一種用於治療癌症的藥物組合物、試劑盒及其應用的製作方法

2023-10-09 11:28:54 1

本發明涉及一種治療癌症的藥物組合物、試劑盒及其應用，屬於藥物技術領域。

背景技術：

惡性腫瘤已經成為影響人類健康的主要疾病之一，目前惡性腫瘤的治療很大程度上仍以化療為主，但是化療藥物已經從傳統的細胞毒性藥物逐漸轉變為具有靶向性且對腫瘤細胞具有高選擇性的靶向小分子藥物。5-氟尿嘧啶(5-FU)是最早廣泛應用於治療惡性腫瘤的抗代謝類藥物之一，是胸腺嘧啶合成酶抑制劑。5-氟尿嘧啶抗腫瘤作用療效確切，但是其在體內半衰期短，臨床使用一般需要靜脈持續灌注給藥，毒性和不良反應較高，因而限制了其在臨床上的應用。為了克服上述缺陷，科研工作者開發了5-氟尿嘧啶的前藥以及與其他藥物的組合從而增加其療效並降低其副作用。

1、替加氟

化學名稱：1-(四氫-2-呋喃基)-5-氟-2,4(1H,3H)-嘧啶二酮，屬於嘧啶類抗癌藥之一，它是5-氟尿嘧啶(5-FU)的前體藥物，對多數實體瘤有抑制作用。其在體內能干擾阻斷DNA、RNA及蛋白質的生物合成，從而產生其抗癌作用。但由於存在比較嚴重的骨髓抑制，腸胃道反應和肝腎損傷等副作用，故在臨床上已很少單獨使用，常常需要和其他藥物配合使用來減小其嚴重的副作用。

替加氟的結構式如下：

2、卡培他濱

化學名為5』-脫氧-5-氟-N-[(戊氧基)羰基]-胞嘧啶核苷，是由瑞士羅氏公司研製的新型抗腫瘤藥物，於1998年被FDA批准在美國上市，商品名為XELODA(希羅達)；目前我國已批准進口該產品。卡培他濱臨床用於晚期轉移性乳腺癌，結、直腸癌以及其他實體瘤的治療，具有良好的抗腫瘤作用和極少的不良反應。

卡培他濱(capecitabine)是一種極具潛力的選擇性腫瘤內激活的口服氟尿嘧啶氨基甲酸酯類抗腫瘤藥物，它通過肝臟和腫瘤內的3種酶轉化為氟尿嘧啶(FU)。其口服後完整地通過胃腸壁，首先經肝臟羧酸酯酶催化代謝為5'-脫氧-5-氟胞苷(5'-DFCR)，然後經肝臟和腫瘤細胞中的胞苷脫氨酶催化轉化為5'-脫氧-氟尿嘧啶(5'-DFUR)，最後經胸苷磷酸化酶(TP)催化轉化為氟尿嘧啶(FU)而發揮細胞毒作用。卡培他濱和替加氟雖然都是5-氟尿嘧啶的前藥，但卡培他濱對腫瘤的高度選擇性和特異性明顯優於替加氟，卡培他濱在抗腫瘤活性增強的同時毒副作用大大減少，因此在臨床上應用廣泛。

卡培他濱結構式如下:

相對於替加氟，卡培他濱無論在分子結構還是在體內代謝方式上均顯著不同。由於副作用大且效果存在局限，替加氟在臨床上已經很少單獨使用。而卡培他濱由於其優異的靶向性，較低的副作用已成為臨床上治療腫瘤的抗代謝類藥物的首選。氟尿嘧啶(5-FU)、替加氟(FT-207)、卡培他濱三者的對比如表1所示。

表1

3、TS-1：

商標：TS-1，Taiho Pharmaceutical Co.，Ltd.製造，含有作為活性成分的替加氟、吉莫斯特和氧嗪酸或其鹽的三組分抗腫瘤劑。

吉莫斯特(CDHP)和氧嗪酸鉀(OXO)分別單獨使用沒有明顯的抗癌活性，他們與替加氟聯合使用是為了提高療效和降低毒性。

CDHP的作用是為了提高替加氟(FT-207)的抗癌療效，當FT-207口服進入體內後，先在肝臟P450活化酶的催化下轉變成5-FU，之後除10％左右進入腸道並在乳清酸核糖轉移酶(ORTC)催化下產生磷酸化外，其餘90％左右的5-FU是在肝臟二氫嘧啶脫氫酶(DPD)的催化下，循5-FU的代謝途徑轉變成三磷酸氟尿苷(FUTP)和一磷酸去氧氟尿苷(FdUMP)兩個活性產物發揮抗癌作用。因此，DPD是5-FU降解的主要限速酶，其血漿5-FU水平的保持取決於DPD活性。CDHP是DPD的可逆性抑制劑，其抑制DPD活性的效果是尿嘧啶的180倍，因而能夠有效抑制5-FU的降解。

氧嗪酸鉀的主要作用是抑制小腸組織ORTC的活性。在替加氟的代謝過程中，有10％左右的5-FU進入腸道組織，在乳清酸核糖轉移酶的催化下，產生磷酸化，這一過程被認為是產生腸道毒副作用的主要原因。OXO的作用特點是能有效的抑制ORTC，進而抑制腸道中5-FU的磷酸化。OXO的另外一個顯著的特點是口服進入體內後，絕大部分分布於小腸黏膜細胞表面，只有極少部分進入血液循環、腫瘤組織及其他正常組織。

因為吉莫斯特的增效作用，此抗腫瘤劑的抗腫瘤效果增大，吉莫斯特對5-FU的降解抑制效果是尿嘧啶的180倍。而且，當替加氟和吉莫斯特結合使用時，氧嗪酸及其鹽尤其抑制可能伴隨著抗腫瘤效果增強的腸胃中毒性的增加，從而降低副作用。

4、DPD抑制劑+5-FU前藥組合

5-FU必須通過代謝轉化成偽尿苷核苷酸和偽脫氧尿苷核苷酸而被激活，所述偽核苷酸能干擾DNA合成和RNA功能，由於5-FU與它的天然對應物尿嘧啶的不同僅在於5位的氟取代，它在癌症患者體內易被激活。但是，它與尿嘧啶的結構相似性也導致它被快速和廣泛的轉化成沒有抗腫瘤活性的降解產物而失活。二氫嘧啶脫氫酶(DPD)是5-FU降解(失活)的第1個和限速的步驟。研究表明，抑制DPD能延長5-FU在血漿中的半衰期。現已研究了若干種DPD抑制劑，包括不可逆地使DPD失活的抑制劑，以及可逆地抑制DPD的抑制劑。5-乙炔基尿嘧啶，又被稱作恩尿嘧啶，它是DPD的不可逆的滅活劑，能減少或消除5-FU的代謝失活，因此在存在極低量恩尿嘧啶的情況下，DPD被破壞，並且不再能夠使5-FU失活。鑑於此，專利CN101068549中提出將DPD抑制劑(恩尿嘧啶)+5-FU前藥(卡培他濱)聯用抗腫瘤。

技術實現要素：

本發明的目的之一是提供一種用於治療癌症的藥物組合物。特別是一種能夠增強卡培他濱的抗腫瘤效果，並且降低副作用的藥物組合物。

本發明的目的之二是提供一種臨床使用的，能夠增強卡培他濱的抗腫瘤效果，降低副作用的藥物試劑盒。

本發明的目的之三是提供一種哺乳動物易感5-氟尿嘧啶的治療方法。

根據上述的現狀，本發明人進行了廣泛的研究，結合TS-1的作用機理及效果，研究了增強卡培他濱的抗腫瘤作用的藥物組合。結果發現，當單獨治療無效劑量的卡培他濱在組合使用抗腫瘤增效效應有效量的吉莫斯特以及降低副作用有效量的氧嗪酸鉀時，可以在降低副作用的基礎上顯著增加卡培他濱的抗腫瘤效果。

本發明提供一種治療癌症的藥物組合物，組合物中卡培他濱：吉莫斯特：氧嗪酸鉀＝1:0.1-3:0.5-4，其中三者的比值為摩爾比。

作為優選，組合物中卡培他濱：吉莫斯特：氧嗪酸鉀＝1:0.4:1，其中三者的比值為摩爾比。

本發明的三個組分都是已知的化合物，均可以通過常規方法製備。

吉莫斯特包括其在藥學上可接受的鹽。其中吉莫斯特的氯離子可用滷素離子代替，例如：氟、溴和碘原子等，優選2,4-二羥基-5-氯吡啶、2,4-二羥基-5-氰基吡啶等。

氧嗪酸鉀包括其在藥學上可接受的鹽，包括酸加成鹽和鹼性化合物的鹽。能夠形成酸加成鹽的有用的酸是鹽酸、硫酸、磷酸、氫溴酸等無機酸，草酸、琥珀酸、馬來酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、丙二酸酸、甲磺酸、苯甲酸和類似的有機酸。能夠形成藥學上可接受的鹼性化合物的鹽的有用的鹼性化合物的實例為氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、碳酸鈉、碳酸氫鉀等。

需要特別說明的是，本發明的重點技術特徵在於發現吉莫斯特與氧嗪酸鉀聯合卡培他濱增強抗腫瘤效果，降低副作用，而上述各個組分之間的摩爾比不是本發明的重要技術特徵，三者都是已知化合物，在哺乳動物上用量均有具體的有效數值範圍，因此，本發明不局限於上述的摩爾比範圍值，包括能夠在哺乳動物上安全使用的所有劑量範圍。

本發明的抗腫瘤增效作用的組合物是通過配製吉莫斯特和氧嗪酸鉀的化合物或其成單一製劑或成兩個相應單獨的製劑獲得。在單一製劑或兩個單獨的製劑可以獨立地或與一個可選的劑型配製的卡培他濱同時給藥。

本發明還提供一種治療癌症的藥物試劑盒一，用於增強卡培他濱的抗腫瘤效果並降低藥物聯用後卡培他濱的副作用，試劑盒一中包括組分(Ⅰ)以及組分(Ⅱ)，組分(Ⅰ)為抗腫瘤增效效應有效量的吉莫斯特，組分(Ⅱ)為降低副作用有效量的氧嗪酸鉀。

優選地，組分(Ⅰ)以及組分(Ⅱ)被容納在分開的容器中。兩種組分可以分別與藥學上可接受的載體混合，以提供在一個可選的單位劑量形式，然後施用的製劑。

優選地，組分(Ⅰ)以及組分(Ⅱ)被容納在同一容器中。兩種組分可以與藥學上可接受的載體相互混合，以提供在一個可選的單位劑量形式，然後施用的單一製劑。

上述試劑盒可以在卡培他濱施用時的任何時間給藥，也就是說可以在卡培他濱施用前施用，或者與卡培他濱同時施用，或者在卡培他濱施用後再施用。

本發明還提供一種治療癌症的藥物試劑盒二，試劑盒二包括三個組份，分別為組分(Ⅰ)、組分(Ⅱ)及組分(Ⅲ)，組分(Ⅰ)為抗腫瘤有效量的卡培他濱，組分(Ⅱ)為抗腫瘤增效效應有效量的吉莫斯特，組分(Ⅲ)為降低副作用有效量的氧嗪酸鉀。

優選地，三個組份分別容納在不同的容器中。三種組分(卡培他濱、吉莫斯特以及氧嗪酸鉀)都是已知化合物，可以與藥學上可接受的載體相互混合，以提供在一個可選的單位劑量形式，然後施用的單一製劑。

優選地，組分(Ⅰ)容納在單獨的容器中，組分(Ⅱ)及組分(Ⅲ)容納在同一容器中。組分(Ⅱ)及組分(Ⅲ)可以與藥學上可接受的載體相互混合，以提供在一個可選的單位劑量形式，然後施用的單一製劑。

優選地，組分(Ⅱ)及組分(Ⅲ)容納在不同的容器中，組分(Ⅰ)包含在含有組分(Ⅱ)及組分(Ⅲ)的不同容器中。組分(Ⅰ)和組分(Ⅱ)可以與藥學上可接受的載體相互混合，以提供在一個可選的單位劑量形式，然後施用的單一製劑。組分(Ⅰ)和組分(Ⅲ)可以與藥學上可接受的載體相互混合，以提供在一個可選的單位劑量形式，然後施用的單一製劑。

上述試劑盒二、三種組分可以同時施用，也可以三種組分順序任意組合施用，不分先後順序。

本發明提供了用於治療哺乳動物易感5-氟尿嘧啶疾病的癌症藥物，通過向哺乳動物施用抗腫瘤有效量的卡培他濱，抗腫瘤效果增效有效量的吉莫斯特，和降低副作用有效量的氧嗪酸鉀。

上述應用中卡培他濱的劑量為0.05-800mg/kg，吉莫斯特的劑量為0.05-400mg/kg，氧嗪酸鉀的劑量為0.05-800mg/kg。

附圖說明

圖1是實施例1中溶劑組、卡培他濱組、卡培他濱+吉莫斯特組給藥兩周後的瘤體重柱狀圖；

圖2是實施例1中溶劑組、卡培他濱組、卡培他濱+吉莫斯特組給藥兩周後的瘤體積柱狀圖；

圖3是實施例1中溶劑組、卡培他濱組、卡培他濱+吉莫斯特組給藥兩周後的瘤體積折線圖；

圖4是實施例1中溶劑組、卡培他濱組、卡培他濱+吉莫斯特組、卡培他濱+恩尿嘧啶組的存活率圖；

圖5是實施例1中溶劑組、卡培他濱組、卡培他濱+吉莫斯特組、卡培他濱+恩尿嘧啶組的瘤體積折線圖；

圖6是實施例1中溶劑組、5-FU+吉莫斯特組、卡培他濱+吉莫斯特組的生存率圖；

圖7是實施例1中溶劑組、卡培他濱+吉莫斯特組、卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組的瘤體積折線圖；

圖8是實施例1中溶劑組、卡培他濱+吉莫斯特組、卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組的體重折線圖；

圖9是實施例1中溶劑組、卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組、替加氟+吉莫斯特+氧嗪酸組的存活率圖；

圖10是實施例1中溶劑組、卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組、替加氟+吉莫斯特+氧嗪酸組的體重折線圖。

具體實施方式

下面結合附圖對本發明作進一步描述。以下實施例僅用於更加清楚地說明本發明的技術方案，而不能以此來限制本發明的保護範圍。

實施例1：

實驗方案:

裸鼠植入結腸癌細胞HCT116，待瘤體長到200-300mm3，隨機分組，每組8隻，給藥2周，給藥方案如下表2：

表2

注釋：卡：卡培他濱；吉：吉莫斯特；氧：氧嗪酸鉀；恩：恩尿嘧啶替：替加氟；溶劑：0.5％CMCNa。

實驗數據：

1、目的：吉莫斯特對卡培他濱有協同增效的作用。

從圖1、圖2、圖3中可以看到，該劑量的卡培他濱組在2周時間內無法縮小瘤的體積和重量，相對於溶劑組無統計學意義，而吉莫斯特+卡培他濱組對比卡培他濱組，明顯縮小了瘤的體積和重量，相對於溶劑組具有統計學意義。

2、目的：吉莫斯特與卡培他濱聯用增效作用比恩尿嘧啶與卡培他濱聯用的效果更優。

從圖5的瘤體積折線圖中可以看到，卡培他濱+吉莫斯特組和卡培他濱+恩尿嘧啶組的療效相當，但是從圖4的存活率圖可看出卡培他濱+恩尿嘧啶組比卡培他濱+吉莫斯特組毒副作用大。

3、目的：5-FU+DPD抑制劑作用差於5-FU前藥+DPD抑制劑

DPD抑制劑選用吉莫斯特，從圖6的生存率圖看出，5-FU+吉莫斯特組比卡培他濱+吉莫斯特組毒副作用大。

4、目的：氧嗪酸鉀能降低卡培他濱與吉莫斯特聯用後的副作用。

從圖7的瘤體積中可以看到，卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組與卡培他濱+吉莫斯特組的療效相似，但是從圖8的體重折線圖上看，卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組與對照組相比，體重基本無變化，而卡培他濱+吉莫斯特組與對照組相比，體重減少比較多，因此，卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組相對於卡培他濱+吉莫斯特組明顯能夠減少副作用。

5、目的：卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組合優於TS-1

從圖9的存活率來看，隨著時間的推移，TS-1的生存率明顯不如卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組。從圖10的體重圖來看，很明顯，卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組的體重與對照組無明顯區別，而TS-1組的體重下降明顯，因此，卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀組相對於TS-1組，副作用更小。

實施例2：

實驗方案：

裸鼠植入結腸癌細胞HCT116，待瘤體長到100-200mm3，隨機分組，每組8隻，給藥19天，給藥方案如下表3：

表3

注釋：溶劑對照組：0.5％CMCNa卡吉氧：卡培他濱+吉莫斯特+氧嗪酸鉀

d1：開始給藥第一天 d19：給藥結束時間

*p<0.05**p<0.01，vs溶劑對照組。

實驗數據：

從表3中可以看到，三組不同摩爾比的組合物在19天的給藥時間均縮小瘤的體積和重量，其中卡吉氧2、3組相對於溶劑組有統計學意義。

以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對於本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明技術原理的前提下，還可以做出若干改進和變形，這些改進和變形也應視為本發明的保護範圍。