一種清熱解毒抗感染中藥及其製備方法

2023-10-06 00:56:54 3

專利名稱：一種清熱解毒抗感染中藥及其製備方法
技術領域：
本發明涉及中藥和中藥的製備方法，特別是涉及清熱解毒抗感染中藥和其製備方法。
臨床上用於治療一些急性感染性疾病的中藥為數不多，開發新的抗感染性疾病的中藥成為當前藥物研究的重要課題。
本發明的目的是提供一種清熱解毒抗感染中藥，使該其具有清熱作用專，解毒作用強，主治病症更廣，且特別適用於治療風溫肺熱證(包括感冒、流行性感冒和急性呼吸道感染等)，具有抗菌、抗病毒、抗內毒素、解熱、抗炎、調節免疫功能等特點，可作為臨床上治療一些感染性疾病，特別是急性感染性疾病的中藥。
本發明的另一個目的是提供本發明清熱解毒抗感染中藥的製備方法，使依該方法製備的中藥療效和作用明顯優於各原料藥材之單獨作用，也顯著優於本發明所使用的原料藥材按現有常規方法製備之製劑的作用和療效。
本發明提供的清熱解毒中藥，是以金銀花、大青葉、蒲公英、魚腥草為原料，按1∶1∶1∶1的重量配比製成的藥劑。該藥劑可以是任何一種藥劑學上所說的劑型，特別是顆粒劑，它是按以下方法製備的(1)提取揮髮油取魚腥草，加10～15倍量水，浸泡2小時，蒸餾5小時得揮髮油，溶解於5～10倍乙醇中，密封，避光保存備用；(2)取金銀花、大青葉、蒲公英加15倍量水浸泡45分鐘後，煎煮1.5小時，取汁，藥渣再加12倍量水煎煮1.5小時，取汁，合併煎液，靜置，過濾；濾液減壓濃縮至相對密度為1.10(60～65℃)，緩緩加入約2倍量乙醇，邊加邊攪拌，使含醇量為65％(ml/ml)，靜置沉澱；取上清液，沉澱用少量65％乙醇洗滌，過濾，洗液與濾液合併，減壓回收乙醇至無醇味，得相對密度為1.05(60～65℃)清膏；(3)水沉向清膏加水1倍量，混勻後靜置沉澱，過濾，棄渣留濾液調節pH值為酸性，可以20％氫氧化鈉溶液對水沉濾液調節pH值為5.0～5.5，減壓濃縮至相對密度為1.35～1.38(80～90℃)的清膏；(4)制軟材制顆粒取上述清膏1份，加入75～85％的乙醇，使含醇量約為15～20％，充分混勻，加糊精2.5份，天冬糖0.02份，制軟材，制顆粒，乾燥，其顆粒乾燥條件是溼顆粒烘烤溫度為60～70℃；幹顆粒烘烤溫度為60～70℃，烘烤時間為4小時；(5)將魚腥草揮髮油乙醇液均勻噴入顆粒中，密閉。
本發明中藥經藥效學研究證明有下列作用1．抗菌作用用液體稀釋法試管內孵育試驗，觀察本發明中藥對一些革蘭氏陽/陰性菌的抑制作用，結果發現本發明中藥對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、D群非腸球菌、肺炎克雷伯氏菌、傷寒桿菌、大腸埃希氏菌、綠膿假單胞菌、產氣腸桿菌等有一定的抑制作用(見表1)。表1 本發明中藥對常見細菌的抑制作用菌株菌名 試管號 1 2 34567來源藥物濃度(g/ml) 3.3 1.65 0.825 0.4 0.2 0.1 (對照)標金黃色葡萄球菌 - - - ++++準ATCC 25923株 綠膿假單胞菌 - - + ++++ATCC 27853金黃色葡萄球菌 - - - ++++表皮葡萄球菌 - - - --++臨 D群非腸球菌 - - - --++床 綠膿假單胞菌 - - + ++++分 奇異變形桿菌 - - - ++++離 肺炎克雷伯氏菌 - + + ++++株 產氣腸桿菌 - + + ++++大腸艾希氏菌 - - + ++++傷寒桿菌 - - + ++++硝酸鹽陰性桿菌 - - + ++ + +注+為細菌生長 -為細菌不生長2．抗病毒作用以病毒唑作為對照，從小鼠體內和組織培養可見本發明中藥能抗流感病毒(FM1)、呼吸道合胞病毒(RSV)、單純皰疹病毒(HSV)；體外試驗可見本品能抗巨細胞病毒(CMV)，但無抗柯薩奇病毒(COXB3)作用。結果見表2～9。表2 藥物在雞胚細胞上對FM1的抑制作用RDQ組(mg/ml)病毒唑組(mg/ml)FM1組 正常細胞組1.25 2.5 50.05mg/ml血凝效價 1∶128 1∶32 1∶8 0 0 0表3 藥物在昆明小鼠體內對FM1的抑制作用(各組n=10)RDQ組 病毒唑組FM1組 正常對照組1g/kg/d 2g/kg/d 4g/kg/d 10mg/kg/d保護率 0 30％ 70％ 90％100％100％P值/＞0.05＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01表4 藥物在組織培養上對RSV的抑制作用分組 n空斑單位(PFu/ml×104) 抑制率(x±S) (％)RSV+RDQ1.25mg/ml 10103.5±1.04*49.7RSV+RDQ2.5mg/ml 1045.8±1.17* 77.8RSV+RDQ5mmg/ml100* 100RSV+病毒唑0.05mg/ml 100* 100RSV對照組 10205.6±1.36 0正常細胞對照組10 0 /*與RSV組比較P＜0.01.表5 藥物在Balb/c小鼠體內對RSV的抑制作用分組n空斑單位(PFu/g×102) 抑制率(x±S)(％)RSV+1g/kg/d RDQ1029.5±1.49* 35.8RSV+2g/kg/d RDQ1014.5±0.97* 68.4RSV+4g/kg/d RDQ100*100RSV+10mg/kg/d病毒唑100*100RSV對照組 1045.9±1.34 0正常小鼠對照組 100 /*與RSV組比較P＜0.01.表6 藥物在Vero細胞上對HSV-I的抑制作用(各組n=4)熱毒清組無環鳥苷組(mg/ml) (mg/ml)病毒組正常對照組5 2.5 1.25 0.625 0.3125 1 0.5 0.25 0.125 0.0625 0.03125CPE 0 02 4 4 0 0 0 0 24 40注CPE(細胞病變)表7 藥物在昆明小鼠體內對HSV-I的抑制作用(各組n=10)熱毒清 無環鳥苷(g/kg/d)(mg/kg/d) 病毒組 正常小鼠
2 4 15 30保護率(％)0 60*60* 80* 0100*與病毒組比較P＜0.01表8 藥物在HEL細胞上對CMV AD169的抑制作用(各組n=4)本發明中藥組(mg/ml) 丙氧鳥苷組(mg/ml) 病毒組 正常細胞對照20 10 5 2.5 1.25100 50 25 12.5 6.25CPE 00 2 44 00 02 44 0表9 藥物在Vero細胞上對COXB3的抑制作用(各組n=4)本發明中藥組(mg/ml) 病毒唑組(mg/ml) 病毒組 正常細胞組5 2.5 1.25 0.625 0.1 0.05 0.025 0.0125 0.0625CPE 34440002 4403.抗內毒素作用體外試驗在電鏡下觀察到本發明中藥能使大腸桿菌O111B4內毒素的網狀結構解聚，呈杆狀、短片狀。體內實驗塑制內毒素性彌散性血管內凝血(DIC)家兔模型，可見本發明中藥能明顯減少腎小球微血栓的形成數，和降低腎小球微血栓的密度。從體內、外實驗表明本發明中藥具有抗內毒素作用(見表10～11)。表10 本發明中藥體外對內毒素作用的電鏡觀察結果處理每次觀察 各次發現被裂解內毒素的網眼數 平均發現被裂解 結果網眼數 第一次第二次第三次 內毒素的網眼數 判定Tris buffer5×21121.33(-)本發明中藥 5×27787.33(+)Polymyxin B5×210 10 10 10 (+)注(-)無裂解作用 (+)有裂解作用； Polymyxin B(多粘菌素B)表11本發明中藥對內毒素性DIC家兔腎小球微血栓形成的影響腎小球 DIC發生率含微血栓腎小球腎小球含微血栓密度觀察數％％(x±SE) ％(x±SE)蒸餾水組 10×5090.0 74.2±3.8 56.5±1.2本發明中藥小劑量組9×5077.866.7±4.9* 54.6±1.4本發明中藥中劑量組10×50 70.056.0±4.9**49.5±1.2**本發明中藥大劑量組9×5066.760.4±5.3**51.1±1.4**Dex組10×50 40.030.2±4.2**23.1±0.9**正常對照組8×500 00注與蒸餾水組比*P＜0.05**P＜0.01；Dex(地塞米松)4．解熱作用給日本大耳白兔注射大腸桿菌O111B4內毒素，和給大鼠注射啤酒酵母菌致熱，實驗表明本發明中藥有明顯的解熱作用(見表12～13)。
表12本發明中藥對LPS所致家兔發熱的解熱作用(△T,X±S,℃)(每組n=6)給藥後△T組別劑量 給藥前△T(g/kg) 1h2h3h4h 5h蒸餾水 1.41±0.18 1.87±0.25 1.82±0.29 1.08±0.38 0.60±0.33 0.40±0.27丨5 1.34±0.24 1.40±0.53 1.40±0.28 0.84±0.44 0.58±0.30 0.50±0.31本發明中藥10 1.37±0.27 1.02±0.26* 1.02±0.39* 0.67±0.34 0.48±0.26 0.34±0.2120 1.40±0.20 1.54±0.53 1.54±0.44 0.74±0.33 0.36±0.21 0.21±0.30阿斯匹林0.2 1.42±0.25 0.55±0.24**0.50±0.42**0.25±0.23**0.28±0.21 0.28±0.21與蒸餾水比較 *P＜0.05 **P＜0.01表13 本發明中藥對啤酒酵母致大鼠體溫升高的降溫作用(△T，攽X敀±S,℃)(n=8)劑量發熱後 給藥後△T組別 (g/kg)△T1h 2h 3h 4h 5h蒸餾水1.34±0.28 1.44±0.31 1.33±0.35 1.34±0.42 1.27±0.33 1.02±0.22丨34.5 1.28±0.25 1.29±0.35 1.03±0.23 0.80±0.29*0.77±0.25**0.62±0.34*本發明中藥23.0 1.29±0.16 1.28±0.32 1.09±0.30 1.01±0.22 0.98±0.25 0.91±0.2515.3 1.34±0.12 1.38±0.22 1.29±0.37 1.20±0.44 1.08±0.42 1.03±0.32阿斯匹林0.2 1.34±0.24 1.03±0.32*0.63±0.32**0.66±0.33**0.44±0.32***0.31±0.22***與蒸餾水組比較*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.0015．抗炎作用給大鼠足蹠皮下注射角叉菜致炎性水腫，可見本發明中藥能抑制該模型的急性炎症反應；給大鼠背部皮內注射組織胺，可見本發明中藥能抑制組織胺所致毛細血管通透性增加。表明本發明中藥有明顯的抗炎作用(見表14～15)。
表14本發明中藥對角叉萊膠致大鼠足趾腫帳的影響(n=8)劑量腫脹度 (ml,x±s)組別(g/kg)1h 2h 4h 6h蒸餾水 0.17±0.070.34±0.08 0.67±0.160.79±0.19丨48.0 0.09±0.050.20±0.13*0.49±0.100.63±0.15本發明中藥30.0 0.16±0.040.25±0.12 0.63±0.130.69±0.2018.8 0.16±0.090.27±0.13 0.66±0.180.80±0.17強的松0.02 0.08±0.04** 0.07±0.04**** 0.30±0.22** 0.48±0.23*注與蒸餾水組比較 *P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001表15本發明中藥對組織胺所致大鼠皮膚毛細血管通透性增加的抑制作用(n=9)組別 劑量(g/kg) 吸收度(A)X±S蒸餾水 0.31±0.15480.19±0.07*本發明中藥 丨 300.18±0.08*18.8 0.21±0.06強的松0.02 0.17±0.07*與蒸餾水組比較 *P＜0.056．對免疫功能的影響給小鼠腹腔注射環磷醯胺(CTX)作為免疫抑制的模型，觀察本發明中藥對下述指標的影響，可見其有良好的免疫調節作用(1)腹腔巨噬細胞吞噬試驗本發明中藥組巨噬細胞的吞噬率和吞噬指數明顯高於CTX組，表明本發明中藥有逆轉巨噬細胞吞噬功能低下的作用(見表16)。
表16.本發明中藥(JY)對小鼠腹腔巨噬細胞功能的影響(X±S)組別例數吞噬率(％)吞噬指數正常對照 1262.70±20.39 3.57±0.93CTX 1137.19±9.22*** 3.57±0.73CTX+LMS 1158.00±15.37△△4.51±1.00△CTX+JY小劑量 1142.72±12.92 4.83±0.89△△CTX+JY中劑量 1167.56±10.98△△△5.37±1.17△△△CTX+JY大劑量 1168.05±10.15△△△6.27±1.53△△△***P＜0.001，與正常對照組比較△P＜0.05 △△P＜0.01 △△△P＜0.001，與CTX組比較(1)小鼠血清溶菌酶含量測定JY組血清溶菌酶含量明顯高於CTX組，表明JY有逆轉血清溶菌酶含量低下的作用(見表17)。表17.本發明中藥(JY)對小鼠血清溶菌酶含量的影響(X±S)組 別 例數溶菌酶含量(u/ml)正常對照122140.60±330.93CTX 111582.81±305.10**CTX+LMS 112066.63±283.60△△CTX+JY小劑量111687.44±624.53CTX+JY中劑量111721.15±312.64CTX+JY大劑量112007.80±419.00△△與正常組比較 **P＜0.01，與CTX組比較 △△P＜0.01(3)對抗體形成細胞的影響本發明中藥組抗體形成細胞明顯高於CTX組，表明本發明中藥有逆轉抗體形成細胞功能低下的作用(見表18)。
表18.本發明中藥(JY)對小鼠抗體形成細胞的影響(X±S)組別 例數 OD值正常對照 141.428±0.229CTX 140.885±0.050***CTX+LMS 140.930±0.050△CTX+JY小劑量140.920±0.030△CTX+JY中劑量140.928±0.038△CTX+JY大劑量140.900±0.030與正常對照組比較 ***P＜0.001，與CTX組比較 △P＜0.05(4)遲髮型超敏反應-小鼠足墊腫脹試驗本發明中藥(JY)組足墊腫脹厚度明顯高於CT組，表明本發明中藥(JY)有逆轉遲髮型超敏反應低下的作用(見表19)。
表19.本發明中藥(JY)對小鼠遲髮型超敏反應的影響(X±S)組別 例數足墊腫脹厚度(mm)正常對照15 0.757±0.230CTX14 0.434±0.260*CTX+LMS 150.987±0.226△△△CTX+JY小劑量150.941±0.245△△△CTX+JY中劑量150.917±0.234△△△CTX+JY大劑量150.814±0.260△△△與正常對照組比較*P＜0.001，與CTX組比較△△△P＜0.001經急性毒性試驗和長期毒性試驗還證明，本發明之中藥製劑無毒性和明顯的副作用，使用安全。本發明中藥四種原料均系無毒藥物，亦無十八反及十九畏的配伍禁忌，且非妊娠禁忌用藥，對於老人、幼兒、孕婦用之均無顧慮，使用是安全的。
本發明中藥的臨床療效治療炎性急腹症200例有效率為82.5％，治療多種急性細菌/病毒感染，有效率為85.8％，顯效率均在70％左右。
綜合以上多方面實驗表明，本發明之中藥臨床上其所以治療一些感染性疾病有良好效果，正由於其具有抗菌、抗病毒、抗內毒素、解熱、抗炎，特別是與其能調節免疫功能等作用的結果，而本發明中藥所用各單味原料藥，以及現有製備方法之藥劑則無如此顯著作用和療效。


圖1為本發明藥物製備方法工藝流程圖。
實施例(1)取處方中的魚腥草，加水10～15倍浸泡2小時，蒸餾5小時，收集揮髮油0.5ml/kg以上，溶解於5～10倍乙醇中，密封，避光保存備用。
(2)取處方中的金銀花、大青葉、蒲公英加15倍量水浸泡45分鐘後，煎煮1.5小時，取汁，藥渣再加12倍量水煎煮1.5小時，取汁，合併煎液，靜置，過濾；濾液減壓濃縮至相對密度為1.10(60～65℃)，緩緩加入約2倍量乙醇，邊加邊攪拌，使含醇量為65％(ml/ml)，靜置沉澱；取上清液，沉澱用少量65％乙醇洗滌，過濾，洗液與濾液合併，減壓回收乙醇至無醇味、相對密度為1.05(60～65℃)；加水1倍量充分攪拌，混勻，靜置沉澱完全，過濾，濾液用20％氫氧化鈉溶液調查pH值為5.0～5.5，減壓濃縮至相對密度為1.35～1.38(80～90℃)的清膏。取清膏1份，加入75～85％的乙醇，使含醇量約為15～20％，充分混勻，加糊精2.5份，天冬糖0.02份，制軟材，制顆粒，60～70℃乾燥，整粒，置遠紅外烘烤箱中於60～70℃乾燥4小時。
(3)將魚腥草揮髮油乙醇液均勻噴入顆粒中，密閉24小時。
(4)檢驗，合格後分裝於鉛塑複合膜袋中，每袋10g。
權利要求
1．一種清熱解毒抗感染中藥，其特徵在於它是以金銀花、大青葉、蒲公英、魚腥草為原料，按1∶1∶1∶1的重量配比製成的藥劑。
2．根據權利要求1所述的清熱解毒抗感染中藥，其特徵在於所說的藥劑是任何一種藥劑學上所說的劑型。
3．根據權利要求2所述的清熱解毒抗感染中藥，其特徵在於所說的藥劑是顆粒劑。
4．根據權利要求3所述清熱解毒抗感染中藥的製備方法，其特徵在於(1)提取揮髮油取魚腥草，加10～15倍量水，浸泡2小時，蒸餾5小時得揮髮油，溶解於5～10倍乙醇中，密封，避光保存備用；(2)取金銀花、大青葉、蒲公英加15倍量水浸泡45分鐘後，煎煮1.5小時，取汁，藥渣再加12倍量水煎煮1.5小時，取汁，合併煎液，靜置，過濾；濾液減壓濃縮至相對密度為1.10(60～65℃)，緩緩加入約2倍量乙醇，邊加邊攪拌，使含醇量為65％(ml/ml)，靜置沉澱；取上清液，沉澱用少量65％乙醇洗滌，過濾，洗液與濾液合併，減壓回收乙醇至無醇味，得相對密度為1.05(60～65℃)清膏；(4)水沉向清膏加水1倍量，混勻後靜置沉澱，過濾，棄渣留濾液調節pH值為酸性，減壓濃縮至相對密度為1.35～1.38(80～90℃)的清膏；(3)制軟材制顆粒取上述清膏1份，加入75～85％的乙醇，使含醇量約為15～20％，充分混勻，加糊精2.5份，天冬糖0.02份，制軟材，制顆粒，乾燥；(4)將魚腥草揮髮油乙醇液均勻噴入顆粒中，密閉。
5.根據權利要求4所述的清熱解毒抗感染中藥的製備方法，其特徵在於所說的顆粒的乾燥條件是溼顆粒烘烤溫度為60～70℃；幹顆粒烘烤溫度為60～70℃，烘烤時間為4小時。
6．根據權利要求4所述的清熱解毒抗感染中藥的製備方法，其特徵在於是以20％氫氧化鈉溶液對水沉濾液調節pH值為5.0～5.5。
全文摘要
一種清熱解毒抗感染中藥及其製備方法,以金銀花、大青葉、蒲公英、魚腥草為原料,按1:1:1:1的重量配比製成藥劑,具有清熱解毒、清肺涼血、消腫排膿、利尿通淋作用,藥效學研究證明其能抗菌、抗病毒、抗內毒素、解熱、抗炎,並能調節免疫功能,有利於臨床治療溫熱病(包括一些急性感染性疾病),特別是風溫肺熱證(包括感冒、流行性感冒、呼吸道感染等)。本製劑臨床有效,價格低廉,無毒副作用和不良反應。
文檔編號A61P31/00GK1302638SQ0011430
公開日2001年7月11日 申請日期2000年1月1日 優先權日2000年1月1日
發明者李鳴真, 葉望雲, 方建國, 陸付耳, 王文清, 楊明煒, 蔣平, 王開富, 徐麗君 申請人:同濟醫科大學附屬同濟醫院