3－烷氧基吡啶－2－醯胺酯,它們的製備及藥用的製作方法

2023-09-12 15:53:20

專利名稱：3－烷氧基吡啶－2－醯胺酯,它們的製備及藥用的製作方法
技術領域：
本發明涉及3-烷氧基吡啶-2-醯胺酯，它們的製備及用於抑制膠原蛋白的生物合成和作為藥物用於治療纖維變性疾病。
抑制脯氨醯羥化酶和賴氨醯羥化酶的化合物可以通過影響膠原蛋白特有的羥化反應高度選擇性地抑制膠原蛋白的生物合成。在這個生物合成方法中，蛋白鍵合的脯氨酸或賴氨酸被脯氨醯-或賴氨醯羥化酶羥基化。如果這個反應被抑制劑所抑制，會導致產生功能喪失的，欠羥基化的膠原蛋白分子，只有很少量的這種分子能被細胞釋放到細胞外間隙。欠羥基化的膠原蛋白還無法與膠原蛋白的基質整合而且容易發生蛋白降解反應。這些因素會導致細胞外沉積的總的膠原蛋白的數量減少。
因此，脯氨醯羥化酶的抑制劑對於治療某些疾病是一種比較合適的物質，在這些疾病中沉積的膠原蛋白對臨床表現起決定性的作用。這些疾病包括，肺，肝臟和皮膚的纖維化(燒傷，損傷和外科手術後的硬皮病和瘢痕)和動脈粥樣硬化。
眾所周知，吡啶-2,4-和-2,5-二羧酸可以有效地抑制脯氨醯羥化酶(K.Majamaa等，歐洲生物化學雜誌(Eur.J.Biochem.).138(1984)239-245)。然而，在細胞培養時，這些化合物只有在很高濃度的條件下才有抑制活性(Tschank,G.等，生物化學雜誌.238(1987)625-633)。
專利EP-A-0 590 520和DE-A-42 38 506和EP-A-0 562512中報導的前藥吡啶-2,4(5)-二羧酸酯也已為大家所熟知。
藥物化學雜誌.1992,35,2652-2658(Cunliffe等)和EP-A-0457 163中報導的N-草醯甘氨酸是脯氨醯-4-羥化酶的抑制劑。
此外，有機化學雜誌.31,636-638(1966)中報導了3-羥基吡啶-2-羧酸(甘氨酸乙酯)醯胺。
因此我們的目標是提供特徵為在體內和/或體外，尤其是當它們全身和/或局部應用時具有非常高的活性的化合物。
令人驚訝的是，現已發現分子式Ⅰ所示的3-烷氧基吡啶-2-醯胺酯是膠原蛋白生物合成的強抑制劑。本發明中的化合物是從EP-A-0650 960中報導的化合物中挑選出來的。與此歐洲專利申請中提到的化合物相比較，它們的特點是在體內和體外，尤其是在全身和/或局部應用時對纖維變性疾病有非常高的活性。這些疾病包括，例如，肺，肝，腎，心臟，眼和皮膚的纖維化和動脈粥樣硬化。
分子式Ⅰ所示的化合物在很多不同種類的細胞中(如正常人皮膚纖維細胞，大鼠肝臟中的初級儲脂細胞，大鼠肝臟上皮細胞和顱蓋的器官培養)都表現為對膠原蛋白生物合成的強列抑制。
它們尤其適用於作為膠原蛋白生物合成的抑制劑，作為抗纖維化的活性化合物來進行局部應用，以及局部應用於由於結締組織(膠原蛋白)的增多引起的疾病。因此，分子式Ⅰ所示的化合物適用於，例如，局部用於防止/減少術後人體產生的瘢痕以及局部用於治療術後的眼部疾病，如青光眼術後的處理和放射或化療引起的纖維樣變性，尤其是應用於肺部。
本發明涉及的化合物是分子式Ⅰ所示的相應羧酸的酯類前藥，其中B為羧基。
分子式Ⅰ所示的化合物在活體內(體內實驗)和細胞培養(體外實驗)中裂解給出B為羧基的分子式Ⅰ所示的化合物或它的鹽。
在用分子式Ⅰ所示的化合物給藥之後，在體內和體外都可以觀察到它們可以抑制膠原蛋白的生物合成，形成了B為羧基的分子式Ⅰ所示的化合物或它的鹽。這些化合物抑制脯氨醯-4-羥化酶並因此抑制了膠原蛋白的生物合成。
本發明涉及的化合物的結構如分子式(Ⅰ)所示
其中R1,R2和R3為H,R4為(C1-C6)-烷基，A為-CH2-基團，其中一個氫原子可以被甲基替代，而B為-CO2G，其中G為醇GOH的殘基，包括具有生理活性的鹽。
優選分子式Ⅰ所示的化合物，其中R1,R2和R3為H,R4為(C1-C6)-烷基，A為-CH2-基團，其中一個氫原子可以被甲基替代，而B為-CO2G，其中G為支鏈或非支鏈的或環狀(C1-C20)-烷基，或者為支鏈或非支鏈的或環狀(C2-C20)-鏈烯基，及相應的(C2-C20)-炔基，相應的(C4-C20)-烯炔基或視黃基，其中各基團可包含一個或多個多價鍵，或者為苯烷基，上述基團優選包含一個或多個如下取代基羥基，滷素，氰基，三氟甲基，羧基，(C1-C12)-烷基，(C3-C8)-環烷基，(C5-C8)-環烯基，(C1-C12)-烷氧基，(C1-C12)-烷氧基-(C1-C12)-烷基，(C1-C12)-烷氧基-(C1-C12)-烷氧基，苯基-(C1-C4)-烷氧基，(C1-C8)-羥烷基，(C1-C12)-烷基羰氧基，(C3-C8)-環烷基羰氧基，苯甲酸基，苯基-(C1-C4)-烷基羰氧基，包括具有生理活性的鹽。
此外，還優選分子式Ⅰ所示的化合物，其中R1,R2和R3為H,R4為(C1-C4)-烷基，A為-CH2-基團，其中一個氫原子可以被甲基替代，而B為-CO2G，其中G為支鏈或非支鏈的或環狀脂肪族(C1-C18)-烷基，(C3-C8)-環烷基-(C1-C8)-烷基，支鏈或非支鏈的(C2-C18)-鏈烯基，例如，犛牛兒基，法呢基或視黃基，或相應的(C2-C18)-炔基，苄基，苯乙基，苯丙基或苯丁基，
上述基團可包括一個如下取代基羥基，(C1-C4)-烷氧基，(C1-C6)-烷基羰氧基，(C3-C8)-環烷基羰氧基，苯甲酸基或苯基-(C1-C4)-烷基羰氧基，包括具有生理活性的鹽。
特優選分子式Ⅰ所示的化合物，其中R1,R2和R3為H,R4為(C1-C4)-烷基，A為-CH2-基團，其中一個氫原子可以被甲基替代，而B為-CO2G，其中G為支鏈或非支鏈的或環狀脂肪族(C1-C18)-烷基，(C3-C8)-環烷基-(C1-C4)-烷基，支鏈或非支鏈的(C2-C18)-鏈烯基，苄基，苯乙基，苯丙基或苯丁基，包括具有生理活性的鹽。
此外，特優選分子式Ⅰ所示的化合物，其中R1,R2和R3為H,R4為甲基，A為-CH2-基團，其中一個氫原子可以被甲基替代，而B為-CO2G，其中G為支鏈或非支鏈的(C1-C18)-烷基或(C2-C8)-鏈烯基，包括具有生理活性的鹽。
此外，特別優選分子式Ⅰ所示的化合物，其中R1,R2和R3為H,R4為甲基，A為-CH2-基團，而B為-CO2G，其中G為支鏈或非支鏈的(C1-C18)-烷基或(C2-C18)-鏈烯基，包括具有生理活性的鹽。
特別地，優選分子式Ⅰ所示的化合物，其中R1,R2和R3為H,R4為甲基，A為-CH2-基團B為-CO2G，其中G為線性的(C1-C18)-烷基，包括具有生理活性的鹽。
最優選分子式Ⅰ所示的化合物，其中G為線性的(C1-C16)-烷基，包括具有生理活性的鹽。
本發明還包括分子式Ⅰ所示的化合物的鹽。
吡啶環上的N原子可以與酸性試劑成鹽。
所用的試劑有，例如，甲苯磺酸，甲磺酸，鹽酸，硫酸，磷酸和含有酸性基團的藥物。
本發明涉及的分子式Ⅰ所示的化合物和它的生理相容的鹽用於抑制膠原蛋白的生物合成，尤其用於不同種類的細胞。
本發明涉及的分子式Ⅰ所示的化合物和它的生理相容的鹽用於在體內和體外抑制脯氨醯-4-羥化酶。
此外，本發明涉及的分子式Ⅰ所示的化合物和它的生理相容的鹽用於肺，肝，腎，心臟，眼和皮膚的纖維化疾病。化合物也可應用於動脈粥樣硬化。在此可使用全身和/或局部用藥。
本發明涉及的分子式Ⅰ所示的化合物和它的生理相容的鹽特別適用於局部用藥，尤其是作為膠原蛋白生物合成的抑制劑，作為抗纖維化的活性化合物來進行應用，以及應用於由於結締組織(膠原蛋白)的增多引起的疾病。包括用於防止/減少術後人體產生的瘢痕以及用於眼部手術的術後處理，如青光眼術後的處理和放射或化療引起的纖維變性，尤其是應用於肺部。
最後，本發明涉及分子式Ⅰ所示的化合物的藥用。
本發明涉及的分子式Ⅰ所示的化合物特別適用於局部用於皮膚，肺和眼部的纖維樣變性，特別用於青光眼的術後處理。
本發明還涉及分子式Ⅰ所示的化合物的製備方法。
分子式Ⅰ所示的化合物，其中A為-CH2-基團，其中一個氫原子可以被甲基替代而B為CO2G，按如下方法製備ⅰ1.)分子式Ⅱ(R5=H)所示的吡啶-2-羧酸與分子式Ⅲ所示的氨基酯或它的鹽反應得到分子式Ⅰ所示的醯胺酯；或者ⅰ2.)分子式Ⅱ(R5=C1-C16-烷基)所示的吡啶-2-羧酸酯在氨解條件下反應得到分子式Ⅰ所示的化合物；或者ⅱ)分子式Ⅳ所示的化合物用醇GOH酯化，或者ⅲ)分子式Ⅴ所示的化合物用R4X烷基化，其中X為離去基團，優選滷素，甲磺醯基，苯磺醯基等。
流程

圖1
比較適用的形成醯胺的方法(反應ⅰ1)是羰基活化方法和大家熟知的肽化學中縮合反應。
活化羧酸的試劑可選用本領域專業人員熟知的試劑，如亞硫醯氯，草醯氯，三甲基乙醯氯，氯甲酸酯衍生物或N,N』-羰基二咪唑。製成後分子式Ⅱ所示化合物的活化衍生物立即與分子式Ⅲ所示的醯胺衍生物反應。
合適的縮合劑有，例如，N,N』-二環己基碳化二亞胺/N-羥基-1H-苯並三唑和N-乙基嗎啉的混合物。
合適的溶劑有，二氯甲烷，四氯化碳，乙酸丁酯，乙酸乙酯，甲苯，四氫呋喃，二甲氧基乙烷，1,4-二氧六環，乙腈，N,N-二甲基甲醯胺，N,N-二甲基乙醯胺，二甲基亞碸，硝基甲烷和/或吡啶。
本發明涉及的分子式Ⅰ所示的化合物具有重要的藥理學性質並且特別表現出抗纖維化活性。
可以通過如下動物模型檢測抗纖維化活性Unemori,E.N.等，皮膚學研究雜誌(J.Invest.Dermatol.),101:280-5,1993中報導的皮下植入的滲透性微泵周圍結締組織囊的形成，Boyle,E.,Mangan,F.R.,Br.J.Ep.Pathnol.61:351-60,1980中報導的皮下植入的「棉球」或聚乙烯海綿球的膠原蛋白含量；以及Ward,H.E.等，研究(Res.),136,15-21,1993,和Santana,A.等，美國呼吸學細胞分子生物學雜誌(Am.J.Respir.Cell.Mol.Biol.)13:34-44,1995中報導的放射或化學引起的纖維樣變性後肺的膠原蛋白含量。
細胞培養中抑制脯氨醯-4-羥化酶正常人皮膚纖維細胞(NHDF)，大鼠肝臟上皮細胞(文獻1)和肝臟儲脂細胞(文獻2)可作為檢測化合物的細胞模型。檢測時，在抑制劑存在的條件下培養細胞。同時，將其間新合成的膠原蛋白用4-3H-L-脯氨酸和14C-脯氨酸來代謝標記。被檢測的物質對膠原蛋白羥化程度的影響可以按Chojkier等人提出的方法檢測(文獻3)。對照物質選用2,2』-二吡啶。(1．:Schrode,W.,Mecke,D.,Gebhard,R.1990.在門靜脈周肝細胞內通過與肝上皮細胞系聯合培養誘導穀氨醯胺合成酶。歐洲細胞生物雜誌.53:35-41,2．:Blomhoff,R.,Berg T.1990.分離和培養大鼠肝臟星狀細胞.Methods Enzymol.190:59-71和3．:Chojkier,M.Peterkofsky,B.,Bateman,J.1980.一種新的通過測量膠原蛋白酶消化方法中[4-3H]∶[14C]脯氨酸比例的變化來檢測脯氨酸羥基化程度的方法。生物化學分析.108:385-393)。
生物化學雜誌(1994)300,525-300中介紹的在體外(雞胚胎顱蓋)抑制脯氨醯-4-羥化酶的方法1．代謝標記從15天大小的雞胚胎上剝下顱蓋並在37℃用Hank′s平衡鹽溶液最低必要介質伊格爾(HMEM,BioWhittaker,Walkersville,MD,USA)洗3分鐘。4個顱蓋分別在玻璃器皿中用1.5mlHMEM在37℃孵育2.5小時並加入2mM穀氨醯胺和1μCi[U-14C]脯氨酸和不同濃度的抑制劑。將樣品池放入冰中以中止孵育。移出介質後用1ml雙蒸水快速洗滌顱蓋。然後用3ml0.5M乙酸和18μg苯甲磺醯氟處理並萃取16個小時。萃取液在4℃用0.5M乙酸滲析除去游離的[U-14C]脯氨酸然後等分並冷凍乾燥。
2．羥基脯氨酸-分析1份冷幹後的樣品溶於2ml 6N的鹽酸中在105℃水解24小時。蒸除鹽酸。殘餘物再懸浮於300μl雙蒸水中，轉移至Eppendorf容器中再次乾燥。殘餘的氫氯化物加入到60μl乙醇/水/三乙胺2∶2∶1(v∶v∶v)溶液中並再次乾燥進行中和。胺基酸於室溫下在乙醇/三乙胺/苯異硫氰酸酯/水7∶1∶1∶1(v∶v∶v∶v)溶液中衍生化20分鐘後再次乾燥。用高效液相色譜進行分析，樣品溶於150μl磷酸鹽緩衝液(5mM磷酸氫二鈉，pH7.4/乙腈95∶5(v∶v)中並在10000g離心5分鐘。取50μl用於分析。高效液相色譜使用碳18反相柱Ultrasphere ODS3μm 4.6nim×7.5cm(Beckman)，在50℃下選用如下分級系統時間緩衝液A緩衝液B0分鐘 100％0-9分鐘 100-90％ 0-10％9-11分鐘90-0％ 10-100％11-12分鐘 0％100％12-14分鐘 0-100％100％14-19分鐘 100％溶液A:70mM乙酸鈉pH6.14/0.1％乙腈溶液B乙腈/甲醇/水45∶15∶40(v∶v∶v)3．SDS-聚丙烯醯胺-凝膠電泳從1.中得到的1份冷幹的樣品溶於10mM三羥甲基氨基甲烷/鹽酸，pH8/1mM EDTA/1％SDS和5％巰基乙醇，95℃變性5分鐘，用於SDS聚丙烯醯胺-凝膠電泳。線性梯度膠(5-15％)電泳。在甲醇/冰醋酸/水3∶1∶6(v∶v∶v)中固定後乾燥，然後在Kodak X-Omat膠片於-70℃曝光。
如下表所示，通過在大鼠肝細胞中進行的抑制脯氨醯-4-羥化酶(膠原蛋白生物合成)的對照實驗可以看出本發明涉及的化合物與EP-A-0650 960報導的化合物相比具有顯著的優點表1
表2
表3
對照實驗表明該選擇本發明的本發明涉及的化合物與EP-A-0650 960報導的化合物相比，在相當低的濃度下(≤10μM，依實驗模型)都顯示出高抑制率(-50％)。
化學式Ⅰ的化合物可用作製藥製劑形式的藥物，該製劑含有式Ⅰ的化合物及任選的製藥相容的載體。化合物可用作治療劑，例如，以製藥製劑的形式，將這些化合物與藥用，有機或無機賦形劑如，水，阿拉伯樹膠，明膠，乳糖，澱粉，硬脂酸鎂，滑石，菜油，聚二醇，凡士林等等，製成可適用於腸胃，透皮或腸外給藥，或吸入給藥的混合物。
為此，可以口服給藥，劑量為0.1至25毫克/公斤/天，優選1至5毫克/公斤/天，或腸外給藥，劑量為0.01至5毫克/公斤/天，優選0.01至2.5毫克/公斤/天，特優選0.5至1.0毫克/公斤/天。在病情嚴重時，可加大劑量。然而，在許多病例中，低劑量已足夠了。這些數據以成人近似體重75公斤為基準。
有機化學雜誌.36,2002(1971)E.V.Brown,M.B.Shambhu報導了3-甲氧基吡啶-2-羧酸。(參見分子式Ⅱ；R1-R3=H,R4=Me,R5=H)。
此外，斯堪地那維亞化學學報(Acta Chem.Scand.)23,1791(1969)中報導了3-甲氧基吡啶-2-羧酸甲酯(參見分子式Ⅱ,R5=CH3)。
在下述的實施例中用作起始原料的3-甲氧基吡啶-2-羧酸是由4-氯-3-甲氧基-2-甲基吡啶製得，而4-氯-3-甲氧基-2-甲基吡啶由麥芽酚製得(參見EP-A-0 208 452和EP-A-0 304732)。
在下述的實施例中，本發明涉及的分子式Ⅰ所示的化合物命名為取代的吡啶-2-羧酸(甘氨醯酯)醯胺。
這種命名可以理解為取代的吡啶-2-羧酸N-((烷氧羰基)甲基)醯胺。
按取代的N-(吡啶基-2-羰基)甘氨酸進行分類更為可行。實施例1N-(((1-丁氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺a)3-甲氧基吡啶-2-羧酸鹽酸鹽a1.)4-氯-3-甲氧基-2-甲基吡啶-1-氧化物11.2克(80.5毫摩爾)3-甲氧基-2-甲基-4(1H)-吡啶酮在100毫升氧氯化磷中加熱回流10小時。隨後將混合物濃縮，每次取2毫升與30毫升甲苯混合併再次濃縮，殘餘物溶於150毫升水中，用碳酸鉀調pH至11後用二氯甲烷萃取，有機相用水洗，乾燥後除去溶劑。得到淺棕色油狀物(9克)，在二氯甲烷中用間氯過氧苯甲酸在標準條件下處理，得到8克產物，熔點88-89℃(從石油醚中)。a2.)4-氯-2-羥甲基-3-甲氧基吡啶30克(173毫摩爾)4-氯-3-甲氧基-2-甲基吡啶N-氧化物溶於100毫升冰醋酸中，在攪拌下於80℃逐滴加入到150毫升醋酐中，混合物在110℃攪拌2小時後冷至80℃，逐滴加入200毫升甲醇，混合物加熱至沸，15分鐘後冷卻，減壓濃縮，殘餘物溶於甲醇中注入到300毫升1.5N的氫氧化鈉甲醇溶液中，在20℃攪拌30分鐘後減壓濃縮，殘餘物溶於水後用二氯甲烷萃取三次，有機相干燥後濃縮，殘餘物用石油醚結晶。得到23克產品，熔點64至66℃。a3.)4-氯-3-甲氧基吡啶-2-羧酸在20℃將52.2克(0.3摩爾)上述醇加入到24克氫氧化鉀溶於900毫升水的溶液中，於50至60℃下將70克(0.44摩爾)高錳酸鉀分步地加入到此混合物中，直至顏色褪去。在50℃攪拌1小時後，將混合物熱抽濾，濾餅用熱水洗滌三次，濾液減壓濃縮至300毫升，冷卻後用濃鹽酸調至pH1。抽濾並乾燥得到50克產品，熔點121℃(不分解)。a4.)29克(0.15摩爾)上述4-氯吡啶羧酸在500毫升甲醇/四氫呋喃(1∶1)中在氫化裝置內用Pd/C(10％)氫化。吸收3.1升氫氣後，抽濾除去催化劑，濾液濃縮後用乙酸乙酯處理結晶狀殘餘物，抽濾後乾燥，得29克產品，熔點170℃(分解)。b)3.8克(20毫摩爾)3-甲氧基吡啶-2-羧酸鹽酸鹽懸浮於500毫升無水二氯甲烷中，於20℃攪拌下加入6.1克(20毫摩爾)甘氨酸1-丁酯甲苯磺酸酯(由甘氨酸，1-丁醇，對甲苯磺酸在分水器中用甲苯分水製得)，然後加入7.5毫升(60毫摩爾)N-乙基嗎啉，3克(22.5毫摩爾)1-羥基-1H-苯並三唑和8.5克(20毫摩爾)N-環己基-N』-(2-嗎啉乙基)碳化二亞胺甲基對甲苯磺酸酯(CMC)，在20℃攪拌24小時。抽濾除去不溶物，濾液依次用碳酸氫鈉水溶液，1N鹽酸和水萃取。有機相干燥後減壓濃縮，殘餘的油狀物研磨結晶，得到1.76克無色的目的物。熔點60至62℃。實施例2N-(((1-辛氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺2.5克(13毫摩爾)3-甲氧基吡啶-2-羧酸鹽酸鹽，5.5毫升(45毫摩爾)N-乙基嗎啉，2克(15毫摩爾)1-羥基-1H-苯並三唑，4.7克(13毫摩爾)甘氨酸辛酯甲苯磺酸酯(由甘氨酸，1-辛醇，對甲苯磺酸在分水器中用甲苯分水製得)，和6.3克(15毫摩爾)CMC(參看實施例1)在350無水二氯甲烷中攪拌48小時。在按實施例1)中所述的操作處理完畢後，粗產品用矽膠柱層析純化，洗脫劑為二氯甲烷(在洗脫方法中加入達2.5％的甲醇)。得到3.6克無色油狀目的物，1H-NMR(CDCl3):δ=4.26(雙峰，CH2-甘氨酸)。實施例3N-(((1-十二烷氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺如實施例1中所述的方法，2.8克(15毫摩爾)3-甲氧基吡啶-2-羧酸鹽酸鹽，在400毫升無水二氯甲烷中於20℃與6.2克(15毫摩爾)甘氨酸1-十二烷基酯甲苯磺酸酯(由38克(0.5摩爾)甘氨酸，93.2克(0.5摩爾)1-十二醇和115克(0.6摩爾)對甲苯磺酸在分水器中用甲苯分水製得；140克產品用乙醚結晶，熔點約106℃,80℃熔結)，8.2毫升(60毫摩爾)N-乙基嗎啉，2克(15毫摩爾)1-羥基-1H-苯並三唑和6.3克(15毫摩爾)CMC攪拌24小時。由於發生強烈的乳化，攪拌後，與實施例1)類似，減壓蒸除二氯甲烷後殘餘物溶於乙醚。有機相用硫酸鎂乾燥後減壓濃縮，得到的4.7克的黃色的油用矽膠柱層析分離，洗脫劑為乙酸乙酯。得到的4.克淺黃色的油放置兩天後用玻璃釘研磨結晶。分離得到3.6克無色目的化合物，熔點47至49℃。實施例4N-(((1-戊氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺實施例5N-(((1-己氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺實施例6N-(((1-庚氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺實施例7N-(((1-壬氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺實施例8N-(((1-癸氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺實施例9N-(((1-十四烷氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺實施例10N-(((1-十八烷氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺實施例11N-(((1-丙氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺實施例12N-(((2-丙氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺實施例13N-(((1-十三烷氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺實施例14N-(((1-十六烷氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺5.7克(30毫摩爾)4-氯-3-甲氧基吡啶-2-羧酸和14.2克(30毫摩爾)甘氨酸十六烷基酯甲苯磺酸酯(熔點約90℃，由甘氨酸，1-十六烷醇，對甲苯磺酸在分水器中用甲苯分水製得)在300毫升二氯甲烷中按照實施例1)中的方法與7.7(60毫摩爾)N-乙基嗎啉，4.5克(33毫摩爾)1-羥基-1H-苯並三唑和12.8克(30毫摩爾)N-環己基-N』-(2-嗎啉乙基)碳化二亞胺甲基對甲苯磺酸酯(CMC)混合併攪拌24小時。抽濾除去不溶物，濾液用碳酸氫鈉水溶液，水和鹽酸萃取，有機相濃縮後殘餘物(14克)溶於500毫升四氫呋喃/甲醇(1∶1)，與Pd/C(10％)混合後在氫化器中進行氫化。
氫化完結，抽濾除去催化劑，濾液濃縮，殘餘物用矽膠層析純化，洗脫劑為乙酸乙酯。將適當的組分濃縮，殘餘物用二異丙醚結晶。得到2.1克無色的目的物，熔點63至65℃。實施例15N-(((乙氧羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺鹽酸鹽a)N-(((乙氧羰基)甲基)-4-氯-3-甲氧基吡啶-2-醯胺4.7克(25毫摩爾)4-氯-3-甲氧基吡啶-2-羧酸懸浮於200毫升無水二氯甲烷中，於20℃在攪拌下接連與3.5克(25毫摩爾)甘氨酸乙酯鹽酸鹽，6.4毫升(50毫摩爾)N-乙基嗎啉，3.8克(28毫摩爾)1-羥基-(1H)-苯並三唑和5.15克(25毫摩爾)N,N』-二環己基碳化二亞胺混合併在20℃攪拌20小時。抽濾除去不溶物，有機相與飽和碳酸鈉水溶液振搖，乾燥後減壓濃縮，殘餘物(6克油)用矽膠層析純化，洗脫劑為乙酸乙酯。得到5.4克油狀產品。b)將上述化合物用Pd/C(10％)在氫化器中氫化得到目的物，熔點141至142℃(產生氣體，從乙醚中)。實施例16N-(((2-壬氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺外消旋體2.5克(10毫摩爾)N-(羧甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺鹽酸鹽(熔點157℃，產生氣體)懸浮於100毫升無水四氫呋喃中並與1.6毫升(12毫摩爾)三乙胺混合，然後在攪拌下逐滴加入2.4克三甲基乙醯氯溶於少量四氫呋喃的溶液(溫度升至35-40℃)。30分鐘後，混合物減壓濃縮，紅色的殘餘物溶於100毫升無水四氫呋喃中與1.6毫升三乙胺混合，將混合物在20℃加入到2-壬醇鈉的2-壬醇溶液(由30毫升2-壬醇和0.8克(20毫摩爾)氫化鈉製得)。1小時後，混合物減壓濃縮，殘餘物與二氯甲烷混合，用2N氯化銨水溶液萃取，有機相干燥後減壓濃縮，殘餘物(9克)用矽膠層析純化，洗脫劑為乙酸乙酯。得到1.1克無色油狀目的化合物，1H-NMR(DMSO):δ=3.95(雙峰，CH2-甘氨酸)。實施例17N-(((4-庚氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺
2.5克(10毫摩升)N-(羧甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺鹽酸鹽按實施例16的方法處理後在20℃加入到140毫升4-庚醇鈉的4-庚醇溶液(由140毫升4-庚醇和0.6克(25毫摩爾)鈉在超聲儀中製得)。30分鐘後，混合物在70至80℃加熱1小時，冷卻後減壓濃縮，殘餘物溶於水，用二氯甲烷萃取，有機相減壓濃縮並用油泵乾燥。油狀粗產品在約15小時後結晶，熔點75-78℃。實施例18N-(((3-戊氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺實施例19N-(((1-(順式-9-十八烯基)氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺實施例20N-(((1-(反式-3-己烯基)氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺實施例21N-(((1-(3-甲丁基)氧基)羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺實施例22N-((甲氧羰基)甲基)-3-甲氧基吡啶-2-醯胺
權利要求
1．分子式Ⅰ所示的化合物
其中R1,R2和R3為H，R4為(C1-C6)-烷基，A為-CH2-基團，其中一個氫原子可以被甲基替代，而B為-CO2G，其中G為醇GOH的基團，包括具有生理活性的鹽。
2．如權利要求1中所述的分子式Ⅰ所示的化合物，其中R1,R2和R3為H,R4為(C1-C6)-烷基，A為-CH2-基團，其中一個氫原子可以被甲基替代，而B為-CO2G，其中G為支鏈或非支鏈的或環狀(C1-C20)-烷基，或者為支鏈或非支鏈的或環狀(C2-C20)-鏈烯基，及相應的(C2-C20)-炔基，相應的(C4-C20)-烯炔基或視黃基，其中基團可包含一個或多個多價鍵，或者為苯烷基，上述基團優選包含一個或多個如下取代基羥基，滷素，氰基，三氟甲基，羧基，(C1-C12)-烷基，(C3-C8)-環烷基，(C5-C8)-環烯基，(C1-C12)-烷氧基，(C1-C12)-烷氧基-(C1-C12)-烷基，(C1-C12)-烷氧基-(C1-C12)-烷氧基，苯基-(C1-C4)-烷氧基，(C1-C8)-羥烷基，(C1-C12)-烷基羰氧基，(C3-C8)-環烷基羰氧基，苯甲酸基，苯基-(C1-C4)-烷基羰氧基，包括具有生理活性的鹽。
3．如權利要求1或2中所述的分子式Ⅰ所示的化合物，其中R1,R2和R3為H,R4為(C1-C4)-烷基，A為-CH2-基團，其中一個氫原子可以被甲基替代，而B為-CO2G，其中G為支鏈或非支鏈的或環狀脂肪族(C1-C18)-烷基，(C3-C8)-環烷基-(C1-C8)-烷基，支鏈或非支鏈的(C2-C18)-鏈烯基，例如，犛牛兒基，法呢基或視黃基，或相應的(C2-C18)-炔基，苄基，苯乙基，苯丙基或苯丁基，上述基團可包括如下取代基羥基，(C1-C4)-烷氧基，(C1-C6)-烷基羰氧基，(C3-C8)-環烷基羰氧基，苯甲酸基或苯基-(C1-C4)-烷基羰氧基，包括具有生理活性的鹽。
4．如權利要求1至3中所述的分子式Ⅰ所示的化合物，其中R1,R2和R3為H,R4為(C1-C4)-烷基，A為-CH2-基團，其中一個氫原子可以被甲基替代，而B為-CO2G，其中G為支鏈或非支鏈的或環狀脂肪族(C1-C18)-烷基，(C3-C8)-環烷基-(C1-C4)-烷基，支鏈或非支鏈的(C2-C18)-鏈烯基，苄基，苯乙基，苯丙基或苯丁基，包括具有生理活性的鹽。
5．如權利要求1至4中所述的分子式Ⅰ所示的化合物，其中R1,R2和R3為H,R4為甲基，A為-CH2-基團，其中一個氫原子可以被甲基替代，而B為-CO2G，其中G為支鏈或非支鏈的(C1-C18)-烷基或(C2-C8)-鏈烯基，包括具有生理活性的鹽。
6．如權利要求1至5中所述的分子式Ⅰ所示的化合物，其中R1,R2和R3為H,R4為甲基，A為-CH2-基團，而B為-CO2G，其中G為支鏈或非支鏈的(C1-C18)-烷基或(C2-C18)-鏈烯基，包括具有生理活性的鹽。
7．如權利要求1至6中所述的分子式Ⅰ所示的化合物，其中R1,R2和R3為H,R4為甲基，A為-CH2-基團B為-CO2G，其中G為線性的(C1-C18)-烷基，包括具有生理活性的鹽。
8．一種用於製備如權利要求1至7中所述的分子式Ⅰ所示的化合物的方法，其中A為-CH2-基團，其中一個氫原子可以被甲基取代，而B為CO2G，此方法包括ⅰ1.)分子式Ⅱ(R5=H)所示的吡啶-2-羧酸與分子式Ⅲ所示的氨基酯或它的鹽反應得到分子式Ⅰ所示的醯胺酯；或者ⅰ2.)分子式Ⅱ(R5=(C1-C16-烷基)所示的吡啶-2-羧酸酯在氨解條件下反應得到分子式Ⅰ所示的化合物；或者
ⅱ)分子式Ⅳ所示的化合物用醇GOH酯化，或者
ⅲ)分子式Ⅴ所示的化合物用R4X烷基化，其中X為離去基團，優選滷素，甲磺酸基，苯磺醯基等
9．如權利要求1至7中所述的分子式Ⅰ所示的化合物，用於在體內抑制脯氨醯-4-羥化酶。
10．如權利要求1至7中所述的分子式Ⅰ所示的化合物，用於抑制膠原蛋白的生物合成。
11．如權利要求1至7中所述的分子式Ⅰ所示的化合物，用於防止/減少在人體器官疾病(纖維變性疾病)中結締組織(膠原蛋白)的沉積。
12．如權利要求1至7中所述的分子式Ⅰ所示的化合物，用於纖維變性疾病。
13．如權利要求12中所述的分子式Ⅰ所示的化合物，用於肺部，肝臟，腎，心臟，眼部和皮膚的纖維變性疾病和動脈粥樣硬化。
14．如權利要求12和13中所述的分子式Ⅰ所示的化合物，用於局部和/或全身。
15．如權利要求14中所述的分子式Ⅰ所示的化合物，局部用於防止/減少術後人體產生的瘢痕。
16．如權利要求9至14中所述的分子式Ⅰ所示的化合物，局部用於皮膚結締組織增生(纖維樣變性)的病例中。
17．如權利要求9至14中所述的分子式Ⅰ所示的化合物，局部用於(吸入)肺部結締組織增生(纖維樣變性)的病例中。
18．如權利要求9至14中所述的分子式Ⅰ所示的化合物，局部用於眼部結締組織增生(纖維樣變性)的病例中。
19．如權利要求9至14中所述的分子式Ⅰ所示的化合物，局部用於青光眼術後的眼部處理。
20．如權利要求9至14中所述的分子式Ⅰ所示的化合物，局部用於放射或化療引起的纖維樣變性，尤其是應用於肺部纖維樣變性。
21．一種包含一種或多種如權利要求1至8中所述的分子式Ⅰ所示的化合物的藥物。
22．化合物在抑制脯氨醯-4-羥化酶和纖維變性疾病中的應用。
全文摘要
如分子式(Ⅰ)所示的3－烷氧基吡啶－2－醯胺酯,其中R
文檔編號C07D213/00GK1216981SQ96180274
公開日1999年5月19日 申請日期1996年4月30日 優先權日1996年4月30日
發明者K·維德曼, K－H·巴林哈斯, G·特斯查克, M·比克爾 申請人:赫徹斯特股份公司