一種調控傘裙追寄蠅滯育的方法

2023-10-06 04:09:19 3

一種調控傘裙追寄蠅滯育的方法
【專利摘要】本發明公開了一種調控傘裙追寄蠅滯育的方法。該方法包括如下步驟：1）將待進行滯育誘導的傘裙追寄蠅置於溫度17±1℃、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導，使所述傘裙追寄蠅進入滯育態；2）將步驟1）得到的進入滯育態的所述傘裙追寄蠅轉入溫度4℃、黑暗的條件下貯存；3）步驟2）貯存結束後，將所述傘裙追寄蠅轉入溫度23±1℃、光周期L14:D10至L16:D8的條件下，恢復發育。該方法滯育誘導率100%，滯育後的貯存期可達120天，滯育解除後20天可得到羽化的成蠅。本發明對傘裙追寄蠅的大規模擴繁，延長其產品貨架期及在田間的防控作用時間，提高害蟲防治效率，加深對天敵昆蟲發育機制的認識，探索昆蟲對環境的適應機制及進化途徑等均具有重要意義。
【專利說明】一種調控傘裙追寄蠅滯育的方法【技術領域】
[0001]本發明屬於生物【技術領域】，涉及一種調控傘裙追寄蠅滯育的方法。
【背景技術】
[0002]天敵昆蟲是一類寄生或捕食其他昆蟲的昆蟲，它們在農田、林區和牧場中控制著害蟲的發展和蔓延。我國天敵昆蟲資源十分豐富，具有強有力的開發應用的物質基礎。通過發展天敵昆蟲規模化生產技術，採用室內大量繁殖天敵昆蟲方法和大量釋放的技術，可增加田間初始天敵的種群數量，結合生物農藥和生態技術，形成較為完整的病蟲害防治技術體系，替代或減少化學農藥的使用次數與用量，保護環境和生物多樣性，確保農產品生產安全。因此，研究天敵昆蟲人工飼養規模化、商品化生產等具有重要的應用和推廣價值。開展昆蟲滯育的深人研究，可為人類能夠了解昆蟲發育和消長的規律，最終為無公害治理害蟲、利用益蟲提供科學理論依據。
[0003]草地螟Loxostege sticticalis L.屬鱗翅目，螟蛾科類昆蟲,是一種世界性分布的農牧業害蟲，由於其寄主植物種類繁多，是一種間歇性暴發和具有毀滅性的遷飛性害蟲。在草地螟寄生昆蟲中，寄生蠅對草地螟的寄生率要高於寄生蜂，對寄主種群起到重要調控作用。草地螟的天敵類群中以寄生蠅最為豐富，是控制草地螟發生危害及種群動態的重要因素。
[0004]傘裙追寄妮(Exoristacivilis Rond.)屬雙翅目寄妮科(Diptera:Tachinidae),是完全變態類寄生蠅，發育過程中共有卵、幼蟲、蛹和成蟲這四個蟲態(發育階段)，每個蟲態的發育特點各有不同，如卵、蛹不食不動；低齡幼蟲只能在寄主體內取食，老熟幼蟲則從蟲寄主體內爬出，12h—24h內即化蛹，進入不食不動狀態。成蟲則具飛行能力翅膀，可以靈活飛翔。
·[0005]傘裙追寄蠅是我國草地螟幼蟲上的重要優勢寄生性天敵之一。雖然已經克服了傳統人工繼代繁育的弊端，可以使傘裙追寄蠅能進行周年性累積繁育。但是採用傳統連代繁殖的方法，蠅容易退化，而且不易長期保存，給田間釋放帶來了很大的困難。通過改進繁殖技術，人為誘導該蠅進入滯育狀態，可使保存期大大延長，因此利用低溫儲藏滯育蟲繭技術，控制天敵發育時間，這對於周年擴繁天敵昆蟲意義極其重要。通過把握各世代的繁育進程以及準確的預測目標害蟲的發生時間和發生數量，在害蟲發生時，能及時的釋放天敵昆蟲，從而達到害蟲防治的效果。

【發明內容】

[0006]本發明的目的是提供一種調控傘裙追寄蠅滯育的方法。
[0007]本發明所提供的調控傘裙追寄蠅滯育的方法，具體包括如下步驟:
[0008](I)將待進行滯育誘導的傘裙追寄蠅置於溫度17±1°C、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導，使所述傘裙追寄蠅進入滯育態；
[0009](2)將步驟(1)得到的進入滯育態的所述傘裙追寄蠅轉入溫度4°C、黑暗的條件下貯存；
[0010](3)步驟(2)貯存結束後，將所述傘裙追寄蠅轉入溫度23±1°C、光周期L14:D10至L16:D8的條件下，恢復發育。
[0011 ] 本發明的再一個目的是提供一種傘裙追寄蠅滯育誘導及貯存方法。
[0012]本發明所提供的傘裙追寄蠅滯育誘導及貯存方法，具體可包括如下步驟:
[0013](I)將傘裙追寄蠅置於溫度17±11:、光周期1^8:016至1^12:012的條件下進行誘導，使所述傘裙追寄蠅進入滯育態；
[0014](2)將步驟(1)得到的進入滯育態的所述傘裙追寄蠅轉入溫度4°C、黑暗的條件下貯存。
[0015]本發明的另一個目的是提供一種傘裙追寄蠅滯育誘導方法。
[0016]本發明所提供的傘裙追寄蠅滯育誘導方法，具體可包括如下步驟:將傘裙追寄蠅置於溫度17±1°C、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導，使所述傘裙追寄蠅進入滯育態。
[0017]對於上述本發明所提供的三種方法，在本發明中，步驟(1)中，所述溫度具體為16°C、17°C或 180C ;所述光周期具體為 L8:D16、L10:D14 或 L12:D12。
[0018]對於上述本發明所提供的三種方法，步驟(1)中，所述條件中的光照強度為4000-5000LX ;所述條件中的空氣相對溼度為60%-70%。
[0019]對於上述本發明所提供`的三種方法，步驟(1)中，所述待進行滯育誘導的傘裙追寄蠅為傘裙追寄蠅的卵或幼蟲；對所述傘裙追寄蠅進行滯育誘導的時間至少涵蓋所述傘裙追寄蠅的幼蟲期。
[0020]具體的，在本發明中，步驟(1)中，所述「將待進行滯育誘導的傘裙追寄蠅置於溫度17±1°C、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導」為:將卵期的所述傘裙追寄蠅置於溫度17±1°C、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導，於蛹期或成蟲期將所述傘裙追寄蠅從所述溫度17±11:、光周期1^8:016至1^12:012的條件下取出。
[0021]在上述方法的步驟(2)中，所述貯存的時間可為120天以內，最好為60天以內，如30-60天。所述條件中的空氣相對溼度為60%-70%，如70%。
[0022]在上述方法的步驟(3)中，所述恢復發育的時間可為20天，20天後所述傘裙追寄蠅即可羽化為成蟲。所述條件中的光照強度為5000LX ;所述條件中的空氣相對溼度為60%-70%，如 70%ο
[0023]在本發明中，對所述傘裙追寄蠅進行滯育誘導、滯育維持或滯育解除時的寄主為草地螟,如4齡末~5齡初的草地螟。
[0024]本發明所提供的調控傘裙追寄蠅滯育的方法，滯育誘導率近100%，滯育後的貯存期可達120天，滯育解除後20後天可得到羽化的成蠅。本發明不僅有助於生產實踐中促進傘裙追寄蠅的大規模擴繁，延長其產品貨架期及在田間的防控作用時間，也有助於掌握天敵昆蟲的發育特點，提高害蟲防治效率。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0025]圖1為溫度和光周期對傘裙追寄蠅滯育的影響。
[0026]圖2為16°C和18°C時傘裙追寄蠅的滯育誘導的臨界光周期。【具體實施方式】
[0027]下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規方法。
[0028]下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。
[0029]供試蟲源:
[0030]傘裙追寄蠅:記載於「相紅燕，劉愛萍，高書晶，徐林波，劉長仲.草地螟優勢寄
生性天敵-傘裙追寄蠅生物學特性研究[J].草業學報，2013，22(3):92-98」一文中，
公眾可從中國農業科學院草原研究所獲得。傘裙追寄蠅成蟲在240ml的一次性透明水杯中飼養，杯口用紗網覆蓋，紗網上縫有脫脂棉球，並且用15% (體積分數)蜂蜜水浸溼。
[0031]草地螟:記載於「吳晉華、劉愛萍等.人工飼料對草地螟消化酶活性及羧酸酯酶mRNA表達量的影響[J],草地學報，2012，20 (6):: 169-1174」 一文中，公眾可從中國農業科學院草原研究所獲得。將草地螟卵置於置有濾紙的半徑為15cm的玻璃培養皿中，其中濾紙應保持溼潤。待草地螟孵化後，用新鮮灰菜葉或苜蓿葉飼餵草地螟，直至草地螟幼蟲為3齡時，將幼蟲轉於 長X寬=15cmX Ilcm的塑料盒中飼養，3-5齡幼蟲所處環境保持在60%左右。每天飼餵1-2次，並及時更換飼料並篩除蟲糞。為了減少幼蟲的死亡，應儘量減少更換葉片時對幼蟲的刷傷或撥動，採用輕輕抖動或震蕩葉片使幼蟲自行脫落到新鮮葉片上。
[0032]試驗儀器及材料
[0033]溫度和光周期對傘裙追寄蠅滯育誘導的影響試驗均在人工氣候箱(SPX-3001-G型，上海博訊實業有限公司醫療設備廠)內進行，人工氣候箱溫度設置誤差為± 1°C，相對溼度設置誤差為±5%。草地螟幼蟲及傘裙追寄蠅的飼養均在自製養蟲籠中進行。另需平底試管(6cmX 1.5cm)，水銀溫度計，毛筆，脫脂棉，橡皮圈，託盤、培養皿、保鮮膜、蛭石等若干。
[0034]下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規方法。
[0035]下述實施例實施數據分析時，均利用DPS進行方差分析，差異顯著性檢驗採用Duncans新復極差法。
[0036]下述實施例中，光周期Lx:Dy表示每天光照時長X小時,黑暗時長y小時，x+y=24。光周期LL表示每天光照時長24小時，黑暗時長O小時；光周期DD表示每天光照時長O小時，黑暗時長24小時。
[0037]下述實施例均採用國際通用的寄生蠅滯育判斷標準，基本原理是基於有效積溫法貝U，當某寄生蠅的某蟲態在最短髮育歷期的三倍時間內仍未完成發育，即認定是進入滯育狀態。更加具體的，本發明中判定傘裙追寄蠅是否進入滯育狀態是按照如下方法確定的:若傘裙追寄蠅「幼蟲」這一蟲態在最短髮育歷期的三倍時間(即27天)內仍未完成發育，即自卵孵化成幼蟲時起，在27天內傘裙追寄蠅的幼蟲未能進入「蛹」這一蟲態，則認定傘裙追寄蠅進入滯育狀態。
[0038]實施例1、傘裙追寄蠅的滯育誘導
[0039]一、傘裙追寄蠅滯育溫度和光周期的確定
[0040]設置4個不同溫度(14°〇、171:、211:和25 °C )和5個不同光周期(L8:D16、L10:D14、L12:D12、L14:D10、L16:D8)，共20個處理，每個處理30頭4齡末~5齡初的健壯
草地螟幼蟲(寄主)，重複3次。將交尾Id後的傘裙追寄蠅雌蠅和草地螟幼蟲一同置於養蟲盒中，放入不同光周期和溫度處理的人工氣候箱中(其中，光照時的光照強度為4000~5000LX、空氣相對溼度為60%-70%)，對傘裙追寄蠅進行滯育誘導(滯育誘導自「卵」這一蟲態開始)，誘導10-12天。誘導完成後，轉入正常的飼養條件，即23°C、L16:D8、空氣相對溼度為60%的光照培養箱中進行飼養，觀察記錄各處理組傘裙追寄蠅的滯育情況，以及蟲體發育情況。
[0041]結果如表1和圖1所示，光周期和溫度是傘裙追寄蠅滯育誘導的主要環境影響因子。無論是溫度還是光周期對傘裙追寄蠅滯育率都有顯著的影響。17°C時滯育率最高，SP17°C為最佳滯育溫度。低於17°C，幼蟲活動遲緩、僵硬。死亡數增加。在21°C時，隨著光照時間的增加，滯育率逐漸下降；在251:時，不能誘導滯育。可見，低溫、短光照是誘導傘裙追寄蠅滯育的主要因素，溫度起主導作用，光周期只在一定的溫度範圍內起作用。
[0042]表1室內條件下溫度和光周期對傘裙追寄蠅滯育的影響
【權利要求】
1.一種調控傘裙追寄蠅滯育的方法，包括如下步驟: (1)將待進行滯育誘導的傘裙追寄蠅置於溫度17± I °C、光周期L8: D16至L12: D12的條件下進行誘導，使所述傘裙追寄蠅進入滯育態； (2)將步驟(1)得到的進入滯育態的所述傘裙追寄蠅轉入溫度4°C、黑暗的條件下貯存； (3)步驟(2)貯存結束後，將所述傘裙追寄蠅轉入溫度23±1°C、光周期L14:D10至L16:D8的條件下，恢復發育。
2.一種傘裙追寄蠅滯育誘導及貯存方法，包括如下步驟: (1)將傘裙追寄蠅置於溫度17±1°C、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導，使所述傘裙追寄蠅進入滯育態； (2)將步驟(1)得到的進入滯育態的所述傘裙追寄蠅轉入溫度4°C、黑暗的條件下貯存。
3.一種傘裙追寄蠅滯育誘導方法，包括如下步驟:將傘裙追寄蠅置於溫度17土1°C、光周期L8:D16至L12:D12的條件下進行誘導，使所述傘裙追寄蠅進入滯育態。
4.根據權利要求1-3中任一所述的方法，其特徵在於:步驟(1)中，所述待進行滯育誘導的傘裙追寄蠅為傘裙 追寄蠅的卵或幼蟲；對所述傘裙追寄蠅進行滯育誘導的時間至少涵蓋所述傘裙追寄蠅的幼蟲期。
5.根據權利要求1-4中任一所述的方法，其特徵在於:步驟(2)中，所述貯存的時間在120天以內。
6.根據權利要求5所述的方法，其特徵在於:步驟(2)中，所述貯存的時間在60天以內。
7.根據權利要求1-6中任一所述的方法，其特徵在於:步驟(3)中，所述恢復發育的時間為20天。
【文檔編號】A01K67/033GK103704178SQ201310703160
【公開日】2014年4月9日 申請日期:2013年12月19日 優先權日:2013年12月19日
【發明者】劉愛萍, 王育青, 徐林波, 高書晶, 劉雅學, 王建梅, 繆麗梅, 王寧, 夏明 , 康愛囯 申請人:中國農業科學院草原研究所