一種高穩定性增強化學發光底物的製作方法
2023-10-09 06:34:09 2
專利名稱：一種高穩定性增強化學發光底物的製作方法
技術領域：
本發明涉及化學發光分析技術，為一種超微量分析方法，屬於國際專利分類GO1N21/17「光學手段測試分析」技術領域。
背景技術：
化學發光分析技術是現代微量分析方法之一，由於其靈敏度高，簡便快速，線性好，有效期長，安全無害(無放射性和致畸物汙染)等特點而成為取代放免和酶聯的重要技術。以辣根過氧化物酶標記的化學分析法是在免疫反應完成後，加入HRP底物H2O2，在鹼性條件下，HRP催化H2O2，使發光底物魯米諾發生化學反應而發光。但現有的該項技術一是H2O2隨放置時間的延長而逐漸被破壞，二是產生的光信號不穩定，對檢測結果造成偏差。
發明內容
本發明的目的，在於克服上述不足，提供一種高穩定性的增強化學發光底物及其檢測方法。
本發明的技術方案如下。
一種高穩定性增強化學發光底物，該底物由特定比例的魯米諾、增強劑對碘苯酚、協同增強劑四苯硼鈉，氧化劑過氧化脲和H2O2，分別配製成的A液和B液組成。等量的A液和B液與免疫反應後的催化劑(如辣根過氧化物酶)標記物接觸，通過化學反應生成一種激發態的產物，它在回到基態的過程中，釋放出的能量轉變成光子從而產生發光現象。其優點是具有發光靈敏度高、穩定性好、結果準確、使用方便和成本低等。適用於全自動、半自動和手工分析。可廣泛用於臨床檢驗，生物學研究，法醫鑑定，農牧業及環境科學中對核酸及抗原抗體等生物大分子的檢測。
化學發光免疫分析方法因對環境無汙染、對人體無毒無害等綜合優勢和潛力，成為目前體外診斷試劑檢測方法中的佼佼者。
本發明的目的是進一步提高化學發光免疫分析底物的穩定性，為產品的工業化生產和使用帶來更大的方便性和靈活性。
附圖為0～4小時測定同一系列校準品劑量-反應曲線穩定性的示意圖。
附圖的時間取值及計算結果如下0miny＝-0.9755x+1.2635 150miny＝-0.9055x+1.1964R2＝0.998 R2＝0.997230miny＝-0.9205x+1.2034 180miny＝-0.909x+1.2062R2＝0.9977 R2＝0.997760miny＝-0.9151x+1.2052 240miny＝-0.9094x+1.2093R2＝0.9972 R2＝0.997890miny＝-0.9068x+1.198R2＝0.99具體實施方式
底物液製備0.5mol/L pH8.6的硼酸緩衝液分別配製A液和B液A液含魯米諾3.0mg/ml，增強劑對碘苯酚0.25mg/ml，協同增強劑四苯硼鈉0.5mg/ml；B液含過氧化脲0.4g/ml，H2O20.1g/ml。
貯存穩定性高。A液和B液分別貯存。2～8℃保存有效期2年。
反應穩定性高。在HRP標記的免疫反應後樣品管(孔)中加入等量混合的A液和B液，0～4小時測定的同一系列校準品劑量-反應曲線穩定(附圖)；0～4小時同樣品測定值變異係數小於5％，其對應的發光值變異係數(CV％)小於15％，參見附表0～4小時測定的同樣品測定值及其對應發光值穩定性。
附表
權利要求
1.一種高穩定性增強化學發光底物，其特徵在於該化學發光底物由A、B兩種液體組成，並且在在辣根過氧化物酶標記的免疫反應後被加入樣品管中等量混勻；用硼酸緩衝液分別配製A液和B液A液含魯米諾和魯米諾增強劑對碘苯酚和協同增強劑四苯硼鈉，B液含氧化劑過氧化脲和H2O2。
2.一種高穩定性增強化學發光底物的檢測方法，其特徵在於檢測方法包括以下步驟化學發光底物A液和B液的組成成分及製備；A液和B液分別貯存；臨用前A液和B液等量混合，在辣根過氧化物酶標記的免疫反應後加入樣品管孔中。
3.按照權利要求1所述的高穩定性增強化學發光底物及其檢測方法，其特徵在於其貯存穩定性，A液和B液分別貯存，2～8℃保存有效期2年；其反應穩定性4小時，包括在辣根過氧化物酶標記的免疫反應後樣品管孔中加入等量混合的A液和B液其發光值的穩定性和被測物濃度值的穩定性。
全文摘要
本發明涉及一種高穩定性增強化學發光底物，該高穩定性增強化學發光底物由A液和B液組成，並且在辣根過氧化物酶標記的免疫反應後被加入混勻。其中A液中含有魯米諾、增強劑對碘苯酚和協同增強劑四苯硼鈉；B液中含有過氧化脲和H
文檔編號G01N21/76GK1687751SQ20051007182
公開日2005年10月26日 申請日期2005年5月25日 優先權日2005年5月25日
發明者段虎 申請人:段虎