一種牡丹葉總苷提取物及其製備方法和用途的製作方法

2023-10-22 16:53:37 2

專利名稱：：一種牡丹葉總苷提取物及其製備方法和用途的製作方法
技術領域：
：本發明屬於中藥新藥研發領域。涉及一種從中藥材新的藥用部位中分離得到有效部位，並提供其製備方法和醫藥用途。
背景技術：
：牡丹不僅是觀賞性植物，其還可以作為藥用。2005年版的《中國藥典》收栽牡丹皮(亦稱丹皮)作為法定的中藥材使用。牡丹皮是毛莨科芍藥屬植物牡丹(Aeo/7/朋w/YV〃〃comAndr.)的乾燥4艮皮。目前，關於牡丹皮的化學成分及其有效部位研究的很多。根據文獻報導，牡丹皮中主要含有牡丹酚、牡丹酚甙、牡丹酚原甙、牡丹酚新甙、芍藥甙、羥基芍藥甙、苯甲醯芍藥戒、苯曱醯羥基芍藥戒、沒食子酸、揮髮油、無機元素等。現代藥理研究表明，牡丹皮具有抗腫瘤、抗炎、抗菌、降血糖、降壓、抗心肌缺血、抗心律失常、抗血栓和動脈硬化、免疫調節等作用("牡丹皮藥理作用的研究進展"《中國新醫藥》2004年第3巻第8期pllO-lll)。其有效部位丹皮多糖有降血糖作用，丹皮總苷有治療B肝、免疫調節、抗炎的作用。但是牡丹皮採收周期較長(3年)，同時取其根部，植抹無法存活，因此從合理利用藥材資源出發，考慮是否可以開發藥材的其它部位作為藥用，研究其化學成分，明確有效部位，發現新的醫藥用途，是醫藥研發人員努力研究的方向。牡丹葉為毛萊科芍藥屬植物牡丹(Ae朋/s57//7rw〃coMAndr.)的乾燥葉，據文獻報導，牡丹葉中含有苷類，酚類，酚酸類，鞣質，黃酮，糖類等化學成分。目前，對牡丹葉的化學成分及其藥理活性研究的很少，並且未見到關於從牡丹葉中提取分離有效部位的文獻報導
發明內容本發明要解決的技術問題之一是提供一種牡丹葉總苷提取物，其中的活性成分是來自於牡丹葉中的有效部位一一牡丹葉總苷。本發明進一步提供了以上述牡丹葉總苷為活性成分，用於治療糖尿病、冠心病的純中藥藥物製劑和相應的藥物劑型。本發明要解決的另一個技術問題是提供用於治療糖尿病、冠心病的牡丹葉總苷提取物的製備方法。為解決上述技術問題，本發明研究制定了如下技術方案。本發明所用的牡丹葉為毛莨科植物牡丹Ae朋/aw/YVi/〃co^Andr.的乾燥葉。本發明人經過多年的研究，用牡丹葉為原料，經過溶劑提取、大孔樹脂吸附、溶劑洗脫、洗脫液濃縮乾燥，得到牡丹葉總苷提取物，其中含有牡丹葉總苷重量百分比為50%~95%。該提取物中主要含有芍藥苷、羥基芍藥苷、苯甲醯芍藥苷、苯甲醯羥基芍藥苷等。其中芍藥苷的重量百分比為45%~95%。本發明比較優選的實施方案，牡丹葉總苷是通過下述方法製備得到的(1)以牡丹葉為原料，用水或含水的乙醇提取；(2)濃縮提取液，至相對密度為1.20的浸膏，加水使浸膏溶解，離心，得上清液；(3)上清液通過大孔吸附樹脂柱，依次用水、含水乙醇洗脫除雜；(4)以乙醇或含水乙醇洗脫，收集洗脫液，洗脫液濃縮乾燥，得牡丹葉總苷提取物。本發明所述的製備方法中提取選用的乙醇濃度為X,0<X《95%，優選為50《X《95%;提取方法可以是滲漉提取或回流提取，乙醇與原料之間應保持比較大的比例，以保證提取完全，可以使用8~16倍藥材重量的溶劑提取23次。所述的吸附樹脂可以為苯乙烯、二乙烯苯、丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯中的任意一種或幾種為骨架材料的樹脂，具體可包括ZTC-1、DlOl、AB-8或固301型樹脂。優選為ZTC-1樹脂。所述除雜的過程中先用4~10倍於樹脂體積(V/W)的水，再用2-5倍樹脂體積(V/W)的含水乙醇，乙醇濃度為X,5《X<20%。洗去柱內未被吸附的雜質，使用該方法能夠有效地去除雜質。所述製備方法中洗脫所用的乙醇的濃度為X，20<X<95%;優選為20《X92%)進行了如下藥效學試驗試驗例1牡丹葉總苷提取物對冠脈結紮致大鼠實驗性心肌梗死的治療作用Wistar大鼠144隻，體重260280g,雌雄兼用。隨機分為9組，每組16隻，分別為假手術組、模型組、陽性藥組(鹽酸地爾硫卓10mg/kg)、牡丹葉總苷提取物小劑量(10mg/kg)、中劑量(30mg/kg)、大劑量(90mg/kg)組；芍藥苷小劑量(10mg/kg)、中劑量(30mg/kg)、大劑量(90mg/kg)組。腹腔注射烏拉坦(1000mg/kg)麻醉，分離十二指腸，各組分別記錄標準II導聯ECGlmin。胸部常規消毒，左鎖骨中線第四肋間開胸，暴露心臟，距左冠狀動脈前降支根部約2mm處結紮，送回心臟，關閉胸腔。結紮冠脈15min後記錄II導心電圖，以T波高犖伴有ST段抬高為結紮成功的標誌，記錄II導心電圖作為給藥前值，然後經十二指腸給藥一次，劑量同前。結紮後5h,腹主動脈取血，留血清，以備測心肌四酶等指標。然後處死大鼠，將心臟橫切成5片置於0.1%的NBT(用pH7.4~7.8的0.2mol/LTris液配製)溶液中，37。C水浴35min，洗去多餘的染料，梗死區不著色，非梗死區被NBT染為紫藍色，並照相，用圖形分析軟體比較心肌梗死面積佔全心面積的百分比實驗結果見表l，表2,表3:注本試驗設置牡丹葉總苷提取物及總苷中單體成分芍藥苷同等劑量下口服給藥進行對比研究。表1牡丹葉總苷提取物和芍藥苷對冠脈結紮致大鼠實驗性心肌梗死T波變化絕對值的影響(^±&單位mV,n=9)組別結紮後15min給藥後15min2h5h0.050±0.046±0駕±0.050±假手術組0.0340.0440.0390.0670.221±0.212±0.186±0.162±模型組0.173"A0.159"A0.084"0扁"0.219±0.158±0.085±0.077±地爾硫卓10mg/kg組0.1170.1120扁0.073牡丹葉總苷提取物0.229±0.197±0.154±0.123±10mg/kg組0.1490.1210.101*0.088*牡丹葉總苷提取物0.20U0.172±0.144±0.102±30mg/kg組0.1300.124*0.094*0.079*牡丹葉總苷提取物0.218±0.167±0.102±0.077±90mg/kg組0.1400細**0.052"0.040"0.216±0.197±0.164±0.143±芍藥苷10mg/kg組0駕*0.096'0.1290.1110.208±0.172±0.158±0.112±芍藥苷30mg/kg組0.124*0.104*0.089*0.140芍藥苷90mg/kg組0.223±0.157±0.122±0.079±0.1450.118"0.082**0.038"注與假手術組比較，"屍<0.01,a"屍O.00；與模型組比較，*屍<0.05或"屍O.Ol由上表可見，冠脈結紮後，與假手術組比較，模型組在結紮後15min、給藥後15min、2h、5h各點均顯著升高T波變化絕對值，經統計學處理差異具有非常顯著性(代O.01或代O.001);與模型組比較，牡丹葉總苷提取物小劑量組在給藥後2h和5h、中劑量組在給藥後15min、2h、5h及大劑量組在給藥後15min、2h、5h均顯著降低T波變化絕對值，經統計學處理差異具有顯著性(代O.05或AO.01);與模型組比較，芍藥苷小劑量組在給藥後2h和5h、中劑量組在給藥後15min、2h、5h及大劑量組在給藥後15min、2h、5h均顯著降低T波變化絕對值，經統計學處理差異具有顯著性(代O.05或屍<0.01);結果顯示芍藥苷和牡丹葉總苷提取物均具有明顯的抗心肌缺血活性。表2牡丹葉總苷提取物和芍藥苷對冠脈結紮致大鼠實驗性心肌梗死心肌tableseeoriginaldocumentpage11注與假手術組比較，"PO.Ol或*"屍<0.001;與模型組比較，/<0.05或PO.OIAST:谷丙轉氨酶CK-MB:肌酸磷酸激酶(CK)的同工酶CK:肌酸磷酸激酶LDH:乳酸脫氫酶血清心肌四酶可以反映心肌細胞的受損程度，其中CK-MB是肌酸磷酸激酶(CK)的同工酶，只存在心肌細胞，當心肌細胞受損傷時，CK-MB漏出，使其在血清中的活性增高，血清CK-MB活性越高，反映心肌損傷越重。由上表可見，冠脈結紮後，與假手術組比較，模型組能顯著升高AST、CK-MB、CK、LDH值，差異具有顯著性(代O.01或代O.001);與模型組比較，陽性藥組、牡丹葉總苷提取物中大劑量組及芍藥苷中大劑量組均能顯著降低AST、CK、LDH,差異具有顯著性(代O.05或代O.01)。而與模型組比較，牡丹葉總苷提取物大劑量組和芍藥苷大劑量組能顯著降低CK-MB，差異具有顯著性(代O.05或代O.01)。表3牡丹葉總苷提取物和芍藥苷對冠脈結紮致大鼠心肌梗死面積及梗死區佔全心面積°/。的影響(n=9)tableseeoriginaldocumentpage12注與模型組比較，屍<0.05或"PO.Ol或"'屍O.OOl由上表可見，冠脈結紮後，與模型組比較，陽性藥組能顯著縮小梗死面積，梗死區佔全心面積％差異具有顯著性(代O.001)。與模型組比較，牡丹葉總苷提取物小、中、大劑量組和芍藥苷小、中、大劑量組能顯著縮小梗死面積，梗死區佔全心面積％差異具有顯著性(代O.05或代O.01)。綜上所述實驗結果表明，牡丹葉總苷提取物和芍藥苷對冠脈結紮所致大鼠心肌梗死面積的影響與對血漿AST、CK、LDH、心電圖T波變化絕對值的影響結果一致，能明顯縮小心肌梗死面積，減少AST、CK、LDH的釋放，降低心電圖T波變化絕對值，提示其對大鼠實驗性心肌梗死具有較好的治療作用。牡丹葉總苷提取物和芍藥苷同等劑量下抗心肌缺血的藥理作用基本相當。試驗例2牡丹葉總苷提取物和芍藥苷對冠脈結紮致實驗性心肌梗死犬的治療作用健康成年雜種犬54隻，體重12-17kg，雌雄兼用。隨機分為9組，每組6隻，分別為假手術組(只穿線不結紮)，模型組，地爾硫卓組(5mg/kg),牡丹葉總苷提取物小劑量組(5mg/kg),中劑量組U5mg/kg)和大劑量組(45rag/kg);芍藥苷小劑量組5mg/kg),中劑量組(15mg/kg)和大劑量組(45mg/kg)。經3%戊巴比妥鈉30mg/kg靜脈麻醉。背位固定，頸部皮膚切開，氣管插管，連接電動呼吸機。分離左側頸總動脈，測定血壓。分離股靜脈，插管以備補液及靜脈取血用。於劍突下切開，分離十二指腸，以備給藥用。犬右側臥位，於左側第四肋間開胸，暴露心臟，做心包術。分離冠脈前降支，於中、下l/3處穿線以備結紮。固定多點式心外膜電極標測EECG，標測點12個。術畢，穩定15min後記錄EECG作為結紮前值，同時自股靜脈取血，以備檢測結紮前的各項血清學指標。結紮冠狀動脈後30min,記錄EECG作為結紮後給藥前值，並經十二指腸給藥，假手術組和模型組給予等容量氯化鈉注射液。記錄給藥後20、120、240、360min的ECG。並在實驗結束取血，分離血清以備測血清酶學指標；給藥後360min處死動物迅速取出心臟。將左心室均勻橫切成5片，將5片心肌標本置於0.5%的N-BT(用pH7.4—7.7的0.2mol/LTris液配製)溶液中，37。C水浴10min，洗去多餘的染料，梗死區不著色，非梗死區被N-BT染為紫藍色，用圖形分析軟體比較心肌梗死面積佔左心室面積的百分比，分別將梗死區和非梗死區分離稱重，比較梗死區佔心室重量的比例(試驗設定同樣具有抗心肌缺血活性的芍藥苷作為藥效學對照)。結果見表4，表5，表6,表7:表4牡丹葉總苷提取物和芍藥苦對實驗性心肌梗死犬S—ST(mV)的影tableseeoriginaldocumentpage14與假手術組比較，模型組在給藥後各時間點i:—ST明顯升高01或/<0.001);地爾硫卓組在20~360min可明顯降低i:一ST升高的亳伏數，與模型組比較差異具有顯著性(；KO.05或001);牡丹葉總苷提取物和芍藥苷各劑量組均不同程度的降低￡一ST升高的毫伏數，牡丹葉總苷提取物小劑量組在120min，牡丹葉總苷提取物中劑量組，芍藥苷小，中劑量組在120~240min,與模型組比較差異具有顯著性(；KO.05或01),牡丹葉總苷提取物大劑量組和芍藥苷大劑量組作用顯著，作用時間也較長，在20~360min，與模型組比較差異具有顯著性(,0.05或;KO.01)。表5牡丹葉總苷提取物和芍藥苷對實驗性心肌梗死犬N—ST(個)的影響(5±s，n=6)tableseeoriginaldocumentpage15注與模型組比較，><0.01或'"*屍O週與模型組比較，地爾硫卓組能夠明顯降低N—ST的點數，在20~360min差異具有顯著性(/K0.05或；KO.01)。牡丹葉總苷提取物和芍藥苷各劑量組可明顯降低N—ST的點數，牡丹葉總苷提取物和芍藥苷小劑量組在120min,牡丹葉總苷提取物中劑量組在120~240min，牡丹葉總苷提取物大劑量組和芍藥苷中，大劑量組在20360min,與模型組比較差異具有顯著性(；KO.05或01)。表6牡丹葉總苷提取物和芍藥苷對實驗性心肌梗死犬心肌梗死面積的影(x±s，n=6)組別梗死區重/心室重(%)梗死區/總面積(%)模型組13.82±4.2614.08±3.98地爾硫卓5mg/kg組3.66士7.62'3.63±1.73**芍藥苷5mg/kg組4.74土2.76'6.31±3.72*芍藥苷15mg/kg組3.78±2.54**4.51土2.4廣芍藥苷45mg/kg組2.72士2.3廣3.28±1.84**牡丹葉總苷5.89±2.89*5.29±2.67*提取物5mg/kg組牡丹葉總苷3.74±2.09**4.06±2.39**提取物15mg/kg組牡丹葉總苷2.09±2.44**2.91±1.26"提取物45mg/kg組注與模型組比較，'屍<0.05或"PO.Ol與模型組比較，牡丹葉總苷提取物和芍藥苷各劑:t組、地爾硫卓組均明顯縮小心肌梗死的面積，差異具有顯著性(；XO.05或,0.Ol或；KO.001),牡丹葉總苷提取物小，中，大劑量組作用明顯，與芍藥苷各組作用相當。表7牡丹葉總苷提取物和芍藥苷對實驗性心肌梗死犬心肌酶(IU/L)的影響G±An=6)AST組別藥前藥後藥前藥後CK藥前藥後32.5±假手術組60.841.5±56.450.0±57.5±385.5±471.5±361.032.2181.3169.332.8±模型組14.8147.7±72.2A35.7±M1.3士444.3±2612.7±11.767.0364.71109.8A地爾疏卓28-0±105.7±99.3±199,0±250.3±1272.7±5mg/kg組4o34.175.0149.472.6504.7*芍藥脊18-8±109.7±61.3±200.2±347.7±1844.3±5mg/kg組10356.825.289.6187.2542.5*tableseeoriginaldocumentpage17注與假手術組比較，▲P<0.05;與模型組比較，*屍<0.05與假手術組比較，模型組在給藥後AST、CK明顯升高，差異具有顯著性(/K0.05);與模型組比較，地爾疏卓組在給藥後CK明顯降低(；KO.05),但對AST及LDH無明顯影響，牡丹葉總苷提取物和芍藥苷各劑量組有降低CK的作用，差異均具有顯著性(/K0.05)。通過以上兩個實-瞼證實牡丹葉總苷提取物具有明顯的抗心肌缺血及梗死的藥理學作用，同時通過試驗對比了牡丹葉總苷提取物中芍藥苷單體和牡丹葉總苷提取物的藥效，結果證實兩者具有同樣的抗心肌缺血活性，考慮到牡丹葉是新的藥用部位，牡丹葉總苷提取物的提取成本較單體成分芍藥苷提取成本低，且兩者同等劑量下抗心肌缺血的藥理作用基本相當，故認為將牡丹葉充分利用，提取其中總苷成分，將其製備成抗心肌缺血新藥，具有很強的實用價值。試驗例3牡丹葉總苷提取物對四氧嘧啶誘發高血糖小鼠的降糖作用選取SPF級ICR小鼠，尾靜脈注射四氧嘧啶生理鹽水溶液(65mg/kg),72小時後測空腹血糖，選擇血糖值大於11.1mmol/L的小鼠作為糖尿病動物模型。根據血糖值隨機分為模型對照組、降糖靈組(150mg/kg)、牡丹葉總苷提取物小劑量組(50mg/kg)、中劑量組(100mg/kg)、大劑量組(200mg/kg)、芍藥苷小劑量組(50mg/kg)、芍藥苷中劑量組(100mg/kg)、芍藥苷大劑量組(200mg/kg),另設空白對照組(尾靜脈注射生理鹽水0.lml/10g)，每組12隻。各給藥組均按0.2ml/10g體積灌胃給藥，空白對照組和模型對照組給予等體積生理鹽水，每天1次，共給藥14天。在給藥第7天末次給藥後1小時，眶後取血測小鼠空腹血糖；第14天末次給藥後l小時，摘眼球取血，測小鼠空腹血糖。所得數據以3±^表示，方差齊性運用F檢驗，組間比較運用f檢驗。結果見表8，表9。表8牡丹葉總苷提取物和芍藥苷對四氧嘧啶誘發的糖尿病小鼠藥後7天、14天血糖值的影響(i±s,/7=12)給藥0天給藥7天給藥14天7天組別空白組模型組降糖靈組牡丹葉總苷提取物小劑量組牡丹葉總苷提取物中劑量組牡丹葉總苷提取物大劑量組芍藥苷小劑量組芍藥苷劑量(mg/kg)15050100200501009.14±U929.65±2.27"A29.71±2.5829.82±2.1729.62±2.2829.79±2.5129.55±2.4129.68土血糖值10.01±9.20±2.081.5128.19±26.70±5.09"A5.8"*22.28±15.38±4.624.6225.59±21.63±4.823.37*24.06±19.79±3.58*3.28"21.97±16.43±3.91"4.45"*26.27±22.92±4.534.8925.09±21.40±22.089.2314.6820.996.8311.02降糖率(％)14天42.4118.9925.9038.4614.1719.86tableseeoriginaldocumentpage19與模型組比較，》0.05,"屍O.Ol,"'屍O.001;與空白對照組比較，"VO.001.由上表可見，給藥前模型組與空白組比較，血糖值明顯升高(代O.001);各給藥組與模型組比較，血糖值均無明顯變化(/^0.05)。給藥第7天，模型組與空白組比較，血糖值明顯升高，經統計學處理差異有顯著性(AO.001);牡丹葉總苷提取物小劑量組、芍藥苷小劑量組、芍藥苷中劑量組與模型組比較，血糖值均有降低趨勢，但無統計學意義(》0.05);牡丹葉總苷提取物中劑量組、牡丹葉總苷提取物大劑量組、芍藥苷大劑量組與模型組比較，血糖值明顯降低(代O.05~0.01),降糖率為分別14.68%、20.99%和20.99%;降糖靈組與模型組比較，血糖值明顯降低(代O.01)。給藥第14天，模型組與空白組比較，血糖值明顯升高(代O.001);牡丹葉總苷提取物小、中、大劑量組與模型組比較,血糖值明顯降低(代0.05~0.001)，降糖率分別為18.99%、25.90%和38.46%;芍藥普小劑量組有降低趨勢，芍藥苷中劑量組及大劑量組血糖值明顯降低(代0.05~0.01);降糖靈組與模型組比較，血糖值明顯降低(代0.001)。表9牡丹葉總苷提取物對四氧嘧啶誘發的糖尿病小鼠藥後7天、14天體重的影響(i土S,/=12)tableseeoriginaldocumentpage19牡丹葉總苷提取物中劑量組10022.07±1.0728.03±2.3029.20±4.36牡丹葉總苷提取物大劑量組20021.90±1.6728.2U1.9730.28±3.18芍藥苷小劑量組5021.93±1.9227.92±2.4328.86±2.20芍藥普中劑量組10022.3U1.7927.72±2.3329.80±2.39芍藥苷大劑量組20022.44±1.6628.01±1.9829.03±3.40與空白對照組比較，a屍0.05，由上表可見，給藥前模型組與空白組比較，體重明顯下降(代O.01);各給藥組與模型對照組比較體重均無明顯變化(vRX).05)。藥後7天、14天，模型組與空白組比較，體重明顯下降(代O.05);各給藥組與模型組比較，體重均無明顯差異(/>0.05)。牡丹是傳統的藥用植物，有清熱涼血、活血散痺之功，多以根皮入藥。本發明從牡丹葉中提取的其有效部位一一牡丹葉總苷，通過藥效試驗結果顯示其具有明顯降血糖活性，效果優於牡丹葉的主要成分芍藥苷。具體實施方式以下通過實施例詳細說明本發明技術方案的實施，但不應以此限定本發明的實施範圍。實施例1:牡丹葉總苷提取物的優選製備方法取牡丹葉藥材粉末，用14倍藥材量50%乙醇加熱回流提取3次，每次1小時。過濾，將乙醇提取液60。C減壓回收乙醇，將提取液濃縮至相對密度1.20(25。C測定)的浸膏，加5倍於藥材重量的水(60X:)使浸骨溶解，離心，上清液通過ZTC-l樹脂柱，以4倍於樹脂體積(V/W)的水及5倍樹脂體積(V/W)的5%乙醇，洗去柱內未被吸附的雜質，然後以6倍於樹脂體積(V/W)的40%乙醇解吸。收集解吸液，減壓濃縮，真空乾燥，得牡丹葉總苷提取物，其中牡丹葉總苷的含量75%,芍藥苷的含量為69%。實施例2:牡丹葉總苷提取物的優選製備方法取牡丹葉藥材粉末，用8倍藥材量95%乙醇加熱回流提取2次，每次1小時。過濾，將乙醇提取液60。C減壓回收乙醇，將提取液濃縮至相對密度1.20(25。C測定)的浸膏，加10倍於藥材重量的水(60°C)使浸膏溶解，離心，上清液通過DIOI樹脂柱，以6倍於樹脂體積(V/W)的水及2.5倍樹脂體積(V/W)的10%乙醇，洗去柱內未被吸附的雜質，然後以10倍於樹脂體積(V/W)的20%乙醇解吸。收集解吸液，減壓濃縮，真空乾燥，得牡丹葉總苷提取物，其中牡丹葉總苷的含量為90%,芍藥苷的含量為85%。實施例3:牡丹葉總苷提取物的優選製備方法取牡丹葉藥材粉末，用10倍藥材量80%乙醇，滲漉提取。將乙醇提取液60。C減壓回收乙醇，將提取液濃縮至相對密度1.20(25。C測定)的浸膏，加8倍於藥材重量的水(60。C)使浸膏溶解，離心，上清液通過DM301樹脂柱，以10倍於樹脂體積(V/W)的水及2倍樹脂體積(V/W)的20%乙醇，洗去柱內未被吸附的雜質，然後以4倍於樹脂體積(V/W)的60%乙醇解吸。收集解吸液，減壓濃縮，真空乾燥，得牡丹葉總香提取物，其中牡丹葉總苷的含量為85%，芍藥苷的含量為79%。實施例4:牡丹葉總苷提取物的優選製備方法取牡丹葉藥材粉末，用16倍藥材量熱水，滲漉提取。將提取液濃縮至IO倍藥材量，離心，上清液通過AB-8樹脂柱，以8倍於樹脂體積(V/W)的水及2.5倍樹脂體積(V/W)的10%乙醇，洗去柱內未被吸附的雜質，然後以8倍於樹脂體積(V/W)的30%乙醇解吸。收集解吸液，減壓濃縮，真空乾燥，得牡丹葉總苷提取物，其中牡丹葉總苷的含量為70%,芍藥苷的含量為63%。實施例5:牡丹葉總苷提取物的優選劑型膠嚢劑取實施例4方法製備的牡丹葉總苷提取物100g，6(TC乾燥，研磨粉碎，過80目篩，加過80目篩的藥用澱粉98g及硬脂酸鎂2g,混合均勻，用85%乙醇適量製成軟材，過30目篩制顆粒，烘乾，使水分小於5%，過40目曬整粒，分裝於3號膠嚢中。每粒膠嚢含牡丹葉總苷提取物0.lg,用鋁塑複合包裝，即得。實施例6:牡丹葉總普提取物的優選劑型片劑取實施例4方法製備的牡丹葉總苷提取物30g，加入澱粉30g，微晶纖維素10g，以10%澱4分漿適量用12目篩制粒，在55。C以下乾燥，幹粒加入硬脂酸鎂，整粒，混勻，壓片，即得。實施例7:牡丹葉總苷提取物的優選劑型凍乾粉針取實施例2方法製備的牡丹葉總苷提取物50g,加適量注射用水，攪拌溶解後，超濾，得到無熱源的澄清液，加注射用水至1000ml,分裝為1000支，按凍乾粉針工藝凍幹，製成凍乾粉針。權利要求1.一種牡丹葉總苷提取物，其特徵在於含有牡丹葉總苷的重量百分比為50％～95％。2.根據權利要求1所述的牡丹葉總苷提取物，其特徵在於該提取物中主要含有芍藥苷、羥基芍藥苷、苯曱醯芍藥苷、苯曱醯羥基芍藥苷。3.根據權利要求1或2所述的牡丹葉總苷提取物，其特徵在於含有芍藥苦的重量百分比為45%~95%。4.根據權利要求l、2、3任一權利要求所述的牡丹葉總苷提取物的製備方法，其特徵在於(1)以牡丹葉為原料，用水或含水的乙醇提取；(2)濃縮提取液，至相對密度為1.20的浸膏，加水使浸膏溶解，離心，得上清液；(3)上清液通過大孔吸附樹脂柱，依次用水、含水乙醇洗脫除雜；(4)再以乙醇或含水乙醇洗脫，收集洗脫液，洗脫液濃縮乾燥，得牡丹葉總苷提取物。5.根據權利要求4所述的牡丹葉總苷提取物的製備方法，其特徵在於提取為滲漉提取或回流提取。6.根據權利要求4所述的牡丹葉總苷提取物的製備方法，其特徵在於提取所用的乙醇的濃度為X，0<X《95%。7.根據權利要求6所述的牡丹葉總苷提取物的製備方法，其特徵在於提取所用的乙醇的濃度為X，50《X《95%。8.根據權利要求4所述的牡丹葉總苷提取物的製備方法，其特徵在於所述的樹脂為苯乙烯、二乙烯苯、丙烯酸酯或曱基丙烯酸酯中的任意一種或幾種為骨架材料的樹脂。9.根據權利要求8所述的牡丹葉總苷提取物的製備方法，其特徵在於所採用的吸附樹脂可以是ZTC-1、DlOl、AB-8或DM301型樹脂。10.根據權利要求4所述的牡丹葉總苷提取物的製備方法，其特徵在於除雜所用的乙醇的濃度為X，5《X《20%。11.根據權利要求4所述的牡丹葉總苷提取物的製備方法，其特徵在於洗脫所用的乙醇的濃度為X，20《X《95°/。。12.根據權利要求11所述的牡丹葉總苷提取物的製備方法，其特徵在於洗脫所用的乙醇的濃度為X，20《X《40%。13.含有權利要求1~12任一權利要求所述的牡丹葉總苷提取物的藥物組合物。14.根據權利要求13所述的藥物組合物，其特徵在於該組合物可以是牡丹葉總苷提取物和其他藥物組成。15.根據權利要求13所述的藥物組合物，其特徵在於該組合物可以是牡丹葉總苷提取物和藥用輔料組成。16.根據權利要求13、14或15所述的藥物組合物，其特徵在於可以以口服製劑或注射製劑形式存在。17.根據權利要求16所述的藥物組合物，其特徵在於所述的口服製劑為膠囊劑、軟膠嚢劑、顆粒劑、口服液、片劑、滴丸。18.根據權利要求16所述的藥物組合物，其特徵在於所述的注射製劑為粉針劑或注射液。19.權利要求1~18任一權利要求所述的牡丹葉總香提取物或者藥物組合物在製備治療外唐尿病、冠心病藥物中的應用。全文摘要本發明提供了一種從牡丹葉新的藥用部位中分離純化的牡丹葉總苷提取物和其製備方法。具體涉及該牡丹葉總苷提取物中總苷的含量為50％～95％，其中芍藥苷的含量為45％～95％。本發明提供的製備方法採用了中藥現代化技術中的樹脂技術，工藝簡單，去除了大量雜質，活性成分的含量高。本發明同時還公開了牡丹葉總苷提取物在製備治療糖尿病、冠心病藥物中的應用。文檔編號A61K36/185GK101164566SQ20061015050公開日2008年4月23日申請日期2006年10月18日優先權日2006年10月18日發明者周亞偉申請人:周亞偉