注射用鹽酸多西環素的生產工藝的製作方法

2023-10-19 01:39:12

專利名稱：：注射用鹽酸多西環素的生產工藝的製作方法
技術領域：
：本發明涉及一種注射用鹽酸多西環素的生產工藝。
背景技術：
：多西環素(doxycycline)為廣譜抑菌劑，高濃度時具殺菌作用。許多立克次體屬、支原體屬、衣原體屬、非典型分枝桿菌屬、螺旋體也對本品敏感。本品對革蘭陽性菌作用優於革蘭陰性菌，但腸球菌屬對其耐藥。其他如放線菌屬、炭疽桿菌、單核細胞增多性李斯特菌、梭狀芽孢桿菌、奴卡菌屬、弧菌、布魯菌屬、彎曲桿菌、耶爾森菌對本品敏感。本品對淋病奈瑟菌具一定抗菌活性，但耐青黴素的淋病奈瑟菌對多西環素也耐藥。多年來由於四環素類的廣泛應用，臨床常見病原菌對本品耐藥現象嚴重，包括葡萄球菌等革蘭陽性菌及多數革蘭陰性桿菌。本品為消除四環素分子中不穩定部分後的產品；四環素遇酸，6位羥基與5a位氫脫水形成去水四環素(anhydrotetracyclme)失去抗菌活性。經修飾後對酸穩定併兼具優異的藥物動力學性能。本品與四環素類抗生素不同品種之間存在交叉耐藥。本類藥物進入菌體內發揮抑菌作用。在胞漿內，藥物與核糖體30S亞基的A位特異性結合，阻止氨基醯tRNA(亦稱氨醯tRNA)進入A位，阻礙肽鏈延長和蛋白質的合成。藥物尚可使細菌細胞膜通透性改變，導致胞內核苷酸及其他重要成分外漏，從而抑制細菌DNA的複製。高濃度時也具有殺菌作用。.本品口服吸收完全，約可吸收給藥量的90%以上，進食對本品吸收的影響小。單劑口服本品100mg後，血藥高峰濃度為1.82.9mg/L。吸收後廣泛分布於體內組織和體液，多西環素有較高的脂溶性，對組織穿透力較強，在胸導管淋巴液、腹水、腸組織、眼和前列腺組織中均有較高濃度，約為血藥濃度的60%75%，在膽汁中濃度可達同期血藥濃度的1020倍，表觀分布容積(Vd)為0.7L/kg。蛋白結合率為80%93%，血消除半衰期(11/2)為12223小時，腎功能減退者tw延長不明顯。本品部分在肝內代謝滅活，主要自腎小球濾過排洩，給藥後24小時內可排出約35%40%。腎功能損害患者應用本品時，藥物自胃腸道的排洩量增加，成為主要排洩途徑，因此本品是四環素類中為腎衰病人感染最安全的藥物之一，並對腸道菌群影響較小。血液或腹膜透析不能清除本品。多西環素為以發酵產生的土黴素鹼原料經氯化、脫水、氫化成鹽，置換而得，藥典中將從起始原料帶入、生產過程中氫化反應不完全、反應副產物等雜質，如雜質A-6-多西環素(6-epidoxycycline)、雜質B-美他黴素(甲烯土黴素metacycline)、雜質C-4-多西環素(4-epidoxycvcline)、雜質D-4、6-多西環素(4-epi-6-epi-doxycycline)、雜質E-土黴素(oxytetracycline)、雜質F-2-acetyl-2-decarbamoyldoxycycline等統稱之為有關物質，因其療效低、毒性大(其中6-多西環素又稱多西環素e-差向異構體毒性大)，藥典對其做限量規定。《中國藥典》(2005年版)、《英國藥典》(1998年版)、《美國藥典》(25版)、《歐洲藥典》(6版)對其原料和製劑中有關物質檢查均採用高效液相色譜法對其限量進行控制。
發明內容本發明的目的是提供一種注射用鹽酸多西環素的生產工藝，所製得的鹽酸多西環素純度高，副作用小，更適合於用於注射用鹽酸多西環素的原料。為達到上述目的，本發明所提供的技術方案是一種注射級鹽酸多西環素，由下述步驟製作而成(1)、在溶解罐加入3倍口服級鹽酸多西環素重量的2832。C的無菌無水甲醇，再加入鹽酸多西環素攪拌溶解，加入活性炭攪拌，並在30min內降溫到2327°C，靜置30min後用0.45pm濾膜過濾；(2)、混合液依次經過0.45iim鈦棒過濾器、0.22(im及0.(Hiim濾芯超濾除菌，過濾後送入無菌萬級區潔淨乾燥間結晶罐內；(3)、真空乾燥將混合液加熱到4852。C進行真空乾燥；(4)、往結晶罐加入3倍鹽酸多西環素重量的無菌無水乙醇，攪拌成混懸液，在25°C±2放置4小時轉晶；用輸液泵輸送到經清洗消毒的三合一無菌乾燥機中，再用鹽酸多西環素重量3倍的無菌無水乙醇洗滌二次後，採用4555。C之間的熱風乾燥1012小時，即得到注射級鹽酸多西環素。一種注射用鹽酸多西環素凍乾粉針劑，包括有重量份數比為115:380:300:2.9的注射級鹽酸多西環素、維生素C、甘露醇和焦亞硫酸鈉。注射用鹽酸多西環素凍乾粉針劑的生產工藝，包括以下步驟①、在室溫下，將注射用水加入到經溼熱滅菌的配液罐中，依次加入重量份數比為115:380:300:2.9的注射級鹽酸多西環素、維生素C、甘露醇和焦亞硫酸鈉，攪拌至完全溶解；②、稱取溶液重量0.05%的活性炭，加入攪拌中的溶液中，繼續攪拌脫色20分鐘，用0.45(am濾膜粗濾脫炭，0.22pm和0.01iam除菌和除熱源過濾，在無菌萬級區接收備用；③、凍幹藥品溫度為-28r，保持2.5小時；真空度小於30Pa，升溫，控制溫度低於-2(TC，保持2天；升溫，控制藥品溫度低於3(TC，維持3小時，通入經0.22pm濾芯除菌過濾的高純氮氣破真空，恢復至常壓，得到注射用鹽酸多西環素凍乾粉針劑。本發明具有的優點通過工藝過程的控制，使製得的注射級鹽酸多兩環素的毒性雜質3-多西環素和美他環素含量大幅度降低，優於《中國藥典》、《歐洲藥典》(6版)和《美國藥典》(25版)標準，有效控制本品的雜質含量，提高純度，提高療效和安全性，具有低刺激性、低過敏性、低不良反應的優點。具體實施例方式下面結合具體實施方式對本發明作進一步詳細說明，但本發明的內容不限於所舉的實施例。實施例1:一種注射用鹽酸多西環素凍乾粉針劑的生產工藝一、注射級鹽酸多西環素的製備1、處方tableseeoriginaldocumentpage51.1生產準備l丄l按無菌藥品生產的要求做好產前準備；1丄2用活性炭按無菌要求分別處理無水甲醇和無水乙醇；l丄3按要求組裝三合一過濾器，不鏽鋼濾板下安裝經溼熱滅菌的本品種專用無塵濾布，關緊所有閥門和螺栓。1.2配製1.2.1在溶解罐加入鹽酸多西環素原料重量3倍的30°C±2無菌無水甲醇，將鹽酸多西環素原料加入攪拌溶解，加0.2%的活性炭攪拌並在30min內降溫到25°C±2,靜置30min後用0.45um濾膜過濾；1.2.2將溶解罐內加有活性炭的混合溶液通過輸液泵經過已滅菌的管道，依次經過0.45微米鈦棒過濾器、0.22um及0.01微米濾芯超濾除菌過濾後送入無菌萬級區潔淨乾燥間結晶罐內；1.3真空乾燥1.3.1將結晶罐內經過除炭過濾、除菌過濾和超濾的鹽酸多西環素無水甲醇溶液通過熱水夾套加熱到50°C±2真空乾燥(開始啟動攪拌電機(控制變頻器數值為1520)緩慢攪拌，至藥液有結晶析出並粘稠時停止攪拌)；1.4結晶、晶體洗滌1.4.1在鹽酸多西環素結晶罐加入鹽酸多西環素原料重量3倍的無菌無水乙醇攪拌成混懸液，在25°C±2放置4小時轉晶，用輸液泵打倒經清洗消毒的三合一無菌乾燥機中，再用鹽酸多西環素重量3倍的無菌無水乙醇洗滌二次後，乾燥；1.4.2乾燥用經蒸汽加熱和除菌過濾的淨化壓縮熱空氣控制熱風進風溫度在4555'C之間，對精製後的注射級鹽酸多西環素進行千燥1012小時左右。1.5整粒1.5.1將收得的注射級鹽酸多西環素裝於經溼熱滅菌的不鏽鋼容器中，轉移至整粒混合間進行整粒。1.5.2整粒、包裝得注射級鹽酸多西環素，本品的各項檢驗指標均高於《中國藥典》、《歐洲藥典》(6版)和《美國藥典》(25版)，臨床療效顯著增加，不良反應和皮膚刺激因素大幅下降。見表一。檢測結果雜質A、雜質B、雜質C、雜質D表一tableseeoriginaldocumentpage7注雜質A:6-多西環素(6-印idoxycycline);雜質B:美他黴素(甲烯土黴素metacycline);雜質C:4-多西環素(4-印idoxycv.c丄ine);雜質D:4、6-多西環素(4-epi-6-epi-doxycycline);雜質E:土黴素(oxytetracycline);雜質F:2-acetyl-2-decarbamoyldoxycycline。二、注射用鹽酸多西環素凍乾粉針劑製備1、處方tableseeoriginaldocumentpage82、生產準備2.1按凍乾粉針生產要求做好生產前準備工作；3、配製3.1稱好配液所需的的注射用水，加入到經溼熱滅菌的配液罐中，開啟配液罐冷卻系統，降低注射用水溫度到常溫G0。C以下)。按處方量依次加入稱量好的注射級鹽酸多西環素、維生素C、甘露醇和焦亞硫酸鈉等原輔料。攪拌使完全溶解。3.2稱取溶液重量0.05%的活性炭(W/W)(己進行預處理)，溼潤後加入攪拌中的溶液中，繼續攪拌脫色20分鐘，用0.45pm濾膜粗濾脫炭，.22pm和O.Olpm除菌和除熱源過濾，在無菌萬級區接收備用。取濾液送質檢部檢測含量、內毒素、pH值等項目。4、灌裝半壓塞、進箱；5、凍幹5.1操作過程(1)預凍將擱板降至-4(TC以下，待品溫降至-28"後，保持2.5小時。(2)升華乾燥乾燥箱內的真空度達到30Pa以下時，啟動加熱系統，溫度控制在-2(TC以下，真空度控制在30Pa以下，升華乾燥。(3)再乾燥在乾燥階段溫度控制製品在3(TC以下，再乾燥時間為3小時。(4)凍乾結束後，使用經0.22pm濾芯除菌過濾的高純氮氣破真空，恢復至常壓後壓塞出箱。(5)出箱完畢後。6、出箱、軋蓋、燈檢、貼標、裝盒、裝箱、入庫。實施例2:—種注射用鹽酸多西環素凍乾粉針劑生產工藝一、注射級鹽酸多西環素的製備1、處方物料名稱投料比鹽酸多西環素1無水甲醇3無水乙醇61.1生產準備1.1.1按無菌藥品生產的要求做好產前準備；1丄2用活性炭按無菌要求分別處理無水甲醇和無水乙醇；l丄3按要求組裝三合一過濾器，不鏽鋼濾板下安裝經溼熱滅菌的本品種專用無塵濾布，關緊所有閥門和螺栓。1.2配製1.2.1在溶解罐加入鹽酸多西環素原料重量3倍的30°C±2無菌無水甲醇，將鹽酸多西環素原料加入攪拌溶解，加0.2%的活性炭攪拌並在30mm內降溫到25°C±2，靜置30mm後用0.45pm濾膜過濾；1.2.2將溶解罐內加有活性炭的混合溶液通過輸液泵經過已滅菌的管道，依次經過0.45微米ft棒過濾器、0.22pm及0.01微米濾芯超濾除菌過濾後送入無菌萬級區潔淨乾燥間結晶罐內；1.3真空乾燥1.3.1將結晶罐內經過除炭過濾、除菌過濾和超濾的鹽酸多西環素無水甲醇溶液通過熱水夾套加熱到50°C±2真空乾燥(開始啟動攪拌電機(控制變頻器數值為1520)緩慢攪拌，至藥液有結晶析出並粘稠時停止攪拌)；1.4結晶、晶體洗滌1.4.1在鹽酸多西環素結晶罐加入鹽酸多西環素原料重量3倍的無菌無水乙醇攪拌成混懸液，在25C°±2放置4小時轉晶，用輸液泵打倒經清洗消毒的三合一無菌乾燥機中，再用鹽酸多西環素重量3倍的無菌無水乙醇洗滌二次後，乾燥；91.4.2乾燥用經蒸汽加熱和除菌過濾的淨化壓縮熱空氣控制熱風進風溫度在4555'C之間，對精製後的注射級鹽酸多西環素進行乾燥1012小時左右。1.5整粒1.5.1將收得的注射級鹽酸多西環素裝於經溼熱滅菌的不鏽鋼容器中，轉移至整粒混合間進行整粒。1.5.2整粒、包裝得注射級鹽酸多西環素。二、注射用鹽酸多西環素凍千粉針劑的製備1、處方物料名稱投料量注射級鹽酸多西環素230g(相當於多兩環素200g)維生素c瑜甘露醇600g焦亞硫酸鈉5.8g2、生產準備2.1按凍乾粉針生產要求做好生產前準備工作；3、配製3.1稱好配液所需的的注射用水，加入到經溼熱滅菌的配液罐中，開啟配液罐冷卻系統，降低注射用水溫度到常溫G(TC以下)。按處方量依次加入稱量好的注射級鹽酸多西環素、維生素C、甘露醇等原輔料。攪拌使完全溶解。3.2稱取溶液重量0.05%的活性炭(W/W)(已進行預處理)，溼潤後加入攪拌中的溶液中，繼續攪拌脫色20分鐘，用0.45(am濾膜粗濾脫炭，.22pm和0.01pm除菌和除熱源過濾，在無菌萬級區接收備用。取濾液送質檢部檢測含量、內毒素、pH值等項目。4、灌裝半壓塞、進箱；5、凍幹5.1操作過程(l)預凍將擱板降至-4(TC以下，待品溫降至-28。C後，保持2.5小時。(2)升華乾燥乾燥箱內的真空度達到30Pa以下時，啟動加熱系統，溫度控制在-2(TC以下，真空度控制在30Pa以下，升華乾燥。(3)再乾燥在乾燥階段溫度控制製品在3(TC以下，再乾燥時間為3小時。(4)凍乾結束後，使用經0.22(am濾芯除菌過濾的高純氮氣破真空，恢復至常壓後壓塞出箱。(5)出箱完畢後。6、出箱、軋蓋、燈檢、貼標、裝盒、裝箱、入庫。與同類品種的優勢該藥片劑於70年代投入世界抗生素市場。至今已有膠囊、片劑、注射劑等多種劑型。但由於口服生物利用度低，注射疼痛等原因，直接影響了多西環素的臨床使用。本發明克服了口服生物利用度低，注射疼痛等不良反應，具有吸收快的優點。注射用鹽酸多西環素凍乾粉針劑中各成分的作用如下1、鹽酸多西環素四環素類抗生素，為廣譜抑菌劑，高濃度時具殺菌作用。許多立克次體屬、支原體屬、衣原體屬、非典型分枝桿菌屬、螺旋體也對本品敏感。本品對革蘭陽性菌作用優於革蘭陰性菌，但腸球菌屬對其耐藥。其他如放線菌屬、炭疽桿菌、單核細胞增多性李斯特菌、梭狀芽孢桿菌、奴卡菌屬、弧菌、布魯菌屬、彎曲桿菌、耶爾森菌對本品敏感。本品對淋病奈瑟菌具一定抗菌活性，但耐青黴素的淋病奈瑟菌對多西環素也耐藥。多年來由於四環素類的廣泛應用,臨床常見病原菌對本品耐藥現象嚴重，包括葡萄球菌等革蘭陽性菌及多數革蘭陰性桿菌。本品與四環素類抗生素不同品種之間存在交叉耐藥。本品作用機制為藥物能特異性與細菌核糖體30S亞基的A位置結合，抑制肽鏈的增長和影響細菌蛋白質的合成。動物試驗證實本品有致畸性。體外試驗表明本品在一定濃度時有致突變的可能。2、維生素C:為凍幹生產常用的臨床可接受的骨架劑、抗氧劑，並調節pH值。3、甘露醇為凍幹生產常用的，臨床可接受的骨架劑。4、焦亞硫酸鈉為注射劑生產常用的，臨床可接受的抗氧劑。注射用鹽酸多西環素的藥理分析適應症敏感菌引起的呼吸系統感染、老年慢性支氣管炎、肺炎、麻疹肺炎、泌尿系統感染、生殖系統感染、膽道感染等。對腎功能不良患者的腎外感染也可使用。對敗血症、皮膚軟組織感染、痤瘡、布氏桿菌病、沙眼及淋病也有效。也可用於青黴素過敏的病人。過敏性、溶血性和局部刺激性試驗注射用鹽酸多西環素過敏性試驗1試驗摘要觀察注射用鹽酸多西環素靜脈注射給藥對豚鼠是否具有過敏作用，結果表明在本試驗條件下，注射用鹽酸多西環素對受試動物無致敏作用。2目的觀察注射用鹽酸多西環素靜脈注射給藥有無致過敏作用。3試驗材料3.1受試藥物注射用鹽酸多西環素，規格O.lg/支，由海口奇力製藥有限公司提供，批號011023。試驗時取鹽酸多西環素1支，先5ml無菌注射用水溶解，然後立即加氯化鈉注射液，至125ml，混勻。注射用水，購自建聯藥店，批號200004121.氯化鈉注射液，濟南三九益民製藥有限責任公司，批號2001082512-5-1。卵白蛋白，由聯星生物有限公司提供，S!gma公司進口分裝。試驗時以氯化鈉注射液配置成0.4%濃度。3.2動物白色豚鼠，由濟南三九益民製藥有限責任公司提供，合格證號魯動質字200001012，購進後進行兩周預飼養。飼養條件用不鏽鋼籠具詞養，6隻/籠，自由飲水，給予顆粒飼料，室溫23251:，溼度60%左右。用於試驗體重300g左右，雌、雄兼用。3.3試驗方法1、取健康豚鼠18隻，稱重，依照體重、性別隨機分為三組，每組6隻，雌雄各半。分別為氯化鈉注射液陰性對照組、注射用鹽酸多西環素組及0.4%卵白蛋白陽性對照組。2、受試動物致敏按無菌操作隔日分別腹腔注射氯化鈉注射液、0.8mg/ml注射用鹽酸多西環素溶液、0.4%卵白蛋白，0.5ml/只，共三次致敏。3、攻擊共進行兩次攻擊。將各組動物隨機分為2批，每批3隻，一批於首次致敏後14天靜脈注射受試品lml/只攻擊，另一批於首次致敏後第21天靜脈注射lml/只攻擊。3.4觀察指標攻擊給藥後30min內觀察動物有無咳嗽、抓鼻、煩躁、豎毛、痙攣、呼吸困難、休克、大小便失禁及死亡等情況，並按表l所列標準評分。表l.全身過敏性反應評分標準評分體徵0無明顯反應1輕微抓鼻、顫抖或梳毛1出現咳嗽，多次抓鼻、顫抖或梳毛1多次或連續咳嗽，伴有呼吸困難或痙攣、抽搐1痙攣、抽搐、大小便失禁、休剋死亡結果判定評分》2使，為過敏試驗陽性。3.5試驗結果0.8mg/ml注射用鹽酸多西環素溶液和氯化鈉注射液的兩次攻擊試驗結果均為陰性，未出現咳嗽、抓鼻、煩躁、豎毛、痙攣、呼吸困難、休克、大小便失禁及死亡等過敏反應。二0.4%卵白蛋白組兩次注射後，短時間內均出現咳嗽、抓鼻、煩躁、豎毛、痙攣、呼吸困難、休克、大小便失禁及死亡等過13敏反應。試驗結果參見表2。表2.注射用鹽酸多西環素過敏試驗結果tableseeoriginaldocumentpage144、試驗結論本試驗結果表明在木試驗條件下，注射用鹽酸多西環素溶液以0.8mg/ml靜脈給藥，對豚鼠無致過敏作用。注射用鹽酸多西環素溶血性試驗1試驗摘要觀察注射用鹽酸多西環素對家兔紅細胞的溶血作用，結果表明注射用鹽酸多西環素對家兔紅細胞無明顯體外溶血及致凝集作用。2試驗目的觀察注射用鹽酸多西環素對家兔紅細胞有無溶血和凝集作用。3試驗材料3.1受試藥物注射用鹽酸多西環素，規格O.lg/支，由海口奇力製藥有限公司提供，批號011023試驗時取鹽酸多西環素1支，先5ml無菌注射用水溶解，然後立即加氯化鈉注射液，至125ml，混勻。注射用水，購自建聯藥店，批號200004121。氯化鈉注射液，濟南三九益民製藥有限公司，批號2001082512-5-1。3.2動物紐西蘭家兔，由濟南三九益民製藥有限公司提供，合格證號魯動質字200001010，購進後進行兩周預飼養。兔飼料濟南康大飼料有限公司與山東省試驗動物中心聯合生產，許可證號魯飼準證字364號。飼養條件用金屬兔籠單籠飼養，自由飲水，給予顆粒兔飼料，室溫2325°C，溼度60%左右。試驗動物環境設施合格證號魯動環字200001012.3.3儀器LXJ—II型離心沉澱機上海醫用分析儀器廠生產HH—W21—600型恆溫水浴鍋上海醫用恆溫設備廠生產。4試驗方法2%兔紅細胞混懸液的製備取家兔一隻，雄性，體重2.25kg，心臟取血約20ml，置燒杯中用玻璃棒不停攪拌去除纖維蛋白，然後取10ml等量移入2支10ml刻度離心管中(5m1/管)，各加入氯化鈉注射液5ml，混勻後離心5分鐘(2500r/min)，去除上清液，再加入氯化鈉注射液5ml混勻離心，反覆洗滌，至上清液無色透明。將所得紅細胞用氯化鈉注射液稀釋成2%(V/V)的混懸液備用。操作步驟取試管7支，按表3分別加入不等量的注射用鹽酸多西環素溶液，第6號試管不加受試品，作為空白對照，第7管仍不加受試品，用蒸餾水代替氯化鈉注射液，作為溶血的陽性對照。將各管輕輕搖勻，在37。C水浴中保溫4小時，觀察各管有無溶血現象。試驗重複一次。表3.體外溶血試驗加樣表管號12345672%紅細胞懸液(ml)2.52.52.52.52.52.52.5受試品(ml)0.10.20.30.40.5——氯化鈉注射液(m)2.42.32.22.12.02.5一15formulaseeoriginaldocumentpage16~~5觀察指標與結果判斷分別於保溫15min、30min、45min、lh、2h、3h和4h肉眼觀察各管溶血情況，用顯微鏡觀察紅細胞是否破裂。如第3號試管在2小時內不引起溶血者即可作注射用。結果判斷標準參見表4.表4.紅細胞溶血、凝集判斷標準全溶血溶液澄明紅色，管底無細胞殘留；部分溶血溶液澄明紅色或棕色，管底乂少呈紅細胞殘留;無溶血紅細胞全部下沉，上層液體無色澄明；凝集紅細胞聚集成塊，振搖後不能分散。6實驗結果第7號試管加入蒸餾水後混勻，出現全溶血顯現。加入注射用鹽酸多西環素溶液後混勻並保溫，15min，l-6管又少量紅細胞下沉；30min，l-6管更多紅細胞下沉，有少量上清液分層；至1小時，1-6管紅細胞繼續下沉，分別上清液無色澄明，部分紅細胞沉於管底，無紅細胞凝集現象；2小時，l-6管分層上清液無色澄明，部分紅細胞沉於管底，無紅細胞凝集現象；3小時，l-6管分層上清液物色澄明，大量紅細胞沉-T貸底，無紅細胞凝集現象；4小時，l-6管溶液紅細胞全部下沉，上層液體無色澄明，經振搖後可見紅細胞均勻散開，證明無紅細胞凝聚(見表5)。顯微鏡檢紅細胞外形正常。表5.注射用鹽酸多西環素溶血試驗結果觀察時間試管編號(h)12345670.25一—一—一—+0.5——————十0.75一———一—+1一一————+2一———一—+3——————+4——————+注一無溶血+全溶血試驗同法重複一次，結果相同。7試驗結論在本試驗條件下，注射用鹽酸多西環素對家兔紅細胞無明顯體外溶血及致凝集作用。注射用鹽酸多西環素血管剌激試驗1試驗摘要通過試驗觀察注射用鹽酸多西環素對家兔耳緣靜脈血管的刺激性，結果表明注射用鹽酸多西環素以16mg/kg的劑量每天靜脈滴注,連續7天,對家兔耳緣靜脈無明顯刺激作用。2試驗目的觀察注射用鹽酸多西環素耳緣靜脈多次給藥後有無血管刺激作用。3試驗材料3.1受試藥物注射用鹽酸多西環素，規格:0.1/支，由海口奇力製藥有限公司提供，批號011023。試驗時取鹽酸多西環素1支，先5ml無菌注射用水溶解，然後立即加氯化鈉注射液，至125ml，混勻。注射用水，購自建聯藥店，批號200004121。氯化鈉注射液，由濟南三九益民製藥有限責任公司生產，批號2001082512-5-1。3.2動物紐西蘭家兔，由濟南三九益民製藥有限責任公司提供，合格證號魯動質字200001010，購進後進行兩周預飼養。兔詞養濟南康大飼養有限公司與山東省試驗動物中心聯合生產，許可證號魯詞準證字364號。飼養條件用金屬兔籠單龐飼養，自由飲水，給予顆粒兔飼料，室溫2325°C，溼度60%左右。試驗動物環境設施合格證號魯動環字200001012。4儀器WZ-50G單道微量注射泵，浙江醫科大學醫學儀器廠生產。5試驗方法取健康、耳緣無損傷家兔6隻，體重2.0-2.3kg，隨機分為兩組,每組3隻，雌、雄兼用(雄2，雌l);注射用鹽酸多西環素組及氯化鈉注射液對照組，分別耳緣靜脈滴注注射用鹽酸多西環素溶液和氯化鈉注射液，注射用鹽酸多西環素給藥量為16mg/kg，給藥體積為20ml/kg，給藥速度為60ml/hr。每天一次，連續7天，對照組給予等量氯化鈉注射液。6觀察指標給藥後，肉眼觀察給藥局部的靜脈血管及周圍組織的紅腫情況。末次給藥後24小時將動物放血處死，分別於注射部位近心端1.5cm到3cm處剪取耳緣，用10%甲醛固定，常規組織切片，觀察有無血栓形成、內皮損傷及其它病理變化。7試驗結果與氯化鈉注射液組兔耳血管周圍組織比較，注射用鹽酸多西環素每天一次，連續7天耳緣靜滴注射用鹽酸多西環素16mg/kg，末次給藥24小時後觀察，兔耳血管紋路均清晰，周圍組織無水腫。組織切片檢查，兔耳血管邊緣清晰，耳血管壁規則完整，內壁光滑，周圍組織無水腫、炎症等病理變化。表明在本實驗條件下，注射用鹽酸多西環素按16mg/kg家兔耳緣靜脈滴注,給藥速度為60ml/hr，對血管無明顯刺激作用。8試驗結論注射用鹽酸多西環素按0.8mg/ml濃度，多次家兔耳緣靜脈給藥(16mg/kg/次)，對家兔無明顯血管刺激作用，亦末引起血管周圍組織明顯病變。穩定性研究的試驗資料本試驗重點考察了樣品的性狀、酸度、溶液的澄清度與顏色、澄明度、有關物質和含量，其中有關物質與含量測定採用高效液相色譜法。18一、試驗儀器及方法島津高效液相LC-20ALC-Operation島津UV-2401PC紫外分光光度計SevenMultipH計(S40)二、試驗及結果(一)影響岡素試驗1、光照試驗儀器ST—80C照度計條件45001X將011029批樣品置4500X日光燈下，分別於5、10天取樣測定有關指標，結果見表l。2、溫試驗儀器AXGZ—10型K用千燥箱將011029批樣品置6(TC條件下，分別地5、10天取要測定各項指標，結果見表l。tableseeoriginaldocumentpage19(二)加速試驗儀器WS/08-01型調溫調溼箱取批號為01129、011102、011104批樣品，置溫度40。C士2。C、相對溼度75%±5%條件下，分別於l、2、3、6月取樣測定各項指標，結果見表2。表2注射用鹽酸多西環素加速試驗結果tableseeoriginaldocumentpage19190110291淡黃色疏鬆塊狀物2.7澄清，淺於黃綠色8號00.111.071.240.09100.22淡黃色疏鬆塊狀物2.8澄清，淺於黃綠色8號00.121.]31.330.0799.33淡黃褐色塊狀物2.8澄清，淺於黃綠色8號00.121.31.310.0699.66淡褐色塊狀物2.7澄清,淺於黃綠色8號00.131.121.310.0498.90淡黃色疏鬆塊狀物2.4澄清，淺於黃綠色8號00.101.071.250.06101.40111021淡黃色疏鬆塊狀物2.4澄清，淺於黃綠色8號00.101.041.220.10101.0淡黃色疏鬆塊狀物2.4澄清，淺於黃綠色8號0011U21.310.07101.23淡黃祝色塊狀物2.3澄潔,淺於貞綠色s00.111.111.2S.06io.；6淡禍色塊狀物2.3澄潔，淺於黃綠色S00.12uo1.30.50淡貞色疏鬆塊狀物2-6澄潔，戱實愁0.111.031.21■04102.50111041淡黃色疏鬆塊狀物2.6澄清，淺於黃綠色8號00.121101.290.06101.9淡黃色疏鬆塊狀物2.6澄清，淺於黃綠色S號00.121.111.370.07102.5淡黃褐色塊狀物2.6澄清，淺於黃綠色s號00.121.101.290.07101.76淡褐色塊狀物2.5澄清，淺於黃綠色S號00.121.121.300.07102.2(三)長期試驗儀器WS/08-01型調溫調溼箱取批號為011029、011102、011104批樣品，置溫度25。C土2。C、相對溼度60%±10%條件下，分別於3、6、9、12月取樣測定各項指標，結果見表3。表3注射用鹽酸多西環素長期試驗結果批號時間天性狀酸度PH值溶液的登淸度與顏色澄明度不合格率％土黴素(%)美他環素(%)P-多西環素％W%^望(%)0淡黃色疏鬆塊狀物2.8澄淸，淺於黃綠色8號00,101.071.220.0699.20110293淡黃色疏鬆塊狀物2.8澄清，淺於貧綠色S號0(U2i.oyO.(M9義16淡黃色疏鬆塊狀物2.8澄淸，淺於黃綠色8號00.111.101.270.0799—59淡黃禍色塊狀物2.6澄清，淺於黃綠色8號00.121.051.260.0699.912淡禍色塊狀物2.7澄清，淺於黃綠色8兮00.131.171.340.0699.50淡黃色疏鬆塊狀物2.4澄清，淺於黃綠色8兮00.101.071.250.06101.4011]02淡黃色疏鬆塊狀物2.3澄清，淺於黃綠色8號00.121.071.260.04101.16淡黃色疏鬆塊狀物2.4澄潔，淺於黃綠色8號0O.U1.081.250.06102.19淡黃褐色塊狀物2.4澄淸，淺於黃綠色s號00.111.061.260.06101.512淡褐色塊狀物2.3澄清，淺於黃綠色8號00.121.081.310.06100.70淡黃色疏鬆塊狀物2.6澄清，淺亍黃綠色8號00.111.031.210.04102.5Ol腦3淡黃色疏鬆塊狀物2.5澄清，淺於黃綠色8號00.121.021.200.06]02.7206淡黃色疏鬆塊狀物2.6澄清，淺於黃綠色8300.121.061.200.06102.59淡黃褐色塊狀物2.6澄清，淺於黃綠色8號00.101.080.05102.912淡褐色塊狀物2.5澄清，淺於黃綠色8號00.121.171.240.06102.6二、結論1、影響因素試驗本品在高溫條件下，外觀顏色完全變成淺褐色，美他環素明顯增加；光照條件下，未見明顯變化。本品應在密閉陰涼處保存。2、加速試驗對本品在4(TC，RH75。/。條件下加速試驗6個月，有關物質略有增加，其他有關的各項指標無明顯變化。3、長期試驗對本品25"C，RH60。/。條件下加速試驗12個月，有關物質略有增加，其他有關的各項指標無明顯變化，該項工作仍在進行中。臨床試驗結果注射用鹽酸多兩環素屬半合成四環類抗生素，其抗菌原理通過阻斷細菌蛋白質合成的各個環節、抑制細菌的複製,達到抗菌的效果。與網環素相比，其具有抗菌作用較強，耐藥株少，半衰期長，不良反應少等特點。體內、外試驗均表明它對革蘭陽性需氧菌中包括金黃色葡萄球菌、鏈球菌和革蘭陰性需氧菌中的淋病奈瑟氏菌、嗜麥芽窄食單胞菌和部分革蘭陰性桿菌有良好的抗菌作用。國外d用於臨床，主要用於呼吸系統感染、泌尿系統感染、生殖系統感染和膽道感染等。該藥片劑於70年代投入世界抗生素市場。至今已有膠囊、片劑、口服液等多種劑型。國產注射用鹽酸多西環素由海口奇力製藥有限公司開發研製開發成功，為評價該藥治療急性細菌感染的臨床療效與安全性，本研究以注射用阿奇黴素為陽性對照藥，由重慶醫科大學附屬第一醫院、海南省人民醫院、海南醫學院附屬醫院、海口市人民醫院、海南省農墾總局醫院5家醫院進行了多中心隨機對照臨床試驗。臨床療效研究結果表明，ITT集試驗組與對照組的臨床痊癒率分別為77.52%與66.67%;臨床有效率分別為96.90%與94.44%。PP集試驗組與對照組的臨床痊癒率分別為78.74%與67.74%;臨床有效率分別為97.64%與94.35%。不同細菌感染的臨床療效結果表明，試驗組痊癒率優於對照組，經統計學分析，差異有顯著性；二組有效率差異無顯著性。對革蘭陽性菌感染患者的痊癒率，試驗組優於對照組，經統計學分析，差異有顯著性；二組有效率差異無顯著性。二組對革蘭陰性菌、支原體感染的痊癒率和有效率經統計學分析差異無顯著性。對支原體感染患者的臨床療效結果顯示，試驗組共分離支原體15株，經治療後感染患者的痊癒率86.67%，有效率100%;對照組共分離支原體27株，經治療後感染患者的痊癒率74.07%，有效率92.59%。經統計學分析差異無顯著性。細菌學療效結果顯示，ITT集試驗組與對照組的細菌清除率分別為95.45%與90.57%，PP集兩組的細菌清除率分別為95.45%與90.48%，兩組比較差異均無統計學意義。對臨床分離的致病菌進行紙片敏試測定及最低抑菌濃度測定，結果表明多西環素對多種需氧革蘭陽性、陰性菌有較強的抗菌活性，對溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、糞腸球菌屬等革蘭陽性菌有較好的抗菌活性,對大腸埃希菌屬、嗜血桿菌、克雷伯菌屬、及部分腸桿菌屬科細菌也有良好的抗菌活性。安全性評價結果表明，試驗組與對照組的臨床不良反應發生率分別為17.05%與13.49%(P=0.4882)。兩組不良事件均以局部刺激及消化道反應為多見，可能與輸液濃度較高和輸液速度較快有關，但患者均可耐受，勿需特殊處理也不影響療程完成。極少患者可有皮疹及肝酶學升高，治療過程中應予注意。綜上所述，注射用鹽酸多西環素治療急性細菌性感染療效確切，不良反應少，安全性較好，是一安全有效的抗菌藥物，適於敏感菌所致的急、慢性輕、中度呼吸道、泌尿道細菌及支原體、衣原體感染患者使用。臨床試驗結果表明以注射用阿奇黴素為對照藥，進行隨機、雙盲、平行、對照多中心臨床試驗結果顯示，由海口奇力製藥有限公司研製的注射用鹽酸多西環素治療呼吸系統和泌尿系統的急、慢性輕、中度細菌、支原體、衣原體感染疾病是安全的、有效的，在臨床療效、細菌清除率、不良反應發生率等方面效果相當，對敏感細菌感染療效確切，部分指標上(革蘭陽性菌22感染痊癒率)優與阿奇黴素，不良反應低，安全性高，病人依從性好，表明注射用鹽酸多西環素是一安全有效的抗菌藥物，適於敏感菌所致的急、慢性輕、中度呼吸道、泌尿道細菌及支原體、衣原體感染患者使用。權利要求1、一種注射級鹽酸多西環素，由下述步驟製作而成(1)、在溶解罐加入3倍口服級鹽酸多西環素重量的28～32℃的無菌無水甲醇，再加入鹽酸多西環素攪拌溶解，加入活性炭攪拌，並在30min內降溫到23～27℃，靜置30min後用0.45μm濾膜過濾；(2)、混合液依次經過0.45μm鈦棒過濾器、0.22μm及0.01μm濾芯超濾除菌，過濾後送入無菌萬級區潔淨乾燥間結晶罐內；(3)、真空乾燥將混合液加熱到48～52℃進行真空乾燥；(4)、往結晶罐加入3倍鹽酸多西環素重量的無菌無水乙醇，攪拌成混懸液，在25℃±2放置4小時轉晶；用輸液泵輸送到經清洗消毒的三合一無菌乾燥機中，再用鹽酸多西環素重量3倍的無菌無水乙醇洗滌二次後，採用45～55℃之間的熱風乾燥10～12小時，即得到注射級鹽酸多西環素。2、一種注射用鹽酸多西環素凍乾粉針劑，其特徵在於包括有重量份數比為115:380:300:2.9的注射級鹽酸多西環素、維生素C、甘露醇和焦亞硫酸鈉。3、如權利要求2所述的注射用鹽酸多西環素凍乾粉針劑的生產工藝，包括以下步驟①、在室溫下，將注射用水加入到經溼熱滅菌的配液罐中，依次加入重量份數比為115:380:300:2.9的注射級鹽酸多西環素、維生素C、甘露醇和焦亞硫酸鈉，攪拌至完全溶解；②、稱取溶液重量0.05%的活性炭，加入攪拌中的溶液中，繼續攪拌脫色20分鐘，用0.45pm濾膜粗濾脫炭，0.22|im和O.Ol)im除菌和除熱源過濾，在無菌萬級區接收備用；◎、凍幹藥品溫度為-28°C，保持2.5小時；真空度小於30Pa，升溫，控制溫度低於-2(TC，保持2天；升溫，控制藥品溫度低於3(TC，維持3小時，通入經0.22pm濾芯除菌過濾的高純氮氣破真空，恢復至常壓，得到注射用鹽酸多西環素凍乾粉針劑。全文摘要本發明公開了一種注射用鹽酸多西環素凍乾粉針劑的製作工藝。本發明生產製得的注射用鹽酸多西環素，降低了毒性物質β-多西環素和美他環素含量，用本發明生產的注射級鹽酸多西環素生產的注射用鹽酸多西環素，具有低刺激性低過敏性低不良反應的特點。本發明生產的注射級鹽酸多西環素可用於生產供靜脈注射用、注射用鹽酸多西環素粉針、凍乾粉針、注射液等供體內注射給藥的藥物製劑，具有低刺激性、低過敏性、低不良反應等優點。文檔編號C07C237/26GK101555215SQ20091013866公開日2009年10月14日申請日期2009年5月12日優先權日2009年5月12日發明者許禮貴,韓宇東申請人:海口奇力製藥股份有限公司