綜合調控波紋唇魚性腺成熟排卵方法
2023-10-08 06:49:14
專利名稱：綜合調控波紋唇魚性腺成熟排卵方法
技術領域：
本發明屬于波紋唇魚生殖調控產卵技術，是一種在室內水泥池中，人工控制光照、 水溫和水流，並綜合利用營養強化措施，促進波紋唇魚親魚性腺成熟排卵的方法。
背景技術：
波紋唇魚(俗稱蘇眉)(Cheilinus undulates)為大型隆頭魚科魚類，體重可 達209kg，主要分布於印度洋和太平洋，世界上最名貴的兩種海水魚之一(Cheilinus undulatus. In JUCN 2008. 2008 IUCN Red List of Threatened Species)。2004 年世界 自然與自然資源保護基金會(IUCN)在日內瓦將其列為包括老虎、亞洲象在內的10種瀕臨 滅絕的生物之一，同年《瀕危野生動植物種國際貿易公約》(CITES)將波紋唇魚列為禁止貿 易和限制貿易的水生物種(Sadovy，Y.，M, 2003. Rev. Fish Biol. Fish.)。波紋唇魚其口味 與品質已成為社會地位的象徵標誌，近年盛行用此魚烹製成佳餚以取代鮑魚、燕窩和魚翅 招待頂級賓客。其市場價值極高，養殖前景非常廣闊。鑑於波紋唇魚的養殖潛力和潛在的經濟、社會和生態效益，多年來，科技工作者對 波紋唇魚在基礎生理學和生態學方面進行了大量研究工作，主要有波紋唇魚攝食習性的 研究(Randall JE, Environ Biol Fish，1978)，波紋唇魚自然群體年齡組成及生長特性研 究(J. H. Choat，2006，Mar Ecol Prog Ser)，波紋唇魚染色體製備及核型的初步研究(中國 水產科學研究院黃海水產研究所，周麗青，漁業科學進展，2010年)，波紋唇魚不同組織5種 同工酶表達的差異(中國水產科學研究院南海水產研究所，區又君，南方水產，2009年)， 波紋唇魚消化系統的形態解剖與腸道上皮的掃描電鏡觀察(海南大學，王永波，海洋通報， 2010年)。至今國際上沒有進行波紋唇魚人工養殖(例如人工孵化生產)以減少漁業捕撈 的壓力的報導(IUCN 2008 Red List)。因此進行波紋唇魚人工繁殖與種質資源保護的研究 工作，既是滿足市場的需求也是減緩或避免此物種消亡的手段。2009年，波紋唇魚親魚人工 調控催熟技術獲得突破，為波紋唇魚養殖的開發和物種保護工作開展奠定了良好的基礎。波紋唇魚的繁殖主要有海上網箱自然產卵技術和室內水泥池人工誘導產卵技術。 採用海上網箱自然產卵技術可獲得波紋唇魚的受精卵，但是存在自然產卵的親魚數量少、 產卵期短、誘導產卵條件複雜獲得受精卵的數量少、收集受精卵困難等問題，同時受颱風、 赤潮、潮汐、海流、海水溫度的影響，在規模化苗種生產過程中尚不能普及推廣應用；採用激 素誘導方法同樣可以獲得受精卵，但是單純使用激素誘導獲得優質受精卵的技術不穩定， 同樣存在親魚性腺對激素效應時間各異，各批次卵子受精率和孵化率差異較大的問題，不 能滿足批量化苗種的生產需要。通常在人工溫度、光照和水流調控條件下，親魚性腺成熟排 卵，但是卵母細胞常常因營養物質的缺乏不能達到最終成熟，或者質量低下，影響優質受精 卵的獲得。營養強化是針對親魚卵母細胞發育所需營養物質進行專門的營養物質調控，可 促進親魚卵母細胞發育成熟，大大提高卵子質量。因此，利用溫度、光照、水流和營養綜合調 控波紋唇魚性腺最終發育成熟順利排卵，從而獲取優質受精卵。目前尚未見有相關報導。
發明內容
本發明的目的提供一種溫度、光照、水流和營養強化綜合調控波紋唇魚性腺成熟 排卵技術方法。本發明技術方案主要內容包括親魚優選、培育及飼料飼喂，水溫、光照和水流調控 親魚發育，營養強化促進性腺成熟排卵三方面一、親魚的優選和培育1、親魚優選選擇形態、體色正常、個體大、健康無傷的5齡以上雌性親魚，全長達45-85釐米， 體重2800-10000克；雄魚達10齡以上，全長75-100釐米，體重達8000-18000克。2、親魚培育及飼料飼餵親魚置於專用溫光調控培育池(80m3)內進行強化培育，親魚入池的性比為早古 =3 1，飼養密度1.2-1. 8kg/m2。培育水溫20 30°C，連續充氣、流水培育，換水率300%， 定時清池換水。水質條件溶解氧> 6. 0mg/L,PH 7. 6-8. 2，鹽度29-33。親魚的餌料以小黃 花魚、魷魚、雜蝦蟹為主。日投餵2次，日投餵量為魚體體重的2% _3%，及時清除殘餌、排 汙。二、水溫、光照、水流調控1、水溫調控在溫度、光照調控前，將波紋唇魚的培育水溫控制在23-25°C，光照強度為300LUX 左右；繁殖期到來前4個月，開始調控水溫。控溫方式每5天水溫緩慢降低1°C，直至降至 20°C後維持不變並停留10天。然後水溫從20°C開始回升，每5天水溫緩慢升高1°C，直至升 值至28°C，開始產卵時降低1°C後維持不變，定期觀察親魚性腺發育情況，日換水率300%。 每天12次監測水溫的變化，精確調控每天溫度變化在士0. 3°C範圍內。2、光照的調控在光照調控過程中，當水溫降至到20°C時開始進行光照調控。將親魚培育池完全 遮住自然光，在培育池水面1米高度處懸掛白熾燈，調節光照強度為300LUX。當水溫為20°C 時控制光照時間為10小時，以後每6天增加光照時間1小時，直至光照時間達到15小時並 維持不變，以定時器精確管理每天的光照時間。3、水流的調控模擬大潮汛海流調節法(升降水位加大流速)。檢查雌魚的卵徑大於0. 4mm、雄魚 成熟精子的數量足夠時，種魚準備交配。準備工作主要是對種魚養殖池的水文條件加以控 制，其方法為早上8時降低水位至水深50cm，維持4個小時後將水溫升高1 ;TC，中午12 時開始注入新鮮海水至水深2米，保持池水整晚不斷循環流動，直至種魚成熟排卵。三、營養強化調控親魚性腺成熟排卵在親魚性腺發育開始啟動後，在餌料中添加卵磷脂(每公斤魚餌料按照3g卵磷脂 添加)，促進親魚性腺進一步成熟。在親魚性腺發育至III期後，增加投餵沙蠶、活海蟹，沙 蠶和活海蟹交替隔天投餵一次，每次按照體重的2%投喂，強化親魚磷脂、卵黃蛋白、DHA及 EPA營養物質的攝入。待親魚性腺完全成熟後，人工擠壓親魚腹部獲得成熟的卵子，人工採 卵受精獲得受精卵。本發明與已有技術對比其特點
本發明綜合利用水溫、光照、水流、營養強化措施調控誘導波紋唇魚親魚性腺發育 成熟排卵，是一種連續完整的成套技術。親魚經營養強化後，卵子可達到最後成熟並排卵， 人工採卵獲得的卵子質量高，以人工採卵受精技術獲得批量優質受精卵，可保證苗種生產 的順利進行。本發明根據波紋唇魚性腺發育的生理生態規律，採用溫度(降溫_再升溫)、光照 調控法(逐漸延長光照時間)、模擬大潮汛海流調節法(升降水位加大流速)，調控親魚性 腺同步發育至四期，性腺發育成熟的親魚比率高達68%。本發明採用的專門的營養強化措施，包括沙蠶、海蟹和添加劑的使用。添加劑主要 成分為卵磷脂、複合維生素，沙蠶、活海蟹為高蛋白和高不飽和脂肪酸(DHA和EPA)的來源， 這些營養物質可充分促進卵母細胞發育所需卵黃蛋白和其它營養物質的獲取，有效促進親 魚卵母細胞的最終成熟和提升卵子質量。
圖1 溫光、營養綜合誘導波紋唇魚產卵期內產卵量；圖2 溫光、營養綜合誘導波紋唇魚產卵期內上浮卵率；圖3 溫光、營養綜合誘導波紋唇魚產卵期內受精率；圖4 溫光、營養綜合誘導波紋唇魚產卵期內孵化率。
具體實施例方式下面通過具體實施例結合附圖詳細敘述本發明的技術內容為了獲得波紋唇魚優質受精卵，於2008-2009年在煙臺基地，採取溫度、光照和營 養綜合調控措施，誘導波紋唇魚親魚性腺發育成熟，人工採卵受精獲得批量優質受精卵，具 體實施過程如下實驗方法包括親魚優選和培育；水溫、水流、光照調控親魚發育；營養強化促進 親魚成熟排卵；人工採卵受精獲取受精卵；實驗結果。1、親魚優選及培育實驗選擇波紋唇魚5-14齡親魚16尾(12早4 $ )，雌魚平均體重5260克，雄 魚平均體重11050克。親魚體形、體色正常，健康無損傷。親魚放入培育池(40m2，水深2 米)進行培育。培育用水為砂濾自然海水，水質條件為00>6.0!^/1，？!1 = 7.6-8.2，鹽度 29-33。親魚的飼料餌料以冰鮮小黃花魚、雜蝦和活海蟹為主。日投餵2次，日投餵量為魚 體體重的2% _3%，在繁殖季節餌料中添加卵磷脂和複合維生素(每公斤魚餌料按照3g卵 磷脂添加)，並保持較高換水率300% )，促進親魚性腺的發育，整個繁殖季節保持相同的投 餵率。投餵過程中及時清除殘餌、排汙。2.水溫、光照、水流調控措施在溫度、光照調控前，波紋唇魚的培育水溫控制在23-25°C，光照強度為300Lux左 右；繁殖期到來前4個月，開始調控水溫。控溫方式每5天水溫緩慢降低1°C，降至20°C後 維持不變並停留10天。然後水溫從20°C開始回升，每5天水溫緩慢升高1°C，直至升值至 28°C，開始產卵時降低1°C後維持不變，定期觀察親魚性腺發育情況。水溫靠熱電廠餘溫熱水和自然海水混合調節控制，日換水率300%。每天12次監測水溫的變化，精確調控每天溫 度變化在士0.3°C範圍內。在光照調控過程中，水溫降至到20°C時開始進行光照調控。將親魚培育池完全遮 住自然光，在培育池水面1米高度處懸掛白熾燈，調節光照強度為300LUX。當水溫為20°C 時控制光照時間為10小時，以後每6天增加光照時間1小時，直至光照時間達到15小時並 維持不變，以定時器精確管理每天的光照時間。模擬大潮汛海流調節法(升降水位加大流速)。種魚準備排卵季節，對種魚養殖池 的水文條件加以控制，其方法為早上8時降低水位至水深50cm，維持4個小時後將水溫升 高1 ;TC，中午12時開始注入新鮮海水至水深2米，並保持池水整晚不斷循環流動，直至 種魚成熟排卵。3.營養強化促進最終成熟和排卵在親魚性腺發育啟動後，開始在餌料中添加卵磷脂和複合維生素(每公斤魚餌料 按照3g卵磷脂添加)。在親魚性腺發育達到III期後，每天增加投餵沙蠶、活海蟹，沙蠶和 活海蟹交替隔天投餵一次，每次按照體重的2%投喂，強化親魚的蛋白、DHA及EPA等營養物 質的攝入。觀察到親魚性腺松生殖孔充血變紫紅色時，人工擠壓親魚腹部獲得成熟的卵子， 人工採卵受精獲得受精卵。4.人工採卵受精獲取受精卵性腺成熟的親魚排卵後並吸水膨脹，性腺明顯隆起，及時進行人工擠卵採集卵子。 將雌魚從生殖腺後端沿生殖腺向前端進行擠壓，獲得卵子置於乾燥潔淨的器皿內，然後擠 取成熟精子，以羽毛或玻璃棒攪拌均勻後加入海水，靜置10-15min，將沉卵和浮卵分離後， 上浮卵移入專用孵化設施進行孵化。5.實驗結果本實驗中，波紋唇魚親魚性腺成熟後人工採卵，獲得的卵子質量好，受精率高。親 魚性腺發育成熟率68%以上。本實驗共採得卵子2. 72公斤，其中上浮卵1.38公斤(見圖 1)，可採得卵子的期間長達83天，獲得優質受精卵數量多，上浮卵率48. 4% (見圖2)，卵子 受精率達到43. 5% (見圖3)，孵化率達到53. 5% (見圖4)。本發明提供的溫度、光照、水流和營養強化措施綜合調控產卵技術對波紋唇魚親 魚的產卵調控效果優良，可用於獲得批量優質受精卵，保障批量化苗種繁育的順利進行。
權利要求
一種綜合調控波紋唇魚性腺成熟排卵方法，其特徵在於它的方法包括親魚優選、培育及飼料飼喂，水溫、光照和水流調控親魚發育，營養強化促進性腺成熟排卵三方面(1)、親魚的優選和培育A、親魚優選選擇形態、體色正常、個體大、健康無傷的5齡以上雌性親魚，全長達45 85釐米，體重2800 10000克；雄魚達10齡以上，全長75 100釐米，體重達8000 18000克；B、親魚培育及飼料飼餵親魚置於80m3溫光調控培育池內進行強化培育，親魚入池的性比為♀∶♂＝3∶1，飼養密度1.2 2.0kg/m2；培育水溫20～30℃，連續充氣、流水培育，換水率300％，定時清池換水；水質條件溶解氧＞6.0mg/L，PH 7.6 8.2，鹽度29 33；親魚的餌料以小黃花魚、魷魚、雜蝦蟹為主；日投餵2次，日投餵量為魚體體重的2％ 3％，及時清除殘餌、排汙；(2)、水溫、光照、水流調控A、水溫調控在溫度、光照調控前，將波紋唇魚的培育水溫控制在23 25℃，光照強度為300Lux；繁殖期到來前4個月，開始調控水溫；控溫方式每5天水溫緩慢降低1℃，直至降至20℃後維持不變並停留10天；然後水溫從20℃開始回升，每5天水溫緩慢升高1℃，直至升值至28℃，開始產卵時降低1℃後維持不變，定期觀察親魚性腺發育情況，日換水率300％；每天12次監測水溫的變化，精確調控每天溫度變化在±0.3℃範圍內；B、光照的調控在光照調控過程中，當水溫降至到20℃時開始進行光照調控；將親魚培育池完全遮住自然光，在培育池水面1米高度處懸掛白熾燈，調節光照強度為300Lux；當水溫為20℃時控制光照時間為10小時，以後每6天增加光照時間1小時，直至光照時間達到15小時並維持不變，以定時器精確管理每天的光照時間；C、水流的調控模擬大潮汛海流調節法；種魚準備排卵季節對種魚養殖池的水文條件加以控制，其方法為早上8時降低水位至水深50cm，維持4個小時後將水溫升高1～3℃，中午12時開始注入新鮮海水至水深2米，保持池水整晚不斷循環流動，直至種魚成熟排卵；(3)、營養強化調控親魚性腺成熟排卵在親魚性腺發育開始啟動後，在餌料中添加卵磷脂每公斤魚餌料按照3g卵磷脂添加，促進親魚性腺進一步成熟；在親魚性腺發育至III期後，增加投餵沙蠶、活海蟹，沙蠶和活海蟹交替隔天投餵一次，每次按照體重的2％投餵；待親魚性腺完全成熟後，人工擠壓親魚腹部獲得成熟的卵子，人工採卵受精獲得受精卵。
全文摘要
一種綜合調控波紋唇魚性腺成熟排卵方法，包括親魚優選、培育和飼料投餵；水溫、光照和水流調控親魚發育、營養強化促進性腺成熟排卵。通過以上技術方法，篩選到人工催熟有效溫度、光照度以及水流速因子數據；篩選到人工催熟有效營養強化劑種類和劑量；篩選到適合波紋唇魚配子受精的時間；建立了波紋唇魚優質受精卵獲取的方法。本方法獲得波紋唇魚卵的受精率為20-86％，孵化率為30-78％；本發明具有先進、高效、實用、可靠的特點，在波紋唇魚苗種繁育上提供了一種溫度、光照、水流和營養強化綜合調控波紋唇魚性腺成熟排卵技術方法；在瀕危物種保護上具有重大應用價值和廣闊的推廣應用前景。
文檔編號A01K61/00GK101919359SQ20101026439
公開日2010年12月22日 申請日期2010年8月27日 優先權日2010年8月27日
發明者於宏, 劉新富, 曲江波, 楊志, 閻國江, 陳超, 雷霽霖, 高淳仁 申請人:中國水產科學研究院黃海水產研究所