一種鹽酸倍他司汀脂質體及其製備方法
2023-10-07 22:11:34 1
專利名稱：一種鹽酸倍他司汀脂質體及其製備方法
技術領域：
本發明涉及一種鹽酸倍他司汀脂質體及其製備方法，屬於藥物製劑及其製備方法技術領域。
背景技術：
鹽酸倍他司汀對腦血管、心血管，特別是對椎底動脈系統有較明顯的擴張作用，能增加心、腦及周圍循環血流量，改善血循環，並降低全身血壓，此外能增加耳蝸和前底血流量，從而消除內耳性眩暈，耳鳴和耳閉感，還能增加毛細血管通透性，促進細胞外液的吸收，消除淋巴內水腫；能對抗兒茶酚胺的縮血管作用及降低動脈壓，並有抑制血漿凝固及ADP誘導的血小板凝集作用，能延長大白鼠體外血栓形成時間，還有輕微的利尿作用。同時普通劑型的鹽酸倍他司汀存在一些不良反應如，偶有口乾、胃部不適、心悸、皮膚瘙癢等，個別病例偶有噁心、頭暈、頭脹、出汗等。脂質體具有類似生物膜的雙分子層結構，與細胞膜有高度的親和性。通過控制脂質體的粒徑將藥物輸送到特定的靶部位，可提高治療效果，降低藥物的副作用。脂質體是近年來受人們關注的靶向製劑，自60年代Rachanan等人首先將脂質體作為載體應用起，不斷有新的脂質體製劑問世，如脂質體公司(TLC)的阿黴素脂質體、順鉬脂質體。現在已有2個抗癌藥物和3個抗真菌藥物的脂質體製劑得到批准，其他尚有十多種藥物的脂質體製劑進入到臨床試驗階段。多年來，對脂質體在進一步提高藥物療效，降低毒性，提高穩定性等方面做了不少工作，並取得了顯著進展。植物留醇與磷脂含量之比是與生物膜流動性有關的一個重要結構因素，植物甾醇/磷脂的比值與膜的流動性呈反變關係，並影響膜脂相變溫度。並且植物留醇分子側鏈上都有一個亞乙基具有較強的抗氧化效應，阻斷了脂肪酸鏈的氧化反應。現已有以植物留醇為主成分的臨床藥物用於動脈粥樣硬化、高血脂症、冠狀動脈硬化性心臟病、胸悶、心悸等心血管障礙的防治。
發明內容
本發明涉及一種鹽酸倍他司汀脂質體的製備方法，同時指出了鹽酸倍他司汀脂質體在藥效學上的特點。本發明公開的一種鹽酸倍他司汀脂質體，其特徵在於包括鹽酸倍他司汀與脂質體製劑，其中，鹽酸倍他司汀5 30mg/mL ;脂質體製劑中包括卵磷脂、植物甾醇兩種脂質成分，其中，卵磷脂與植物留醇的質量比為3 :1 8 :1，鹽酸倍他司汀與總脂質成分的質量比為 I :1 I :15。本發明所述的鹽酸倍他司汀脂質體的製備方法，其特徵在於，步驟如下
(1)按質量比3:1 8 :1稱取卵磷脂、植物甾醇，然後將兩者用20 30mL 二氯甲烷溶解，完全溶解後，減壓蒸發至薄膜形成；
(2)將40 SOmL乙醚傾入脂質膜中，是薄膜完全溶於乙醚中；(3)配製含有鹽酸倍他司汀5 30mg/mL的磷酸鹽緩衝液，其pH為5.7 8. O ;
(4)將(2)(3)所述溶液混合均勻，超聲15 30分鐘；
(5)超聲後的混合溶液，置旋轉蒸發儀上減壓蒸發至全部有機試劑蒸發；
(6)將上述製得的混懸液通過高壓均質機，壓力為500 lOOObar，然後通過脂質體擠出儀(濾膜孔徑在O. 2 μ m 10 μ m之間)，即得鹽酸倍他司汀脂質體。
所述步驟(3)配製含有鹽酸倍他司汀5 30mg/mL的PBS緩衝液，其pH為5. 7 8. O。所述步驟(6)將上述製得的混懸液通過高壓均質機,壓力為500 IOOObar,然後通過脂質體擠出儀(濾膜孔徑在O. 2 μ m 10 μ m之間)，即得鹽酸倍他司汀脂質體，粒徑在
O.2 μ m 10 μ m 之間。所述的鹽酸倍他司汀脂質體，其特徵在於可製備成含有鹽酸倍他司汀脂質體的片劑、膠囊、口服液、注射液。 本發明的鹽酸倍他司汀脂質體平均粒徑在O. 2 μ m 10 μ m，鹽酸倍他司汀的濃度為5 30mg/mL，脂質體可是中性的，也可以帶正電荷或負電荷；包封率為50% 90%，pH值在5. 8 8. O,外觀為乳白色混懸液。本發明用植物留醇取代膽固醇來製備鹽酸倍他司汀脂質體。植物留醇性質與膽固醇類似，可以預防心血管疾病，臨床也已經有研究，但從未應用於脂質體製備工藝中。說明書中主要對比了植物留醇和膽固醇分別製備脂質體到達大鼠腦部藥物有效含量的差異，來說明植物留醇更加適合製備鹽酸倍他司汀脂質體。本發明的積極效果在於將鹽酸倍他司汀製成脂質體，能明顯增強藥效，可增加毛細血管通透力，使藥物到達腦血管的劑量增加，可用於提高美尼爾綜合症的治療效果，同時還可以降低胃腸道刺激，降低藥物不良反應，有助於減小胃部不適，噁心頭暈等副作用。同時本發明應用植物留醇取代傳統脂質體製備工藝的膽固醇來調節脂質體膜的流動性，可以提高脂質體的抗氧化能力。植物留醇主要是作為預防心血管疾病的功能性活性成分，本發明中植物甾醇可以輔助提高鹽酸倍他司汀的藥效。鹽酸倍他司汀脂質體具有較好的穩定性，能明顯增強藥效，可增加毛細血管通透力，使藥物到達腦血管的劑量增加，可用於提高美尼爾綜合症的治療效果，同時還可以降低胃腸道刺激，降低藥物不良反應，有助於減小胃部不適，噁心頭暈等副作用。本發明還應用植物留醇取代傳統脂質體製備工藝的膽固醇來調節脂質體膜的流動性，可以提高脂質體的抗氧化能力，對心血管、腦血管雙重疾病的有效治療。
圖I為鹽酸鹽酸倍他司汀標準曲線。具體實施方法
下面實施例用來進一步說明本發明，但本發明的內容並不局限於此。實施例I
本發明所述的製備方法
(I)按質量比3 1稱取卵磷脂、植物留醇，然後將兩者用20mL 二氯甲烷溶解，完全溶解後，減壓蒸發至薄膜形成；(2)將40mL乙醚傾入脂質膜中，是薄膜完全溶於乙醚中； (3)配製含有鹽酸倍他司汀5mg/mL的磷酸鹽緩衝液，其pH為5.7 ;
(4)將步驟(2)(3)所述溶液混合均勻，超聲15分鐘；
(5)超聲後的混合溶液，置旋轉蒸發儀上減壓蒸發至全部有機試劑蒸發；
(6)將上述製得的混懸液通過高壓均質機，壓力為500bar，然後通過脂質體擠出儀(濾膜孔徑為O. 4μ m)，即得鹽酸倍他司汀脂質體(實驗組一)。對照組製備方法
(1)按質量比3:1稱取卵磷脂、膽固醇，然後將兩者用20mL二氯甲烷溶解，完全溶解後，減壓蒸發至薄膜形成；
(2)將40mL乙醚傾入脂質膜中，是薄膜完全溶於乙醚中；
(3)配製含有鹽酸倍他司汀5mg/mL的磷酸鹽緩衝液，其pH為5.7 ;
(4)將步驟(2)(3)所述溶液混合均勻，超聲15分鐘；
(5)超聲後的混合溶液，置旋轉蒸發儀上減壓蒸發至全部有機試劑蒸發；
(6)將上述製得的混懸液通過高壓均質機，壓力為500bar，然後通過脂質體擠出儀(濾膜孔徑為O. 4μ m)，即得鹽酸倍他司汀脂質體(對照組一)。實施例2
本發明所述的製備方法
(1)按質量比4:1稱取卵磷脂、植物留醇，然後將兩者用25mL二氯甲烷溶解，完全溶解後，減壓蒸發至薄膜形成；
(2)將60mL乙醚傾入脂質膜中，是薄膜完全溶於乙醚中；
(3)配製含有鹽酸倍他司汀10mg/mL的磷酸鹽緩衝液，其pH為6.5 ;
(4)將步驟(2)(3)所述溶液混合均勻，超聲20分鐘；
(5)超聲後的混合溶液，置旋轉蒸發儀上減壓蒸發至全部有機試劑蒸發；
(6)將上述製得的混懸液通過高壓均質機，壓力為800bar，然後通過脂質體擠出儀(濾膜孔徑在O. 3 μ m之間)，即得鹽酸倍他司汀脂質體(實驗組二)。對照組製備方法
(1)按質量比4:1稱取卵磷脂、膽固醇，然後將兩者用25mL二氯甲烷溶解，完全溶解後，減壓蒸發至薄膜形成；
(2)將60mL乙醚傾入脂質膜中，是薄膜完全溶於乙醚中；
(3)配製含有鹽酸倍他司汀10mg/mL的磷酸鹽緩衝液，其pH為6.5 ;
(4)將(2)(3)所述溶液混合均勻，超聲20分鐘；
(5)超聲後的混合溶液，置旋轉蒸發儀上減壓蒸發至全部有機試劑蒸發；
(6)將上述製得的混懸液通過高壓均質機，壓力為800bar，然後通過脂質體擠出儀(濾膜孔徑在0. 3 μ m之間)，即得鹽酸倍他司汀脂質體(對照組二)。
實施例3
本發明所述的製備方法
(I)按質量比5 1稱取卵磷脂、植物留醇，然後將兩者用25mL 二氯甲烷溶解，完全溶解後，減壓蒸發至薄膜形成；(2)將60mL乙醚傾入脂質膜中，是薄膜完全溶於乙醚中；
(3)配製含有鹽酸倍他司汀20mg/mL的磷酸鹽緩衝液，其pH為6.8 ;
(4)將(2)(3)所述溶液混合均勻，超聲20分鐘；
(5)超聲後的混合溶液，置旋轉蒸發儀上減壓蒸發至全部有機試劑蒸發；
(6)將上述製得的混懸液通過高壓均質機，壓力為900bar，然後通過脂質體擠出儀(濾膜孔徑在O. 5 μ m之間)，即得鹽酸倍他司汀脂質體(實驗組三)。對照組製備方法
(1)按質量比5:1稱取卵磷脂、膽固醇，然後將兩者用25mL二氯甲烷溶解，完全溶解後，減壓蒸發至薄膜形成；
(2)將60mL乙醚傾入脂質膜中，是薄膜完全溶於乙醚中；
(3)配製含有鹽酸倍他司汀20mg/mL的磷酸鹽緩衝液，其pH為6.8 ;
(4)將(2)(3)所述溶液混合均勻，超聲20分鐘；
(5)超聲後的混合溶液，置旋轉蒸發儀上減壓蒸發至全部有機試劑蒸發；
(6)將上述製得的混懸液通過高壓均質機，壓力為900bar，然後通過脂質體擠出儀(濾膜孔徑在O. 5 μ m之間)，即得鹽酸倍他司汀脂質體(對照組三)。
實施例4
本發明所述的製備方法
(1)按質量比8:1稱取卵磷脂、植物留醇，然後將兩者用30mL 二氯甲烷溶解，完全溶解後，減壓蒸發至薄膜形成；
(2)將SOmL乙醚傾入脂質膜中，是薄膜完全溶於乙醚中；
(3)配製含有鹽酸倍他司汀30mg/mL的磷酸鹽緩衝液，其pH為8.O ;
(4)將(2)(3)所述溶液混合均勻，超聲30分鐘；
(5)超聲後的混合溶液，置旋轉蒸發儀上減壓蒸發至全部有機試劑蒸發；
(6)將上述製得的混懸液通過高壓均質機，壓力為lOOObar，然後通過脂質體擠出儀(濾膜孔徑在10 μ m之間)，即得鹽酸倍他司汀脂質體(實驗組四)。對照組製備方法
(1)按質量比8:1稱取卵磷脂、膽固醇，然後將兩者用30mL二氯甲烷溶解，完全溶解後，減壓蒸發至薄膜形成；
(2)將SOmL乙醚傾入脂質膜中，是薄膜完全溶於乙醚中；
(3)配製含有鹽酸倍他司汀30mg/mL的磷酸鹽緩衝液，其pH為8.O ;
(4)將(2)(3)所述溶液混合均勻，超聲30分鐘；
(5)超聲後的混合溶液，置旋轉蒸發儀上減壓蒸發至全部有機試劑蒸發；
(6)將上述製得的混懸液通過高壓均質機，壓力為lOOObar，然後通過脂質體擠出儀(濾 膜孔徑在10 μ m之間)，即得鹽酸倍他司汀脂質體(對照組四)。
以下實驗表明鹽酸鹽酸倍他司汀脂質體較普通劑型具有更高的生物利用度，可提高藥效，並且證明本發明提供的試劑及用量為最佳條件
I.色譜條件=Agilent HC-C18色譜柱，以乙腈醋酸混合溶液(12%硫酸10mL、l%四丁基氫氧化胺40mL及水650 mL,混合後加入2. 5g十二燒基硫酸鈉，溶解、搖勻，調節pH為3. 3) (28:72)為流動相，紫外檢測波長為260nm，理論板數按鹽酸鹽酸倍他司汀峰計算應不低於1500，進樣數針其RSD小於20%。2.取鹽酸鹽酸倍他司汀對照品約O. lg，加水溶解並定容至IOOmL即為貯備液。取貯備溶液I. 5,2. 0,2. 25,2. 5,2. 75mL,加流動相至25mL,取各濃度液10 μ L注入液相色譜儀，得出各自峰面積。以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標得回歸方程y=11977x-16799，R2=O. 9992。以上結果說明鹽酸鹽酸倍他司汀濃度在100 170 mg/mL的濃度範圍內線性關係良好。如圖I
3.取體重為180 220g雄性大鼠，隨機分為二組。一組按4. 32mg · kg—1的劑量灌胃給予鹽酸倍他司汀脂質體混懸液，另一組給予等劑量的市售鹽酸倍他司汀片劑。連續給藥 7天後，末次給藥Ih後，處死大鼠，取腦組織，用生理鹽水衝洗乾淨，濾紙吸乾，稱重；精密稱定後置於勻漿器中，加適量生理鹽水(內臟重量生理鹽水=Ig: IOmL)勻漿，取勻漿液全部置於離心管中，加2mL25%鹽酸溶液旋渦混合3分鐘,後置於40°C水浴中水解30分。放冷，加5mL去離子水，旋渦混合3分鐘，8000r · mirT1離心15min，吸取上清液，精密吸取20 μ L進樣，注入液相色譜儀，記錄峰面積。對照標註曲線得出各腦組織的鹽酸倍他司汀含量。4.結果
本發明所述的方法製備的鹽酸倍他司汀脂質體在給藥後，大鼠腦組織的藥物含量如表1,
表1實驗組大鼠腦組織鹽酸倍他司汀含量(η=10)
權利要求
1.一種鹽酸倍他司汀脂質體，其特徵在於包括鹽酸倍他司汀與脂質體製劑，其中，鹽酸倍他司汀5 30mg/mL ;脂質體製劑中包括卵磷脂、植物甾醇兩種脂質成分，其中，卵磷脂與植物甾醇的質量比為3 :1 8 :1，鹽酸倍他司汀與總脂質成分的質量比為I :1 I :15。
2.權利要求I所述的鹽酸倍他司汀脂質體的製備方法，其特徵在於，步驟如下 (1)按質量比3:1 8 :1稱取卵磷脂、植物甾醇，然後將兩者用20 30mL 二氯甲烷溶解，完全溶解後，減壓蒸發至薄膜形成； (2)將40 SOmL乙醚傾入脂質膜中，是薄膜完全溶於乙醚中； (3)配製含有鹽酸倍他司汀5 30mg/mL的磷酸鹽緩衝液，其pH為5.7 8. O ; (4)將(2)(3)所述溶液混合均勻，超聲15 30分鐘； (5)超聲後的混合溶液，置旋轉蒸發儀上減壓蒸發至全部有機試劑蒸發； (6)將上述製得的混懸液通過高壓均質機，壓力為500 lOOObar，然後通過脂質體擠出儀(濾膜孔徑在O. 2 μ m 10 μ m之間)，即得鹽酸倍他司汀脂質體。
3.權利要求2所述的鹽酸倍他司汀脂質體的製備方法，其特徵在於所述步驟(3)配製含有鹽酸倍他司汀5 30mg/mL的PBS緩衝液，其pH為5. 7 8. O。
4.權利要求2所述的鹽酸倍他司汀脂質體的製備方法，其特徵在於所述步驟(6)將上述製得的混懸液通過高壓均質機，壓力為500 lOOObar，然後通過脂質體擠出儀(濾膜孔徑在0. 2 μ m 10 μ m之間)，即得鹽酸倍他司汀脂質體，粒徑在0. 2 μ m 10 μ m之間。
5.權利要求I所述的鹽酸倍他司汀脂質體，其特徵在於可製備成含有鹽酸倍他司汀脂質體的片劑、膠囊、口服液、注射液。
全文摘要
本發明涉及一種鹽酸倍他司汀脂質體及其製備方法，先將脂質成分溶解於二氯甲烷中，並在水浴中減壓蒸發至薄膜形成，將薄膜溶於乙醚中，再加入含有倍他司的磷酸緩衝液，將上述混懸液超聲處理後，置旋轉蒸發儀上減壓蒸發至全部有機試劑蒸發，即得鹽酸倍他司汀脂質體。將鹽酸倍他司汀製成脂質體，能明顯增強藥效，可增加毛細血管通透力，使藥物到達腦血管的劑量增加，可用於提高美尼爾綜合症的治療效果，同時還可以降低胃腸道刺激，降低藥物不良反應，有助於減小胃部不適，噁心頭暈等副作用。
文檔編號A61P1/08GK102631320SQ20121012151
公開日2012年8月15日 申請日期2012年4月24日 優先權日2012年4月24日
發明者劉明石, 吳麗豔, 孟凡欣, 孟慶繁, 張瑤, 楊東生, 滕利榮, 王立英, 王豔珍, 趙明智, 金元寶 申請人:吉林大學珠海學院