異戊烯化羥基二苯乙烯、包含其的藥物組合物、用途及其製備方法與流程

2023-05-15 19:23:16

本申請是申請日為2012年05月04日的題為「異戊烯化羥基二苯乙烯」的中國專利申請no.201280033556.x的分案申請。相關申請的引用本發明要求au2011901663的優先權，其內容通過引用併入本文。本發明涉及新型異戊烯化二苯乙烯化合物和此類化合物在治療疾病和醫學病症(例如癌症和皮膚衰老)中的應用。
背景技術：
：蜂巢蠟膠或所謂的蜂膠是由工蜂(西方蜜蜂(apismellifera))從某些樹木和灌木的嫩枝和芽的滲出物和分泌物中採集的複雜樹脂狀物質。蜜蜂將其用於封接蜂巢中的裂縫和孔洞並防止微生物感染。蜂巢蠟膠是生物活性物質的豐富來源，並且蜂巢蠟膠的藥用用途可以追溯到古代文明。目前，蜂巢蠟膠被廣泛用作天然保健產品，並且廣泛應用於化妝品中。然而，其在藥物中的現代應用是有限的，這主要是歸因於其化學組成有很大不同，這種不同是由於蜜蜂從不同的植物來源或植物來源的混合物進行採集所造成的。蜂膠的組成取決於蜜蜂接觸的周邊植物群，並且同樣地，植物群的這種差異會導致蜂膠組成的差異。例如，已知類黃酮是歐洲蜂膠中的主要藥理活性化合物，聚異戊烯化二苯甲酮是古巴蜂膠和委內瑞拉蜂膠中的主要物質，並且異戊烯化肉桂酸衍生物在巴西蜂膠中佔主要地位。對由蜜蜂產生的蜂膠的植物來源的識別能夠將巢箱放置在有利的位置，以便從單一植物來源生產蜂膠，從而能夠製造高品質和高療效的藥物。蜂膠的藥用唯一性是由蜜蜂的選擇性採集能力所決定的，因為它們能夠識別相對非極性的並具有抗菌性能的天然材料。據報導，蜂膠的常見來源是葉和花芽的滲出物，其具有高抗生素特性，從而保護柔弱的生長中的植物組織免受微生物的攻擊。也已經報導了蜜蜂從受傷或患病的植物組織中採集滲出物。此種來源潛在地富含抗生素物質，這是由植物響應創傷或來自昆蟲、微生物和病毒的攻擊而產生的。從以往的研究中，尚不清楚蜜蜂是簡單地採集已知為蜂膠的植物材料還是是否存在蜜蜂的代謝修飾或添加。但是，似乎沒有蜜蜂添加了大量材料的證據或代謝轉化的強有力證據。因此，需要更好地了解關於在特定的地理位置的蜂膠的組成，以能夠利用它來充分發揮其益處。在涉及本發明的工作中，本發明人對分離自袋鼠島(南澳大利亞)的蜂膠樣品進行了調查，並且出乎意料地發現與通常含有類黃酮作為活性組分的其它蜂膠不同，袋鼠島蜂膠含有二苯乙烯，更具體地是新的異戊烯化多羥基二苯乙烯(pphos)，它們的核心結構類似於白藜蘆醇(如下圖所示)。白藜蘆醇是紅葡萄酒中的成分，儘管高消耗非常豐富的食物，但是法國人認為紅葡萄酒對心臟病發作的低發病率做出了貢獻。事實上，已經證明了白藜蘆醇抑制ldl氧化，這種ldl氧化會導致動脈粥樣硬化和冠狀動脈心臟病。白藜蘆醇也是預防性抗衰老藥物中的主要化合物，並且已經發現其具有抗癌和抗氧化活性。然而，除了其治療性能，白藜蘆醇顯示出非常差的口服生物利用度並且在腸和肝臟中快速地代謝為葡萄糖醛酸鹽/酯和磺酸鹽/酯的偶聯物。只在高濃度(可達5g)下或在直接給予的情況下(例如靜脈注射或局部應用)觀察到了白藜蘆醇的體內效力。最近，葛蘭素史克(gsk)藥業進行了其白藜蘆醇(3-5g)的專利製劑srt501在治療多發性骨髓瘤中的iia期臨床試驗；但是，該試驗由於製劑僅提供極小的療效並且試驗中的幾個病人患上了腎衰竭而中止。已經報導在主要來自桑科(桑樹科，包括桑(morusalba，桑樹)，和各種菠蘿蜜物種)和蝶形花科(豆科，包括花生(arachishypogaea))的植物中有異戊烯化羥基二苯乙烯。據報導該分離的化合物示出了抗炎症、抗菌和抗氧化活性，從而暗示異戊烯基不會不利地影響羥基二苯乙烯的生物活性。實際上，異戊烯化羥基二苯乙烯基於其親脂性而能夠規避羥基二苯乙烯(例如白藜蘆醇)的生物利用度低的問題。由於存在一個或多個異戊烯基，所述化合物也許能夠更容易穿過細胞膜並避免形成葡萄糖醛酸鹽/酯和磺酸鹽/酯的偶聯物，從而改善該化合物的生物利用度，並且更普遍地提供用於開發新治療劑的優異候選藥物。先前已經證明白藜蘆醇的四甲氧基衍生物能夠比白藜蘆醇更容易地穿過大鼠的血-腦屏障。因此，從袋鼠島的蜂膠樣品中分離出的新型pphos衍生物是用於開發在治療疾病(如癌症)中使用的新治療劑的強有力候選物。包括於本說明書中的對文獻、步驟、材料、裝置、物品等的任何論述都不能被視為承認：任一或所有這些事項為現有技術基礎的組成部分或為本申請各項權利要求的優先權日之前存在的本發明相關領域的普通常識。技術實現要素：在涉及本發明的工作中，本發明人已經分離和合成了多種新型異戊烯化多羥基二苯乙烯(pphos)衍生物並且進行了體外實驗，其中這些新型化合物在癌細胞系的組中示出了高的效力和選擇性，特別是在白血病和黑色素瘤細胞系中。在其它初步實驗中，發現了許多所述新型pphos衍生物調節sirt1酶的活性，這表明本發明的該新型pphos化合物可以是治療一系列疾病的主要治療劑。因此，本發明的第一方面，提供了一種治療癌症的方法，其包括向需要其的患者給予治療有效量的式(i)的化合物、或者藥用鹽、溶劑化物或包含所述化合物的藥物組合物：其中：r1獨立地為h、oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chch(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2，其中至少一個r1為ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chch(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r2選自oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chch(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r3選自h、oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chch(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r4選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基或苄基；n是選自由1、2、3或4組成的組中的整數；並且a----b選自ch＝ch、ch2-ch2、ch＝chx或ch2-ch2x，其中x＝(ch2)pch2，並且p為選自由0、1、2或3組成的組中的整數；條件是當r2為oh時，r3為h或oh，a----b為ch＝ch，n為3且兩個r1基團為oh，則第三個r1基團不是ch＝chch(ch3)2。在本發明的第二方面，提供了一種治療癌症的方法，包括向需要其的患者給予治療有效量的式(i)的化合物、或者藥用鹽、溶劑化物或包括所述化合物的藥物組合物，其中：r1獨立地為h、oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chch(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2，其中至少一個r1為ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chch(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r2選自oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chch(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r3選自h、oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chch(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r4選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基或苄基；n是選自由1、2、3或4組成的組中的整數；並且a----b選自ch＝ch、ch2-ch2、ch＝chx或ch2-ch2x，其中x＝(ch2)pch2，並且p為選自由0、1、2或3組成的組中的整數。在第三方面，提供了一種根據第一或第二方面的式(i)的化合物或其藥物組合物作為藥物的應用。在第四方面，提供了一種根據第一或第二方面的式(i)的化合物或其藥物組合物在治療中的應用。在本發明的第五方面，提供了一種根據第一或第二方面的式(i)的化合物或其藥物組合物在治療癌症中的應用。在本發明的第六方面，提供了一種治療免疫抑制的方法，包括向需要其的患者給予治療有效量的根據第一或第二方面的式(i)的化合物或包括所述化合物的藥物組合物。在本發明的第七方面，提供了一種治療炎症的方法，包含向需要治療的患者給予治療有效量的根據第一或第二方面的式(i)的化合物或包括所述化合物的藥物組合物。在本發明的第八方面，提供了一種治療細菌或真菌感染的方法，包括向需要其的患者給予治療有效量的根據第一或第二方面的式(i)的化合物或包括所述化合物的藥物組合物。在本發明的第九方面，提供了一種治療皮膚老化的方法，包括向需要其的患者給予治療有效量的根據第一或第二方面的式(i)的化合物或包括所述化合物的藥物組合物。在本發明的第十方面，提供了根據第一或第二方面的式(i)的化合物或其藥物組合物在製備用於治療癌症的藥物中的應用。在本發明的第十一方面，提供了根據第一或第二方面的式(i)的化合物或其藥物組合物在製備用於治療免疫抑制的藥物中的應用。在本發明的第十二方面，提供了根據第一或第二方面的式(i)的化合物或其藥物組合物在製備用於治療炎症的藥物中的應用。在本發明的第十三方面，提供了根據第一或第二方面的式(i)的化合物或其藥物組合物在製備用於治療細菌或真菌感染的藥物中的應用。在本發明的第十四方面，提供了根據第一或第二方面的式(i)的化合物或其藥物組合物在製備用於治療皮膚老化的藥物中的應用。在本發明的進一步方面，提供了包含如上定義的化合物或藥物組合物、和至少一種用於本文所述的方法和應用的其它治療劑的組合。根據本發明的第十五方面，提供了一種式(ia)的化合物或者其藥用鹽或溶劑化物：其中：r1a、r1b、r1c和r1d各自獨立地為h、oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2，其中r1a-1d中的至少一個為ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r2選自oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r3選自h、oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r4選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基或苄基；並且a----b選自ch＝ch、ch2-ch2、ch＝chx或ch2-ch2x，其中x＝(ch2)pch2，並且p為選自由0、1、2或3組成的組中的整數；條件是：(i)當r3為h且r2為oh或och2ch＝c(ch3)2時，r1b和r1d各自獨立地不是oh或och2ch＝c(ch3)2；(ii)當r3為h、r1a-1d中的一個是h並且r1a-1d中的至少一個是ch2ch＝c(ch3)2時，a----b不是ch＝ch。本發明的第十六方面，提供了一種式(ia)的化合物或者其藥用鹽或溶劑化物：其中：r1a、r1b、r1c和r1d各自獨立地為h、oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2，其中r1a-1d中的至少一個為ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r2和r3各自獨立地選自oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r4選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基或苄基；並且a----b選自ch＝ch、ch2-ch2、ch＝chx或-ch2-ch2x，其中x＝(ch2)pch2且p為選自由0、l、2或3組成的組中的整數。在本發明的第十七方面，提供了一種藥物組合物，其包含根據第十五或十六方面的式(ia)的化合物或者其藥用鹽或溶劑化物，以及藥用賦形劑。根據第十八方面，提供了一種治療癌症、免疫抑制、炎症、細菌感染、真菌感染或皮膚老化的方法，包括向需要其的患者給予治療有效量的根據第十五或十六方面的式(ia)的化合物或包括所述化合物的藥物組合物。根據本發明的第十九方面，提供了根據第十五或十六方面的式(ia)的化合物或其藥物組合物在製備用於治療癌症、免疫抑制、炎症、細菌感染、真菌感染或皮膚老化的藥物中的應用。根據本發明的第二十方面，提供了一種製備通式(ib)的化合物的方法，其包括下列步驟：(i)如下，用適合的試劑處理羧酸以提供醯氯；(ii)如下，使該相應的醯氯與芳基烯烴縮聚；(iii)如下，脫保護乙酸酯基團並烷基化；其中，r4、r5和r6各自獨立地選自基團ome、oet、opr、oipr、obu、oibu、otbu、obn。在一個實施方式中，所述方法包含如下另外的步驟：(iv)如下的氫化反應：其中r4、r5和r6如前述定義，條件是r4、r5或r6中的至少一個為obn；r7、r8和r9各自獨立地選自基團oh、ome、oet、opr、oipr、obu、oibu、otbu。在另一個實施方式中，該方法包括如下的兩個另外的步驟：(v)異戊烯基的重排，如下：(vi)以及如下所示的氫化反應：其中，r4、r5和r6如前述的定義，條件是r4、r5或r6中的至少一個為obn；r7、r8和r9各自獨立地選自基團oh、ome、oet、opr、oipr、obu、oibu、otbu。在本發明的第二十一方面，提供了一種如下表示的usyds15的化合物：還提供了一種藥物組合物，其包含根據第二十一方面的化合物usyds15或者其藥用鹽或溶劑化物以及藥用賦形劑。在本發明的第二十三方面，提供了根據第二十一方面的化合物或第二十二方面的組合物在製備用於治療癌症、免疫抑制、炎症、細菌或真菌感染、或用於治療皮膚老化的藥物中的應用。本發明的優選實施方式的說明在本說明書的自始至終，詞語「包含」或其變形如「包括」或「含有」應該理解為是指包含所述的要素、整數或步驟，或者要素、整數或步驟的組，但是不排除任何其它要素、整數或步驟，或者要素、整數或步驟的組。雖然可以在治療中使用治療有效量的本文中定義的化合物或者其藥用鹽或溶劑化物，但是其可以作為主要產品給予；在本發明的一個方面，所述活性成分提供為藥物組合物。因此，在本發明的進一步實施方式中，提供了一種藥物組合物，其包含根據第一、第二、第十五和第十六方面的式(i)或(ia)的化合物或者它們的藥用鹽或溶劑化物，並混合有一種或多種藥用載體、稀釋劑或賦形劑。在與製劑的其它成分的相容性以及不對其接受者造成損害的意義上來說，所述載體、稀釋劑或賦形劑必需是可用的。當適用時，本發明的化合物(包括式(i)或(ia)的化合物)可以為藥用鹽的形式和/或可以作為藥用鹽給予。本文所使用的術語「藥用鹽」是指用於毒理學上安全於全身給予的鹽。該藥用鹽可以選自鹼金屬或鹼土金屬鹽(包括鈉、鋰、鉀、鈣、鎂等)以及無毒的銨、季銨和胺陽離子(包括，但不限於，銨、四甲基銨、四乙基銨、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、乙胺、三乙醇胺等)。本文中所使用的術語「藥用賦形劑」是指可安全用於全身給予的固體或液體填料、稀釋劑或封裝物質。取決於具體的給予途徑，也可以使用本領域中公知的各種載體。這些載體或賦形劑可以選自包括糖、澱粉、纖維素及其衍生物、麥芽、明膠、滑石粉、硫酸鈣、植物油、合成油、多元醇、海藻酸、磷酸鹽緩衝溶液、乳化劑、等滲鹽水和無熱原水的組。本文中所使用的術語「溶劑化物」是指由溶質(在本發明中，式(i)或(ia)的化合物或者其鹽或其生理功能衍生物)與溶劑形成的可變化學計量的複合物。用於本發明目的的此種溶劑可以不幹擾所述溶質的生物活性。適合的溶劑的實例包括，但不限於，水、甲醇、乙醇和乙酸。特別地，所使用的溶劑是藥用溶劑。適合的藥用溶劑的實例包括，但不限於，水、乙醇、乙酸、甘油、液體聚乙二醇及它們的混合物。特別的溶劑是水。式(i)或(ia)的化合物可以以「前藥」的形式給予。前藥為無活性形式的化合物，其在體內轉化為活性形式。適合的前藥包括活性形式化合物的酯類、膦酸酯類等。應理解的是除了以上特別提及的成分之外，製劑還包括本領域中考慮到所討論的製劑類型的其它試劑。本發明的化合物可以適合於治療人類或動物患者的疾病。在一個實施方式中，患者是哺乳動物包括人、馬、狗、貓、羊、牛或靈長類動物。在一個實施方式中，患者是人類。在進一步的實施方式中，患者不是人類。本文中所使用的術語「有效量」是指研究人員或臨床醫師所尋求的能夠引起組織、系統、動物或人的生物學或醫學響應的藥物或藥劑的量。另外，術語「治療有效量」是指任何量，與未接受該量的相應受試者相比，其引起疾病、病症、或副作用的改善的治療、治癒、預防或改善，或者其降低疾病或病症的惡化進度。該術語也包括在其範圍內能有效地增強正常生理功能的量。本文中所使用的術語「治療」是指與未給予包含本發明的化合物的藥物組合物相比，預防或抑制症狀、治療症狀、延遲症狀的顯現、降低症狀惡化的嚴重程度、和/或減少個體患有的症狀的數量和類型。術語治療涵蓋姑息性設置中的應用。本領域技術人員能夠理解在本發明的化合物的製備中，可以需要和/或期望保護分子中的一個或多個敏感性基團以防止不希望的副反應。適合用於本發明的保護基為本領域技術人員熟知，並且可以以常規方法來使用。例如參見，t.w.greene和p.g.m.wuts的"protectivegroupsinorganicsynthesis"(johnwiley&sons1991)或pj.kocienski的"protectinggroups"(georgthiemeverlag1994)。合適的氨基保護基的實例包括醯基型保護(例如甲醯基、三氟乙醯基、乙醯基)、芳族尿烷型保護基(例如，苄氧基羰基(cbz)和取代的cbz)、脂肪族尿烷型保護基(例如，9-芴基甲氧基羰基(fmoc)、叔丁氧基羰基(boc)、異丙氧基羰基、環己氧基羰基)和烷基型保護基(例如，苄基、三苯甲基、氯代三苯甲基)。根據本發明的第一、第二或第十八方面，待治療的癌症是白血病、非小細胞肺癌、結腸癌、cns癌、黑色素瘤、卵巢癌、腎癌、前列腺癌或乳腺癌。最優選地，待治療的癌症是白血病或黑色素瘤。在第一至第九方面的優選實施方式中，根據式(i)的化合物具有式(ia)。根據本發明的第十或第十九方面，優選地該藥物用於治療以下癌症：白血病、非小細胞肺癌、結腸癌、cns癌、黑色素瘤、卵巢癌、腎癌、前列腺癌或乳腺癌。最優選地，該藥物用於治療白血病或黑色素瘤。在第十至第十四方面的優選實施方式中，根據式(i)的化合物具有式(ia)。本發明的化合物的抗腫瘤效果可以應用為唯一的治療或可以包括除此之外的一種或多種其它物質和/或治療劑。此種聯合治療(conjointtreatment)可以通過同時、順序或單獨給予所述治療的單個組分。在腫瘤醫學領域，正常的做法是使用不同形式的治療劑的組合來治療患有癌症的各患者，例如手術、放射療法和/或化學療法的組合。特別地，已知放射或利用抗血管生成和/或血管滲透性降低劑的治療可以提高腫瘤內的缺氧組織的量。因此，本發明的化合物的效果可以通過與放射療法和/或利用抗血管生成劑的聯合治療來提高。此類組合的個體組分可以在療程的不同時間單獨地給予或同時地以分開或單一組合的形式給予。因此，本發明可以理解為包括所有此種同時或交替治療的方式，並且術語「給予」也進行相應的解釋。應理解的是本發明的化合物與其它抗腫瘤劑的組合的範圍原則上包括與任何有用於治療癌症的藥物組合物的組合。當組合於同一製劑時，應理解所述兩種化合物必需是穩定的並且彼此相容，與製劑中的其它組分相容，並且可以配製用於給予。當單獨配製時，它們可以提供為任何方便的製劑，方便地以本領域中公知的用於該化合物的方式。本發明的藥物組合物可以配製用於通過任何適合的途徑給予，例如通過口腔(包括頰或舌下)、直腸、鼻、局部(包括頰、舌下或透皮)、陰道或腸胃外(包括皮下、肌內、靜脈內或皮內)途徑。因此，本發明的藥物組合物可以配製為例如片劑、膠囊劑、粉劑、顆粒劑、錠劑、乳膏劑或液體製劑，如口服或無菌非腸道溶液劑或懸浮液。此類藥物製劑可以通過製藥領域已知的任何方法來製備，例如使活性成分與載體或賦形劑聯合。此類藥物製劑可以製備為腸溶包衣的顆粒劑、片劑或膠囊劑，以適合於口服和延遲釋放製劑。當化合物與針對相同疾病具有活性的第二治療劑組合使用時，各組分的劑量可以不同於當化合物單獨使用時的量。合適的劑量是本領域技術人員容易理解的。在根據第十五方面的本發明的一個實施方式中，提供了一種式(ia)的化合物，其中r1a-r1d、r2、r3、r4和a----b如上文中的定義，條件是：(i)當r3為h時，r1b和r1d各自獨立地不是oh或och2ch＝c(ch3)2；以及(ii)當r3為h、r1a-ld中的一個為h且r1a-1d中的至少一個為ch2ch＝c(ch3)2時，a----b不是ch＝ch。根據第十五或十六方面，在本發明的優選實施方式中，r1a-1d的兩個為h。在其它優選實施方式中，r1a-1d中的一個為h，且在其它實施方式中，r1a-1d都不為h。在優選的實施方式中，r1a-1d中的至少一個為ch2ch＝c(ch3)2，並且在另一個優選的實施方式中，r1a-1d中的至少一個為och2ch＝c(ch3)2。在某些實施方式中，r1a-1d中的至少一個為羥基，並且在某些其它實施方式中，r1a-1d中的至少兩個為羥基。在另一個實施方式中，r1a-1d中的至少一個為or4且r4為甲基，並且在又一個實施方式中，r4為苄基。在根據第十五或十六方面的本發明的優選實施方式中，r2或r3中的至少一個為羥基。在另一個優選的實施方式中，r2和r3都為羥基。在另一個實施方式中，r2或r3中的至少一個為or4且r4為甲基，並且在又一個實施方式中，r4為苄基。在本發明的優選實施方式中，式(ia)中的基團a----b為ch＝ch或ch＝chx-，其中x＝(ch2)pch2，並且p為選自由0、1、2或3組成的組中的整數。在本發明的其它實施方式中，式(ia)中的基團a----b為ch2-ch2或ch2-ch2x，其中x＝(ch2)pch2，並且p獨立地為選自由0、1、2或3組成的組中的整數。在優選的實施方式中，根據第十五或十六方面的式(ia)的化合物具有通式(ib)：其中r4、r5和r6各自獨立地選自基團ome、oet、opr、oipr、obu、oibu、otbu、obn。在另一個優選的實施方式中，根據第十五或十六方面的式(ia)的化合物具有式(ic)或(id)：其中r7、r8和r9各自獨立地選自基團oh、ome、-oet、opr、oipr、obu、oibu、otbu。在又一個優選的實施方式中，根據第十五或十六方面的式(ia)的化合物具有通式(ie)或(if)：其中r7、r8和r9各自獨立地選自基團oh、ome、oet、opr、oipr、obu、oibu、otbu。優選地，根據第十五或十六方面的化合物或者其藥用鹽或溶劑化物選自由以下各項組成的組：更優選地，根據第十五或十六方面的化合物或者其藥用鹽或溶劑化物選自由以下各項組成的組：在一個實施方式中，根據十五或十六方面的化合物或者其藥用鹽或溶劑化物選自由以下各項組成的組：在另一個優選的實施方式中，該化合物是usyds18：在另一個優選的實施方式中，根據第十五方面的化合物或者其藥用鹽或溶劑化物選自由以下各項組成的組：在研究異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物的初步體外試驗中，本發明人觀察到所有衍生物usyds1至usyds7對癌細胞生長的結構依賴性抑制。這些化合物的大多數表現出強效抑制幾乎所有的白血病細胞系(ccrf-cem、hl-60(tb)、k-562、molt-4、rpmi-8226、sr)。在一些細胞系中，生長在納米摩爾濃度下受到抑制。在抑制癌細胞的生長上，usyds1表現出最有效的活性，然後是usyds10、usyds9、usyds2，再就是usyds14。也觀察到衍生物usyds10和14對癌細胞生長的結構依賴性抑制。結構-活性研究顯示在3-位具有甲氧基且在2-位的c-異戊烯化表現出抑制癌症細胞的最高效力。大多數本研究中的pthos具有基於已知天然存在的化合物白皮杉醇結構的結構，其示出廣譜的生物活性。由於其抑制各種腫瘤細胞(包括白血病、淋巴瘤；乳癌、前列腺癌、結腸癌和黑素瘤)的增殖的能力，其當前因其抗癌特性而倍受關注。認為其抗癌作用通過細胞周期停滯介導；上調bid、bax、bik、bok、fas；p21waf1下調bcl-xl；bcl-2、ciap、活化半胱天冬蛋白酶(caspase)、損耗線粒體膜電位和釋放細胞色素c。已經證明白皮杉醇抑制一些轉錄因子的激活，這些轉錄因子包括nf-κβ(其在響應由自由基、紫外線照射、細胞因子、或微生物抗原引起的細胞應激中起著核心作用)、jak-1(在控制響應細胞外因子的細胞活性的stat路徑中的關鍵轉錄物)。已經觀察到在本研究中描述的pthos顯示的生物活性譜類似於由白皮杉醇所顯示的生物活性譜。另外，pthos(即usyds1，gi50值：0.02μμ-5μμ)在抑制幾乎所有類型的腫瘤細胞的增殖上與白皮杉醇(ic50值：5μμ-100μμ)相比，顯示出大約250倍以上的有效性。因此，本申請中提出的pthos將會是藥物研究和開發的極具吸引力的導向並作為進一步了解癌症的病理生理的生物工具。化合物usyds1和化合物usyds2的強效細胞毒性可以用它們的增加的疏水性來解釋，通過它們的計算得出的log分配係數(logp)值來表示。usyds1和usyds2具有的logp值幾乎是羥基二苯乙烯白藜蘆醇的兩倍。logp值對治療化合物的作用主要涉及組織穿透和分布。較高的logp值將使得化合物能夠更容易地穿過細胞膜和進入細胞。在其它初步實驗中，發現特定實例的o-異戊烯化羥基二苯乙烯衍生物和c-異戊烯化羥基二苯乙烯衍生物顯示出對sirt1酶的濃度依賴性抑制，該sirt1酶為sirtuin蛋白家族(沉默信息調節子2蛋白，sir2)的成員。sirtuin已經成為模型生物體中用於衰老和長壽的關鍵調節子。對sirtuin的遺傳學和生理學的研究證明這種酶家族在各種細胞過程中發揮了作用，包括基因沉默、細胞死亡、脂肪酸代謝、神經元的保護和壽命延長。為了不受任何特定的理論的約束，提出sirt1活性的調節可以致使治療疾病(包括癌症、代謝症候群、肥胖、神經退行性疾病和衰老-相關性疾病)用治療劑的開發。在優選的實施方式中，根據第十五或十六方面，式(ia)的化合物是化學合成的。在另一個優選的實施方式中，式(ia)的化合物分離自蜂膠，其中所述蜂膠來源於鱗籽莎屬(lepidospermagenus)的植物。在又一個實施方式中，式(ia)的化合物分離自鱗籽莎屬的樹脂、樹膠或滲出物。根據本發明的第二十方面，在式(ib)、(ic)、(id)、(ie)或(if)的化合物的製備中，優選地步驟(ii)中的縮聚反應是在鈀催化劑的存在下進行的。優選地，鈀催化劑是乙酸鈀(ii)。優選地，步驟(iii)中的烷基化反應是在金屬氫化物和滷代異戊烯基試劑的存在下進行的。優選地，所述金屬氫化物是氫化鈉；但是本領域技術人員能夠理解其它已知的金屬氫化物也可以使用。最優選的滷代異戊烯基試劑是brch2ch＝c(ch3)2。在優選的實施方式中，步驟(iv)或(vi)中的氫化反應是在鈀催化劑的存在下在溶劑的混合物中進行的。最優選地，鈀催化劑是碳載鈀(palladiumoncarbon)，且溶劑的混合物包含1,4-環己二烯和乙醇。但是，本領域技術人員能夠理解任何其它適合的試劑和溶劑也可以使用。在優選的實施方式中，步驟(v)中的重排反應是在矽酸鎂顆粒二氧化矽或氧化鋁顆粒的存在下進行的。在另一個優選的實施方式中，所述重排反應可以在微波輻射或光的存在下進行。在又一個實施方式中，步驟(v)中的重排反應是在矽酸鎂顆粒二氧化矽或氧化鋁顆粒的存在下和在微波輻射或光的存在下進行的。附圖說明圖1為一些分離的和合成的異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物的總結。圖2為概述新型o-異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物和c-異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物的合成的流程圖。圖3顯示了對於各種細胞系，化合物usyds1對人類癌細胞生長的抑制的劑量響應曲線。圖4顯示了對於各種細胞系，化合物usyds2對人類癌細胞生長的抑制的劑量響應曲線。圖5顯示了對於各種細胞系，化合物usyds3對人類癌細胞生長的抑制的劑量響應曲線。圖6顯示了對於各種細胞系，化合物usyds4對人類癌細胞生長的抑制的劑量響應曲線。圖7顯示了對於各種細胞系，化合物usyds9對人類癌細胞生長的抑制的劑量響應曲線。圖8顯示了對於各種細胞系，化合物usyds6對人類癌細胞生長的抑制的劑量響應曲線。圖9顯示了對於各種細胞系，化合物usyds7對人類癌細胞生長的抑制的劑量響應曲線。圖10用圖表示出了二苯乙烯化合物對自由基清除的效果。圖11用圖表示出了二苯乙烯化合物對nad-依賴性脫乙醯基酶sirtuin-2(sirt1)的濃度依賴性抑制。具體實施方式為了更好地理解本發明的本質，現在將描述如下的若干實施例：材料將從莎草(鱗籽莎屬粘質(lepidospermaviscidum))收集的觀察的蜜蜂捕獲在塑料管中，蓋上蓋子並冷凍。剪下並匯集帶有蜂膠的蜜蜂后腿的部分。收集來自植物的樹脂並存貯在-20℃直到分析。得到植物樣品並在40℃下在通風烘箱(thermoline,nswaustralia)中乾燥過夜以提供植物學者鑑定用的憑證標本，a/profmurrayhenwood,johnraymuseum,universityofsydney,sydney,australia，並且登記為鱗籽莎屬粘質(lepidospermaviscidum)化學型la，憑單號duke100222-42和鱗籽莎屬粘質化學型2a，憑單號duke100221-21。使用76個由3個10-框架盒製成的蜂箱(每個蜂箱在蜂箱罩蓋下配有蜂膠墊)來收集蜂膠樣品。在位於袋鼠島中南部地區的蜂房場所的位置上使用獨立編號的蜂箱。正相短柱色譜(npscc)用的預塗有矽膠60f254和矽膠60h的薄層層析板購自merck。用uvgl-58礦物光燈multibanduv-2544/366目測tlc板。在分離和合成中使用的所有化學品都購自sigma-aldrichptyltd(castlehill,nsw,australia)，包括氘化的nmr溶劑(例如氯仿-d和甲醇-d4)、氘化的二甲基亞碸(d6-二甲基亞碸)。溶劑包括己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、異丙醇、乙醇、甲醇和乙酸，都是分析純的並且購自ajaxfinechem,tarenpoint,nsw,australia或asiapacificspecialtychemicalltd(aps)。使用rotavapor型r-114旋轉蒸發器以40-60℃範圍的水浴溫度來蒸發溶劑餾分。真空泵v-700或1684930_1.doc。使用具有真空控制器v-800或v-850的vacuubrandmd4cnt隔膜泵(vacuubrandgmbh,wertheim,germany)。使用directtorr真空泵(sargent-welch,buffalo,usa)通過napco5831真空烘箱(napco,saltlakecity,usa)進行最終的乾燥。製備性hplc是在反相柱(grace,alltimac185μμ22mmid×250mm)上的shimadzu製備梯度lc-8a系統上進行的，注射體積500μl，用甲醇(75％)和水以10ml/min進行洗脫，並且使用紫外-可見光檢測器(shimadzuspd-20a)在280nm下進行檢測。分析hplc是在shimadzuuflc、lc-20ad泵、sil-20aht自動進樣器上利用hewlett-packard柱(nucleosil100c18,5μm,4mm×125mm)來進行的，注射體積20μl，用甲醇-水-乙酸(70:29.8:0.2)在1ml/min下進行洗脫，並且用紫外-可見光檢測器(shimadzuspd-20a)在230nm下進行檢測。1h和13c核磁共振(nmr)分析是在具有sms自動進樣器的varian400mhz系統(paloalto,california,usa)上進行的。nmr光譜以四甲基矽烷(tms)為參照物。質譜是從thermofinnigantsq7000(lc-ms/ms系統)和finniganpolarisiontrapms/ms系統(finnigan,sanjose,usa)使用xcalibur1.2數據系統來獲得的。植物和蜂膠樣本的1h-nmr化學概況(profile)的測定在室溫下將來自莖基部(0.1g)、蜜蜂后腿(0.1g)和蜂箱蜂膠(1.0g)的樹脂樣品用乙酸乙酯萃取15min。過濾萃取液，在減壓下乾燥並通過1h-nmr和hplc分析。發現來自莎草-1型的樣品含有作為主要成分的異戊烯化羥基二苯乙烯和肉桂酸酯，而來自莎草-2型的那些樣品顯示只有異戊烯化二苯乙烯作為主要成分，如上所述。然後選擇蜂膠樣品以分離出所述組分。來自袋鼠島的蜂膠的異戊烯化多羥基二苯乙烯的分離和鑑定。一般方法在室溫下用二氯甲烷以攪拌1小時來萃取蜂膠(10g)。使用正相短柱色譜(npscc)純化萃取物。採用由二氯甲烷(dcm)和乙酸乙酯(etoac)組成的以0、1、2、4、8、10、15、20、50和100％組成的逐步梯度流動相(2x100ml)來洗脫各組分，然後通過tlc和nmr分析。如果需要，隨後在相同的npscc上以不同的由乙烷和etoac或由己烷和異丙醇組成的流動相進一步純化化合物。當需要進一步純化化合物時，也採用正相製備hplc(shimadzulc-8a)。在室溫下，以含2％異丙醇的己烷為流動相，以10ml/min的流速使化合物洗脫通過矽膠柱(silica10μm,10cmx250cm)。用uv檢測器(uv/visspd-20a)在280nm下監控化合物的洗脫。通過1h-和13c-nmr和質譜(包括高分辨質譜)來表徵這些純化合物的結構和特性。當需要時，也使用梯度異核多重鍵的相干性(ghmbc)通過2d-nmr來進行分離的化合物的詳細結構分析。分離的異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物：(e)-2-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-4',5-二羥基-3,3'-二甲氧基二苯乙烯(usyds1)。淺黃色液體。c21h24o41hnmr(甲醇-d4400mhz):rt14.64min.δ7.16(d,j＝16hz,h),7.07(d,j＝4hz,h),6.94(dd,j＝8,4hz,h),6.86(d,j＝19hz,h),6.78(d,j＝8hz,h),6.63(d,j＝4hz,h),6.34(d,j＝4hz,h),5.06(m,h),3.89(s,3h),3.77(s,3h),3.39(m,2h),1.80(bs,3h),1.66(bs,3h).13c-nmr(cdcl3,100mhz)δ158.5,154.4,146.7,145.6,138.1,130.6,130.4,130.3,124.3,123.7,120.7,120.6,114.5,108.2,103.9,98.2,55.9,55.7,25.8,24.5,18.0；ci-ms:m/z339(m-1)-,hresims:m/z341.1749(m+h)+,c21h25o4的計算值341.1747.(e)-3-(-3-甲基-2-丁烯基氧基)-4』,5-二羥基-3』-甲氧基二苯乙烯(usyds2)。淺黃色液體。c20h22o41hnmr(甲醇-d4,400mhz):rt15.46min.δ7.12(d,j＝4hz,1h),7.01(d,j＝16hz,1h),6.97(dd,j＝8,4hz,1h),6.88(d,j＝16hz,1h),6.78(d,j＝8hz,2h,6.56(m,1h),6.24(m,1h),5.46(m,1h),4.52(d,j＝4hz,2h),3.90(s,3h),1.79(bs,3h),1.76(bs,3h).13c-nmr(cdcl3,100mhz)δ160.2,156.9,146.7,145.5,139.9,138.6,129.9,129.2,126.2,120.6,119.4,114.7,108.4,105.9,105.4,101.5,65.0,55.9,25.8,18.2；ci-msm/z325(μ-1)-,hresimsm/z327.15938(m+h)+,c20h23o4的計算值327.1591.(e)-4-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3,3』,5-三羥基-4』-甲氧基二苯乙烯(usyds3)。淺黃色液體。c20h22o41hnmr(甲醇-d4,400mhz):rt11.46min.δ7.08(d,j＝4hz,1h),6.93(dd,j＝8,4hz,1h),6.91(d,j＝16hz,1h),6.78(d,j＝16hz,1h),6.77(d,j＝8hz,1h),6.46(s,2h),5.23(m,1h),3.89(s,3h),3.28(m,2h),1.76(bs,3h),1.65(bs,3h)；ci-ms:m/z325(m-l)-；hrms:325.14453[m-1]-,(c20h21o4的計算值325.14398).(e)-3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-3',4',5-三羥基二苯乙烯(usyds4)。淺黃色液體。c19h20o41hnmr(甲醇-d4,400mhz):rt18.62min.δ6.98(d,j＝4hz,1h),6.94(d,j＝16hz,1h),6.85(dd,j＝8,4hz,1h),6.80(d,j＝16hz,1h),6.74(d,j＝8hz,1h),6.53(m,2h),6.23(m,1h),5.46(m,1h),4.51(d,j＝4hz,2h),1.79(bs,3h),1.76(bs,3h)；13cnmr(甲醇-d4,100mhz):δ160.2,158.2,145.2,145.1,139.8,136.9,129.5,128.5,125.5,119.9,118.8,114.9,112.4,105.2,103.8,100.7,64.4,24.4,16.8；ci-ms:m/z311(m-l)-；hreims:m/z335.1252(m+na)+,c19h20o4na的計算值335.1259.(e)-2,4-二(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3,4',5-三羥基二苯乙烯(usyds6)。灰白色固體。c24h28o31hnmr(甲醇-d4,400mhz):rt9.35min.δ7.30(d,j＝8hz,2h),7.11(d,j＝16hz,1h),6.80(d,j＝16hz,1h),6.76(d,j＝8hz,2h),6.63(s,1h),5.21(m,1h),5.10(m,1h),3.41(m,2h),3.35(m,2h),1.81(bs,3h),1.78(bs,3h),1.68(bs,6h)；ci-ms:m/z363(m-1)-.(e)-2,4-二(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3,3',4',5-四羥基二苯乙烯(usyds7)。灰白色固體。c24h28o41hnmr(甲醇-d4,400mhz):rt10.46min.δ7.07(d,j＝16hz,1h),6.94(d,j＝4hz,1h),6.79(dd,j＝8,4hz,1h),6.73(d,j＝16hz,1h),6.71(d,j＝8hz,1h),6.62(s,1h),5.21(m,1h),5.10(m,1h),3.41(m,2h),3.35(m,2h),1.81(bs,3h),1.78(bs,3h),1.68(bs,6h)；ci-ms:m/z379(m-l)-；hrms:379.19148[m-1]-,(c24h27o4的計算值379.19092).(e)-2-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3,3',4',5-四羥基二苯乙烯(usyds8)。c19h20o41hnmr(丙酮-d6,400mhz):δ7.07(d,j＝2hz,1h),7.15(d,j＝16hz,1h),6.89(dd,j＝8,2hz,1h),6.81(d,j＝8hz,1h),6.80(d,j＝16hz,1h),6.63(d,j＝2hz,1h),6.35(d,j＝2hz,1h),5.15(t,j＝7hz,1h),3.42(d,j＝7hz,2h),1.81(s,3h),1.65(s,3h).13cnmr(丙酮-d6,100mhz):δ155.9,155.8,145.4,145.3,138,4,130.1,129.7,129.4,124.5,123.9,117.4,119.0,115.4,112.9,103.4,101.6,24.0,25.0,17.2.hresims:(m/z)313.1434(m+h)+,c19h21o4的計算值313.1440.(e)-2-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3',4',5-三羥基-3-甲氧基二苯乙烯(usyds9)。c20h22o41hnmr(丙酮-d6,400mhz):δ7.16(d,j＝16hz,1h),7.07(d,j＝2hz,1h),6.90(dd,j＝8,2hz,1h),6.85(d,j＝16hz,1h),6.82(d,j＝8hz,1h),6.71(d,j＝2hz,1h),6.39(d,j＝2.3hz,1h),5.09(1h,t,j＝7hz,1h),3.78(s,3h),3.40(d,j＝7hz,2h),1.80(s,3h),1.64(s,3h).13cnmr(丙酮-d6,100mhz):δ158.5,156.3,145.3(2c),138.0,130.1,130.0,129.6,123.7,124.2,119.1,118.9,115.3,112.9,103.7,98.1,55.0,25.0,23.9,17.2.hresims:m/z327.1592(m+h)+,c20h23o4的計算值327.1596.(e)-2-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3,4',5-三羥基-3'-甲氧基二苯乙烯(usyds10)。c20h22o41hnmr(丙酮-d6,400mhz):δ7.13(d,j＝16hz,1h)7.02(dd,j＝8,2hz,1h),7.00(s,1h),6.92(d,j＝8hz,1h),6.85(d,j＝16hz,1h),6.66(d,j＝2hz,1h),6.30(d,j＝2hz,1h),5.20(t,＝7hz,1h),3.95(s,3h),3.43(d,j＝7hz,2h),1.84(s,3h),1.75(s,3h).13cnmr(丙酮-d6,100mhz):δ155.4,154.4,146.7,145.7,138.8,133.6,131.2,130.1,124.2,122.5,120.5,117.7,114.6,108.4,105.3,102.5,55.9,25.8,25.1,18.0.hresims:m/z349.1411(m+na)+,c20h22o4na的計算值349.1416.(e)-3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-4',5-二羥基二苯乙烯(usyds11)。c19h22o31hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.38(dd,j＝7,2hz,2h),7.00(d,j＝16hz,1h),6.84(d,j＝16hz,1h),6.82(dd,j＝7,2hz,2h),6.64(t,j＝2hz,1h),6.56(t,j＝2hz,1h),6.33(t,j＝2hz,1h),5.50(t,j＝7hz,1h),4.51(d,j＝7hz,2h),1.81(s,3h),1.76(s,3h).13cnmr(cdcl3,100mhz):δ160.4,156.7,155.4,139.9,138.4,130.1,128.8,128.0(2c),126.3,119.5,115.6(2c),105.6,105.5,101.3,64.9,25.8,18.2.4-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3,4',5-三羥基二氫二苯乙烯(usyds12)。c19h22o41hnmr(cd3od,400mhz)δ6.97(d,j＝8hz,2h),6.66(d,j＝8hz,2h),6.13(s,2h),5.22(t,j＝7hz,1h),3.24[d,j＝7hz,2h),2.72(m,2h),2.64(m,2h),1.74(s,3h),1.64(s,3h).13cnmr(cd3od,100mhz):δ155.5(2c),154.9,140.3,132.9,129.4,128.9(2c),123.6,114.6(2c),112.3,106.5(2c),38.0,36.8,24.5,21.7,16.5.(e)-2-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-3',4',5-三羥基二苯乙烯(usyds14)。無色固體，產量12mg。esi-ms:m/z379[m-1]-,1h-nmr(甲醇-d4,400mhz):δ7.07(d,j＝16hz,1h),6.96(d,j＝4hz,1h),6.80(dd,j＝8,4hz,1h),6.79(d,j＝16hz,1h),6.74(d,j＝8hz,1h),6.61(d,j＝4hz,1h),6.32(d,j＝4hz,1h),5.47(m,1h),5.06(m,1h),4.48(m,2h),3.37(m,2h),1.78(m,6h),1.75(m,3h),1.66(m,3h).13c-nmr(100mhz,cd3od):δ16.75,16.80,23.84,24.45,24.54,64.86,99.04,103.41,112.39,114.96,118.71,119.14,120.14,123.54,123.97,129.51,129.70,130.01,136.78,137.95,145.08,145.09,155.59,157.47.hrms:379.19148[m-1]-,(c24h27o4的計算值379.19092).(e)-2,6-二(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3,3',5,5'-四羥基二苯乙烯usyds15無色固體，產量9mg。esi-ms:m/z379[m-1]-,1hnmr(400mhz,cd3od):δ6.91(s,1h),6.82(d,j＝16hz,1h),6.73(s,1h),6.72(s,1h),6.28(s,1h),6.27(d,j＝16hz,1h),5.12(m,1h),3.26(m,2h),1.65(m,6h),1.59(m,6h).13c-nmr(100mhz,cd3od):δ16.75(2c),24.53(2c),25.60(2c),100.93,112.27,114.86,117.66(2c),118.24,124.06,124.63(2c),128.93(2c),130.20,133.33,139.41,144.73,144.97,153.04(2c).hrms:379.19149[m–1]-,(c24h27o4的計算值379.19092).(e)-2,6-二(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3,4',5-三羥基-3'-甲氧基二苯乙烯usyds18產量5mg。esi-ms:m/z393[m-1]-.1hnmr:(cd3od,400mhz)δ7.03(d,j＝2hz,1h),6.87(d,j＝17hz,1h),6.85(dd,j＝8,2hz,1h),6.77(d,j＝8hz,1h),6.33(d,j＝17hz,1h),6.30(s,1h),5.14(brt,j＝6hz,2h),3.88(s,3h),3.26{brd,j＝6hz,4h),1.66{brs,6h),1.60(brs,6h).13cnmr(cd3od,100mhz):δ18.37.(2c),26.12(2c),27.20(2c),56.53,102.58,110.27,116.42,119.23(2c),121.03,126.02(2c),126.31,130.41(2c),131.7,134.87,140.95,147.51,149.26,154.65(2c).hrms:417.20363[m+23]+,(c25h30o4na的計算值417.20418).異戊烯化多羥基二苯乙烯的化學改性及合成a.o-異戊烯基多羥基二苯乙烯至c-異戊烯基多羥基二苯乙烯的重排在微波反應器(cemdiscovermicrowave)中於120℃將usyds2(5mg)和florisil(5mg)在二甲苯(2ml)中的混合物加熱30min。在減壓下乾燥產物並使用npscc純化。檢測到兩種重排產物，組合產率為約30％。檢測到的主產物為(e)-4-(3-甲基-2-丁烯-l-基)-3,4',5-三羥基-3'-甲氧基二苯乙烯(usdys13)：檢測到的次產物為(e)-2-(3-甲基-2-丁烯-l-基)-3,4',5-三羥基-3'-甲氧基二苯乙烯(usyds10)。b.異戊烯化多羥基二苯乙烯的合成1.3,5-二羥基苯甲酸甲酯(1)的製備向3,5-二羥基苯甲酸(10g,64.9mmol)的無水甲醇(150ml)溶液中滴加乙醯氯(2ml,28.1mmol)。在n2下將混合物加熱回流17小時。蒸去溶劑並將殘留物溶解於乙酸乙酯(100ml)中，然後用飽和碳酸氫鈉(3x100ml)洗滌。用水(2x100ml)洗滌合併的有機層，用硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮得到作為無色固體的2(9.80g,90％)：mp167-168℃(lit.1mp168-169℃)；1hnmr(400mhz,丙酮-d6)δ8.66(s,2h),7.00(d,j＝2.4hz,2h),6.59(t,j＝2.4hz,2h),3.83(s,3h)。2.3-羥基-5-苄氧基苯甲酸甲酯(2)的製備在0℃在n2下，向nah(60％分散於礦物油中，3.3g，137.3mmol)的無水n,n-二甲基甲醯胺(dmf)(100ml)的懸浮液中加入2(10g，59.5mmol)的無水dmf(30ml)溶液，然後滴加苄基溴(6.4ml，53.8mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時，用冷水(50ml)冷激，用冷的1mhc1(20ml)酸化並且使用二乙醚(3x50ml)萃取。用水(2x50ml)洗滌合併的有機萃取物，用硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮。使用npscc使用由氯仿/乙醇組成的逐步梯度純化產物得到灰白色固體的2(4.5g，60％)2：mp97-98℃(lit.3mp98℃)；c15h14o41′hnmr(400mhz,cdc13)δ8.01(s,1h),7.43-7.33(m,5h),7.24(dd,j＝2.0,1.2hz,1h),7.20(dd,j＝2.0,1.2hz,1h),6.70(t,j＝2.0hz,1h),5.07(s,2h),3.90(s,3h)。3.3-羥基-5-苄氧基苯甲酸(3)的製備向2(4.5g，16.7mmol)的甲醇(30ml)溶液中加入1mnaoh(60ml60mmol)。在45℃在n2下，將所得到的反應混合物攪拌4小時，然後加入1mhc1(50ml)以酸化該溶液，然後用乙酸乙酯(3x40ml)萃取。用水(2x30ml)洗滌合併的有機萃取液並用硫酸鈉乾燥。在真空下蒸發出溶劑得到作為灰白色固體的3(4.02g，94％)：mp196-198℃；c14h12o41′hnmr(400mhz,丙酮-d6)δ7.42-7.33(m,5h),7.21(dd，j＝2.4,1.2hz,1h),7.11(dd,j＝2.4,1.2hz,1h),6.68(t,j＝2.4hz,1h),5.07(s,2h)。4.3-羥基-5-甲氧基苯甲酸(4)的製備使用甲基碘代替苄基溴如上所述來製備標題化合物，得到作為灰白色固體的4，mp199-200℃(lit.4mp.199-200℃)；c8h8o41hnmr(400mhz,丙酮-d6)δ8.01(s,2h),7.16(t,j＝1.2hz,1h),7.13(t,j＝1.2hz,1h),6.15(t,j＝2.4hz,1h),3.82(s,3h)。5.3-乙醯氧基-5-苄氧基苯甲酸(5)的製備向3(4.02g，17.6mmol)的乙酸酐(20ml，21.6mmol)溶液中加入吡啶(10％，0.15ml，1.76mmol)。將該混合物在室溫下攪拌4小時，用水(30ml)冷激，通過0.1mhcl(10ml)酸化並且使用乙酸乙酯(3x40ml)萃取。用水(2x30ml)洗滌合併的有機萃取液，用硫酸鈉乾燥並且過濾。真空蒸去溶劑並且在己烷/乙酸乙酯的(1:1)混合物中重結晶得到作為粉紅色晶體的5(3.86g，96％)5：mp133-134℃；c16h14o51hnmr(400mhz,cdc13)δ7.59(dd,j＝2.4,1.2hz,1h),7.45(dd,j＝2.4,1.2hz,1h),7.43-7.34(m,5h),6.99(t,j＝2.4hz,1h),5.1(s,2h),2.32(s,3h)。6.3-乙醯氧基-5-甲氧基苯甲酸(6)的製備如5中所述的製備標題化合物，得到作為灰白色固體的6：mp151-153℃；c10h10o51hnmr(400mhz,cdc13)δ7.50(dd,j＝2.0,1.4hz,1h),7.43(dd,j＝2.0,1.4hz,1h),6.90(t,j＝2.0hz,1h),3.86(s,3h),2.32(s,3h)。7.3-甲氧基-4-苄氧基苯甲醛(7)的製備在0℃在n2下，通過注射器向nah(60％分散於礦物油中，1.6g，66.6mmol)的無水dmf(50ml)的懸浮液中緩慢加入香草醛(4-羥基-3-甲氧基苯甲醛，4g，26.3mmol)的無水dmf(20ml)溶液，然後逐滴加入苄基溴(3ml，25.2mmol)。將該混合物在室溫下攪拌4小時，用冷水(30ml)冷激，用冷的1mhcl(15ml)酸化並且使用二乙醚(3x40ml)萃取。用水(2x30ml)洗滌合併的有機萃取液，用硫酸鈉乾燥並且減壓乾燥得到作為無色固體的7(6g,92％)：mp60-62℃(lit.6mp61-62℃)；c15h14o31hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.84(s,1h)),7.43-7.31(m,7h)),7.00(d,j＝8.4hz,1h)),5.25(s,2h)),3.95(s,3h))。8.4-甲氧基-3-苄氧基苯甲醛(8)的製備如7中所述的製備標題化合物，得到作為無色固體的8：mp61-63℃(lit.7mp61-63℃)；ci5h14o31hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.80(s,1h)),7.49-7.31(m,7h))，7.00(d,j＝8.1hz,1h)),5.20(s,2h)),3.97(s,3h))。9.4-乙烯基-2-甲氧基-1-苄氧基苯(9)的製備在0℃在n2下，向甲基三苯基溴化膦(6.5g，18.2mmol)的無水四氫呋喃(thf)(15ml)的懸浮液中加入叔丁醇鉀(2.3g，20.5mmol)，並且將反應混合物溫熱至室溫。逐滴地加入苄基香草醛(7)(4g，16.5mmol)的無水thf(15ml)溶液並攪拌2小時，然後用冷水(20ml)冷激，用0.1mhcl(20ml)酸化，並且使用乙酸乙酯(3x40ml)萃取。用20％氯化鈉水溶液(20ml)洗滌合併的有機萃取液，然後減壓乾燥。使用npscc使用由己烷/乙酸乙酯組成的逐步梯度流動相純化產物，得到作為無色固體的9(3.37g，85％)；mp53-54℃(lit.8mp50-51℃)；c16h16o21hnmr(400mhz,cdc13)δ7.45-7.28(m,5h),6.99(d,j＝2hz,1h),6.90(dd,j＝4,1hz,1h),6.83(d,j＝4hz,1h),6.68(dd,j＝17,1hz,1h),5.64(dd,j＝17,1hz,1h),5.17(s,2h),5.14(d,j＝1hz,1h),3.92(s,3h)。10.5-乙烯基-2-甲氧基-1-苄氧基苯(10)的製備如9中所述的製備標題化合物，得到作為灰白色固體的10；mp68-69℃(lit.9mp68-69℃)；c16h16o21hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.48-7.31(m,5h),7.01(d,j＝2hz,1h),6.97(dd,j＝8,2hz,1h),6.85(d,j＝8hz,1h),6.64(dd,j＝17,1hz,1h),5.56(dd,j＝17,1hz,1h),5.17(s,2h),5.12(d,j＝1hz,1h),3.92(s,3h)。11.e-1-[3-乙醯氧基-5-苄氧基苯基]-2-[3-甲氧基-4-苄氧基苯基]乙烯(11)的製備:在n2下在室溫下，向n,n-二(2,6-二異丙基)二氫氯化咪唑(0.093g，10％，0.217mmol)和pd(oac)2(0.048g，10％，0.217mmol)的二甲苯(3ml)溶液中加入5的醯氯(0.7g，2.17mmol)的二甲苯溶液2ml，隨後加入4-乙基嗎啉(0.04ml，0.316mmol)和試劑9(0.627g，2.61mmol)的二甲苯(3ml)溶液。將該混合物在130℃加熱18-22小時。真空蒸去溶劑並且使用npscc(己烷/乙酸乙酯3:1作為流動相)純化該產物得到作為黃色油狀物的11(0.33g，31.6％)；c31h28o51hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.45-7.28(m,13h),7.06(d,j＝2.0hz,1h),7.02(d,j＝17hz,1h),6.97(dd,j＝6,2hz,1h),6.89(m,1h),6.62(t,j＝2hz,1h),5.18(s,2h),5.07(s,2h),3.94(s,3h),2.30(s,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ169.39,159.78,151.81,149.79,148.32,139.82,137.00,136.57,130.48,129.78,128.63(2c),128.58(2c),128.10,127.88,127.55(2c),127.24(2c),126.02,119.98,113.95,112.02,110.50,109.48,107.28,71.0,70.27,56.02,21.19；ci-msm/z(％):481(m+1)+,503(m+na)+；hrms:m/z503.1828(m+na)+,c31h28o5na的計算值503.1834。12.e-1-[3-乙醯基-5-苄氧基苯基]-2-[3-苄氧基-4-甲氧基苯基]乙烯(12)的製備如11中所述的將5的醯氯與試劑10縮聚來製備標題化合物。從己烷/甲苯的混合物(2:1)中對產物進行重結晶得到微黃色針狀結晶；c31h28o5mp133-134℃；1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.49-7.29(m,10h),7.07(d,j＝2hz,1h),7.05(dd,j＝8,2hz,1h),6.97(d,j＝16hz,1h),6.95(t,j＝2hz,1h),6.89(d,j＝8hz,1h),6.84(t,j＝2hz,1h),6.82(d,j＝16hz,1h),6.62(t,j＝2hz,1h),5.18(s,2h),5.07(s,2h),3.94(s,3h),2.30(s,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ169.39,159.76,151.80,149.90,148.34,139.83,137.05,136.58,129.94,129.78,128.64(2c),128.60(2c),128.11,127.94,127.58(2c),127.38(2c),125.88,120.59,112.00,111.91,111.81,110.52,107.22,71.16,70.27,56.06,21.18(ch3co)；ci-msm/z481(m+1)+,503(m+na)+；hrmsm/z503.1832(m+na)+,c31h28o5na的計算值503.1834。13.e-1-[3-乙醯氧基-5-甲氧基苯基]-2-[3-甲氧基-4-苄氧基苯基]乙烯(13)的製備如11中所述的將6的醯氯與試劑9縮聚來製備標題化合物，得到作為灰白色固體的標題化合物；mp104-106℃；c25h24o51hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.45-7.30(m,8h),7.07(d,j＝2hz,1h),7.03(d,j＝16hz,1h),6.98(dd,j＝8,2hz,1h),6.90(d,j＝16hz,1h),6.88(m,1h),5.18(s,2h),3.95(s,3h),3.83(s,3h),2.31(s,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ169.41,160.58,151.83,149.78,148.31,139.76,137.00,130.49,129.72,128.58(2c),127.88,127.24(2c),126.07,119.97,113.94,111.73,109.67,109.46,106.54,71.01,56.02,55.50,21.18；ci-msm/z405[m+1]+；hrmsm/z405.1695(m+h)+,c25h25o5的計算值405.1702。14.e-1-[3-羥基-5-苄氧基苯基]-2-[3-甲氧基-4-苄氧基苯基]乙烯(14)的製備在0℃在n2下，向二苯乙烯11(0.04g，0.083mmol)在混合溶劑(meoh/thf/h2o，3/3/3ml)的溶液中加入naoh(0.02g，0.35mmol)。將反應混合物溫熱至室溫並且攪拌3小時。用0.1mhcl(5ml)將溶液酸化並且使用乙酸乙酯(3x20ml)萃取。用20％氯化鈉水溶液(10ml)洗滌合併的有機相，用硫酸鈉乾燥和真空蒸發。使用npscc(己烷/乙酸乙酯的流動相)純化產物，然後重結晶得到作為無色固體的14(0.016g，44.5％)；mp114-115℃；c29h26o41hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.45-7.28(m,10h),7.06(d,j＝2hz,1h),7.00(d,j＝16hz,1h),6.98(dd,j＝8,2hz,1h),6.87(d,j＝8hz,1h),6.86(d,j＝16hz,1h),6.71(t,j＝2.0hz,1h),6.59(t,j＝2hz,1h),6.38(t,j＝2hz,1h),5.18(s,2h),5.07(s,2h),3.95(s,3h)；13cnmr(100mhz,甲醇-d4)δ160.29,156.78,149.76,148.19,139.92,136.98,136.84,130.65,129.20,128.61(2c),128.57(2c),128.02,127.88,127.49(2c),127.26(2c),126.54,119.94,113.96,109.45,105.97,105.69,101.54,71.02,70.01,56.03；ci-ms:461(m+na)+,439(m+1)+；hrmsm/z439.1908(m+h)+,c29h27o4的計算值439.1909。15.e-1-[3-羥基-5-苄氧基苯基]-2-[3-苄氧基-4-甲氧基苯基]乙烯(15)的製備如對化合物14所述的對12進行鹼性水解得到作為無色固體的標題化合物；mp117-119℃；c29h26o41hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.49-7.30(m,10h),7.07(d,j＝2.0hz,1h),7.06(dd,j＝8.4,2.0hz,1h),6.96(d,j＝16.0hz,1h),6.87(d,j＝8.0hz,1h),6.79(d,j＝16.4hz,1h),6.99(t,j＝1.6hz,1h),6.57(t,j＝2.0hz,1h),6.38(t,j＝2.4hz,1h),5.19(s,2h),5.07(s,2h),3.90(s,3h)。13cnmr(100mhz,甲醇-d4)δ160.20,158.30,149.68,148.25,139.70,137.41,137.31,130.62,128.16,128.07(2c),128.05(2c),127.52,127.41(3c),127.15(2c),126.62,120.35,111.95(2c),105.67,104.09,101.11,70.88,69.56,55.10；ci-ms:m/z461(m+na)+,439(m+1)+；hrmsm/z439.1907(m+h)+,c29h27o4的計算值439.1909。16.e-1-[3-羥基-5-甲氧基苯基)-2-[3-甲氧基-4-苄氧基苯基]乙烯(16)的製備如對化合物14所述的對13進行鹼性水解得到作為淡黃色固體的標題化合物；mp110-112℃；c23h22o41hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.45-7.28(m,5h),7.07(d,j＝2hz,1h),7.00(d,j＝16hz,1h),6.98(dd,j＝8,2hz,1h),6.87(d,j＝17hz,1h),6.85(d,j＝8hz,1h),6.62(t,j＝2hz,1h),6.57(t,j＝2hz,1h),6.31(t,j＝2hz,1h),5.17(s,2h),3.94(s,3h),3.81(s,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ161.08,156.86,149.73,148.16,139.85,136.96,130.69,129.11,128.57(2c),127.90,127.29(2c),126.61,119.95,113.97,109.47,105.72,104.73,100.72,71.03,56.03,55.36；ci-ms,m/z384(m+na)+,363(m+1)+；hrmsm/z363.1592(m+h)+,c23h23o4的計算值363.1596。17.e-1-[3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-5-苄氧基苯基]-2-[3-甲氧基-4-苄氧基苯基]乙烯(17)的製備在0℃在n2下，向nah(60％分散於礦物油中，0.0051g，0.213mmol)的無水dmf(5ml)懸浮液中逐滴加入二苯乙烯14(0.04g，0.091mmol)的dmf(3ml)溶液，然後逐滴加入3,3-二甲基烯丙基溴(0.011ml，0.091mmol)2。將該混合物在室溫下攪拌2-3小時，然後用冷水(5ml)冷激，用冷的0.1mhcl(5ml)酸化並且使用二乙醚(3x10ml)萃取。用水(2x10ml)洗滌合併的有機萃取液並且減壓乾燥。使用npscc(己烷/乙酸乙酯作為流動相)對產物進行純化得到作為淡黃色油狀物的17(0.02g，43.3％)；c34h34o41hnmr(400mhz,cdc13)δ7.46-7.28(m,10h),7.07(d,j＝2hz,1h),7.01(d,j＝16hz,1h),6.96(d,j＝2hz,1h),6.90(d,j＝16hz,1h),6.87(d,j＝8hz,1h),6.73(t,j＝2hz,1h),6.68(t,j＝2hz,1h),6.48(t,j＝2hz,1h),5.52(m,1h),5.17(s,2h),5.07(s,2h),4.52(d,j＝7hz,2h),3.95(s,3h),1.80(d,j＝1hz,3h),1.76(d,j＝1hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ160.21,160.12,149.78,148.14,139.49,138.35,137.03,136.94,130.76,128.94,128.59(2c),128.56(2c),127.94,127.86,127.54(2c),127.24(2c),126.97,119.87,119.53,113.98,109.43,105.38,105.32,101.14,71.01,70.09,64.84,56.03,25.85,18.22；ci-ms:m/z529(m+na)+,507(m+1)+；hrmsm/z507.2528(m+h)+,c34h35o4的計算值507.2535。18.e-l-[3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-5-苄氧基苯基]-2-[3-苄氧基-4-甲氧基苯基]乙烯(18)的製備如對化合物17所述的對15進行異戊烯化得到作為灰白色固體的標題化合物；mp88-90℃；c34h34o41hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.49-7.32(m,10h),7.08(d,j＝2hz,1h),7.06(dd,j＝8,2hz,1h),6.97(d,j＝16hz,1h),6.89(d,j＝8hz,1h),6.82(d,j＝16hz,1h),6.71(t,j＝2hz,1h),6.66(t,5j＝2hz,1h),6.47(t,j＝2hz,1h),5.53(m,1h),5.20(s,2h),5.07(s,2h),4.52(d,j＝6hz,2h),3.91(s,3h),1.80(d,j＝1hz,3h),1.75(d,j＝1hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ161.04,160.95,150.51,149.11,140.24,139.03,137.81,137.67,130.91,129.57,129.27(4c),128.66,128.58,128.22(2c),128.05(2c),127.50,121.10,120.20,112.48,112.40,105.95,105.86,101.60,71.55,70.47,65.18,56.36,026.00,18.33；ci-ms:m/z529(m+na)+,507(m+1)+；hrmsm/z507.2530(m+h)+,c34h35o4的計算值507.2535。19.e-1-[3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-5-甲氧基苯基]-2-[3-甲氧基-4-苄氧基苯基]乙烯(19)的製備如對化合物17所述的對16進行異戊烯化得到作為灰白色晶體的標題化合物；mp66-69℃；c28h30ο41hnmr(400mhz,cdcl3)57.45-7.28(m,5h),7.08(d,j＝2hz,1h),7.02(d,j＝16hz,1h),6.98(d,j＝2hz,01h),6.90(d,j＝16hz,1h),6.87(d,j＝8hz,1h),6.67(t,j＝2hz,1h),6.64(t,j＝2hz,1h),6.40(t,j＝2hz,1h),5.53(m,1h),5.17(s,2h),4.53(d,j＝7hz,2h),3.96(s,3h),3.81(s,3h),1.81(d,j＝1hz,3h),1.76(d,j＝1hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ160.91,160.23,149.76,148.14,139.46,138.35,137.04,130.78,128.90,128.56(2c),127.87,127.25(2c),127.02,119.86,119.56,113.98,109.44,5104.96,104.49,100.37,71.02,64.82,56.04,55.36,25.86,18.22；ci-ms:m/z453(m+na)+；hrmsm/z453.2036(m+na)+,c28h30o4na的計算值453.2042。20.(e)-3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-4',5-二羥基-3'-甲氧基二苯乙烯(20，相當於usyds2)的製備向17(0.02g，0.035mmol)的無水乙醇(8ml)溶液中加入1,4-環己二烯(3ml，0.030mmol)和pd-c(10％，0.002g)。在n2下攪拌該混合物並且在80℃下回流4小時。將溶液過濾並且在減壓下乾燥得到油狀殘留物，將其通過高效液相色譜法(hplc)進行純化得到作為淡黃色油狀物的20；c20h22o41hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.02(d,j＝2hz,1h),7.00(d,j＝16hz,1h),6.99(d,j＝2hz,1h),6.91(dd,j＝8,1hz,1h),6.85(d,j＝16hz,1h),6.64(t,j＝2hz,1h),6.56(t,j＝2hz,1h),6.33(t,j＝2hz,1h),5.53(m,1h),4.52(d,j＝7hz,2h),3.95(s,3h),1.82(d,j＝1hz,3h),1.76(d,j＝1hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ160.38,156.70,146.67,145.69,139.87,138.37,129.73,129.29,126.15,120.63,119.49,114.54,108.24,105.58,105.38,101.29,64.85,55.92,25.85,18.22；ci-ms:m/z325(m-l)-；hrmsm/z327.1588(m+h)+,c20h23o4的計算值327.1596。21.3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-4',5-二羥基-3'-甲氧基二氫二苯乙烯(21)的製備在脫除化合物20上的苄基的過程中，通過氫化橋連c＝c獲得標題化合物。得到的標題化合物為淺黃色油狀物；c20h24o41hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.84(d,j＝8hz,1h),6.69(dd,j＝8,2hz,1h),6.62(d,j＝2hz,1h),6.34(t,j＝2hz,1h),6.26(t,j＝2.0hz,1h),6.24(t,j＝2hz,1h),),5.46(m,lh),5.46(s,1h),4.68(s,1h),4.53(d,j＝7hz,2h),3.84(s,3h),2.85(m,4h),1.80(d,j-0.4hz,3h),1.73(d,j＝0.5hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ160.11,156.44,146.22,144.46,143.73,138.23,133.61,120.95,119.55,114.15,111.10,107.89,107.58,99.62,64.72,55.84,38.29,37.23,25.84,18.18；ci-ms:m/z351(m+na)+；hrmsm/z351.1566(m+na)+,c20h24o4na的計算值351.1572。22.(e)-3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-3』,5-二羥基-4』-甲氧基二苯乙烯(22)的製備如對化合物20所述的脫除18的苄基得到作為淺黃色油狀物的標題化合物；c20h22o41nmr(400mhz,cdc13)δ7.13(d,j＝2hz,1h),6.98(d,j＝16hz,1h),6.97(dd,j＝8,2hz,1h),6.86(d,j＝8hz,1h),6.86(d,j＝16hz,1h),6.64(t,j＝2hz,1h),6.57(t,j＝2hz,1h),6.33(t,j＝2hz,1h),5.60(s,lh),5.52(m,1h),4.77(s,1h),4.52(d,j＝9hz,2h),3.91(s,3h),1.82(d,j＝1hz,3h),1.76(d,j＝1hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdc13)δ160.37,156.69,146.51,145.75,139.83,138.36,130.87,128.92,126.78,119.51,119.40,111.84,110.62,105.66,105.48,101.33,65.18,56.36,26.00,18.33；ci-ms:m/z349.1408(m+na)+,c20h22o4na的計算值349.1416。23.3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-3',5-二羥基-4'-甲氧基二氫二苯乙烯(23)的製備在脫除化合物18上的苄基的過程中，通過氫化側鏈上的雙鍵獲得標題化合物。所獲得的標題化合物為淺黃色油狀物；c20h24o41hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.79(d,j＝2hz,1h),6.77(d,j＝4hz,1h),6.66(dd,j＝8,2hz,1h),6.35(t,j＝2hz,1h),6.27(m,1h),5.56(s,1h),5.50(m,1h),4.74(s,1h),4.46(d,j＝7hz,2h),3.88(s,3h),2.80(m,4h),1.80(d,j＝1hz,3h),1.74(d,j＝1hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdc13)δ160.11,156.42,145.41,144.80,144.51,138.18,135.07,119.73,119.59,114.59,110.55,107.81,107.49,99.64,64.73,55.00,38.05,36.89,25.83,18.18；ci-ms:m/z351(m+na)+；hrmsm/z351.1566(m+na)+,c20h24o4na的計算值351.1572。24.e-l-[2-(3-甲基-2-丁烯基)-5-羥基-3-苄氧基苯基]-2-[3-甲氧基-4-苄氧基苯基]乙烯(24)的製備向17(0.024g，0.061mmol)的甲苯(30ml)溶液中加入100-200目florisil(0.24g，10x)並且在110℃在n2下加熱4小時。將反應混合物過濾，真空蒸發並且使用npscc(己烷/乙酸乙酯作為流動相)對紅棕色殘留物進行純化得到微褐色固體(0.014g，58.3％)。在己烷/乙酸乙酯(3:1)混合物中對產物進行重結晶得到作為灰白色固體的24；mp145-150℃；c34h34o41hnmr(400mhz,cdc13)δ7.46-7.28(m,10h),7.20(d,j＝16hz,1h),7.06(d,j＝2hz,1h),6.97(dd,j＝8,2hz,1h),6.88(d,j＝16hz,1h),6.87(d,j＝8hz,1h),6.68(d,j＝2hz,1h),6.40(d,j＝2hz,1h),5.18(s,2h),5.17(m,1h),5.05(s,2h),4.69(s,1h),3.94(s,3h),3.48(d,j＝7hz,2h),1.73(d,j＝1hz,3h),1.67(d,j＝1hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ157.60,154.27,149.76,148.08,138.31,137.14,137.04,131.18,130.59,130.35,128.56(2c),128.49(2c),127.86,127.78,127.23(2c),127.21(2c),124.74,123.63,121.13,119.85,113.99,109.47,104.31,99.53,71.03,70.29,55.98,25.77,24.69,18.01。25.e-1-[2-(3-甲基-2-丁烯基)-5-羥基-3-甲氧基苯基]-2-[3-甲氧基-4-苄氧基苯基]乙烯(25)的製備如對化合物24所述的對19進行重排得到粉紅色固體：mp161-162℃；c28h30o41hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.46-7.28(m,5h),7.19(d,j＝16hz,1h),7.06(d,j＝2hz,1h),6.97(dd,j＝8,2hz,1h),6.88(d,j＝16hz,1h),6.87(d,j＝8hz,1h),6.66(t,j＝2hz,1h),6.40(t,j＝2hz,1h),5.18(s,2h),5.13(m,1h),4.64(s,1h),3.94(s,3h),3.80(s,3h),3.42(d,j＝6hz,2h),1.80(d,j＝1hz,3h),1.68(d,j＝1hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ158.56,154.35,149.76,148.07,138.11,137.04,131.21,130.63,130.24,128.56(2c),127.86,127.22(2c),124.73,123.61,120.78,119.84,113.99,109.42,103.88,98.21,71.03,55.97,55.68,25.77,24.46,17.98；ci-ms:m/z453(m+na)+,431(m+l)+；hrmsm/z431.2217(m+l)+,c28h31o4的計算值431.2222。26.(e)-2-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3,4',5-三羥基-3'-甲氧基二苯乙烯(26，相當於usyds10)的製備向24(0.02g，0.035mmol)的純乙醇(6ml)的溶液中加入1,4-環己二烯(3ml)和pd-c(10％，0.0035mmol)。在n2下攪拌該混合物並且在80℃下加熱4小時。將溶液過濾並真空蒸發得到油狀殘留物，使用npscc(己烷/乙酸乙酯作為流動相)對其進行純化，然後用正相hplc(2:1己烷/異丙醇為流動相)進行純化得到淺黃色油狀的標題化合物：數據類似於usyds10。27.(e)-2-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-5,4'-二羥基-3',3-二甲氧基二苯乙烯(27，相當於usyds1)的製備使用如對化合物25所述的程序製備標題化合物，得到作為淺黃色油狀物的27；c21h24o41hnmr(400mhz,cdc13)δ7.17(d,j＝16hz,1h),7.01(dd,j＝12,2hz,1h),7.0(d,j＝2hz,1h),6.91(d,j＝8hz,1h),6.87(d,j＝16hz,1h),6.66(t,j＝2hz,1h),6.36(t,j＝2hz,1h),5.15(m,1h),4.64(s,1h),3.94(s,3h),3.80(s,3h),3.42(d,j＝7hz,2h),1.81(d,j＝1hz,3h),1.68(d,j＝1hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdc13)δ158.57,154.37,146.68,145.60,138.18,130.61,130.44,130.27,124.28,123.67,120.73,120.58,114.55,108.26,103.88,98.18,55.88,55.71,25.79,24.48,17.98；ci-ms:m/z339(m-l)-；hrmsm/z363.1566(m+na)+,c21h24o4na的計算值363.1572。28.2-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-5,4'-二羥基-3',3-二甲氧基二氫二苯乙烯(28)的製備在脫除化合物27上的苄基的過程中，通過氫化側鏈上的雙鍵獲得標題化合物。所獲得的標題化合物為淺黃色油狀物；c21h26o41hnmr(400mhz,cdc13)δ6.86(d,j＝8hz,1h),6.70(dd,j＝8,2hz,1h),6.64(d,j＝2hz,1h),6.30(d,j＝2hz,1h),6.24(d,j＝2hz,1h),5.48(s,1h),5.07(m,1h),4.67(s,1h),3.85(s,3h),3.78(s,3h),3.28(d,j-6hz,2h),2.82(m,4h),1.74(d,j＝1hz,3h),1.66(d,j＝1hz,3h)；,3cnmr(100mhz,cdc13)δ158.63,154.23,146.23,143.73,142.01,133.93,130.59,123.87,120.92,120.67,114.21,111.02,107.96,96.90,55.84,55.60,37.19,35.49,25.76,24.38,17.95；ci-ms:m/z365(m+na)+；hrmsm/z365.1723(m+na)+,c21h26o4na的計算值365.1729。異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物的生物學評價1.異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物的抗癌活性a)在美國國家癌症研究所(nationalcancerinstitute,nci)中，針對60種細胞系，評價七種異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物(即，usyds1至usyds7)在一系列濃度(1x10-8-1xl0-4m)濃度下對細胞生長的抑制，如下表1中所示。體外癌症篩選的方法：nci所採用的一般方法將人類腫瘤細胞系生長於含有5％牛胎血清和2mml-穀氨醯胺的rpmi1640培養基中。對於典型實驗，取決於個體細胞系的倍增時間，以5000-40000細胞/孔範圍內的接種密度，以100μl將細胞接種到96孔微量滴定板中。在細胞接種後，將該微量滴定板在37℃、5％co2、95％空氣和100％相對溼度的條件下溫育24小時，然後加入藥物。24h後，用三氯乙酸(tca)原位固定兩個板的各細胞系，以表示在加入藥物時各細胞系的細胞群的測量。以400倍於所需的最終最大測試濃度將實驗藥物溶解於二甲基亞碸(dmso)中，並且在使用前冷凍保存。在藥物添加時，解凍等分試樣的冷凍濃縮物，並且用含有50μg/ml慶大黴素的完全培養基將其稀釋至兩倍於所需的最終最大測試濃度。將100μl等分試樣的藥物加入到已經含有100μl培養基的適合微滴板孔中，得到所需的最終藥物濃度。在加入藥物後，將板在37℃、5％co2、95％空氣和100％相對溼度的條件下再溫育48h。對於貼壁細胞，通過添加冷的tca來終止實驗。通過溫和添加50μl冷的50％(w/v)tca(最終濃度，10％tca)來原位固定細胞，並且在4℃下溫育60分鐘。棄去上清液，用自來水將板洗滌五次並風乾。向每個孔中加入0.4％(w/v)處於1％乙酸中的磺基羅丹明b(srb)溶液(100μl)，並且將板在室溫下溫育10分鐘。染色後，用1％的乙酸洗滌五次去除未結合的染料，並且將板風乾。隨後用10mmtrizma鹼溶解結合的染劑，並且在自動酶標儀上在515nm的波長下讀取吸光度。對於懸浮細胞，方法是一樣的，除了實驗是通過溫和地添加50μl80％的tca(最終濃度，16％tca)而將沉降的細胞固定在孔的底部來終止的，並在在自動酶標儀上在515nm的波長下讀取吸光度。計算usyds1-usyds7各自的gi50值(細胞生長的50％抑制所需的濃度)、tgi值(細胞生長的完全抑制所需的濃度)和lc50值(50％細胞致死率或死亡所需的濃度)，結果如以下表1-3所示。表1：pphosusyds1、usyds2、和usyds3對人類癌症細胞生長的影響表2：pphosusyds4至usyds6對人類癌症細胞生長的影響表3：pphosusyds7對人類癌症細胞生長的影響概括來說，所有的異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物usyds1至usyds7都示出了對癌細胞生長的結構依賴性抑制。在一些細胞系中，生長在納摩爾濃度下受到抑制。在抑制癌細胞生長方面，usyds1表現出了最有效的活性，然後是usyds5，再是usyds2。測試的其它pphos化合物被證明是中度的抑制劑。圖3-圖9所示為對於上表中所示的各細胞系，化合物usyds1至usyds7對人類癌細胞生長的劑量響應曲線。值得注意的是，相對於抑制細胞生長所需的濃度(gi50值)，這些pphos需要至少10倍的過量濃度才能導致細胞死亡(lc50值)或導致壞死。這表明所述pphos可能會引起癌細胞經受程序性細胞死亡(凋亡)或細胞周期停滯。b)美國國家癌症研究所(nci)，針對所述細胞系在一系列濃度(1x10-8-1x10-4m)下，評價了兩種異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物(即usyds10和usyds14)對細胞生長的抑制，如下表4a和4b所示。表4a：usyds10對癌細胞生長的抑制效果表4b：usyds14對癌生長的抑制效果概括來說，所有的異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物usyds10和usyds14都顯示出了對癌細胞生長的結構依賴性抑制。2.各種羥基二苯乙烯的計算的log分配係數(logp)值usyds1和usyds2以及已知的羥基二苯乙烯的計算的logp值如下表5所示。表5.各種羥基二苯乙烯的計算的logppphos化合物(例如usyds1和usyds2)的有效抑制可以依據它們增加的疏水性來說明，通過它們的計算的log分配係數(logp)值來表示。usyds1和usyds2具有的logp值幾乎是羥基二苯乙烯白藜蘆醇的兩倍。logp對治療化合物的作用主要涉及組織穿透和分布。較高的logp值將使得化合物能夠更加容易地穿過細胞膜並進入細胞。3.異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物對經uv-輻射的人類皮膚細胞的影響在12-孔培養板中將正常成年人類角質細胞(nhk)(invitrogen,vic,australia)培養於角質細胞生長培養基epilife中直到達到亞匯合狀態，所述培養基補充鈣和人類角質細胞生長增補物(hkgs，含有0.2ngegf每ml，5mg胰島素每ml，5mg鐵傳遞蛋白每ml，0.18mg氫化可的松每ml和0.2％牛垂體提取物)(invitrogen,vic,australia)。在37℃下在具有5％二氧化碳的增溼培養箱中，在24-孔板中將細胞培養24h至密度為5x103細胞每ml/孔，並且根據以下所述的方法來測試：uv輻射的最佳劑量的測定使用pbs(磷酸鹽緩衝液)將如上所述的密度接種的細胞洗滌兩次，然後使用一系列公知為med(最小紅斑量，1med＝25.43/光強度)的uva和uvb劑量進行輻射。將細胞更換生長培養基並且在37℃於具有5％二氧化碳的增溼培養箱中溫育約24h。使用mts檢測((celltiteraqueous單溶液細胞增殖檢測)(promega,vicaustralia)測量細胞活力。救援(rescue)檢測用pbs將細胞洗滌兩次，用pbs薄層進行更換，然後用如所確定的最佳劑量的uva和uvb進行輻射。在輻射後，立即地用含有一系列濃度的測試樣品的新鮮培養基對細胞進行更換，並且在增溼的co2培養箱中在37℃下再溫育24小時。收集上清液並且保持在-80℃直到使用elisa試劑盒測量pge2和細胞因子(il1、il6、il8、il10和il12)的濃度。防護檢測用pbs將細胞洗滌兩次，用含有不同濃度的測試化合物的pbs薄層進行更換，然後使用如上所確定的最佳劑量的uva和uvb進行輻射。在輻射後，立即用新鮮培養基對細胞進行更換，並且在增溼的co2培養箱中在37℃下再溫育24小時。收集上清液並且保持在-80℃直到使用elisa試劑盒測量pge2和細胞因子(il1、il6、il8、il10和il12)的濃度。同樣的對假處理的對照培養物進行處理，但是不進行uv輻射。二苯乙烯化合物包括usyds1、usyds2、usyds3、usyds5和usyds7並且蜂膠在0.1、1和10μμ或μg/ml進行測試。測量最佳劑量的uv輻射的結果顯示在1med的uva和uvb輻射下，對細胞活力沒有顯著影響。因此，選擇該條件用於研究二苯乙烯和蜂膠提取物對救援測試中細胞因子的水平的影響。在對uv輻射的人類表皮角質細胞(hek)中細胞因子生產的調節的初步研究中，觀察到usyds1和usyds2的混合物適度地抑制il-6、tgfα、g-csf和gm-csf的生產(2-3倍)。然而，發現該異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物顯著地增加uv輻射的細胞對il-8和il-1rα的生產(4-5倍)。已知il-8在免疫響應的發病中發揮作用。另一方面，il-1rα(天然存在的細胞因子受體拮抗劑)在抑制炎症過程中il-1的有毒效應中發揮作用。因此，這些初步結果表明本發明的異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物可以是用於治療與免疫抑制和炎症相關的病症的優良候選物。4.二苯乙烯和蜂膠提取物的抗氧化活性1,1-二苯基-2-苦肼基(dpph)清除活性檢測(l,l-二苯基-2-苦肼基)dpph檢測通常用於測試化合物或天然產物的提取物的自由基清除能力，其在517nm下測量dpph*自由基的減少。以其自由基形式的dpph*由於其奇電子而在517nm下顯示出強大的吸收。一旦被抗氧化劑或自由基清除劑減少，該吸收即消失並且通過清除自由基所產生的脫色與吸收的電子數量成化學計量關係(dpph*+ah→dpph:h+a*)。該dpph檢測是以如下所述的程序逐步進行的。在室溫下在暗容器中將dpph(0.1mm)的甲醇溶液攪拌20min。在400-750nm之間掃描該溶液以獲得最大波長(λmax，約510nm)。用甲醇調節dpph溶液的濃度以得到約1.0的最大吸光度。將不同濃度的測試樣品和標準抗氧化劑溶液(0.05ml)加入到比色杯中的0.95ml甲醇dpph溶液中。所述測試樣品的最終濃度為0.1、1、10、50、100和200μμ。劇烈振搖所述混合物並且在室溫下將其在暗處靜置30min。在最大波長(約510nm)下測量所得溶液的吸光度。吸光度的降低指示所述測試樣品的自由基清除效果。建立所述測試樣品的劑量響應曲線以研究它們的ic50值(顯示uv吸光度減少50％的濃度)。結果除了usyds7顯示出了強烈的效果外，本研究中的pphos化合物顯示出中度至微弱的自由基清除效果。這些結果顯示在圖10中。5.二苯乙烯衍生物對煙醯胺腺嘌呤二核苷酸(nad)-依賴性脫乙醯酶sirtuin-2(sirt1)的影響sirt1是sir2家族(iii類)的成員，其是nad-依賴性組蛋白脫乙醯酶。sirt1酶的脫乙醯基作用可以靶向許多底物，包括組蛋白、腫瘤抑制因子p53、叉頭轉錄因子(foxo)、過氧化物酶體增殖物-激活受體-γ(pparγ)和共-活化因子-1α(pga-1α)。10已經證明sirt1參與許多病理生理過程的調控，如炎症、細胞衰老、細胞凋亡/增殖、代謝和細胞周期調控(chung,yaoetal.2010)。因此，調節sirt1的活性可能是靶向控制許多疾病如癌症、代謝症候群、肥胖、神經退行性疾病、骨骼肌功能障礙和與衰老相關的疾病的潛在治療11。sirt1檢測試劑盒(caymanchemical,annarbor,michigan,usa)提供了一種基於螢光的用於篩選sirt1抑制劑或活化劑的方法。該檢測是根據來自製造商的說明進行的。簡單地說，該檢測由兩步組成，該兩步都是在相同的板中進行的。在第一步中，用人類重組體sirt1和其輔助底物nad+一起溫育包含p53序列arg-his-lys-lys(ε-乙醯基)-amc(7-氨基-4-甲基香豆素)的底物。脫乙醯基作用敏化底物以使在第二步中使用顯影劑的處理能夠釋放出螢光產物，使用螢光酶標儀在350-360nm的激發波長和450-165nm的發射波長下分析該螢光產物。在三個濃度(1、10和100μμ)下檢測了二苯乙烯。數據表示兩個獨立的實驗，每個實驗重複進行三次。結果除了白藜蘆醇，所有的二苯乙烯都顯示出了對sirt1的濃度依賴性抑制，如圖11中的a和圖11中的b中所示。對sirt1活性的調節能夠使得對用於治療疾病包括癌症、代謝綜合症、肥胖、神經退行性疾病、和衰老相關性疾病的治療劑的開發。6.usyds1、usyds2和莎草1型蜂膠的乙醇提取物的抗菌活性概要使用14種菌株和4種化合物進行最小抑制濃度(mic)篩選。根據臨床和實驗室標準化研究所(clinicalandlaboratorystandardsinstitute，clsi)指南的肉湯稀釋法測定mic。在含有64-0.06μg/ml的2倍稀釋系列的化合物的96-孔板上進行mic篩選。使用來自適當的瓊脂平板上培養菌在陽離子調節的muellerhinton培養基肉湯中製備細菌接種，所述瓊脂平板每周都新制。在每個檢測板中都包括生長對照和無菌對照。在環境空氣的培養箱中在35±2℃將所述檢測板溫育16-20小時(對於mrsa溫育24小時)，觀察並記錄細胞的生長。mic篩選中的參照化合物左氧氟沙星的所有mic都處於clsis100-a20中描述的標準範圍內。3個測試樣品的效力的順序為usyds1>usyds2>乙醇蜂膠提取物。1.材料1.1.菌株用於mic篩選的細菌組1公知的抗藥性；2公知存在質粒縮寫：tsa，胰酶大豆瓊脂；camhb，陽離子調節的muellerhinton肉湯；htm，嗜血桿菌試驗培養基；amp，氨苄西林；azt，氨曲南；cfx，頭孢西丁；cpd，頭孢泊肟；caz，頭孢他啶；chl，氯黴素；pip，哌拉西林；tet，四環素；imi，亞胺培南；van，萬古黴素；pen，青黴素；ery，紅黴素；met，甲氧西林；oxa，苯唑西林；lev，左氧氟沙星；cli，克林黴素。1.2.培養基和試劑胰酶大豆瓊脂(bd211043)，陽離子調節的muellerhinton肉湯(bd212322)，嗜血桿菌試驗培養基(fluka51295)，氯化血紅素(fluka51280)，β-nad(fluka43410)，左氧氟沙星(sigma28266)，羊血(quadfive630-500)，溶解的馬血(quadfive205-500)，0.5mcfarland硫酸鋇標準，無菌0.85％nacl(w/v)。2.方法2.1製備細菌菌株a.在進行mic篩選的兩天前從冷凍保存(-80℃)中將細菌菌株復活。劃線至適合瓊脂平板的表示上，並且將板在35±2℃於合適的氣氛中溫育20-24小時。鏈球菌屬：tsaii，5％co2腸球菌：tsaii，環境空氣流感嗜血桿菌：巧克力瓊脂，5％co2組中的其它菌株：tsa，環境空氣b.使用無菌環選擇5-10孔形態相似的孤立菌落並且重新劃線至新鮮的瓊脂平板上。如上所述將板在35±2℃於合適的氣氛中溫育20-24小時。2.2.製備化合物板在進行mic篩選的當天在100％dmso中製備化合物的儲備液，並且立即使用。化合物儲備濃度＝[(最高測試濃度)x103μl/3μl](例如，如果在測試板中所需的最高測試濃度為64μg/ml，則儲備濃度＝64x103/3＝2.2mg/ml)。除非另有說明，否則將測試化合物的效力設為100％，而根據製造商的分析數據來計算參照化合物的效力。每種化合物製備11個2倍稀釋，然後轉移3μl至測試板的各孔中。dmso在mic篩選中的最終濃度為約3％。2.3.製備細菌接種物a.從4℃冰箱中取出培養基肉湯並使其溼熱至室溫。b.用無菌環從新鮮培養板中將菌落轉移至5ml鹽水中並且混合均勻。使用濁度計測量並調節其濁度至0.5mcfarland硫酸鋇標準。或者，轉移1-2個菌落至500μl鹽水中並且使用酶標儀調節od625至約0.1。c.對革蘭氏陽性和偏好性菌株以1:280且對於革蘭氏陰性菌株以1:400將細菌接種物稀釋至相應的培養基肉湯(camhb，camhb+3％溶解的馬血，htm)中(例如35.6μl接種物至10ml的camhb或25μl接種物至10ml的camhb)。流感嗜血桿菌：htm鏈球菌屬：camhb+3％溶解的馬血組中的其它菌株：camhb2.4.製備檢測板a.除了孔b12、d12、f12和h12之外，各所述化合物板的每個孔中加入100μl的細菌接種物。b.向所述化合物板的孔b12、d12、f12和h12中加入100μl的培養基肉湯。c.將四個板堆疊在一起並蓋上無菌板蓋。在環境空氣培養箱中在35±2℃下溫育16-20小時(對於mrsa溫育24小時)。2.5.進行菌落計數a.在鹽水溶液中將細菌接種物(0.5mcfarland)稀釋至10-1至10-7的系列(例如，100μl細胞接種物+900μl鹽水)。b.將100μl各稀釋液(10-4、10-5、10-6和10-7)散布在camha板上，每個稀釋液各三份，使液體滲入至瓊酯中10分鐘，反轉該瓊脂平板並在35±2℃下溫育24小時。2.6.記錄mic並計算cfua.打開化合物板，定位在化合物管理系統中，並且檢查檢測板的條形碼。b.將所述檢測板放置在mic讀數器的上部，並且調節放大倍率鏡以讀取各孔，記錄生長狀態作為原始數據。(可選的)使用高速高解析度掃描儀記錄各測試板的圖像。c.根據clsi指南確定mic折點。d.計數菌落並計算細菌接種物的cfu。3.結果3.1.mic匯總表使用14個細菌菌株(11個atcc菌株和3個臨床分離株)和4種化合物(usyds1、usyds2和蜂膠的乙醇提取物和參照化合物左氧氟沙星)進行mic篩選。所述mic匯總於以下表6中。在本研究中獲得的參照化合物左氧氟沙星的mic值處於s100-a20[2]中描述的標準範圍內。dmso在mic篩選中的最終濃度為約3％，並且不會抑制大多數微生物的生長。表6.usyds1、usyds2和蜂膠的乙醇提取物針對14種細菌菌株的mic(μg/ml)。左氧氟沙星是參照化合物。4.討論異戊烯化四羥基二苯乙烯usyds1和usyds2顯示出中度的抗菌活性，其效力等級為usyds1>usyds2>蜂膠的乙醇提取物。7.usyds1、usyds2和usyds10化合物對激酶活性的影響以下為該研究中的激酶列表。實驗材料·激酶-glo(plus)/adp-glo檢測緩衝液25mmhepes，10mmmgcl2，0.01％tritonx-100，100μg/mlbsa，2.5mmdtt，ph7.4。·caliper檢測緩衝液100mmhepes，10mmmgcl2，100μι/lbrij35(30％)，1mmdtt，ph7.4。檢測底物·mbp蛋白、未活化的mekl、rb蛋白均購自signalchem。聚(glu:tyr)(4:l)購自sigma。pip2購自cayman。肽底物是在hdbiosciences,china合成的。atp購自sigma。激酶gloplus試劑、激酶glo試劑和adpglo試劑均購自promega。檢測工序—caliper形式在96-孔檢測板中混合激酶、底物、atp和化合物，總體積為50μl。在30℃下將所述檢測板溫育1小時。加入20μl的35mmedta停止反應並且轉移26μl停止的反應物至384-孔檢測板中。在酶標儀上讀取該檢測板。檢測工序—adp-glo形式在384-孔檢測板中混合激酶、底物、atp和化合物，總體積為10μl。在30℃下將所述檢測板溫育1小時。向檢測板中加入10μl/孔的adpglo試劑，在27℃下溫育40min。向所述檢測板中加入20μl/孔的檢測試劑，在27℃下溫育30min。在酶標儀上讀取該檢測板。檢測工序—激酶-glo(plus)形式在384-孔檢測板中混合激酶、底物、atp和化合物，總體積為10μl。在30℃下將所述檢測板溫育1小時。向反應混合物中加入10μl/孔的激酶glo(plus)試劑，然後在27℃下溫育20min。在酶標儀上讀取該檢測板。·在沒有化合物和酶但含有atp和底物的條件下，產生了100％的效果。·在沒有化合物但含有atp、底物和酶的條件下，產生了0％的效果。·sb202190為激酶p38β的參照化合物；十字孢鹼(stsp)為其餘激酶的參照化合物。結果被抑制多於60％的激酶匯總於下表中。有趣的是注意到所有這三個化合物都抑制激酶trka和pi3kδ和ρι3kγ。針對所述激酶，usyds1和usyds10似乎表現出類似的抑制活性。8.usyds1的急性毒性研究方法給單個的小鼠進行400mg/kg的單一ip注射；第二隻小鼠接受200mg/kgip的劑量且第三隻小鼠接受100mg/kgip的單一劑量。觀察小鼠2周。如果它們失去多於20％的體重或者如果有其它顯著毒性的體徵，就將它們殺死。如果所有3隻小鼠都必須殺死，則以類似的方式進行下一個3劑量水平(50、25、12.5mg/kg)。重複該過程直到找到耐受劑量。則該劑量標示為最大耐受劑量(mtd)，並且將其用於計算抗腫瘤測試期間給予實驗小鼠的材料的量。可以使小鼠自由採食餵食和水。將藥物以200mg/ml的濃度溶解於100％dmso中。結果組劑量(mg/kg/劑量)途徑死亡天數存活/總天數15注射體積1100ip無1/10.5μl/gm體重2200ip10/11μl/gm體重3400ip10/12μl/gm體重usyds1的mtd被確定為100mg/kg。這個濃度表示對哺乳動物毒性低，並且用於進一步的抗腫瘤測試。usyds1的中空纖維檢測(bec/c)正在進行中。該中空纖維檢測是它們在小鼠異種移植模型中的評價之前，用於評價新穎推測的化療化合物針對一系列癌症細胞系的初步快速篩選。與常規異種移植模型相比，中空纖維模型具有更短的評價時間和減少的化合物需求。該模型還使得在異種移植中能夠有效選擇癌症細胞的類型。產生作為異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物的來源的樹脂的植物的化學型通過定量1h-nmr(q-nmr)分析從來自不同位置的鱗籽莎屬的植物中獲得的樹脂、樹膠和滲出物以分析異戊烯化多羥基二苯乙烯含量，其包括c-異戊烯化的和o-異戊烯化的、o-甲基化的和非o-甲基化的衍生物。來自樹脂的這些異戊烯化多羥基二苯乙烯的不同比例相應地形成對植物分類的基礎。迄今已經鑑定出鱗籽莎屬植物至少有3個不同的化學型，並且這些植物的每一種又顯示為若干亞化學型。類型1是最常見的植物，其含有大約相等比例的c-異戊烯化的和o-異戊烯化的衍生物。類型2植物僅含有c-異戊烯化的衍生物。而類型3植物不含有o-甲基化的異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物。本領域技術人員能夠理解，在不脫離概括描述的本發明的範圍的條件下，可以對如具體實施方式中所示的發明進行多種變化和/或改變。因此，本發明的實施方式在所有方面都應被認為是示例性的而不是限制性的。參考文獻(1)denmark,e.；regens,c.s.；tetsuya,k.j.ofam.chem.soc.2007,129,2774-2276.(2)ali,i.a.i；fathalla,wheteroatomchemistry2006,17,280-288.(3)krohn,k.；thiem,j.j.chem.soc,perkintrans.11977,1186-1190.(4)soerme,p.；arnoux,p.；kahl-knutsson,b.；leffler,h.；rini,j.m.；nilsson,u.j.j.am.chem.soc.2005,127,1737-1743.(5)andrus,m.b.；liu,j.；meredith,e.l.；nartey,e.tetrahedronlett.2003,44,4819-4822.(6)rao,m.l.n.；awasthi,d.k.；banerjee,d.tetrahedronlett.2010,51,1979-1981.(7)yang,p.-y.；zhou,y.-g.tetrahedronasymmetry2004,15,1145-1149.(8)rooney,j.m.journalofmacromolecularscience,parta1986,23,823-829.(9)batsomboon,p.；phakhodee,w.；ruchirawat,s.；ploypradith,p.j.org.chem.2009,74,4009-4012.(10)michan,s.；sinclaird.biochem.j.2007,404,1-13.(11)yamamotoh.；schoonjansk.；auwerxj.mol.endocrinol.2007,21,1745-1755。當前第1頁12