一種豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍幹保護劑及製備方法
2023-10-25 00:33:57 4
專利名稱：一種豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍幹保護劑及製備方法
技術領域：
本發明涉及一種豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍幹保護劑及製備方法，屬於動物用病毒活疫苗製造領域。
背景技術：
在疫苗製品的領域中，凍幹保護劑及其製備工藝是活疫苗生產中的一項關鍵技術，對疫苗的保存、運輸和使用有很大影響。目前，在我國獸用疫苗中，活的凍幹疫苗佔相當大的比例，國內常用的保護劑主要為牛奶、蔗糖、明膠等，組方簡單，保護功能差。如果在 2°C-8°C條件下，保存期只有4-6個月，多需要在-15°C以下保存。加上國內傳統的獸用生物製品保護劑的研製相對滯後，使成品疫苗的長期保存和運輸受限。所以，耐熱凍幹保護劑的研究是非常急需的，在20世紀80年代，發達國家就已開始進行耐熱凍幹保護劑的研究。 我國在耐熱凍幹保護劑方面的研究起步較晚，但現在在這方面的研究取得了一定的成果， 傅德霞等(1997)將明膠蔗糖保護劑用於雞新城疫弱毒凍幹苗和雞傳染性支氣管炎弱毒凍幹苗，其免疫效果與牛奶蔗糖保護劑基本相同。王仁耕等(1989)對雞新城疫I系凍幹苗的耐熱保護劑的研究表明，2_8°C保存M個月能夠達到《規程》標準，主要為牛奶、蔗糖、穀氨酸鈉、甘露醇等。沈銘強等(1990)對狂犬病凍幹苗耐熱保護劑進行了研究，以蔗糖、牛奶、 EDTA、甘露醇等材料為主，經2-8°C保存有效期為一年。李道義等(1996)進行了豬瘟凍幹苗保護劑的研究，主要成分為CH0、穀氨酸鈉、牛血清、脫脂牛奶等，4-8°C保存15-M個月， 250C 100天，37°C 7天，經檢驗，物理性狀、真空度、水分、安全效力等測定達部頒標準。王棟等000 已經研製出一種耐熱凍幹保護劑，用此保護劑凍幹的疫苗在2°C-8°C條件下，保存M個月以後，病毒滴度無明顯下降，但仍未達到全面推廣應用。由於凍幹保護劑可影響生物製品的質量、效價和穩定性，改變生物製品的生產工藝，提高產品預測能力並增大產品批次間的穩定性，並且耐熱凍幹保護劑有免疫活性但無藥理活性，可在凍幹和保存時維持疫苗的穩定性，初次乾燥時在適宜的溫度下疫苗不倒塌， 企業低成本即可獲取。
發明內容
本發明的目的是提供一種新型豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍幹保護劑及其製備方法， 降低保護條件，延長使用期並降低使用成本。一種豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍幹保護劑，以注射用水為溶劑配製溶液，各組分質量百分比濃度為明膠3%、聚乙烯吡咯烷酮5%、脫水果糖1%、海藻糖3%、甘氨酸3%、山梨醇3%、穀氨酸鈉2% ；均為乾物質組份。上述豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍幹保護劑的製備方法，(1)對可高壓滅菌的明膠、 聚乙烯吡咯烷酮(K90)，按各自比例溶於注射用水，121°C滅菌15分鐘；(2)將不耐高溫的物質組份山梨醇、穀氨酸鈉、脫水果糖、甘氨酸、海藻糖；均按各自比例溶於注射用水中用孔徑0. 22 μ m的濾膜過濾除菌；然後將(1)、(幻混合，即為耐熱凍幹保護劑，凍幹保護劑中各組分質量百分比濃度為明膠3 %、聚乙烯吡咯烷酮5%、脫水果糖1 %、海藻糖3%、甘氨酸 3%、山梨醇3%、穀氨酸鈉2%。使用時按1 1體積比加入病毒抗原液中，分裝後進行冷凍乾燥。本發明的活疫苗耐熱凍幹保護劑，降低保存條件，延長保存期，降低使用成本及其提高疫苗的免疫效力，使活疫苗的儲存、運輸和使用都更方便、經濟。本發明的的製劑在 2_8°C條件下可保存M個月以上，能達到《中華人民共和國獸醫生物製品質量標準》中規定的各項指標。
具體實施例方式以下結合具體實施例，對本發明進行詳細說明。一種新型豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍幹保護劑，配比為明膠3g、聚乙烯吡咯烷酮 5g、脫水果糖lg、海藻糖3g、甘氨酸3g、山梨醇3g、穀氨酸鈉2g，注射用水80g，可得到IOOg 豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍幹保護劑。豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍幹保護劑的製備方法，(1)對可高壓滅菌的明膠、聚乙烯吡咯烷酮(K90)，按各自比例溶於注射用水，121°C滅菌15分鐘；( 將不耐高溫的物質組份山梨醇、穀氨酸鈉、脫水果糖、甘氨酸、海藻糖；均按各自比例溶於注射用水中用孔徑 0.22 μ m的濾膜過濾除菌；分別完成除菌後將(1)、(2)兩種成分混合，即為耐熱凍幹保護劑，使用時按1 1體積比例加入病毒抗原液中，分裝後進行冷凍乾燥。技術參數及檢測方法1.產品的物理性狀、無菌檢驗、支原體檢驗、外源病毒檢驗、安全檢驗、剩餘水分測定和真空度測定按《中華人民共和國獸醫生物製品規程》的方法及標準進行。2.凍於周期不超過48h。3.病毒含量測定及標準用家兔效檢按瓶籤註明頭份，用生理鹽水將每頭份疫苗稀釋750倍或按實含抗原量稀釋適當的倍數，耳靜脈注射家兔2隻，每隻lmL，根據家兔體溫變化來確定疫苗的效價，產品的效力達5萬倍合格。4、試製3批由本耐熱凍幹保護劑凍幹的產品，並設常規5%蔗糖脫脂乳保護劑對照組，置於37°C、2-8°C條件下保存，不同時間取樣，測定病毒含量及其物理性狀等。結果見表；表1本發明的豬瘟脾淋源活疫苗凍幹後物理性狀等參數測定
權利要求
1.一種豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍幹保護劑，其特徵在於，以注射用水為溶劑配製溶液， 各組分質量百分比濃度為明膠3%、聚乙烯吡咯烷酮5%、脫水果糖1%、海藻糖3%、甘氨酸3%、山梨醇3%、穀氨酸鈉2% ；均為乾物質組份。
2.根據權利要求1所述的豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍幹保護劑的製備方法，其特徵在於，(1)對可高壓滅菌的明膠、聚乙烯吡咯烷酮(K90)，按各自比例溶於注射用水，121°C滅菌15分鐘；( 將不耐高溫的物質組份山梨醇、穀氨酸鈉、脫水果糖、甘氨酸、海藻糖；均按各自比例溶於注射用水中用孔徑0. 22 μ m的濾膜過濾除菌；然後將(1)、(2)混合，即為耐熱凍幹保護劑，凍幹保護劑中各組分質量百分比濃度為明膠3%、聚乙烯吡咯烷酮5%、脫水果糖1%、海藻糖3%、甘氨酸3%、山梨醇3%、穀氨酸鈉2%。
全文摘要
本發明公開了一種豬瘟脾淋源活疫苗耐熱凍幹保護劑，以注射用水為溶劑配製溶液，各組分質量百分比濃度為明膠3％、聚乙烯吡咯烷酮5％、脫水果糖1％、海藻糖3％、甘氨酸3％、山梨醇3％、穀氨酸鈉2％；均為乾物質組份。(1)對可高壓滅菌的明膠、聚乙烯吡咯烷酮(K90)，按各自比例溶於注射用水，121℃滅菌15分鐘；(2)將不耐高溫的物質組份山梨醇、穀氨酸鈉、脫水果糖、甘氨酸、海藻糖；均按各自比例溶於注射用水中用孔徑0.22μm的濾膜過濾除菌；然後將(1)、(2)混合，即為耐熱凍幹保護劑。本發明是一種低成本、長效製品及製備方法，為獸醫生物製品使用解決了長久以來運輸、儲存的高成本問題。
文檔編號A61K39/187GK102526751SQ201210040109
公開日2012年7月4日 申請日期2012年2月22日 優先權日2012年2月22日
發明者單虎, 楊瑞梅, 王述柏, 秦曉冰, 範懿娜, 韓先傑, 黃娟 申請人:青島農業大學