調整內皮肽活性的磺醯胺及其衍生物的製作方法

2023-08-07 04:12:06 2

專利名稱：調整內皮肽活性的磺醯胺及其衍生物的製作方法
相關申請本申請要求Wu等人於1999年12月31日申請的第60/174,104號美國臨時專利申請的優先權，其名稱為「調整內皮肽活性的磺醯胺及其衍生物」。為了美國國內申請以及其他的需要，該臨時專利申請的內容在此併入作為參考。
這三種同功肽族內皮肽-1、內皮肽-2與內皮肽-3是由三種基因族編碼的(參見，Inoue等人(1989)，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，862863-2867；亦參見Saida等人(1989)，J.Biol.Chem.26414613-14616)。三種人類基因的核苷酸序列在編碼成熟的21個胺基酸肽的區域內高度保守，且肽的C-末端部分均相同。內皮肽-2為(Trp6，Leu7)內皮肽-1，且內皮肽-3為(Thr2，Phe4，Thr5，Tyr6，Lys7，Tyr14)內皮肽-1。因此這些肽的C-末端高度保守。由經培養的內皮細胞中釋放內皮肽的作用受許多化學性與物理性刺激調節，且似乎在轉錄及/或翻譯階段調節。化學刺激，包括腎上腺素、凝血酶及Ca2+離子載體，可提高編碼內皮肽-1之基因的表達。由內皮產生及釋放內皮肽的作用則受血管收縮素II、血管加壓素、內毒素、環孢菌素及其他在因子刺激(參見Brooks等人(1991)，Eur.J.Pharm，194115-117)，且受氧化氮抑制。內皮細胞在受血管活性劑如乙醯膽鹼及緩激肽刺激時，似乎會分泌短壽命的衍生自內皮的鬆弛因子(EDRF)，包括氧化氮或相關物質(Palmer等人(1987)，Nature，327524-526)。受內皮肽誘發的血管收縮作用亦由於前房鈉尿肽(ANP)而減弱。
內皮肽在體外及活體內均具有許多生物活性。內皮肽在老鼠活體內以及已分離之血管平滑肌製劑中引發強烈且持續的血管收縮作用；其亦引發由已灌洗之血管床中釋放類二十烷醇(eicosanoids)及衍生自內皮的鬆弛因子(EDRF)。經靜脈內給藥內皮肽-1及體外添加內皮肽-1至血管及其他平滑肌組織中，分別會產生長效的加壓和收縮作用(參見例如Bolger等人，Can.J.Physiol，Pharmacol，69406-413)。例如在分離的血管條中，內皮肽-1為強效(EC50＝4×10-10M)、作用緩慢但持續的收縮劑。在活體內，單劑量在約20至30分鐘即可升高血壓。內皮肽所誘發的血管收縮作用不受已知神經遞質或激素因子的拮抗劑影響，但受鈣通道拮抗劑抑制。然而，鈣通道拮抗劑的影響最有可能是抑制鈣流入作用的結果，這是因為鈣流入作用對內皮肽的長效性收縮反應似乎是必需的。
內皮肽亦在豚鼠前房中調節腎素釋放、刺激ANP釋放及誘發增強收縮作用。在肺部中，內皮肽-1的作用為強效支氣管收縮劑(Maggi等人(1989)，Eur.J.Pharmacol.，160179-182)。內皮肽提高腎血管抗性，減低腎血流，並降低腎小球濾液速率。其是腎小球膜細胞的強效有絲分裂因子，且在這些細胞中刺激磷酸肌苷階式反應(Simonson等人(1990)，J.Clin.Invest.，85790-797)。
血管系統及其他組織(包括腸、心臟、肺、腎、脾、腎上腺及腦)中，均有內皮肽的專一性高親和性結合點(解離常數在2-6×10-10M的範圍內)。結合作用不受兒茶酚胺、血管活性肽、神經毒素或鈣通道拮抗劑抑制。內皮肽會與不同於其他自主性受體及電壓依賴性鈣通道的受體位置結合併相互作用。由競爭性結合試驗發現，有幾類受體對內皮肽同功肽具有不同親和性。沙洛弗毒性(sarafotoxin)是一種來自蛇Atractaspis eingadensis毒液的肽毒素，其能夠使被蛇咬傷者出現嚴重的冠狀血管痙攣，其結構和功能均與內皮肽-1為同種性，且會與相同的心膜受體競爭結合(Kloog等人(1989)，Trends Pharmacol.Sci.，10212-214)。
已鑑別出有二種不同內皮肽受體，稱為ETA和ETB，且分離出編碼各受體的DNA克隆(Arai等人(1990)，Nature，348730-732；Sakurai等人(1990)，Nature，348732-735)。根據該克隆出的DNA所編碼之蛋白質的胺基酸序列，各受體似乎含有7個膜距區，且結構上類似於G蛋白質偶合的膜蛋白質。已在許多不同組織上(包括心、肺、腎及腦)檢測到編碼這二種受體的信使RNA。受體亞型的分布為組織專一性的(Martin等人(1989)，Biochm.Biophys.Res.Commun.，162130-137)。ETA受體似乎對內皮肽-1具有選擇性，且主要出現在心血管組織中。ETB受體主要出現在非心血管組織中，包括中樞神經系統及腎，並與三種內皮肽同功肽相互作用(Sakurai等人(1990)，Natrure 348732-734)。此外，出現在血管平滑肌上的ETA受體與血管收縮有關，且與心血管、腎及中樞神經系統疾病有關；而位於血管內皮的ETB受體則與血管舒張有關(Takayanagi等人(1991)，FEBS Lttrs.，282103-106)，並與支氣管收縮性病變有關。
由於受體型態的分布及各受體亞型對各同功肽的親和性不同，內皮肽同功肽的活性亦隨組織不同而變化。例如，內皮肽-1在心血管組織中抑制125I標記的內皮肽-1結合作用比內皮肽-3強40至700倍。內皮肽-1與內皮肽-3對非心血管組織如腎、腎上腺及小腦中125I標記的內皮肽-1結合作用的抑制程度則相同，這表示ETA受體主要出現在心血管組織中，而ETB受體主要出現在非心血管組織中。
某些疾病狀態會提高內皮肽血漿濃度(參見例如國際PCT申請WO94/27979及美國專利第5,382,569號，這些文獻已完全併入本文作為參考文獻)。由放射免疫分析法(RIA)測得健康人體內的內皮肽-1血漿濃度為0.26-5pg/ml。在休克、心肌梗塞、血管痙彎性絞痛、腎衰竭及各種不同結締組織病變中，血液中內皮肽-1及其前體(大內皮肽)的濃度會提高。進行血液透析或腎移植或患有心臟性休克、心肌梗塞或肺動脈高血壓的患者曾出現高達35pg/ml的濃度(參見Stewart等人(1991)，Annals Internal Med.，114464-469)。由於內皮肽可能為局部性而非全身性調節因子，因此內皮/平滑肌界面處的內皮肽濃度可能遠高於循環濃度。
患有缺血性心臟病的患者也可測得內皮肽濃度提高(Yasuda等人(1990)，Amer.Heart J.，119801-806；Ray等人(1992)，Br.Heart J.，67383-386)。晚期動脈硬化患者的循環與組織內皮肽免疫反應性增加2倍以上(Lerman等人(1991)，New Engl.J.Med.，325997-1001)。內皮肽免疫反應性提高亦與血栓閉塞性脈管炎(Buerger′s disease)(Kanno等人(1990)，J.Amer.Med.Assoc.，2642868)及雷諾現象(Raynaud′sphenomenon)(Zamora等人(1990)，Lancet 336，1144-1147)有關。接受經皮式穿透管腔的冠狀血管成形術(PTCA)的患者(Tahara等人(1991)，Metab.Clin.Exp.，401235-1237；Sanjay等人(1991)，Circulation84(補充本4)726)、及肺動脈高血壓的患者(Miyauchi等人(1992)，Jpn.J.Pharmacol.58279P；Stewart等人(1991)，Ann.Internal Medicine，114464-469)，也出現循環內皮肽濃度增高的現象。因此，有臨床人體試驗數據支持內皮肽濃度提高與許多種疾病之間的相關性。內皮肽激動劑與拮抗劑由於內皮肽與某些疾病有關且涉及許多種生理作用，因此可幹擾或加強內皮肽相關活性(如內皮肽-受體相互作用和血管收縮劑活性)的化合物即值得注意。現已鑑別出具有內皮肽拮抗活性的化合物。例如三崎鏈黴菌(Streptomyces misakiensis)的發酵產物(稱為BE-18257B)已被鑑定為ETA受體拮抗劑。BE-18257B為一種環五肽，環(D-Glu-L-Ala-allo-D-Ile-L-Leu-D-Trp)，其在心血管組織中濃度依賴性地抑制125I標記的內皮肽-1結合作用(於主動脈平滑肌中的IC50為1.4μM，室膜中為0.8μM，且於經培養的主動脈平滑肌細胞中為0.5μM)，但在ETB受體濃度達100μM的組織中，則無法抑制與受體的結合作用。現已合成與BE-18257B相關的環五肽，如環(D-Asp-Pro-D-Val-Leu-D-Trp)(BQ-123)，且已顯示具有作為ETA受體拮抗劑的活性(參見美國專利第5,114,918號(Ishikawa等人)；亦參見EPA 10 436 189(BANYUPHARMACUTICAL CO.，LTD.1991年10月7日)。測定此等環肽抑制內皮肽-1與內皮肽專一性受體的結合作用的研究顯示，此等環肽優先與ETA受體結合。現已鑑定出其他肽及非肽的ETA拮抗劑(參見例如第5,352,800、5,334,598、5,352,659、5,248,807、5,240,910、5,198,548、5,187,195、5,082,838號美國專利)。這些拮抗劑包括其他環五肽、醯基三肽、六肽類似物、某些蒽醌衍生物、茚滿羧酸(indanecarboxylic acids)、某些N-嘧啶基苯磺醯胺、某些苯磺醯胺、以及某些萘磺醯胺(Nakajima等人，(1991)，J.Antibiot.441348-1356；Miyata等人(1992)，J.Antibiot.4574-8；Ishikawa等人(1992)，J.Med.Chem.352139-2142；Ishikawa等人的第5,114,918號美國專利；EP A 10569 193；EP A 10558 258；EP A10436 189，頒與BANYU PHARMACEUTICAL CO.，LTD(1991年10月7日)；加拿大專利申請2,067,288；加拿大專利申請2,071,193；美國專利5,208,243；美國專利5,270,313；美國專利5,612,359；美國專利5,514,696；美國專利5,378,715；Cody等人(1993)Med.Chem.Res.3154-162；Miyata等人(1992)J.Antibiot 451041-1046；Miyata等人(1992)，J.Antibiot 451029-1040；Fujimoto等人(1992)FEBS Lett.30541-44；Oshashi等人(1002)J.Antibiot 451684-1685；EP A10496 452；Clozel等人(1993)Nature 365759-761；國際專利申請WO 93/08799；Nishikibe等人(1993)Life Sci.52717-724；以及Benigni等人(1993)Kidney Int.44440-444)。在第5,464,853、5,594,021、5,591,761、5,571,821、5,514,691號美國專利、國際PCT申請第96/31492號以及國際PCT申請第WO97/27979號中也描述了許多為內皮肽拮抗劑的磺醯胺。
通常，已鑑定的化合物在體外測試中於約50-100μM或更低的濃度下具有ETA拮抗劑活性。許多此等化合物亦在活體內動物模型中具有活性。以內皮肽拮抗劑及激動劑作為治療劑已知在測試內皮肽拮抗劑或激動劑活性的標準體外分析法中，於IC50或EC50為10-4或更低濃度下具有活性的化合物具有藥理應用(參見例如美國專利5,352,800、5,334,598、5,352,659、5,248,807、5,240,910、5,198,548、5,187,195和5,082,838)。由於此活性，認為這些化合物適用於治療高血壓如周邊循環不良、心臟病如心絞痛、心肌病、動脈硬化、心肌梗塞、肺動脈高血壓、血管痙攣、血管再狹窄、雷諾病、腦中風如腦動脈痙彎、腦缺血、多蛛膜下出血後的後期腦痙攣、氣喘、支氣管收縮、腎衰竭、特別是缺血後腎衰竭、環孢菌素腎毒性如急性腎衰竭、結腸炎、及其他炎症、因內皮肽引起或與內皮肽有關的內毒素休克、以及其他涉及內皮肽的疾病。
就內皮肽的許多生理作用及其與某些疾病的相關性而言，具信內皮肽在這些病理生理病症中扮演重要角色(參見例如Saito等人(1990)Hypertension 15734-738；Tomita等人(1989)N.Engl.J.Med.3211127；Kurihara等人(1989)J.Cardiovasc.Pharmacol.13(Suppl.5)S13-S17；Doherty(1992)J.Med.Chem.351493-1508；Morel等人(1989)Eur.J.Pharmacol.167427-428)。若能提供內皮肽族肽的功能及結構方面的更詳細知識，將可了解此等病症的發展和治療法。
為了有助於進一步了解及研究受內皮肽調節或與內皮肽有關的病變，需要鑑別可調整或改變內皮肽活性的化合物。鑑別可調整內皮肽活性的化合物，如那些具有專一性拮抗劑或激動劑作用的化合物，可能不僅有助於闡明內皮肽的功能，而且還可產生有治療作用的化合物。具體而言，可專一性幹擾內皮肽與ETA或ETB受體相互作用的化合物應可用於鑑別內皮肽的必要特性，應有助於設計治療藥物，且可用為疾病的專一性治療藥物。如上所述，許多化合物，特別是磺醯胺化合物，是強效內皮肽拮抗劑，並因此是理想的臨床候選者。在臨床使用時，需要體內活性最佳的強效化合物以及穩定的組合物和適用於各種途徑給藥的組合物。
因此，本發明的目的是提供具有體內調整一種或多種內皮肽同功肽的生物活性能力的化合物。另一個目的是提供用作體內專一性內皮肽拮抗劑的化合物。再一個目的是可與ETA受體專一性相互作用或抑制內皮肽與ETA受體專一性相互作用的化合物的用途。又一個目的是提供用於治療受內皮肽調節之疾病的此等化合物的組合物。這些化合物應可用為治療受內皮肽調節的疾病與疾變的治療藥物。
特別優選的磺醯胺是N-異惡唑基噻吩磺醯胺、呋喃基、吡咯基和苯基磺醯胺，其中噻吩、呋喃、吡咯或者苯環被芳基、優選苯基取代，其只有一個或兩個氫取代基。與其中芳基具有兩個以上氫取代基的化合物相比，所述化合物具有更好的效力、效用、生物利用度、體內半衰期和/或穩定性，並同時避免了與疏水性有關的毒性作用。另外，這些化合物似乎在標準體外毒性測試中具有良好的曲線。
發現在體內給藥時，希望磺醯胺達到適當程度的親水性，這可降低化合物潛在的溶血性。如果例如取代噻吩、呋喃、吡咯或者苯環的芳基是四、五或六取代的，優選四或五取代的，則可實現此目標。如果芳基是四取代的，優選在1、2、4和6位取代。1位的取代基與噻吩、呋喃、吡咯或者苯環連接。2、4或位處的取代基之一優選是極性基團，例如羥基、乙醯氧基、羧基、磺醯基、醯基、雜芳基、肟、滷素、假滷素和羧醯胺(carboxamide)。此等取代可增強化合物的內皮肽拮抗劑活性和親水性。
如果芳基是被3個非極性基團取代的，如烷基，更具體而言是甲基，則芳基優選為五-或六取代的。在所述五取代的芳基中，第4個取代基連接在噻吩、呋喃、吡咯或者苯環時，而第5個取代基優選是極性基團，如羥基、乙醯氧基、羧基、磺醯基、醯基、雜芳基、肟、滷素、假滷素和羧醯胺。為實現治療應用中最高水平的活性，此等取代是優選的。
此等取代使化合物具有良好的生物利用度、長的體內半衰期、和/或良好的體內效用。就在此所述而言，使用合適的動物模型也可經驗性地確定其它如此合適的取代模式和取代基。
本發明的組合物及方法中所用的化合物是具有以下通式I的磺醯胺化合物Ar2-SO2-NH-Ar1(I)及其藥物學上可接受的衍生物，其中Ar1是未取代或被一個或者多個取代基取代的芳基或雜芳基，所述取代基包括烷基、芳基、取代芳基、硝基、氨基或滷素；或者是烷基。具體而言，Ar1是烷基或者是5或6元取代或未取代芳香或雜芳香環，特別是3-或5-異惡唑基，噠嗪基，吡嗪基，包括2-吡嗪基，噻唑基，包括2-噻唑基，苯並噻二唑基，包括2，1，3-苯並噻二唑-5-基，苯並惡二唑基，包括2，1，3-苯並惡二唑-5-基，嘧啶基，包括2-嘧啶基，或取代苯基，包括芳氧基取代苯基，或者是二環或三環碳或者雜環。
對於Ar1更優選的基團是3-或5-異惡唑基。在這些實施方案中，化合物具有以下式II 其中R1和R2是如下的(i)、(ii)或(iii)(i)R1和R2分別獨立地選自於H、NH2、NO2、滷素、假滷素、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、芳烷基、雜芳基、烷氧基、烷基氨基、烷硫基、烷基氧基、滷代烷基、烷基亞硫醯基、烷基磺醯基、芳氧基、芳基氨基、芳硫基、芳基亞硫醯基、芳基磺醯基、滷代烷基、滷代芳基、烷氧羰基、烷基羰基、氨基羰基、芳基羰基、甲醯基、取代或未取代醯胺基、以及取代或未取代脲基，其中烷基、鏈烯基和鏈炔基部分包含1-14個碳原子，而且可以是直鏈或支鏈或環狀的，而芳基部分包含4-16個碳原子，但是R2不是滷素或假滷素；或者(ii)R1和R2一起形成-(CH2)n-，其中n是3-6；或者(iii)R1和R2一起形成1，3-丁二烯基(-CH＝CH-CH＝CH-)。
在優選的實施方案中，R1和R2分別獨立地選自於烷基、低級鏈烯基、低級鏈炔基、低級滷代烷基、滷素、假滷素或H，但R2不是滷素。
在用於本發明的組合物及方法中的化合物中，Ar2是具有以下式的噻吩基、呋喃基、吡咯基或苯基 其中M是-C(Y)-W-、(CH2)mC(Y)(CH2)r、(CH2)mC(Y)NH(CH2)r、(CH2)m(CH＝CH)(CH2)r、(CH2)mC(Y)(CH2)sNH(CH2)r、C＝N(OH)(CH2)r、(CH2)mC(Y)(CH＝CH)sNH(CH2)r、CH(OH)(CH2)r、CH(CH3)C(Y)(CH2)r、CH(CH3)C(Y)(CH2)m(CH＝CH)(CH2)r、(CH2)r、(CH2)rO、或(CH2)S(O)n；其中n是0-2；m、s和r分別獨立地是0-6，優選為0-3；W是O、NH或(CH2)z，其中z是0-6，優選為0-3，更優選為1；而Y是O、S，或者與R8以及它們所連接的原子一起形成3-16元未取代或取代環或雜環，優選為5或6元未取代或取代環或雜環，更優選為6元未取代或取代雜環；M優選是-C(Y)-W-或(CH2)z；R3和R4獨立地選自於氫、滷素、氰基、氰基烷基、C(O)R41、烷基、鏈烯基、環烷基和芳基，或一起形成亞烷基或亞烯基，其中R41是烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、環烷基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷基磺醯基氨基、芳基磺醯基氨基、烷基磺醯基烷基氨基、烷基磺醯基芳基氨基、芳基磺醯基烷基氨基或芳基磺醯基芳基氨基；Y1和Y2分別獨立地是碳或氮；a和b分別獨立地是0或1；R5、R6、R7、R8和R9分別獨立地如下選自於(i)或(ii)
(i)R5、R6、R7、R8和R9分別獨立地選自於H、OH、NHR38、CONR38R39、NO2、氰基、滷素、假滷素、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、芳烷基、雜芳基、烷氧基、烷基氨基、烷硫基、滷代烷基、烷基亞硫醯基、烷基磺醯基、烷氧羰基、烷基羰基、鏈烯基硫基、鏈烯基氨基、鏈烯基氧基、鏈烯基亞硫醯基、鏈烯基磺醯基、烷氧羰基、芳基氨基羰基、烷基氨基-羰基、氨基羰基、(烷基-氨基羰基)烷基、乙醯氧基、羥基、羧基、羧基烷基、羧基烯基、烷基磺醯基氨基烷基、氰基烷基、乙醯基、乙醯氧基烷基、羥基烷基、烷氧基烷氧基、羥基烷基、(乙醯氧基)烷氧基、(羥基)烷氧基、甲醯基、磺醯氯、胺基酸、己糖、O-糖苷、核糖、低級烷基、CN、-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3、-(CH2)xCH3、(CH2)xNH-低級烷基、-(CH2)xC(O)NH2、D-、L-或外消旋胺基酸、伯或仲醯胺、O-糖苷、己糖或核糖、-S(O)2NH2、羥基、烷氧基、烷氧羰基、乙醯氧基烷基、-(CH2)xCOOH、-(CH2)xCH(COOH)(CH2)yCH3、CO2-低級烷基、CN、雜芳基、C(O)(CH2)xS(O)2(CH2)yCH3、C(＝N-OR38)(CH2)yCH3、-C(O)C(O)(CH2)yCH3、-(CH2)xN(CH3)2、磺醯氯、S(O)2NHR50、OS(O)2NR38R39、烷基芳基、烷基雜芳基、C(O)NHR50、-(CH2)xOH、以及-C(O)N(H)N(H)R50；其中R38和R39分別獨立地選自於氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、滷代烷基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳基烷氧基、烷氧基、芳氧基、環烷基、環烯基和環炔基，並優選分別選自於氫、低級烷基、低級烷氧基和低級滷代烷基；x和y分別獨立地是0-14；而R50是諸如氫、低級烷基、低級烷氧基或雜芳基的取代基；或者(ii)取代環上相鄰碳原子的R5、R6、R7、R8和R9中的至少兩個一起形成亞烷基二氧基，亞烷基硫代氧基氧基或亞烷基二硫代氧基(如-O-(CH2)n-O-、-S-(CH2)n-O-、-S-(CH2)n-S-，其中n是1-4，優選為1或2)，這些基團是未取代或者一個或多個氫原子通過被滷素、低級烷基、低級烷氧基或滷代低級烷基置換而被取代，而其他的R5、R6、R7、R8和R9則如(i)進行選擇；而且X是-C(R3)＝C(R4)-、S、O或NR11，其中R11是氫或包含最多約30個碳原子、優選1-10個碳原子、更優選1-6個碳原子，而且選自於氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳烷氧基、環烷基、環烯基、環炔基、C(O)R15和S(O)nR15，其中n是0-2；R15是氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳烷氧基、環烷基、環烯基或環炔基；R11和R15是未取代或被一個或多個獨立地選自於Z中的取代基取代，所述Z包括氫、滷素、假滷素、烷基、烷氧基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、胺基酸、伯和仲醯胺、O-糖苷、己糖、核糖、烷基芳基、烷基雜芳基、雜環基、芳烷基、芳烷氧基、環烷基、環烯基、環炔基、OH、CN、C(O)R16、OC(O)R16、CO2R16、OCO2R16、SH、S(O)nR16其中n是0-2、NHOH、NR12R16、NO2、N3、OR16、R12NCOR16以及CONR12R16；R16是氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳烷氧基、環烷基、環烯基、環炔基、氯、NHR50、烷基芳基、烷基雜芳基或-(CH2)xOH；R50是諸如氫、低級烷基、低級烷氧基或雜芳基的取代基；x是0-14；R12獨立地選自於R11和Z，選自於氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳烷氧基、環烷基、環烯基、環炔基、C(O)R17和S(O)nR17其中n is 0-2；R17是氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳烷氧基、環烷基、環烯基或環炔基；R12和R16可一起形成亞烷基；R11、R12、R15和R16可分別進一步被Z中的合適基團取代。
在所有的實施方案中，X優選是S或者-CH＝CH-，更優選是S。
在某些實施方案中，化合物的選擇具有以下前提條件R5、R6、R7、R8和R9中最多有兩個是氫。在另一個實施方案中，化合物的選擇具有以下前提條件R5、R6、R7、R8和R9中最多有一個是氫。
在另一個實施方案中，所述化合物具有式I或II，其前提條件是化合物沒有具體地公開在國際專利申請公布WO 94/27979、WO 96/31492、WO 98/13366和WO 98/49162中，這些文獻的內容在此併入作為參考。
在另一個實施方案中，化合物的選擇具有以下前提條件R8不是COOH、CONH2或者苯基。
本文所述的化合物中，優選那些在約10μ以下的濃度即可抑制或提高內皮肽所調節活性約50％的化合物。更優選的是在1μM以下濃度時，以約0.1μM以下更優選，甚至約0.01μM以下更優選，約0.001μM以下最優選，可抑制或提高內皮肽所調節活性約50％的化合物。應注意到，如下所述，於體外分析法測定的IC50濃度為培養溫度的非線性函數。在本文中，得到優選數值的分析法於4℃下進行。當分析法於24℃下進行時，可觀察到稍高(見表1)的IC50濃度。因此，優選IC50濃度高約10倍。另外，在這些化合物中，以標準動物模型測定具有最大生物利用度和穩定性的化合物是最優選的。
亦用於本文所提供方法的最優選化合物是那些具有ETA選擇性者，也就是說，在遠低於與ETB受體相互作用的濃度下(IC50至少低約10倍，優選低100倍)與ETA受體相互作用。具體而言，優選的是，與ETA相互作用的IC50約10μM以下，優選低於1μM，更優選低於0.1μM，但與ETB的IC50約10μM以上的化合物，或與ETB相互作用的IC50約10μM以下，優選低於1μM，但與ETA的IC50為約10μM以上的化合物。
本發明還涉及磺醯胺的任何藥物學上可接受的衍生物，包括鹽、酯、酸、和鹼、溶劑化物、水合物和前體藥物。優選的是藥物學上可接受的鹽，包括但不限於胺鹽，例如但不限於N，N′-二苄基乙二胺、氯普魯卡因、膽鹼、氨、二乙醇胺以及其它羥烷基胺、乙二胺、N-甲基葡糖胺、普魯卡因、N-苄基苯乙胺、1-對氯苄基-2-吡咯烷-1′-基-甲基苯並咪唑、二乙基胺和其它烷基胺、哌嗪、三(羥甲基)氨基甲烷，鹼金屬鹽，例如但不限於鋰、鉀和鈉，鹼土金屬鹽，例如但不限於鋇、鈣和鎂，過渡金屬鹽，例如但不限於鋅，以及其它金屬鹽，例如但不限於磷酸氫鈉和磷酸鈉，優選鈉鹽，更優選鈉鹽，而且還包括但不限於礦物酸的鹽，例如但不限於鹽酸和硫酸鹽，有機酸的鹽，例如但不限於乙酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、抗壞血酸鹽、琥珀酸鹽、丁酸鹽、戊酸鹽和富馬酸鹽。在此優選鹼金屬鹽，特別是鈉鹽，最優選的鹽是鈉鹽。
本發明還提供用於經適當途徑和手段給藥的藥物組合物，其含有有效濃度的本文所提供的一種或多種化合物或該磺醯胺的藥物學上可接受的鹽、酯、酸和鹼、溶劑化物、水合物以及前體藥物，優選鹽，更優選鈉鹽，包括但不限於鈉鹽和磷酸氫鈉鹽，最優選鈉鹽，該組合物釋放有效劑量，用於治療高血壓、中風、心血管疾病、心臟病包括心肌梗塞、肺動脈高血壓、新生性肺動脈高血壓、紅細胞生成素所調節的高血壓、呼吸性疾病及炎症，包括氣喘、支氣管收縮、眼部疾病包括青光眼和視網膜灌流不充分、胃腸疾病、腎衰竭、內毒素休克、月經性疾病、產科疾病、受傷、板炎、勃起功能障礙、絕經、骨質疏鬆症和骨代謝性疾病、氣候性疾病包括熱潮紅、異常凝塊行為、尿道生殖道不適以及心血管疾病的發病率增加、和其他與中年婦女卵巢功能下降有關的疾病、子癇前期、懷孕期間的控制、過敏性休克、出血性休克、氧化氮減弱的疾病、以及其他涉及由內皮肽調節之生理反應的疾病或者涉及血管收縮的疾病或者給藥內皮肽拮抗劑或激動劑可緩解其症狀的疾病。
本發明製劑是適用於通過任何所希望的途徑給藥的組合物，其包括溶液、混懸液、乳液、片劑、溶散片、丸劑、膠囊、粉末、吸入用的乾粉末、緩釋製劑、鼻腔和呼吸道給藥的氣霧劑、透皮給藥的藥貼、以及任何其它合適途徑給藥的劑型。本發明組合物應適用於經口服給藥，非經胃腸道通過注射給藥，這包括以注射水溶液或油溶液或乳液經皮下、肌肉內或靜脈注射，透皮給藥以及其它經選擇的給藥途徑。
本發明還提供磺醯胺衍生物的凍乾粉末、其製備方法、以及包含復原形式之凍乾粉末的製劑。亦提供包含粉末的管形瓶、安瓿、注射器以及其它合適容器。
優選製劑包括含有磺醯胺之藥物學上可接受的鹽、優選鈉鹽、更優選一個鈉鹽的無菌凍乾粉末，還包括膠囊和片劑。特別優選的製劑是那些釋放有效劑量之藥物治療高血壓或腎衰竭的製劑。有效劑量和濃度是指有效緩解任何疾病之任何症狀的量。
在一個實施方案中，製劑是包含一種或多種式I之磺醯胺化合物的一種或多種鹽、優選磷酸氫鈉鹽或鈉鹽、更優選鈉鹽的凍幹固體，其還包括以下一種或多種物質緩衝劑，如磷酸鉀或鈉、檸檬酸鹽；增溶劑，如LABRASOL(Gattefosse SA，France出售的聚乙二醇-8-辛基癸基甘油酯)、DMSO、二(三甲基甲矽烷基)乙醯胺、乙醇、丙二醇(PG)、或者聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，以及糖或者其它碳水化合物，如山梨醇或葡萄糖。
在其它實施方案中，製劑為固體劑型，優選為膠囊或片劑。在優選實施方案中，製劑是固體劑型，優選是膠囊或片劑，其包括10-100重量％、優選50-95重量％、更優選75-85重量％、最優選80-85重量％的式I之一種或多種磺醯胺的一種或多種鹽，優選磷酸氫鈉鹽或鈉鹽，更優選為鈉鹽；約0-25％、優選8-15％的賦形劑或粘合劑，如乳糖或微晶纖維素；約0-10％、優選約3-7％的崩解劑，如改性澱粉或纖維素聚合物，特別是交聯羧甲基纖維素鈉，如交聯羧甲基纖維素(crosscarmellose)鈉(交聯羧甲基纖維素鈉NF可從FMC Corporation，Philadelphia，PA以AC-DI-SOL商品名購得)或澱粉羥乙酸鈉；以及0-2潤滑劑，如硬脂酸鎂、滑石和硬脂酸鈣。如交聯纖維素鈉或者澱粉羥乙酸鈉的崩解劑能夠使得在包衣聚合物溶解後快速崩解纖維素基質以立即釋放活性物質。在所有實施方案中，活性成分和輔助成分的精確量可經驗性地確定，而且與給藥途徑和所治療的疾病有關。
用於給藥的固體劑型如片劑也在本發明的範圍之內。應理解的是，本領域技術人員可經驗性地確定所述製劑的精確量和組成。
本發明還提供使用所述製劑來調整內皮肽與ETA和/或ETB受體之相互作用的方法。該方法是如下實現的在使受體與內皮肽接觸之前、與其同時或者隨後，使受體與磺醯胺之一種或多種藥物學上可接受的鹽、優選磺醯胺的鈉鹽的製劑接觸。
本發明還提供抑制內皮肽與內皮肽受體結合的方法。該方法如下實現在使受體與內皮肽接觸之前、與其同時或者隨後，使受體與一種或多種本發明化合物或者所述化合物之藥物學上可接受的鹽的製劑接觸。
還提供治療內皮肽所調節之疾病的方法，所述疾病包括但不限於高血壓、氣喘、休克、眼壓過高、青光眼、視網膜灌流不充分以及其他由內皮肽依某些方式調節的病症，或用於治療涉及血管收縮或可通過給藥內皮肽拮抗劑或激動劑而改善的病變。
具體而言，是提供治療內皮肽所調節之病變的方法，其是給藥有效量的磺醯胺、磺醯胺的前體藥物或其他合適衍生物。特定言之，是提供治療內皮肽所調節之病變的方法，包括高血壓、心血管疾病、心臟病包括心肌梗塞、肺動脈高血壓、新生性肺動脈高血壓、紅細胞生成素所調節的高血壓、呼吸性疾病及炎症，包括氣喘、支氣管收縮、眼部疾病包括青光眼和視網膜灌流不充分、胃腸疾病、腎衰竭、內毒素休克、月經性疾病、產科疾病、受傷、板炎、勃起功能障礙、絕經、骨質疏鬆症和骨代謝性疾病、氣候性疾病包括熱潮紅、異常凝塊行為、尿道生殖道不適以及心血管疾病的發病率增加、和其他與中年婦女卵巢功能下降有關的疾病、子癇前期、懷孕期間的控制、氧化氮減弱的疾病、過敏性休克、出血性休克、以及其他涉及由內皮肽調節之生理反應的疾病，該方法是通過給藥有效量之在藥物學上可接受的載體中的一種或多種本發明的化合物來實現的。優選的治療方法是治療高血壓和腎衰竭。
更優選的治療法為那些其中組合物含有至少一種化合物，該化合物在IC50約10μM以下，優選約5μM以下，更優選約1μM以下，甚至更優選約0.1μM以下，且最優選0.05μM以下，可抑制內皮肽-1與ETA受體相互作用。其他優選方法為那些其中組合物含有一種或多種ETA選擇性化合物或一種或多種ETB選擇性化合物的藥物學上可接受的鹽。使用ETA選擇性化合物的方法是用於治療如高血壓的疾病，而使用ETB選擇性化合物的方法是用於治療需要擴張支氣管的疾病如氣喘。
操作該方法時，是將含有治療有效濃度之化合物的有效量組合物給藥出現一種或多種以下疾病之症狀的個體，該組合物調配成經口、靜脈內、定點及局部施藥，所述疾病為高血壓、心血管疾病、心臟病包括心肌梗塞、肺動脈高血壓、新生性肺動脈高血壓、紅細胞生成素所調節的高血壓、呼吸性疾病及炎症，包括氣喘、支氣管收縮、眼部疾病包括青光眼和視網膜灌流不充分、胃腸疾病、腎衰竭、免疫抑制劑介導的腎血管收縮、內毒素休克、月經性疾病、產科疾病、受傷、板炎、勃起功能障礙、絕經、骨質疏鬆症和骨代謝性疾病、氣候性疾病包括熱潮紅、異常凝塊行為、尿道生殖道不適以及心血管疾病的發病率增加、和其他與中年婦女卵巢功能下降有關的疾病、子癇前期、懷孕期間的控制、過敏性休克、出血性休克、氧化氮減弱的疾病、及其他涉及內皮肽所調節之生理反應的疾病。其用量為有效改善或消除該等疾病的一種或多種症狀。
本發明亦提供鑑別及分離內皮肽受體亞型的方法。具體而言，提供使用所揭示的化合物以檢測、分辨、及分離內皮肽受體的方法。特定言之，提供使用本文所提供化合物以檢測、分辨及分離內皮肽受體的方法。
此外，亦提供鑑定根據其對特定內皮肽受體亞型的優先親和力而適用於治療特定疾病的化合物。
並提供含有以下物質的製成品包裝材料、包含在該包裝材料中的本文所提供可有效改善內皮肽所調節之病變且在約10μM以下的IC50可拮抗內皮肽效果或抑制內皮肽與ET受體的結合作用的化合物、及說明該化合物或其藥物學上可接受的鹽用於拮抗內皮肽效果、治療內皮肽所調節之病變或抑制皮肽與ET受體的結合作用的標籤。
優選實施方案的描述定義除非另外定義，否則本文所採用的科技名詞均與本發明所屬領域的普通技術人員普通理解的意義相同。本文提及的所有專利及文獻均在此併入作為參考。
本文所採用的內皮肽(ET)包括實質上具有內皮肽-1、內皮肽-2或內皮肽-3的胺基酸序列且作為強效內源性血管收縮劑肽作用的肽。
本文所採用的「內皮肽所調節的病症」是指因內皮肽活性異常或可採用抑制內皮肽活性的化合物治療的病症。此等疾病包括但不限於高血壓、心血管疾病、氣喘、炎症、眼部疾病、月經性病變、產科病症、胃腸疾病、腎衰竭、肺動脈高血壓、內毒素休克、過敏性休克、或出血性休克。內皮肽所調節的病症亦包括使用如紅細胞生成素和免疫抑制劑等會提高內皮肽濃度的藥劑治療所造成的病症。
本文所採用「用於治療特定疾病的有效量化合物」為足以改善且依某些方式降低與疾病有關的症狀的用量。此等用量可以單劑量或可根據療程有效給藥。該用量可治療疾病，但典型地是給藥以改善疾病的症狀。典型地，需重複給藥，以達到所需的改善症狀效果。
本文所採用「內皮肽激動劑」為一種加強或具有與內皮肽有關的或為內皮肽所擁有的生物活性的化合物。
本文所採用「內皮肽拮抗劑」為一種如藥物和抗體的化合物，可抑制內皮肽所刺激的血管收縮和收縮作用以及其他內皮肽所調節的生理反應。拮抗劑的作用可幹擾內皮肽與內皮肽專一性受體的相互作用或幹擾內皮肽同功肽的生理反應或生物活性，如血管收縮。因此，依本領域技術人員熟知的分析法，本文所採用「內皮肽拮抗劑」可幹擾內皮肽所刺激的血管收縮或其他反應或幹擾內皮肽與內皮肽專一性受體如ETA受體的相互作用。
有潛力的激動劑與拮抗劑的有效性可使用本領域技術人員已知的方法測試。例如，內皮肽激動劑活性可利用其刺激經分離的老鼠胸部主動脈或門靜脈環節的血管收縮的能力來鑑定(Borges等人(1989)「內皮肽的組織選擇性」(Tissue selectivity of endothelin)Eur.J.Pharmacol.165223-230)。內皮肽拮抗劑活性可由其幹擾內皮肽所誘發之血管收縮作用來分析。分析實例示於實施例部分。如上所述，優選IC50濃度範圍是供分析法參考，其中試驗化合物是與含ET受體的細胞於4℃下培養。在較不適宜的24℃下進行的培養步驟所顯示的分析數據已有註明。可以理解的是，為了比較，此等濃度均比於4℃時測得的濃度稍高。
本文所採用「生物利用度」是指吸收速率和程度。確定生物利用度的方法對於本領域技術人員是已知的。例如，本發明描述的任何化合物的生物利用度都可如下經驗性地確定將所述化合物給藥於動物，然後隨時間採取血樣，並測定化合物的血液濃度。體內半衰期(t1/2)定義為化合物血液濃度降低一半所需要的時間。估算靜脈給藥曲線下的面積可用於估計口服給藥曲線下的面積，並產生生物利用度數據。參見例如MiloGibal(1991)，Biopharmaceutics and Pharmacology，第4版(Lea andSediger)。
本文所採用的「效能」是指化合物可產生的最大作用。效能可用本領域技術人員已知的方法來測定。例如，可根據化合物的性質及其受體-效應器系統來確定，然後反映在濃度-作用曲線的平臺中。體內效能是指在動物模型中測定的效能。例如，本發明化合物的體內效能可通過在鼠中缺氧誘導的肺動脈高血壓來測定。參見例如DiCarlo等人(1995)，Am.J.Physiol.269L690-L697。
本文所採用的「在標準的體外或者體內毒性實驗中具有良好行為的化合物」是指相對於已知的內皮肽拮抗劑該化合物表現出更高的耐受性。具體而言，如本文所述，在抑制P450酶、特別是CP4502C9、2C19和3A4酶時具有更高的IC50值的化合物在標準的體外毒性實驗中具有良好的行為。在標準的體內急性缺氧模型中實現平均肺動脈壓(MPAP)增加50％抑制時需要較低的劑量的化合物具有良好的體內行為。
本文所採用「內皮肽的生物活性」包括任何於活體內由內皮肽誘發、加強或影響的活性。亦包括與特定受體結合的能力及誘發功能反應如血管收縮的能力。其可利用活體內分析法或體外分析法(如本文所例舉者)分析。相關活性包括但不限於血管收縮、血管舒張及支氣管擴張。例如，ETB受體似乎表達在血管內皮細胞中，且可調節血管擴張及其他此等反應；而內皮肽-1專一性的ETA受體則出現在平滑肌上，且與血管收縮有關。本領域技術人員已知用來測定或檢測此等活性的任何分析法均可用來分析此等活性(參見例如Spokes等人(1989)J.Cardiovasc.Pharmacol.13(補充本5)S191-192；Spinella等人(1991)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 887443-7446；Cardell等人(1991)Neurochem.Int.18571-574；及本文的實施例)。
本文所採用「IC50」是指在測定此等反應的分析法中，特定的試驗化合物抑制最大反應如內皮肽與組織受體的結合作用達50％時的用量、濃度或劑量。
本文所採用「EC50」是指特定的試驗化合物隨劑量誘發的反應達該特定的試驗化合物所誘發、激發或加強特定反應的最大表現的50％時的劑量、濃度或用量。
本文所採用「ETA選擇性磺醯胺」是指該磺醯胺對ETA受體的IC50比對ETB受體的IC50至少低約10倍。
本文所採用「ETB選擇性磺醯胺」是指該磺醯胺對ETB受體的IC50比對ETA受體的IC50至少低約10倍。
本文所採用「化合物的藥物學上可接受的鹽、酯、水合物、溶劑化物或其他衍生物」包括本領域技術人員使用此等衍生化法的已知方法即可製備且所產生的化合物可給藥於動物或人類、而實質上無毒性且具藥物活性或為前體藥物的任何鹽、酯或其它衍生物。藥物學上可接受的鹽包括但不限於鹼金屬鹽和鹼土金屬鹽，包括但不限於鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽、鈣鹽和鎂鹽；過渡金屬鹽，如鋅鹽、銅鹽和鋁鹽；多陽離子平衡離子鹽，例如但不限於銨鹽、和取代的銨鹽，和有機胺鹽，如羥烷基胺和烷基胺；礦物酸的鹽，例如但不限於鹽酸鹽和硫酸鹽，有機酸的鹽，例如但不限於乙酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、抗壞血酸鹽、琥珀酸鹽、丁酸鹽、戊酸鹽和富馬酸鹽。在此還包括相應的酯。
本文所採用「鈉鹽」是指任何鈉化合物的鹽，其中平衡離子包括Na+，並可包括其它離子，如HPO42-；所述「鈉鹽」特別是指平衡離子為Na+的鹽。
本文所採用「治療法」是指改善或有利地改變病症、病變或疾病的症狀的任何方式。治療法亦包括本文中組合物的任何藥物用途，如成為避孕藥的用途。
本文所採用「通過給藥特定藥物組合物來改善特定病變的症狀」是指任何因給藥或與給藥本發明組合物有關而減輕病情，不論暫時或永久、持續或過渡性的。
本文所採用「實質上純」是指其均勻性足以令標準分析法無法測得可檢測到的雜質，該等分析法為如本領域技術人員常用來檢測此等雜質的薄層層析法(TLC)、凝膠電泳及高效液相色譜法(HPLC)，或其純度達到足以使進一步純化亦不會改變物質的物理和化學性質(如酶活性和生物活性)的程度。可產生化學上實質上純的化合物的純化法是本領域技術人員已知的。然而，化學上實質上純的化合物可為立體異構體的混合物。在此情況下，進一步純化可能提高化合物的比活性。
本文所採用「生物活性」是指化合物的活體內活性或化合物、組合物或其他混合物給藥至活體內所產生的生理反應。因此，生物活性包括此等化合物、組合物及混合物的治療效果及藥物活性。
本文所採用「製劑的穩定性增加」是指以本領域技術人員已知的分析法測定，例如高效液相色譜法、氣相色譜法等，製劑中的活性成分在該製劑製備後的給定時間處的百分比明顯高於其它組合物在製備後的相同時間處的活性成分百分比。在此情況下，就稱前一個組合物相對於後一個組合物具有增加的穩定性。
本文所採用「前體藥物」為一種給藥至活體內時會代謝或轉化成化合物的生物、藥物或治療活性型的化合物。為了製成前體藥物，需修飾藥物活性化合物，使得活性化合物可經由代謝過程產生。設計前體藥物時，可改變藥物的代謝穩定性或轉運特性，遮蔽副反應或毒性，改善藥物口味或改變藥物的其他特性或性質。由於本領域技術人員已了解活體內的藥物動力學過程及藥物代謝，因此一旦已知一種藥物活性化合物，即可設計該化合物的前體藥物(參見例如Nogrady(1985)「醫學化學、生物學的探討」，紐約牛津大學出版社(Medicinal Chemistry A BiochemicalApproach)，Oxford University Press，New York)，第388-392頁)。例如，琥珀醯基-磺噻唑為4-氨基-N-(2-噻唑基)苯磺醯胺(磺噻唑)的前體藥物，可改變轉運特性。
本文所採用「酸等排物」是指一種在生理pH下顯著離子化的基團。合適的酸等排物實例包括磺基、磷醯基、烷磺醯基氨甲醯基、四唑基、芳磺醯基氨甲醯基或雜芳磺醯基氨甲醯基。
本文所採用「滷素或滷化物」是指滷原子；F、Cl、Br與I。
本文所採用「假滷化物」為其表現實質上類似於滷化物的化合物。此等化合物可依滷化物的相同方式使用及處理(「X-」，其中X為滷素，如Cl或Br)。假滷化物包括但不限於氰化物、氰酸根、硫代氰酸根、硒氰酸根及疊氮化物。
本文所採用「滷代烷基」是指低級烷基，基中一個或多個氫原子被滷素取代，其包括但不限於氯甲基、三氟甲基、1-氯-2-氟乙基，等等。
本文所採用「烷基」是指脂族烴基，其為鏈中優選含約1至12個碳原子的直鏈或支鏈鏈。優選烷基為鏈中含1至約6個碳原子的直鏈或支鏈鏈低級烷基。「支鏈」表示在線性烷基鏈上附接一個或多個低級烷基如甲基、乙基或丙基。烷基可未經取代或分別經一個或多個基團取代，例如但不限於滷素、羧基、甲醯基、磺基、亞磺基、氨甲醯基、氨基和亞氨基。烷基實例包括甲基、乙基、丙基、羧基甲基、羧基乙基、羧基丙基、亞磺酸基乙基及磺酸基乙基。
本文中「低級」是用於說明含約6個或更少碳原子的烷基、鏈烯基與鏈炔基。亦用於說明環中含6個或更少碳原子的芳基或雜芳基。低級烷基、低級烯基及低級炔基是指含約6個碳以下的碳鏈。本文所提供化合物的優選實施方案包括含低級烷基、低級烯基與低級炔基部分的烷基、烯基或炔基部分。
本文所採用「鏈烯基」是指含有一個碳-碳雙鍵且可為鏈中含約2至約10個碳原子的直鏈或支鏈鏈的脂族烴基。優選烯基是於鏈中含2至4個碳原子。「支鏈」表示在線性烯基鏈上附接一個或多個低級烷基或低級烯基。鏈烯基可未經取代或分別經一個或多個基團取代，如滷素、羧基、甲醯基、磺基、亞磺基、氨甲醯基、氨基和亞氨基。鏈烯基實例包括乙烯基、丙烯基、羧乙烯基、羧丙烯基、亞磺基乙烯基和磺基乙烯基。
本文所採用「鏈炔基」是指含有一個碳-碳參鍵且可為鏈中含約2至10個碳原子的直鏈或支鏈鏈的脂族烴基。「支鏈」表示在線性炔基鏈上附接一個或多個低級烷基、烯基或炔基。鏈炔基實例為乙炔基。
本文所採用「芳基」是指含3至15或16個、優選5至10個碳原子的芳香性單環或多環烴環系。芳基包括但不限於苯基、經取代的苯基、萘基、經取代的萘基，其中取代基為低級烷基、滷素、或低級烷氧基。優選芳基為環結構中含7個碳以下的低級芳基。
本文所採用烷基、烷氧基、羰基等的命名法是本領域技術人員都了解的用法。例如，本文所採用「烷基」是指含有一個或多個碳的飽和碳鏈；該鏈可為直鏈或支鏈，或包括環狀部分或可為環狀。本文所採用「脂環」是指環狀的芳基。
本文所採用「環烷基」是指飽和環狀碳鏈；「環烯基」與「環炔基」是指分別包含至少一個未飽和雙鍵或參鍵的環狀碳鏈。碳鏈的環狀部分可包含一個環或二個或多個稠合環。
本文所採用「環烯基」是指含有一個碳-碳雙鍵以及約3至10個碳原子的非芳香性單環或多環系。單環的環烯基實例包括環戊烯基或環己烯基；優選為環己烯基。多環系環烯基的實例為降冰片烯基。環烯基可分別經一個或多個滷素或烷基取代。
本文所採用「滷代烷基」是指低級烷基，其中一個或多個氫原子被滷素取代，其包括但不限於氯甲基、三氟甲基、1-氯-2-氟乙基，等等。
本文所採用「滷代烷氧基」是指其中R為滷烷基的RO-。
本文所採用「羧醯胺」是指如式RpCONH2的基團，其中R是選自烷基或芳基，優選為低級烷基或低級芳基，且p為0或1。
本文所採用「烷氨基羰基」是指-C(O)NHR，其中R為氫、烷基，優選為低級烷基，或芳基，優選為低級芳基。
本文所採用「二烷基氨基羰基」是指-C(O)NR′R，其中R′與R分別選自烷基或芳基，優選為低級烷基或低級芳基；本文所採用「羧醯胺」是指如式NR′COR的基團。
本文所採用「烷氧羰基」是指-C(O)OR，其中R為烷基，優選為低級烷基，或芳基，優選為低級芳基。
本文所採用「烷氧基」與「硫烷氧基」是指RO-和RS-，其中R為烷基，優選為低級烷基，或芳基，優選為低級芳基。
本文所採用「滷代烷氧基」是指其中R為滷烷基的RO-。
本文所採用「氨基羰基」是指-C(O)NH2。
本文所採用「烷胺基羰基」是指-C(O)NHR，其中R為烷基，優選為低級烷基，或芳基，優選為低級芳基。
本文所採用「烷氧羰基」是指-C(O)OR，其中R為烷基，優選為低級烷基。
本文所採用「環烷基」是指飽和環狀碳鏈；環烯基和環炔基是指包含至少一個不飽和參鍵的環狀碳鏈。該碳鏈的環狀部分可包含一個環或二個或多個稠合環。
本文所採用「亞烷基二氧基」是指-O-烷基-O-基團，其中烷基部分如上所述。亞烷基二氧基的置換類似物是指亞烷基二氧基中一個或二個氧原子被表現類似的原子或原子的基團如S、N、NH、Se置換。置換的亞烷基二氧基實例為亞乙基雙(硫烷二基)。亞烷硫基氧為-S-烷基-O-、-O-烷基-S-，而亞烷基二硫基為-S-烷基-S-。
本文所採用「雜芳基」是指芳香性單環或稠合環系中一個或多個碳原子被碳以外的元素例如氮、氧或硫置換。優選環狀基含有一個或二個稠合環，且各環為3至約7元環。雜芳基類似於「芳基」，可未經取代或經一個或多個取代基取代。雜芳基實例包括吡嗪基、吡唑基、四唑基、呋喃基、(2-或3-)噻吩基、(2-、3-、或4-)吡啶基、咪唑基、嘧啶基、異惡唑基、噻唑基、異噻唑基、喹啉基、吲哚基、異喹啉基、惡唑基和2，1，3-惡二唑基。優選的雜芳基包括5至6元含氮環，如嘧啶基。
本文所採用「烷氧羰基」是指烷基-O-CO-基團。烷氧羰基實例包括甲氧羰基和乙氧基羰基。
本文所採用「氨甲醯基」是指-CONH2。如同本文所述的所有基團，此等基團可未經取代或經取代。經取代的氨甲醯基包括如CONY2Y3基團，其中Y2與Y3分別為氫、烷基、氰基(低級烷基)、芳烷基、雜芳烷基、羧基(低級烷基)、羧基(芳基取代的低級烷基)、羧基(羧基取代的低級烷基)、羧基(羥基取代的低級烷基)、羧基(雜芳基取代的低級烷基)、氨甲醯基(低級烷基)、烷氧羰基(低級烷基)、或烷氧羰基(芳基取代的低級烷基)，但其限制條件為Y2與Y3中僅有一個為氫，而且當Y2和Y3之一為羧基(低級烷基)、羧基(芳基取代的低級烷基)、氨甲醯基(低級烷基)、烷氧羰基(低級烷基)或烷氧羰基(芳基取代的低級烷基)時，則Y2與Y3中另一個為氫或烷基。Y2與Y3優選分別為氫、烷基、氰基(低級烷基)、芳烷基、雜芳烷基、羧基(低級烷基)、羧基(芳基取代的低級烷基)及氨甲醯基(低級烷基)。
本文所採用「其任何相應的N-(4-滷-3-甲基-5-異惡唑基)、N-(4-滷-5-甲基-3-異惡唑基)、N-(3，4-二甲基-5-異惡唑基)、N-(4-滷-5-甲基-3-異惡唑基)、N-(4-滷-3-甲基-5-異惡唑基)、N-(4，5-二甲基-3-異惡唑基)衍生物」是指其中Ar2與明確說明的化合物相同的化合物，但Ar1為N-(4-滷-3-甲基-5-異惡唑基)、N-(4-滷-5-甲基-3-異惡唑基)、N-(3，4-二甲基-5-異惡唑基)、N-(4-滷-5-甲基-3-異惡唑基)、N-(4-滷-3-甲基-5-異惡唑基)或N-(4，5-二甲基-3-異惡唑基)，其中滷素為任何滷化物，以Cl或Br較佳。
本文所採用的任何保護基團、胺基酸或其他化合物的縮寫，除非另有說明，否則為根據其一般用法、公認的縮寫、或IUPAC-IUB生化命名委員會(IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature)(參見(1972)Biochem.11942-944)。A、用於治療內皮肽所調節之疾病的化合物本發明提供治療內皮肽所調節之疾病的化合物及使用式I化合物治療內皮肽所調節之疾病的方法。具體而言，本發明所提供的化合物為芳基取代的噻吩基、呋喃基、吡咯基或苯基磺醯胺，其中所述芳基是四、五或六取代的，優選是四或五取代的。特別優選的磺醯胺是N-異惡唑基噻吩磺醯胺，其中噻吩是經芳基取代的，該芳基僅有一個或兩個氫取代基。如果芳基是四取代的，則優選在1、2、4和6位被取代，且這些取代基之一是極性基團，如羥基、乙醯氧基、羧基、磺醯基、醯基、雜芳基、肟、滷素、假滷素和羧醯胺。如果芳基在2、4和6位是被非極性基團取代的，如烷基，更具體為甲基，則芳基優選是五或六取代的。在五取代芳基中，第4個取代基連接噻吩、呋喃、吡咯或苯環，而第5個取代基優選是極性基團，如羥基、乙醯氧基、羧基、磺醯基、醯基、雜芳基、肟、滷素、假滷素和羧醯胺。
在此描述的化合物在體內動物模型和其它合適模型中具有良好的生物利用度，相對長的體內半衰期，以及良好的效能。
在此具體描述的實施方案中，Ar1是3-或5-異惡唑基，而該磺醯胺化合物具有式III 或其藥物學上可接受的衍生物，其中R1和R2是如下的(i)、(ii)或(iii)(i)R1和R2分別獨立地選自於H、NH2、NO2、滷素、假滷素、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、芳烷基、雜芳基、烷氧基、烷基氨基、烷硫基、烷基氧基、滷代烷基、烷基亞硫醯基、烷基磺醯基、芳氧基、芳基氨基、芳硫基、芳基亞硫醯基、芳基磺醯基、滷代烷基、滷代芳基、烷氧羰基、烷基羰基、氨基羰基、芳基羰基、甲醯基、取代或未取代醯胺基、以及取代或未取代的脲基，其中烷基、鏈烯基和鏈炔基部分苯環1-14個碳原子，而且可以是直鏈或支鏈或環狀的，而芳基部分苯環4-16個碳原子，但R2不是滷素或假滷素；或者(ii)R1和R2一起形成-(CH2)n-，其中n是3-6；或者(iii)R1和R2一起形成1，3-丁二烯基(-CH＝CH-CH＝CH-)；
M是-C(Y)-W-，(CH2)mC(Y)(CH2)r，(CH2)mC(Y)NH(CH2)r，(CH2)m(CH＝CH)(CH2)r，(CH2)mC(Y)(CH2)sNH(CH2)r，C＝N(OH)(CH2)r，(CH2)mC(Y)(CH＝CH)sNH(CH2)r，CH(OH)(CH2)r，CH(CH3)C(Y)(CH2)r，CH(CH3)C(Y)(CH2)m(CH＝CH)(CH2)r，(CH2)r，(CH2)rO，(CH2)S(O)n其中n是0-2，其中m、s和r分別獨立地是0-6，優選為0-3，其中W是O、NH或(CH2)z其中z是0-6，優選為0-3，更優選為1；而Y是O、S，或者與R8以及它們所連接的原子一起形成3-16元未取代或取代環或雜環，優選為5或6元未取代或取代環或雜環，更優選為6元未取代或取代雜環；M優選是-C(Y)-W-或(CH2)z；R3和R4獨立地選自於氫、滷素、氰基、氰基烷基、C(O)R41、烷基、鏈烯基、環烷基和芳基，或一起形成亞烷基或亞烯基，其中R41是烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、環烷基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷基磺醯基氨基、芳基磺醯基氨基、烷基磺醯基烷基氨基、烷基磺醯基芳基氨基、芳基磺醯基烷基氨基或芳基磺醯基芳基氨基；Y1和Y2分別獨立地是碳或氮；a和b分別獨立地是0或1；R5、R6、R7、R8和R9分別獨立地選自於如下的(i)或(ii)(i)R5、R6、R7、R8和R9分別獨立地選自於H，OH，NHR38，CONR38R39，NO2，氰基，滷素，假滷素，烷基，鏈烯基，鏈炔基，芳基，芳烷基，雜芳基，烷氧基，烷基氨基，烷硫基，滷代烷基，烷基亞硫醯基，烷基磺醯基，烷氧羰基，烷基羰基，鏈烯基硫基，鏈烯基氨基，鏈烯基氧基，鏈烯基亞硫醯基，鏈烯基磺醯基，烷氧羰基，芳基氨基羰基，烷基氨基-羰基，氨基羰基，(烷基-氨基羰基)烷基，乙醯氧基，羥基，羧基，羧基烷基，羧基烯基，烷基磺醯基氨基烷基，氰基烷基，乙醯基，乙醯氧基烷基，羥基烷基，烷氧基烷氧基，羥基烷基，(乙醯氧基)烷氧基，(羥基)烷氧基，甲醯基，磺醯氯，胺基酸，己糖，O-糖苷，核糖，低級烷基，CN，-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3，-(CH2)xCH3，(CH2)xNH-低級烷基，-(CH2)xC(O)NH2，D-、L-或外消旋胺基酸，伯或仲醯胺，O-糖苷，己糖或核糖，-S(O)2NH2，羥基，烷氧基，烷氧羰基，乙醯氧基烷基，-(CH2)xCOOH，-(CH2)xCH(COOH)(CH2)yCH3，CO2-低級烷基，CN，雜芳基，C(O)(CH2)xS(O)2(CH2)yCH3，C(＝N-OR38)(CH2)yCH3，-C(O)C(O)(CH2)yCH3，-(CH2)xN(CH3)2，S(O)2NHR50，OS(O)2NR38R39，烷基芳基，烷基雜芳基，C(O)NHR30，-(CH2)xOH，以及-C(O)N(H)N(H)R50；其中R38和R39分別獨立地選自於氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、滷代烷基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳基烷氧基、烷氧基、芳氧基、環烷基、環烯基和環炔基，而且優選分別選自於氫、低級烷基、低級烷氧基和低級滷代烷基；x和y分別獨立地是0-14；和R50是諸如氫、低級烷基、低級烷氧基或雜芳基的取代基；或者(ii)取代環上的相鄰碳原子的R5、R6、R7、R8和R9中的至少兩個一起形成亞烷基二氧基、亞烷基硫代氧基氧基或亞烷基二硫代氧基(如-O-(CH2)n-O-，-S-(CH2)n-O-，-S-(CH2)n-S-，其中n是1-4，優選為1或2)，其是未取代或通過用滷素、低級烷基、低級烷氧基或滷代低級烷基置換一個或者多個氫而被取代，而且其他的R5、R6、R7、R8和R9如(i)進行選擇；以及X是-C(R3)＝C(R4)-，S，O或NR11，其中R11是氫或包含最多30個碳原子、優選1-10個碳原子、更優選1-6個碳原子，並選自於氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳烷氧基、環烷基、環烯基、環炔基、C(O)R15和S(O)nR15其中n是0-2；R15是氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳烷氧基、環烷基、環烯基或環炔基；R11和R15是未取代或被一個或者多個分別選自於z中的取代基取代，所述Z包括氫、滷素、假滷素、烷基、烷氧基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、胺基酸、伯和仲醯胺、O-糖苷、己糖、核糖、烷基芳基、烷基雜芳基、雜環基、芳烷基、芳烷氧基、環烷基、環烯基、環炔基、OH、CN、C(O)R16、OC(O)R16、CO2R16、OCO2R16、SH、S(O)nR16其中n是0-2、NHOH、NR12R16、NO2、N3、OR16、R12NCOR16和CONR12R16；R16是氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳烷氧基、環烷基、環烯基、環炔基、氯、NH50、烷基芳基、烷基雜芳基或-(CH2)xOH；R50是諸如氫、低級烷基、低級烷氧基或雜芳基的取代基；x是0-14；R12選自於R11和Z，並選自於氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳烷氧基、環烷基、環烯基、環炔基、C(O)R17和S(O)nR17其中n是0-2；R17是氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳烷氧基、環烷基、環烯基或環炔基；R12和R16可一起形成亞烷基；R11、R12、R15和R16可分別進一步被Z中的合適基團取代。
在所有的實施方案中，X優選是S或-C(R3)＝C(R4)-，更優選是S或-CH＝CH-，並最優選是S。
在一個實施方案中，M優選是-C(Y)-W-，而在該組合物及方法中所用的化合物具有以下式IV 或其藥物學上可接受的衍生物，其中R1-R9、X、Y、W、Y1、Y2、a和b分別如上所定義。
在這些實施方案中，化合物優選為式IV的化合物，其中X是S或-CH＝CH-，優選為S；R1是滷素或低級烷基；R2是低級烷基；R3和R4分別是氫；R5是低級烷基或-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3；R6是低級烷基、-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3、或雜芳基；R7是氫，羥基，烷氧基，低級烷基，S(O)2NHR50和OS(O)2NR38R39；其中R38和R39分別獨立地選自於氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、滷代烷基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳基烷氧基、烷氧基、芳氧基、環烷基、環烯基和環炔基，而且優選分別選自於氫、低級烷基、低級烷氧基和低級滷代烷基；x和y分別獨立地是0-14；和R50是氫、低級烷基、低級烷氧基或雜芳基；Y和R8選自於如下的(i)或(ii)(i)Y是O；而R8是CONR38R39，CN，雜芳基，烷基磺醯基，(CH2)xC(O)(CH2)yCH3，烷基，滷素，假滷素，羥基烷基，C(O)(CH2)xS(O)2(CH2)yCH3或C(＝N-OR38)(CH2)yCH3；或者(ii)Y和R8與它們所連接的原子一起形成3-16元未取代或取代環或雜環，優選5或6元未取代或取代環或雜環，更優選6元未取代或取代雜環，Y和R8優選一起形成-CO-N＝或-CO-C(CN)＝；R9是H；Y1和Y2分別獨立地是碳或氮；如果Y2是碳，則a是1；如果Y2是氮，則a是0；如果Y1是碳，則b是1；如果Y1是氮，則b是0；而W是NH。
在特別優選的實施方案中，式IV的化合物是以下式V的2-取代-3-磺醯胺 及其藥物學上可接受的衍生物，其中X是S或-CH＝CH-，優選為S；R1是滷素或低級烷基；R2是低級烷基；R3和R4分別是氫；R5是低級烷基或-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3；R6是低級烷基，-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3，或雜芳基；R7是氫，羥基，烷氧基，低級烷基，S(O)2NHR50和OS(O)2NR38R39；其中R38和R39分別獨立地選自於氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、滷代烷基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳基烷氧基、烷氧基、芳氧基、環烷基、環烯基和環炔基，而且優選分別選自於氫、低級烷基、低級烷氧基和低級滷代烷基；x和y分別獨立地是0-14；而R50是氫、低級烷基、低級烷氧基或雜芳基；Y和R8選自於如下的(i)或(ii)(i)Y是O；而R8是CONR38R39，CN，雜芳基，烷基磺醯基，(CH2)xC(O)(CH2)yCH3，烷基，滷素，假滷素，羥基烷基，C(O)(CH2)xS(O)2(CH2)yCH3或C(＝N-OR38)(CH2)yCH3；或(ii)Y和R8與它們所連接的原子一起形成3-16元未取代或取代環或雜環，preferably a 5或6元未取代或取代環或雜環，更優選6元未取代或取代雜環，Y和R8優選一起形成-CO-N＝或-CO-C(CN)＝；R9是H；Y1和Y2分別獨立地是碳或氮；如果Y2是碳，則a是1；如果Y2是氮，則a是0；如果Y1是碳，則b是1；如果Y1是氮，則b是0；而W是NH。
在更優選的實施方案中，所述化合物是式V的化合物，其中R1是滷素或低級烷基；優選是Cl或Me；更優選是Me。在這些實施方案中，R2是低級烷基，優選是Me；而R3和R4分別是H。
在具體描述的實施方案中，所述化合物是以下的式V化合物，其中R5是Me或乙醯基，優選為Me；R6是Me、乙醯基或2-惡唑基，優選為Me；R7是H、Me、OSO2NMe2、OCH2-環丙基，羥基或SO2NH-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)，優選是H；Y和R8選自於(i)或(ii)，優選如下選自於(i)(i)Y是O；而R8是C(O)CH2SO2CH3，C(O)Me，CN，C(O)N(Me)(CH2-t-Bu)，SO2Me，2-惡唑基，SO2-異丙基，SO2-n-丙基，CH(OH)Me，C(O)NMe2，C(＝N-OMe)Me，Me，C(O)Et，Cl，n-丙基或乙基；或(ii)Y和R8一起形成-CO-N＝或-CO-C(CN)＝；R9是H；Y1和Y2分別獨立地是碳或氮，優選是碳；如果Y2是碳，則a是1；如果Y2是氮，則a是0；如果Y1是碳，則b是1；如果Y1是氮，則b是0；而W是NH。
因此，在優選的實施方案中，化合物是以下的式V化合物，其中X是S；R1是Cl或Me，優選為Me；R2是Me；R3、R4和R9是H；Y是O；W是NH；和Y1和Y2分別是碳。在這些實施方案中，化合物是以下式VI的噻吩磺醯胺化合物 或其藥物學上可接受的衍生物，其中R1是Cl或Me，preferably Me；R5是Me或乙醯基，preferably Me；R6是Me，乙醯基或2-惡唑基，preferably Me；R7是H，Me，OSO2NMe2，OCH2-環丙基，羥基或SO2NH-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)，preferably H；和R8是C(O)CH2SO2CH3，C(O)Me，CN，C(O)N(Me)(CH2-t-Bu)，SO2Me，2-惡唑基，SO2-異丙基，SO2-n-丙基，CH(OH)Me，C(O)NMe2，C(＝N-OMe)Me，Me，C(O)Et，Cl，n-丙基或乙基。
在最優選的實施方案中，R1、R5和R6是Me；R7是氫；而R8是C(O)Me。
在另一個實施方案中，化合物是其中Y1和Y2分別為氮的式I化合物。在該實施方案中，a和b優選為0；而其他的變量如上所定義。在優選的實施方案中，R5、R6和R8是烷基，優選是低級烷基，更優選是Me；Y是O；而W是NH。在更優選的實施方案中，R3和R4分別是H；而X是S。因此，該實施方案的化合物是N-(5-異惡唑基)2-或3-(5-嘧啶基氨基羰基)噻吩磺醯胺。
上述實施方案的優選化合物包括N-(2-乙醯基-4，6-二甲基苯基)-3-{[(3，4-二甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩羧醯胺、N-(2-氰基-3，4，6-三甲基苯基)-3-{[(3，4-二甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(3，4，6-三甲基-2-丙醯基苯基)-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-[2-(1-羥基乙基)-4，6-二甲基苯基]-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-{2-[(二甲基氨基)羰基]-4，6-二甲基苯基)-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-{2，4-二甲基-6-[(甲氧基)ethanimidoyl]苯基}-2-噻吩羧醯胺、3-{[(3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-硫苯基)羰基]氨基}-2，4，6-三甲基苯基-N，N-二甲基氨基磺酸酯、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-{3-[(環丙基甲基)氧基]-2，4，6-三甲基苯基}-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(2，4，6-三甲基-5-嘧啶基)-2-噻吩羧醯胺、N-(2-乙醯基-3，4，6-三甲基苯基)-3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(2-氰基-3，4，6-三甲基苯基)-2-噻吩羧醯胺、N-(2-氯-4，6-二甲基苯基)-3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(4，6-二乙醯基-3-羥基-2-丙基苯基-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(2，4-二甲基-6-[2-(甲基磺醯基)乙醯基]苯基}-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(2，4-二甲基-6-{[甲基(2，2-二甲基丙基)氨基]羰基}苯基)-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基)-N-[2，4-二甲基-6-(甲基磺醯基)苯基]-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-[2，4-二甲基-6-(1，3-惡唑-2-基)苯基]-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-[2-(2-丙基磺醯基)-4，6-二甲基苯基]-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基)-N-[2，4-二甲基-6-(丙基磺醯基)苯基]-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(2-乙基-4，6-二甲基苯基)-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-[2，6-二甲基-4-(1，3-惡唑-2-基)苯基]-2-噻吩羧醯胺、N-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)-2-(6，8-二甲基-4-羥基-2-苯並嘧啶基)噻吩-3-磺醯胺和N-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)-2-(3-氰基-4-羥基-6，8-二甲基苯並[b]吡啶-2-基)噻吩-3-磺醯胺。
在另一個實施方案中，X是-C(R3)＝C(R4)-，而化合物是式VII的苯磺醯胺 及其藥物學上可接受的衍生物，其中R1和R2分別是如下的(i)、(ii)或(iii)(i)R1和R2分別獨立地選自於H、NH2、NO2、滷素、假滷素、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、芳烷基、雜芳基、烷氧基、烷基氨基、烷硫基、烷基氧基、滷代烷基、烷基亞硫醯基、烷基磺醯基、芳氧基、芳基氨基、芳硫基、芳基亞硫醯基、芳基磺醯基、滷代烷基、滷代芳基、烷氧羰基、烷基羰基、氨基羰基、芳基羰基、甲醯基、取代或未取代醯胺基、以及取代或未取代脲基，其中烷基、鏈烯基和鏈炔基部分包含1-14個碳原子，而且可以是直鏈或支鏈或環狀的，而芳基部分包含4-16個碳原子，但R2不是滷素或假滷素；或(ii)R1和R2一起形成-(CH2)n-，其中n是3-6；或(iii)R1和R2一起形成1，3-丁二烯基(-CH＝CH-CH＝CH-)；W是O、NH或(CH2)z其中z是0-6、優選為0-3、更優選為1；而Y是O、S，或者與R8以及它們所連接的原子一起形成3-16元未取代或取代環或雜環，優選5或6元未取代或取代環或雜環，更優選6元未取代或取代雜環；M優選是-C(Y)-W-或(CH2)z；R3和R4獨立地選自於氫，滷素，氰基，氰基烷基，C(O)R41，烷基，鏈烯基，環烷基和芳基，或一起形成亞烷基或亞烯基，其中R41是烷基，芳基，雜芳基，芳烷基，雜芳烷基，環烷基，烷基氨基，二烷基氨基，芳基氨基，二芳基氨基，烷基磺醯基氨基，芳基磺醯基氨基，烷基磺醯基烷基氨基，烷基磺醯基芳基氨基，芳基磺醯基烷基氨基或芳基磺醯基芳基氨基；Y1和Y2分別獨立地是碳或氮；a和b分別獨立地是0或1；R5、R6、R7、R8和R9分別獨立地如下選自於(i)或(ii)(i)R5、R6、R7、R8和R9分別獨立地選自於H，OH，NHR38，CONR38R39，NO2，氰基，滷素，假滷素，烷基，鏈烯基，鏈炔基，芳基，芳烷基，雜芳基，烷氧基，烷基氨基，烷硫基，滷代烷基，烷基亞硫醯基，烷基磺醯基，烷氧羰基，烷基羰基，鏈烯基硫基，鏈烯基氨基，鏈烯基氧基，鏈烯基亞硫醯基，鏈烯基磺醯基，烷氧羰基，芳基氨基羰基，烷基氨基-羰基，氨基羰基，(烷基-氨基羰基)烷基，乙醯氧基，羥基，羧基，羧基烷基，羧基烯基，烷基磺醯基氨基烷基，氰基烷基，乙醯基，乙醯氧基烷基，羥基烷基，烷氧基烷氧基，羥基烷基，(乙醯氧基)烷氧基，(羥基)烷氧基，甲醯基，磺醯氯，胺基酸，己糖，O-糖苷，核糖，低級烷基，CN，-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3，-(CH2)xCH3，(CH2)xNH-低級烷基，-(CH2)xC(O)NH2，D-、L-或外消旋胺基酸，伯或仲醯胺，O-糖苷，己糖或核糖，-S(O)2NH2，羥基，烷氧基，烷氧羰基，乙醯氧基烷基，-(CH2)xCOOH，-(CH2)xCH(COOH)(CH2)yCH3，CO2-低級烷基，CN，雜芳基，C(O)(CH2)xS(O)2(CH2)yCH3，C(＝N-OR38)(CH2)yCH3，-C(O)C(O)(CH2)yCH3，-(CH2)xN(CH3)2，S(O)2NHR50，OS(O)2NR38R39，烷基芳基，烷基雜芳基，C(O)NHR50，-(CH2)xOH，以及-C(O)N(H)N(H)R50；其中R38和R39分別獨立地選自於氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、滷代烷基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳基烷氧基、烷氧基、芳氧基、環烷基、環烯基和環炔基，而且優選分別選自於氫、低級烷基、低級烷氧基和低級滷代烷基；x和y分別獨立地是0-14；而R50是諸如氫、低級烷基、低級烷氧基或雜芳基的取代基；或(ii)取代環上相鄰原子的R5、R6、R7、R8和R9中至少有兩個一起形成亞烷基二氧基、亞烷基硫代氧基氧基或亞烷基二硫代氧基(如-O-(CH2)n-O-，-S-(CH2)n-O-，-S-(CH2)n-S-，其中n是1-4，優選為1或2)其是未取代或通過用滷素、低級烷基、低級烷氧基或滷代低級烷基取代一個或者多個氫而被取代，而其他的R5、R6、R7、R8和R9如(i)中所述進行選擇。
在某些實施方案中，化合物式如下的式VII化合物，其中R3、R4和R9是H；Y是O；而W是NH。在優選的實施方案中，R1和R2分別選自於烷基、低級鏈烯基、低級鏈炔基、低級滷代烷基、滷素、假滷素或H，但R2不是滷素。R1優選是低級烷基或滷素，更優選是Me或Cl。R2優選是低級烷基，更優選是Me。
在更優選的實施方案中，化合物具有以下式VIII 或其藥物學上可接受的衍生物，其中R1是低級烷基或滷素，優選是Me或Cl；R5是低級烷基或-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3；R6是低級烷基，-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3，或雜芳基；R7是氫，羥基，烷氧基，低級烷基，S(O)2NHR50或OS(O)2NR38R39；而R8是CONR38R39，CN，雜芳基，烷基磺醯基，(CH2)xC(O)(CH2)yCH3，烷基，滷素，假滷素，羥基烷基，C(O)(CH2)xS(O)2(CH2)yCH3或C(＝N-OR38)(CH2)yCH3。
在更優選的實施方案中，所述化合物是如下的式VIII化合物，其中R5是Me或乙醯基，優選為Me；R6是Me、乙醯基或2-惡唑基，優選為Me；R7是H、Me、OSO2NMe2、OCH2-環丙基、羥基或SO2NH-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)，優選為H；而R8是C(O)CH2SO2CH3，C(O)Me，CN，C(O)N(Me)(CH2-t-Bu)，SO2Me，2-惡唑基，SO2-異丙基，SO2-n-丙基，CH(OH)Me，C(O)NMe2，C(＝N-OMe)Me，Me，C(O)Et，Cl，n-丙基或乙基。因此，在優選的實施方案中，所述化合物是如下的式VIII化合物，其中R5和R6是Me；而R7是H。在這些實施方案中，R8最優選是C(O)Me。
優選的式VIII化合物包括N-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)-2-(2-乙醯基-4，6-二甲基苯基氨基羰基)苯磺醯胺。
在其他的實施方案中，所述化合物是如下的式I化合物，其中M是(CH2)z，其中z是0-6、優選0-3、更優選1。因此，在更優選的實施方案中，式I的化合物具有式IX 或其藥物學上可接受的衍生物，其中R1和R2是如下的(i)、(ii)或(iii)(i)R1和R2分別獨立地選自於H、NH2、NO2、滷素、假滷素、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、芳烷基、雜芳基、烷氧基、烷基氨基、烷硫基、烷基氧基、滷代烷基、烷基亞硫醯基、烷基磺醯基、芳氧基、芳基氨基、芳硫基、芳基亞硫醯基、芳基磺醯基、滷代烷基、滷代芳基、烷氧羰基、烷基羰基、氨基羰基、芳基羰基、甲醯基、取代或未取代醯胺基、以及取代或未取代脲基，其中烷基、鏈烯基和鏈炔基部分包含1-14個碳原子，而且可以是直鏈或支鏈或環狀的，而芳基部分包含4-16個碳原子，但R2不是滷素或假滷素；或(ii)R1和R2一起形成-(CH2)n-，其中n是3-6；或，(iii)R1和R2一起形成1，3-丁二烯基(-CH＝CH-CH＝CH-)；R3和R4獨立地選自於氫、滷素、氰基、氰基烷基、C(O)R41、烷基、鏈烯基、環烷基和芳基，或一起形成亞烷基或亞烯基，其中R41是烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、環烷基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷基磺醯基氨基、芳基磺醯基氨基、烷基磺醯基烷基氨基、烷基磺醯基芳基氨基、芳基磺醯基烷基氨基或芳基磺醯基芳基氨基；Y1和Y2分別獨立地是碳或氮；a和b分別獨立地是0或1；R5，R6，R7，R8和R9分別獨立地如下選自於(i)或(ii)(i)R5、R6、R7、R8和R9分別獨立地選自於H，OH，NHR38，CONR38R39，NO2，氰基，滷素，假滷素，烷基，鏈烯基，鏈炔基，芳基，芳烷基，雜芳基，烷氧基，烷基氨基，烷硫基，滷代烷基，烷基亞硫醯基，烷基磺醯基，烷氧羰基，烷基羰基，鏈烯基硫基，鏈烯基氨基，鏈烯基氧基，鏈烯基亞硫醯基，鏈烯基磺醯基，烷氧羰基，芳基氨基羰基，烷基氨基-羰基，氨基羰基，(烷基-氨基羰基)烷基，乙醯氧基，羥基，羧基，羧基烷基，羧基烯基，烷基磺醯基氨基烷基，氰基烷基，乙醯基，乙醯氧基烷基，羥基烷基，烷氧基烷氧基，羥基烷基，(乙醯氧基)烷氧基，(羥基)烷氧基，甲醯基，磺醯氯，胺基酸，己糖，O-糖苷，核糖，低級烷基，CN，-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3，-(CH2)xCH3，(CH2)xNH-低級烷基，-(CH2)xC(O)NH2，D-、L-或外消旋胺基酸，伯或仲醯胺，O-糖苷，己糖或核糖，-S(O)2NH2，羥基，烷氧基，烷氧羰基，乙醯氧基烷基，-(CH2)xCOOH，-(CH2)xCH(COOH)(CH2)yCH3，CO2-低級烷基，CN，雜芳基，C(O)(CH2)xS(O)2(CH2)yCH3，C(＝N-OR38)(CH2)yCH3，-C(O)C(O)(CH2)yCH3，-(CH2)xN(CH3)2，S(O)2NHR50，OS(O)2NR38R39，烷基芳基，烷基雜芳基，C(O)NHR50，-(CH2)xOH，以及-C(O)N(H)N(H)R50；其中R38和R39分別獨立地選自於氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、滷代烷基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳基烷氧基、烷氧基、芳氧基、環烷基、環烯基和環炔基，而且優選分別選自於氫、低級烷基、低級烷氧基和低級滷代烷基；x和y分別獨立地是0-14；而R50是諸如氫、低級烷基、低級烷氧基或雜芳基的取代基；或(ii)取代環上相鄰原子的R5、R6、R7、R8和R9中至少有兩個一起形成亞烷基二氧基、亞烷基硫代氧基氧基或亞烷基二硫代氧基(如-O-(CH2)n-O-，-S-(CH2)n-O-，-S-(CH2)n-S-，其中n是1-4，優選為1或2)，其是未取代或通過用滷素、低級烷基、低級烷氧基或滷代低級烷基取代一個或者多個氫而被取代，而其他的R5、R6、R7、R8和R9如(i)中所述進行選擇；以及X是-C(R3)＝C(R4)-，S，O或NR11，其中R11是氫或包含最多30個、優選1-10個、更優選1-6個碳原子，並選自於氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳烷氧基、環烷基、環烯基、環炔基、C(O)R15和S(O)nR15其中n是0-2；R15是氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳烷氧基、環烷基、環烯基或環炔基；R11和R15是未取代或被一個或者多個分別獨立地選自於Z中的取代基取代，所述Z包括氫、滷素、假滷素、烷基、烷氧基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、胺基酸、伯和仲醯胺、O-糖苷、己糖、核糖、烷基芳基、烷基雜芳基、雜環基、芳烷基、芳烷氧基、環烷基、環烯基、環炔基、OH、CN、C(O)R16、OC(O)R16、CO2R16、OCO2R16、SH、S(O)nR16其中n是0-2、NHOH、NR12R16、NO2、N3、OR16、R12NCOR16和CONR12R16R16是氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳烷氧基、環烷基、環烯基、環炔基、氯、NHR50、烷基芳基、烷基雜芳基或-(CH2)xOH；R50是諸如氫、低級烷基、低級烷氧基或雜芳基的取代基；x是0-14；R12獨立地選自於R11和Z，選自於氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳烷氧基、環烷基、環烯基、環炔基、C(O)R17和S(O)nR17其中n是0-2；R17是氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳烷氧基、環烷基、環烯基或環炔基；R12和R16可一起形成亞烷基；R11、R12、R15和R16可分別進一步被Z中所定義的合適基團取代。
在這些實施方案中，R3和R4優選形成-CH＝CH-CH＝CH-，而X優選是S。在更優選的實施方案中，式LX的化合物是在2位被苄基取代的苯並噻吩-3-磺醯胺取代。因此，在更優選的實施方案中，式IX的化合物具有式X 或其藥物學上可接受的衍生物，其中R1和R2分別如下是(i)、(ii)或(iii)(i)R1和R2分別獨立地選自於H、NH2、NO2、滷素、假滷素、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、芳烷基、雜芳基、烷氧基、烷基氨基、烷硫基、烷基氧基、滷代烷基、烷基亞硫醯基、烷基磺醯基、芳氧基、芳基氨基、芳硫基、芳基亞硫醯基、芳基磺醯基、滷代烷基、滷代芳基、烷氧羰基、烷基羰基、氨基羰基、芳基羰基、甲醯基、取代或未取代醯胺基，以及取代或未取代脲基，其中烷基、鏈烯基和鏈炔基部分包含1-14個碳原子，而且可以是直鏈或支鏈或環狀的，而芳基部分包含4-16個碳原子，但R2不是滷素或假滷素；或，(ii)R1和R2一起形成-(CH2)n-，其中n是3-6；或，(iii)R1和R2一起形成1，3-丁二烯基(-CH＝CH-CH＝CH-)；Y1和Y2分別獨立地是碳或氮；a和b分別獨立地是0或1；R5，R6，R7，R8和R9分別獨立地如下選自於(i)或(ii)(i)R5、R6、R7、R8和R9分別獨立地選自於H，OH，NHR38，CONR38R39，NO2，氰基，滷素，假滷素，烷基，鏈烯基，鏈炔基，芳基，芳烷基，雜芳基，烷氧基，烷基氨基，烷硫基，滷代烷基，烷基亞硫醯基，烷基磺醯基，烷氧羰基，烷基羰基，鏈烯基硫基，鏈烯基氨基，鏈烯基氧基，鏈烯基亞硫醯基，鏈烯基磺醯基，烷氧羰基，芳基氨基羰基，烷基氨基-羰基，氨基羰基，(烷基-氨基羰基)烷基，乙醯氧基，羥基，羧基，羧基烷基，羧基烯基，烷基磺醯基氨基烷基，氰基烷基，乙醯基，乙醯氧基烷基，羥基烷基，烷氧基烷氧基，羥基烷基，(乙醯氧基)烷氧基，(羥基)烷氧基，甲醯基，磺醯氯，胺基酸，己糖，O-糖苷，核糖，低級烷基，CN，-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3，-(CH2)xCH3，(CH2)xNH-低級烷基，-(CH2)xC(O)NH2，D-、L-或外消旋胺基酸，伯或仲醯胺，O-糖苷，己糖或核糖，-S(O)2NH2，羥基，烷氧基，烷氧羰基，乙醯氧基烷基，-(CH2)xCOOH，-(CH2)xCH(COOH)(CH2)yCH3，CO2-低級烷基，CN，雜芳基，C(O)(CH2)xS(O)2(CH2)yCH3，C(＝N-OR38)(CH2)yCH3，-C(O)C(O)(CH2)yCH3，-(CH2)xN(CH3)2，S(O)2NHR50，OS(O)2NR38R39，烷基芳基，烷基雜芳基，C(O)NHR50，-(CH2)xOH，以及-C(O)N(H)N(H)R50；其中R38和R39分別獨立地選自於氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、滷代烷基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳基烷氧基、烷氧基、芳氧基、環烷基、環烯基和環炔基，而且優選分別選自於氫、低級烷基、低級烷氧基和低級滷代烷基；x和y分別獨立地是0-14；而R50是諸如氫、低級烷基、低級烷氧基或雜芳基的取代基；或(ii)取代環上相鄰原子的R5、R6、R7、R8和R9中至少有兩個一起形成亞烷基二氧基、亞烷基硫代氧基氧基或亞烷基二硫代氧基(如-O-(CH2)n-O-，-S-(CH2)n-O-，-S-(CH2)n-S-，其中n是1-4，優選為1或2)其是未取代或通過用滷素、低級烷基、低級烷氧基或滷代低級烷基取代一個或者多個氫而被取代，而其他的R5、R6、R7、R8和R9如(i)中所述進行選擇。
在更優選的實施方案中，所述化合物是如下的式X化合物，其中R1是滷素或低級烷基；R2是低級烷基；R5是低級烷基或-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3；R6是低級烷基，-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3，或雜芳基；R7是氫，羥基，烷氧基，低級烷基，S(O)2NHR50和OS(O)2NR38R39；其中R38和R39分別獨立地選自於氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、滷代烷基、烷基芳基、雜環基、芳烷基、芳基烷氧基、烷氧基、芳氧基、環烷基、環烯基和環炔基，而且優選分別選自於氫、低級烷基、低級烷氧基和低級滷代烷基；x和y分別獨立地是0-14；而R50是氫、低級烷基、低級烷氧基或雜芳基；R8是CONR38R39，CN，雜芳基，烷基磺醯基，(CH2)xC(O)(CH2)yCH3，烷基，滷素，假滷素，羥基烷基，C(O)(CH2)xS(O)2(CH2)yCH3或C(＝N-OR38)(CH2)yCH3；R9是H；Y1和Y2分別獨立地是碳或氮；如果Y2是碳，則a是1；如果Y2是氮，則a是0；如果Y1是碳，則b是1；而如果Y1是氮，則b是0。
在這些實施方案中，Y1和Y2優選是碳；a和b分別為1；R5、R6和R8優選是低級烷基，更優選為Me；而R7優選是H或SO2NHR50，其中R50是雜芳基，更優選為異惡唑基，最優選為4-氯-3-甲基-5-異惡唑基。
該實施方案的優選化合物包括N-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)-2-(2，4，6-三甲基苄基)苯並[b]噻吩-3-磺醯胺和N-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)-2-(3-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基磺醯基-2，4，6-三甲基苄基)苯並[b]噻吩-3-磺醯胺。
還令人感興趣的是藥物學上可接受的衍生物，包括磺醯胺化合物的鹽、酯、酸和鹼、溶劑化物、水合物和前體藥物。優選的是藥物學上可接受的鹽，特別是鹼金屬鹽，最優選是鈉鹽。
特別優選的衍生物是如下化合物的鹽，其中W是亞烷基，更特別是CH2。在這些衍生物中，優選的鹽是鈉鹽。
在所有的實施方案中，優選的取代基也可參考表1來確定，該表顯示了-些示例性的化合物。優選的合物是表1中具有最高活性的那些，而優選的取代基則是在具有最高活性(最低濃度下的活性)的化合物上的取代基。
表1
*相對於N-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)-2-{[3，4-(亞甲二氧基)-6-甲基苯基)乙醯基]-噻吩-3-磺醯胺的ETA拮抗活性--數據沒有得到或者是在100μM以％抑制測定的本發明的化合物與已知的內皮肽拮抗劑相比還具有更高的藥代動力學性質(見下表2)。如表2中所示，本發明的化合物與已知的內皮肽拮抗劑相比具有更高的口服生物利用度和選擇性。例如，N-(2-乙醯基-4，6-二甲基苯基)-3-{[(3，4二甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩羧醯胺的口服利用度為148.1％，而N-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)-2-{[3，4-(亞甲二氧基)-6-甲基苯基)乙醯基]-噻吩-3-磺醯胺的口服利用度為43.6％。另外，N-(2-乙醯基-4，6-二甲基苯基)-3-{[(3，4二甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩羧醯胺對ETA受體的拮抗選擇性比對ETB受體的拮抗選擇性高441000，而N-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)-2-{[3，4-(亞甲二氧基)-6-甲基苯基)乙醯基]-噻吩-3-磺醯胺在相同的測試中的選擇性僅為20950。
表2還提供了證實與已知的內皮肽受體拮抗劑相比本發明的化合物在體外和體內的耐受性都提高的數據。參見實施例24。例如，N-(2-乙醯基-4，6-二甲基苯基)-3-{[(3，4二甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩羧醯胺在測量對CP4502C9、2C19和3A4酶抑制作用的體外測試中的IC50值分別為7.6、126.3和28.0，而N-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)-2-{[3，4-(亞甲二氧基)-6-甲基苯基)乙醯基]-噻吩-3-磺醯胺在相同測試中的IC50值分別為0.03、0.2和0.09。另外，N-(2-乙醯基-4，6-二甲基苯基)-3-{[(3，4二甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩羧醯胺在急性缺氧模型中以約1mg/kg的劑量使平均肺動脈壓(MPAP)增加被抑制了50％，而N-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)-2-{[3，4-(亞甲二氧基)-6-甲基苯基)乙醯基]-噻吩-3-磺醯胺在相同的測試中50％抑制MPAP增加時的劑量為2.5mg/kg。在表2中還提供了其他的數據因此，如體內和體外測試中所表明的，與已知的內皮肽受體拮抗劑相比，本發明的化合物具有更高的藥代動力學性質和耐受性。
表2
s％+對於ETB的IC50/對於ETA的IC50
表2(續)
*IC50值(μM)。
表2(續)
#在體內模型中，對平均肺動脈壓增加產生50％抑制作用時的劑量(mg/kg)B、化合物的製備一些具有所需活性的上述及其他化合物的製備方法示於實施例中。其中未明確其合成法的化合物可利用實施例中詳述的一種或多種方法經過常規修飾，以容易取得的試劑適當替代即可合成。
許多本文中描述的化合物是3-氨磺醯基-2-芳基氨基羰基噻吩衍生物。通常情況下，這些化合物可通過偶聯適當的3-氨磺醯基噻吩基羧酸和經取代或未經取代的苯胺來製備。
3-氨磺醯基噻吩基羧酸可通過本領域技術人員已知的各種方法來製備。通常情況下，大多數合成法涉及羰烷氧基噻吩基磺醯氯與氨基異惡唑於無水吡啶或四氫呋喃(THF)及氫化鈉中的縮合反應。隨後水解羰烷氧基形成所需要的酸。磺醯氯與氨基異惡唑可市售得到或根據實施例中所述方法或採用本領域技術人員已知的其他方法合成(參見例如第4,659,369、4,861,366和4,753,672號美國專利)。
例如，噻吩基磺醯氯可通過以下方法製備。例如與溴或N-溴代琥珀醯亞胺反應，在2位溴化3-氨磺醯基噻吩前體。隨後金屬-滷與烷基鋰如正丁基鋰交換，再與二氧化碳反應，由此形成所需要的酸。另外的方法是，與例如硫酸中的三氧化硫反應，使2-噻吩基羧酸衍生物在3位磺化。將所得的磺酸轉化為磺醯氯(與五氯化磷、三氯化磷、磷醯氯、亞硫醯氯或草醯氯反應)，然後與適當的胺反應，形成所需要的氨磺醯基噻吩基羧酸衍生物。中間體磺醯氯也可直接通過噻吩基羧酸衍生物與氯磺酸的反應來製備。
N-(烷基異惡唑基)磺醯胺的製備方法可由氨基異惡唑與磺醯氯於無水吡澱中，使用或不使用催化劑4-(二甲基氨基吡啶)縮合。N-(3，4-二甲基-5-異惡唑基)磺醯胺和N-(4，5-二甲基-3-異惡唑基)磺醯胺則可由相應的氨基二甲基異惡唑製備，如5-氨基-3，4-二甲基異惡唑。例如，N-(3，4-二甲基-5-異惡唑基)-2-(羧甲氧基)噻吩-3-磺醯胺是由2-甲氧羰基噻吩-3-磺醯氯與5-氨基-3，4-二甲基異惡唑於無水吡啶中製備。
N-(4-滷異惡唑基)磺醯胺的製備方法可由氨基-4-滷異惡唑與磺醯氯於THE中，使用氫化鈉作為鹼，進行縮合。例如，N-(4-溴-3-甲基-5-異惡唑基)噻吩-2-磺醯胺是由5-氨基-4-溴-3-甲基異惡唑與噻吩-2-磺醯氯於THF和氫化鈉中製備。
這些磺醯胺亦可由相應的磺醯氯與氨基異惡唑，於吡啶中，使用或不使用催化劑量的4-二甲基氨基吡啶(DMAP)製備。在某些情況下，可得到二磺醯基化合物為主要或唯一產物。該二磺醯化產物容易使用氫氧化鈉水溶液及合適共溶劑，如甲醇或四氫呋喃，通常於室溫上，水解成磺醯胺。
取代苯胺通過用例如硝酸和硫酸的混合物或者四氟硼酸硝硝化合適的前體取代苯來合成。用例如鋅粉末、催化氫化、氯化亞錫、或任何其它本領域技術人員已知的方法還原所得的芳香硝基化合物，得到所需要的苯胺。
噻吩基羧酸與苯胺的偶聯可如下進行將酸轉化為相應的醯基咪唑(例如與羰基二咪唑反應)或者醯基氯(例如與草醯氯或亞硫醯氯反應)，然後與苯胺反應，形成所希望的芳氨基羰基噻吩化合物。
在此所描述的一些化合物是3-氨磺醯基-2-苄基氨基羰基噻吩衍生物。在製備這些化合物時，上述製備方法中的苯胺可用苄胺來替換。合適的苄胺可如下合成相應的苄基滷與疊氮化物反應，然後通過例如催化氫化或者用三烷基或三芳基膦處理來還原所得的苄基疊氮化物。
在此所描述的其它化合物是3-氨磺醯基-2-芳基乙醯基噻吩衍生物。這些化合物可通過在3-氨磺醯基-2-噻吩羧酸衍生物如N-甲基-N-甲氧基醯胺中加入合適的苄基氯化鎂來形成。所述醯胺可如下製備使酸與羰基二咪唑反應，然後與N-甲基-N-甲氧基胺反應。
在此描述的某些化合物可用以下合成路線1中描述的方法來製備 其中R1是滷素或者低級烷基，其中優選是氯和甲基。
對於式A的化合物，R60與CO一起形成羧酸或其衍生物。在此情況下，R60優選為OR40，其中R40為低級烷基或者烷氧基烷基，優選甲基或甲氧基甲基，或者與所希望的化學相一致的其他基團。
對於式C或D的化合物，R60是OR40、滷素或與所希望的化學轉化相一致的其他羧酸活化基團，其中特別優選是氯。
對於式E的化合物，Ar可以是任何芳香或者雜芳基環，其中優選是苯和嘧啶。
適合給藥人體的化合物的前體藥物與其他衍生物也可依本領域技術已知的方法設計和製備(參見例如Nogrady(1985)醫學化學，生化學探論，紐約牛津大學出版社(Medicinal Chemistry A Biochemical Approach，Oxford University Press，New York，第388-392頁)。
本文所說明的化合物已合成，並於體外測試中試驗其活性，且有些在活體動物模型中進行。由核磁共振光譜(NMR)、質譜、紅外光譜及高效液相色譜法進行的分析顯示，所合成化合物的結構與此等化合物應有的結構一致，而且通常純度至少約98％。本文所例舉或說明的所有化合物均具有內皮肽拮抗劑活性。C、化合物生物活性的評估可採用標準生理、藥學及生化方法來測試化合物，以鑑定那些具有任何內皮肽生物活性或具有幹擾或抑制內皮肽之能力的化合物。具有體外活性的化合物，如有能力結合內皮肽受體或與一種或多種內皮肽競爭結合內皮肽受體的化合物，可用於分離內皮肽受體的方法及分辯內皮肽受體專一性的方法中，且可為用於治療由內皮肽所調節之病變的方法中的候選藥物。
因此，除了本發明明確說明的化合物外，其他亦為內皮肽拮抗劑或激動劑的優選式I與II化合物可使用此類篩選法進行鑑別。1、調整內皮肽活性的化合物的鑑別測試化合物調整內皮肽-1之活性的能力。本領域技術人員已知有許多分析法可評估化合物調整內皮肽活性的能力(參見，例如Ishikawa等人的第5,114,918號美國專利；EP A10436189，BANYU PHARMA-CEUTICAL CO.，LTD.(1991年10月7日)；Borges等人(1989)Eur.J.Pharm.165223-230；Filep等人(1991)Biochem.Biophys.Res.Commum.177171-176)。體外試驗可由活體內試驗進行校正(參見例如Ishikawa等人的第5,114,918號美國專利；EP A10436189，BANYUPHARMACEUTICAL CO.，LTD.(1991年10月7日))，並由此分析藥物活性。此等分析法已說明於本文實施例中，並包括從其對自已經接受遺傳工程處理而在細胞表面上表達ETA或ETB受體的細胞株中分離的膜上的ETA及ETB受體進行競爭結合的能力。
有潛力的拮抗劑的性質可採用特定組織，如鼠門靜脈及主動脈、鼠子宮、氣管及輸精管，分析其隨活體內抑制內皮肽所誘發之活性的能力的變化(參見例如R.Borges，H.Von Grafenstein，及D.E.Knight，「內皮肽的組織選擇性」(Tissue selectivity of endothelin)，Eur.J.Pharmacol.165223-230(1989))。採用高血壓鼠、ddy小白鼠或其他認可的動物模型，測試其於活體內作為內皮肽拮抗劑的能力(參見Kaltenbronn等人，(1990)J.Mde.Chem.33838-845，亦參見Ishikawa等人的第5,114,918號美國專利；及EP A10436189，BANYU PHARMACEUTICAL CO.，LTD.(1991年10月7日)；亦參見Bolger等人(1983)J.Pharmacol.Exp.Ther.225291-309)。採用此類動物試驗的結果可評估藥物有效性並測定藥物有效劑量。有潛力的激動劑亦可使用本領域人員已知的體外及活體內分析法評估。
內皮肽活性可由試驗化合物刺激分離之鼠胸主動脈收縮的能力來鑑定(Borges等人(1989)，「內皮肽的組織選擇性」(Tissue selectivity ofendothelin)，Eur.J.Pharmacol.165223-230。進行分析時，除掉內皮，切成環節，於組織浴中放在張力下，於試驗化合物的存在下以內皮肽處理。記錄內皮肽所誘發的張力變化。產生劑量反應曲線，提供試驗化合物的相對抑制效力的資料。其他組織，包括心臟、骨骼肌、腎、子宮、氣管和輸精管，均可用來評估特定試驗化合物對組織收縮的效果。
內皮肽同功型專一性拮抗劑可由試驗化合物幹擾內皮肽與表達不同內皮肽-受體亞型的組織或細胞的結合，或幹擾內皮肽或內皮肽同功型的生物效果的能力來鑑定(Takayanagi等人(1991)Reg.Pep.3223-37；Panek等人(1992)Biochem.Biophys.Res.Commun.183556-571)。例如，ETB受體表達在血管內皮細胞中，可能調節前列環素及衍生自內皮肽的鬆弛因子的釋放(De Nucci等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA859797)。ETA受體則未見於經培養的、表達ETB受體的內皮細胞中。
分析化合物的結合或抑制內皮肽與ETB受體的結合時，是通過測定對內皮肽-1所調節的前列環素釋放的抑制作用來進行的，亦即測定由經培養的牛主動脈內皮細胞中釋放出的主要穩定代謝物，6-酮基PGF1α(見例如Filep等人(1991)Biochem.And Biophys Res.Commun.177171-176)。因此，評估化合物對不同內皮肽受體的相對親和力時，可採用與受體亞型相異的組織來測定抑制性劑量-反應曲線。
採用此等分析法時，可分析化合物對ETA受體及ETB受體的相對親和力。選出具有所需性質，如對內皮肽-1結合作用的專一抑制性的化合物。經選出具有所需活性的化合物可用於治療，並採用上述可評估其活體內有效性的分析法測試此種用途(參見例如第5,248,807號美國專利；第5,240,910號美國專利；第5,198,548號美國專利；第5,187,195號美國專利；第5,082,838號美國專利；第5,230,999號美國專利；已公開的第2,067,888和2071193號加拿大專利申請；已公開的第2,259,450號英國申請；已公開的國際PCT申請WO 93/08799；Benigi等人(1993)Kidney Internatioal44440-444；以及Nirei等人(1993)Life Sciences521869-1874)。具有體外活性並與體內有效性相關的化合物即可調配成合適的藥物組合物，並用為治療劑。
該等化合物亦可用於鑑定及分離內皮肽專一性受體，而且有助於設計更強效的內皮肽拮抗劑或激動劑或者對特定內皮肽受體更專一性的化合物。2、內皮肽受體的分離本文提供一種鑑定內皮肽受體的方法。在操作本方法時，將一種或多種化合物連接在載體上，並用於受體的親和性純化法。選擇具有特定專一性的化合物時，可鑑定出不同ET受體的亞型。
一種或多種化合物可連接至適當樹脂，如Affi-凝膠，其是依本領域技術人員已知的連接內皮肽與此等樹脂的方法進行共價連接或其他方式連接(參見Schvartz等人(1990)Endocrinology 1263218-3222)。連接的化合物則可為那些對ETA或ETB受體或其他受體亞型呈專一性的化合物。
樹脂已先以通常在生理pH(7至8)下的合適緩衝劑平衡。取含有來自特定組織的已溶解受體的組合物與化合物待連接的樹脂混合，並選擇性洗脫受體。測試受體結合內皮肽同功肽或類似物的情形或利用其他鑑定蛋白質及鑑別特性的方法來鑑定受體。受體、樹脂的製備及洗脫法可通過修改本領域技術人員已知的標準程序來進行(參見例如Schvartz等人(1990)Endocrinology 1263218-3222)。
本文根據受體與任何本化合物的差示性親和力提供分辯受體類型的其他方法。本文所說明用於測定特定化合物對內皮肽受體的親和力的任何分析法可用於根據受體對本文所提供特定化合物的親和力來分辯受體亞型。具體而言，測定未知受體對本文所提供已知其對一種受體的親和力高於另一種受體的化合物的結合親和性時，即可鑑定其為ETA或ETB受體。此等優先性相互作用適用於測定可採用本文所述製得的化合物治療的特定疾病。例如，對ETA受體親和性高和對ETB受體親和力低或無的化合物可作為高血壓劑的候選藥物；而優先與ETB受體相互作用的化合物則適用於為抗氣喘劑的候選藥物。D、組合物的調配與給藥本發明還提供磺醯胺的製劑。所述製劑是用於給藥本文所述磺醯胺化合物之藥物學上可接受的衍生物、特別是其鹽的組合物。由於與中性形式相比，鹽、特別是鈉鹽的穩定性高，所以特別適合於口服或非經胃腸道給藥。此等組合物包括溶液、混懸液、片劑、溶散片、丸劑、膠囊、粉末、緩釋製劑或任何其它合適劑型。該組合物優選為丸劑或片劑。製造片劑、膠囊劑以及其它此等製劑的方法對於本領域技術人員是已知的(參見例如Ansel，H.C(1985)Introduction to Pharma-ceutical DosageForms，第4版，第126-163頁)。
在所述製劑中，有效濃度的一種或多種藥物學上可接受的衍生物與合適的藥物載體或載劑混合。優選的是，在配製之前，磺醯胺化合物如上所述衍生為相應的鹽，優選為鈉鹽。製劑中化合物鹽的濃度應使得在給藥時釋放的量可有效改善內皮肽所調節之疾病的症狀。通常情況下，將組合物配製成單劑量給藥的形式。在配製組合物時，將化合物溶解、懸浮、分散在所選載體中或與所述載體混合，該化合物的重量份應使其濃度足以緩解或改善所治療的病症。適合於給藥本發明化合物的藥物載體或載劑包括任何本領域技術人員已知的適用於具體給藥形式的載體。另外，本發明化合物可單獨作為藥物活性成分配製在組合物中，或者與其它活性成分混合。脂質體懸浮體，包括組織靶向的脂質體，也適於作為藥物學上可接受的載體。它們可根據本領域技術人員已知的方法來製備。例如，脂質體劑可如第4,522,811號美國專利來製備。
鹽、優選為鈉鹽形式的活性化合物在藥物學上可接受的載體中的量應足以對所治療的病人產生有用的治療作用，但沒有副反應。治療有效濃度可通過在體外和體內系統中測試化合物來經驗性地確定(參見例如Ishikawa等人的第5,114,918號美國專利；EP A1 0436189，BanyuPharmaceutical Co.，Ltd.(1991年10月7日)；Borges等人(1989)Eur.J.Pharm.165223-230；Filep等人(1991)Biochem.Biophys.Res.Commun.177171-176)，然後由此外推得到用於人的劑量。
藥物組合物中活性化合物鈉鹽的濃度取決於該活性化合物的吸收、失活和排洩速率、該化合物的物化特性、給藥方案、給藥量以及本領域技術人員已知的其它因素。例如，所給藥的量應足以治療高血壓的症狀。希望治療內皮肽所調節之病變的有效量高於給藥治療細菌感染的磺醯胺化合物的量。
通常情況下，治療有效劑量應產生約0.1ng/ml至約50-100μg/ml的活性成分血清濃度。藥物組合物通常提供約0.001-2000mg化合物/kg體重/天的劑量。所製備的藥物單元劑量劑型可提供約1-1000mg、優選約10-500mg基本活性組分或基本組分的組合/單元劑量劑型。
活性組分可一次性地給藥，或者以一定的時間間隔分成多個小劑量給藥。應理解的是，精確的治療劑量和持續時間隨待治療的疾病而變化，並可使用已知的測試方案或從體內或體外測試數據外推來經驗性地確定。應注意的是，濃度和劑量值還可根據待緩解之病症的嚴重程度來變化。進一步應理解的是，對於任何特別的病人，具體的給藥方案應根據個體所需以及給藥人或監視給藥組合物之人的專業判斷隨時間來調節，而且上述濃度範圍僅為示例性的，並不用來限制本發明組合物的範圍或實際使用。
優選的藥物學上可接受的衍生物包括酸、鹽、酯、水合物、溶劑化物和前體藥物形式。所選的衍生物應比相應的中性化合物更穩定。更優選的鹽包括鹼金屬鹽，特別是鈉鹽，例如但不限於磷酸氫鈉和鈉鹽，最優選為鈉鹽。
因此，有效濃度或量的一種或多種本發明之化合物或其藥物學上可接受的衍生物與適於全身、定點或局部給藥的藥物載體相混合，由此形成藥物組合物。組合物中包括的化合物量應有效緩解或治療所欲治療之由內皮肽調節的疾病。組合物中活性化合物的濃度取決於該活性化合物的吸收、失活、排洩速率、給藥方案、給藥量、具體的製劑以及本領域技術人員已知的其它因素。
本發明組合物可根據所治療的疾病通過合適的途徑給藥，這包括口服、非經胃腸道、直腸、定點和局部給藥。例如，在治療眼科疾病如青光眼時，可製成眼內和玻璃體內注射給藥的劑型。在口服給藥時，優選膠囊和片劑。在非經胃腸道給藥時，優選如上所述的經復原的凍乾粉末。化合物可以是液體、半液體或固體劑型，並以適合於各給藥途徑的方式來配製。優選的給藥方式包括非經胃腸道和口服給藥。
用於非經胃腸道、經皮內、皮下或局部給藥的溶液或混懸液可包括以下任何物質無菌稀釋劑，如注射用水、鹽水溶液、混合油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成溶劑；抗菌劑，如苄醇和對羥基苯甲酸甲酯；抗氧劑，如抗壞血酸和亞硫酸氫鈉；螯合劑，如乙二胺四乙酸(EDTA)；緩衝劑，如乙酸鹽、檸檬酸鹽和磷酸鹽；以及用於調節離子強度的試劑，如氯化鈉或葡萄糖。非經胃腸道給藥的製劑可封閉在由玻璃、塑料或其它合適材料製成的安瓿、一次性注射器或者單或多劑量管形瓶中。
當化合物的溶解度不足時，可採用增溶化合物的方法。此等方法是本領域技術人員已知的，且包括但不限於使用共溶劑，如二甲基亞碸(DMSO)，使用表面活性劑，如tween，或溶於碳酸氫納水溶液中。化合物的衍生物，如化合物的鹽類或化合物的前體藥物，亦可用於調配有效的藥物組合物。
當混合或添加磺醯胺化合物的鈉鹽時，所形成的混合物可為溶液、懸浮液、乳液，等等。所形成的混合物的形式依許多因素而定，包括計劃的給藥模式以及化合物在特定載體或載劑中的濃解度。有效濃度足以改善待治療疾病、病變或病症的症狀，且可由實驗決定。
用於給藥於人和動物的製劑可為單元劑量劑型，例如片劑、膠囊劑、丸劑、粉末劑、顆粒劑、無菌注射溶液劑或混懸劑、以及口服溶液或混懸劑、油-水乳劑，它們都包含合適量的化合物、特別是其藥物學上可接受的鹽、優選為鈉鹽。藥物學上治療活性的化合物及其衍生物通常配製成單元劑量劑型或多份劑量劑型並給藥。在此所述的單元劑量劑型是指本領域技術人員已知的適用於人和動物患者並單獨包裝的物理上獨立的單元。各單元劑量包括預定量的治療活性化合物以及所需要的藥物載體、載劑或稀釋劑，所述活性化合物的量足以產生所希望的治療效果。單元劑量劑型的例子包括安瓿和注射器、單獨包裝的片劑或膠囊。單元劑量劑型可以其一部分或多份給藥。多份劑量劑型是指包裝在單個容器中的多個相同單元劑量劑型，並以獨立的單元劑量劑型給藥。多份劑量劑型包括管形瓶、片劑瓶或膠囊或品脫或加侖瓶。因此，多份劑量劑型是沒有單獨包裝的多個單元劑量。
本發明的組合物可包括活性成分稀釋劑，如乳糖、蔗糖、磷酸氫二鈣、或羧甲基纖維素；潤滑劑，如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣和滑石；以及粘合劑，如澱粉、天然膠如金合歡膠、葡萄糖、糖蜜、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素和其衍生物、povidone、crospovidone、以及本領域技術人員已知的其它粘合劑。可以液體給藥的藥物組合物可例如通過以下方法來製備在載體中溶解、分散或混合如上所述的活性化合物以及任選的藥物輔劑，所述載體例如是水、鹽水、葡萄糖水溶液、甘油、乙二醇、乙醇等，由此形成溶液或混懸液。如果需要，待給藥的藥物組合物還可包括少量的非毒性輔助物質，如溼潤劑、乳化劑、或增溶劑、pH緩衝劑等，如乙酸鹽、檸檬酸鈉、環糊精衍生物、山梨糖醇酐單月桂酸酯、三乙醇胺乙酸鈉、油酸三乙醇胺、以及其它此等試劑。製備此等劑型的實際方法對於本領域技術人員是已知的或者是顯而易見的；例如，參見Remington′sPharmaceutical Sciences，Mack Publishing Company，Easton，Pa.，第15版，1975。待給藥的組合物或製劑在任何時候都包含一定量的活性化合物，該量應足以緩解所治療患者的症狀。
可製備包含0.005％-100％活性成分、其餘為非毒性載體的劑型或組合物。對於口服給藥，混入任何常規使用的賦形劑，如藥物級的甘露糖、乳糖、澱粉、硬脂酸鎂、滑石、纖維素衍生物、交聯羧甲基纖維素鈉、葡萄糖、蔗糖、碳酸鎂或糖精鈉，由此形成藥物學上可接受的非毒性組合物。此等組合物包括溶液劑、混懸劑、片劑、膠囊劑、粉末劑和緩釋製劑，例如但不限於植入劑和微膠囊化的給藥系統、以及可生物降解且生物相適的聚合物，如膠原、乙烯乙酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、聚原酸酯、聚乳酸等。製備這些製劑的方法對於本領域技術人員是已知的。本發明的組合物可包含0.001-100％活性成分，優選0.1-85％，通常為75-95％。
活性化合物的鹽、優選鈉鹽可與載體混合，該載體保護化合物避免快速從體內消除，例如定時釋放製劑或包衣。
所述製劑可包含其它活性化合物，以得到所希望的性能組合。本發明之式I化合物或其藥物學上可接受的鹽和衍生物可有利地與其它本領域已知用於治療一種或多種上述疾病或病症的藥劑共同給藥用於治療或預防目的，例如β-腎上腺能阻斷劑(例如阿替洛爾)、鈣通道阻斷劑(如硝苯地平)、血管緊張素轉化酶(ACE)抑制劑(如賴諾普利)、利尿劑(如呋塞米或氫氯噻嗪)、內皮肽轉化酶(ECE)抑制劑(例如phosphoramidon)、中性肽鏈內切酶(NEP)抑制劑、HMGCoA還原酶抑制劑、氧化氮供體、抗氧劑、血管舒張藥、多巴胺激動劑、神經保護劑、甾體、β-激動劑、抗凝血劑、或血栓溶解劑。應理解的是，此等組合治療構成了本發明組合物及治療方法的另一個方面。1、口服給藥製劑口服給藥劑型可為固體、凝膠或液體製劑。固體劑型有片劑、膠囊劑、顆粒劑、塊狀粉末劑。口服片劑的類型包括壓縮的口嚼錠劑和片劑，它們可為腸衣、糖衣或薄膜包衣的。膠囊可為硬或軟明膠膠囊，而顆粒和粉末劑可與本領域技術人員已知的其它成分一起組合以非泡騰或泡騰劑型提供。
在某些實施方案中，製劑為固體劑型，優選為膠囊劑或片劑。片劑、丸劑、膠囊劑、含片等可包含以下任何成分或者性質類似的化合物粘合劑、稀釋劑、崩解劑、潤滑劑、助流劑、甜味劑、和調味劑。
粘合劑的例子包括微晶纖維素、黃蓍膠、葡萄糖溶液、阿拉伯膠漿、明膠溶液、蔗糖和澱粉糊。潤滑劑包括滑石、澱粉、硬脂酸鎂或硬脂酸鈣、石松子和硬脂酸。稀釋劑包括乳糖、蔗糖、澱粉、高嶺土、鹽、甘露糖和磷酸二鈣。助流劑包括但不限於膠體二氧化矽。崩解劑包括交聯羧甲基纖維素鈉、澱粉羥乙酸鈉、藻酸、玉米澱粉、馬鈴薯澱粉、膨潤土、甲基纖維素、瓊脂和羧甲基纖維素。著色劑包括任何經批准的水溶性FD和C染料、它們的混合物；以及懸浮於水合礬土中的非水溶性FD和C染料。甜味劑包括蔗糖、乳糖、甘露糖和人造甜味劑，如甜精鈉和糖精；以及任何噴霧乾燥的芳味劑。調味劑包括從植物如果實中提取的天然調味劑以及可產生令人愉快之感覺的化合物的合成混合物，例如但不限于洋薄荷和水楊酸甲酯。溼潤劑包括丙二醇單硬脂酸酯、脫水山梨糖醇單油酸酯、二乙二醇單月桂酸酯和聚氧乙烯月桂基醚。催吐包衣包括脂肪酸、脂肪、蠟、蟲膠、氨基蟲膠和乙酸鄰苯二甲酸纖維素。薄膜包衣包括羥乙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚乙二醇4000和乙酸鄰苯二甲酸纖維素。
如果需要口服給藥，化合物的鹽可配製在組合物中，以防止胃液的酸性環境。例如，組合物可配製在腸溶包衣中，該包衣能夠保持其在胃中的完整性，並在腸中釋放活性化合物。組合物還可配製成與抗酸劑或其它類似成分組合。
如果單元劑量劑型是膠囊，除以上類型的物質外，其還可包含液體載體如脂肪油。另外，單元劑量劑型可包括各種改善該單元劑量劑型之物理形狀的物質，例如糖衣和其它腸溶劑。化合物還可以作為甘香酒劑、混懸劑、糖漿劑、糯米紙囊劑、噴灑劑(sprinkle)、口香糖劑等中的成分來給藥。除活性化合物外，糖漿劑還可包含作為甜味劑的蔗糖以及某些防腐劑、染料、著色劑和調味劑。
活性物質也可與其它不損壞所希望之作用的活性物質相混合，或者與增強所希望之作用的物質如抗酸劑、H2阻斷劑和利尿劑混合。例如，如果本發明化合物用於治療哮喘或高血壓，其可分別與其它支氣管舒張劑和抗高血壓藥物一起使用。活性成分是本文中所述的化合物或其鹽。也可包括更高濃度的活性成分，最多至約98重量％。
片劑中包括的藥物學上可接受的載體是粘合劑、潤滑劑、稀釋劑、崩解劑、著色劑、調味劑和甜味劑。由於其腸衣，腸衣片可對抗胃酸的作用，並在中性或鹼性的腸道中溶解或崩解。糖衣片為壓製片劑，其中有不同層的藥物學上可接受的物質。薄膜包衣片是用聚合物或其它合適包衣來包衣的壓製片劑。多次壓製片劑是使用上述藥物學上可接受的物質通過一次以上壓制循環而製成的壓製片劑。著色劑也可用於上述劑型中。調味劑和甜味劑用於壓製片劑、糖衣片劑、多次壓製片劑和口嚼片劑中。調味劑和甜味劑特別用於口嚼片劑和錠劑中。
液體口服劑型包括水溶液、乳劑、混懸劑、由非泡騰顆粒復原形成的溶液和/或混懸劑、以及由泡騰顆粒復原形成的泡騰製劑。水溶液例如包括甘香酒劑和糖漿劑。乳劑可為水包油或者油包水型的。
甘香酒劑為澄清的、甜的水醇製劑。甘香酒劑中所用的藥物學上可接受的載體包括溶劑。糖漿劑為濃的糖水溶液，例如蔗糖，並可包含防腐劑。乳劑為兩個相的系統，其中一種液體以小球狀分散在另一種液體中。乳劑中所用的藥物學上可接受的載體是非含水的液體、乳化劑和防腐劑。混懸劑使用藥物學上可技術的懸浮劑和防腐劑。待覆原成液體口服劑型之非泡騰顆粒中所用的藥物學上可接受的載體包括稀釋劑、甜味劑和溼潤劑。待覆原成液體口服劑型之泡騰顆粒中所用的藥物學上可接受的載體包括有機添加劑和二氧化碳源。在以上所有劑型中都使用著色劑和調味劑。
溶劑包括甘油、山梨醇、乙醇和糖漿。防腐劑的例子包括甘油、尼泊金甲酯和尼泊金丙酯、苯甲酸類添加劑、苯甲酸鈉和醇。乳劑中所用的非含水的液體包括礦物油和棉籽油。乳化劑的例子包括明膠、金合歡膠、黃蓍膠、膨潤土、以及表面活性劑，如聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯。懸浮劑包括羧甲基纖維素鈉、果膠、黃蓍膠、V字膠和金合歡膠。稀釋劑包括乳糖和蔗糖。甜味劑包括蔗糖、糖漿、甘油和人造甜味劑，如甜精鈉和糖精。溼潤劑包括丙二醇單硬脂酸酯、脫水山梨醇單油酸酯、二乙二醇單月桂酸酯和聚氧乙烯月桂基醚。有機添加劑包括檸檬酸和酒石酸。二氧化碳源包括碳酸氫鈉和碳酸鈉。著色劑包括任何經批准的水溶性FD和C染料、以及它們的混合物。調味劑包括從植物如果實中提取的天然調味劑、以及可產生令人愉快之感覺的化合物的合成混合物。
對於固體劑型，在例如碳酸丙烯酯、植物油或甘油三酯中的溶液和懸浮液優選包膠在明膠膠囊中。此等溶液、其製備方法和包膠方法見第4,328,245、4,409,239和4,410,545號美國專利。對於液體劑型，例如在聚乙二醇中的溶液，可用足夠量的藥物學上可接受的液體載體如水來稀釋，以容易計量給藥。
另外，液體或半固體口服製劑通過以下方法來製備將活性化合物或鹽溶解或分散在植物油、多元醇、甘油三酯、丙二醇酯(例如碳酸丙烯酯)以及其它此等載體中，然後將這些溶液包膠在硬或軟明膠膠囊殼中。其它有用的製劑包括第Re 28,819和4,358,603號美國專利中所述的。
在一個實施方案中，製劑為固體劑型，優選為膠囊或片劑。在優選實施方案中，製劑為固體劑型，優選為膠囊或片劑，其包含10-100重量％、優選50-95重量％、更優選75-85重量％、最優選80-85重量％的一種或多種磺醯胺或磺醯胺鹽，優選為式I之一種或多種磺醯胺化合物的磷酸氫鈉鹽或鈉鹽，更優選為鈉鹽；約0-25％、優選8-15％的稀釋劑或粘合劑，例如乳糖或微晶纖維素；約0-10％、優選0-7％的崩解劑，例如經改性的澱粉或纖維素聚合物，特別是交聯羧甲基纖維素鈉，如交聯羧甲基纖維素鈉(交聯羧甲基纖維素鈉NF可從FMCCroporation，Philadelphia，PA以AC-DI-SOL商品名購得)或澱粉羥乙酸鈉；以及0-2％的潤滑劑，例如硬脂酸鎂、滑石和硬脂酸鈣。崩解劑，例如交聯羧甲基纖維素鈉或澱粉羥乙酸鈉，可使纖維素基質快速崩解，在包衣聚合物溶解後立即釋放活性物質。在所有實施方案中，活性成分和輔助成分的精確量可經驗性地測定，並隨給藥途徑和所治療之疾病變化。
在示例性實施方案中，製劑為膠囊，其包含約50-100％、優選70-90％、更優選80-90％、最優選83％的一種或多種式I之磺醯胺化合物的一種或多種鈉鹽；約0-15％、優選11％的稀釋劑或粘合劑，例如乳糖或微晶纖維素；約0-10％、優選5％的崩解劑，例如交聯羧甲基纖維素鈉或澱粉羥乙酸鈉；以及約0-5、優選約1％的潤滑劑，例如硬脂酸鎂。以片劑給藥的固體劑型也在此範圍之內。
在示例性的優選實施方案中，製劑為膠囊劑，其包含83％的一種或多種磺醯胺化合物的一種或多種鈉鹽；11％微晶纖維素；5％崩解劑，例如交聯羧甲基纖維素鈉或澱粉羥乙酸鈉；以及1％硬脂酸鎂。
上述實施方案也可配製成片劑，並任選地進行包衣。片劑包含上述組成。
在所有實施方案中，片劑和膠囊劑可如本領域技術人員已知地進行包衣，以改進或維持活性組分的溶解。例如，片劑可用常規的腸溶包衣如水楊酸苯酯、蠟和乙酸鄰苯二甲酸纖維素來包衣。2、注射劑、溶液劑和乳劑非胃腸道給藥，通常包括注射、皮下、肌肉內或靜脈內給藥，也在本發明的範圍內。注射劑可製成常規形式，如液體溶液或混懸劑，注射前適合於在液體中形成溶液或混懸劑的固體劑型，或者乳劑。合適的賦形劑是例如水、鹽水、葡萄糖、甘油或乙醇。另外，如果需要，所給藥的藥物組合物還可包括少量的非毒性輔助物質，例如溼潤劑或乳化劑、pH緩衝劑、穩定劑、增溶劑、以及其它此等試劑，如乙酸鈉、脫水山梨醇單月桂酸酯、油酸三乙醇胺和環糊精。本發明還包括植入緩釋或持續釋放系統，以維持恆定的劑量水平(例如參見第3,710,795號美國專利)。包含在此等非胃腸道給藥之組合物中的活性化合物的百分比絕大程度上取決於其具體的性質、以及化合物的活性和患者的需要。
非胃腸道給藥製劑包括靜脈、皮下和肌肉內給藥。非胃腸道給藥的製劑包括用於注射的無菌溶液，在使用前待與溶劑混合的無菌可溶性乾物質，如凍乾粉末，其包括皮下片劑，用於注射的無菌混懸劑，在使用前待與載體混合的無菌乾燥非可溶性物質和無菌乳劑。溶液劑可為含水的或者是不含水的。
如果靜脈給藥，合適的載體包括生理鹽水或磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)、以及包含增粘或增溶之試劑的溶液，上述試劑例如是葡萄糖、聚乙二醇和聚丙二醇以及它們的混合物。
非胃腸道給藥之製劑中所用的藥物學上可接受的載體包括含水載體、非含水載體、抗菌劑、等滲劑、緩衝劑、抗氧劑、局部麻醉劑、懸浮和分散劑、乳化劑、螯合劑、以及其它藥物學上可接受的物質。
含水載體的例子包括氯化鈉注射液、Ringers注射液、等滲葡萄糖注射液、無菌水注射液、葡萄糖和乳酸Ringers注射液。非含水的非胃腸道給藥載體包括植物來源的固定油、棉籽油、玉米油、芝麻油和花生油。必須在包裝於多份劑量容器中的非胃腸道給藥製劑中加入抑菌或抑真菌濃度的抗菌劑，所述抗菌劑包括苯酚或甲酚、汞製劑、苄醇、氯丁醇、對羥基苯甲酸甲酯和丙酯、乙基汞硫代水楊酸鈉、苄扎氯銨和苄索氯銨。等滲劑包括氯化鈉和葡萄糖。緩衝劑包括磷酸鹽和檸檬酸鹽。抗氧劑包括硫酸氫鈉。局部麻醉劑包括鹽酸普魯卡因。懸浮和分散劑包括羧甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮。乳化劑包括Polysorbate80(Tween 80)。金屬離子螯合劑包括EDTA。藥物載體還包括乙醇、聚乙二醇和丙二醇用於可與水混溶的載劑，以及氫氧化鈉、鹽酸、檸檬酸或乳酸用於pH調節。
藥物活性化合物的濃度可進行調節，以使注射劑可提供有效量的化合物，產生所希望的藥物效果。如本領域技術人員已知的，精確的劑量取決於患者或動物的年齡、體重和病況。
單元劑量的非胃腸道給藥製劑可包裝在安瓿、管形瓶或帶針頭的注射器中。如本領域技術人員已知的，所有用於非胃腸道給藥的製劑必須是無菌的。
例如，靜脈或動脈內輸注包含活性化合物的無菌水溶液是一種有效的給藥方式。其它實施方案是無菌水或油溶液或懸浮液，其中包括產生希望之藥物效果所必須的活性注射物質。
注射劑用於定點或全身給藥。通常情況下，配入治療有效劑量，其包含至少約0.1％w/w-90％w/w或更多、優選超過1％w/w的活性化合物。活性成分可一次性給藥，也可分成多個小劑量以一定間隔給藥。應理解的是，治療的精確劑量和時間隨治療組織而變化，並可使用已知的測試方案或者通過從體內或體外測試數據外推來經驗性地確定。還應注意的是，濃度和劑量值也可隨治療個體的年齡而變化。進一步應理解的是，對於任何患者，具體的給藥方案應根據個體需要以及給藥人或監視給藥製劑的人的專業判斷而隨時間來調整，而且在此所述濃度僅是示例性的，並不是用於限制本發明組合物的範圍或實際操作。
化合物可懸浮成微粒化或其它合適的形式，或者進行衍生化以形成更穩定的活性產物或產生前體藥物。所得混合物的形式取決於許多因素，包括給藥方式以及化合物在所選載體或載劑中的溶解度。有效濃度應足以緩解病症之症狀，並可經驗性地確定。
在許多情況下，與中性化合物相比，鈉鹽的溶液，包括鈉鹽和磷酸氫鈉具有。在含水媒質中，與中性化合物相比，這些鹽還具有更高的溶解度。在某些含水製劑中發現，鈉鹽與磷酸氫鈉鹽一樣穩定。3、凍乾粉末特別令人感興趣的是凍乾粉末，該粉末可復原以溶液、乳劑或其它混合物給藥。它們還可復原並配製成固體或凝膠製劑。
在具體實施方案中，提供了相對於中性磺醯胺製劑具有更高穩定性的磺醯胺化合物鹽、磷酸氫鈉或鈉鹽、特別是鈉鹽的製劑。具體而言，提供了作為無菌凍乾粉末的磺醯胺鈉鹽的製劑。發現這些粉末相對於中性磺醯胺製劑具有更高的穩定性。
無菌凍乾粉末是如下製備的將鈉鹽溶解在包含葡萄糖或其他合適賦形劑的磷酸鈉緩衝溶液中，無菌過濾該溶液，然後在本領域技術人員已知的標準條件下凍幹，產生所希望的製劑。簡而言之，凍乾粉末是如下製備的將右旋糖、山梨醇、果糖、玉米糖漿、木糖醇、甘油、葡萄糖、蔗糖或其他合適的試劑溶解在合適緩衝液中，上述物質的量約為1-20％，優選約為5-15％，所述緩衝液為例如檸檬酸鹽、磷酸鈉或鉀或者本領域技術人員已知的其他緩衝液，該緩衝液通常約為中性pH值。然後在優選在高於室溫、更優選在約30-35℃下將所選的磺醯胺鹽、優選鈉鹽加入至上述混合物中(約1g鹽/10-100g緩衝液，通常為約1g/30g)，並攪拌直至溶解。添加更多的緩衝液，由此稀釋所得的混合物(使所得鹽的濃度下降約10-50％，通常約為15-25％)。所得混合物無菌過濾，或者無菌處理以除去顆粒，並確保無菌，然後等分放入管形瓶中凍幹。每個管形瓶包含單個劑量(100-500mg，優選250mg)或者多份劑量的磺醯胺。凍乾粉末可儲存在適當的條件下，如約4℃-室溫。示例性步驟的細節見實施例。
該凍乾粉末用注射水復原則可提供用於非胃腸道給藥磺醯胺鈉鹽的製劑。對於復原，每ml無菌水或其他合適載體中加入約1-50mg、優選5-35mg、更優選約9-30mg。精確的量取決於所治療的病症和所選的化合物。此量可經驗性地確定。
在一個實施方案中，製劑包含凍幹固體，其包含一種或多種式I之磺醯胺化合物的一種或多種鹽，優選磷酸氫鈉或鈉鹽，更優選鈉鹽，其還包含一種或多種以下物質緩衝劑，如磷酸鈉或鉀、檸檬酸鹽；增溶劑，如LABRASOL、DMSO、二(三甲基甲矽烷基)乙醯胺、乙醇、丙二醇(PG)、或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)；以及糖，如山梨醇或葡萄糖。
在更優選的實施方案中，製劑包含一種或多種式I之磺醯胺化合物的一種或多種鹽，優選磷酸氫鈉或鈉鹽，更優選鈉鹽；緩衝劑，如磷酸鈉或鉀、或檸檬酸鹽；以及糖，如山梨醇或葡萄糖。
在最優選的實施方案中，製劑包含一種或多種式I之磺醯胺化合物的一種或多種鈉鹽；磷酸鈉緩衝劑；和葡萄糖。4、局部給藥局部給藥可如以上定點和全身給藥來製備。所得混合物可為溶液、混懸液、乳液等，並可配製成乳膏劑、凝膠劑、軟膏劑、乳膠、溶液劑、甘香酒劑、洗液劑、混懸劑、酊劑、糊劑、泡沫劑、氣霧劑、灌注劑、噴霧劑、栓劑、繃帶、藥貼或者任何適合於局部給藥的其他劑型。
本發明化合物的鈉鹽及其他衍生物可成型為局部給藥的氣霧劑，如吸入劑(參見例如第4,044,126、4,414,209和4,364,923號美國專利，它們描述了用於給藥治療炎性疾病、特別是哮喘之甾體藥物的氣霧劑)。這些向呼吸道給藥的製劑可為用於噴霧器的氣霧劑或溶液，或者為用於吸入的微細粉末，活性物質可單獨使用或者與惰性載體如乳糖組合使用。在此情況下，製劑中顆粒的粒徑小於50微米，優選小於10微米。
化合物的鈉鹽可配製成用於定點或局部給藥，例如局部用於皮膚和黏膜，如眼中，為凝膠劑、乳膏劑和洗液劑，並可用於眼或者腦池內或脊柱內。局部給藥還包括透皮給藥，以及向眼或黏膜給藥，或用於吸入治療。也可鼻腔給藥單獨的活性化合物溶液或者與其他藥物學上可接受的賦形劑組合給藥。
這些溶液、特別是那些用於眼科的溶液，可用適當的鹽配製成0.01-10％的等滲溶液，pH值約為5-7。5、製成品最後，本化合物的衍生物，特別是鹽、酸、酯和前體藥物，優選鈉鹽，可包裝成製成品，其中含包裝材料，含在包裝材料中的本文所提供可有效拮抗內皮肽效果、改善內皮肽所調節的病變的症狀、或抑制內皮肽與ET受體結合、IC50低於10μM的化合物的鹽、酸、酯和前體藥物、優選鈉鹽，以及說明該化合物或其鹽可用於拮抗內皮肽效果、治療內皮肽所調節的病變或抑制內皮肽與ET受體結合的標籤。6、用於其他給藥途徑的製劑根據所治療的病症，其他給藥途徑，如局部給藥、透皮藥貼、直腸給藥，也在本發明範圍之內。
例如，直腸給藥的藥物劑型是具有全身作用的直腸栓劑、膠囊和片劑。在此所用的直腸栓劑是指插入在直腸中的固體物體，該物體可在體溫下熔化或軟化，釋放一種或多種藥理或治療活性成分。直腸栓劑中所用的藥物學上可接受的物質是基質或載體以及提高熔點的試劑。基質的例子包括可可脂(可可油)、甘油-明膠、碳酯聚乙二醇、(聚氧乙二醇)以及甘油的單、二和三脂肪酸酯的混合物。提高栓劑熔點的栓劑包括鯨蠟和蜂蠟。直腸栓劑可通過壓縮或模塑法製備。直腸栓劑的通常重量為約2-3g。
直腸給藥的片劑和膠囊可使用與口服給藥之製劑相同的藥物學上可接受的物質和方法來製造。
下列實施例僅說明本發明，並未限制本發明的範圍。
實施例1N-(2-乙醯基-4，6-二甲基苯基)-3-{[(3，4-二甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩羧醯胺步驟1製備化合物1 在配有磁攪拌棒的250ml圓底燒瓶中加入20.0g的5-氨基-3，4-二甲基異惡唑、50ml的吡啶、以及2.0g(催化量)的二甲基氨基吡啶。在冰浴中冷卻該混合物，同時分批添加21.5g的2-羧甲基-3-噻吩磺醯氯。密封該燒瓶，撤掉冰浴，然後在室溫下攪拌反應物過夜。通過旋轉蒸發除去絕大部分的吡啶，殘留物在乙酸乙酯和2 N鹽酸之間分配。分離各層，並用乙酸乙酯(2×)萃取含水層。合併的萃取液用稀鹽酸(2×)、鹽水(2×)洗滌，然後在硫酸鎂上乾燥。過濾並旋轉蒸發濃縮，得到23.2g油狀的化合物1。步驟2製備化合物2 在1L配有磁攪拌棒和滴液漏鬥的圓底燒瓶中加入23.1g的化合物1、500ml的二氯甲烷、和28.4g的二異丙基胺。在冰浴中冷卻反應物，然後滴加6.0ml的溴甲基甲基醚。撤掉冰浴，然後在室溫下攪拌反應物過夜。此時，添加200ml的水，並攪拌反應物30分鐘。分離各層，並用二氯甲烷萃取含水層(2×)。合併的有機層用0.5N鹽酸、水、飽和碳酸氫鈉水溶液、鹽水洗滌，然後在硫酸鎂上乾燥。過濾並旋轉蒸發，得到一油狀物，其進一步通過矽膠色譜法用25-30％乙酸乙酯/己烷作為洗脫劑進行純制，得到21.5g油狀的化合物2。步驟2B製備化合物3 在500ml配有磁攪拌棒的圓底燒瓶中加入21.4g的化合物2、120ml的四氫呋喃、以及120ml的1N氫氧化鈉。快速攪拌反應物，直至反應完全(約3-4個小時)。通過旋轉蒸發除去絕大多數的四氫呋喃，然後將殘留物與50ml的水混合。該混合物用130ml的1N鹽酸進行酸化，然後用200ml的乙酸乙酯萃取(×2)。合併的萃取液用水(50ml)、鹽水(50ml)洗滌，最後用硫酸鎂乾燥。過濾並旋轉蒸發濃縮後，得到20.1g黃色油狀的化合物3，其在放置時固化。步驟2C製備化合物4 在1L配有磁攪拌棒和滴液漏鬥的圓底燒瓶中加入19.7g的化合物3、200ml的二氯甲烷、以及5滴吡啶。滴加128ml草醯氯在100ml二氯甲烷中的溶液。將滴液漏鬥換成回流冷凝器，並將反應物加熱至回流3小時，之後通過旋轉蒸發進行濃縮，得到20.9g棕色固體狀的化合物4。該物質未經純制直接用於步驟3中。步驟3製備化合物6 在1L配有磁攪拌棒和滴液漏鬥的圓底燒瓶中加入18.5g的2-乙醯基-4，6-二甲基苯胺(5)和150ml的二氯甲烷。向其中滴加20.7g的化合物4在350ml二氯甲烷中的溶液。在室溫下攪拌反應物3小時，然後蒸發濃縮。向殘留物中添加20ml的乙醚，並過濾該混合物。濾餅用3×100ml的乙醚洗滌。合併的濾液用3×100ml的1N鹽酸洗滌，然後分別用100ml的水、飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。溶液用硫酸鎂乾燥，過濾，然後旋轉蒸發濃縮，產生半晶體材料。該材料用200ml的乙醚研磨，得到23.7g的化合物6，其為白色固體。步驟4A製備化合物7 在500ml配有磁攪拌棒和回流冷凝器的圓底燒瓶中加入23.7g的化合物6、180ml的甲醇、以及90ml的濃鹽酸。將混合物加熱回流4小時。停止加熱，然後攪拌混合物，並用冰浴冷卻。約30分鐘後，過濾混合物，濾餅用水和甲醇的混合物洗滌，得到18.3g的化合物7。該物質用乙酸乙酯/己烷重結晶，得到16.8g白色固體狀的物質mp 158-160℃。步驟4B製備化合物7鈉鹽 將16.8g的化合物7溶解在800ml的乙酸乙酯和200ml的四氫呋喃中，並向其中添加100ml的飽和碳酸氫鈉水溶液。分離各層，並用額外的2×100ml飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌有機層。合併的碳酸氫鈉洗滌液重新用乙酸乙酯萃取，合併的有機溶液在硫酸鎂上乾燥，過濾，然後旋轉蒸發濃縮，得到一泡沫狀物質。該物質溶解在300ml的水中，然後過濾所得的溶液並凍幹，得到15.5g的化合物7鈉鹽，其為白色固體。
實施例2N-(2-氰基-3，4，6-三甲基苯基)-3-{[(3，4-二甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩羧醯胺 按照實施例1的方法製備N-(2-氰基-3，4，6-三甲基苯基)-3-{[(3，4-二甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩羧醯胺，但在步驟3中用2-氰基-3，4，6-三甲基苯胺(8)替換2-乙醯基-4，6-二甲基苯胺。
實施例3製備化合物163-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(3，4，6-三甲基-2-丙醯基苯基)-2-噻吩羧醯胺步驟1製備化合物103-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩甲酸 在500ml圓底燒瓶中加入46.5g的3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩甲酸甲酯，然後添加250ml的1N氫氧化鈉溶液。攪拌混合物，直至不存在任何起始物。用2N鹽酸酸化反應溶液，然後用乙酸乙酯(3×100ml)萃取。合併的萃取物乾燥(硫酸鎂)，過濾並旋轉蒸發濃縮，得到42.5g的化合物10固體。步驟2A製備3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-甲氧基甲基-2-噻吩甲酸甲氧基甲基酯
在2L配有磁攪拌棒和滴液漏鬥的圓底燒瓶中加入42.5g的化合物10、500ml的二氯甲烷和40.1g的二異丙基乙基胺。用冰浴冷卻反應混合物，然後滴加21.5ml的溴甲基甲基醚。車掉冰浴，然後在室溫下攪拌反應物過夜。添加200ml的水，並攪拌反應混合物30分鐘。分離各層，並用100ml二氯甲烷萃取含水層。合併有機層並分別用50ml的0.5N鹽酸、水、飽和碳酸氫鈉水溶液、鹽水洗滌，最後用硫酸鎂乾燥。混合物過濾，並旋轉蒸發濾液，得到一油狀物，其進一步通過矽膠色譜法用25-30％乙酸乙酯/己烷作為洗脫劑進行純制，得到38.1g油狀的化合物11。
步驟2B製備化合物12 在1L配有磁攪拌棒的圓底燒瓶中加入38g的化合物11、250ml的四氫呋喃、以及250ml的1N氫氧化鈉。快速攪拌反應物，直至範圍完全(約4小時)。通過旋轉蒸發除去絕大部分的四氫呋喃，然後使殘留物與50ml的水混合。該溶液通過添加260ml的1N鹽酸進行酸化。用200ml的乙酸乙酯萃取該混合物兩次。合併的萃取液分別用50ml的水和鹽水洗滌，然後用硫酸鎂乾燥。過濾並旋轉蒸發濃縮，得到30.8g黃色油狀的化合物12，其在放置時固化。步驟2C製備化合物13 在1L配有磁攪拌棒和滴液漏鬥的圓底燒瓶中加入30g的化合物12、20ml的二氯甲烷、以及5滴吡啶。添加29.2g的亞硫醯氯在200ml二氯甲烷中的溶液。將滴液漏鬥換成回流冷凝器，然後將反應物加熱回流4小時。通過旋轉蒸發來濃縮反應物，得到31.4g的化合物13，其為棕色固體。該物質未經進一步的純制即直接用於步驟3中。步驟3製備化合物15 在1L配有磁攪拌棒和滴液漏鬥的圓底燒瓶中加入19.8g的化合物(14)和150ml的二氯甲烷。向其中滴加20.0g的化合物13在350ml二氯甲烷中的溶液。反應物在室溫下攪拌3小時，然後旋轉蒸發濃縮。向殘留物中添加200ml的乙醚，然後過濾該混合物。濾餅用100ml的乙醚、2×200ml的熱乙酸乙酯洗滌。合併的洗滌液用3×100ml的1N鹽酸、分別為100ml的水、飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。溶液用硫酸鎂乾燥，過濾，然後旋轉蒸發濃縮，得到半晶體物質。該物質用100ml的乙醚研磨，得到20.1g的化合物15，其為白色固體。步驟4製備化合物16 按照實施例1的方法，將步驟4A的化合物15轉化為化合物16，其為固體，mp 166-170℃。
實施例4製備化合物183-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-[2-(1-羥基乙基)-4，6-二甲基苯基]-2-噻吩羧醯胺 在100mg的化合物17(鈉鹽)於水中的溶液內添加100mg的硼氫化鈉。3小時後，添加另外的100mg硼氫化鈉，然後在室溫下攪拌溶液過夜。反應物與過量的飽和氯化鈉溶液混合，用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。萃取液用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，然後蒸發，得到化合物18(鈉鹽)，其為固體，mp 147-154℃。
實施例5製備化合物203-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-{2-[(二甲基氨基)羰基]-4，6-二甲基苯基}-2-噻吩羧醯胺 根據實施例3的方法製備化合物20，但在步驟3中用2-[(二甲基氨基)羰基]-4，6-二甲基苯胺(19)替換化合物12。所得的化合物20為白色固體。
實施例6製備化合物223-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-{2，4-二甲基-6-[(甲氧基)ethanimidoyl]苯基}-2-噻吩羧醯胺 使化合物17與甲氧基胺(21)在乙醇溶液中反應，得到白色固體的化合物22，mp 140-145℃。
實施例7製備化合物243-{[(3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩基)羰基]氨基}-2，4，6-三甲基苯基-N，N-二甲基氨基磺酸酯 在700mg的3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-{3-羥基-2，4，6-三甲基苯基}-2-噻吩羧醯胺(23)於15ml二甲基甲醯胺中的冰冷溶液內加入247mg的叔丁醇鉀。短時間後，添加317mg的二甲基氨基磺醯氯。判斷反應完全時，用水稀釋，用1N鹽酸酸化。該混合物用乙酸乙酯(3×30ml)萃取，合併的萃取液乾燥(硫酸鎂)、過濾，然後蒸發，得到白色固體狀的化合物24；mp 169-174℃。
實施例8製備化合物263-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-{3-[(環丙基甲基)氧基]-2，4，6-三甲基苯基}-2-噻吩羧醯胺 在700mg的3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-{3-羥基-2，4，6-三甲基苯基}-2-噻吩羧醯胺(23)於15ml二甲基甲醯胺中的冰冷溶液內加入247mg的叔丁醇鉀。短時間後，添加135mg的環丙基甲基溴(25)。判斷反應完全時，用水稀釋，用1N鹽酸酸化。該混合物用乙酸乙酯(3×30ml)萃取，合併的萃取液乾燥(硫酸鎂)、過濾，然後蒸發，得到白色固體狀的化合物26；mp 155-158℃。
實施例9製備化合物283-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(2，4，6-三甲基-5-嘧啶基)-2-噻吩羧醯胺 根據實施例3的方法製備化合物28，但在步驟3中用5-氨基-2，4，6-三甲基嘧啶(27)替換化合物12。所得的化合物28為白色固體；mp 170-175℃。
實施例10製備化合物30N-(2-乙醯基-3，4，6-三甲基苯基)-3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩羧醯胺 根據實施例3的方法製備化合物30，但在步驟3中用2-乙醯基-3，4，6-三甲基苯胺(29)替換化合物12。所得的化合物30為白色固體；mp 223-225℃。
實施例11製備化合物323-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(2-氰基-3，4，6-三甲基苯基)-2-噻吩羧醯胺 根據實施例3的方法製備化合物32，但在步驟3中用2-氰基-3，4，6-三甲基苯胺(31)替換化合物12。所得的化合物32為白色固體；mp 218-220℃。
實施例12製備化合物34N-(2-氯-4，6-二甲基苯基)-3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩羧醯胺 根據實施例3的方法製備化合物34，但在步驟3中用2-氯-4，6-二甲基苯胺(33)替換化合物12。所得的化合物34為白色固體；mp 174-176℃。
實施例13製備化合物363-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(4，6-二乙醯基-3-羥基-2-丙基苯基)-2-噻吩羧醯胺 根據實施例3的方法製備化合物36，但在步驟3中用4，6-二乙醯基-3-羥基-2-丙基苯胺(35)替換化合物12。所得的化合物36為白色固體；mp 163-167℃。
實施例14製備化合物383-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(2，4-二甲基-6-[2-(甲基磺醯基)乙醯基]苯基)-2-噻吩羧醯胺 根據實施例3的方法製備中間化合物53，但在步驟3中用2，4-二甲基-6-(2-氯乙醯基)苯胺(37)替換化合物12。
在室溫下攪拌400mg的化合物53和1.2g的甲磺酸鈉在10ml二甲基甲醯胺中的溶液。當判斷反應完全時，反應物用水稀釋，用2N鹽酸酸化，並用乙酸乙酯(3×30ml)萃取。合併萃取液，乾燥，然後旋轉蒸發濃縮，得到化合物38，其為白色固體；mp172-175℃。
實施例15製備化合物403-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(2，4-二甲基-6-{[甲基(2，2-二甲基丙基)氨基]羰基}苯基)-2-噻吩羧醯胺 根據實施例3的方法製備化合物40，但在步驟3中用2-{[甲基-(2，2-二甲基丙基)氨基]羰基}-4，6-二甲基苯胺(39)替換化合物12。所得的化合物40為白色固體；mp 174-176℃。
實施例16製備化合物423-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-[2，4-二甲基-6-(甲基磺醯基)苯基]-2-噻吩羧醯胺 根據實施例3的方法製備化合物42，但在步驟3中用2，4-二甲基-6-(甲基磺醯基)苯胺(41)替換化合物12。所得的化合物40為白色固體；mp 208-210℃。
實施例17製備化合物443-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-[2，4-二甲基-6-(1，3-惡唑-2-基)苯基]-2-噻吩羧醯胺 根據實施例3的方法製備化合物44，但在步驟3中用2，4-二甲基-6-(1，3-惡唑-2-基)苯胺(43)替換化合物12。所得的化合物44為白色固體；mp 176-178℃。
實施例18製備化合物463-{[(4-氯-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-[2-(2-丙基磺醯基)-4，6-二甲基苯基]-2-噻吩羧醯胺 根據實施例3的方法製備化合物46，但在步驟3中用2-(2-丙基磺醯基)-4，6-二甲基苯胺(45)替換化合物12。所得的化合物46為白色固體；mp 190-192℃。
實施例19製備化合物483-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-[2，4-二甲基-6-(丙基磺醯基)苯基]-2-噻吩羧醯胺 根據實施例3的方法製備化合物48，但在步驟3中用2，4-二甲基-6-(丙基磺醯基)苯胺(47)替換化合物12。所得的化合物40為白色固體；mp 152-155℃。
實施例20製備化合物503-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-[2-乙基-4，6-二甲基苯基]-2-噻吩羧醯胺 根據實施例3的方法製備化合物50，但在步驟3中用2-乙基-4，6-二甲基苯胺(49)替換化合物12。所得的化合物50為白色固體；mp 152-154℃。
實施例21製備化合物523-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-[2，6-二甲基-4-(1，3-惡唑-2-基)苯基]-2-噻吩羧醯胺 根據實施例3的方法製備化合物52，但在步驟3中用2，6-二甲基-4-(1，3-惡唑-2-基)苯胺(51)替換化合物12。所得的化合物52為白色固體；mp 205-207℃。
實施例22磺醯胺鈉鹽的製劑A、靜脈給藥的磺醯胺鈉鹽製劑在4升有標度的量筒中加入3200ml無菌注射用水(USP)，在該無菌水中加入七水磷酸氫二鈉(USP，21.44g)，攪拌該混合物5分鐘，或者直至固體完全溶解，加入磷酸二氫鈉(USP，11.04g)，攪拌混合物直至固體完全溶解，將溶液稀釋至4.0升並攪拌，由此製得緩衝液。將3000g製得的磷酸鹽緩衝液加入至8升燒杯中。加入葡萄糖(USP，200.0g)，並將混合物在水浴中加熱至30-35℃，同時攪拌直至形成溶液。加入混有賦形劑的磺醯胺鈉鹽(100.0g)。攪拌該混合物至少10分鐘或者直至形成溶液。待鈉鹽溶解後從水浴中取出溶液。用磷酸鹽緩衝液將該溶液稀釋至4000g，並攪拌5分鐘。使用無菌0.22微米之預製孔徑的DuraporeMillipak 200過濾器無菌過濾該溶液。經過濾的溶液裝入無菌管形瓶中，並在標準條件下凍幹。密封該管形瓶。凍乾產物然後用9.4ml或19.4ml的注射用水復原，形成的最終濃度分別為25mg/ml或12.5mg/ml。B、用於口服給藥的磺醯胺鈉鹽製劑使用本領域技術人員已知的方法製備這些製劑(例如參見Ansel，Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms(第4版)1985(LeaFebiger))。通常情況下，用溼法或幹法使各成分成粒，然後壓縮，由此來製備片劑。另外，組合的成分可通過直接壓縮來形成片劑。在製備膠囊時，將磺醯胺鈉鹽、賦形劑(稀釋劑)、粘合劑、崩解劑和潤滑劑直接填入膠囊殼中。在這些製劑中活性成分和惰性成分的合適量可通過本領域技術人員已知的方法來經驗性地確定。通常情況下，活性成分的量(即磺醯胺鈉鹽)應足以產生治療有效劑量的活性成分。治療有效劑量可通過在已知的體內和體外系統中測試化合物(例如參見Ishikawa等人的第5,114,918號美國專利；EP A10436189，BANYUPHARMACEUTICALCO.，LTD.(1991年10月7日)；Borges等人(1989)Eur.J.Pharm.165223-230；Filep等人(1991)Biochem.Biophys.Res.Commun.177171-176)、然後再由此外推用於人的劑量來經驗性地確定。
實施例23具有內皮肽拮抗劑和/或激動劑活性之化合物的鑑別法具有內皮肽拮抗劑潛力的化合物通過其與125I標記之ET-1在經分離之細胞膜上競爭結合人ETA受體或ETB受體的能力來鑑別。試驗化合物作為內皮肽之生物組織反應的拮抗劑或激動劑之有效性亦可通過測定其對分離之老鼠胸主動脈環節受內皮肽所誘發之收縮的影響來評估。化合物作為ETB受體之拮抗劑或激動劑的能力可由試驗化合物抑制內皮肽-1誘發所培養的牛主動脈內皮細胞釋放前列環素的能力來決定。A、抑制內皮肽結合作用-結合試驗#1抑制與ETA受體結合的作用TE671細胞(ATCC No.HTB 139)表達ETA受體。此等細胞於T-175燒瓶中生長至融合為止。自多數重複的燒瓶中刮下細胞匯集在一起，於190×g下離心10分鐘。使用Tenbroeck均化器，將細胞懸浮於含10mMEDTA之磷酸鹽緩衝生理鹽水(PBS)中。懸浮液於4℃、57800×g下離心15分鐘，沉澱物再懸浮於5ml緩衝液A(5mM HEPES緩衝液，pH7.4，包含抑蛋白酶肽(100KIU/ml))，然後冷凍及解凍一次。添加5ml緩衝液B(5mM HEPES緩衝液，pH7.4，含10mM MnCl2和0.001％脫氧核糖核酸酶I)，反轉懸浮液混合，然後於37℃下培養30分鐘。如上所述，混合物於57800×g下離心，沉澱物以緩衝液A洗滌2次後，再懸浮於緩衝液C(30mM HEPES緩衝液，pH7.4，含抑蛋白酶肽(100KIU/ml))，蛋白質終濃度為2mg/ml，保存在-70℃下，直到使用時為止。
以結合作用緩衝液(30mM HEPES緩衝液，pH7.4，含150mM NaCl、5mM MgCl2、0.5％桿菌肽)稀釋膜懸浮液至8μg/50μl的濃度。添加125I-內皮肽-1(3000cpm，50ml)至50μl之(A)內皮肽-1(用於非專一性結合作用)，終濃度為80nM；(B)結合作用緩衝液(用於總結合作用)；或(C)試驗化合物(終濃度1nM至100μM)中。取包含8μg膜蛋白質的膜懸浮液(50μl)加至各(A)、(B)或(C)中。振蕩混合物，於4℃下培養16-18小時，再於4℃及2500×g下離心25分鐘。或者，於24℃下培養。當於24℃下培養時，IC50濃度比在4℃下培養時高2至10倍。因此，當比較本文所提供化合物之間的IC50濃度時，必須注意此點。
傾析包含未結合之放射活性的上清液，取沉澱物於Genesys多孔式γ計數器上計數。根據下列公式計算抑制結合作用的程度(D)%D=100-(C)-(A)(B)-(A)100]]>每項試驗通常進行三次。B、抑制內皮肽結合作用-結合試驗#2抑制與ETB受體結合的作用以編碼ETB受體的DNA轉染COS7細胞。所產生的可表達人ETB受體之細胞於T-150燒瓶中生長至融合。依上述方法製備膜。使用膜製劑，以結合作用緩衝液稀釋至1μg/50μl的濃度，依上述進行結合作用分析。
簡言之，由上述已接受編碼ETB受體之DNA轉染並於其表面上表達人ETB受體的COS7細胞於T-175燒瓶中生長至融合。自多數重覆的燒瓶中刮下細胞匯集在一起，於190×g離心10分鐘。使用Tenbroeck均化器，使細胞懸浮於含10mM EDTA的磷酸鹽緩衝生理鹽(PBS)。懸浮液於4℃、57800×g下離心15分鐘，沉澱物再浮於5ml緩衝液A(5mMHEPES緩衝液，pH7.4，含抑蛋白酶(100KIU/ml))，然後冷凍及解凍一次。添加5ml緩衝液B(5mM HEPES緩衝液，pH7.4，含10mM MnCl2和0.001％脫氧核糖核酸酶I)，反轉懸浮液混合，然後於37℃下培養30分鐘。混合物依上述，於57800×g下離心，沉澱物以緩衝液A洗滌2次後，再懸浮於緩衝液C(30mM HEPES緩衝液，pH7.4，含抑蛋白酶肽(100KIU/ml))，蛋白質終濃度為2mg/ml。
依上述，使用稀釋至1μg/50μl結合作用緩衝液的膜製劑，進行結合作用分析法。C、對抗內皮肽誘發分離之老鼠胸主動脈環和縮之活性的試驗試驗化合物作為內皮肽之生物組織反應的拮抗劑或激動劑的有效性分析法是通過測定其對內皮肽誘發分離之老鼠胸主動脈環之收縮作用的影響(見例如Borges等人(1981)，Eur.J.Pharmacol.165223-230)或測定其單獨添加時使組織收縮的能力來估測的。
將試驗化合物製成100μM保存液。若必須溶解，先使化合物溶於最DMSO中，以150mM NaCl稀釋。由於DMSO可使主動脈環放鬆，因此測試含有不同濃度DMSO的對照組溶液。
自成鼠主動脈上切下胸主動脈部分，小心剝下內皮，切成3毫米環節。環節在2g預負載量下懸浮於10ml器官浴中。器官浴中填充以95％O2和5％CO2氣體混合物飽和的Krebs′-Henseleit溶液(118mM NaCl、4.7mM KCl、1.2mM MgSO4、1.2mM KH2PO4、25mM NaHCO3、2.5mMCaCl2、10mM D-葡萄糖)。
作為內皮肽所誘發胸主動脈環收縮之拮抗劑的活性與作為內皮肽與內皮肽受體結合作用之抑制劑的活性之間有相關性。pA2為IC50對數值的線性函數。D、對ETB受體具有激動劑和/或拮抗劑活性之化合物的鑑別法1、刺激前列環素釋放由於內皮肽-1刺激經培養之牛主動脈內皮細胞釋放前列環素，因此大致上依Filep等人(1991)Biochem.Biophys.Res.Commun.177171-176所述測定6-酮基PGF1α，由化合物抑制內皮肽-1誘發此等內皮肽細胞釋放前列環素的能力，鑑定具有激動劑或拮抗劑活性的化合物。牛主動脈細胞來自經膠原處理的牛主動脈，接種至培養皿中，於補充已熱失活的15％胎牛血清和L-谷醯胺(2mM)、青黴素、鏈黴素和fungizone的199培養基中生長，並進行培養至少4次。細胞再接種於相同培養基的六孔板中。待細胞達融合後，於分析前8小時更換培養基。細胞再a)與培養基單獨培養，b)與含內皮肽-1(10nM)的培養基培養，c)與試驗化合物單獨培養，及d)與試驗化合物+內皮肽-1(10nM)培養。
培養15分鐘後，取出各孔中的培養基，由直接免疫分析法測定6-酮基PGF1α濃度，由接受內皮肽-1處理之細胞釋放的6-酮基PGF1α量減去接受相同處理但未受內皮肽-1處理之細胞釋放的量，由其差值計算前列環素產量。會刺激6-酮基PGF1α釋放的化合物具有激動劑活性，而那些抑制內皮肽-1、6-酮基PGF1α釋放的化合物則具有拮抗劑活性。2、抑制沙洛弗毒素6c所誘發的收縮作用沙洛弗毒素6c為專一性ETB拮抗劑，使老鼠胃底剝條收縮。採用試驗化合物抑制此沙洛弗毒素6c所誘發之老鼠胃底剝條收縮的有效性，作為ETB拮抗劑活性的測定值。取2條經分離之老鼠胃底剝條，在1g負載量下懸浮於器官浴中，器官浴填充包含10μM環(D-Asp-Pro-D-Val-Leu-D-Trp)、5μM吲哚美辛並以95％O2/5％CO2氣體混合物飽和的Kreb’s-Henseleit溶液(BQ-123；參見Ishikawa等人的第5,114,918號美國專利)。在等量下測定張力的變化，並採用連接於轉換器的GrassPolygraph記錄。以累進式添加沙洛弗毒素6c至其中一個剝條上，同時取第二個剝條先與試驗化合物預培養15分鐘，然後再添加累進劑量的沙洛弗毒素6c。檢查試驗化合物對沙洛弗毒素6c的濃度一反應曲線的影響。E、以去氧皮質甾酮乙酸鹽(DOCA)高血壓鼠模型於活體內分析特定化合物的活性於去氧皮質甾酮乙酸鹽(DOCA)高血壓鼠模型中測試本文所揭示的幾種特定化合物。進行此等試驗時，根據Ommsbee等人(1973)，the J.Pharm.Sci.62255-257的方法，製備含47mg DOCA的矽橡膠MDX4-4210彈性體植入物。簡言之，將DOCA加入矽橡膠植入物中，使之持續釋放。製備植入物時，使DOCA加入未聚合的矽橡膠中，添加催化劑，然後將混合物塑成半圓柱形。
取Sprague Dawley鼠(7至8周大)，在氯胺酮麻醉下進行單側腎切除術，將DOCA-植入物在動物左腹背面上。使老鼠恢復3周。恢復期間，可自由取用正常老鼠飼料，及改用0.9％NaCl飲用溶液替代飲水。老鼠在3周內發展出高血壓。
所有動物均在手術後21天至30天之間用於試驗。此等動物的平均動脈血壓在165-200毫米汞柱之範圍內。
實驗當天，在甲己炔巴比妥(brevital)麻醉下，將導管插入右股動脈中用於測量血壓，及插入右股靜脈中用於給藥特定化合物。動物置入柵欄內，使之恢復至少60分鐘，或直到記錄到平穩的平均動脈血壓為止。此時，經靜脈內以60分鐘輸液，或經口導管給予特定化合物或對照組載劑。再連續測量血壓10小時。F、在清醒之自主性阻斷的大鼠之活體內活性分析模式中測定特定化合物經靜脈內給藥對ET-1所誘發之加壓素反應的影響麻醉(甲己炔巴比妥50mg/kg，IP)雄Sprague Dawley鼠(250-450g)，將導管插入股動脈中測定平均動脈壓(MAP)，插入股靜脈的導管則供經靜脈內給藥。動物置入柵欄內，使之恢復意識。30分鐘後，給藥自主性阻斷劑(阿託品甲基硝酸鹽，3mg/kg，IV，隨後給藥心得安(propranalol)，2mg/kg，IV)。1小時後，動物接受大丸劑載劑注射(0.5ml)，30分鐘後，經靜脈內大丸劑給藥ET-1(對照組，1μg/kg)。由接受此等處理中恢復後，經靜脈內大丸劑給藥試驗化合物(0.5ml)，30分鐘後再給予ET-1。結果以給藥試驗化合物後對ET-1誘發之加壓素反應與接受對照組ET-1處理所誘發之加壓素反應比較得到的抑制作用百分比表示。有時候在給藥試驗化合物90分鐘後才進行第三次ET-1處理。G、結果1、體外前述實施例化合物對ETA和ETB受體的各IC50均已測定。幾乎所有化合物對ETA及ETB受體之一或二者之IC50均低於10μM。許多化合物的IC50低於10μM，其他化合物的IC50低於約1μM，有些化合物的IC50低於約0.1μM。許多化合物對ETA受體的IC50遠低於(10至100倍或更多)對ETB受體，因此對ETA受體具選擇性。其他化合物則對ETB受體具選擇性。2、活體內均已在高血壓鼠模型中測試幾種特定化合物，如N-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)-2-(3-羥基-2，4，6-三甲基苯基氨基羰基)噻吩-3-磺醯胺，且可有效降低血壓。
實施例24評估化合物的毒理學性質的實驗A、細胞色素P450酶實驗使用由Gentest Corporation研製的人重組細胞色素P450酶實驗來測定不同的人細胞色素P450酶(2C9、2C19、3A4)50％抑制底物代謝時所需要的本發明化合物濃度(IC50)的體外實驗。這些實驗包括GentestSupersomesTM(特異性人細胞色素P450酶，與P450還原酶和細胞色素b5共同表達)、NADPH再生體系、底物以及本發明化合物的濃度範圍。螢光產物是這些實驗的測量終點。IC50是使用4個參數的對數等式計算的，其中底部為0％抑制，而頂部為100％抑制(當n大於1時，數值是平均IC50±SD)。i總的實驗條件實驗是在96孔微量滴定板中進行的，其中使用Gentest Corporation研製的螢光計。每排的12個孔用於一個抑制曲線。第1-8孔包含測試化合物一系列1∶3的稀釋液。第9-12孔不包含抑制劑，而第11和12孔是用於背景螢光的空白(在酶之前添加的停止溶液)。所有的濃度曲線都進行雙份。在與溫熱的反應混合物中添加酶和底物，由此開始進行溫育。在特定的溫育時間後，通過添加停止溶液使反應停止。使用螢光板讀數器測量螢光，由此測定每個孔的代謝產物。每個酶的詳細實驗程序如下所示。通常參見用於測量細胞色素P450抑制作用的高輸出法(GentestCorporation，Technical Bulletin)；Crespi，C.L.，Miller，V.P.，和Penman，B.W.(1997)Adv.Pharm.437-35。ii、CYP2C9實驗在37℃下溫育0.2ml/孔的反應混合物45分鐘，該混合物在25mM磷酸鉀(pH7.4)中包含3pmol的CYP2C9(P258)、1.3mM NADP+、3.3mM的葡萄糖-6-磷酸、3.3mM的氯化鎂、0.4U/ml的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶、以及75μM的甲氧基-4-三氟甲基香豆素。將標準的CYP2C9抑制劑--磺胺苯吡唑由最高濃度10μM進行系列稀釋，並用作陽性對照。測試化合物由最高濃度100μM進行系列稀釋。溫育後，通過添加75μl的停止溶液(80％乙腈/20％0.5M Tris鹼)使反應停止，然後使用Spectra Fluor(Tecan)或者Cytoflour 2350(Millipore)螢光板讀數器測量每個孔的螢光。分別使用409nm的激發波長(30nm帶寬)和535nm的放射波長(25nm帶寬)，或者400nm的激發波長(30nm帶寬)和460nm的放射波長(40nm帶寬)。iii、CYP2C19實驗在37℃下溫育0.2ml/孔的反應混合物45分鐘，該混合物在50mM磷酸鉀(pH7.4)中包含1pmol的CYP2C19(P258)、1.3mM NADP+、3.3mM的葡萄糖-6-磷酸、3.3mM的氯化鎂、0.4U/ml的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶、以及25μM的3-氰基-7-乙氧基香豆素。將標準的CYP2C19抑制劑--反苯環苯丙胺由最高濃度500μM進行系列稀釋，並用作陽性對照。測試化合物由最高濃度100μM進行系列稀釋。溫育後，通過添加75μl的停止溶液(80％乙腈/20％0.5M Tris鹼)使反應停止，然後使用Spectra Fluor(Tecan)螢光板讀數器在1小時內測量每個孔的螢光。使用409nm的激發波長(30nm帶寬)和465nm的放射波長(25nm帶寬)。iv、CYP3A4實驗在37℃下溫育0.2ml/孔的反應混合物45分鐘，該混合物在200mM磷酸鉀(pH7.4)中包含4pmol的CYP3A4(P258)、1.3mM NADP+、3.3mM的葡萄糖-6-磷酸、3.3mM的氯化鎂、0.4U/ml的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶、0.01％的pluronic F68以及50μM的試滷靈乙基醚。將標準的3A4抑制劑--酮康唑由最高濃度5μM進行系列稀釋，並用作陽性對照。測試化合物由最高濃度100μM進行系列稀釋。溫育後，通過添加75μl的停止溶液(80％乙腈/20％0.5M Tris鹼)使反應停止，然後使用Spectra Fluor(Tecan)螢光板讀數器在1小時內測量每個孔的螢光。使用530nm的激發波長(30nm帶寬)和580nm的放射波長(4nm帶寬)。v、分析每個濃度的兩個孔的螢光值、沒有添加測試化合物的4個孔的螢光值(這是0％抑制)、以及「停止-空白」的4個孔(這些孔代表「背景」，因為在添加酶之前反應被停止)的螢光值針對每個化合物進行平均。
「％抑制」如下進行計算100-(每個螢光值的平均值-背景)×100/(0％抑制-背景)在Prism(GraphPad，Inc.)中建立濃度-％抑制曲線。使用「TopBottom Fixed」途徑分析數據。所用等式是Y-0+100/(1+10_((Log IC50-X)*HillSlope))其中X是濃度的對數，Y是應答(％抑制)，在0％開始，並向100％前進，具有S形狀。
該等式對於「四參數對數等式」。vi、結果測試化合物對不同CYP酶介導的代謝物形成的平均IC50值見表2所示。使用對於各分析的CYP已知的抑制劑(陽性對照)，實驗值是有效的。如果陽性對照的IC50值在CYP陽性對照的歷史平均值的1個標準偏差之內，則認為實驗對於表2中的內容是有效的。如果陽性對照的IC50值在1個標準偏差之外，則將該實驗排除。B、缺氧方案缺氧接觸(10.0±0.5％O2)是通過將大鼠放置在3301 Plexiglas手套箱(Manostat，Brooklyn，New York，USA)中實現的。間斷地由液氮儲存器中向該手套箱中添加氮氣。Baralyme(Allied Health Care Products，St.Louis，Missouri，USA)CO2洗滌器將CO2濃度保持低於0.2％。手套箱內的相對溼度用無水硫酸鈣保持低於70％。使用硼酸，將手套箱內的NH3濃度保持最低。參見Tilton等人(2000)Pulm.Pharm.Ther.1387-97。i、急性缺氧方案在初始實驗中，評估測試化合物對隨後暴露於急性缺氧環境90分鐘的大鼠的平均肺動脈壓(MPAP)的作用。在戊巴比妥鈉麻醉(50mg/kgip)下，對股動脈和靜脈進行插管，並用胸腔封閉技術通過右頸靜脈對肺動脈進行插管。所有插管都連接至聚乙烯(PE 20)管上，而且通過皮下埋入的不鏽鋼絲(直徑為0.018in)在頸的後側引到外面。2天後，通過股和肺動脈插管由連接在多種波描記器上的換能器記錄MPAP。一旦達到穩定的記錄曲線，就使清醒而且未受限制的大鼠接觸缺氧環境(10％O2，1atm)，並在90分鐘的時間內記錄缺氧對該參數的影響。在實驗設計中插入測試化合物防止方案(在10分鐘的時間內iv輸注5mg/kg，在開始缺氧前10分鐘停止)和測試化合物幹擾方案(在10分鐘的時間內iv輸注5mg/kg，在開始缺氧後50分鐘啟動)。ii、結果急性normobaric缺氧與MPAP的雙相(biphasic)增加有關在5分鐘內由19mm Hg的基線水平增加至24.5mm Hg，然後在接下來的10分鐘內下降至21mm Hg，接著在餘下來的缺氧時間內返回至約25mm Hg的峰值水平。當該組在實驗結束時重新回到室內空氣時，肺壓快速返回到基線值。如表2中所示，在低於已知內皮肽所需的劑量時，本發明的化合物對於抑制缺氧誘發的血管收縮是有效的。
由於一些修飾對本領域技術人員是顯而易見的，因此對本發明僅受所附的權利要求限制。
權利要求
1.以下式IV的化合物 或其藥物學上可接受的衍生物，其中X是S或-C(R3)＝C(R4)-；R1是滷素或低級烷基；R2是低級烷基；R3和R4獨立地選自於氫、滷素、氰基、氰基烷基、C(O)R41、烷基、鏈烯基、環烷基和芳基，或一起形成亞烷基或亞烯基，其中R41是烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、環烷基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷基磺醯基氨基、芳基磺醯基氨基、烷基磺醯基烷基氨基、烷基磺醯基芳基氨基、芳基磺醯基烷基氨基或芳基磺醯基芳基氨基；R5是低級烷基或-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3；R6是低級烷基、-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3、或雜芳基；R7是氫、羥基、烷氧基、低級烷基、S(O)2NHR50和OS(O)2NR38R39；其中R38和R39分別獨立地選自於氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、滷代烷基、烷基芳基、雜環基、芳基烷基、芳基烷氧基、烷氧基、芳氧基、環烷基、環烯基和環炔基；x和y分別獨立地是0-14；R50是氫、低級烷基、低級烷氧基或雜芳基；Y和R8如下選自於(i)或(ii)(i)Y是O；而R8是CONR38R39、CN、雜芳基、烷基磺醯基、(CH2)xC(O)(CH2)yCH3、烷基、滷素、假滷素、羥基烷基、C(O)(CH2)xS(O)2(CH2)yCH3或C(＝N-OR38)(CH2)yCH3；或者(ii)Y和R8與它們所連接的原子一起形成3-16元未取代或取代環或雜環；R9是H；Y1和Y2分別獨立地是碳或氮；如果Y2是碳，則a是1；如果Y2是氮，則a是0；如果Y1是碳，則b是1；如果Y1是氮，則b是0；以及W是NH。
2.如權利要求1所述的化合物，其中X是S；R3和R4分別是H；Y1和Y2分別是碳；而a和b分別是1。
3.如權利要求1所述的化合物，其中該化合物具有式V 及其藥物學上可接受的衍生物，其中X是S或-CH＝CH-；R1是滷素或低級烷基；R2是低級烷基；R3和R4分別是氫；R5是低級烷基或-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3；R6是低級烷基、-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3、或雜芳基；R7選自於以下組中氫，羥基，烷氧基，低級烷基，S(O)2NHR50和OS(O)2NR38R39；R38和R39分別獨立地選自於氫，烷基，鏈烯基，鏈炔基，芳基，滷代烷基，烷基芳基，雜環基，芳基烷基，芳基烷氧基，烷氧基，芳氧基，環烷基，環烯基和環炔基；x和y分別獨立地是0-14；R50是氫，低級烷基，低級烷氧基或雜芳基；Y和R8如下選自於(i)或(ii)(i)Y是O；而R8是CONR38R39，CN，雜芳基，烷基磺醯基，(CH2)yC(O)(CH2)yCH3，烷基，滷素，假滷素，羥基烷基，C(O)(CH2)xS(O)2(CH2)yCH3或C(＝N-OR38)(CH2)yCH3；或者(ii)Y和R8與它們所連接的原子一起形成3-16元未取代或取代環或雜環；R9是H；Y1和Y2分別獨立地是碳或氮；如果Y2是碳，則a是1；如果Y2是氮，則a是0；如果Y1是碳，則b是1；如果Y1是氮，則b是0；以及W是NH。
4.如權利要求3所述的化合物，其中R1是Cl或Me；而R2是Me。
5.如權利要求3所述的化合物，其中R5是Me或乙醯基；R6是Me，乙醯基或2-惡唑基；R7是H，Me，OSON2Me2，OCH2-環丙基，羥基或SO2NH-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)；Y和R8如下選自於(i)或(ii)(i)Y是O；而R8是C(O)CH2SO2CH3，C(O)Me，CN，C(O)N(Me)(CH2-t-Bu)，SO2Me，2-惡唑基，SO2-異丙基，SO2-n-丙基，CH(OH)Me，C(O)NMe2，C(＝N-OMe)Me，Me，C(O)Et，Cl，n-丙基或乙基；或者(ii)Y和R8一起形成-CO-N＝或-CO-C(CN)＝；R9是H；Y1和Y2分別獨立地是碳或氮；如果Y2是碳，則a是1；如果Y2是氮，則a是0；如果Y1是碳，則b是1；如果Y1是氮，則b是0；以及W是NH。
6.如權利要求3所述的化合物，其中X是S；R1是Cl或Me；R2是Me；R3、R4和R9是H；Y是O；W是NH；以及Y1和Y2分別是碳。
7.如權利要求6所述的化合物，其中該化合物具有式VI 或其藥物學上可接受的衍生物，其中R1是Cl或Me；R5是Me或乙醯基；R6是Me，乙醯基或2-惡唑基；R7是H，Me，OSO2NMe2，OCH2-環丙基，羥基或SO2NH-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)；以及R8是C(O)CH2SO2CH3，C(O)Me，CN，C(O)N(Me)(CH2-t-Bu)，SO2Me，2-惡唑基，SO2-異丙基，SO2-n-丙基，CH(OH)Me，C(O)NMe2，C(＝N-OMe)Me，Me，C(O)Et，Cl，n-丙基或乙基。
8.如權利要求7所述的化合物，其中R1、R5和R6是Me；而R7是氫。
9.如權利要求1所述的化合物，其選自於以下組中N-(2-乙醯基-4，6-二甲基苯基)-3-{[(3，4二甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩羧醯胺、N-(2-氰基-3，4，6-三甲基苯基)-3-{[(3，4-二甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(3；4，6-三甲基-2-丙醯基苯基)-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-[2-(1-羥基乙基)-4，6-二甲基苯基]-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-{2-[(二甲基氨基)羰基]-4，6-二甲基苯基)-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-{2，4-二甲基-6-[(甲基氧基)ethanimidoyl]苯基}-2-噻吩羧醯胺、3-{[(3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-硫苯基)羰基]氨基}-2，4，6-三甲基苯基-N，N-二甲基氨基磺酸酯、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-{3-[(環丙基甲基)氧基]-2，4，6-三甲基苯基}-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(2，4，6-三甲基-5-嘧啶基)-2-噻吩羧醯胺、N-(2-乙醯基-3，4，6-三甲基苯基)-3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(2-氰基-3，4，6-三甲基苯基)-2-噻吩羧醯胺、N-(2-氯-4，6-二甲基苯基)-3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(4，6-二乙醯基-3-羥基-2-丙基苯基-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(2，4-二甲基-6-[2-(甲基磺醯基)乙醯基]苯基}-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(2，4-二甲基-6-{[甲基(2，2-二甲基丙基)氨基]羰基}苯基)-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基)-N-[2，4-二甲基-6-(甲基磺醯基)苯基]-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-[2，4-二甲基-6-(1，3-惡唑-2-基)苯基]-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-[2-(2-丙基磺醯基)-4，6-二甲基苯基]-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基)-N-[2，4-二甲基-6-(丙基磺醯基)苯基]-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(2-乙基-4，6-二甲基苯基)-2-噻吩羧醯胺、3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-[2，6-二甲基-4-(1，3-惡唑-2-基)苯基]-2-噻吩羧醯胺、N-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)-2-(6，8-二甲基-4-羥基-2-苯並嘧啶基)噻吩-3-磺醯胺和N-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)-2-(3-氰基-4-羥基-6，8-二甲基苯並[b]吡啶-2-基)噻吩-3-磺醯胺，或其藥物學上可接受的衍生物。
10.如權利要求1所述的化合物，其是N-(2-乙醯基-4，6-二甲基苯基)-3-{[(3，4-二甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-2-噻吩羧醯胺，或其藥物學上可接受的衍生物。
11.一種藥物學上可接受的鹽，其包括如權利要求10所述的化合物。
12.如權利要求11所述的鹽，其是鈉鹽。
13.如權利要求1所述的化合物，其中Y1和Y2分別是氮。
14.如權利要求13所述的化合物，其中a和b分別是0。
15.如權利要求13所述的化合物，其中R5、R6和R8是烷基；Y是O；而W是NH。
16.如權利要求13所述的化合物，其中R3和R4分別是H；而X是S。
17.如權利要求13所述的化合物，其是3-{[(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基]磺醯基}-N-(2，4，6-三甲基-5-嘧啶基)-2-噻吩羧醯胺，或其藥物學上可接受的衍生物。
18.如權利要求1所述的化合物，其中X是-C(R3)＝C(R4)-。
19.如權利要求18所述的化合物，其具有式VII 及其藥物學上可接受的衍生物，其中R1和R2是如下的(i)，(ii)或(iii)(i)R1和R2分別獨立地選自於H、NH2、NO2、滷素、假滷素、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、芳基烷基、雜芳基、烷氧基、烷基氨基、烷硫基、烷基氧基、滷代烷基、烷基亞硫醯基、烷基磺醯基、芳氧基、芳基氨基、芳硫基、芳基亞硫醯基、芳基磺醯基、滷代烷基、滷素芳基、烷氧基羰基、烷基羰基、氨基羰基、芳基羰基、甲醯基、取代或未取代醯胺基、以取代或未取代脲基，其中烷基、鏈烯基和鏈炔基部分包含1-14個碳原子，且可以是直鏈或支鏈或環狀的，而芳基部分包含約4-16個碳原子，但R2不是滷素或假滷素；或者(ii)R1和R2一起形成-(CH2)n-，其中n是3-6；或者(iii)R1和R2一起形成1，3-丁二烯基(-CH＝CH-CH＝CH-)；W是O、NH或(CH2)z其中z是0-6；而Y是O、S，或者與R8以及它們所連接的原子一起形成3-16元未取代或取代環或雜環；R3和R4獨立地選自於氫、滷素、氰基、氰基烷基、C(O)R41、烷基、鏈烯基、環烷基和芳基，或一起形成亞烷基或亞烯基，其中R41是烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、環烷基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷基磺醯基氨基、芳基磺醯基氨基、烷基磺醯基烷基氨基、烷基磺醯基芳基氨基、芳基磺醯基烷基氨基或芳基磺醯基芳基氨基；Y1和Y2分別獨立地是碳或氮；a和b分別獨立地是0或1；R5、R6、R7、R8和R9分別獨立地如下選自於(i)或(ii)(i)R5、R6、R7、R8和R9分別獨立地選自於H，OH，NHR38，CONR38R39，NO2，氰基，滷素，假滷素，烷基，鏈烯基，鏈炔基，芳基，芳基烷基，雜芳基，烷氧基，烷基氨基，烷硫基，滷代烷基，烷基亞硫醯基，烷基磺醯基，烷氧基羰基，烷基羰基，烯基硫基，鏈烯基氨基，鏈烯基氧基，鏈烯基亞硫醯基，鏈烯基磺醯基，烷氧基羰基，芳基氨基羰基，烷基氨基羰基，氨基羰基，(烷基-氨基羰基)烷基，乙醯氧基，羥基，羧基，羧基烷基，羧基鏈烯基，烷基磺醯基氨基烷基，氰基烷基，乙醯基，乙醯氧基烷基，羥基烷基，烷氧基烷氧基，羥基烷基，(乙醯氧基)烷氧基，(羥基)烷氧基，甲醯基，磺醯氯，胺基酸，己糖，O-糖苷，核糖，低級烷基，CN，-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3，-(CH2)xCH3，(CH2)xNH-低級烷基，-(CH2)xC(O)NH2，D-、L-或外消旋胺基酸，伯或仲醯胺，O-糖苷，己糖或核糖，-S(O)2NH2，羥基，烷氧基，烷氧基羰基，乙醯氧基烷基，-(CH2)xCOOH，-(CH2)xCH(COOH)(CH2)yCH3，CO2-低級烷基，CN，雜芳基，C(O)(CH2)xS(O)2(CH2)yCH3，C(＝N-OR38)(CH2)yCH3，-C(O)C(O)(CH2)yCH3，-(CH2)xN(CH3)2，S(O)2NHR50，OS(O)2NR38R39，烷基芳基，烷基雜芳基，C(O)NHR50，-(CH2)xOH，和-C(O)N(H)N(H)R50；其中R38和R39分別獨立地選自於氫，烷基，鏈烯基，鏈炔基，芳基，滷代烷基，烷基芳基，雜環基，芳基烷基，芳基烷氧基，烷氧基，芳氧基，環烷基，環烯基和環炔基；x和y分別獨立地是0-14；R50是諸如氫、低級烷基、低級烷氧基或雜芳基的取代基；或者(ii)取代環上的相鄰碳原子的R5、R6、R7、R8和R9中的至少兩個一起形成亞烷基二氧基、亞烷基硫代氧基氧基或亞烷基二硫代氧基，這些基團是未取代或通過用滷素、低級烷基、低級烷氧基或滷代低級烷基置換一個或者多個氫而被取代，而其他的R5、R6、R7、R8和R9如(i)進行選擇。
20.如權利要求19所述的化合物，其中R3、R4和R9是H；Y是O；而W是NH。
21.如權利要求19所述的化合物，其中R1和R2分別獨立地選自於烷基、低級鏈烯基、低級鏈炔基、低級滷代烷基、滷素、假滷素或H，但R2不是滷素。
22.如權利要求19所述的化合物，其中R1是低級烷基或滷素；而R2是低級烷基。
23.如權利要求19所述的化合物，其中該化合物具有式VIII 或其藥物學上可接受的衍生物，其中R1是低級烷基或滷素；R5是低級烷基或-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3；R6是低級烷基、-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3、或雜芳基；R7是氫，羥基，烷氧基，低級烷基，S(O)2NHR50或OS(O)2NR38R39；以及R8是CONR38R39，CN，雜芳基，烷基磺醯基，(CH2)xC(O)(CH2)yCH3，烷基，滷素，假滷素，羥基烷基，C(O)(CH2)xS(O)2(CH2)yCH3或C(＝N-OR38)(CH2)yCH3。
24.如權利要求23所述的化合物，其中R5是Me或乙醯基；R6是Me，乙醯基或2-惡唑基；R7是H，Me，OSO2NMe2，OCH2-環丙基，羥基或SO2NH-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)；以及R8是C(O)CH2SO2CH3，C(O)Me，CN，C(O)N(Me)(CH2-t-Bu)，SO2Me，2-惡唑基，SO2-異丙基，SO2-n-丙基，CH(OH)Me，C(O)NMe2，C(＝N-OMe)Me，Me，C(O)Et，Cl，n-丙基或乙基。
25.如權利要求23所述的化合物，其中R5和R6是Me；R7是H；而R8是C(O)Me。
26.如權利要求23所述的化合物，其是N-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)-2-(2-乙醯基-4，6-二甲基苯基氨基羰基)苯磺醯胺。
27.如權利要求1所述的化合物，其中M是(CH2)z，其中z是0-6。
28.如權利要求27所述的化合物，其中該化合物具有式X 或其藥物學上可接受的衍生物，其中R1和R2是如下的(i)、(ii)或(iii)(i)R1和R2分別獨立地選自於H、NH2、NO2、滷素、假滷素、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、芳基烷基、雜芳基、烷氧基、烷基氨基、烷硫基、烷基氧基、滷代烷基、烷基亞硫醯基、烷基磺醯基、芳氧基、芳基氨基、芳硫基、芳基亞硫醯基、芳基磺醯基、滷代烷基、滷素芳基、烷氧基羰基、烷基羰基、氨基羰基、芳基羰基、甲醯基、取代或未取代醯胺基、以及取代或未取代脲基，其中烷基、鏈烯基和鏈炔基部分包含1-14個碳原子，且可以是直鏈或支鏈或環狀的，而芳基部分包含約4-16個碳原子，但R2不是滷素或假滷素；或者(ii)R1和R2一起形成-(CH2)n-，其中n是3-6；或者(iii)R1和R2一起形成1，3-丁二烯基(-CH＝CH-CH＝CH-)；Y1和Y2分別獨立地是碳或氮；a和b分別獨立地是0或1；R5、R6、R7、R8和R9分別獨立地如下選自於(i)或(ii)(i)R5、R6、R7、R8和R9分別獨立地選自於H，OH，NHR38，CONR38R39，NO2，氰基，滷素，假滷素，烷基，鏈烯基，鏈炔基，芳基，芳基烷基，雜芳基，烷氧基，烷基氨基，烷硫基，滷代烷基，烷基亞硫醯基，烷基磺醯基，烷氧基羰基，烷基羰基，烯基硫基，鏈烯基氨基，鏈烯基氧基，鏈烯基亞硫醯基，鏈烯基磺醯基，烷氧基羰基，芳基氨基羰基，烷基氨基羰基，氨基羰基，(烷基-氨基羰基)烷基，乙醯氧基，羥基，羧基，羧基烷基，羧基鏈烯基，烷基磺醯基氨基烷基，氰基烷基，乙醯基，乙醯氧基烷基，羥基烷基，烷氧基烷氧基，羥基烷基，(乙醯氧基)烷氧基，(羥基)烷氧基，甲醯基，磺醯氯，胺基酸，己糖，O-糖苷，核糖，低級烷基，CN，-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3，-(CH2)xCH3，(CH2)xNH-低級烷基，-(CH2)xC(O)NH2，D-、L-或外消旋胺基酸，伯或仲醯胺，O-糖苷，己糖或核糖，-S(O)2NH2，羥基，烷氧基，烷氧基羰基，乙醯氧基烷基，-(CH2)xCOOH，-(CH2)xCH(COOH)(CH2)yCH3，CO2-低級烷基，CN，雜芳基，C(O)(CH2)xS(O)2(CH2)yCH3，C(＝N-OR38)(CH2)yCH3，-C(O)C(O)(CH2)yCH3，-(CH2)xN(CH3)2，S(O)2NHR50，OS(O)2NR38R39，烷基芳基，烷基雜芳基，C(O)NHR50，-(CH2)xOH，和-C(O)N(H)N(H)R50；其中R38和R39分別獨立地選自於氫，烷基，鏈烯基，鏈炔基，芳基，滷代烷基，烷基芳基，雜環基，芳基烷基，芳基烷氧基，烷氧基，芳氧基，環烷基，環烯基和環炔基；x和y分別獨立地是0-14；而R50是氫，低級烷基，低級烷氧基或雜芳基；或者(ii)取代環上的相鄰碳原子的R5、R6、R7、R8和R9中的至少兩個一起形成亞烷基二氧基、亞烷基硫代氧基氧基或亞烷基二硫代氧基，這些基團是未取代或通過用滷素、低級烷基、低級烷氧基或滷代低級烷基置換一個或者多個氫而被取代，而且其他的R5、R6、R7、R8和R9如(i)進行選擇。
29.如權利要求28所述的化合物，其中R1是滷素或低級烷基；R2是低級烷基；R5是低級烷基或-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3；R6是低級烷基、-(CH2)xC(O)(CH2)yCH3、或雜芳基；R7是氫、羥基、烷氧基、低級烷基、S(O)2NHR50和OS(O)2NR38R39；其中R38和R39分別獨立地選自於氫、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、滷代烷基、烷基芳基、雜環基、芳基烷基、芳基烷氧基、烷氧基、芳氧基、環烷基、環烯基和環炔基；x和y分別獨立地是0-14；而R50是氫，低級烷基，低級烷氧基或雜芳基；R8是CONR38R39，CN，雜芳基，烷基磺醯基，(CH2)xC(O)(CH2)yCH3，烷基，滷素，假滷素，羥基烷基，C(O)(CH2)xS(O)2(CH2)yCH3或C(＝N-OR38)(CH2)yCH3；R9是H；Y1和Y2分別獨立地是碳或氮；如果Y2是碳，則a是1；如果Y2是氮，則a是0；如果Y1是碳，則b是1；而如果Y1是氮，則b是0。
30.如權利要求29所述的化合物，其中Y1和Y2是碳；a和b分別是1；R5、R6和R8是低級烷基；而R7是H或SO2NHR50，其中R50是雜芳基。
31.如權利要求28所述的化合物，其選自於以下組中N-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)-2-(2，4，6-三甲基苄基)苯並[b]噻吩-3-磺醯胺和N-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)-2-(3-(4-氯-3-甲基-5-異惡唑基)氨基磺醯基-2，4，6-三甲基苄基)苯並[b]噻吩-3-磺醯胺。
32.如權利要求1所述的化合物的藥物學上可接受的鹽。
33.如權利要求32所述的鹽，其是鈉鹽。
34.一種藥物組合物，其包括有效量的在藥物學上可接受的載體中的如權利要求1所述的化合物或其藥物學上可接受的衍生物，其中，所述的量可有效改善內皮肽所調節之疾病的症狀。
35.一種藥物組合物，其包括有效量的在藥物學上可接受的載體中的如權利要求10所述的化合物或其藥物學上可接受的衍生物，其中，所述的量可有效改善內皮肽所調節之疾病的症狀。
36.如權利要求34所述的組合物，其為單劑量或多份劑量劑型。
37.如權利要求35所述的組合物，其為單劑量或多份劑量劑型。
38.一種製成品，其包括包裝材料、包含在該包裝材料中的如權利要求1所述的化合物或其藥物學上可接受的衍生物，其中，所述化合物有效地拮抗內皮肽的作用，有效改善內皮肽所調節之病變的症狀，或者在約10μM以下的IC50時抑制內皮肽與ET受體的結合作用，而所述包裝材料包括標籤，該標籤說明該化合物或其衍生物用於拮抗內皮肽效果、治療內皮肽所調節之病變或抑制皮肽與ET受體的結合作用。
39.一種製成品，其包括包裝材料、包含在該包裝材料中的如權利要求10所述的化合物或其藥物學上可接受的衍生物，其中，所述化合物有效地拮抗內皮肽的作用，有效改善內皮肽所調節之病變的症狀，或者在約10μM以下的IC50時抑制內皮肽與ET受體的結合作用，而所述包裝材料包括標籤，該標籤說明該化合物或其衍生物用於拮抗內皮肽效果、治療內皮肽所調節之病變或抑制皮肽與ET受體的結合作用。
40.一種治療內皮肽所調節之疾病的方法，其包括向患者給藥有效量的如權利要求1所述的化合物或其藥物學上可接受的衍生物，其中，所述有效量足以緩解一種或多種所述疾病的症狀。
41.一種治療內皮肽所調節之疾病的方法，其包括向患者給藥有效量的如權利要求10所述的化合物或其藥物學上可接受的衍生物，其中，所述有效量足以緩解一種或多種所述疾病的症狀。
42.如權利要求40所述的方法，其中，所述疾病選自於高血壓、心血管疾病、心臟病包括心肌梗塞、肺動脈高血壓、新生性肺動脈高血壓、紅細胞生成素所調節的高血壓、呼吸性疾病及炎症，包括氣喘、支氣管收縮、眼部疾病包括青光眼和視網膜灌流不充分、胃腸疾病、腎衰竭、內毒素休克、月經性疾病、產科疾病、受傷、板炎、勃起功能障礙、絕經、骨質疏鬆症和骨代謝性疾病、氣候性疾病包括熱潮紅、異常凝塊行為、尿道生殖道不適以及心血管疾病的發病率增加、和其他與中年婦女卵巢功能下降有關的疾病、子癇前期、懷孕期間的控制、氧化氮減弱的疾病、過敏性休克、出血性休克、以及免疫抑制劑介導的腎血管收縮。
43.如權利要求41所述的方法，其中，所述疾病選自於高血壓、心血管疾病、心臟病包括心肌梗塞、肺動脈高血壓、新生性肺動脈高血壓、紅細胞生成素所調節的高血壓、呼吸性疾病及炎症，包括氣喘、支氣管收縮、眼部疾病包括青光眼和視網膜灌流不充分、胃腸疾病、腎衰竭、內毒素休克、月經性疾病、產科疾病、受傷、板炎、勃起功能障礙、絕經、骨質疏鬆症和骨代謝性疾病、氣候性疾病包括熱潮紅、異常凝塊行為、尿道生殖道不適以及心血管疾病的發病率增加、和其他與中年婦女卵巢功能下降有關的疾病、子癇前期、懷孕期間的控制、氧化氮減弱的疾病、過敏性休克、出血性休克、以及免疫抑制劑介導的腎血管收縮。
44.如權利要求42所述的方法，其中，所述疾病選自氣喘和炎症。
45.如權利要求42所述的方法，其中，所述疾病是青光眼。
46.如權利要求43所述的方法，其中，所述疾病選自氣喘和炎症。
47.如權利要求43所述的方法，其中，所述疾病是青光眼。
48.一種抑制內皮肽與內皮肽A(ETA)或內皮肽B(ETB)受體結合的方法，其包括使所述受體與如權利要求1所述的化合物或者其藥物學上可接受的衍生物相接觸，其中所述接觸是在所述受體與內皮肽接觸之前、與其同時或者其後進行的。
49.一種抑制內皮肽與內皮肽A(ETA)或內皮肽B(ETB)受體結合的方法，其包括使所述受體與如權利要求10所述的化合物或者其藥物學上可接受的衍生物相接觸，其中所述接觸是在所述受體與內皮肽接觸之前、與其同時或者其後進行的。
50.一種改變內皮肽受體調節之活性的方法，其包括使內皮肽受體與如權利要求1所述的化合物或其藥物學上可接受的衍生物相接觸。
51.一種改變內皮肽受體調節之活性的方法，其包括使內皮肽受體與如權利要求10所述的化合物或其藥物學上可接受的衍生物相接觸。
52.如權利要求34所述的藥物組合物，其中所述藥物學上可接受的載體包括含有糖的磷酸鈉緩衝液。
53.如權利要求52所述的藥物組合物，其中所述化合物是藥物學上可接受的鹼金屬鹽。
54.一種凍乾粉末，其包括如權利要求1所述的化合物的鹽。
55.如權利要求54所述的凍乾粉末，其是如下製備的(a)將所述磺醯胺化合物的藥物學上可接受的鹽溶解在包含糖或碳水化合物的磷酸鈉緩衝液中；(b)無菌過濾所得的溶液；和(c)在標準條件下凍幹經過濾的溶液，製備無菌粉末。
56.如權利要求55所述的凍乾粉末，其中，所述糖或碳水化合物是葡萄糖。
57.一種製成品，其包括包裝材料、包含在該包裝材料中的如權利要求54所述的凍乾粉末，其中，所述化合物有效地拮抗內皮肽的作用，有效改善內皮肽所調節之病變的症狀，或者在約1μM以下的IC50時抑制內皮肽與ET受體的結合作用，而所述包裝材料包括標籤，該標籤說明該化合物或其藥物學上可接受的鹽用於拮抗內皮肽效果、治療內皮肽所調節之病變或抑制皮肽與ET受體的結合作用。
58.一種組合，其包括含有如權利要求54所述之凍乾粉末的無菌管形瓶。
59.如權利要求58所述的組合，其中，所述無菌管形瓶包含粉末的量為單個劑量。
60.如權利要求58所述的組合，其中，所述無菌管形瓶還包含一定量的注射用無菌水，所述磺醯胺鈉鹽的最終濃度在約1-250mg/ml之間。
61.如權利要求34所述的藥物組合物，其成型為片劑或膠囊劑。
62.如權利要求61所述的藥物組合物，其進一步包括腸溶包衣。
63.如權利要求61所述的藥物組合物，其中，所述包衣選自乙酸鄰苯二甲酸纖維素、聚乙二醇、聚氧乙烯脫水山梨醇、蓖麻油、乙基纖維素pseudolatex、水楊酸苯酯、硬脂酸正丁酯、硬脂酸和巴西棕櫚蠟。
64.如權利要求35所述的藥物組合物，其中所述藥物學上可接受的載體包括含有糖的磷酸鈉緩衝液。
65.如權利要求64所述的藥物組合物，其中所述化合物是藥物學上可接受的鹼金屬鹽。
66.一種凍乾粉末，其包括如權利要求10所述的化合物的鹽。
67.如權利要求66所述的凍乾粉末，其是如下製備的(a)將所述磺醯胺化合物的藥物學上可接受的鹽溶解在包含糖或碳水化合物的磷酸鈉緩衝液中；(b)無菌過濾所得的溶液；和(c)在標準條件下凍幹經過濾的溶液，製備無菌粉末。
68.如權利要求67所述的凍乾粉末，其中，所述糖或碳水化合物是葡萄糖。
69.一種製成品，其包括包裝材料、包含在該包裝材料中的如權利要求66所述的凍乾粉末，其中，所述化合物有效地拮抗內皮肽的作用，有效改善內皮肽所調節之病變的症狀，或者在約1μM以下的IC50時抑制內皮肽與ET受體的結合作用，而所述包裝材料包括標籤，該標籤說明該化合物或其藥物學上可接受的鹽用於拮抗內皮肽效果、治療內皮肽所調節之病變或抑制皮肽與ET受體的結合作用。
70.一種組合，其包括含有如權利要求66所述之凍乾粉末的無菌管形瓶。
71.如權利要求70所述的組合，其中，所述無菌管形瓶包含粉末的量為單劑量。
72.如權利要求70所述的組合，其中，所述無菌管形瓶還包含一定量的注射用無菌水，所述磺醯胺鈉鹽的最終濃度在約1-250mg/ml之間。
73.如權利要求35所述的藥物組合物，其成型為片劑或膠囊劑。
74.如權利要求73所述的藥物組合物，其進一步包括腸溶包衣。
75.如權利要求73所述的藥物組合物，其中，所述包衣選自乙酸鄰苯二甲酸纖維素、聚乙二醇、聚氧乙烯脫水山梨醇、蓖麻油、乙基纖維素pseudolatex、水楊酸苯酯、硬脂酸正丁酯、硬脂酸和巴西棕櫚蠟。
全文摘要
本發明提供調整或改變內皮肽族肽活性的噻吩基－、呋喃基－和吡咯基－磺醯胺、其藥物學上可接受衍生物的組合物及方法。具體而言，本發明提供N－(異惡唑基)噻吩基磺醯胺、N－(異惡唑基)呋喃基磺醯胺、N－(異惡唑基)吡咯基磺醯胺、和N－(異惡唑基)苯基磺醯胺，它們的組合物以及通過使用這些磺醯胺與內皮肽受體接觸來抑制內皮肽與內皮肽受體結合的方法。還提供一種治療受內皮肽調節的疾病的方法，其是給藥可抑制內皮肽活性的有效量的一種或多種此等磺醯胺或其藥物學上可接受的衍生物。
文檔編號A61P9/08GK1414965SQ00818061
公開日2003年4月30日 申請日期2000年12月29日 優先權日1999年12月31日
發明者吳成德, 喬治·W·霍蘭, 納塔莉·布洛克 申請人:德州生物科技公司