一種穩定的卡泊芬淨凍幹組合物及其製備方法與流程

2023-10-08 23:16:34 2

本發明涉及藥物製劑領域，具體為一種穩定的卡泊芬淨凍幹組合物及其製備方法。
背景技術：
：卡泊芬淨為一種半人工合成的棘白菌素類抗真菌化合物，可作為葡聚糖合成的抑制劑，非競爭性抑制真菌細胞壁的β(1，3)-d-葡聚糖的合成而發揮殺菌作用。2001年，獲得fda的批准上市，具有如下結構：卡泊芬淨結構中存在多個肽鍵，同時還含有多個羥基、氨基及酚羥基結構，天然地，其化學穩定性極差，易於因氧化、水解而降解產生雜質，為此，在長期存儲過程中，卡泊芬淨需要置於-70℃條件下方可維持6月左右相對穩定。為了解決卡泊芬淨製劑放置穩定性的問題，現有技術多採用添加額外穩定劑或填充劑的方法。譬如，us2010/0137197公開了一種含卡泊芬淨和玻璃化轉變溫度為90℃以上的非還原性糖的凍乾乾組合物，其穩定性要明顯好於科賽斯(cancidas)，能夠在5℃下保存更長的時間，甚至是在室溫下進行保存。cn1132624c則公開了一種含有蔗糖、甘露醇的卡泊芬淨注射液組合物，cn10216648a公開了含有卡泊芬淨、山梨醇和甘露醇的卡泊芬淨凍幹組合物，cn102614493a公開了一種含有穩定劑如海藻糖或蔗糖的卡泊芬淨組合物，以及cn103386117a中的含有糖類保護和胺基酸的卡泊芬淨凍幹組合物，等等。技術實現要素：本發明提供了一種藥物組合物，該藥物組合物含有卡泊芬淨或其可藥用鹽，緩衝鹽和叔丁醇/c1-c3醇溶液組成，該藥物組合物中水分含量不高於1％(質量百分含量，w/w％)，具體實施方案中，含水量可以小於或等於0.02、0.04、0.06、0.08、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0％或更低。在實施方案中，前述藥物組合物中卡泊芬淨或其可藥用鹽的濃度為3mg/ml～200mg/ml，可以為3mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、15mg/ml、20mg/ml、25mg/ml、30mg/ml、45mg/ml、50mg/ml、55mg/ml、60mg/ml、65mg/ml、70mg/ml、75mg/ml、80mg/ml、90mg/ml、100mg/ml、120mg/ml、150mg/ml、200mg/ml，進一步地，為了避免藥物組合物中卡泊芬淨或其可藥用鹽在放置過程中自然析出現象，卡泊芬淨或其可藥用鹽的濃度為10mg/ml～80mg/ml。進一步地，所述c1-c3醇為本領域技術人員所熟知的，選自甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇或正丁醇中的至少一種，優選為甲醇、乙醇或其組合。本發明所述c1-c3醇為無水溶劑，其含水量不高於0.05％。在一些實施方案中，所述c1-c3醇與叔丁醇的體積比(v/v)為95:5～60:40，保證卡泊芬淨或其可藥用鹽的最大溶解度，其體積比可以為95:5、90:10、85:15、80:20、75:25，70:30、65:35、60:40，進一步地，所述溶劑體積比為90:10～80:20。在一些實施方案中，所述藥物組合物含有25mg/ml的卡泊芬淨或其可藥用鹽、2mg/ml緩衝鹽和甲醇/乙醇/叔丁醇＝70:20:10的溶液。在一些實施方案中，所述藥物組合物含有40mg/ml的卡泊芬淨或其可藥用鹽、2mg/ml緩衝鹽和甲醇/乙醇/叔丁醇＝75:5:20的溶液。在一些實施方案中，所述藥物組合物含有25mg/ml的卡泊芬淨或其可藥用鹽、4mg/ml緩衝鹽和甲醇/乙醇/叔丁醇＝60:20:20的溶液。在一些實施方案中，所述藥物組合物含有60mg/ml的卡泊芬淨或其可藥用鹽、6mg/ml緩衝鹽和甲醇/乙醇/叔丁醇＝80:10:10的溶液。在一些實施方案中，所述藥物組合物含有100mg/ml的卡泊芬淨或其可藥用鹽、10mg/ml緩衝鹽和甲醇/乙醇/叔丁醇＝85:5:10的溶液。在一些實施方案中，所述藥物組合物含有150mg/ml的卡泊芬淨或其可藥用鹽、10mg/ml緩衝鹽和甲醇/叔丁醇＝80:20的溶液。在一些實施方案中，所述藥物組合物含有50mg/ml的卡泊芬淨或其可藥用鹽、5mg/ml緩衝鹽和乙醇/叔丁醇＝80:20的溶液。進一步地，本發明所述緩衝鹽為醋酸鈉，藥物組合物中醋酸鈉的濃度為0.5～20mg/ml，在實施方案中醋酸鈉的濃度可以為0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5、10mg/ml，更進一步為1～10mg/ml。在實施方案中，本發明所述藥物組合物ph＝5～7，可以為5.0、5.2、5.4、5.6、5.8、6.0、6.2、6.4、6.6、6.8、7.0。在一些實施方案中，所述藥物組合物含有40mg/ml的醋酸卡泊芬淨、2mg/ml醋酸鈉和甲醇/乙醇/叔丁醇＝75:5:20的溶液。在一些實施方案中，所述藥物組合物含有25mg/ml的醋酸卡泊芬淨、4mg/ml醋酸鈉和甲醇/乙醇/叔丁醇＝60:20:20的溶液。在一些實施方案中，所述藥物組合物含有60mg/ml的醋酸卡泊芬淨、6mg/ml醋酸鈉和甲醇/乙醇/叔丁醇＝80:10:10的溶液。在一些實施方案中，所述藥物組合物含有100mg/ml的醋酸卡泊芬淨、10mg/ml醋酸鈉和甲醇/乙醇/叔丁醇＝85:5:10的溶液。在一些實施方案中，所述藥物組合物含有150mg/ml的醋酸卡泊芬淨、10mg/ml醋酸鈉和甲醇/叔丁醇＝80:20的溶液。在一些實施方案中，所述藥物組合物含有50mg/ml的醋酸卡泊芬淨、5mg/ml醋酸鈉和乙醇/叔丁醇＝80:20的溶液。進一步地，本發明所述藥物組合物中還含有凍幹保護劑或凍幹支撐劑，譬如，蔗糖、海藻糖、甘露醇、乳糖、葡萄糖、麥芽糖等糖類/多元醇；葡聚糖、白蛋白等聚合物；甘氨酸、肌氨酸、丙氨酸、穀氨酸鈉、l-絲氨酸等胺基酸。醋酸卡泊芬淨結構中存在多種羥基、氨基和苯酚基團，其對熱和潮溼具有高度不穩定性。通過放置穩定性實驗，利用lc-mc、nmr等檢測手段，大體可以確認雜質3-7為卡泊芬淨在高溼或高溫條件下降解產物，雜質5和6我們推測為兩分子卡泊芬淨之間通過氫鍵形成的二聚體化合物，雜質3、4和7化學結構如下：取前述藥物組合物作為供試品，於2～8℃放置72小時(h)，取樣測定。所述藥物組合物展現優異的穩定性，便於醋酸卡泊芬淨於2～8℃放置的長期儲存。在一些實施方案中，藥物組合物於2～8℃放置72h(相對於3天)，其中雜質3的含量小於0.1％，可以為0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01％或更低；雜質4的含量小於0.40％，可以為0.40、0.39、0.38、0.37、0.36、0.35、0.34、0.33、0.32、0.31、0.30、0.29、0.25、0.22、0.21、0.18、0.16、0.14、0.12、0.10、0.08、0.06、0.04、0.02或更低；雜質5的含量小於0.2％，可以為0.20、0.19、0.18、0.17、0.16、0.15、0.14、0.13、0.12、0.11、0.10、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02或更低；雜質6的含量小於0.1％，可以為0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01％或更低；雜質7的含量小於0.1％，可以為0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01％或更低。本發明還提供了一種凍幹組合物，該凍幹組合物由前述藥物組合物經冷凍乾燥獲得。製備凍幹組合物步驟包括：a)將卡泊芬淨或其可藥用鹽溶於叔丁醇溶液中，逐漸加入緩衝鹽，調節ph＝5～7；b)用0.22um微孔濾膜過濾,以形成凍幹前溶液；c)隨後將步驟a)所得組合物(或稱為凍幹前溶液)冷凍乾燥。進一步地，所述步驟c)冷凍乾燥分為如下三個階段：i)預凍期：將凍幹前溶液保持在-20℃～-10℃至少1h，凍結的樣品的冰晶在垂直方向呈現煙囪狀，在藥品表面沒有凍結濃縮層，而且整個藥品的結構均一性很好；ii)升華期：開啟真空泵，將冷凍溶液緩慢調節溫度值-50℃～-40℃的第一冷凍乾燥溫度，保持溫度至少10-50h，期間維持真空為150～200μbar(毫巴)；iii)乾燥期：將冷凍乾燥溫度緩慢調節至-30℃～-10℃，保持溫度約5-20h，至冰線消失，保持真空度為150～200μbar(毫巴)，以形成凍幹組合物。進一步地，前述所得凍幹組合物中含有雜質3的含量小於0.1％，可以為0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01％或更低；雜質4的含量小於0.40％，可以為0.40、0.39、0.38、0.37、0.36、0.35、0.34、0.33、0.32、0.31、0.30、0.29、0.25、0.22、0.21、0.18、0.16、0.14、0.12、0.10、0.08、0.06、0.04、0.02或更低；雜質5的含量小於0.2％，可以為0.2、0.19、0.18、0.17、0.16、0.15、0.14、0.13、0.12、0.11、0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01％或更低；雜質6的含量小於0.2％，可以為0.2、0.19、0.18、0.17、0.16、0.15、0.14、0.13、0.12、0.11、0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01％或更低；雜質7的含量小於0.1％，可以為0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01％或更低。更進一步地，所述凍幹組合物中總雜含量小於1.5％，可以為1.5、1.4、1.3、1.2、1.1、1.0、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5、0.4、0.3、0.2、0.1或更小。同時，本發明所述凍幹組合物中殘留溶劑叔丁醇含量小於0.05％，可以為0.05、0.04、0.03、0.02、0.01％，完全符合ichq3c殘留溶劑指導原則。本發明所述凍幹組合物中水分含量不高於1％，可以小於或等於0.02、0.04、0.06、0.08、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0％或更低，凍幹組合物中水分含量低有利於放置過程中穩定性，減少降解雜質的產生。取凍幹組合物適量，精密稱定；於-20℃放置6月後，取樣測定考察凍幹組合物穩定性情況，結果表明：凍幹組合物展現優異的穩定性，便於長期儲存。在一些實施方案中，藥物組合物於-20℃放置6月，其中雜質3的含量小於0.1％，可以為0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01％或更低；雜質4的含量小於0.40％，可以為0.40、0.39、0.38、0.37、0.36、0.35、0.34、0.33、0.32、0.31、0.30、0.29、0.25、0.22、0.21、0.18、0.16、0.14、0.12、0.10、0.08、0.06、0.04、0.02或更低；雜質5的含量小於0.3％，可以為0.3、0.28、0.26、0.24、0.22、0.20、0.18、0.16、0.14、0.12、0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01％或更低；雜質6的含量小於0.2％，可以為0.2、0.19、0.18、0.17、0.16、0.15、0.14、0.13、0.12、0.11、0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01％或更低；雜質7的含量小於0.2％，可以為0.2、0.19、0.18、0.17、0.16、0.15、0.14、0.13、0.12、0.11、0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01％或更低。本文所用的術語「卡泊芬淨」意指卡泊芬淨游離鹼。「卡泊芬淨可藥用鹽」為卡泊芬淨與有機酸的酸加成鹽，進一步地，卡泊芬淨可藥用鹽為醋酸卡泊芬淨，又稱為卡泊芬淨二乙酸鹽。本發明所述醋酸卡泊芬淨通過wo2012146099所述方法獲得，所用其他試劑均可通過外購方式獲得。本發明所用醋酸卡泊芬淨原料藥質量如下：本發明所述「純度或有關物質」通過hplc方法測定，其檢測方法參照高效液相色譜法(中國藥典2010年版二部附錄vd)：色譜柱waterssymmetry-c18柱；以高氯酸與氯化鈉混合溶液/乙腈為流動相，梯度洗脫。本發明水分測定方法：中國藥典2010年版二部附錄ⅷm第一法a操作方法：注入適量無水甲醇於滴定瓶中，用卡爾費休氏試液滴定至終點。迅速稱取約0.1g的供試品，將樣品注入滴定瓶，使樣品在甲醇中充分溶解後，開始測定，需做平行樣。按以下公式計算本品水分：式中：v為供試品消耗費休氏試液的體積，ml；f為每1ml費休氏試液相當於水的質量，mg/ml；w為供試品的質量，mg。本發明殘留溶劑檢測方法：中國藥典2010年版二部附錄ⅷp第二法測定。色譜條件與系統適用性試驗：色譜柱：以6％氰丙基苯基-94％二甲基聚矽氧烷為固定液升溫程序：起始柱溫為40℃，維持5分鐘，以每分鐘20℃的速率升溫至100℃，維持2分鐘，以每分鐘80℃的速率升溫至180℃，維持2分鐘載氣：載氣為氮氣；流速：4.0ml/min；分流比：10:1；進樣口溫度：160℃按以下公式以外標法計算殘留溶劑的量：式中：ai—供試溶液中待測溶劑峰面積mi—供試品稱重as—對照溶液中待測溶劑峰面積ms—待測溶劑對照品稱重具體實施方式以下將結合實施例更詳細地解釋本發明，本發明的實施例僅用於說明本發明的技術方案，並非限定本發明的實質。實施例1：製備醋酸卡泊芬淨組合物處方製備工藝：1)取2g蔗糖，1.3g甘露醇，2.5g醋酸卡泊芬淨(批號；801)加入甲醇/乙醇(70ml/20ml)的混合溶液中，攪拌溶解後；2)加入適量醋酸鈉調節溶液ph＝6.1，再加入叔丁醇10ml。實施例2：製備醋酸卡泊芬淨組合物處方製備工藝：1)取3.1g蔗糖，2g甘露醇，4.0g醋酸卡泊芬淨(批號；801)加入甲醇/乙醇(75ml/5ml)的混合溶液中，攪拌溶解後；2)加入適量醋酸鈉調節溶液ph＝5.9，再加入叔丁醇20ml。實施例3：製備醋酸卡泊芬淨組合物處方製備工藝：1)取4.7g蔗糖，3.1g甘露醇，6.0g醋酸卡泊芬淨(批號；801)加入甲醇/乙醇(80ml/20ml)的混合溶液中，攪拌溶解後；2)加入適量醋酸鈉調節溶液ph＝6.5。實施例4：製備醋酸卡泊芬淨組合物處方製備工藝：1)取7.8g蔗糖，5.2g甘露醇，10.0g醋酸卡泊芬淨(批號；801)加入甲醇/乙醇(55ml/45ml)的混合溶液中，攪拌溶解後；2)加入適量醋酸鈉調節溶液ph＝6.2。實施例5：製備醋酸卡泊芬淨組合物處方製備工藝：1)取11.6g蔗糖，7.7g甘露醇，15.0g醋酸卡泊芬淨(批號；901)加入甲醇(80ml)中，攪拌溶解後；2)加入適量醋酸鈉調節溶液ph＝5～7，再加入叔丁醇20ml。實施例6：製備醋酸卡泊芬淨組合物處方製備工藝：1)取3.9g蔗糖，2.6g甘露醇，5.0g醋酸卡泊芬淨(批號；901)加入乙醇(80ml)中，攪拌溶解後；2)加入適量醋酸鈉調節溶液ph＝6.0，再加入叔丁醇20ml。實施例7：製備醋酸卡泊芬淨組合物處方醋酸卡泊芬淨(按卡泊芬淨鹼計，下同)50mg/ml醋酸鈉10mg/ml製備工藝：1)取5.0g醋酸卡泊芬淨(批號；901)加入水(80ml)中，攪拌溶解後；2)加入適量醋酸鈉調節溶液ph＝6.0。實施例8：按照cn103315969的對比例3製備組合物處方醋酸卡泊芬淨(按卡泊芬淨鹼計，下同)50mg/ml蔗糖40mg/ml甘露醇26mg/ml製備工藝：取甘露醇0.5g，蔗糖0.75g溶於20ml水中，之後加入1.17g醋酸卡泊芬淨(批號；901)，用1m的氫氧化鈉、鹽酸調節ph6.2。實施例9：按照cn103315969的對比例2製備組合物處方製備工藝：海藻糖1.20g溶於3ml水中，之後加入7.5μl的冰醋酸，用1m的氫氧化鈉調至ph5.1，再加入0.223g醋酸卡泊芬淨(批號；901)，輕輕攪拌溶解，並用1m的氫氧化鈉、鹽酸調至ph6.0，加水定容到5ml，0.22μm膜過濾即得。實施例10：2～8℃放置穩定性試驗將前述實施例1-9藥物組合物作為供試品，於2～8℃放置3天穩定性數據如下：表1於2～8℃放置3天穩定性結論：在叔丁醇/c1-3醇溶液體系中，各個處方在2～8℃條件下都非常穩定，放置3d後卡泊芬淨含量沒有明顯的降低，而含水溶液體系中的處方在2～8℃條件下穩定性差，組合物中水會促使卡泊芬淨的降解產生雜質3,4，會影響後續凍幹組合物的質量。實施例11：將實施例1-9所得藥物組合物製備成凍幹組合物製備工藝：i)分別將實施例1-9的藥物組合物(凍幹前溶劑)保持在-20℃～-10℃至少1h，凍結的樣品的冰晶在垂直方向呈現煙囪狀，在表面沒有形成凍結濃縮層，而且整個藥品的結構均一性很好；ii)開啟真空泵，將冷凍溶液緩慢調節溫度值-50℃～-40℃的第一冷凍乾燥溫度，保持溫度至少10-50h，期間維持真空為150～200μbar(毫巴)；iii)將冷凍乾燥溫度緩慢調節至-30℃～-10℃，保持溫度約5-20h，至冰線消失，保持真空度為150～200μbar(毫巴)，以形成凍幹組合物。表2實施例1-9凍幹組合物有關物質實施例12：將實施例1-9凍幹組合物放置於-20℃、2～8℃考察穩定性，具體穩定性數據如下：表3於-20℃條件放置穩定性數據表4於2-8℃條件放置穩定性數據結論：叔丁醇凍幹體系利於各處方在2～8℃條件下比較穩定，放置6月後卡泊芬淨含量沒有明顯的降低，仍然可接受範圍內。進一步地，叔丁醇凍幹體系中乙醇或甲醇比例較高時，在本發明所述凍幹步驟i)中較難固化，在藥品表面會出現凍結濃縮層，均一性不好，影響後續凍幹步驟，且所得凍幹組合物結構不均一，會出現稍許結塊，如實施例3或4樣品結構不均一、有結塊現象，穩定性數值差於比其它樣品。實施例13：實施例1-9凍幹組合物的復溶時間分別將實施例1-9凍幹組合物用0.9％生理鹽水勾兌稀釋，考察凍幹組合物的復溶時間。表5結論：在製備醋酸卡泊芬淨凍幹組合物過程中，用含有10％以下叔丁醇溶液進行凍幹，所得樣品中易於出現塌陷或結塊現象，直接影響所得凍幹組合物復溶時間。在沒有凍幹保護劑或填充劑情況下，利用水進行凍幹所得凍幹組合物多呈餅狀，其復溶時間較長，且所得凍幹組合物中含水量較高，長期穩定性會較差。另外，凍幹組合物中含水高時，即便含甘露醇，復溶時間也較長。實施例14：凍幹工藝考察將實施例2所述處方進行凍幹實驗，考察最優凍幹參數表6預凍期升華期乾燥期實驗例1-20℃-50℃，180μbar-30℃，150μbar實驗例2-10℃-40℃，200μbar-20℃，150μbar實驗例3-40℃-50℃，180μbar-30℃，180μbar實驗例4-60℃-50℃，180μbar-20℃，150μbar表7註：通常凍乾粉針的疏鬆狀優於結塊狀，結塊狀優於皺縮狀。結論：凍幹過程中壓力和溫度對凍幹組合物的外觀和質量有較大的影響，當預凍期穩定過低，凍幹前溶劑就會因快速凍幹而在藥品表面形成凍結濃縮層，且內部結構冰晶尺寸不一，均一性不好，影響凍幹組合物的成型效果，凍乾粉結構不均一、表面不平整。當前第1頁12