一種板層角膜保存液的製作方法

2023-10-20 19:38:27

一種板層角膜保存液的製作方法
【專利摘要】本發明公開了一種板層角膜保存液，其特徵在於包括以下組分：甘油200-500g/L，透明質酸5-50g/L，硫酸軟骨素10-25g/L，抗氧化劑1-10g/L，緩衝鹽液10-40mmol/L，PH值6.0-8.0。本發明的優點是適用於板層角膜材料的保存並維持角膜原有膠原纖維結構和透明性，同時避免角膜膠原纖維因輻照滅菌處理造成損傷。
【專利說明】一種板層角膜保存液 【技術領域】
[〇〇〇1] 本發明涉及屬於醫療材料的保存領域，具體是指板層角膜保存液。 【背景技術】
[0002] 角膜透明性喪失而導致的角膜盲是僅次於白內障的引起視力喪失的主要原因。角 膜移植可以替代混濁或病變的角膜組織，使角膜恢復原有結構和透明性，已達到保護眼球 結構恢復患者視力的目的。目前角膜移植根據移植片成分和手術方式分為穿透性角膜移 植、板層角膜移植和角膜內皮移植，而後兩種成分移植由於保留受體角膜部分結構（內皮層 或內皮層以前的結構)，具有排斥發生率少，遠期併發症少等優點，手術量逐年增加。在美國 穿透性角膜移植僅佔50%，而成分板層移植所佔比重增加。在中國板層角膜移植比例約佔總 角膜移植的40%以上，新加坡約佔25%，英國約佔11%，而且板層角膜移植的比例正逐年增 力口。板層角膜移植由於不受材料保存時限的限制，非常適合於角膜材料來源不足的國家使 用，如中國、亞洲、歐洲等國家。
[0003] 以往報導的角膜保存液材料僅適合於穿透角膜移植或內皮移植，其保存液功能保 存內皮細胞活性，而板層角膜材料更多應關注起基質層的角膜膠原纖維的保護，研發移植 保存角膜膠原纖維結構的保存液尤為重要。並且異種角膜材料的應用需經輻照滅活病毒 或者滅菌，同種異體角膜材料的使滅活病毒提高安全性或修飾其生物學性質之後的滅菌處 理，其保護角膜膠原結構不受輻照損傷也應著重考慮。
[0004] 針對這些問題，研發一種板層角膜保存液，適合於板層角膜材料的保存維持角膜 原有膠原纖維結構和透明性，避免角膜膠原纖維因輻照造成損傷。
【發明內容】

[0005] 本發明的目的是為了克服現有技術存在的缺點和不足，而提供一種板層角膜保存 液，通過該板層角膜保存液，適用於板層角膜材料的保存並維持角膜原有膠原纖維結構和 透明性，同時避免角膜膠原纖維因輻照滅菌處理造成損傷。
[0006] 為實現上述目的，本發明的技術方案是包括以下組分： 甘油200-500g/L，透明質酸5-50g/L，硫酸軟骨素10-25g/L，抗氧化劑l-10g/L，緩衝 鹽液 10-40mmol/L，PH 值 6. 0-8. 0。
[0007] 進一步設置是保存液中的抗氧化劑為N-乙醯半胱氨酸或維生素 C。
[0008] 進一步設置是所述的緩衝鹽液為磷酸鹽緩衝液、碳酸鹽緩衝液或Η印es緩衝液。
[0009] 本發明製備異種角膜保存液的方法主要特點： 第一個特點是使用甘油首先是冷凍保護劑，甘油具有保護角膜膠原纖維免受冷凍和復 溫過程產生的損傷，而且甘油無細胞毒性、分子量小、易溶於水，更容易洗脫；目前研究一定 濃度的甘油可以有效保持角膜膠原的脫水性，防止膠原纖維腫脹而導致膠原纖維內部及膠 原纖維間的結果破壞，維持角膜的厚度接近生理水平；甘油具有抗菌和病毒失活作用，避免 保存液使用抗生素達到抑細菌滋生。
[0010] 第二個特點是在添加透明質酸鈉和硫酸軟骨素，透明質酸鈉廣泛存在於動物和人 體的生理活性物質，在人皮膚、房水及眼玻璃體中均有分布，其溶液具有高粘彈性及仿形 性，為眼科手術的輔助劑，應用十分廣泛，其安全性已得到廣泛認可。透明質酸鈉為D-葡萄 糖醛酸及N-乙醯葡糖胺組成的雙糖單位玻尿酸，其在溶液形式在濃度大於1%時可形成三 級結構，在一定濃度透明質酸可以具有一定脫水效果和甘油聯合維持角膜膠原厚度。最重 要的是透明質酸鈉和硫酸軟骨素可與角膜膠原纖維的部分斷裂點發生結合，因為輻照時Y 射線的照射可以有效滅活病毒和細菌的同時，也對膠原纖維發生破壞，導致膠原纖維發生 老化、黃變。而透明質酸和硫酸軟骨素所帶氨基可以和斷裂位置〇鍵結合，保持膠原纖維的 結構完整性，結構原理圖（圖1)。並且透明質酸鈉在輻照前具有一定粘彈性，可以有效維持 角膜固有形態，在輻照中保持角膜固有的曲率和膠原纖維構象，避免輻照發生一定程度交 聯對角膜形態發生改變；輻照後大分子透明質酸分解成小分子量的透明質酸鈉，使整體保 存液呈一定粘度的液態，臨床手術應用時非常方便。
[〇〇11] 第三個特點抗氧化劑的使用，NAC為N-乙醯半胱氨酸可以有效清除自由基，防止 氧化損傷。在輻照過程中或凍融過程膠原纖維的破壞可以產生自由基，而自由基對膠原照 成氧化損傷，這種損傷會加速膠原的老化和黃變，而應用NAC可以有效清除自由基起到保 護作用。
[0012] 第四個特點是保存液，工藝較簡單，應用廣泛，可能不僅適合於角膜保存液的保 存，而且適合於人工皮膚等膠原組織的保存。
[0013] 本發明的作用機理和保藏效果如圖1-2所示。
[0014] 下面結合說明書附圖和【具體實施方式】對本發明做進一步介紹。 【專利附圖】

【附圖說明】
[0015] 圖1本發明的作用機理圖； 圖2本發明的保藏效果比較圖。 【具體實施方式】
[0016] 下面通過實施例對本發明進行具體的描述，只用於對本發明進行進一步說明，不 能理解為對本發明保護範圍的限定，該領域的技術工程師可根據上述發明的內容對本發明 作出一些非本質的改進和調整。
[0017] 本發明中板層角膜保存液的實例配方：
【權利要求】
1. 一種板層角膜保存液，其特徵在於包括以下組分： 甘油200-500g/L，透明質酸5-50g/L，硫酸軟骨素10-25g/L，抗氧化劑Ι-lOg/L，緩衝 鹽液 10-40mmol/L，PH 值 6. 0-8. 0。
2. 根據權利要求1所述的一種板層角膜保存液，其特徵在於：保存液中的抗氧化劑為 N-乙醯半胱氨酸或維生素 C。
3. 根據權利要求1所述的一種板層角膜保存液，其特徵在於：所述的緩衝鹽液為磷酸 鹽緩衝液、碳酸鹽緩衝液或Hepes緩衝液。
【文檔編號】A01N1/02GK104094925SQ201410344982
【公開日】2014年10月15日 申請日期:2014年7月18日 優先權日:2014年7月18日
【發明者】陳蔚, 鄭欽象, 羊俊, 林永亮 申請人:廣州優得清生物科技有限公司