抗原為一種流感表面抗原的混合物，它存在於脂質體的表面上。該物質可與其它致病微生物的抗原結合。如上面已提到的那樣，本發明的疫苗因此也可含有其它抗原，優選其它致病有機體的抗原。
在另一個實施方案中，前述的方法用於預防感染性疾病，用於治療鼻塞和不同的鼻黏膜障礙。
下面參照附圖示例地敘述本發明的優選實施方案，其中圖1是人類甲介狀體與狍子甲介狀體的對比示意圖。
圖2是內部鼻孔構造的解剖圖示；圖3是按本發明給藥裝置的一個優選實施方案的原理性構造的圖示；圖4是有效施藥時正確的噴霧角的示意；圖5是一種細胞學圖示不同的細胞群落的定量化，這些細胞群落通過個體(每組20個)的鼻腔塗抹技術、按三類不同的鼻內接種後至多29天而得到的。與B和C組明顯較少的增加相對照(P＜0.005)，可觀察到A組中作為局部的免疫應答標誌的中心細胞(centroblasten)顯著增加；圖6是按本發明的不帶軸環給藥裝置的一個優選實施方案；圖7a和7b是用於圖6所示本發明給藥裝置的軸環的優選實施方案的兩個視圖。
實施例1用HLT作為另加的粘液性輔料來製備一種粘液性病毒體的流感病毒疫苗流感病毒體疫苗的製備見敘於glück R，Wegmann A流感抗原的脂質性表達；見敘於Nicholson KG，Webster RG，Hay AJ，Hrsg.，流感教科書(1998)，400-409頁，倫敦Blackwell；不久，製備包括流感病毒的主幹H1N1 A/新加坡/6/86，H3N2 A/武漢/359/95和B/北京/184/93-它們在已孵化過的雞蛋(Huhnereiern)中培養一將由位於英國倫敦的生物學標準和控制國家研究院提供。完好的病毒體由絨膜尿囊膜-液體通過區域離心法而分離出來且用β-丙內酯使之失活。提純了的病毒體放入一個緩衝物中，它含有於PBS-NaCl中的0.1M的八亞乙二醇單(N-十二烷基)醚(OEG)(Nikko Chemicals，Japan)。將它於21℃培養20分鐘，以便儘可能地完全破壞掉病毒成分。
為了萃取Hmagglutinin(HA)和神經氨酸甙酶，將混合物於100000xg離心分離60分鐘。含有HA、NA和病毒性磷脂(PL)的上清液將用於製備不同的鼻內疫苗製劑。還加入另外的磷脂(磷脂醯膽鹼[Lipoid，德國)並使之溶解。該病毒體在通過色譜法除去OEG-Detergens的過程中自發地生成。向一個粘液性疫苗劑量(100μl)中-其中含有來自三種流感病毒主幹中每一種的3.75μg HA(如由WHO推薦的那樣)，和35μg卵磷脂-加入0.5μg大腸桿菌的熱變性毒素(HLT)，大腸桿菌來自增生性主幹大腸桿菌HE22VK(Vogel FR，Powell MF疫苗輔料和輔劑概要。疫苗設計亞基和輔料途徑(M.F.Powell，M.J.Newmann，Hrsg.)Plenum出版社，紐約(1995)141頁)，它用作為粘液性輔料。
實施例2
該大腸桿菌細胞在一個自由式離心機(Westfalia AG)中沉積且懸浮在磷酸鹽緩衝的生理鹽水中(PBS，6.06g/LNa2HPO4，1.46g/L KH2PO42.4g/LNaCl pH7.4)。
細胞內熱穩定的毒素(HLT)的釋去通過在一個球磨中(例如Dyuna-Mill，W.Bachofen AG)或在一個法式擠壓機(French-Press)中進行勻漿而實現。例如10L細胞懸浮體以33ml/分鐘的流率泵送通過球磨。該球磨裝有500ml玻璃珠，以3000/分鐘的速度旋轉，且其縫隙開口為0.05mm。
在均漿溶液中對固態的細胞成分的分離藉助切線式過濾法實現。例如10升細胞-溶解產物於一個Prostak系統中(Millipore AG)、在使用一個孔徑為0.2μ的過濾器的情況下濃縮至約4升。此後用24升PBS作後衝洗。滲透物通過一種0.2μ滅菌過濾器(例如Gelman Supor DCF，Pall)過濾。
藉助親合色譜法由滲透物中分離出HLT。作為固定相，採用固定化的半乳糖(例如來自Pierce的半乳糖凝膠)或固定化的乳糖(例如來自Pharmacia的乳糖凝膠)。移動相由PBS(緩衝物A)和在半濃縮了的PBS中的5％(g/v)乳糖(緩衝物B)組成。例如無菌過濾了的細胞溶解產物將加到用緩衝物A預調定的柱子上，該柱子此後用緩衝物A衝洗。直至在280nm處的UV-吸收達到基線。此後用緩衝物B將HLT由柱子上洗脫出來。
實施例3一種粘液性病毒體流感疫苗的製備，使用PCG作為另外的粘液性輔料在實施例1中敘述了一種流感病毒體疫苗的製備。向一個粘液性疫苗劑量中-它含有三種流感疫苗主幹的每一種有3.75μg HA(如由WHO推薦的那樣)和35μg卵磷脂-加入6μg前霍亂原(Procholeragenoid)作為粘液性輔料，該前霍亂原通過提純了的CT的加熱製得，而該CT又得自V.霍亂(Inaba 569B)(Pierce NF，Cray WC，Sacci JB，Craig JP，Germanier R，Fürer E前霍亂原一種用於口腔免疫化的安全和有效抗原，以對付實驗性霍亂。Inf.Immünity 40，3(1983)1112-1118)。
實施例4一種粘液性肝炎-B(HBs-)疫苗的製備將磷脂醯基乙醇胺(R.Berchtold，生物化學實驗室，Bern，瑞士)溶於甲醇中，再加入0.1％(v/v)三乙胺。該溶液然後與γ-馬來醯亞胺基丁酸-N-羥基琥珀醯亞胺酯(GMBS)混合(Pierce Chemical Company，Rockford，IL)(比例磷脂醯乙醇胺GMBS＝2∶1)，GMBS事先溶解在二甲亞碸中。在室溫下溫育約15分鐘後，該溶液劑在真空下在一個Speedvac-離心機中蒸發1小時。重組體HBs-顆粒將按已知的方式於CHO-細胞譜系中製備並提純。
為了得到帶有半胱胺酸殘基的HBs顆粒，將該粒用40mMol/升DL-二硫蘇糖醇(DTT)在室溫下處理5分鐘。使用一種Sephadex-G10-柱(Pharmacia LKB Biotechnology，Uppsula，瑞典)除去該DTT，且加入八亞乙二醇(Fluka Chemicals，瑞士)(CEG)至終濃度為100mMol/升。該蒸發了的磷脂醯基乙醇胺-GMBS)然後與該HBs-溶液混合1小時(HBs∶GMBS之比例為1∶2)，未結合的GMBS然後通過半胱胺酸束縛。該反應藉助薄層色譜法監測。
將32 mg磷脂醯膽鹼(Lipoid GmbH，路德維希港，德國)和6mg磷脂醯乙醇胺加到事先交聯了的磷脂醯乙醇胺-GMBS-HBs中，將該混合物溶解於總體積為2.66ml的PBS中，它含100mMOEG(PBS-OEG)中。
流感A/新加坡-Hmagglutinin將按前敘於實施例1中的方式提純。一種含4mg Hmagglutinin的溶液將在100000下離心30分鐘，而沉降物溶解於1.33ml PBS-OEG中。
混合該磷脂和Hmagglutinin溶液，並用超聲處理1分鐘。該混合物然後在100000g下離心1小時，並無菌過濾上清液(0.22μm)。
在使用BioRad-SM-Bio-Beads的情況下按實施例1所述，然後通過除去Detergen而除去帶有吸收的HBs的病毒體。一個含50μg HBs-抗原/ml的原液將加入按實施例2的10μg/ml HLT，並按實施例6所述裝入噴霧給藥器中。
實施例5試管試驗以檢測粘液性輔料的活性粘液性輔料的生物學活性將藉助按實施例1的流感病毒體、HLT、PCG、一種病毒體和HLT的混合物和一種按實施例2的由病毒體和PCG組成的混合物來測定。後面的溶液將加入到Y-1-腎上腺細胞ATCCCCL79(Y-1-腎上腺腫瘤，老鼠類甾醇分泌物)於微型培養體中，按Sack DA和SackRB(Sack DA和Sack RB採用Y-1腎上腺細胞於微型培養體中進行腸毒素原大腸埃希桿菌測試。Infect，Imun.11(1974)334-336)(a)HLT(5μg/ml)，(b)PCG(60μg/ml)，(c)流感病毒體和HLT3種細胞幹(H1N1，H3N2，B)各37μg/ml流感Hamagglutinin，100μg/ml磷脂醯膽鹼和5μg/ml及(d)流感病毒體和PCG三種細胞幹各37μg/ml流感Hamagglutinin，100μg/ml磷脂醯膽鹼和60mg/ml PCG。
後面的輔料活性(以單元位計)如下測定(a)15單位，(b)6單位，(c)80單位，(d)36單位。最高的生物輔料活性將用由病毒體和HLT或病毒體和PCG組成的混合物進行檢測。輔料作用將藉助細胞毒性參數確定。
實施例6不同的噴霧給藥器的臨床評價按本發明的給藥裝置在其基礎構造部分基本上與常規的噴霧給藥裝置器是可比的，但它特別適應於解剖學構造，以對任意一種，特別是此處描述的藥物活性物質能特別好地作經鼻給藥。
按本發明的給藥裝置2的一個特別優選的實施方案示於圖3和圖6中。在圖3中示出的按本發明給藥裝置(噴霧給藥器)2的一個側視圖中，主要的部件是易識別的。給藥裝置2主要具有一個裝有一種(未示出)藥物活性物質的容器4和一個噴霧-或泵壓機械裝置6。泵壓機械裝置6用一種結合段8與容器4液密地結合。用按本發明的給藥裝置2的泵動和噴霧藉助常規方式、並通過操作手指軸環10而實現。在容器4中存在的藥物活性物質將通過一個沿泵壓機械裝置延伸的開口12提供給出口開口14。
按本發明的給藥裝置2本身不同於、特別是由於鼻藥杆的結構性構造而不同於已知的噴霧給藥器，在有效地給出藥物活性物質時，鼻藥杆16發揮了重要作用。鼻藥杆16優選是與泵壓機械裝置6和手指軸環10整體地構造在一起。鼻藥杆16優選與泵壓機械裝置6和手指軸環10構成一個整體。該鼻藥杆16優選分為兩段18和20，其中鼻藥杆16上，在手指軸環一方設置的段18比與出口開口14相鄰設置的段20的直徑要大些。兩段16和20的過渡區構成一個擋板22，它用作-按本發明的一個優選的實施方案-在鼻藥杆16的段20上可固定的軸環24，以支承在使用者的上唇上。
在鄰近於出口開口14設置的、鼻藥杆16的段20優選構成基本上園筒形狀，並其直徑d20最大為5mm，優選約2-4mm。鼻藥杆16的前段20的長度l20優選至少為5mm，優選最少為10mm，特別優選為10-20m。軸環24是可穿過鼻藥杆16段20、優選從出口開口14處可移開的，並藉助一個旋轉固定裝置旋轉固定地把持在給藥裝置2上。旋轉固定裝置可以例如有多邊形體的外形，例如具有橢園形的橫截面，這是在鼻藥杆16的前面段20和一個相應的、在軸環24上留出的空間26來實現的。
按照本發明給藥器2的另一個實施方案，突入一個患者的鼻子中的噴霧給藥器突起段也可構造在軸環24上。這樣一種實施方案在圖7b中示例示出。如在圖7b中所示，在軸環24上已構造了一個基本上為管狀的突出段28，它可支立在鼻藥杆16的、與出口開口14相鄰設置的段20上。在這種情況下，管狀突出段28的尺寸優選基本上相應於前述實施方案中的尺寸(d20和l20)。
鼻藥杆16的段18有利地具有的長度l18為至少10mm，優選約20mm。兩個段18和20的尺寸將這樣選擇，使得使用者的背側手指表面和噴霧尖頭或出口開口14之間的距離至少為2cm，有利地為2.5-3cm。當軸環24至噴霧尖頭14之間的距離為至少3cm或有利地為4-5cm時，這尤其是好的。
通過具有這些尺寸的按本發明給藥裝置2，藥物活性物質基本上被直接準確地噴入主鼻孔或內鼻孔中，以可以達到比已知系統顯著更高的有效性。
按本發明的給藥裝置2有利地安排了軸環24，以便對較適合的尺寸而言可補充調節最佳噴霧角α。然而軸環24也可與前述噴霧給藥器2無關地裝在常規給藥裝置上，以便使用該常規噴霧給藥器、基於該精確可調的噴霧角α，可以獲得顯著改善的效果。
或者通過選擇鼻藥杆16的尺寸，或者通過適宜的軸環24來調節最佳的噴霧角α，可獲得改進的效果。優選的是將新的給藥裝置2與前述的尺寸和為了調節最佳噴霧角α的設計的軸環24組合起來，以便達到最好的處理結果。
如前面簡短解釋的那樣，軸環24藉助管狀段28穿過鼻藥杆16的段20移動。在安裝了的狀態下，軸環24優選與給藥裝置旋轉固定地結合。例如，旋轉固定方式可通過一個在至少一個側面打平的園形外形輪廓在鼻藥杆16上實現，軸環24可藉助一個相應構型的開口與該輪廓旋轉固定地安裝。軸環24具有一個支承段30，它可座落在使用者的上唇上，以便與在患者鼻孔中存在的鼻藥杆16的段20共同限定出噴霧角α。最佳噴霧角α優選為50°至70°。
軸環24的支承段30彎成一種與上唇形狀易於匹配的形狀，以便提供最佳的安放-和支承面。軸環24可由任一種適宜的材料製造，優選用可注鑄的人造材料製成。
為了評價效果，試驗了不同的給藥裝置。為此，1％甲基藍溶液裝入5種不同的鼻用給藥器中(a)一種按本發明的、帶定向軸環的噴霧給藥器，該軸環固定噴霧出的液體的方向；(b)一種不帶定向軸環的按本發明噴霧給藥器；(c)一種常規的市售噴霧給藥器，它沒有長2cm、直徑4mm、噴霧角為50°的細長的鼻藥杆；(d)一種按本發明的噴霧給藥器，但它具有50°的噴霧角；和最後
(e)一種按本發明的噴霧給藥器，但它帶手指軸環，它離噴頭3cm。
總體的噴霧給藥器稱為所謂的雙劑量給藥器。每一噴霧給藥器用5個受試對象在醫生看護下檢測。受試對象將每一劑量的甲基藍溶液噴入適宜的右或左鼻孔。藉助鼻內視鏡照亮黏膜-甲介狀體並進行照相。在甲介狀體上藍色強度和藍色著色的面將藉助1-4的標度來評價。評價給出下列結果(幾何平均)組(a)19點，組(b)16點，組(c)7點，組(d)9點，組(e)12點。
僅在組(a)中，噴霧液體幾乎全部地噴到鼻黏膜上。同樣在組(b)中，噴出物的較大部分噴到了黏膜上。在其餘組中，噴出物的重要部分噴到了鼻前庭中，在那裡，待施用的噴霧液不產生藥效。
實施例7帶和不帶HLT的鼻內病毒體的流感疫苗的臨床效果的比較，它們在一種本發明已敘及的新型噴霧儀器中使用，取得人們的自願後與非經腸的市售流感疫苗比較。
開放的隨機化臨床研究在與Helsinki宣言的原則和與當地的法律和關於臨床研究的規程完全一致的情況下進行。根據Luzern州倫理委員會對協議書的批准和報端士聯邦健康管理當局備案，有80個健康的志願者(18-64歲)提供了他們的書面表達的參加試驗的意願。當他們在進行免疫化的時間點上標記為急性或慢性疾病病人或當用免疫抑制藥劑或已知的免疫興奮劑進行同時處理時，志願者將被隔離。
鼻內疫苗製劑對三組中的每一組將用20個志願者給藥(表1)。組A和B於1天中於每個鼻孔內得到製劑A或B2個劑量，且在1周後得到2個劑量，組C在1天內得到雙倍增濃的製劑A的2個劑量。組D用非經腸製劑作三角肌肌內接種。血-和唾液取樣(Omnisal，GB)將在第一次種疫苗之前和第一次免疫化之後一個月(29±2天)進行。由於技術性的問題，僅能評價首先47個人的唾液試樣。鼻孔的排放細胞學檢查在免疫化前和之後第4，8天和1個月後進行。
對血樣和唾液樣進行編號，以便於分析。
對HA-疫苗成分的血清免疫應答將通過標準測試法，使用4個相應抗原的Hmagglutinin單位而測定。血清在試驗前30分鐘在56℃處理。滴度值是以血清的最高稀釋度的倒數值表示的，該稀釋度能完全阻止Hmagglutination。滴度≥1∶40被認為是有保護作用的。
總的-和流感特異性的IgA-抗體將藉助已知的ELISA-方法測定(Tamura SI，Ito Y，Asanuma H等人針對流感病毒感染的交叉保護，它是由三價滅活的疫苗鼻內用霍亂毒素B亞單位接種提供的。免疫學雜誌149(1992)981-987)。病毒特異的IgA-值以每μg的總體-IgA-濃度的特IgA的ELISA-單位表示。
鼻上皮細胞唯一地由在每個人身上兩個鼻孔的上頜鼻甲(胚)上用同類的小型尼龍刷採集，該刷是用於支氣管鏡檢查時作細胞病理學研究的(Glück U，Gebbers，J-O，吸菸者的鼻細胞病理學一種空氣汙染的可能的生物標記？Am.J.Rhinol.10(1996)55-57)。取樣通過同一研究者(U.G.)在鼻鏡檢查法監控下用一種能旋轉和平移運動的器械、沿著下部鼻甲(胚)突出體(Turbinatanheftung)進行。細胞將轉移到一個玻璃的載玻片上並立即固定到一種由200ml乙醇+100ml丙酮+6滴三氯乙酸的溶液中。
帕帕尼科拉烏法著色的載玻片將通過病理學研究的、在Luzern州立醫院，細胞病理學研究機構中，使用的載玻片構成，並未記載免疫化狀態。
閃光細胞、杯狀細胞、淋巴細胞、Centroblasten、中性白細胞、嗜曙紅細胞和Schuppen上皮細胞的平均細胞數將在每個載玻片的25個代表性區域內以100x來測定。
基線-和後免疫化滴度值之間的顯著性將通過Paired-T試驗法來測定。4個免疫化試驗-它用於在研究組中引起抗-HA-保護抗體-的區別將通過X2測定。
所有在臨床研究中觀察到的有缺陷的結果必須記錄下來。一種不足的結果以受試者的基線(免疫化前)狀態的不利變化來定義的，不管該結果是否與免疫化相關聯地出現。不利的結果(局部的或系統的反應)-它在免疫化後出現-將由臨床者以一種特定的用於不利結果的報告表格來記載下來。不利結果的基線比率將在免疫化前測定。
平均年齡40歲和可比社會地位的80個人將徵召來用於研究。參加者的27.5％為女性。所有3個鼻用免疫化製劑及非經腸疫苗將能很好地承受。在三組鼻疫苗物質之間沒有出現顯著的診斷學區別，有三種製劑易於承受。在單個情況下，後面出現的可能的伴隨反應報導有發燒、疲乏、噁心、鼻炎、鼻塞和鼻咽炎同樣，非經腸的病毒體疫苗也能很好地承受。
血清學的免疫應答示於表2中。滴度的顯著上升在組A(以7天的間距作2次鼻疫苗接種)、組C(一次鼻疫苗接種，雙份劑量)及組D(針對3種病毒株非經腸疫苗接種)觀察到了。最高的抗體滴度值(GMT)的幾何平均值在組A和D中發現。組D具有針對HIN1-株的最高GMT值(P≤0.05)。在H3N2-株的情況下，在組A和D之間沒有顯著的區別。
這些組比組B和C反應得顯著地更好。對於B-株而言，在組A、C和D中沒有顯著的區別。但它們比組B顯出了明顯更高的滴度。血清轉化率最高值出現在組A和D中。通常它們顯著高於組B和C中的轉化率，且對3種病毒株而言，按歐共體對非經腸流感疫苗提出的血清學要求滿足了(歐共體委員會，在歐共體內醫藥產品的規程。對流感疫苗的要求的協調。(1992)，93-98頁。盧森堡歐共體公告辦公室)。
體液的粘液性免疫應答(唾液)示於表3中。IgA-滴度的最大上升值在組A中觀察到。它顯著地好於其它組中的值。考慮到總的IgA，組A中GMT也同樣是最高的。粘液轉化率(IgA-滴度升高4倍)又是在組A中最高。在肌肉內作疫苗接種的情況下，只有很弱的粘液轉化率。
鼻黏膜的排放細胞學檢查在組A、B和C中進行。結果匯總於圖5中。我們確定鼻黏膜上皮的細胞數(閃光-和非閃光柱狀細胞，杯狀細胞和Schuppen上皮細胞)和脊髓/單-和淋巴細胞的細胞數(淋巴細胞，中性白細胞，嗜曙紅細胞和Centroblasten)。在組A中，一種明顯的杯狀細胞增生可在作疫苗接種後第4和8天證實。此外我們觀察到淋巴細胞和Centroblasten在同樣天數裡的強勁升高。另外，嗜曙紅細胞和中性白細胞的升高在開始接種後第8天觀察到。柱細胞的數量保持不變。
在組B中僅有淋巴細胞、中性白細胞和嗜曙紅細胞粒質體(Granulozyte)的少量升高。在該組中未見到活化的淋巴細胞的徵兆。
在組C中，甚至可以測到比在組A中更強的杯狀細胞增生。此外，嗜曙紅細胞和中性白細胞粒質體在該組中在第4和8天有最強的升高。在該組中，成淋巴細胞的升高弱於在組A中。P＝≤0.05。在第一次接種後一個月，各組中細胞組成的原先狀態又恢復了。
圖5涉及鼻細胞學不同細胞群落的定量，它通過鼻塗抹技術、在三種不同的鼻內接種後直至29天由單個個體(每組20人)獲得。與在組B和C中顯著較低的升高，相比，觀察到作為局部免疫應答的標誌的Centroblasten的顯著升高(P＜0.005)。
實施例8帶HLT或PCG的鼻內病毒體流感疫苗在志願者身上的臨床作用效果的比較，在一個按本發明所敘的新噴霧儀器中給藥兩種抗-流感噴霧疫苗的免疫應答和可耐受性在雙盲研究中進行，它用總共158個年齡為18-67歲的、健康的瑞士志願者作此研究。
一種三價的病毒體流感疫苗(提純了的HA，用磷脂醯膽鹼配製)與來自大腸桿菌的熱變性毒素(HLT)以一種形式組合，它適於作鼻內給藥。一個人用劑量含7.5μg HA(對每種流感株而言)和2μg HLT。在第1和8天，對在18-59歲或≥60歲的組中個體受試者每個鼻孔給予一個劑量。在免疫化後約4周採取血清試樣。反應少和弱。那些獲得了保護性的血清-抗HA-抗體滴度(≥40)的人(成人或老人)數百分值如下A/拜耳(92％，91％)，A/武漢(92％，78％)和B/北京(59％，50％)。免疫化後的GMT和GMT上升的翻番在兩個老年組之間是可比的。那些不具有保護性的基線滴度值、但在免疫化後獲得了保護性水平的人(成人或老人)的人數百分值如下A/拜耳(79％，85％)，A/武漢(86％，56％)和B/北京(48％，41％)。
第二種粘液性疫苗製劑含有7.5μg HA和12μg前霍亂原(Procholeragenoid)(PCG)。該製劑同樣也能很好地承受，且比HLT-製劑具有大約低一些的免疫原。那些獲得保護性的血清-抗-HA-抗體滴度值的人數百分值如下A/拜耳94.2％，A/武漢80.8％和B/北京36.5％。各組的血清轉化率示於表4中。
這些結果表明，鼻內途徑給藥的病毒體流感疫苗對包括老人在內的成人是安全的和免疫發生性的。
實施例9在鼻內應用一種病毒性流感疫苗後老鼠身上產生的粘液性免疫應答，該疫苗帶HLT、帶PCG或沒有另外的粘液輔料10個長成的雌性卵巢/c-老鼠將用30μl或是在實施例1中所述的流感疫苗或在實施例2中所述的流感疫苗接種。10隻老鼠的對照組得到不帶另外輔料、但有同樣病毒體組成的病毒性疫苗製劑。一周後，每組的一半得到一個第二種鼻內劑量。三周後進行鼻清洗(NW)和支氣管肺泡衝洗(BAL)。表5相應於實施例9。特異IgA的求取將通過已知的ELISA方法進行。結果(GMT)歸納於表6中。
對所有三個疫苗株(A/約翰內斯保，A/南京，B/哈爾濱)的最高GMT值可在這一組中驗證，該組已用按實施例1的疫苗接種兩次。在它僅接種一次後，它甚至在BAL中反應出最高的IgA-水平。
一個令人滿意地出現的IgA-應答也在這樣一組老鼠身上得到，它已用按實施例2的製劑作鼻內接種。對照組-它未加另外的粘液性輔料的病毒體製劑-僅顯示出很弱的粘液性免疫應答。
這些結果表明，一種鼻內給藥的病毒體流感疫苗-它含粘液性輔料-可誘導出高的粘液性抗體應答。
在老鼠身上對病毒體流感疫苗的臨床前研究鼻內應用(相應於實施例9的表5)
老鼠身上的IgA-流感-抗體，GM滴度的倒數的GMT(ELISA)(相應於實施例9的表6)
實施例10粘液性肝炎病毒-B-(HBs-)疫苗的臨床評價按實施例4製備該疫苗，且裝入按實施例5的鼻用噴霧給藥器中。該產品在10個志願者身上試驗在第1天每個鼻孔給藥100μl，一周後再給藥一次。在第1天(接種前)和第29天採取血樣。按HBs-抗體將藉助RIA(甘油瓊脂)評定。接種前的滴度的幾何平均值為7IU/ml，在第29天為159IU/ml.
實施例11在鼻內使用一種DNA-質體後老鼠的粘液性免疫應答，該DNA-質體為腮腺炎病毒的HN-抗原編碼，加入到含10％陽離子性磷脂中的流感病毒體中，並與HLT混合(5μg/ml)用a)用於給腮腺炎病毒的HN-抗原編碼的裸DNA(組c)或b)在用病毒體預免疫化後包括在病毒體中的DNA(組A)或c)未作預免疫化(組B)對老鼠組作鼻內免疫化。對照組(H)用活體Urabe-腮腺炎病毒(Priorix，SKBRixensart)作鼻內免疫處理。如表7中所示，在已作預免疫處理的老鼠組中，IgG的滴度的幾何平均值(GMT)高於老鼠組B和C中的該值(Lovell GHProteosomes，hydrophobic anchors，iscoms and liposomers forimproved presentation of peptide and protein vaccines，InNewGeneration Vaccines(1990)(G.C.Woodrow und M.M.Levine Hrsg.)Dekker，New York，141-168頁；Cusi MG und Gluck RIntranasalimmunization of mice with mumps DNA entrapped into influeuzavirosomes.IBS’s 4th Annual Conference on Genetic Vaccines，25.-27.10月，1998年，華盛頓特區)。已用裸DNA作鼻內免疫處理的那些老鼠的組展現了很低的IgG-水平，對此，那些用腮腺炎病毒免疫處理了的老鼠(組H)顯示了好的IgG-應答。通過粘液免疫性分析我們發現，除了用裸DNA免疫處理了的外，所有其它老鼠組均展現了IgA。僅在用腮腺炎病毒鼻內免疫處理了的老鼠的鼻清洗物(NW)中我們才能檢測到升高的IgA滴度(組H)。
細胞素檢測在採用由老鼠脾上取出的原始脾細胞來進行，該細胞在免疫處理後12天取出。表8匯總了代表性的測量值，它們由兩個分立的實驗得到。用腮腺炎病毒抗原刺激了的老鼠細胞-它事先已用DNA-病毒體鼻內接種-誘導了IL-2和IFN-γ的生產。此外，被流感感染了的老鼠誘導了IL-4的生產。由用腮腺炎病毒免疫處理了的動物身上取出的細胞在用腮腺炎抗原體外刺激後產生了IFN-γ，IL-2，IL-4和IL-10。如同用提純了的腮腺炎抗原作對照免疫處理的那樣，用DNA-病毒體進行的免疫處理與Th1-表型作關聯。此外收集和考慮IgG-總水平和病毒特異的IgG1或IgG2a之間的比例、在組A中IgG2a-Isotyp的量，它表示了Th2-應答。表7對老鼠作支氣管炎泡衝洗時的體液IgG、IgA的、和對老鼠作鼻清洗時的IgA的滴度幾何平均值(GMT)
表8對老鼠身上細胞素生產的表徵性測量，通過兩個分立的實驗得到
實施例12藉助帶和不帶HLT的流感病毒體、用一種新的噴霧給藥器在志願者身上處理鼻塞在一個臨床研究中，選出30個具有感冒症狀和急性鼻塞的志願者。對全部志願者而言，呼吸強度通過每個單個鼻孔作鼻腔測壓法(帕斯卡)測室。隨後將他們隨機地分成3組，每組10人。組A得到一個按實施例1的接種物劑量(每鼻孔100μl)，組B得到相同的劑量，但沒有粘液性輔料HLT，組C每個鼻孔得到100μl 0.9％ NaCl(生理食鹽水)。在15、30分鐘、1和2小時後測量空氣流。
測量數據匯總於表9中。在組A和B中的評價值顯著地好於在組C中的值。在這兩組中可以確認這呼吸功能的明顯改善。
表9對志願者作噴霧處理之前和之後鼻腔測壓法幾何平均值
實施例13藉助流感病毒體和HLT在志願者身上作黏膜(Mukosalsionen)處理如實施例7所述，使志願者作鼻內接種。如此處所述，鼻內疫苗處理3，7和28天後，測定平均杯狀細胞數。我們能夠在細胞學塗抹法中用杯狀細胞增生來確定上皮改變(Glück U，Gebber J-O吸菸者中的鼻細胞病理學空氣汙染的一種可能生物標誌？Am.J.Rhinol.10(1996)55-57)。杯狀細胞對黏膜層具有保護功能。首次鼻內疫苗處理後一個月，黏膜的細胞狀態顯著地好於先前狀態。
新的疫苗因此可用作治療劑來處理受損狀態的鼻黏膜。
實施例14用具有和不具有流感病毒體的HLT作經鼻給藥來預防腸毒性的大腸桿菌性腹瀉一組訪問突尼西亞(Tunesien)的旅行者由38個人組成。按照表達的意願，所有的人都參與研究中。隨機地將19個志願者用按實施例1的製劑以1周的間距接種二次，相對的是，19個人沒得到接種物質。第一次鼻內接種28天後，從所有志願者身上抽取血樣。19個接種了的人在血清中顯示了對於粘液性輔料(HLT)的高的Ig G-水平。對照組保持抗-HLT陰性。當他們離開突尼西亞之前、一個月之後，向每個參與者分發一份特定的健康事項調查表格。該組20天後由突尼西亞返回家去，且已填好的調查表用於評估腹瀉疾病。在接種了的一組中僅報告了二個人有腹瀉問題，相對照的是，未接種的組中有9個人在逗留在突尼西亞期間發生了腹瀉。這些數據表明，疫苗對阻止腸毒性的大腸桿菌疾病性腹瀉是有效的。實施例7表1臨床記錄
權利要求
1.用於鼻內給藥的疫苗，包括(a)流感表面蛋白，它配成脂質的(病毒體)；(b)粘液性輔料細菌源；(c)特定的噴霧給藥器，它這樣構造，以使近100％的噴出物可全域地施加到對藥效重要的鼻黏膜上。
2.按權利要求1的疫苗，其中流感表面蛋白是Hmagglutinin HA。
3.按權利要求1或2的疫苗，其中流感表面蛋白是HmagglutininHA和神經氨酸甙酶。
4.按權利要求1-3中之一的疫苗，其中含有另外的抗原。
5.按權利要求4的疫苗，其中，所說另外的抗原結合在病毒體的表面。
6.按權利要求4和5之一的疫苗，其中抗原是病原有機體的抗原。
7.按權利要求6的疫苗，其中，病原有機體是一種病毒、細菌、真菌或寄生物。
8.按權利要求7的疫苗，其中病毒、細菌、真菌或寄生物選自肝炎A-病毒、肝炎B-病毒、呼吸道合胞體-病毒(肺病毒)、副流感病毒、腮腺炎病毒、Morbilli病毒、HIV、白喉細菌(白喉棒狀桿菌)、破傷風桿菌、肺炎桿菌、流感嗜血桿菌、大腸桿菌、白色念珠菌、麴黴屬、毛滴蟲屬、錐蟲屬、利什曼蟲屬、鼠弓形體、惡性瘧原蟲、間日瘧原蟲、卵形瘧原蟲、三日瘧原蟲、吸蟲屬和線蟲屬。
9.按權利要求1-8之一的疫苗，其中它是一種流感疫苗。
10.按權利要求1-9之一的疫苗，其中它可用於預防和/或治療通常的感染/感染性疾病。
11.按權利要求1-10之一的疫苗，它用於預防和/或治療流感疾病。
12.按權利要求10或11的疫苗，它用於預防和/或治療鼻塞。
13.按權利要求10、11或12的疫苗，它用於處理受損的鼻黏膜。
14.按權利要求1-13之一的疫苗，其中每個劑量(100μl)中Hamagglutinin的含量為1-30μg，優選3-10μg，最好3.75μg。
15.按權利要求2-14之一的疫苗，其中脂質體-磷脂與HA的比例在1∶0至20∶1之間。
16.按權利要求15的疫苗，其中脂質體-磷脂與HA的比例為1∶1至10∶1之間。
17.按權利要求15和/或16之一的疫苗，其中的比例為3∶1。
18.按權利要求15-17之一的疫苗，其中脂質體的磷脂選自中性的、陽離子性的和陰離子性的磷脂。
19.按權利要求1-18之一的疫苗，其中粘液性輔料為一種活性毒素、一種非活的毒素和/或一種它們的非毒性衍生物。
20.按權利要求19的疫苗，其中毒素和/或其非毒性的衍生物是熱變性、毒素(HLT)、霍亂毒素(CT)和/或前霍亂原(PCG)。
21.按權利要求1-20的之一的疫苗，其中的熱變性毒素(HLT)和/或霍亂毒素(CT)的比例為1∶2至20∶1，優選1∶1至1∶10和最好的7.5∶1。
22.按權利要求19和20之一的疫苗，其中含有熱滅活的前霍亂原(PCG)、通過重組技術失活的HLT和/或霍亂毒素(CT)作為粘液性輔料，其比例HA∶PCG(和/或rHLT，和/或rCT)在3∶1至1∶20之間。
23.按權利要求22的疫苗，其中比例HA∶PCG(和/或rHLT，和/或rCT)在1∶1至1∶10之間。
24.按權利要求23的疫苗，其中比例HA∶PCG(和/或rHLT，和/或rCT)為1∶2。
25.按權利要求1-24之一的疫苗，其中進一步含有DNS-和/或RNS-質體，它們結合在病毒體之上或之內。
26.按權利要求1-25之一的疫苗，它是一種流感疫苗。
27.按權利要求1-26之一的粘液性輔料，它是熱變性毒素(HLT)，它用按實施例2的一種乳糖緩衝物由大腸桿菌中洗脫出來，並在一個帶乳糖醯基類-凝膠(Pharmacia)的色譜柱上提純。
28.軸環(24)，它具有一個用於結合在一個尤其是可使按權利要求1-27之一的藥物活性物質噴霧給藥的給藥裝置(2)、結合裝置(28)、一個支承裝置(30)，其中這樣安排結合裝置(28)和支承裝置(30)，以使它們限定出一個由給藥裝置出來的藥物的最佳給藥噴霧角(α)。
29.按權利要求28的軸環(24)，其中噴霧角(α)與水平方向成50°至80°。
30.按權利要求28或29的軸環(24)，其中結合裝置(28)是一個基本上圓筒形的管段。
31.按權利要求30的軸環(24)，其中管段(28)至少在給藥裝置(2)的鼻藥杆(20)的一部分上是可移動的。
32.按權利要求28-31的軸環(24)，其中支承裝置(30)在使用者側這樣彎曲，以使它基本上適應使用者的上唇的外側的形狀。
33.按權利要求28-32之一的軸環(24)，其中軸環(24)可安排成旋轉地固定在給藥裝置(2)上。
34.按權利要求33的軸環(24)，其中管段(28)和鼻藥杆(20)的這一部分-在該段上管段(28)可移動-至少部分地構成多邊形狀，以便構成旋轉固定。
35.給藥裝置(2)，尤其是使按權利要求1-27的藥物活性物質噴霧給藥的給藥裝置(2)，它具有一個泵壓裝置(6)、一個操作泵壓裝置(6)的手指軸環(10)、一個用於與儲存容器(4)密切結合的包封單元(8)和一個鼻藥杆(16)，它有第一段(18)和第二段(20)，其中鼻藥杆(16)的兩段(18，20)的尺寸這樣給出，以使鼻藥杆(16)的一個噴霧開口(14)突出到基本上到達患者的主鼻孔。
36.按權利要求35的給藥裝置(2)，其中至少將鼻藥杆(16)的第二段(20)構造成基本上圓筒形狀。
37.按權利要求36的給藥裝置(2)，其中第二段(20)的直徑為3-10mm，優選約7mm。
38.按權利要求35-37之一的給藥裝置(2)，其中鼻藥杆(16)的第二段(20)的長度為5-50mm，優選約20mm。
39.按權利要求35-38之一的給藥裝置(2)，其中鼻藥杆(16)的第一段的長度為10-40mm，優選約30mm。
40.按權利要求35-39之一的給藥裝置(2)，其中手指軸環(10)與在尖頭存在的噴霧開口(14)之間的距離至少為30mm，優選為約45mm。
41.按權利要求35-40之一的給藥裝置(2)，它具有一個按權利要求28-34之一的軸環(24)。
42.按權利要求41的給藥裝置(2)，它與軸環構造成單體的或單件的。
全文摘要
本發明涉及一種改進的藥用物質以及一種改進的給藥裝置,它構成用於施用有效的鼻用藥物的形式。
文檔編號A61K39/108GK1331604SQ99814882
公開日2002年1月16日 申請日期1999年11月8日 優先權日1998年11月6日
發明者R·格拉克, U·格拉克, A·科裡奧德 申請人:瑞士伯爾尼血清及接種研究所