益生菌株gm-080用於治療心臟發炎與心臟細胞凋亡的組合物及其用途的製作方法

2023-10-09 03:33:04

專利名稱：：益生菌株gm-080用於治療心臟發炎與心臟細胞凋亡的組合物及其用途的製作方法
技術領域：
：本發明涉及一種益生菌株的用途，特別是涉及一種益生菌株GM-080在治療心臟發炎與心臟細胞凋亡的用途。
背景技術：
：益生菌(probiotics或probioticbacteria)—般指源自於人體內、有益於腸道健康的活菌，也可指外來補充、對身體可能有益的某些微生物，例如乳酸菌(lacticacidbacteria；LAB)和部分酵母菌，其中乳酸菌為將乳糖或其它糖類轉換成乳酸的微生物的統稱。乳酸菌屬革蘭氏陽性菌，常作為食品工業發酵之用。近來的研究證明，乳酸菌可改善過敏相關疾病以及腸胃不適，例如發炎性腸病(inflammatoryboweldisease；IBD)等。一般而言，乳酸菌以乳酸桿菌屬(Lactobacillus)、明串球菌屬(Leuconostoc)、足球菌屬(Pediococcus)、乳酸球菌屬(Lactococcus)以及鏈球菌屬(Streptococcus)等為主，另有氣球菌屬(Aerococcus)>ηπ桿菌屬(Carnobacterium)、腸球菌屬(Enterococcus)、酒球菌屬(Oenococcus)、有抱子乳酸菌(Sporolactobacillus)、四體球菌屬(Teragenococcus)、徘徊球菌屬(Vagococcus)以及魏斯氏菌屬(Weisella)等，其中大多數的乳酸菌隸屬於乳酸桿菌屬。上述菌屬隸屬於乳酸桿菌目(Lactobacillales)，其中部分菌種可作為益生菌(probiotics)。目前對於益生菌的乳酸桿菌屬以及雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)，其研究較為透徹。近來關於流行病學的研究顯示，乳酸菌更可刺激免疫反應，以發展對無害的過敏源(innocentallergens)的免疫而受個生(tolerance)(Penders,J.，Stobberingh,Ε.Ε.，vandenBrandt,P.A.，Thijs,C.Theroleoftheintestinalmicrobiotainthedevelopmentofatopicdisorders.EuropeanJournalofAllergyandClinicalImmunology62(11)，1223-1236.(2007))。其它研究也顯示，乳酸菌可有效改善人畜的抗生素相關的腹瀉(antibiotic-associateddiarrhea)與旅行者腹寫(travellers『diarrhea)、小兒腹瀉(pediatricdiarrhea)、發炎性腸病(IBD)、腸躁症(irritablebowelsyndrome)(以上參閱Furrie,Ε.Probioticsandallergy.ProceedingsoftheNutritionSociety64(4)，465-469，2005；Goossens，D.，Jonkers,D.，Stobberingh，Ε.，vandenBogaard，A.，Russel,Μ.，Stockbrugger,R.Probioticsingastroentrology!indicationandfutureperspectives.ScandinavianJournalofGastroenterology239(Suppl.)，15-23,2003；Kalliomaki，Μ.，Salminen，S.，Poussa，Τ.，Arvilommi,H.，Isolauri，Ε.Probioticsandpreventionofatopicdisease:4_yearfollow-upofarandomisedplacebo-controlledtrial.Lancet361，1869—1871，2003；Pfruender,H.，Amidjojo,Μ.，Hang,F.,Weuster-Botz,D.ProductionofLactobacilluskefircellsforasymmetricsynthesisofa3,5-dihydroxycarboxylate.AppliedMicrobiologyandBiotechnology67,619-622,2005；Shanahan,F.Probioticsandinflammatoryboweldisease:isthereascientificrationale？InflammatoryBowelDisease6(2)，107-115，2000)、異位t生疾病(atopicdisease)(以上參Penders,J.，Stobberingh,Ε.Ε.，vandenBrandt,P.A.,Thijs,C.Theroleoftheintestinalmicrobiotainthedevelopmentofatopicdisorders.EuropeanJournalofAllergyClinicalImmunology62(11)，1223-1236，2007;Lee，J·，Seto，D·，Bielory，LMeta-analysisofclinicaltrialsofprobioticsforpreventionandtreatmentofpediatricatopicdermatitis.JournalofAllergyandClinicalImmunology123(1)，266-267，2009)等。利用乳酸菌治療心血管疾病的相關研究已超過50年。過去的研究顯示，乳酸菌可有效降低血壓與高膽固醇症(hypercholesterolemia)(以上參閱Pfruenderetal.，2005；Lye,H.S.，Kuan，C.Y.，Ewe,J.A.，Fung，W.Y.，Liong,Μ.T.Theimprovementofhypertensionbyprobiotics:Effectsoncholesterol,diabetes,renin,andphytoestrogens.InternationalJournalofMolecularSciences10，3755-3775，2009)。然而，上述研究很少探討益生菌株是否可應用於過敏引起的心臟發炎與心臟細胞凋亡，也未提出益生菌株可能涉及的調控機制。有鑑於此，亟需提供一種益生菌株在提供治療心臟發炎與心臟細胞凋亡的新用途，以開發益生菌株的其它應用面。
發明內容本發明的一個方面是在提供一種用於治療心臟發炎與細胞凋亡的組合物，其包括一益生菌株GM-080，且此益生菌株GM-080的含量可有效治療心臟發炎與心臟細胞凋亡。本發明的另一方面則是在提供一種益生菌株GM-080的用途，此益生菌株GM-080可單獨使用或結合其它混合菌株，以專一性抑制磷酸化c-Jun氨基末端激Sl(phosphorylatedc-JunN-terminalkinase；p-JNK)、Bcl_2才目關死亡促進因子(Bcl-2-associateddeathpromoter；Bad)以及Bcl_2相關X蛋白(Bcl-2-associatedXprotein；Bax)的表現，從而有效治療心臟發炎與心臟細胞凋亡。根據本發明的上述方面，提出一種用於治療心臟發炎與細胞凋亡的組合物。在一實施例中，此組合物包括一益生菌株GM-080，此益生菌株GM-080例如可為副乾酪乳桿菌(Lactobacillusparacasei)GM-080(保藏於中國典型培養物保藏中心，保藏號為CCTCCM204012)。依據本發明一實施例，上述益生菌株GM-080為活的或不活化的。依據本發明一實施例，上述益生菌株GM-080用於專一性抑制p-JNK、Bad以及Bax的表現。依據本發明一實施例，上述組合物為醫藥組合物、飲食補充物、食品或其組成分。根據本發明的另一方面，提出一種益生菌株GM-080的用途，其前述的益生菌株GM-080可專一性抑制p-JNK、Bad以及Bax的表現。依據本發明一實施例，上述益生菌株GM-080還可包含其它混合菌株。應用本發明的益生菌株GM-080在治療心臟發炎與心臟細胞凋亡的用途，可利用上述益生菌株GM-080，透過專一性抑制p-JNK、Bad以及Bax的表現，進而有效治療心臟發炎與心臟細胞凋亡，從而開發益生菌株的其它應用面。附圖簡要說明為了讓本發明的上述和其它目的、特徵、優點與實施例能更明顯易懂，附圖的詳細說明如下圖1繪示根據本發明一實施例的益生菌株GM-080參與治療心臟發炎與心臟細胞凋亡的信號傳導途徑的示意圖。圖2顯示根據本發明一實施例的小鼠心臟組織的Western印跡法分析圖。圖3繪示利用α-微管蛋白的表現量標準化圖2的p-JNK表現量的柱狀圖。圖4繪示利用α-微管蛋白的表現量標準化圖2的JNK1/2表現量的柱狀圖。圖5顯示根據本發明一實施例的小鼠心臟組織的Western印跡法分析圖。圖6繪示利用α-微管蛋白的表現量標準化圖5的p_NFκB表現量的柱狀圖。圖7繪示利用α-微管蛋白的表現量標準化圖5的ρ_ΙκB表現量的柱狀圖。圖8顯示根據本發明一實施例的小鼠心臟組織的Western印跡法分析圖。圖9繪示利用α-微管蛋白的表現量標準化圖8的Bad表現量的柱狀圖。圖10繪示利用α-微管蛋白的表現量標準化圖8的Bax表現量的柱狀圖。圖11顯示根據本發明一實施例的小鼠心臟組織的Western印跡法分析圖。圖12繪示利用α-微管蛋白的表現量標準化圖11的細胞質的細胞色素C表現量的柱狀圖。圖13繪示利用α-微管蛋白的表現量標準化圖11的活化態的凋亡蛋白酶3表現量的柱狀圖。具體實施例方式承前所述，本發明提供一種益生菌株GM-080在治療心臟發炎與心臟細胞凋亡的用途，其利用益生菌株GM-080製造一組合物，且此益生菌株GM-080的含量可有效治療心臟發炎與心臟細胞凋亡。本發明此處所稱的「益生菌株GM-080，，指副乾酪乳桿菌(LactobacilIusparacasei)GM-080，此菌株GM-080已於2004年2月19日保藏於中國典型培養物保藏中心(ChinaCenterforTypeCultureCollection;CCTCC；中國湖北省武漢市武昌洛珈山)，保藏號為CCTCCM204012。前述益生菌株GM-080可利用常規方式，或利用中國專利發明者呂英震,曾千育,王雪芳,蔡政志,謝豐欽,黃志揚申請人:景嶽生物科技股份有限公司