一種pH值敏感的薑黃素載藥膠束（單鏈）及前體的製備方法
2023-10-23 11:14:52 1
一種pH值敏感的薑黃素載藥膠束（單鏈）及前體的製備方法
【專利摘要】本發明涉及一種pH值敏感的薑黃素載藥膠束（單鏈）及前體的製備方法。一種pH酸敏感的薑黃素膠束（單鏈）前體，化學式為：MPEG-PLA-N=Cur。反應原料為：經過修飾後末端含有肼基的聚乙二醇單甲醚-聚乳酸和單端酚羥基羰基化的薑黃素，將上述所述兩種原料按適當的投料比在一定的溶劑下溶解，並發生鍵合反應，形成pH酸敏感的薑黃素膠束單體。本發明相對於現有技術的優點在於：在本發明中，通過在傳統的二嵌段聚合物（MPEG-PLA）結構中引入腙鍵，再與疏水性藥物薑黃素鍵合，所形成的兩親性聚合物在水溶液中自組裝形成膠束。
【專利說明】一種pH值敏感的薑黃素載藥膠束(單鏈)及前體的製備方法
【技術領域】:
[0001]本發明涉及一種載藥載藥膠束(單鏈)及前體的製備,進一步涉及一種pH值敏感的薑黃素載藥載藥膠束(單鏈)及前體的製備方法。
【背景技術】:
[0002]薑黃素(Curcumin)是從草本植物薑黃的根莖中提取的疏水性多酚類化合物，已被證明具有抗炎、抗氧化、降血脂、抗腫瘤等廣泛的藥理活性，同時臨床研究發現，高劑量8克/天口服薑黃素無毒副作用，因此其有效性和安全性使得薑黃素成為治療和預防各種疾病的潛在藥物。尤其是抗腫瘤的研究中，由於腫瘤已成為嚴重威脅、危害人類生命的常見病，而在腫瘤治療過程中又通常面臨毒性很大、副作用多等各種問題，所以對於腫瘤的治療早已成為研究的重點。研究表明薑黃素可通過細胞、蛋白質、基因、信號傳導通路等多種途徑作用於腫瘤細胞，影響腫瘤的發生和發展，因此，薑黃素在抗癌藥物中備受關注。然而研究發現薑黃素難溶於水(1 μ g/mL)，穩定性差，容易被氧化，同時在體內吸收差、代謝快等因素使其在體內的生物利用度很低，限制了其在臨床上尤其是腫瘤治療上的應用。
[0003]為了解決上述問題，國內外藥劑工作者對其劑型做了大量研究與開發，通過改善劑型增加溶解性、改善體內吸收狀況，延長體內循環時間等來提高生物利用度。近年來膠束、脂質體、微球與微囊、前藥、樹枝狀大分子等新劑型的湧現為薑黃素劑型的改造提供了深厚的基礎。例如:採用兩親性共聚物聚乙二醇單甲醚-聚己內酯(MPEG-PCL)為載體製備的薑黃素載藥膠束，粒徑為27.3nm左右，均勻分布，薑黃素分子分散在疏水的PCL核內，與PCL通過疏水作用等方式，增加了薑黃素的溶解性，延長了薑黃素在體內的滯留時間，提高了其生物利用度；與此同時薑黃素的載藥膠束比游離的薑黃素顯示出更強的抑制腫瘤血管生長活性以及抗結腸癌活性。但是，無論是膠束還是脂質體等劑型都具有局限性，如本身為熱力學不穩定系統，在人體環境易出現突釋現象，對正常細胞和腫瘤細胞作用沒有選擇性等問題。
[0004]為了減少對正常細胞的不良反應，從而發揮藥物的最大療效，國內外學者一直致力於使藥物導向病灶部位釋放藥物，增加靶部位的藥物濃度，減少對在正常細胞的毒性作用。環境敏感型聚合物是能夠感知外界環境的物理或化學刺激的智能型聚合物，依據腫瘤細胞的微環境與正常組織的區別，溫度、PH值、氧化還原等智能型環境敏感的聚合物引起了人們的普遍關注和研究。例如:腫瘤細胞內的穀胱甘肽的含量是正常細胞組織內的至少四倍，有研究表明MPEG-SS-PBLG聚合物膠束中含有還原敏感的二硫鍵，當載體到達腫瘤細胞內時，其強還原性的環境將使膠束結構破壞，使藥物快速釋放；還有pH-敏感的聚合物納米粒，脂質體，膠束及樹枝狀聚合物的研究，由於腫瘤細胞中早期內涵體的PH值在6.0左右，而晚期內涵體的PH值一般在5.0左右，溶酶體的pH值更低(4.0~5.0)，使藥物在腫瘤細胞內酸性條件下較正常細胞(pH=7.4)更易釋藥，提高了靶細胞部位的藥物濃度，達到更好的殺傷腫瘤細胞的作用，同時，也為環境敏感聚合物在腫瘤治療的研究中提供新的思路。
【發明內容】
:
[0005]本發明的目的是提供一種pH值敏感的薑黃素載藥載藥膠束(單鏈)及前體的合成設計方法。
[0006]一種pH值敏感的薑黃素載藥膠束(單鏈)前體，化學式為:MPEG-PLA_N=Cur。分子
式如下所示:
[0007]
【權利要求】
1.一種pH值敏感的薑黃素載藥膠束(單鏈)前體，其特徵在於，化學式為:MPEG-PLA-N=Cur。分子式如下所示:
2.權利要求1所述一種PH值敏感的薑黃素載藥膠束(單鏈)前體的製備方法，其特徵在於: 反應原料為:經過修飾後末端含有肼基的聚乙二醇單甲醚-聚乳酸(mpeg-pla-nhnh2)和單端酹羥基羰基化的薑黃素(Single-Cur), 將上述所述兩種原料按適當的投料比在一定的溶劑下溶解，並發生鍵合反應，形成PH值敏感的薑黃素載藥膠束(單鏈)前體；反應方程式如下:
3.權利要求2所述一種pH值敏感的薑黃素載藥膠束(單鏈)前體的製備方法，其特徵在於: 稱量經過修飾後末端含有肼基的聚乙二醇單甲醚-聚乳酸mpeg-pla-nhnh2，單端酚羥基羰基化的薑黃素Single-Cur按照摩爾比1:1-2置於容器中； 加入以下任何一種溶劑為:N，N-二甲基甲醯胺(DMF)、四氫呋喃(THF)、二甲基亞碸(DMSO)N, N-二甲基甲醯胺(DMF);氮氣保護，室溫下攪拌避光反應24h以上； 反應產物加入截留分子量3500的透析袋中，pH=5-6或pH=7的蒸懼水為介質透析24h,透析袋中溶液10000r/min離心15min,取上清液,用0.45 μ m的微孔濾膜過濾,濾液冷凍乾燥，產物即 MPEG-PLA-N=Cur。
4.根據權利要求2所述一種pH值敏感的薑黃素載藥膠束(單鏈)前體的製備方法，其特徵在於，所述原料末端含有肼基的聚乙二醇單甲醚-聚乳酸(mpeg-pla-nhnh2)的製備方法:以水合肼(NH2NH2.H2O)對羰基化的聚乙二醇-聚乳酸(MPEG-PLA-NPC)進行修飾，使末端鍵合有肼基。如下所示:
5.根據權利要求4所述的一種pH值敏感的薑黃素載藥膠束(單鏈)前體的製備方法，其特徵在於: 稱量末端含有肼基的聚乙二醇單甲醚-聚乳酸(MPEG-PLA-NHNH2)於容器中，加入以下任何一種溶劑:N，N-二甲基甲醯胺(DMF)、四氫呋喃(THF)、二甲基亞碸(DMSO)；抽真空並氮氣保護，取水合肼(NH2NH2.Η20)逐滴緩慢加入上述溶液25°C攪拌反應12h ；反應產物過濾除去不溶物，旋蒸濃縮，待溶液恢復至室溫後，邊攪拌邊緩慢滴加到冰乙醚中沉澱，抽濾，產物反覆沉澱三次，真空乾燥24h。
6.根據權利要求4所述的一種pH值敏感的薑黃素載藥膠束(單鏈)前體的製備方法，其特徵在於，所述原料羰基化的聚乙二醇-聚乳酸(MPEG-PLA-NPC)的製備方法:以對硝基苯基氯甲酸酯(NPC)對聚乙二醇單甲醚-聚乳酸MPEG-PLA進行修飾，使其末端羥基羰基化，形成MPEG-PLA-NPC。如下所示:
7.根據權利要求1或2所述一種pH值敏感的薑黃素載藥膠束(單鏈)前體的製備方法，其特徵在於，所述單端酹羥基羰基化的薑黃素(Single-Cur)的製備方法: 乙醯丙酸與薑黃素的摩爾比為1:1 ;首先將乙醯丙酸置於容器中，加入DCM溶解，室溫下攪拌活化羧基Ih ;同時，將薑黃素置於容器中，加入DCM溶解；將活化後的乙醯丙酸溶液滴加至薑黃素溶液中，氮氣保護，25°C下攪拌避光反應24h; 產物旋蒸除去DCM，依次加入水、乙酸乙酯萃取，收集有機相，旋蒸除溶劑，採用矽膠柱層析的方法純化分離；產物旋幹，真空乾燥。如下所示:
8.根據權利要求7所述一種pH值敏感的薑黃素載藥膠束(單鏈)前體的製備方法，其特徵在於，所述純化選擇的展開劑為:石油醚、乙酸乙酯、冰醋酸的混合液，其體積比為=1:1:1.5 ;所述反應產物單端酚羥基羰基化的薑黃素(Single-Cur)純化選用的洗脫劑為:石油醚與EA的混合物。
9.以權利要求1所述一種PH值敏感的薑黃素載藥膠束(單鏈)前體為原料的一種PH值敏感的薑黃素載藥膠束(單鏈)的製備方法，其特徵在於: 取薑黃素載藥膠束(單鏈)前體；在THF、DMSO、DMF任何一種溶劑中的溶解；然後加入截留分子量3500的透析袋中透析，以蒸餾水作為介質透析24h ;透析結束後，以lOOOOr/min速度離心15min，取上清液，用0.45 的微孔濾膜過濾，冷凍乾燥收集凍乾粉末。
10.以權利要求1所述一種pH值敏感的薑黃素載藥膠束(單鏈)前體為原料的一種PH值敏感的薑黃素載藥膠束(單鏈)的製備方法，其特徵在於: 取薑黃素載藥膠束(單鏈)前體與薑黃素的混合物，質量比例為1:1-5 ;在THF、DMS0、DMF任何一種溶劑中的溶解；然後加入截留分子量3500的透析袋中透析，以蒸餾水作為介質透析24h ;透析結束後，以10000r/min速度離心15min,取上清液,用0.45 y m的微孔濾膜過濾，冷凍乾燥收集凍乾粉末。
【文檔編號】A61K31/12GK103736101SQ201310756002
【公開日】2014年4月23日 申請日期:2013年12月31日 優先權日:2013年12月31日
【發明者】趙燕軍, 王徵, 張琪, 曹延武, 陳超, 高敏 申請人:天津大學