Hsa相關組合物及使用方法

2023-08-12 21:38:31

專利名稱：Hsa相關組合物及使用方法
HSA相關組合物及使用方法I.相關申請的交叉引用本申請要求2010年2月16日提交的美國臨時申請No. 61/304，954以及2010年7月15日提交的美國臨時申請No. 61/364，503的優先權，以上兩個申請的全文均以引用方式併入。2.序列表的引用本申請通過引用方式併入以文本文件通過EFS-Web與本申請一起提交的序列表，所述序列表命名為「MED0554PCT ST25」，於2010年2月14日創建，並且大小為38. 5千字節。3.發明背景 新生兒Fe受體(FcRn)通過依賴pH的機制延長IgG與人血清血蛋白(HSA)的生命周期，在核內體的酸性PH下特異性結合這兩種分子並將其再循環至細胞表面，從而從默認的溶酶體降解途徑將這兩種分子轉移出去。已證實FcRn結合能力對於白蛋白的結構域III為固有的。4.發明概要本公開提供HSA相關組合物及使用方法。本公開提供包含人血清白蛋白(HSA)部分的嵌合多肽以及包含與藥物載體組合的嵌合多肽的組合物，所述人血清白蛋白部分包含新生兒FcRn結合片段和異源性多肽或其生物活性片段。還公開了用於產生這類嵌合多肽的構建體。此外，本公開教導製備嵌合多肽和編碼其的構建體的方法。本公開還提供包含人血清白蛋白(HSA)部分的多肽，所述HSA部分包含HSA結構域III或其新生兒Fe受體(FcRn)結合片段，其中所述HSA結構域III包含一至十八個胺基酸取代以相對於其中HSA部分不包括胺基酸取代的對照多肽增加多肽對FcRn的親和力和其血清半衰期中的一者或二者。本公開亦提供包含人血清白蛋白(HSA)部分的嵌合多肽，所述HSA部分包含HSA結構域III或其新生兒Fe受體(FcRn)結合片段以及異源蛋白質，其中所述嵌合多肽保留異源蛋白質的功能活性並可與FcRn結合，並且HSA結構域III包含至少一個胺基酸取代以相對於其中HSA部分不包括所述胺基酸取代的對照嵌合多肽增加嵌合多肽對FcRn的親和力和其血清半衰期中的一者或二者。此外，本文公開使用嵌合多肽的方法(例如)以增加蛋白質的血清半衰期。還公開了用於產生腺病毒文庫的方法和載體，所述腺病毒文庫用於篩選大量不同的多肽群。此類方法用於篩選和鑑定增加對FcRn的親和力或血清半衰期中的一者或二者的HSA結構域III胺基酸取代。在某些實施方案中，相對於不包含HSA部分的對照多肽,嵌合多肽具有對FcRn增加的親和力和增加的血清半衰期中的一者或二者。在某些實施方案中，嵌合多肽具有增加的血清半衰期。在某些實施方案中，嵌合多肽具有對FcRn增加的親和力和增加的血清半衰期二者。在某些實施方案中，嵌合多肽在酸性PH下(例如，pH為約5. 5)具有對FcRn增加的親和力。在其他實施方案中，嵌合多肽在酸性PH下(例如，pH為約5. 5)具有增加的FcRn,嵌合多肽在中性pH下(例如，pH為約7. 4)對FcRn的親和力基本上不改變。本公開預期任何前述方面和實施方案的所有組合，以及與在詳細描述中提出的任何實施方案和實施例的組合。5.附圖簡述為闡明本發明，以圖示方式描繪本發明的某些實施方案。然而，並不將本發明限制於圖中所示的實施方案的精確配置和手段。圖I提供與人血清白蛋白(HSA)結構域III結合的人FcRn的動力學與平衡分析。圖中呈現了在PH5. 5下與固定結構域III結合的人FcRn的源自SPR的締合、離解動力學和平衡結合常數。圖IA呈示考馬斯亮藍(Coomassie)染色的PAGE凝膠，證明來自比赤酵母(Pichia Pastoris)的HSA的結構域III的成功表達和純化(如箭頭所示)。圖IB呈示通過在固定於CM5薄片上的結構域III上注入一系列FcRn濃度而產生的結合傳感圖。圖IC呈示在平衡時的結合反應與適合穩態親和力模型的FcRn濃度的關係的圖。圖2提供各種構建體設計的示意性表示，以及關於與HSA融合的IgG和與結構域III融合的IgG的純化和表徵的信息。圖2A呈示重組IgG-HSA或IgG-結構域III融合蛋 白的重鏈以及YTE變體的DNA構建體。圖2B呈示在還原和非還原條件下，純化的融合蛋白(5iig/泳道)的SDS PAGE分析。圖2C呈示純化的IgG融合蛋白的分析尺寸排阻層析。圖3提供和與HSA融合的IgG以及與結構域III融合的IgG結合的人FcRn的源自SPR的平衡常數。對每次FcRn注入在平衡時的響應單位(Req)與人FcRn濃度的關係以圖表示，並且使數據適合穩態親和力模型以計算固定IgG (圖A)、與HSA融合的IgG (圖B)和與結構域III融合的IgG(圖C)的Kd。插圖中的傳感圖顯示在消除空位後Y軸上的結合於固定配體的FcRn的質量(共振單位)與X軸上的時間的關係。圖4提供指示FcRn在HSA上的表位為構象表位的證據。在pH5. 5下，將以用三種不同方式處理的瓊脂糖凝膠(S)-HA、S-IgG或S-Tris與人FcRn孵育。洗脫所結合的FcRn並通過用抗-P 2微球蛋白抗體進行免疫印跡來定量。示出分子重量標準(M，以kD計)的位置。泳道I包含20y g的人FcRn，將這一數量添加至每一吸附樣本中。圖5顯示保留FcRn結合能力的酵母細胞(S. Cerevisiae)表面上展示的HSA與結構域III。圖5A呈示使用FITC綴合的抗-HSA抗體，用半乳糖可誘導的pYDl細胞表面展示質粒轉化的釀酒酵母(S. Cerevisiae)細胞上的HSA或結構域III的流式細胞術檢測。用半乳糖誘導細胞持續指定的時間。圖B呈示生物素化的人FcRn與釀酒酵母細胞上展示的HSA或結構域III的結合，誘導48小時並通過使用流式細胞儀用抗-鏈黴親和素藻紅蛋白顯形。將用scfv轉化的酵母細胞用作FITC以及藻紅蛋白的背景螢光性的對照。實驗以螢光強度(對數刻度)與細胞數量的關係柱狀圖表達。圖6提供來自不同物種(人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和
馬)的結構域III的胺基酸序列比對。圖A至D中的比對包括雞，而圖中的比對將雞排除在外。在不同物種間保守的胺基酸殘基用實線標記，並且保守的半胱氨酸殘基用虛線標記。陰影部分的胺基酸殘基為物種間非保守的。應注意，圖6中的胺基酸編號僅針對於人結構域III而言，而並非針對相對於全長成熟HSA的結構域III的編號而示。圖7示出HSA與具有野生型的IgG的融合使血清持久性增加至與IgG-YTE變體所見相似的水準。將血清中剩餘的注射樣本的百分數隨時間(I至240小時)作圖。圖8描繪scFv-Fc細胞表面展示文庫入門載體的質粒圖。圖A描繪pENDisplay載體的質粒圖，其包含可操作連結至啟動子(此處為CMV啟動子)的scFv-Fc-GPI-錨盒(anchor cassette)且用聚腺苷酸序列(此處為BGH聚腺苷酸序列)終止。Sfi I與Not I限制酶位點位於scFv部分的兩側以有助於克隆不同的scFv序列。attLl與attL2位點位於scFv-Fc-GPI-錨表達盒的兩側。圖B描繪pENDisplay-OriP載體的質粒圖，其基於圖A中所示的載體，但在scFv-Fc-GPI-錨盒的聚腺苷酸尾部後併入了 OriP序列(參見圖9C)。圖9提供EBNA-I與OriP的代表。圖A與B中分別提供EBNA-I的胺基酸序列與核苷酸序列。圖C中提供OriP的序列。

圖10提供用於表達目標蛋白質的代表性一般腺病毒表達載體的示意圖。所描繪載體包括用於編碼一種或多種目標蛋白質的目標DNA序列、OriP序列和任選的EBNA-I編碼區域。這些組分任選地兩側可為已用於載體構建的att重組位點。在El和/或E3基因缺失的情形下，這些組分的一側可為腺病毒基因組並且這些組分的一側可為ITR序列。所示為3』與5』 ITR序列。為便於構建、增殖和選擇，載體還提供用於在細菌細胞中進行複製(例如大腸桿菌(E. coli)起點)及抗生素選擇(例如氨苄青黴素抗性)的序列，這些成分以不會併入援救的腺病毒的方式定位。

圖11示出哺乳動物細胞(293F細胞)表面上展示的HSA保留FcRn結合能力。圖A描繪命名為pEN-HSA-GPI的哺乳動物表達構建體，其包含CMV啟動子(粗線)、信號序列(粗虛線)、N端Flag標籤(細虛線)、兩側為HSA部分(陰影線框)和DAF-GPI序列的(G4S) 3接頭(細實線)。圖B呈示使用FITC綴合的抗-HSA抗體(圖A)，用產生自pEN_HSA_GPI的腺病毒感染16小時和24小時後或用編碼對照scFv-Fc融合蛋白的對照質粒的293-F細胞表面上的HSA的流式細胞術檢測。圖C與D呈示生物素化的人FcRn (分別為25 u g/ml與5 u g/ml)與293F細胞上展示的HSA的結合，使用流式細胞術通過抗_鏈黴親和素藻紅蛋白顯形。實驗以螢光強度(對數刻度)相對於細胞數量的柱狀圖表示。圖12示出生物素化的人FcRn與野生型HSA(HSA-wt)以及293F細胞上展示的兩個HSA突變體文庫(HSA-DIII-Iibl和HSA-DIII-lib2)的結合的分布的變化。圖A呈示用野生型與突變HSA-DIII文庫感染的293-F細胞表面上的HSA的流式細胞術檢測。圖B呈示結合細胞表面上HAS的生物素化人FcRn的HSA的流式細胞檢測，通過抗-鏈黴親和素藻紅蛋白顯形。實驗以螢光強度(對數刻度)相對於細胞數量的柱狀圖表示。圖13示出表達野生型HAS(HSA_wt，圖A)和兩個HSA突變體文庫(分別為圖B和圖C中的HSA-DIII-Iibl和HSA-DIII-lib2)的細胞的FACS分選分布，這些細胞被生物素化的人FcRn(10 u g/ml)染色,用抗-鏈黴親和素藻紅蛋白檢測。圖14示出在分選前以及第一輪和第二輪分選後，生物素化的人FcRn與293F細胞結合的分布變化，所述293F細胞在其細胞表面表達野生型HSA (HSA-wt) ,HSA-DIII-Iibl突變體文庫。圖A呈示在分選前以及第一輪和第二輪分選後，對表達野生型、HSA-DIII-Iibl的293F細胞表面上的HSA的流式細胞術檢測。圖B及C呈示生物素化的人FcRn(分別為I u g/ml和0. I ii g/ml)與同組細胞的結合,使用流式細胞術通過抗-鏈黴親和素藻紅蛋白顯形。實驗以螢光強度(對數刻度)相對於細胞數量的柱狀圖表示。圖15示出FcRn與細胞表面上展示的突變體HSA的結合是pH依賴性的。圖A及B示出在pH5. 5(0. I u g/ml FcRn，圖A)和pH7. 2 (10 y g/ml，圖B)下，在293F細胞的表面上用抗-鏈黴親和素藻紅蛋白檢測的生物素化的人FcRn的流式細胞術檢測，所述293F細胞表達對照scFv-Fc融合蛋白質、野生型HSA以及三種代表性突變(參見表5)。圖C顯示使用FITC綴合的抗-HSA抗體對這些細胞表面上的HSA的流式細胞術檢測。圖16示出如通過流式細胞術所測量，大多數分離的HSA突變對於FcRn具有更高的親和力。通過流式細胞術分析野生型HSA和一組選定的突變體在不同濃度下結合生物素化的人FcRn。對數據用MFI隨FcRn濃度的變化作圖。圖17描繪HSA的分析結構上的許多變體的定位(PDB存取號1BM0)。大部分結構呈示為帶狀圖，其中殘基L463、E495、T508、1523和K534用條形表示並且用箭頭指出。環6和7以及圍繞殘基492-536的螺旋7和8為環繞的。在此區域中發現了大部分熱點和優選點。6.發明詳述6. I 引言
新生兒FC受體(FcRn)通過pH依賴機制延長IgG與人血清白蛋白(HSA)生命周期，在核內體的酸性PH下特異性結合這兩種分子並將其再循環至細胞表面，從而從默認的溶酶體降解途徑將這兩種分子轉移出去。已證實FcRn結合能力對白蛋白的結構域III為固有的。如本文所證實，添加HAS的FcRn結合片段可用於增加蛋白質的血清半衰期和/或治療劑的FcRn結合親和力，所述治療劑例如抗體、抗體替代物、蛋白質、蛋白質支架和肽。具體而言，如本文所證實，在酸性PH(例如，pH為約5. 5)下，FcRn結合親和力增加，而在中性pH(例如，pH為約7. 4)下，親和力基本不變。包含本公開的FcRn結合結構域變體的嵌合多肽可增加蛋白質的血清半衰期或FcRn結合親和力，甚至進一步大於野生型FcRn結合結構域。本發明的HSA變體多肽可用作支架以用於與治療靶標結合或可偶聯至治療製劑。本公開提供結構域III的變體。結構域III的此類變體可單獨使用或用於另外的HSA序列的情形中，以增加異源蛋白質和/或非蛋白質製劑的血清半衰期和/或FcRn結合親和力。本文中公開的嵌合多肽和HSA變體具有大量用途。應理解，有時可相對快速地從動物或人體中清除蛋白質和其他分子。快速清除會逐漸削弱研究動物模型內的蛋白質和其他分子的能力，且會逐漸削弱使用其有效用於治療目的的能力。在一些例子中，快速清除蛋白質以使其沒有治療效果。在其他例子中，以需要頻繁給藥的速度清除蛋白質。頻繁給藥增加了治療成本，且也增加了不遵照治療方案的風險。在一些例子中，以需要施用較大劑量的速度清除蛋白質。較大劑量的活性劑會增加副作用的風險，包括免疫反應。本公開的嵌合多肽和變體HSA多肽有助於通過增加血清半衰期和/或對FcRn的親和力解決與快速或相對快速的蛋白質清除有關的問題。同樣，非蛋白質物質可與本公開的變體HSA多肽綴合以增加血清半衰期和/或對FcRn的親和力。6. 2 術語在繼續進一步詳細描述本發明之前，應了解，並未將本發明限制於特定的組合物或處理步驟，因為這些組合物或處理步驟都可以改變。必須注意的是，除非上下文中清楚地指出，否則如本說明書及所附專利要求中所用的單數形式「一種」、「一個」和「該」包括複數指示對象。除非另外定義，否則本文所用的所有技術和科學術語具有與本發明涉及的本領域所屬的技術人員通常所理解的相同的意義。例如，the Concise Dictionary ofBiomedicine and Molecular Biology, Juo, Pei-Show,第二 版，2002, CRC Press ；TheDictionary of Cell and Molecular Biology,第三版，1999, Academic Pres;以及 theOxford Dictionary Of Biochemistry And Molecular Biology,修訂版，2000, OxfordUniversity Press為技術人員提供在本發明中所用的許多術語的常用詞典。本文中的胺基酸可由其一般已知的三個字母符號表示或由IUPAC-IUBBiochemical Nomenclature Commission (IUPAC-IUB 生物化學命名委員會)推薦的一個字母符號來提及。同樣地，核苷酸可由其一般公認的單一字母代碼來提及。如本文所用的「胺基酸取代」是指用另一胺基酸代替在母體多肽序列中的特定位置處的胺基酸。例如，取代L463N是指其中在位置463處的亮氨酸用天門冬醯胺代替的變體多肽。除非另外指出，抗體的可變結構域、互補決定區(CDR)和骨架區域(FR)中的胺基酸的編號均遵循 Kabat 等在 Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5thEd. Public Health Service, N ational Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991)中所提出的Kabat定義。使用這一編號系統，實際的線性胺基酸序列可包含較少或另外的胺基酸，其對應於可變結構域的FR或CDR的縮短或插入。例如，重鏈可變結構域可包括在H2 的殘基52之後的單個胺基酸插入(根據Kabat的殘基52a)和在重鏈FR殘基82之後插入的殘基(例如，根據Kabat的殘基82a、82b和82c等)。對於一給定的抗體,殘基的Kabat編號可以通過在抗體的序列與「標準」Kabat編號的序列的同源區域進行比對來確定。骨架殘基的最大比對經常需要在編號系統中插入「間隔」殘基，以用於Fv區域。此外，由於物種間或等位基因趨異，在任何給定Kabat位點號碼處的某些個別殘基的身份可因抗體鏈而
巳如本文所用術語「抗體(antibody) 」和「抗體(antibodies) 」,也稱為免疫球蛋白，涵蓋單克隆抗體(包括全長單克隆抗體)、多克隆抗體、由至少兩個不同表位結合片段形成的多特異抗體(例如，雙特異抗體)、人抗體、人源化抗體、駱駝化抗體、嵌合抗體、單鏈Fv(scFv)、單鏈抗體、單結構域抗體、結構域抗體、Fab片段、Ffeb' )2片段、表現所需生物活性的抗體片段(例如，抗原結合部分)、二硫化物連接的Fv(dSFv)，以及抗個體基因型(抗-Id)抗體(包括(例如)針對本發明的抗體的抗-Id抗體)、細胞內抗體，以及以上任何表位結合片段。具體而言，抗體包括免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫活性片段，SP，包含至少一個抗原結合位點的分子。免疫球蛋白分子可為任何同種型(例如，IgG、IgE、IgM、IgD、IgA 和 IgY)、亞型(例如，IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgAl 和 IgA2)或同種異型(例如，Gm,例如，Glm(f、z、a 或 x)、G2m(n)、G3m(g、b 或 c)、Am、Em 和 Km(l、2 或 3))。抗體可源自任何哺乳動物，包括但不限於人、猴、豬、馬、兔、狗、貓、小鼠等，或其他動物諸如鳥類(例如雞)。如本文所用的術語「全長HSA 」是指成熟全長人血清白蛋白蛋白質或指編碼這種蛋白質的核苷酸序列。全長HSA蛋白質為大約585個胺基酸(移除N端前序列(pro-sequence)和前體原序列(prepro-sequence)之後)。成熟全長HSA(也稱為全長成熟HSA)蛋白質在SEQ ID NO :2中示出。在某些實施方案中，全長HSA是指沒有前序列的HSA的成熟全長形式。前體原HSA的序列(在移除N端前序列和前體原序列之前)為609個胺基酸且在GenBank登錄號NP000468中示出。此外，由於等位基因趨異，某些個別殘基的身份可與SEQID NO :2中所呈現的那些不同。出現在HSA結構域III中的等位基因變化包括殘基410處R — C ;殘基466處K — E ;殘基479處E — K ;殘基494處D — N ;殘基501處E — K ;殘基505處E — K ;殘基533處V — M ;殘基536處K — E ;殘基541處K — E ;殘基550處D — A或D — G ;殘基560處K — E ;殘基563處D — N ;殘基565處E — K ;殘基570處E — K ;殘基 573 處 K — E ;殘基 574 處 K — E ;殘基 572 至 585 處 GKKLVAASQAALGL — PTMRIRERK ；以及殘基 575 至 585 處 LVAASQAALGL — TCCCKSSCLRLITSHLKASQ PTMRIRERK,如相對於全長成熟HSA中的位置所進行的編號。如本文所用術語「HSA的結構域III」是指跨越全長成熟HSA的胺基酸381-385的HAS的常規結構域III，約為205個胺基酸，或編碼此種蛋白質的核苷酸序列。在本文中，HSA結構域III也縮寫成結構域III或簡單的DIII。結構域III多肽的胺基酸序列在SEQID NO :1中示出。如上所述，由於等位基因趨異，某些個別殘基的身份可與SEQ ID N0:1中呈現的那些不同。如本文所用術語「嵌合多肽」是指包含至少兩個彼此不是異源的部分的多肽。例 如，嵌合多肽，也稱為融合多肽或融合蛋白，其包含接合至異源蛋白質部分的至少一個HSA部分。HSA部分與異源蛋白質部分自身可融合至(例如)Fc或其他部分。HSA部分和異源蛋白質部分可經由共價或非共價相互作用接合。例如，HSA部分和異源蛋白質部分可彼此化學共軛或以重組的方式融合(例如框內的平移融合)。如本文所用術語「異源蛋白質」是指非HSA的蛋白質的全部或部分。儘管本文中使用一般術語「異源蛋白質」，但該術語意欲涵蓋不同長度的生物活性肽，以及全長或基本上全長蛋白質，包括抗體和抗體片段。優選的異源蛋白質可為治療目的而使用或研究。異源蛋白質的示例性種類包括但不限於酶、細胞因子和生長因子。如本文所用HSA多肽包括各種生物活性片段和變體、融合蛋白和野生型HSA多肽的修飾形式。這些生物活性片段或變體、融合蛋白和HSA多肽的修飾形式具有至少一部分與天然HSA蛋白質基本序列同一性的胺基酸序列，且保留至少天然HSA蛋白質的FcRn結合活性。在某些實施方案中，HSA多肽的生物活性片段、變體或融合蛋白包含與HSA多肽具有至少80%、85%、90%、95%、97%、98%、99%或100%同一性的胺基酸序列。如本文所用的術語「片段」應理解為包括表現FcRn結合活性的生物活性片段或生物活性變體。合適的生物活性片段可用於製備嵌合多肽，且這些嵌合多肽可用於本文所述的任何方法中。如本文所用的術語「突變的」、「突變」等是指分子，尤其是指HSA多肽，其通過使用用於定點誘變的熟知方法或任何其他常規方法經歷一或多個胺基酸的缺失、添加或取代。6.3 HSA 結構域 III在某些方面，本公開提供人血清白蛋白(HSA)變體多肽，其包含HSA結構域III或其新生兒Fe受體(FcRn)結合片段，其中所述變體多肽可與FcRn結合，且其中所述HSA結構域III包含一至十八個胺基酸取代以相對於缺乏所述胺基酸取代的對照HSA多肽增加所述變體多肽的血清半衰期或增加對FcRn的親和力。在某些實施方案中，一至十八個胺基酸取代增加HSA變體多肽對FcRn的親和力。在某些實施方案中，一至十八個胺基酸取代增加HSA變體多肽的血清半衰期。在某些實施方案中，一至十八個胺基酸取代增加HSA變體多肽對FcRn的親和力和HSA變體多肽的血清半衰期二者。在某些實施方案中，在酸性pH(例如，pH為約5. 5)下，一至十八個胺基酸取代增加HSA變體多肽對FcRn的親和力。在某些實施方案中，在酸性pH(例如，pH為約5. 5)下，一至十八個胺基酸取代增加HSA變體多肽對FcRn的親和力，而在中性pH (例如，pH為約7. 4)下，基本上不改變HSA變體多肽對FcRn的親和力。在某些實施方案中，HSA變體與FcRn結合，且具有與所述對照HSA多肽不同的解離速率或結合速率。例如，在某些實施方案中，HSA變體與FcRn結合，且具有較快的結合速率和/或較慢的解離速率。在其他實施方案中，結合速率較慢和/或解離速率較快。在某些實施方案中，本公開提供嵌合多肽，其包括HSA部分，所述HSA部分包含結構域III或其FcRn結合部分以及異源蛋白質，其中所述嵌合多肽保留異源蛋白質的功能活性。在某些實施方案中，HSA部分包含整個HSA多肽或包含HSA結構域III的生物活性片段，或其新生兒Fe受體(FcRn)結合片段。在某些實施方案中，HSA部分包含HSA結構域III，或其新生兒Fe受體(FcRn)結合片段以及HSA的另一結構域的至少一部分，例如，HSA結構域I的至少一部分、或HSA結構域II的至少一部分，或HSA結構域I和II中的至少一部分。如相對於長成熟HAS中的位置進行編號，如本文所用的HSA結構域I包含殘基1-197 ；HSA結構域II包含殘基189-385 ；HSA結構域III包含殘基381-585。
在某些實施方案中，嵌合多肽相對於不包含HSA部分的對照多肽具有對FcRn增加的親和力和增加的血清半衰期。在某些實施方案中，嵌合多肽具有對FcRn增加的親和力。在某些實施方案中，嵌合多肽具有增加的血清半衰期。在某些實施方案中，嵌合多肽具有對FcRn增加的親和力和增加的血清半衰期中的兩者。在某些實施方案中，嵌合多肽在酸性pH(例如，pH為約5. 5)下具有對FcRn增加的親和力。在其他實施方案中，嵌合多肽在酸性pH下(例如，pH為約5. 5)具有增加的FcRn，嵌合多肽在中性pH下(例如，pH為約7. 4)對FcRn的親和力基本上不變此外，如本文中所述，在某些實施方案中，多肽(例如，HSA變體或嵌合多肽)的HSA部分的結構域III包括一至十八個胺基酸取代以相對於其中HSA部分不包含所述胺基酸取代的對照嵌合多肽增加對FcRn的親和力和嵌合多肽的血清半衰期中的一者或二者。在某些實施方案中，一至十八個胺基酸取代增加嵌合多肽對FcRn的親和力。在某些實施方案中，一至十八個胺基酸取代增加嵌合多肽的血清半衰期。在某些實施方案中，一至十八個胺基酸取代增加嵌合多肽對FcRn的親和力和嵌合多肽的血清半衰期兩者。在某些實施方案中，多肽(例如，HSA變體多肽或嵌合多肽)的HSA部分的結構域III 包含 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17 或 18 個胺基酸取代。同樣，在包含結構域III或其FcRn結合部分的HSA變體多肽的情形中，結構域III包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17或18個胺基酸取代。在某些實施方案中，胺基酸取代並不僅僅是單個胺基酸對等位基因變體中存在的另一殘基的取代。在某些實施方案中，多肽(例如，HSA變體多肽或嵌合多肽)的HSA部分的結構域III包含以下任何位置處的至少一個胺基酸取代，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位直進彳了編號殘基381、殘基383、殘基391、殘基401、殘基402、殘基407、殘基411、殘基413、殘基414、殘基415、殘基416、殘基424、殘基426、殘基434、殘基442、殘基445、殘基447、殘基450、殘基454、殘基455、殘基456、殘基457、殘基459、殘基463、殘基495、殘基506、殘基508、殘基509、殘基511、殘基512、殘基515、殘基516、殘基517、殘基519、殘基521、殘基523、殘基524、殘基525、殘基526、殘基527、殘基531、殘基535、殘基538、殘基539、殘基541、殘基557、殘基561、殘基566、殘基569。在某些實施方案中，多肽(例如，HSA變體多肽或嵌合多肽)的HSA部分的結構域III包含在以下任何位置處的胺基酸取代，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號(a)殘基383和413 ； (b)殘基401和523 ； (c)殘基407和447 ； (d)殘基407和447和539 ； (e)殘基 407 和 509 ； (f)殘基 407 和 526 ； (g)殘基 411 和 535 ； (h)殘基 414 和 456 ；
(i)殘基 415 和 569 ； (j)殘基 426 和 526 ； (k)殘基 442 和 450 和 459 ； (I)殘基 463 和 508 ；(m)殘基 508 和 519 和 525 ； (n)殘基 509 和 527 ； (o)殘基 523 和 538 ； (p)殘基 526 和 557 ；以及(q)殘基541和561。在某些實施方案中，相對於不同的對照，評估增加的對FcRn的親和力和/或血清半衰期。例如，可相對於缺少HSA部分的異源蛋白質特性評估嵌合多肽的特性，或可相對於缺少胺基酸取代和/或缺少異源蛋白質的相同或類似HSA部分的特性評估嵌合多肽的特性。類似地，可相對於不具有胺基酸取代的HSA分子的特性評估HSA變體多肽。在某些實施方案中，嵌合多肽/HSA變體多肽以比所述對照多肽更高的親和力與FcRn結合。在某些實施方案中，一至十八個胺基酸取代在酸性pH(例如，pH為約5. 5)下增 加嵌合多肽/HSA變體多肽對FcRn的親和力。在某些實施方案中，一至十八個胺基酸取代在酸性pH(例如，pH為約5. 5)下增加嵌合多肽/HSA變體多肽對FcRn的親和力，但在中性pH(例如，pH為約7. 4)下基本上不改變嵌合多肽對FcRn的親和力。在某些實施方案中，嵌合多肽在酸性PH下以較高的親和力與FcRn結合且具有增加的血清半衰期。在某些實施方案中，嵌合多肽/HSA變體多肽與FcRn結合且具有與所述對照多肽不同的解離速率和結合速率。例如，在某些實施方案中，嵌合多肽/HSA變體多肽與FcRn結合且具有較快的結合速率和/或較慢的解離速率。在其他實施方案中，結合速率較慢和/或解離速率較快。在某些實施方案中，多肽(例如，HSA變體或具有HSA部分的嵌合多肽)的HSA結構域III包含一至十個胺基酸取代以相對於其中HSA部分不包含所述胺基酸取代的對照多肽增加多肽對FcRn的親和力和/或增加多肽的血清半衰期。在某些實施方案中，HSA結構域III包含一個胺基酸取代。在某些實施方案中，HSA結構域III包含2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代。在某些實施方案中，HSA結構域III包含11、12、13、14、15、16、17或18個胺基酸取代。在某些實施方案中，HSA結構域III包含至少一個胺基酸取代。在某些實施方案中，HSA結構域III包含至少十個胺基酸取代。示例性胺基酸取代包括(i)用丙氨酸取代；(ii)保守胺基酸取代；(iii)非保守胺基酸取代。本公開預期，在給定多肽的結構域III中的所有胺基酸取代均可為這些取代類型中的一者，且還預期給定多肽(例如，HSA變體和具有HSA部分的嵌合多肽)的結構域III中的每個胺基酸取代可個別且獨立地選自這些類型。在某些實施方案中，取代(至少1、2、3、4、5、6等數目的HSA結構域III取代)是將HSA中的殘基取代為丙氨酸。在某些實施方案中，取代(至少1、2、3、4、5、6等數目的HSA結構域III取代)用另一中性胺基酸殘基置換HSA中給定的中性胺基酸殘基。在某些實施方案中，取代(至少1、2、3、4、5、6等數目的HSA結構域III取代)用另一酸性胺基酸殘基置換HSA中給定的酸性胺基酸殘基。在某些實施方案中，取代(至少1、2、3、4、5、6等數目的HSA結構域III取代)用另一鹼性胺基酸殘基置換HSA中給定的鹼性胺基酸殘基。本公開預期以下實施方案，其中每一取代均獨立選自前述取代類型。特別預期包含前述取代類型的任何組合的多肽(例如，HSA變體和具有HSA部分的嵌合多肽)。
在某些實施方案中，取代(至少1、2、3、4、5、6等數目的HSA結構域III取代)用以下組中的另一種胺基酸一個置換某一種胺基酸賴氨酸((K;Lys);精氨酸(R;Arg);組氨酸(H;His)。在某些實施方案中，取代(至少1、2、3、4、5、6等數目的HSA結構域III取代)用以下組中的另一胺基酸置換某一胺基酸天冬氨酸(aspartate) (D ；Asp ;天冬氨酸)和穀氨酸(glutamate) (E ;Glu ;天冬氨酸)。在某些實施方案中，取代(至少1、2、3、4、5、6等數目的HSA結構域III取代)用以下組中的另一種胺基酸置換某一種胺基酸天冬醯胺(N ;Asn)，穀氨醯胺(Q ;Gin)、絲氨酸(S ;Ser)、蘇氨酸(T ；Thr)和酪氨酸(Y ；Tyr)。在某些實施方案中，取代(至少1、2、3、4、5、6等數目的HSA結構域III取代)用以下組中的另一種胺基酸置換某一種胺基酸丙氨酸(A ；Ala)、纈氨酸(V ；Val)、異亮氨酸(I ；lie)、亮氨酸(L ；Leu)、脯氨酸(P ；Pro)、苯丙氨酸(F ；Phe)、色氨酸(W ；Trp)、蛋氨酸(M ；Met)、半胱氨酸(C;Cys)和甘氨酸(G;Gly)。在某些實施方案中，取代(至少1、2、3、4、5、6等數目的HSA結構域III取代)用以下組中的另一種胺基酸置換某一種胺基酸苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸。在某些實施方案中，取代(至少1、2、3、4、5、6等數目的HSA結構域III取代)用以下組中的另一種胺基酸置換某一種胺基酸半胱氨酸、絲氨酸和蘇氨酸。在某些實施方案中，取代(至少1、2、3、4、5、6等數目的HSA結構域III取代)用以下組中的另一種胺基酸置換某一種胺基酸天冬醯胺、穀氨醯胺、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、 天冬氨酸、穀氨酸。在某些實施方案中，取代(至少1、2、3、4、5、6等數目的HSA結構域III取代)用以下組中的另一種胺基酸置換某一種胺基酸甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸。本公開預期以下實施方案，其中每一取代均獨立選自前述取代類型。特別預期包含前述取代類型的任何組合的多肽(例如，HSA變體和具有HSA部分的嵌合多肽)。在特定實施方案中，具有對FcRn增加的親和力和/或增加的血清半衰期的多肽(例如，HSA變體多肽或具有HSA部分的嵌合多肽)的HSA部分的結構域III包括選自由下列組成的組中的至少一個胺基酸取代V381N、V381Q、E383A、E383G、E383I、E383L、E383V、N391A、N391G、N391I、N391L、N391V、Y401D、Y401E、K402A、K402G、K402I、K402L、K402V、L407F、L407N、L407Q、L407W、L407Y、Y411Q、Y411N、K413C、K413S、K413T、K414S、K414T、V415C、V415S、V415T、Q416H、Q416P、V424A、V424G、V424I、V424L、V424N、V424Q、V426D、V426E、V426H、V426P、G434C、G434S、G434T、E442K、E442R、R445F、R445W、R445Y、P447S、P447T、E450D、E450E、S454C、S454M、S454T、V455N、V455Q、V456N、V456Q、L457F、L457W、L457Y、Q459K、Q459R、L463N、L463Q、E495D、T506F、T506W、T506Y、T508K、T508R、T508S、F509C、F509I、F509L、F509M、F509V、F509W、F509Y、A511F、A511W、A511Y、D512F、D512W、D512Y、T515C、T515H、T515N、T515P、T515Q、T515S、L516F、L516S、L516T、L516W、L516Y、S517C、S517F、S517M、S517T、S517W、S517Y、K519A、K519G、K519I、K519L、K519V、R521F、R521W、 R521Y、 I523A、 I523D、 I523E、 I523F、 I523G、 15231、 I523K、 I523L、 I523N、 I523Q、I523R、I523V、I523W、I523Y、K524A、K524G、K524I、K524L、K524V、K525A、K525G、K525I、K525L、K525V、Q526C、Q526M、Q526S、Q526T、Q526Y、T527F、T527W、T527Y、E531A、E531G、E531I、E531L、E531V、H535D、H535E、H535P、K538F、K538W、K538Y、A539I、A539L、A539V、K541F、K541W、K541Y、K557A、K557G、K557I、K557L、K557V、A561F、A561W、A561Y、T566F、T566W、T566Y、A569H和A569P。在某些實施方案中，結構域III中的一個以上的胺基酸取代(例如，2、3、4、5...)或甚至所有胺基酸取代均選自前述取代。在其他特定實施方案中，多肽(例如，HSA變體多肽或嵌合多肽)的HSA部分的結構域III包含選自由下列組成的組中的至少一個胺基酸取代V381N、E383G、N391V、Y401E、K402A、L407N、L407Y、Y411Q、K414S、K413S、V415T、V415C、Q416P、V424I、V424Q、V426E、V426H、G434C、E442K、R445W、P447S、E450D、S454C、V455N、V456N、L457F、Q459R、L463N、E495D、T506Y、T508R、T508S、F509I、F509M、F509W、A511F、D512Y、T515P、T515Q、T515S、L516T、L516W、S517C、S517W、K519I、R521W、I523D、I523E、I523Q、I523K、I523G、I523R、I523Y、K524L、K524V、K525V、Q526T、Q526M、Q526Y、T527Y、E531I、H535N、H535P、K538Y、A539I、K541F、K557G、A561F、T566W和A569P。在某些實施方案中，結構域III中的一個以上的胺基酸取代(例如，2、3、4、5...)或甚至所有胺基酸取代均選自前述取代。在其他特定實施方案中，多肽(例如，HSA變體多肽或嵌合多肽)的HSA部分的結構域III包含選自由下列組成的組中的至少一個胺基酸取代L407N、L407Y、V415T、V424I、V424Q、V426E、V426H、P447S、V455N、V456N、L463N、E495D、T506Y、T508R、F509M、F509W、 A511F、D512Y、T515Q、L516T、L516W、S517W、R521W、I523D、I523E、I523G、I523K、I523R、K524L、Q526M、T527Y、H535P和K557G。在某些實施方案中，結構域III中的一個以上的胺基酸取代(例如，2、3、4、5...)或甚至所有胺基酸取代均選自前述取代。在其他特定實施方案中，多肽(例如，HSA變體多肽或嵌合多肽)的HSA部分的結構域III包含選自由下列組成的組中的至少一個胺基酸取代L407Y、V415T、V424I、V424Q、P447S、V455N、V456N、L463N、E495D、T506Y、T508R、S517W、I523D、I523E、I523G、I523K、15231 、1(52禮、052611、了527￥、11535 和1(5576。在某些實施方案中，結構域III中的一個以上的胺基酸取代(例如，2、3、4、5...)或甚至所有胺基酸取代均選自前述取代。在某些實施方案中，多肽(例如，HSA變體多肽或嵌合多肽)的HSA部分的結構域III包含選自由下列組成的組中的HSA結構域III的胺基酸取代(a)E383G/K413S ；(b)Y401E/I523G ； (c)L407N/P447S ； (d)L407N/P447S/A539I ； (e)L407N/F509M ； (f)L407Y/Q526T ； (g)Y411Q/H535N ； (h)K414S/V456N ； (i)V415T/A569P ； (j)V426H/Q526Y ； (k)E442K/E450D/Q459R ； (I)L463N/T508R ； (m)T508R/K519I/K525V ； (n)F509I/T527Y ； (o)I523Q/K538Y ;(p)Q526M/K557G ;以及(q)K541F/A561F。在某些實施方案中，結構域III中的一個以上的胺基酸取代(例如，2、3、4、5...)或甚至所有胺基酸取代均選自前述取代。在某些實施方案中，多肽(例如HSA變體多肽或嵌合多肽)的HSA部分的結構域III包含選自由下列組成的組中的HSA結構域III的胺基酸取代(a)L407N/P447S ；(b)L407N/P447S/A539I ； (c)L407N/F509M ； (d)Y411Q/H535N ； (e)K414S/V456N ； (f)V426H/Q526Y ； (g) L463N/T508R ； (h) F509I/T527Y ； (i) I523Q/K538Y ； (j) Q526M/K557G ;以及(k)K541F/A561F。此外，片段或變體可使用本領域已知的技術以化學方法合成，例如常規的Merrifield固相f_Moc或t_Boc化學法。所述片段或變體可(以重組方式或化學合成)而產生並對其測試以鑑定(例如)可與天然HSA蛋白質同樣發揮作用或與天然HSA蛋白質的基本相似地發揮作用的那些片段或變體。在某些實施方案中，本發明預期對HSA多肽的結構進行修飾以用於這樣的目的，諸如增強治療或預防功效或穩定性(例如，血清半衰期、活體外保質期和對體內的蛋白降解的抗性)。這類修飾的HSA多肽具有與天然存在(S卩，天然或野生型)的HSA多肽相同或基本相同的生物活性。如本文中所述，可將修飾的HSA多肽綴合至其他治療部分(例如，蛋白質或非蛋白質物質)。修飾的多肽可通過(例如)胺基酸取代、缺失或添加來產生。例如，可以合理預期(例如)，用異亮氨酸或纈氨酸置換亮氨酸，用穀氨酸置換天冬氨酸，用絲氨酸置換蘇氨酸，或用結構上相關的胺基酸類似地置換另一胺基酸的單獨取代(例如，保守胺基酸取代)將對所得分子的生物活性不具有主要影響。保守置換是在其側鏈有關聯的胺基酸的家族中發生的那些。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在多個物種中為保守的殘基。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在多個物種中為保守的殘基。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中為保守的殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自於人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中為保守的殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。在某些實施方案中，HSA結構域III中的·至少一個所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中為保守的殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自與人高度保守的物種(例如猿和猴)。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在來自非哺乳動物的血清白蛋白蛋白質中為保守的殘基。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中為保守的殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自與人高度保守的物種(例如猿和猴)。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在來自非哺乳動物的血清白蛋白蛋白質中為保守的殘基。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中為保守的殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬中的大部分。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中為保守的殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自選自由下列組成的組中的至少兩個物種人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中為保守的殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自選自由下列組成的組中的至少三個物種人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中為保守的殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自選自由下列組成的組中的至少四個物種人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中為保守的殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自選自由下列組成的組中的至少五個物種人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中為保守的殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自選自由下列組成的組中的兩至五個物種人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中為保守的殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬中的大部分。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中為保守的殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自選自由下列組成的組中的至少兩個物種人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中為保守的殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自選自由下列組成的組中的至少三個物種人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中為保守的殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自選自由下列組成的組中的至少四個物種人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中為保守的殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自選自由下列組成的組中的至少五個物種人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中為保守的殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自選自由下列組成的組中的兩至五個物種人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。還預期包含前述胺基酸取代類別的任何組合的多肽(例如，HSA變體和嵌合多肽)。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個胺基酸取代位於以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基383、殘基389、殘基391、殘基 410、殘基417、殘基425、殘基442、殘基465、殘基467、殘基468、殘基486、殘基499、殘基502、殘基520、殘基532、殘基536、殘基543和殘基571。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個胺基酸取代位於以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基417、殘基442、殘基499和殘基502。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個胺基酸取代位於以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進打編號殘基392、殘基399、殘基403、殘基411、殘基412、殘基414、殘基416、殘基418、殘基420、殘基423、殘基434、殘基437、殘基438、殘基445、殘基448、殘基450、殘基453、殘基461、殘基476、殘基477、殘基484、殘基485、殘基487、殘基488、殘基494、殘基497、殘基507、殘基509、殘基514、殘基529、殘基534、殘基537、殘基540、殘基551、殘基558、殘基559、殘基567、殘基568、殘基572。在某些實施方案中，在結構域III中的一個以上的胺基酸取代(例如，2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18)或甚至所有胺基酸取代均在前述殘基中。特別預期包含任何一或多個前述殘基中的胺基酸取代的所有組合的多肽(例如，HSA變體和嵌合多肽)。在某些實施方案中，在結構域III中的至少一個胺基酸取代位於以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA結構域III中的位置進行編號殘基383、殘基391、殘基411、殘基414、殘基416、殘基434、殘基442、殘基445、殘基450和殘基509。在某些實施方案中，在HSA結構域III中的至少一個胺基酸取代選自由下列組成的組E383A、E383G、E383I、E383L、E383V、N391A、N391G、N391I、N391L、N391V、Y411Q、Y411N、K414S、K414T、Q416H、Q416P、G434C、G434S、G434T、E442K、E442R、R445F、R445W、R445Y、E450D、E450E、F509C、F509I、F509L、F509M、F509V、F509W 和 F509Y。在某些實施方案中，在結構域III中的一個以上的胺基酸取代(例如，2、3、4、5...)或甚至所有胺基酸取代均選自前述取代。在某些實施方案中，在HSA結構域III中的至少一個胺基酸取代位於以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA結構域III中的位置進行編號殘基380、殘基381、殘基384、殘基387、殘基396、殘基401、殘基404、殘基405、殘基406、殘基409、殘基419、殘基421、殘基422、殘基424、殘基428、殘基430、殘基431、殘基433、殘基441、殘基457、殘基458、殘基463、殘基464、殘基466、殘基469、殘基470、殘基474、殘基475、殘基480、殘基481、殘基489、殘基491、殘基495、殘基500、殘基508、殘基510、殘基515、殘基516、殘基524、殘基525、殘基526、殘基528、殘基531、殘基535、殘基539、殘基544、殘基547、殘基576。在某些實施方案中，在結構域III中的一個以上的胺基酸取代(例如，2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18)或甚至所有胺基酸取代均在前述殘基中。特別預期包含任何一或多個前述殘基中的胺基酸取代的所有組合的多肽(例如，HSA變體和嵌合多肽)。在某些實施方案中，在HSA結構域III中的至少一個胺基酸取代位於以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA結構域III中的位置進行編號殘基381、殘基401、殘基424、殘基457、殘基463、殘基495、殘基508、殘基515、殘基516、殘基524、殘基525、殘基526、殘基531、殘基535和殘基539。
在某些實施方案中，在結構域III中的至少一個胺基酸取代選自由下列組成的組V381N、V381Q、Y401D、Y401E、V242A、V242G、V424I、V424L、V424N、V424Q、V424V、L457F、L457W、L457Y、L463N、L463Q、E495D、T508K、T508R、T508S、T515C、T515H、T515N、T515P、T515Q、T515S、L516F、L516S、L516T、L516W、L516Y、K524A、K524G、K524I、K524L、K524V、K525A、K525G、K525I、K525L、K525V、Q526C、Q526M、Q526S、Q526T、Q526Y、E531A、E531G、E531I、E531L、E531V、H535D、H535E、H535P、A539I、A539L 和 A539V。在某些實施方案中，在結構域III中的一個以上的胺基酸取代(例如，2、3、4、5...)或甚至所有胺基酸取代均選自前述取代。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在多個物種中為不保守的殘基。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在多個物種中為不保守的殘基。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中為不保守的殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自人、大鼠、狗、兔和牛。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中為不保守的殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自人、大鼠、狗、兔和牛。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中為不保守的殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自人、大鼠、狗、兔和牛。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在血清白蛋白蛋白質中的非保守殘基，這些血清白蛋白蛋白質來自人、大鼠、狗、兔和牛。還預期包含前述胺基酸取代類別的任何組合的多肽(例如，HSA變體和具有HSA部分的嵌合多肽)。在某些實施方案中，在HSA結構域III中的至少一個胺基酸取代位於以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基382、殘基385、殘基390、殘基397、殘基400、殘基402、殘基415、殘基429、殘基432、殘基435、殘基439、殘基440、殘基443、殘基444、殘基446、殘基447、殘基459、殘基471、殘基472、殘基478、殘基479、殘基483、殘基490、殘基492、殘基493、殘基503、殘基511、殘基517、殘基518、殘基519、殘基521、殘基538、殘基541、殘基542、殘基546、殘基549、殘基550、殘基552、殘基554、殘基556、殘基560、殘基562、殘基563、殘基565和殘基566。在某些實施方案中，在結構域III中的一個以上的胺基酸取代(例如，2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18)或甚至所有胺基酸取代均在前述殘基中。特別預期包含任何一或多個前述殘基中的胺基酸取代的所有組合的多肽(例如HSA變體和具有HAS部分的嵌合多肽)。在某些實施方案中，在HSA結構域III中的至少一個胺基酸取代位於以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基402、殘基415、殘基447、殘基459、殘基511、殘基517、殘基519、殘基521、殘基538、殘基541和殘基566。在某些實施方案中，在HSA結構域III中的至少一個胺基酸取代選自由下列組成的組K402A、K402G、K402I、K402L、K402V、V415C、V415S、V415T、P447S、P447T、Q459K、Q459R、L463N、L463Q、A511F、A511W、A511Y、S517C、S517F、S517M、S517T、S517W、S517Y、K519A、K519G、K519I、K519L、K519V、R521F、R521W、R521Y、K538F、K538W、K538Y、K541F、K541W、K541Y、T566F、T566W和T566Y。在某些實施方案中，在結構域III中的一個以上的胺基酸取代(例如，2、3、4、5...)或甚至所有胺基酸取代均選自前述取代。 在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是表面可及殘基。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均是表面可及殘基。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是表面可及殘基且在多個物種中為保守的殘基。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是表面可及殘基且在多個物種中為保守的殘基。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代位於以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基383、殘基389、殘基391、殘基410、殘基417、殘基425、殘基442、殘基465、殘基467、殘基468、殘基486、殘基499、殘基502、殘基520、殘基532、殘基536、殘基543和殘基571。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個胺基酸取代位於以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基417、殘基422、殘基499和殘基502。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個胺基酸取代位於以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基383、殘基391和殘基442。在某些實施方案中，在結構域III中的一個以上的胺基酸取代(例如，2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18)或甚至所有胺基酸取均在前述殘基中。特別預期包含前述胺基酸取代類別的任何組合的多肽(例如，HSA變體和嵌合多肽)。在某些實施方案中，在HSA結構域III中的至少一個胺基酸取代選自下列組成的組E383A、E383G、E383I、E383L、E383V、N391A、N391G、N391I、N391L、N391V、E442K、E442R。在某些實施方案中，在結構域 III 中的一個以上的胺基酸取代(例如，2、3、4、5...)或甚至所有胺基酸取代均選自前述取代。在某些實施方案中，在HSA結構域III中的至少一個胺基酸取代不僅僅是R410C ；K466E ；E479K ；D494N ；E501K ；E505K ；V533M ；K536E536 ；K541E ；D550A 或 D550G ；K560E ；D563N ；E565K ；E570K ；K573E ;或 K574E 的取代。在某些實施方案中，多肽(例如，HSA變體和具有HSA部分的嵌合多肽)包含HSA結構域III，其包含與SEQ ID NO :1具有至少80%、85%或至少90%同一性的胺基酸序列。在某些實施方案中，HSA結構域III包含與SEQ ID NO :1具有至少95%同一性的胺基酸序列。在某些實施方案中，HSA結構域III包含與SEQ ID NO :1具有至少98%同一性的胺基酸序列。在某些實施方案中，HSA部分包含與SEQ ID N0:2的對應部分具有至少80%、85%或至少90%同一性的胺基酸序列。在某些實施方案中，HSA部分包含與SEQ ID NO :2的對應部分具有至少95%同一性的胺基酸序列。在某些實施方案中，HSA部分包含與SEQ ID NO:2的對應部分具有至少98%同一性的胺基酸序列。在某些實施方案中，本公開預期，除HSA結構域III中的一個或多個胺基酸取代夕卜，多肽(例如，HSA變體和具有HSA部分的嵌合多肽)可包括結構域III以外的HSA部分中的一或多個胺基酸取代。在某些實施方案中，本公開預期，除HSA結構域III中的一或多個胺基酸取代，多肽(例如，HSA變體和具有HSA部分的嵌合多肽)也可包括結構域III中的一或多個胺基酸缺失和/或插入(例如，1、2、3、4、5、6、7、8)。應注意，當HSA部分包含一或多個胺基酸缺失和/或插入時，這些插入或缺失的殘基可使用字母表示，以致不幹擾相對於天然HSA的殘基的編號。例如，若在殘基414與415之間插入胺基酸殘基，則可將此殘基表示為414a。在某些實施方案中，所插入的胺基酸殘基插在表面可及環中以增加此環的大小。在某些實施方案中，插入的胺基酸殘基插在螺旋中以增加此螺旋的大小和/或改變其結構。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域 III的環2中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的環2中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含一至五個(1、2、3、4、5)胺基酸取代，其中所述一至五個胺基酸取代在HSA結構域III的環2中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含HSA結構域III的環2中的一至五個(1、2、3、4或5)胺基酸取代，且另外包括不在環2中的HSA結構域III中的一或多個另外的胺基酸取代。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環3中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的環3中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含一至五個(1、2、3、4、5)胺基酸取代，其中所述一至五個胺基酸取代在HSA結構域III的環3中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含HSA結構域III的環3中的一至五個(1、2、3、4或5)胺基酸取代，且另外包括不在環3中的HSA結構域III中的一或多個另外的胺基酸取代。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環6中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的環6中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含一至十八個(1、2、3、4、5、6等)胺基酸取代，其中所述一至十八個胺基酸取代均在HSA結構域III的環6中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含HSA結構域III的環6中的一至十八個(1、2、3、4、5、6等)胺基酸取代，且另外包括不在環6中的HSA結構域III中的一或多個另外的胺基酸取代。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋7中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的螺旋7中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含一至六個(1、2、3、4、5或6)胺基酸取代，其中所述一至六個胺基酸取代均在HSA結構域III的螺旋7中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含HSA結構域III的螺旋7中的一至六個(1、2、3、4、5或6)胺基酸取代，且另外包括不在螺旋7中的HSA結構域III中的一或多個另外的胺基酸取代。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環7中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的環7中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含一至三個(1、2或3)胺基酸取代，其中所述一至三個胺基酸取代在HSA結構域III的環7中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含HSA結構域III的環7中的一至三個(1、2或3)胺基酸取代，且另外包括不在環線7中的HSA結構域III中的一或多個另外的胺基酸取代。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋8中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的螺旋8中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含一至十八個(1、2、3、4、5、6等)胺基酸取代，其中所述一至十八個胺基酸取代均在HSA結構域III的螺旋8中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含HSA結構域III的螺旋8中的一至六個(1、2、3、4、5、6等)胺基酸取代，且另外包括不在螺旋8中的HSA結構域III中的一或多個另外的胺基酸取代。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環8中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的環8中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含一至五個(1、2、3、4或5)胺基酸取代，其中所述一至五個胺基酸取代在HSA結構域III的環8中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含HSA結構域III的環8中的一至五個(1、2、3、4或5)胺基酸取代，且另外包括不在環8中的HSA結構域III中的一或多個另外的胺基酸取代。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少 一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環9中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的環9中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含一至四個胺基酸取代，其中所述一至四個(1、2、3、4)胺基酸取代在HSA結構域III的環9中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含HSA結構域III的環9中的一至五個(I、2、3、4或5)胺基酸取代，且另外包括不在環9中的HSA結構域III中的一或多個另外的胺基酸取代。如上所述，在每一位置處的可能的胺基酸取代均獨立地選自上述任何取代類型(例如，丙氨酸取代、保守性取代等)。同樣預期包含前述胺基酸取代類別的任何組合的多肽(例如，HSA變體和嵌合多肽)。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所述胺基酸取代不在HSA結構域III的環2中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所述胺基酸取代不在HSA結構域III的環3中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所述胺基酸取代不在HSA結構域III的環6中。在某些實施方案中，所述胺基酸取代不在HSA結構域III的螺旋7中。在某些實施方案中，所述胺基酸取代不在HSA結構域III的環7中。在某些實施方案中，所述胺基酸取代不在HSA結構域III的螺旋8中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所述胺基酸取代不在HSA結構域III的環8中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所述胺基酸取代不在HSA結構域III的環9中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所述胺基酸取代不在HSA結構域III的選自由環2、3、6、7、8和9組成的組中的至少兩個環中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所述胺基酸取代不在HSA結構域III的選自由環2、3、6、7、8和9組成的組中的至少三個環中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所述胺基酸取代不在HSA結構域III的選自由環2、3、6、7、8和9組成的組中的至少四個環中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所述胺基酸取代不在螺旋7或8中。在某些實施方案中，結構域III包含至少兩個胺基酸取代且所述胺基酸取代在HSA結構域III的選自由環2、3、6、7、8和9以及螺旋7和8組成的組中的至少兩個環和/或螺旋中。在某些實施方案中，結構域III包含至少三個胺基酸取代且所述胺基酸取代在HSA結構域III的選自由環2、3、6、7、8和9以及螺旋7和8組成的組中的至少三個環和/或螺旋中。在某些實施方案中，結構域III包含至少四個胺基酸取代且所述胺基酸取代在HSA結構域III的選自由環2、3、6、7、8和9以及螺旋7和8組成的組中的至少四個環和/或螺旋中。在某些實施方案中，結構域III包含至少五個胺基酸取代且所述胺基酸取代在HSA結構域III的選自由環2、3、6、7、8和9以及螺旋7和8組成的組中的至少五個環和/或螺旋中。在某些實施方案中，結構域III包含至少六個胺基酸取代且所述胺基酸取代在HSA結構域III的選自由環2、3、6、7、8和9以及螺旋7和8組成的組中的至少六個環和/或螺旋中。在某些實施方案中，結構域III包含至少五個胺基酸取代且所述胺基酸取代在HSA結構域III的環2、3、6、7、8和9的每一個中。在某些實施方案中，結構域III包含至少六個胺基酸取代且所述胺基酸取代在HSA結構域III的環2、3、6、7、8和9的每一個中。在某些實施方案中，結構域III包含至少兩個胺基酸取代且所述胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋7和8的每一個中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在環2中且選自殘基415、殘基416、殘基417、殘基418和殘基419。在某些實施方案中，一個以上(2、3、 4、5)的胺基酸取代在環2中且選自殘基415、殘基416、殘基417、殘基418和殘基419。在某些實施方案中，在HSA結構域III環2中的至少一個所述胺基酸取代選自V415C、V415S、V415T、Q416H和Q416P。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在環3中且選自殘基439、殘基440、殘基441、殘基442和殘基443。在某些實施方案中，一個以上(2、3、4、5)的胺基酸取代在環3中且選自殘基439、殘基440、殘基441、殘基442和殘基443。在某些實施方案中，在HSA結構域III環3中的至少一個所述胺基酸取代選自E442K和E442R。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在環6中且選自殘基492、殘基493、殘基494、殘基495、殘基496、殘基497、殘基498、殘基499、殘基500、殘基501、殘基502、殘基503、殘基504、殘基505、殘基506、殘基507、殘基508和殘基509。在某些實施方案中，一個以上(2、3、4、5、6、7、8、9、10等)胺基酸取代在環6中且選自殘基492、殘基493、殘基494、殘基495、殘基496、殘基497、殘基498、殘基499、殘基500、殘基501、殘基502、殘基503、殘基504、殘基505、殘基506、殘基507、殘基508和殘基509。在某些實施方案中，在HSA結構域III環6中的至少一個所述胺基酸取代選自T506F、T506W、T506Y、T508K、T508R、T508S、F509C、F509I、F509L、F509M、F509V、F509W 和F509Y。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在螺旋7中且選自殘基510、殘基511、殘基512、殘基513、殘基514和殘基515。在某些實施方案中，一個以上(2、3、4、5、6)的胺基酸取代在螺旋7中且選自殘基510、殘基511、殘基512、殘基513、殘基514和殘基515。在某些實施方案中，在HSA結構域III環7中的至少一個所述胺基酸取代選自:A511F、A511W、A511Y、D512F、D512W、D512Y、T515C、T515H、T515N、T515P、T515Q和T515S。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在環7中且選自殘基516、殘基517和殘基518。在某些實施方案中，一個以上(2、3)胺基酸取代在環7中且選自殘基516、殘基517和殘基518。在某些實施方案中，在HSA結構域III環7中的至少一個所述胺基酸取代選自L516F、L516S、L516T、L516W、L516Y、S517C、S517F、S517M、S517T、S517W和S517Y。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在螺旋8中且選自殘基519、殘基518、殘基519、殘基520、殘基521、殘基522、殘基523、殘基524、殘基525、殘基526、殘基527、殘基528、殘基529、殘基530、殘基531、殘基532、殘基533、殘基534、殘基535和殘基536。在某些實施方案中，一個以上(2、3、4、5、6、7、8、9、10等)胺基酸取代在螺旋8中且選自殘基519、殘基518、殘基519、殘基520、殘基521、殘基522、殘基523、殘基524、殘基525、殘基526、殘基527、殘基528、殘基529、殘基530、殘基531、殘基532、殘基533、殘基534、殘基535和殘基536。在某些實施方案中，在HSA結構域III螺旋8中的至少一個所述胺基酸取代選自K519A、K519G、K519I、K519L、K519V、R521F、R521W、 R521Y、 I523A、 I523D、 I523E、 I523F、 I523G、 15231、 I523K、 I523L、 I523N、 I523Q、I523R、I523V、I523W、I523Y、K524A、K524G、K524I、K524L、K524V、K525A、K525G、K525I、K525L、K525V、Q526C、Q526M、Q526S、Q526T、Q526Y、T527F、T527W、T527Y、E531A、E531G、￡5311、￡5311、￡531￥、昍350、昍35￡和冊35卩。在某些實施方案中，在HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在環8中且選自殘基537、殘基538、殘基539、殘基540和殘基541。在某些實施方案中，一個以上(2、3、4、5)胺基酸取代在環8中且選自殘基537、殘基538、殘基539、殘基540和殘基541。在某些實施方案中，在HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在環9中且選自殘基561、殘基562、殘基563、殘基564。在某些實施方案中，在HSA結構域III環8中的至少一個所述胺基酸取代選自K538F、K538W、K538Y、A539I、A539L、A539V、K541F、K541W、K541Y。在某些實施方案中，一個以上(2、3、4)的胺基酸取代 在環9中且選自殘基561、殘基562、殘基563、殘基564。在某些實施方案中，在HSA結構域III環9中的至少一個所述胺基酸取代選自A561F、A561W和A561Y。另外預期結構域III中的插入和缺失，其(例如)增加或減少HSA結構域III環的長度。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所述插入或缺失改變環2的長度。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所述插入或缺失改變環3的長度。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所述插入或缺失改變環6的長度。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所述插入或缺失改變螺旋7的長度。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所述插入或缺失改變環7的長度。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所述插入或缺失改變螺旋8的長度。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所述插入或缺失改變環8的長度。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所述插入或缺失改變環9的長度。在某些實施方案中，結構域III中的所述插入或缺失改變選自由環2、3、6、7、8和9以及螺旋7和8組成的組中的至少兩個環和/或螺旋的長度。在某些實施方案中，結構域III中的所述插入或缺失改變選自由環2、3、6、7、8和9以及螺旋7和8組成的組中的至少三個環和/或螺旋的長度。在某些實施方案中，結構域III中的所述插入或缺失改變選自由環2、3、6、7、8和9以及螺旋7和8組成的組中的至少四個環和/或螺旋的長度。在某些實施方案中，結構域III中的所述插入或缺失改變選自由環2、3、6、7、8和9以及螺旋7和8組成的組中的至少五個環和/或螺旋的長度。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所述插入或缺失改變HSA結構域III的環2、3、6、7、8和9中的每一個的長度。應注意，當多個環和/或螺旋改變時，本公開預期這些環和/或螺旋均獨立地發生改變，從而可以通過插入增加一或多個環/螺旋，或可以通過缺失減少一或多個環/螺旋。對於其中結構域III包括胺基酸的插入或缺失的實施方案，本公開預期一個胺基酸的插入或缺失。同樣預期超過一個胺基酸，例如2、3、4、5、6、7、8、9、10個胺基酸的插入或缺失。在某些實施方案中，本公開預期超過10個胺基酸殘基，例如10至20、20至40、40至50、50至100個胺基酸的插入或缺失。與本公開的嵌合多肽和HSA變體多肽相一致，對包括插入或缺失的組合物進行測試以證實其保留FcRn的結合活性。優選的組合物為相對於對照提供增加的FcRn結合和/或血清半衰期的組合物。為清晰的目的，本公開特別預期任何前述或下列方面和實施方案的組合。在包含HSA部分的嵌合多肽情形中，以及在包含HSA部分的變體HSA多肽情形中，此種HSA部分包含結構域III或其FcRn結合部分。此外，如上所述，HSA部分的結構域III包括一至十八個胺基酸取代。在某些實施方案中，HSA部分的結構域III包括1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17或18個胺基酸取代。示例性的胺基酸取代包括(i)用丙氨酸置換；
(ii)保守的胺基酸取代；(iii)非保守的胺基酸取代。本公開預期給定多肽的結構域III中的所有胺基酸取代均可為這些胺基酸取代類型中的一者，且預期給定多肽的結構域III中的每一胺基酸取代均可個別地且獨立地選自這些類別。在某些實施方案中，結構域III中的天然半胱氨酸殘基得以保留並且未被取代。在某些實施方案中，結構域III中的天然脯氨酸殘基得以保留並且未被取代。在某些實施方案中，結構域III中的天然半胱氨酸殘 基和天然脯氨酸殘基得以保留並且未被取代。在某些實施方案中，半胱氨酸殘基未被取代(例如，未使用半胱氨酸置換天然殘基)。在某些實施方案中，脯氨酸殘基未被取代(例如，未使用脯氨酸置換天然殘基)。在其他實施方案中，使用二十種胺基酸中的任一種取代給定的天然殘基。同樣期望包含前述胺基酸取代類型的任何組合的HSA變體和嵌合多肽。本發明涵蓋具有HSA部分的變體和嵌合多肽，所述HSA部分包含與本文所述的胺基酸序列基本相同的序列中的胺基酸。與本文所述序列基本相同的胺基酸序列包括包含保守胺基酸取代的序列，以及胺基酸缺失和/或插入。保守胺基酸取代是指第一胺基酸被具有與第一胺基酸的化學和/或物理特性(例如電荷、結構、極性、疏水性/親水性)類似特性的第二胺基酸置換。保守胺基酸取代包括一種胺基酸被用下列組中的另一種胺基酸置換賴氨酸(K)、精氨酸(R)和組氨酸(H);天冬氨酸(D)和穀氨酸(E);天冬醯胺(N)、穀氨醯胺(Q)、絲氨酸⑶、蘇氨酸⑴、酪氨酸⑴、K、R、H、D和E ;丙氨酸(A)、纈氨酸(V)、亮氨酸(U、異亮氨酸(I)、脯氨酸(P)、苯丙氨酸(F)、色氨酸(W)、蛋氨酸(M)、半胱氨酸(C)和甘氨酸(G)麼胃和丫^^和！'。在某些實施方案中，所述HSA變體多肽是實質上純化的。在某些實施方案中，所述嵌合多肽是實質上純化的。在某些方面，本公開提供組合物，其包含本公開的HSA變體或嵌合多肽，以及藥物上可接受的載體。在某些實施方案中，組合物是無菌組合物。在某些實施方案中，組合物為非致熱的。6. 4組合的結構域III突變體本發明進一步預期產生包含結構域III的HSA部分的組合突變體以及截短突變體的組，且本發明尤其可用於鑑定生物活性變體序列。可產生源自組合的變體，其相對於天然存在的HSA多肽具有選擇性潛能。同樣，誘變可產生具有與對應的野生型HSA多肽顯著不同的細胞內半衰期的變體。例如，可使改變的蛋白質對蛋白降解或導致目標蛋白質破裂或失活的其他細胞過程更穩定或較不穩定。此類變體可用於通過調節其半衰期來改變HSA多肽水平。存在許多藉此可例如由簡併寡核苷酸序列產生潛在的HSA變體序列的文庫的方法。可在自動DNA合成儀中進行簡併基因序列的化學合成，並且接著將合成基因連接至適當的基因用以表達。簡併基因組的目的是在一個混合物中提供編碼所需潛在多肽序列組的所有序列。簡併寡核苷酸的合成在本領域中是眾所周知的(參見，例如，Narang,SA(1983)Tetrahedron39 3 ；Itakura 等，(1981)Recombinant DNA, Proc. 3rd ClevelandSympos. Macromolecules,編著 AG Walton,Amsterdam Elsevier pp273~289 ;Itakura 等，(1984) Annu. Rev. Biochem. 53 :323 ;Itakura 等,(1984) Science 198 :1056 ;Ike 等，(1983)Nucleic Acid Res. 11 :477)。此類技術已用於其他蛋白質的定向進化(參見,例如，Scott等，(1990)Science249 :386-390 ；Roberts 等，(1992)PNAS USA 89 :2429-2433 ;Devlin 等，(1990) Science 249 :404-406 ;Cwirla 等，(1990) PNAS USA 87 :6378-6382 ;以及美國專利No 5, 223，409,5, 198，346 和 5，096，815)。或者，可使用其他誘變形式以產生組合文庫。例如，可使用例如丙氨酸掃描誘變等通過篩選從一文庫中產生和分離HSA多肽變體(Ruf等，(1994)Biochemistry 33:1565-1572 ；ffang 等，(1994) J. Biol. Chem. 269 :3095-3099 ；Balint 等，(1993)Gene 137 109-118 ；Grodberg 等，(1993) Eur. J. Biochem. 218 :597-601 ;Nagashima 等，(1993)J.Biol. Chem. 268 :2888-2892 ;Lo碰an 等，(1991)Biochemistry30 :10832-10838 ；以及 Cunningham 等,(1989) Science 244:1081-1085);通過接頭掃描誘變(Gustin 等,(1993)Virology 193 :653-660 ；Brown 等，(1992)Mol. Cell Biol. 12 :2644-2652 ；McKnight 等，(1982) Science232 :316);通過飽和誘變(Meyers 等，(1986) Science 232 :613);通過 PCR誘變(Leung等，(1989)Method Cell Mol Biol :11-19);或通過隨機誘變，包括化學誘變等(Miller 等，(1992)A Short Course in Bacterial Genetics, CSHL Press, Cold SpringHarbor, NY ;以及 Greener 等，(1994) Strategies in Mol Biol 7 :32-34)。尤其以組合設置的形式的接頭掃描誘變對於鑑定HSA多肽的截短(生物活性)形式是很有吸引力的方法。本文還提供產生和篩選HSA多肽變體文庫的其他方法，參見(例如)命名為「舉例說明」的第8章節。具體而言，章節8. 10和8. 11是用於產生和篩選組合HSA結構域III突變體文庫的特定方法。本公開的多肽中的胺基酸取代的上述任何實施方案均可用於產生肽文庫。在某些實施方案中，在HSA結構域III中的殘基中產生源自組合的變體。在某些實施方案中，在以下一或多個情形下，引入且篩選結構域III突變(i)僅變體結構域III構建體；(ii)變體結構域III構建體存在於全長HSA情形下；或(iii)在為截短HSA或包含至少結構域III的嵌合多肽的情形下。在某些實施方案中，從肽文庫篩選出變體，其相對於初始多肽具有對FcRn增加的親和力和增加的血清半衰期中的一者或兩者。在某些實施方案中，使用本申請所述的標準體外測定(例如，流式細胞儀)評估變體。在某些實施方案中，鑑定出展示對FcRn增加的親和力的變體。在其他實施方案中，篩選變體以確定對FcRn增加的親和力是否僅出現在酸性pH下(例如，pH為約5. 5)，而不出現在中性pH下(例如，pH為約7. 4)。在某些實施方案中，源自組合的變體包含在以下任何位置處的至少兩個胺基酸取代，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基407、殘基415、殘基463、殘基495、殘基508、殘基509、殘基511、殘基512、殘基515、殘基516、殘基517、殘基521、殘基523、殘基524、殘基526、殘基527和殘基557。在某些實施方案中，源自組合的變體包含選自由下列組成的組中的至少兩個胺基酸取代:L407N、L407Y、V415T、L463N、L463F、E495D、T508R、T508S、F509M、F509W、F509I、A511F、D512Y、D512M、T515Q、L516T、L516W、S517W、R521W、I523D、I523E、I523F、I523G、I523K、I523R、K524L、Q526A、Q526M、Q526Y、T527Y 和 T557G。在某些實施方案中，源自組合的變體包含在以下位置的HSA結構域III中的胺基酸取代，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號這些位置選自由以下組成的組(a)殘基 383 和 413 ； (b)殘基 401 和 523 ； (c)殘基 407 和 447 ； (d)殘基 407、447 和 539 ；(e)殘基407和509 ； (f)殘基407和526 ； (g)殘基411和535 ； (h)殘基414和456 ；⑴殘基 415 和 569 ； (j)殘基 426 和 526 ； (k)殘基 442,450 和 459 ； (I)殘基 463 和 508 ； (m)殘基508和519和525 ； (n)殘基509和527 ； (o)殘基523和538 ； (p)殘基526和557 ；以及(q)殘基 541 和 561。在某些實施方案中，在於多個物種中保守的殘基中產生源自組合的變體。在某些實施方案中，在表面可及殘基中產生源自組合的變體。在某些實施方案中，在表面可及且於 多個物種中保守的殘基中產生源自組合的變體。在某些實施方案中，在於多個物種中保守而在雞HSA中不保守的殘基中產生源自組合的變體。在某些方面，本公開提供包含多個多肽的文庫，其中所述多個多肽中的每一個都包含HSA結構域III、或其FcRn結合片段，且其中所述多個多肽中的每一個都獨立地包含在所述HSA結構域III中的殘基的至少一個胺基酸取代，所述殘基在來自人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬的血清白蛋白蛋白質中為保守的。在某些方面，本公開提供包含多個多肽的文庫，其中所述多個多肽中的每一個都包含HSA結構域III、或其FcRn結合片段，且其中所述多個多肽中的每一個都獨立包含在所述HSA結構域III中的殘基的至少一個胺基酸取代，所述殘基在來自人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬的血清白蛋白蛋白質中為保守的，而在來自雞的血清白蛋白中為不保守的。在某些方面，本公開提供包含多個多肽的文庫，其中所述多個多肽中的每一個都包含HSA結構域III或其FcRn結合片段，且其中所述多個多肽中的每一個都獨立包含在所述HSA結構域III中的殘基的至少一個胺基酸取代，所述殘基為表面可及殘基。在某些方面，本公開提供包含多個多肽的文庫，其中所述多個多肽中的每一個都包含HSA結構域III、或其FcRn結合片段，且其中所述多個多肽中的每一個都獨立包含在所述HSA結構域III中的殘基的至少一個胺基酸取代，所述殘基既為(i)表面可及殘基，且
(ii)在來自人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬的血清白蛋白蛋白質中為保守的。在某些實施方案中，所述表面可及殘基在HSA結構域III的環2中。在某些實施方案中，所述表面可及殘基在HSA結構域III的環3中。在某些實施方案中，所述表面可及殘基在HSA結構域III的環6中。在某些實施方案中，所述表面可及殘基在HSA結構域III的螺旋7中。在某些實施方案中，所述表面可及殘基在HSA結構域III的環7中。在某些實施方案中，所述表面可及殘基在HSA結構域III的螺旋8中。在某些實施方案中，所述表面可及殘基在HSA結構域III的環8中。在某些實施方案中，所述表面可及殘基在HSA結構域III的環9中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基383、殘基389、殘基391、殘基410、殘基417、殘基425、殘基442、殘基465、殘基467、殘基468、殘基486、殘基499、殘基502、殘基520、殘基532、殘基536、殘基543和殘基571。某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個胺基酸取代在以下位置中，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基417、殘基442、殘基499和殘基502。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基392、殘基399、殘基403、殘基411、殘基412、殘基414、殘基416、殘基418、殘基420、殘基423、殘基434、殘基437、殘基438、殘基445、殘基448、殘基450、殘基453、殘基461、殘基476、殘基477、殘基484、殘基485、殘基487、殘基488、殘基494、殘基497、殘基507、殘基509、殘基514、殘基529、殘基534、殘基537、殘基540、殘基551、殘基558、殘基559、殘基567、殘基568、殘基572。在某些實施方案中，在HSA結構域III中的至少一個胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA結構域III中的位置進行編號殘基380、殘基381、殘基384、殘基387、殘基396、殘基401、殘基404、殘基405、殘基406、殘基409、殘基419、殘基421、殘基422、殘基424、殘基428、殘基430、殘基431、殘基433、殘基441、殘基457、殘基458、殘基463、殘 基464、殘基466、殘基469、殘基470、殘基474、殘基475、殘基480、殘基481、殘基489、殘基491、殘基495、殘基500、殘基508、殘基510、殘基515、殘基516、殘基524、殘基525、殘基526、殘基528、殘基531、殘基535、殘基539、殘基544、殘基547、殘基576。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環2中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的環2中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含在HSA結構域III的環2中的至少一個所述胺基酸取代，且另外包括不在環2中的HSA結構域III中的一或多個另外的胺基酸取代。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環3中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的環3中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含在HSA結構域III的環3中的至少一個所述胺基酸取代，且另外包括不在環3中的HSA結構域III中的一或多個另外的胺基酸取代。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環6中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的環6中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含在HSA結構域III的環6中的至少一個所述胺基酸取代，且另外包括不在環6中的HSA結構域III中的一或多個另外的胺基酸取代。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋7中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的螺旋7中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含在HSA結構域III的螺旋7中的至少一個所述胺基酸取代，且另外包括不在螺旋7中的HSA結構域III中的一或多個另外的胺基酸取代。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環7中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的環7中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含在HSA結構域III的環7中的至少一個所述胺基酸取代，且另外包括不在環7中的HSA結構域III中的一或多個另外的胺基酸取代。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋8中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的螺旋8中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含在HSA結構域III的螺旋8中的至少一個所述胺基酸取代，且另外包括不在螺旋8中的HSA結構域III中的一或多個另外的胺基酸取代。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環8中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的環8中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含在HSA結構域III的環8中的至少一個所述胺基酸取代，且另外包括不在環8中的HSA結構域III中的一或多個另外的胺基酸取代。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環9中。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的環9中。在某些實施方案中，HSA結構域III包含在HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代，且另外包括不在環9中的HSA結構域III中的一或多個另外的胺基酸取代。在任何前述或以下方面或實施方案中的某些實施方案中，胺基酸取代可為將殘基變為丙氨酸。在任何前述或以下方面或實施方案中的某些實施方案中，胺基酸取代可為保守性胺基酸取代，其中用具有相似的電荷和其他特性的另一種殘基取代一種殘基。在任何 前述或以下方面或實施方案中的某些實施方案中，胺基酸取代可為非保守性胺基酸取代，其中用不具有相似電荷和相似其他特性的另一種殘基取代一種殘基。在任何前述或以下方面或實施方案中的某些實施方案中，胺基酸取代可為將殘基變為任何其他殘基。當HSA部分包括一個以上的胺基酸殘基時，可以預期取代可落入前述胺基酸取代類別中的任何一個或任何組合中。例如，所有取代可變為丙氨酸取代或可為保守性胺基酸取代，或可為非保守性胺基酸取代。或者，胺基酸取代可包括，例如，一個丙氨酸的變化、一個保守性胺基酸取代和一個非保守性胺基酸取代中的任何組合。本領域已知廣泛範圍的以下技術用於篩選通過點突變和截短製備的組合文庫的基因產物，並且就此而言用於篩選cDNA文庫的具有某種特性的基因產物。此類技術將通常適用於快速篩選通過對HSA多肽的組合誘變產生的基因文庫。用於篩選大量基因文庫最廣泛使用的技術通常包括將基因文庫克隆至可複製的表達載體，用所得載體文庫轉化適當的細胞，且在以下的條件下表達組合基因其中，所需活性的檢測有助於相對容易地分離編碼其產物被檢測的基因的載體。必要時，使以下描述的每個說明性測定均適用於高通分析以篩選通過組合誘變技術產生的大量簡併序列。在某些實施方案中，HSA多肽可包括肽和模擬肽。如本文所用術語「模擬肽」包括可化學上修飾的肽和肽樣分子，其含有非天然存在的胺基酸、類肽等。模擬肽提供超越肽的各種優點，包括當施用於受試者時增強的穩定性。鑑定模擬肽的方法在本領域眾所周知，並且包括篩選含有潛在模擬肽文庫的資料庫。例如，劍橋結構資料庫含有超過300，000種具有已知晶體結構的化合物的集合(Allen等，Acta Crystallogr.章節B, 35 :2331 (1979)。當沒有祀分子的晶體結構可用時，可使用(例如)程序CONCORD產生結構(Rusinko等，J. Chem. Inf. Comput. Sci. 29 :251 (1989)。另一資料庫，現有化學品目錄資料庫(AvailableChemicals Directory)(Molecular Design Limited,Informations Systems ;San LeandroCalif.)含有大約100，000種可商購的化合物並且也可對其搜索以鑑定HSA多肽的潛在模擬肽。在某些實施方案中，HSA多肽可進一步包含翻譯後修飾。示例性的翻譯後蛋白質修飾包括磷酸化、乙醯化、甲基化、ADP-核糖基化、泛素化、糖基化、羰基化、類泛素化(sumoylation)、生物素化或添加多肽側鏈或疏水基團。因此，修飾的HSA多肽可含有非胺基酸組分，例如脂類、聚糖或單糖，以及磷酸鹽。可測試此種非胺基酸組分對HSA多肽的功能性的作用以測試其生物活性，例如結合FcRn的能力。假定可以使天然HSA多肽糖基化，則在某些實施方案中，使用於根據本公開的嵌合多肽中的HSA多肽糖基化。在某些實施方案中，糖基化的水平和模式與天然HSA多肽相同或基本相同。在其他實施方案中，糖基化的水平和/或模式與天然HSA多肽不同(例如，低糖基化、過度糖基化、未糖基化)。在本發明的某些實施方案中，包含HSA部分的多肽(例如，HSA變體或嵌合多段)可綴合至非蛋白質物質。此類非蛋白質物質包括但不限於核酸分子、化學劑、有機分子等，其中每一個可從天然來源獲得(例如天然產物篩選)或可通過化學方式合成。在某些實施方案中，將HSA部分以化學方式綴合至非蛋白質物質。在本發明的一個具體實施方案中，可用非蛋白質聚合物修飾HSA多肽。在一具體實施方案中，聚合物為聚乙二醇(「PEG」)、聚丙二醇或聚氧化烯，如以美國專利No. 4，640，835 ;4，496，689 ;4，301，144 ;4，670，417 ;4，791，192 或 4，179，337 中所列的方 式。PEG是熟知的水溶性聚合物，其可商購或可根據本領域熟知的方法通過乙二醇的開環聚合製備(Sandler 和 Karo, Polymer Synthesis, Academic Press, New York,第 3 卷，第138-161 頁)。在某些實施方案中，HSA多肽的片段或變體將優選保留至少50%、60%、70%、80%、85%、90%、95%或100%與天然HSA多肽相關的生物活性。在某些實施方案中，HSA多肽的片段或變體具有相對於天然蛋白質增加的半衰期(tl/2)。對於其中半衰期增加的實施方案中，HSA片段或變體的半衰期相對於天然HSA蛋白質的半衰期增加至少
30%,40%, 50%,60%,70%,80%,90% ,100% ,125% ,150% ,175%,200%,250%,300%,400%或500%或甚至1000%。在一些實施方案中，在體外，例如在緩衝生理鹽水或血清中，測定蛋白質半衰期。在某些實施方案中，蛋白質的半衰期為體內半衰期，例如在動物的血清或其他體液中的蛋白質的半衰期。在某些方面，包含HSA部分的多肽可為進一步包含一或多個融合結構域的融合蛋白。此類融合結構域的熟知的例子包括但不限於多組氨酸、Glu-Glu、穀胱甘肽S轉移酶(GST)、硫氧還蛋白、蛋白質A、蛋白質G以及免疫球蛋白重鏈恆定區(Fe)、麥牙糖結合蛋白(MBP)，這些尤其可用於通過親和層析分離融合蛋白。為進行親和純化，使用用於親和層析的相關載體，例如與穀胱甘肽、澱粉酶以及鎳或鈷綴合的樹脂。融合結構域還包括「附加表位」，其通常為可獲得特異性抗體的短肽序列。可容易獲得特異性單克隆抗體的熟知附加表位包括FLAG、流感病毒血凝素(HA)以及c-myc標籤。在一些情形下，融合結構域具有蛋白酶切割位點，例如因子Xa或凝血酶，其允許相關蛋白酶局部消化融合蛋白，並從而從中釋放出重組蛋白。接著可通過後續的層析分離從融合結構域分離出所釋放的蛋白質。在某些實施方案中，HSA多肽可含有一種或多種能夠使多肽穩定的修飾。例如，此類修飾增加多肽的體外半衰期，增加多肽的循環半衰期或減少多肽的蛋白水解降解。同樣，在為嵌合多肽的情形下，前述修飾類型可另外附加至嵌合多肽的異源蛋白質部分。在一些實施方案中，包含HSA部分的多肽可為具有免疫球蛋白的全部或部分Fe區域的融合蛋白。在某些實施方案中，融合蛋白包含IgG的FcRn結合結構域或其片段。同樣，在某些實施方案中，免疫球蛋白的全部或部分Fe區域可用作接頭以將HSA部分連接至異源蛋白質。已知每一免疫球蛋白重鏈恆定區包含四或五個結構域。結構域按以下順序命名CHI-鉸鏈-CH2-CH3 (-CH4)。重鏈結構域的DNA序列在免疫球蛋白類中具有雜交同源性，例如，IgG的CH2結構域與IgA和IgD的CH2結構域以及IgM和IgE的CH3結構域都是同源的。如本文所用術語「免疫球蛋白Fe區域」應理解為是指免疫球蛋白鏈恆定區的羧基端部分，優選為免疫球蛋白重鏈恆定區或其部分。例如，免疫球蛋白Fe區域可包含1)CH1結構域、CH2結構域和CH3結構域；2)CH1結構域和CH2結構域；3)CH1結構域和CH3結構域；4)CH2結構域和CH3結構域；或5)兩或兩個以上結構域和免疫球蛋白鉸鏈區的組合。在優選實施方案中，免疫球蛋白Fe區域包含至少一個免疫球蛋白鉸鏈區、CH2結構域和CH3結構域，並且優選缺乏CHl結構域。在一個實施方案中，重鏈恆定區源自其中的免疫球蛋白類型為IgG(Igy) (y子類1、2、3或4)。可使用其他類型的免疫球蛋白，如IgA(Iga)、IgD(IgS)、IgE(Ig ￡ )和IgM(Igu)。美國專利No. 5，541，087，和5，726，044中詳述了適當的免疫球蛋白重鏈恆定區的選擇。認為從某些免疫球蛋白類型和子類型中選擇特定的免疫球蛋白重鏈恆定區序列以達到特定結果在本領域技術人員的水平內。編碼免疫球蛋白Fe區的DNA構建體的部分優選地包含鉸鏈區的至少一部分，且優選為Fe y的CH3結構域或IgA、IgD、IgE·或IgM任何一個中的同源結構域的至少一部分。此外，可以預期，在免疫球蛋白重鏈恆定區中的胺基酸的取代或缺失可用於本發明的實踐中。一實例為在上CH2區域中引入胺基酸取代以產生對Fe受體具有減少的親和力的Fe變體(Cole等(1997) J. IMMUNOL. 159 :3613)。本領域普通技術人員可使用熟知分子生物技術製備此類構建體。同樣，在嵌合多肽的情形下，可將前述修飾類型另外附加至嵌合多肽的異源蛋白質部分。在某些方面，HSA多肽可為支架。在某些實施方案中，將蛋白質用以選擇或設計可特異性與靶標結合的蛋白質骨架。當由支架設計蛋白質時，保留對骨架的有利特性重要的胺基酸殘基，而可改變其他殘基。在某些實施方案中，支架可具有少於或等於50 %的在具有不同特性的蛋白質衍生物之間變化的胺基酸殘基，以及大於或等於50%的在此類衍生物之間恆定的殘基。在某些實施方案中，支架可具有少於或等於
25%、20 %、15 %、10%或5%的在具有不同特性的蛋白質衍生物之間變化的胺基酸殘基，以及大於或等於55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%的在此類衍生物之間恆定的殘基。在某些實施方案中，支架可具有大於或等於
80 %、85 %、90 %或95 %的在具有不同特性的蛋白質衍生物之間變化的胺基酸殘基，以及少於或等於45%、40%、35%、30%、25%、20%、15%、10%或5%的在此類衍生物之間恆定的殘基。在某些實施方案中，這些恆定殘基賦予所有變體結構域相同的整體三維摺疊，而不論其特性如何。在某些實施方案中，可如本公開的其他方面和實施方案中所述，可修飾HSA多肽支架。在某些實施方案中，HSA多肽支架為治療劑。在某些實施方案中，HSA多肽支架對靶標可以是激動的。在某些實施方案中，HSA多肽支架對靶標可以是拮抗的。6.5嵌合多肽本公開的包含HSA部分的多肽，包括HSA變體多肽可與任何異源蛋白質綴合。在某些實施方案中，異源蛋白質為治療劑。在某些實施方案中，治療劑為抗體或肽。在某些實施方案中，嵌合多肽的異源蛋白質部分包含抗體或其抗原結合片段。在某些實施方案中，嵌合多肽進一步包含IgG免疫球蛋白的恆定區。在某些實施方案中，異源蛋白質包含非抗體治療蛋白質。在某些實施方案中，嵌合多肽的異源蛋白質部分包括生長因子或細胞因子。在某些實施方案中，嵌合多肽進一步包括表位。例如，用於檢測和/或純化的表位(例如，His標籤、FLAG標籤等)。在某些實施方案中，用將HSA部分化學綴合至異源蛋白質。在某些實施方案中，將HSA部分重組綴合至異源蛋白質。在某些實施方案中，使用編碼HSA部分與異源蛋白質兩者的重組載體產生嵌合多肽。在某些實施方案中，在原核細胞或真核細胞中產生HSA變體。在某些實施方案中，在原核細胞或真核細胞中產生嵌合多肽。在某些實施方案中，真核細胞選自酵母細胞、鳥類細胞、昆蟲細胞或哺乳動物細胞。可以各種方式製備本發明的嵌合多肽。在某些實施方案中，可將HSA部分的C端連接至異源蛋白質(例如，抗體或治療肽)的N端。或者，可將異源蛋白質(例如，抗體或治療肽)的C端連接至HSA部分的N端。在某些實施方案中，將HSA部分綴合至異源蛋白 質的內部胺基酸。在某些實施方案中，可能的構象包括在需要時使用抗體的重鏈和輕鏈序列的截短部分以保持所連接的HSA部分和/或所連接的異源蛋白質的功能完整性。在某些其他實施方案中，HSA部分包含HSA結構域III、或其新生兒Fe受體(FcRn)結合片段，以及HSA結構域I、或HSA結構域II、或HSA結構域I和II中的至少一部分。此外，可將異源蛋白質連接至HSA部分或其變體的暴露的內部(非末端)殘基。在另外實施方案中，可使用HSA與異源蛋白質構象的任何組合，從而使得HSA與異源蛋白質的比率大於I : 1(例如，2個HSA分子1個異源蛋白質)。可將HSA部分與異源蛋白質彼此直接綴合。或者，可將其經由一接頭序列彼此連接，所述接頭序列將HSA部分與異源蛋白質分離一定距離，此距離足以確保每個結構域適當地摺疊為二級結構和三級結構。在某些實施方案中，接頭為可裂解接頭。優選的接頭(I)應採用柔性延伸構象，(2)不應展現發展有序的二級結構的傾向，所述二級結構可與HSA多肽或異源蛋白質的功能性結構域相互作用，並且(3)應具有最小的疏水性或帶電特性，此會促進與功能性蛋白質結構域的相互作用。在某些實施方案中，接頭長度為至少8O埃(A)、或至少IOOA、或至少120A、或至少140A、或至少160人、或至少180人、或至少200人。在某些實施方案中，接頭長度介於約80A至約200A之間，或介於約IOOA至約180A之間，或介於約120人至約160人之間。在某些實施方案中，接頭為妝接頭。在某些實施萬案中，接頭為妝接頭，且所述妝接頭具有一或多個以下特徵a)其允許異源蛋白質序列和HSA部分相對於彼此旋轉；b)其對蛋白酶消化有抗性；以及c)其不與異源蛋白質序列或HSA部分互相作用。在柔性蛋白質區域中的典型表面胺基酸包括Gly、Asn和Ser。期望含有Gly、Asn和Ser的胺基酸序列的排列以滿足上述接頭序列的標準。其他接近中性的胺基酸，例如Thr和Ala也可用於接頭序列中。在某些實施方案中，肽接頭中的每個胺基酸均選自由Gly、Ser、AsruThr和Ala組成的組中。在某些實施方案中，肽接頭包括Gly-Ser組分。在特定的實施方案中，肽接頭包含一或多個Gly-Gly-Gly-Gly-Ser重複。在特定的實施方案中，肽接頭包含1、2、3、4、5、6或7個Gly-Gly-Gly-Gly-Ser重複。在特定的實施方案中，可使用長度為約20個胺基酸的接頭序列，以便提供適當分開功能性蛋白質結構域，儘管也可使用較長或較短的接頭序列。分開HSA多肽和異源蛋白質的接頭序列的長度可為5至500個胺基酸的長度，或更優選5至100個胺基酸的長度。在一些實施方案中，接頭序列的長度為約5至60或約5至30個胺基酸。在某些實施方案中，接頭序列為約5至約20個胺基酸，且有利地為約10至約30個胺基酸。在其他實施方案中，接合HSA部分與異源蛋白質的接頭可為抗體的恆定結構域(例如，抗體的Fe區域的全部或部分)。在某些實施方案中，接頭為可分裂解接頭。在某些實施方案中，可使用熟知的交聯劑和方案產生本發明的嵌合多肽。例如，存在大量本領域技術人員已知的化學交聯劑，並且其可用於使HSA多肽與異源蛋白質(例如，抗體)交聯。例如，交聯劑為異雙官能團交聯劑，其可用於以逐步方式連接分子。雙官能團交聯劑提供設計用於綴合蛋白質的更特異的偶聯方法的能力，從而減少不需要的副反應的出現，例如同源蛋白質聚合物。本領域已知大量的異雙官能團交聯劑，包括4-(N-馬來醯亞胺基甲基)環己烷-I-羧酸琥珀醯亞胺酯(SMCC)、間馬來醯亞胺苯甲醯基-N-羥基琥珀醯亞胺酯(MBS)、N-琥珀醯亞胺基(4-碘代乙醯基)-氨基苯甲酸酯(SIAB)、4-(對馬來醯亞胺苯基)丁酸琥珀醯亞胺酯(SMPB)U-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)、4_琥珀醯亞胺基氧羰基-a -甲基-a (2-吡啶基二硫)甲苯(SMPT)、N-琥珀醯亞胺基3-(2-吡啶基二硫)丙酯(STOP)、琥珀醯亞胺基6-[3-(2-吡啶基硫代)_丙醯胺]己酸酯(LC-SPDP)。那些具有N-羥基琥珀醯亞胺部分的交聯劑可作為N-羥基硫代琥珀醯亞 胺類似物而得到，其通常具有更高的水溶性。此外，反而那些在連接鏈中具有二硫橋的交聯劑可合成為烷基衍生物，以便減少體內接頭裂解的量。除異雙官能團交聯劑外，還存在許多其他交聯劑，包括同雙官能團交聯劑和光敏交聯劑。辛二酸二琥珀醯亞胺(DSS)、二馬來醯亞胺己烷(BMH)和庚二亞氨酸二甲酯二鹽酸鹽(DMP)是有用的同雙官能團交聯劑的例子，而雙-[B- (4-疊氮水楊醯胺基)乙基]二硫化物(BASED)和N-琥珀醯亞胺基_6 (4』 -疊氮基-2』-硝基苯氨)己酸酯(SANPAH)為可用於本發明的光敏交聯劑的例子。關於蛋白質偶聯技術的最新評論參見Means等(1990)Bioconjugate Chemistry. I :2_12，其以引用的方式併入本文。上文所包括的尤其有用的異雙官能團交聯劑類型含有伯胺反應基團，N-羥基琥珀醯亞胺(NHS)，或其水溶性類似物N-羥基硫代琥珀醯亞胺(sulfo-NHS)。在鹼性pH下的伯胺(賴氨酸e基團)未質子化，並且其通過在NHS或sulfo-NHS酯上的親核攻擊發生反應。此反應導致醯胺鍵的形成，並釋放出副產物NHS或sulfo-NHS。另一用作異雙官能團交聯劑部分的反應基團為硫醇反應基團。常見的硫醇反應基團包括馬來醯亞胺、滷素和吡啶二硫化物。具體而言，馬來醯亞胺在微酸至中性(pH 6.5-7.5)條件下與自由巰基(半胱氨酸殘基)在幾分鐘內反應。滷素(碘代乙醯基官能團)在生理PH下與SH基團反應。這些反應基團都導致形成穩定的硫醚鍵。異雙官能團交聯劑的第三種組分是間隔臂或橋。橋是連接兩個反應端的結構。橋最明顯的特徵是對位阻的影響。在一些情況中，較長的橋可以更容易跨越連接兩個複雜生物分子所需的距離。使用異雙官能團試劑製備蛋白質綴合物的方法是兩步的過程，包括胺反應和巰基反應。對於第一步胺反應，所選蛋白質應含有伯胺。此伯胺可為賴氨酸e胺或在大多數蛋白質的N端發現的伯a胺。所述蛋白質不應含有自由巰基。在將要綴合的蛋白質都含有自由巰基的情形下，可修飾其中一種蛋白質以便使用(例如)N_乙基馬來醯亞胺來阻斷所有巰基(參見Partis等(1983)J.Pro. Chem. 2 :263，其以引用的方式併入本文)。在特定蛋白質中，可使用Ellman試劑計算巰基的量(參見,例如Ellman等(1958)Arch. Biochem.Biophys. 74 :443 和 Riddles 等(1979)Anal. Biochem. 94 :75,其以引用的方式併入本文)。在某些實施方案中，可通過使用以下參考文獻中描述的標準蛋白質化學技術產生本發明的嵌合多妝Bodansky, M. Principles ofPeptide Synthesis, SpringerVerlag, Berlin(1993)和 Grant G. A.(編著)，Synthetic Peptides A User' s Guide,ff. H. Freeman and Company, New York (1992)。此外，肽自動合成儀可以商購(例如，Advanced ChemTech Model 396 ；Milligen/Biosearch 9600)。在任何前述用於將HSA化學綴合至異源蛋白質的交聯方法中，均可使用可裂解結構域或可裂解接頭。裂解允許將異源蛋白質與HSA多肽分離。例如，在嵌合多肽穿透細胞後，可裂解接頭的裂解將允許從異源蛋白質中分離出HSA。在某些實施方案中，本發明的嵌合多肽可產生為含有HSA部分和異源蛋白質(例如，抗體或治療肽)的融合蛋白，其表達為一個鄰接的多肽鏈。此類嵌合多肽在本文中稱為以重組方式綴合的多肽。在製備此類融合蛋白時，構建融合基因，其包含編碼HSA部分和異源蛋白質以及任選的跨越所述HSA部分和異源蛋白質的肽接頭序列的核酸。使用重 組DNA技術產生融合基因，翻譯產物為所需的融合蛋白，這在本領域中是眾所周知的。基因的編碼序列和其調控區域都可重新設計以改變蛋白質產物的功能特性、所製得蛋白質的量，或其中產生所述蛋白質的細胞類型。可大規模改變基因的編碼序列-例如，通過將部分所述基因融合至不同基因的編碼序列以產生編碼融合蛋白的新型雜合基因。在PCT申請PCT/US87/02968、PCT/US89/03587 和 PCT/US90/07335 以及 Traunecker 等(1989) Nature339 :68中描述了用於產生融合蛋白的方法的實例，所述文獻以引用的方式併入本文。本質上，採用用於連接、限制酶消化的平端或交錯端，根據常規技術進行對編碼不同多肽序列的各種DNA片段的接合，以提供適當的末端，酌情加入粘性末端，鹼性磷酸酶處理以避免不需要的結接合和酶連接。或者，可通過常規技術，包括DNA自動合成儀來合成融合基因。在另一方法中，可使用錨定引物對基因片段進行PCR擴增，其產生兩個連續基因片段之間互補的突出，所述連續基因片段可隨後進行退火以產生嵌合基因序列(參見，例如，CurrentProtocols in Molecular Biology, Ausubel 等 John Wiley & Sons 編著1992。如本領域眾所周知的，可使用各種表達系統以重組方式產生由融合基因編碼的嵌合多肽(同樣參見下文)。重組綴合的嵌合多肽包括其中將HSA部分綴合至異源蛋白質的N端或C端的實施方案。在一些實施方案中，如美國專利公布No. 2003/0166877中所述，通過鑑定在跨越嵌合多肽的連接區域內的候選T細胞表位且改變連接區內的胺基酸來降低嵌合多肽的免疫原性。術語嵌合蛋白用來指包含HSA部分(例如HSA變體多肽)和異源蛋白質的蛋白質，而不管這些部分是否互連(例如，化學綴合或重組綴合)。就其本身而言，術語嵌合蛋白、融合蛋白和綴合蛋白質可互換使用。示例性的異源蛋白質種類包括但不限於酶、生長因子和細胞因子。在某些實施方案中，異源蛋白質是抗體。用於包含HSA部分的嵌合多肽中的異源蛋白質可為治療蛋白質，或其片段，例如生長因子、酶、骨形態發生蛋白質和可溶受體片段。示例性的異源多肽包括生長因子，例如肝細胞生長因子(HGF)、神經生長因子(NGF)、表皮生長因子(EGF ;生長因子的EFG家族的成員)、成纖維細胞生長因子(FGF ;生長因子的FGF家族的成員)、轉化生長因子(例如TGF- a、TGF- β、TGF- β 2、TGF- β 3)、血管內皮生長因子(VEGF ;例如，VEGF-2)、幹擾素(例如，INF-α、INF-β)、白細胞介素(例如，IL-1、IL-2)、細胞因子和胰島素。其他示例性的異源蛋白質包括酶。其他示例性的異源多肽包括骨形態發生蛋白質(BMP;蛋白質BMP家族的成員)、促紅細胞生成素(EPO)、肌肉抑制素(myostatin)以及腫瘤壞死因子(例如，TNF-a)。其他示例性的異源多肽包括跨膜受體的細胞外結構域,包括細胞受體及其任何變體(包括突變體、片段和模擬肽形式)的任何天然存在的細胞外結構域。用於包含HSA部分的嵌合多肽中的異源蛋白質可為治療蛋白質或其片段，包括抗體或其抗原結合部分。示例性的抗體和抗體片段包括但小 1 J.· Humira 、Reinicade , Simpo.n.l· 、Rituxan 、Herceptin. 、Avastin 、Erbitux. 、Synagis , Mylotarg. 、Campath 、TheraCiM 、Vectibix 、Tysabri 、ReoPra' 、Luce.ntis_ 、Cimzia ^, 6. 6 HSA相關核酸和表達在某些方面，本公開提供包含核苷酸序列的核酸構建體，所述核苷酸序列編碼本公開的任何多肽(例如，HSA變體和具有HSA部分的嵌合多肽)。此外，本發明使用此類核酸以產生嵌合多肽或HSA變體多肽(例如，HSA部分-包括其生物活性片段、變體和融合物)。在某些特定實施方案中，核酸可進一步包括DNA，其編碼異源蛋白質(例如，抗體或治療肽)以製備本發明的重組嵌合蛋白。所有這些核酸可統稱為HSA核酸。在某些方面，本公開提供核酸構建體，其包含(i)編碼人血清白蛋白(HSA)部分的核苷酸序列，所述HSA部分包含HSA結構域III或其FcRn結合片段，所述HSA結構域III包含一至十八個胺基酸取代，其可操作地連接至(ii)編碼異源蛋白質的核苷酸序列，其中所述核酸構建體編碼保留異源蛋白質的功能活性且可與FcRn結合的嵌合多肽，且其中所述嵌合多肽相對於其中HSA部分不包括所述胺基酸取代的對照嵌合多肽，具有增加的半衰期和/或對FcRn的親和力。在某些實施方案中，由核酸構建體編碼的嵌合多肽以比所述對照嵌合多肽更高的親和力與FcRn結合。在某些實施方案中，由核酸構建體編碼的嵌合多肽相對於所述對照嵌合多肽具有增加的血清半衰期。在某些實施方案中，由核酸構建體編碼的嵌合多肽具有上述兩種特性。在某些實施方案中，(i)包含編碼人血清白蛋白(HSA)部分的核苷酸序列，所述HSA部分包含HSA結構域III或其FcRn結合片段，所述HSA結構域III包含一至十八個(I、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17 或 18)胺基酸取代。在某些實施方案中，在由核酸構建體編碼的HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在多個物種中保守的殘基。在某些實施方案中，在HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均是在多個物種中保守的殘基。在某些實施方案中，在HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸是在來自以下物種的血清白蛋白蛋白質中保守的殘基人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。在某些實施方案中，在HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在來自以下物種的血清白蛋白蛋白質中保守的殘基人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是表面可及殘基。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是表面可及殘基。在某些實施方案中，HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是表面可及殘基且在多個物種中是保守的殘基。在某些實施方案中，HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是表面可及殘基且在多個物種中是保守的殘基。在某些實施方案中，(i)包含編碼與SEQ ID NO: I具有至少90%同一性的HSA結構域III的核苷酸序列。在某些實施方案中，(i)包含編碼與SEQ ID NO :I具有至少95%同一性的HSA構域III核苷酸序列。在某些實施方案中，(i)包含編碼與SEQ ID NO :1具有至少98%同一性的HSA部分的核苷酸序列。在某些實施方案中，至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環2中。在某些實施方案中，至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環3中。在某些實施方 案中，至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環6中。在某些實施方案中，至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋7中。在某些實施方案中，至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環7中。在某些實施方案中，至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋8中。在某些實施方案中，至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環8中。在某些實施方案中，至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環9中。在某些實施方案中，(ii)包含編碼異源蛋白質的核苷酸序列，所述異源蛋白質包含抗體或其抗原結合片段。在某些實施方案中，(ii)包含編碼異源蛋白質的核苷酸序列，所述異源蛋白質包括治療蛋白質。在某些實施方案中，核苷酸序列另外編碼IgG免疫球蛋白的恆定區。在某些實施方案中，(ii)包含編碼異源蛋白質的核苷酸序列，所述異源蛋白質包括生長因子或細胞因子。在某些實施方案中，核苷酸序列另外包含編碼接頭的核苷酸序列。核酸可為單鏈或雙鏈DNA或RNA分子。在某些實施方案中，本公開涉及分離或重組的核酸序列，其編碼與HSA序列(例如，SEQ ID N0:1和2)的相同區域具有至少80%、85%、90%、95%、97%、98%、99%或100%同一性的HSA部分。在另外的實施方案中，可對HSA核酸序列進行分離、重組和/或與異源核苷酸序列融合或在DNA文庫中。在某些實施方案中，HSA核酸還包括這樣的核苷酸序列，其在高嚴格度條件下與上述天然HSA核苷酸序列或其互補序列雜交。本領域技術人員將容易理解，可改變促進DNA雜交的適當的高嚴格度條件。例如，可在大約45°C下於6X氯化鈉/檸檬酸鈉(SSC)中進行雜交，之後在50°C用2XSSC洗滌。例如，洗滌步驟中的鹽濃度可選自50°C下約2XSSC的低嚴格度至50°C下約O. 2XSSC的高嚴格度。此外，洗滌步驟中的溫度可從約22°C室溫下的低嚴格度條件增加至約65°C下的高嚴格度條件。溫度和鹽均可改變，或者溫度或鹽濃度可保持恆定而改變其他變量。在一實施方案中，本發明提供核酸，其在室溫下於6XSSC的低嚴格度條件下雜交，接著在室溫下以2 X SSC洗滌。由於遺傳密碼的簡併性而與天然HSA核酸不同的分離核酸也在本發明的範疇內。例如，許多胺基酸由一個以上的三聯體命名。明確指明相同胺基酸或同義詞(例如，CAU和CAC為組氨酸的同義詞)的密碼子可導致「沉默」突變，其不影響蛋白質的胺基酸序列。然而，預期確實導致受試者蛋白質的胺基酸序列變化的DNA序列多態性將存在於哺乳動物細胞中。本領域技術人員應理解，由於天然等位基因變化，在編碼特定蛋白質的核酸的一或多個核苷酸(高達約3-5%的核苷酸)的這些變化可存在於給定物種的個體中。任何和所有此類核苷酸變化和產生的胺基酸多態性均在本發明的範疇內。在某些實施方案中，可將重組HSA核酸操作地連接至表達構建體中的一或多個調控核苷酸序列。調控核苷酸序列通常適合用於表達的宿主細胞。本領域已知用於多種主宿主胞的許多類型的合適的表達載體和合適的調控序列。通常，所述一或多個調控核苷酸序列可包括但不限於啟動子序列、前導序列或信號序列、核糖體結合位點、轉錄起始序列和終止序列、翻譯起始和終止序列以及增強子或激活序列。本發明預期如本領域已知的組成型可誘導型啟動子。啟動子可為天然存在啟動子或組合一個以上啟動子組分的雜交啟動子。表達構建體可存在於細胞內附加體(例如質粒)上，或表達構建體可插入染色體中。在優選的實施方案中，表達載體含有選擇標記基因以允許選擇轉化的宿主細胞。選擇標記基因在本領域中眾所周知且其將隨所用宿主細胞而不同。在某些實施方案中，本發明涉及包含核苷酸序列的表達載體，所述核苷酸序列編碼HSA多肽且可操作地連接至至少一個調控序列。調控序列為本領域所公認的且其經選擇以指導所編碼的多肽的表達。因此，術語調控 序列包括啟動子、增強子和其他表達控制元件。示例性的調控序列描述於Goeddel ；GeneExpression Technology Methods in Enzymology,Academic Press,San Diego,CA(1990)中。應理解，表達載體的設計可取決於這樣的因素，諸如對待轉化的宿主細胞的選擇和/或期望表達的蛋白質的類型。此外，還應考慮載體的拷貝數量、控制拷貝數量的能力和由所述載體編碼的任何其他蛋白質(例如抗生素標記)的表達。本發明還涉及用編碼本發明的HSA多肽或嵌合多肽的重組基因轉染的宿主細胞。宿主細胞可為任何原核或真核細胞。例如，可在細菌細胞中表達HSA多肽或嵌合多肽，例如大腸桿菌、昆蟲細胞(例如，使用杆狀病毒屬表達系統)、酵母或哺乳動物細胞。其他合適的宿主細胞為本領域技術人員所已知。本發明進一步涉及產生本發明的HSA多肽、異源蛋白質和/或嵌合多肽的方法。例如，可在適當的條件下培養用編碼HSA多肽或嵌合多肽的表達載體轉染的宿主細胞以允許多肽的表達。多肽可分泌並從細胞和含有多肽的培養基的混合物中分離。或者，多肽可保留在細胞質或細胞膜部分中和所收穫、溶解的細胞中以及所分離的蛋白質中。細胞培養物包括宿主細胞、介質和其他副產物。適於細胞培養基的介質在本領域中眾所周知。可從細胞培養基、宿主細胞中分離出多肽，或同時使用本領域已知的用於純化蛋白質的技術，包括離子交換層析、凝膠過濾層析、超濾、電泳以及用對多肽的特定表位(例如，HSA多肽)特異的抗體進行的免疫親和純化。在優選實施方案中，多肽為含有促進其純化的結構域的融合蛋白。可通過將克隆基因或其部分連接至載體來產生重組HSA核酸，所述載體適合在原核細胞、真核細胞(酵母、鳥類、昆蟲或哺乳動物)或兩者中表達。用於產生重組多肽的表達載體包括質粒和其他載體。例如，合適的載體包括用於在原核細胞(例如大腸桿菌)中表達的以下類型的質粒pBR322衍生質粒、pEMBL衍生質粒、pEX衍生質粒、pBTac衍生質粒和PUC衍生質粒。優選的哺乳動物表達載體含有有助於載體在細菌中增殖的原核序列以及在真核細胞中表達的一或多個真核轉錄單位。pcDNAI/amp、pcDNAI/neo、pRc/CMV、pSV2gpt、pSV2neo、pSV2_dhfr、pTk2、pRSVneo、pMSG、pSVT7、pko-neo 和 pHyg 衍生載體為適合轉染真核細胞的哺乳動物表達載體的例子。這些載體中的一些用來自細菌質粒(例如PBR322)的序列修飾，以有助於在原核細胞和真核細胞中的複製和抗藥性選擇。或者，可使用諸如牛乳頭狀瘤病毒(BPV-I)或Epstein-Barr病毒(pHEBo、pREP衍生的和p205)的病毒的衍生物以用於在真核細胞中暫時表達蛋白質。製備質粒和轉化宿主生物所採用的各種方法在本領域中眾所周知。對於適合原核和真核細胞的其他表達系統以及一般重組程序參見MolecularCloning ALaboratory Manual,第二版，Sambrook、Fritsch 和 Maniatis 編著(Cold SpringHarbor Laboratory Press, 1989)第16、17章。在一些實例中，期望通過使用杆狀病毒表達系統表達重組多肽。此類杆狀病毒表達系統的實例包括PVL衍生載體(例如pVL1392、PVL1393和pVL941)、pAcUff衍生載體(例如pAcUffl)和pBlueBac衍生載體(例如含有pBlueBac III 的 β -gal)。製備融合基因的技術眾所周知。本質上，採用用於連接、限制酶消化的平端或交錯端，根據常規技術進行對編碼不同多肽序列的各種DNA片段的接合，以提供適當的末端，酌情加入粘性末端，鹼性磷酸酶處理以避免不需要的接合和酶連接。在其他實施方案中，可通過常規技術，包括DNA自動合成儀，來合成融合基因。或者，可使用錨定引物對基因片段進行PCR擴增，其產生兩個連續基因片段之間互補的突出，所述連續基因片段可隨後進行退 火以產生嵌合基因序列(參見，例如，Current Protocols in Molecular Biology,Ausubel等編著.John ffiley&Sons :1992)。6.7治療方法在某些實施方案中，本公開提供使用本公開的嵌合融合物的異源蛋白質治療可治療病症的方法。在某些實施方案中，本公開提供增加受試者體內蛋白質的血清半衰期和/或增加對FcRn的結合親和力的方法，包括將所述蛋白質綴合至HSA部分，所述HSA部分包含結構域III或其新生兒Fe受體(FcRn)結合片段。在某些實施方案中，HSA結構域III包含一至十八個胺基酸取代以相對於所得對照多肽，增加相關嵌合多肽對FcRn的親和力和增加血清半衰期中的一者或兩者。這些方法對需要其的個體施用治療有效量的如上所述的嵌合或HSA變體多肽。在某些實施方案中，所述方法包括施用嵌合多肽，其包含(a)HSA部分或其生物活性片段以及(b)異源蛋白質。這些方法尤其針對動物而言的治療或預防治療，並且更具體為人。應注意，可治療的特定疾病和病症取決於嵌合蛋白的異源蛋白質部分。此外，本公開預期，包括適用於治療特定疾病或病症的異源蛋白質的嵌合多肽可作為治療方案的一部分與一種或多種其他化合物或其他適合治療特定疾病或病症的治療形式一起施用。此外，本公開預期，給定患者年齡、體重、健康狀況、病情等，以與醫學上適當的治療一致的方式施用嵌合多肽。舉例而言，若異源蛋白質為Humira，則嵌合多肽可用於(例如)治療類風溼性關節炎、銀屑病、幼年關節炎和克羅恩氏病。若異源蛋白質為胰島素，則嵌合多肽可用於(例如)胰島素的治療。本文所用術語「治療(treatment) 」、「治療(treating) 」等通常指獲得所需的藥理學和/或生理學的效果。就完全或部分預防疾病、病症或其症狀而言，效果可為預防性的，和/或就部分或完全治療疾病或病症和/或歸因於疾病或病症的不利影響而言，效果可為治療性的。本文所用的「治療(treatment)」涵蓋哺乳動物，尤其是人的疾病或病症的任何治療，其包括(a)防止疾病或病症出現在可能傾向於患所述疾病或病症但仍未診斷為患有所述疾病或病症的受試者中；(b)抑制疾病或病症(例如，阻止其發展)；或(C)緩解疾病或病症(例如，使疾病或病症消退，提供一種或多種症狀的改善)。根據本領域中已知的標準方法和技術可容易地評估任何病症的改善。通過所述疾病的方法治療的受試者群體包括患有不期望的病症或疾病的受試者，以及病症或疾病有發展風險的受試者。術語「有療效的劑量」或「有效量」是指對施用對象產生所需效果的劑量。精確的劑量取決於治療目的，且本領域技術人員可使用已知技術來確定(參見，例如Lloyd (1999)The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding)。在某些實施方案中，可一起(同時)或在不同時間(按順序)施用本發明的一種或多種嵌合或HSA變體多肽。此外，可與用於治療相同疾病或症狀的一種或多種其他化合物或療法組合施用本發明的嵌合或HSA變體多肽。例如，可連同一種或多種治療化合物共施用一種或多種嵌合或HSA變體多肽。組合治療可包括同時或交替施用。此外，組合可包括急性或慢性施用。任選地，本發明的嵌合或HSA變體多肽和另外的化合物以相加或協同的方式作用以治療疾病或症狀。用於組合治療的另外的化合物包括但不限於小分子、多肽、抗體、反義寡核苷酸和siRNA分子。此外，組合治療還包括本文公開的方法連同其他非藥物治療。根據組合治療、的性質，可在施用其他治療的同時和/或之後，繼續施用本發明的嵌 合或HSA變體多肽。可以單劑量或多次劑量施用嵌合或HSA變體多肽。在某些實施例中，嵌合或HSA變體多肽的施用在其他治療之前至少幾天開始，而在其他情況中，在施用其他治療之前或同時開始施用。6. 8施用方法在某些實施方案中，對所述受試者施用包括全身施用HSA變體或嵌合多肽。在某些實施方案中，對所述受試者施用包括通過口服施用HSA變體或嵌合多肽。在某些實施方案中，對所述受試者施用包括通過靜脈內施用所述HSA變體或嵌合多肽。在某些方面，本公開提供包含本公開的HSA變體或嵌合多肽以及藥學上可接受載體的組合物。在某些實施方案中，組合物為無菌組合物。在某些實施方案中，組合物為非致熱的。已知各種遞送系統且其可用於施用本公開的嵌合或HSA變體多肽，例如，封裝在脂質體、微粒、微膠囊中、能夠表達化合物的重組細胞、受體介導的胞吞(參見(例如)Wu和Wu, 1987，J. Biol. Chem. 262 =4429-4432)。引入方法可為腸內或腸外途徑，其包括但不限於皮內、透皮、肌肉內、腹膜內、靜脈、皮下、肺、鼻內、眼內、硬膜外、局部或經口服的途徑。在特定實施方案中，腸外引入包括經肌肉內、皮下、靜脈內、血管內和心包內的施用。可以任何方便的途徑施用嵌合或HSA變體多肽，例如通過輸注或彈丸注射、通過經由上皮細胞或黏膜皮膚內層(例如口腔黏膜、直腸和腸道黏膜等)吸收，且可將其與其他生物活性劑一起施用。施用可為全身的或局部的。也可例如通過使用吸入器或霧化器以及具有霧化劑的製劑採用經肺施用。在某些實施方案中，期望將本發明的嵌合或HSA變體多肽局部施用於需要治療的區域(例如，肌肉)；此可通過例如以下方法實現，但不僅限於這些方法外科手術期間局部輸注、局部敷用，例如，通過注射、藉助導管或藉助植入物，所述植入物可為多孔的、非多孔的或凝膠狀材料，包括膜，諸如sialastic膜、纖維或市售皮膚替代品。在其他實施方案中，可在泡囊中，尤其是在脂質體中遞送本公開的嵌合或HSA變體多肽(參見Langer，1990，Science 249:1527-1533)。在另一實施方案中，可在控釋系統中遞送本公開的嵌合或HSA變體多肽。在另一實施方案中，可使用泵(參見Langer，1990，同上文)。在另一實施方案中，可使用聚合材料(參見Howard等，1989, J. Neurosurg. 71 105)。在某些特定實施方案中，可通過靜脈內遞送本公開的嵌合或變體多肽。在某些實施方案中，可通過靜脈輸注施用嵌合或HSA變體多肽。在某些實施方案中，在至少10分鐘、至少15分鐘、至少20分鐘或至少30分鐘的時間段內輸注嵌合或HSA變體多肽。在其他實施方案中，在至少60分鐘、90分鐘或120分鐘的時間段內輸注嵌合或HSA變體多肽。不論輸注時間如何,本公開預期每次輸注為整個治療方案的一部分,其中根據定期計劃(例如，每周、每月等)施用嵌合或HSA變體多肽。6.9評估方法本公開的嵌合多肽基於以下來表徵(i)基本保留異源蛋白質的功能以及(ii)相對於綴合至非修飾HSA部分的嵌合多肽或相對於另一適當的對照，具有對FcRn增加的親和力和/或增加的血清半衰期。本公開的HSA變體多肽基於以下來表徵相對於天然HSA部 分或相對於另一適當的對照，具有對FcRn增加的親和力和/或增加的血清半衰期。可在在體內或體外進行的任何一種或多種適當的測定中，評估嵌合多肽或HSA變體多肽的特性。舉例而言，可使用(例如)實施例中所述的任何一種或多種測定或其他結合測定來體外評估對FcRn的親和力久和/或Kd)。同樣，可使用(例如)實施例中所述的任何一種或多種測定或其他結合測定體外評估Ktjff和/或Km。對抗原和抗體之間結合的親和力常數和特異性的測量是決定使用抗-HSA抗體的治療、診斷或研究方法的功效的關鍵因素。「結合親和力」一般是指在分子(例如，抗體、HSA部分)的單一結合位點與其結合配偶體(例如，抗原、FcRn)之間的非共價相互作用的總強度。除非另外說明，如本文所用「結合親和力」是指反映結合對的成員(例如，抗體和抗原)之間I:I相互作用的內在結合親和力。分子X對其配偶體Y的親和力一般可表示為平衡解離常數(Kd或Kd)，計為KtjffZXn之比率。參見，例如Chen，Y.等，(1999) J. Mol Biol293 865-881。可用本領域已知的常見方法，包括本文所述和例舉的那些(例如BIAcore)測量親和力。低親和力抗體一般緩慢地結合抗原且趨於容易解離，而高親和力抗體一般更快地結合抗原且趨於保持更長久的結合。本領域已知測量結合親和力的多種方法，其中任何一種方法均可用於本發明的目的。在某些實施方案中，嵌合多肽或變體HSA多肽相對於對照，對FcRn具有增加約I. 5、2、2. 5、3、4倍或約5倍的親和力。在其他實施方案中，嵌合多肽相對於對照，具有提高大於5倍或甚至大於10倍的親和力。在某些實施方案中，嵌合多肽或變體HSA多肽相對於對照，具有提高大於20、25、40倍或大於50倍的親和力。在某些實施方案中，嵌合多肽或變體HSA多肽相對於對照，具有提高大於約5至10倍、約10至20倍、約25至40倍、約40至50倍、或約75至100倍的親和力。當通過計算Ka評估親和力時，親和力的這些提高轉化成Ka的增加(例如，如上所述，2倍、5倍、10倍等)。當通過計算Kd評估親和力時，親和力的這些提高轉化成Kd的減少(例如，如上所述，2倍、5倍、10倍等)。在某些實施方案中，對FcRn的親和力在低pH(例如，pH 5. 5)下增加。在某些其他實施方案中，對FcRn的親和力在低pH(例如，pH 5. 5)下增加，而在中性pH(例如，pH 7. 2)不變。進一步舉例來說，可在人或動物模型內測量血清半衰期。任何動物模型(包括但不限於具有人FcRn的轉基因動物)中血清半衰期的增加足以將嵌合或has變體多肽表徵為相對於對照，具有增加的血清半衰期。在一實施方案中，嵌合多肽或HSA變體多肽在血中具有不少於10天、優選不少於約14天的半衰期，且最優選不少於天然血清白蛋白蛋白質或其同系物50%的半衰期。在另一實施方案中，嵌合多肽或HSA變體多肽的半衰期相對於對照多肽，增加約I. 5、2、2. 5、3、4倍或約5倍。在某些實施方案中，嵌合多肽或HSA變體多肽的半衰期相對於對照多肽，增加大於5倍，或甚至大於10倍。在某些實施方案中，嵌合多肽或HSA變體多肽的半衰期相對於對照多肽，增加大於20、25、40倍，或大於50倍。在某些實施方案中，嵌合多肽或變體HSA多肽的半衰期相對於對照多肽，增加約5至10倍、約10至20倍、約 25至40倍、約40至50倍、或約75至100倍。評估嵌合多肽是否基本上保留異源蛋白質功能的合適的測定將取決於異源蛋白質及其天然功能。然而，可在任何適當的體外或體內(包括在動物模型中)測定中評估功能。示例性的功能包括但不限於(i)與特定受體結合的能力；(ii)誘導或抑制經由特定信號轉導途徑的信號轉導的能力誘導或抑制細胞凋亡的能力；(iv)誘導或抑制血管生成的能力；(V)刺激或抑制細胞增殖的能力；(Vi)促進或抑制細胞分化的能力；(Vii)促進細胞存活的能力；以及(Viii)促進或抑制另一種蛋白質因子分泌的能力。在某些實施方案中，組成生物活性異源蛋白質的本公開的嵌合多肽比生物活性異源蛋白質本身(例如，未融合至HSA部分)更有效。例如，嵌合多肽的活性比單獨的生物活性蛋白質序列的活性的高2倍、4倍、5倍、10倍、25倍、50倍、100倍或甚至1000倍，例如，多1、2或甚至3個數量級。因此，在其中生物活性肽序列抑制生物活性的實施方案中，嵌合多肽的IC5tl比單獨的生物活性蛋白質的IC5tl低10倍、100倍或甚至1000倍，並且在其中生物活性蛋白質序列誘導或促進生物活性的實施方案中，嵌合多肽的EC5tl比單獨的生物活性肽的EC5tl低10倍、100倍或甚至1000倍。在其中生物活性蛋白質序列與生物分子(例如，核酸、肽或碳水化合物)結合的實施方案中，嵌合多肽與其所結合的生物分子的解離常數Kd可比生物分子與單獨的生物活性蛋白質的Kd低10倍、100倍或甚至1000倍，例如，兩個實體的結合逐步勝過其解離。6. 10藥物組合物在某些實施方案中，將本公開的主題嵌合或HSA變體多肽與藥學上可接受的載體配製。可將一種或多種嵌合或HSA變體多肽單獨施用或作為藥物製劑(組合物)的組分施用。嵌合或HSA變體多肽可經配製用於以任何便利的方式施用來用於人或獸醫醫學中。在組合物中還可存在潤溼劑、乳化劑和潤滑劑，諸如十二烷基硫酸鈉和硬質酸鎂，以及著色劑、釋放劑、包衣劑、甜味劑、調味劑和芳香劑、防腐劑和抗氧化劑。主題嵌合或HSA變體多肽的製劑包括適合口服、鼻、局部、腸胃外、直腸和/或葉鞘內施用的那些。製劑可方便地以單位計量形式存在且可用藥劑學領域熟知的任何方法製備。可與載體材料組合以產生單一劑量形式的活性成分的量將取決於所治療的宿主和特定的施用模式而變。可與載體材料組合以產生單一劑量形式的活性成分的量一般為產生療效的化合物的量。在某些實施方案中，製備這些製劑或組合物的方法包括將其他類型的治療劑和載體以及任選的一種或多種助劑組合。一般而言，可用液體載體，或精細分離的固體載體，或其兩者製備製劑，並且如有需要則然後給產物定型。口服施用的製劑形式可為膠囊、扁囊劑、藥丸、片劑、錠劑(使用調味基底，通常為蔗糖和阿拉伯樹膠或黃芪膠)、粉末、顆粒、或在水溶性或非水溶性液體中的溶液或懸浮液，或水包油或油包水液體乳化液，或酏劑或糖漿，或糖果錠劑(使用惰性基底，例如明膠和甘油，或蔗糖和阿拉伯樹膠)，和/或漱口水等，每一形式均含有預定量的主題多肽治療劑作為活性成分。除活性化合物外，懸浮液可含有懸浮劑，例如乙氧基異硬酯醇、聚氧乙烯山梨糖醇和山梨聚糖酯、微晶纖維素、氫氧化鋁、膨潤土、瓊脂和黃芪膠，及其混合物。在用於口服施用的固態劑形(膠囊、片劑、藥丸、糖衣丸劑、粉末、顆粒等)中，可將本發明的一種或多種多肽治療劑與一種或多種藥學上可接受載體(諸如檸檬酸鈉或磷酸氫鈣)和/或下列任何試劑混合(I)填料或填充劑，例如澱粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、和/或矽酸；(2)粘結劑，例如羧甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖，和/或阿拉伯樹膠；⑶保溼劑，例如甘油；⑷崩解劑，例如瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯澱粉、藻朊酸、某些矽酸鹽，以及碳酸鈉；(5)溶液阻燃劑，例如石蠟；(6)吸收加速劑，例如季銨化合物；(7)潤溼劑，例如十六烷基醇和甘油單硬脂酸酯；(8)吸收劑，例如高嶺土和膨潤土 ； (9)潤滑劑，例如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、十二烷基硫酸鈉，及其混合物；以及(10)著色劑。在膠囊、片劑和藥丸的情形下，藥物組合物還可包含緩衝劑。還可使用賦形劑，諸如乳糖(lactose)或乳糖(milk sugar)以及高分子量聚乙二醇等,將相似類型的固體組合物用作軟式和硬式填充的明膠膠囊中的填料。用於口服施用的液體劑形包括藥學上可接受的乳化劑、微乳劑、溶液、懸浮液、糖漿和酏劑。除活性成分外，液體劑形可含有本領域常用的惰性稀釋劑(例如水或其他溶劑)，增溶劑和乳化劑，例如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、醋酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、油(特別是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氫呋喃甲醇、聚乙二醇和山梨聚糖的脂肪酸酯，及其混合物。除惰性稀釋劑外，口服組合物還可包括佐劑，例如潤溼劑、乳化和懸浮劑、甜味劑、調味劑、著色劑、芳香劑以及防腐劑。適合腸胃外施用的藥物組合物可包含與一種或多種與藥學上可接受的以下試劑組合的一種或多種嵌合或HSA變體多肽無菌等滲水溶性或非水溶性溶液、分散液、懸浮液或乳化液或無菌粉末，所述無菌粉末可僅在使用之前重組於無菌可注射溶液或分散液中，所述無菌可注射溶液或分散液可含有抗氧化劑、緩衝劑、抑菌劑、使製劑與預期受體的血液等滲的溶質、或懸浮劑或增稠劑。可用於本發明的藥物組合物的適合的水溶性和非水溶性載體的實例包括水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)，及其適合的混合物、植物油(諸如橄欖油)以及可注射有機酯，例如油酸乙酯。例如，藉助使用包衣材料(例如卵磷脂)，通過保持在分散體情形下所需顆粒的尺寸，以及藉助使用表面活性劑，可保持適當的流動性。這些組合物還可含有佐劑，例如防腐劑、潤溼劑、乳化劑和分散劑。可通過納入各種抗細菌劑和抗真菌劑(例如，對羥苯甲酸酯、氯丁醇、山梨酸苯酚等)確保防止微生物的作用。還期望在組合物中包括等滲劑，例如糖、氯化鈉等。此外，可通過納入延遲吸收的試劑(例如單硬質酸鈉和明膠)引起可注射藥物形式的延遲吸收。在某些實施方案中，本公開的組合物，包括藥物組合物，為非致熱的。換言之，在某些實施方案中，組合物基本為無熱源的。在一實施方案中，本發明的製劑為無熱源製劑，其基本上無內毒素和/或相關的致熱物質。內毒素包括限制在微生物體內且僅當微生物破裂或死亡時才釋放出來的毒素。致熱物質還包括來自細菌和其他微生物的外膜的發熱誘導的耐熱性物質(糖蛋白類)。如果這些物質施用於人時均會導致發熱、低血壓和休克。由於潛在的有害影響，即使低量的內毒素也必須從通過靜脈內施用的藥物溶液中移除。食品藥物管理局("FDA")已規定對靜脈藥物施用在單個一小時內，每公斤體重每一劑量的內毒素單位(EU)的上限為 5(The United States Pharmacopeial Convention,PharmacopeialForum 26(1) :223(2000))。當對每公斤體重以幾百或幾千毫克的量施用治療蛋白質時，即使存在抗體的情形下，甚至微量的有害和危險的內毒素也必須清除。在某些特定的實施方案中，組合物中的內毒素和熱源水平小於10EU/mg、或小於5EU/mg、或小於lEU/mg、或小於O. lEU/mg、或小於 O. 01EU/mg、或小於 O. 001EU/mg。通過在可生物降解的聚合物(例如聚交酯-聚乙交酯)中形成一種或多種多肽治療劑的微膠囊基體來製備可注射的沉澱物形式。根據藥物與聚合物的比率以及所採用的特定聚合物的性質，可控制藥物的釋放速率。其他可生物降解的聚合物的例子包括聚原酸酯和聚酸酐。還可通過使藥物陷入與身體組織相容的脂質體或微乳劑中來製備沉澱物可注射 製劑。在某些實施方案中，根據常規程序將本公開的嵌合或HSA變體多肽配製為適合靜脈內施用於人的藥物組合物。需要時，組合物還可包括增溶劑和局部麻醉劑(例如利多卡因)以緩解注射部位的疼痛。在通過輸注施用組合物時，可配含有無菌醫藥級水或鹽水的輸液瓶。在通過注射施用組合物時，可提供用於注射的一安瓿無菌水或鹽水以在施用前可使其成分混合。可通過標準臨床技術確定對治療組織相關病症或及疾病有效的本公開的嵌合或HSA變體多肽的量。此外，任選地可採用體外測定以有助於鑑定最佳劑量範圍。製劑中採用的精確劑量還將取決於施用途徑和病症的嚴重程度，且應根據行醫者的判斷和每一受試者的情況來決定。然而，用於靜脈施用的適當劑量範圍一般為每公斤體重約20-5000毫克的活性嵌合或HSA變體多肽。用於鼻內施用的適當劑量範圍一般為約0. 01pg/kg體重至Img/kg體重。可從源自體外或動物模型測試系統的劑量響應曲線推斷有效劑量。6.11製品和試劑盒在某些實施方案中，本公開還提供藥物包或試劑盒，其包含裝有本公開的至少一種嵌合或HSA變體多肽的一個或多個容器。在特定的實施方案中，本公開的製劑包含嵌合或HSA變體多肽，其以重組方式融合或化學綴合至另一部分，所述部分包括但不限於異源蛋白質、異源多肽、異源肽、大分子、小分子、標記序列、診斷或可檢測劑、治療部分、藥物部分、放射性金屬離子、第二抗體以及固體支架。在特定的實施方案中，在單劑量小瓶中將本公開的製劑配製為無菌液。可在目標體積為1.2mL的3cc USP Type I的硼矽酸鹽琥珀小瓶中提供本公開的製劑(West Pharmaceutical Serices-Part No. 6800-0675)。不例性的容器包括但不限於小瓶、瓶子、預填充注射器、IV包、吸塑包裝(包含一或多個藥丸)。任選地，與這樣的容器相關的可是由管理藥物或生物製品的製造、使用或銷售的政府機構規定的形式的公告，所述公告反映對人診斷和/或施用時政府機構對製造、使用或銷售的許可。在某些實施方案中，還提供包含嵌合或HSA變體多肽的試劑盒，其適用於各種目的,例如增加治療劑的血清半衰期或增加FcRn結合親和力。為分離和純化試劑,試劑盒可含有偶合至珠子(例如瓊脂糖珠子)的多肽。可提供含有多肽的試劑盒，用於(例如)在ELISA或Western blot (蛋白質印記)中檢測和量化體內革巴標。至於製品，試劑盒包含容器和在容器上或與其相關的標籤或說明書。所述容器容納包含本公開的至少一種嵌合或HSA變體多肽的組合物。還可包括其他容器，其含有(例如)稀釋液和緩衝液、對照診斷劑。標籤或說明書可提供組合物的描述以及意欲體外或診斷使用的說明。6. 12腺病毒載體和方法適用於自宿主細胞產生重組腺病毒顆粒的DNA載體在本領域眾所周知且商用試劑容易獲得(參見，例如，Invitrogen，目錄No. V493-20和V494-20)。本公開提供一種用於通過將OriP序列併入用於產生腺病毒顆粒(本文亦稱作腺病毒載體)的DNA載體來增強重組腺病毒產生的方法。含有腺病毒載體的OriP可進一步包含用於表達EBNA-I蛋白質的序列或作為選擇表達EBNA-I蛋白質的宿主細胞用於產生重組腺病毒顆粒。含有腺病毒載體的OriP尤其可用於產生重組腺病毒群，其包含目標DNA序列(例如，編碼HSA結構域III變體的DNA序列)的不同/複合文庫。 使用本領域已知的大量技術可容易地將OriP序列設計成任何已知的腺病毒載體。例如，若使用網關重組系統，則OriP序列應位於入門載體或腺病毒目的載體的att重組位點之間。當將序列添加至腺病毒載體時，應小心避免將其插入會干擾腺病毒DNA複製或組裝的位點中。或者或任選地，可將含有OriP序列的腺病毒載體設計成也表達EBNA-I蛋白質(參見圖10)。通過自腺病毒載體直接表達EBNA-I蛋白質，宿主細胞不需要表達EBNA-I基因。本發明的腺病毒載體包含OriP序列和腺病毒基因組序列。本發明的腺病毒載體可進一步包含一種或多種以下元件(i)重組位點(例如，attRl和attR2)，其用於與另一載體的重組克隆，此類位點可用於影響在自當前載體產生的重組腺病毒中表達的目標DNA序列的克隆；(ii)抗生素/藥物(例如，氯黴素)抗性基因和/或毒素表達基因(例如，ccdB基因)，其可用於選擇和/或逆選擇；(iii)克隆位點(可為多克隆位點)，其可用於亞克隆目標DNA序列；(iv)目標DNA，其可包含編碼一種或多個種目標蛋白質的一種或多種目標基因；(V)啟動子，其用於在範圍廣泛的哺乳動物細胞中表達目標基因(例如，人巨細胞病毒(CMV)即刻早期啟動子)，所述啟動子可為組成型的或可為可誘導型的；(vi)表位標籤(例如，His6X表位)，其用於檢測和/或純化目標蛋白質。所述表位標籤可存在於目標重組蛋白的5』或3』端；(vii)聚腺苷酸化(polyA)序列(例如，類人猿40病毒聚腺苷酸序列)，其用於有效的mRNA的轉錄終止和聚腺苷酸化；(viii)複製起點，其用於以高拷貝複製和保持大腸桿菌中的質粒；(ix)抗生素抗性基因，其用於在大腸桿菌中的選擇；(x)限制酶位點(例如，PacI)，其用於線性化載體，所述限制酶位點可在元件(viii)與(ix)的側面；以及(xi) DNA序列，其編碼EBNA-I蛋白質。質粒DNA合成的Epstein-Barr病毒(EBV)起點oriP有效支持多種高等真核細胞中的DNA合成。圖9C中提供代表性的OriP序列。此起點僅使用一種病毒蛋白質EBNA-1，而所有的其他因子由細胞提供。在某些實施方案中，由宿主細胞(例如，293E細胞)提供EBNA-I蛋白質。在其他實施方案中，本發明的腺病毒載體進一步包含元件(xi)編碼EBNA-I蛋白質的DNA序列。圖9A和圖9B分別提供代表性的EBNA-I蛋白質和DNA序列。特別預期腺病毒基因組序列(例如，人腺病毒5型序列)將編碼適當包裝和產生腺病毒所需的基因和其他元件(例如，左右反向末端重複(ITR)、衣殼化信號序列、晚期基因)(Hitt 等，1999, The Development of Human Gene Therapy, T. Friedmann,編著(ColdSpring Harbor, N YCold Spring Harbor Laboratory Press),第 61-86 頁；Russell,2000，J. Gen. Virol. 81，2573-2604)。腺病毒基因組序列可編碼完整的腺病毒基因組。或者，腺病毒基因組序列可編碼除一種或多種蛋白質和/或調控元件之外的所 有蛋白質和其他調控元件，所述一種或多種蛋白質和/或調控元件以反式提供以產生無法重複的腺病毒。例如，編碼El蛋白質((Ela和Elb)的El區域可從本發明的腺病毒載體中排除(Russell，2000，J. Gen. Virol. 81，2573-2604)。缺失的蛋白質和/或其他元件則通常將由用於產生腺病毒的宿主以反式提供，例如，293細胞系含有El區域的基因組拷貝。在特定的實施方案中，腺病毒基因組序列包含對應於野生型序列1-458和3513-35935的人腺病毒5型序列或基本上由其組成。本領域技術人員應了解，將組合提供某些元件和/或可將其併入其他元件，例如元件(iv)可併入元件(V)至(vii)。應進一步了解，將在其他元件的5』和/或3』提供某些元件，例如，元件(X)可用於腺病毒載體的線性化，當併入元件(X)以用於線性化時，應提供其在5』ITR的5』和/或3』ITR的3』。同樣，當存在元件(viii)和(ix)時，其一般使得其不會併入援救腺病毒而定位，例如這些元件可位於5』 ITR的5』以及3』 ITR的3』。OriP與元件(i)至(vii)(若存在)在一側為包括3』ITR的腺病毒基因組序列，另一側為5』ITR序列(例如圖10)圖10提供本發明的代表性腺病毒載體，其併入元件(i)、(ii)、(iv)、(viii)至(X)以及任選的(xi)。7.實施方案I. 一種嵌合多肽，其包含(a)人血清白蛋白(HSA)部分，所述HSA部分包含HSA結構域III或其新生兒Fe受體(FcRn)結合片段，以及(b)異源蛋白質，其中所述嵌合多肽保留異源蛋白質的功能活性且可與FcRn結合，且其中所述HSA結構域III包含一至十八個胺基酸取代以相對於其中HSA部分不包括所述胺基酸取代的對照嵌合多肽增加嵌合多肽對FcRn的親和力和其血清半衰期中的一者或兩者。2.根據實施方案I所述的嵌合多肽，其中所述嵌合多肽以比所述對照嵌合多肽高的親和力與FcRn結合。3.根據實施方案I或2所述的嵌合多肽，其中所述嵌合多肽以比所述對照嵌合多肽高的親和力與FcRn結合，且其中所述親和力在酸性pH下測得。4.根據實施方案3所述的嵌合多肽，其中所述酸性pH介於5. O和6. O之間。5.根據實施方案4所述的嵌合多肽，其中酸性pH為5. 5±0. 2。6.根據實施方案I至3中任一項所述的嵌合多肽，其中所述嵌合多肽在酸性pH下以比所述對照嵌合多肽高的親和力與FcRn結合，但在中性pH下，所述嵌合多肽並沒有以比所述對照嵌合多肽高的親和力與FcRn結合。7.根據實施方案6所述的嵌合多肽，其中所述中性pH介於6. 9和7. 9之間。8.根據實施方案7所述的嵌合多肽，其中所述中性pH為7. 4±0. 2。9.根據實施方案I至6中任一項所述的嵌合多肽，其中所述嵌合多肽與FcRn結合，且具有與所述對照嵌合多肽不同的解離速率或結合速率。10.根據實施方案9所述的嵌合多肽，其中所述嵌合多肽與FcRn結合，且相對於所述對照嵌合多肽具有增加的結合速率和/或減少的解離速率。11.根據實施方案9所述的嵌合多肽，其中所述嵌合多肽與FcRn結合，且相對於所述對照嵌合多肽具有增加的解離速率。
12.根據實施方案I至11中任一項所述的嵌合多肽，其中所述HSA結構域III包含一至十個胺基酸取代以相對於其中所述HSA部分不包括所述胺基酸取代的對照嵌合多肽，增加所述嵌合多肽的血清半衰期。13.根據實施方案I至12中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在多個物種中的保守的殘基。14.根據實施方案13所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在多個物種中的保守的殘基。15.根據實施方案I至13中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在來自以下物種的血清白蛋白蛋白質中保守的殘基人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。16.根據實施方案15所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在來自以下物種的血清白蛋白蛋白質中保守的殘基人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。17.根據實施方案I至13中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自表5中所列出的那些。18.根據實施方案I至15中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA(SEQ ID NO 2)中的位直進彳丁編號殘基381、殘基383、殘基391、殘基401、殘基402、殘基407、殘基411、殘基413、殘基414、殘基415、殘基416、殘基424、殘基426、殘基434、殘基442、殘基445、殘基447、殘基450、殘基454、殘基455、殘基456、殘基457、殘基459、殘基463、殘基495、殘基506、殘基508、殘基509、殘基511、殘基512、殘基515、殘基516、殘基517、殘基519、殘基521、殘基523、殘基524、殘基525、殘基526、殘基527、殘基531、殘基535、殘基538、殘基539、殘基541、殘基557、殘基561、殘基566、殘基569。19.根據實施方案I至15中任一項所述的嵌合多肽，其中所述嵌合多肽包含在HSA結構域III中的選自由下列組成的組的位置處的胺基酸取代，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號(a)殘基383和413 ;(b)殘基401和523 ; (c)殘基407和447 ；(d)殘基 407 和 447 和 539 ； (e)殘基 407 和 509 ； (f)殘基 407 和 526 ； (g)殘基 411 和 535 ；(h)殘基414和456 ；⑴殘基415和569 ； (j)殘基426和526 ； (k)殘基442和450和459 ；(I)殘基 463 和 508 ； (m)殘基 508 和 519 和 525 ； (η)殘基 509 和 527 ； (ο)殘基 523 和 538 ；(P)殘基526和557 ；以及(q)殘基541和561。
20.根據實施方案I至15或18中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自由下列組成的組V381N、V381Q、E383A、E383G、E383I、E383L、E383V、N391A、N391G、N391I、N391L、N391V、Y401D、Y401E、K402A、K402G、K402I、K402L、K402V、L407F、L407N、L407Q、L407W、L407Y、Y411Q、Y411N、K413C、K413S、K413T、K414S、K414T、V415C、V415S、V415T、Q416H、Q416P、V424A、V424G、V424I、V424L、V424N、V424Q、V426D、V426E、V426H、V426P、G434C、G434S、G434T、E442K、E442R、R445F、R445W、R445Y、P447S、P447T、E450D、E450E、S454C、S454M、S454T、V455N、V455Q、V456N、V456Q、L457F、L457W、L457Y、Q459K、Q459R、L463N、L463Q、E495D、T506F、T506W、T506Y、T508K、T508R、T508S、F509C、F509I、F509L、F509M、F509V、F509W、F509Y、A511F、A511W、A511Y、D512F、D512W、D512Y、T515C、T515H、T515N、T515P、T515Q、T515S、L516F、L516S、L516T、L516W、L516Y、S517C、S517F、S517M、S517T、S517W、S517Y、K519A、K519G、K519I、K519L、K519V、R521F、R521W、R521Y、I523A、I523D、I523E、I523F、I523G、15231、I523K、I523L、I523N、I523Q、I523R、I523V、I523W、I523Y、K524A、K524G、K524I、K524L、K524V、K525A、K525G、K525I、K525L、K525V、Q526C、Q526M、Q526S、Q526T、Q526Y、T527F、T527W、T527Y、E531A、E531G、E531I、E531L、E531V、H535D、H535E、H535P、K538F、K538W、K538Y、A539I、A539L、A539V、K541F、K541W、K541Y、、K557G、K557I、K557L、K557V、A561F、A561W、A561Y、 T566F、T566W、T566Y、A569H 和 A569P。21.根據實施方案I至15、18或20中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自由下列組成的組V381N、E383G、N391V、Y401E、K402A、L407N、L407Y、Y411Q、K414S、K413S、V415T、V415C、Q416P、V424I、V424Q、V426E、V426H、G434C、E442K、R445W、P447S、E450D、S454C、V455N、V456N、L457F、Q459R、L463N、E495D、T506Y、T508R、T508S、F509I、F509M、F509W、A511F、D512Y、T515P、T515Q、T515S、L516T、L516W、S517C、S517W、K519I、R521W、I523D、I523E、I523Q、I523K、I523G、I523R、I523Y、K524L、K524V、K525V、Q526T、Q526M、Q526Y、T527Y、E531I、H535N、H535P、K538Y、A539I、K541F、K557G、A561F、T566W 和 A569P。22.根據實施方案I至15或18中任一項所述的嵌合多肽，其中所述嵌合多肽包含HSA結構域III中的一個胺基酸取代，所述取代選自由下列組成的組V381N、E383G、N391V、Y401E、K402A、L407N、L407Y、Y411Q、K414S、K413S、V415T、V415C、Q416P、V424I、V424Q、V426E、V426H、G434C、E442K、R445W、P447S、E450D、S454C、V455N、V456N、L457F、Q459R、L463N、E495D、T506Y、T508R、T508S、F509I、F509M、F509W、A511F、D512Y、T515P、T515Q、T515S、L516T、L516W、S517C、S517W、K519I、R521W、I523D、I523E、I523Q、I523K、I523G、I523R、I523Y、K524L、K524V、K525V、Q526T、Q526M、Q526Y、T527Y、E531I、H535N、H535P、K538Y、A539I、K541F、K557G、A561F、T566W 和 A569P。23.根據實施方案21所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自由下列組成的組中L407N、L407Y、V415T、V424I、V424Q、V426E、V426H、P447S、V455N、V456N、L463N、E495D、T506Y、T508R、F509M、F509W、A511F、D512Y、T515Q、L516T、L516W、S517W、R521W、I523D、I523E、I523G、I523K、I523R、K524L、Q526M、T527Y、H535P 和K557G。24.根據實施方案22所述的嵌合多肽，其中所述嵌合多肽包含HSA結構域III中的一個胺基酸取代，所述取代選自由下列組成的組L407N、L407Y、V415T、V424I、V424Q、V426E、V426H、P447S、V455N、V456N、L463N、E495D、T506Y、T508R、F509M、F509W、A511F、D512Y、T515Q、L516T、L516W、S517W、R521W、I523D、I523E、I523G、I523K、I523R、K524L、Q526M、T527Y、H535P 和 K557G。25.根據實施方案1-14或18中任一項所述的嵌合多肽，其中所述嵌合多肽包含HSA結構域III中的胺基酸取代，所述取代選自由下列組成的組(a)E383G/K413S ；
(b)Y401E/I523G； (c)L407N/P447S ； (d)L407N/P447S/A539I ； (e)L407N/F509M ； (f)L407Y/Q526T ； (g)Y411Q/H535N ； (h)K414S/V456N ； (i)V415T/A569P ； (j)V426H/Q526Y ； (k)E442K/E450D/Q459R ； (I)L463N/T508R ； (m)T508R/K519I/K525V ； (n)F509I/T527Y ； (o)I523Q/Κ538Υ ； (p)Q526M/K557G ;以及(q) K541F/A561F。26.根據實施方案25所述的嵌合多肽，其中所述嵌合多肽包含HSA結構域III中的胺基酸取代，所述取代選自由下列組成的組(a)L407N/P447S ； (b)L407N/P447S/A539I ；
(c)L407N/F509M； (d)Y411Q/H535N ； (e)K414S/V456N ； (f)V426H/Q526Y ； (g)L463N/T508R ；(h) F509I/T527Y ； (i) I523Q/K538Y ； (j) Q526M/K557G ；以及(k) K541F/A561F。27.根據實施方案1-15中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在來自人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬的血清白蛋白蛋白質中保守的殘基，但在雞血清白蛋白中不保守。28.根據實施方案27所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在來自人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬的血清白蛋白蛋白質中保守的殘基，但在雞血清白蛋白中不保守。29.根據實施方案15所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所述至少一個胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA(SEQ ID NO :2)中的位置進行編號殘基383、殘基389、殘基391、殘基410、殘基417、殘基425、殘基442、殘基465、殘基
467、殘基468、殘基486、殘基499、殘基502、殘基520、殘基532、殘基536、殘基543和殘基571。30.根據實施方案29所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所述至少一個胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基383、殘基391、殘基434、殘基442、殘基445和殘基450。31.根據實施方案30所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自由下列組成的組V381N、E383A、E383G、E383I、E383L、E383V、N391A、N391G、N391I、N391L、N391V、G434C、G434S、G434T、E442K、E442R、R445F、R445W、R445Y、E450D 和E450E。32.根據實施方案29所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所述至少一個胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基417、殘基442、殘基499和殘基502。33.根據實施方案27所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所述至少一個胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基
380、殘基381、殘基384、殘基387、殘基396、殘基401、殘基404、殘基405、殘基406、殘基409、殘基419、殘基421、殘基422、殘基424、殘基428、殘基430、殘基431、殘基433、殘基441、殘基457、殘基458、殘基463、殘基464、殘基466、殘基469、殘基470、殘基474、殘基475、殘基480、殘基481、殘基489、殘基491、殘基495、殘基500、殘基508、殘基510、殘基515、殘基516、殘基524、殘基525、殘基526、殘基528、殘基531、殘基535、殘基539、殘基544、殘基547和殘基576。34.根據實施方案33所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所述至少一個胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基381、殘基401、殘基424、殘基457、殘基463、殘基495、殘基508、殘基515、殘基516、殘基524、殘基525、殘基526、殘基531、殘基535和殘基539。35.根據實施方案34所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自由下列組成的組V381N、V381Q、Y401D、Y401E、V424N、V424Q、L457F、L457W、L457Y、L463N、L463Q、E495D、T508K、T508R、T508S、T515C、T515H、T515N、T515P、T515Q、T515S、L516F、L516S、L516T、L516W、L516Y、K524A、K524G、K524I、K524L、K524V、K525A、K525G、K525I、K525L、K525V、Q526C、Q526M、Q526S、Q526T、Q526Y、E531A、E531G、E531I、 E531L、E531V、H535D、H535E、H535P、A539I,以及 A539L、A539V。36.根據實施方案29所述的嵌合多肽，其中所有所述胺基酸取代選自由下列組成的組的成員殘基383、殘基389、殘基391、殘基410、殘基417、殘基425、殘基442、殘基465、殘基467、殘基468、殘基486、殘基499、殘基502、殘基520、殘基532、殘基536、殘基543和殘基571。37.根據實施方案33所述的嵌合多肽，其中所有所述胺基酸取代選自由下列組成的組的成員殘基380、殘基381、殘基384、殘基387、殘基396、殘基401、殘基404、殘基405、殘基406、殘基409、殘基419、殘基421、殘基422、殘基424、殘基428、殘基430、殘基431、殘基433、殘基441、殘基457、殘基458、殘基463、殘基464、殘基466、殘基469、殘基470、殘基474、殘基475、殘基480、殘基481、殘基489、殘基491、殘基495、殘基500、殘基508、殘基510、殘基515、殘基516、殘基524、殘基525、殘基526、殘基528、殘基531、殘基535、殘基539、殘基544、殘基547和殘基576。 38.根據實施方案29或33所述的嵌合多肽，其中所有所述胺基酸取代選自由下列組成的組的成員殘基380、殘基381、殘基384、殘基383、殘基387、殘基389、殘基391、殘基396、殘基401、殘基404、殘基405、殘基406、殘基409、殘基410、殘基417、殘基419、殘基421、殘基422、殘基424、殘基425、殘基428、殘基430、殘基431、殘基433、殘基441、殘基442、殘基457、殘基458、殘基463、殘基464、殘基465、殘基466、殘基467、殘基468、殘基469、殘基470、殘基474、殘基475、殘基480、殘基481、殘基486、殘基489、殘基491、殘基495、殘基499、殘基500、殘基502、殘基508、殘基510、殘基515、殘基516、殘基520、殘基524、殘基525、殘基526、殘基528、殘基531、殘基532、殘基535、殘基536、殘基539、殘基
543、殘基544、殘基547、殘基571和殘基576。39.根據實施方案38所述的嵌合多肽，其中所有所述胺基酸取代選自由下列組成的組的成員殘基381、殘基383、殘基391、殘基401、殘基424、殘基442、殘基463、殘基495、殘基506、殘基508、殘基515、殘基516、殘基524、殘基525、殘基526、殘基531、殘基535和殘基539。40.根據實施方案39所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自由下列組成的組V381N、V381Q、E383A、E383G、E383I、E383L、E383V、N391A、N391G、N391I、N391L、N391V、Y401D、Y401E、V424A、V424G、V424I、V424L、V424N、V424Q、E442K、E442R、L463N、L463Q、E495D、T506F、T506W、T506Y、T508K、T508R、T508S、T515C、T515H、T515N、T515P、T515Q、T515S、L516S、L516T、L516W、L516Y、K524A、K524G、K524I、K524L、K524V、K525A、K525G、K525I、K525L、K525V、Q526C、Q526M、Q526S、Q526T、Q526Y、E531A、E531G、E531I、E531L、E531V、H535D、H535E、H535P、A539I、A539L 和 A539V。41.根據實施方案1-40所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是表面可及殘基。42.根據實施方案41所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是表面可及殘基。
43.根據實施方案1-12中任一項所述的嵌合多肽，其中IISA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是表面可及殘基且在多個物種中是保守性的殘基。44.根據實施方案43所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是表面可及殘基且在多個物種中是保守的殘基。45.根據實施方案43或44所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所述至少一個胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基383、殘基389、殘基391、殘基410、殘基417、殘基425、殘基442、殘基465、殘基467、殘基
468、殘基486、殘基499、殘基502、殘基520、殘基532、殘基536、殘基543和殘基571。46.根據實施方案45所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所述至少一個胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基383、殘基391和殘基442。47.根據實施方案45所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自由下列組成的組E383A、E383G、E383I、E383L、E383V、N391A、N391G、N3911、N391L、N391V,以及 E442K、E442R。48.根據實施方案45所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所述至少一個胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基417、殘基442、殘基499和殘基502。49.根據實施方案1-48中任一項所述的嵌合多肽，其中所述HSA結構域III包含與SEQ ID NO : I具有至少90%同一性的胺基酸序列。50.根據實施方案49所述的嵌合多肽，其中所述HSA結構域III包含與SEQ IDNO 1具有至少95%同一性的胺基酸序列。51.根據實施方案49所述的嵌合多肽，其中所述HSA結構域III包含與SEQ IDNO 1具有至少98%同一性的胺基酸序列。52.根據實施方案1-48中任一項所述的嵌合多肽，其中所述HSA部分包含與SEQID NO : 2具有至少90%同一性的胺基酸序列。53.根據實施方案52所述的嵌合多肽，其中所述HSA部分包含與SEQ ID NO :2具有至少95%同一性的胺基酸序列。54.根據實施方案52所述的嵌合多肽，其中所述HSA部分包含與SEQ ID NO :2具有至少98%同一性的胺基酸序列。
55.根據實施方案1-54中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環2中。56.根據實施方案1-22、27-29、32、33、36-38、41-45或48-55中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的環2中。57.根據實施方案55或56所述的嵌合多肽，其包含HSA結構域III中的一至五個胺基酸取代，其中所述一至五個胺基酸取代在HSA結構域III的環2中。58.根據實施方案1-55所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環3中。59.根據實施方案1-22、27-33、36_54或58中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的環3中。
60.根據實施方案58或59所述的嵌合多肽，其包含HSA結構域III中的一至五個胺基酸取代，其中所述一至五個胺基酸取代在HSA結構域III的環3中。61.根據實施方案1-55或58中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環6中。62.根據實施方案1-22、27-29、32、33-45、48-54或61中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的環6中。63.根據實施方案61或62所述的嵌合多肽，其包含HSA結構域III中的一至十八個胺基酸取代，其中所述一至十八個胺基酸取代在HSA結構域III的環6中。64.根據實施方案1_55、58或61中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋7中。65.根據實施方案1-22、27-29、32、33-45、48-54或64中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的螺旋7中。66.根據實施方案67或68所述的嵌合多肽，其包含HSA結構域III中的一至三個胺基酸取代，其中所述一至六個胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋7中。67.根據實施方案1_55、58、61、64中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環7中。68.根據實施方案1-22、27-29、32、33-45、48-54或67中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的環7中。69.根據實施方案67或68所述的嵌合多肽，其包含HSA結構域III中的一至三個胺基酸取代，其中所述一至三個胺基酸取代在HSA結構域III的環7中。70.根據實施方案1_55、58、61、64或67中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋8中。71.根據實施方案1-22、27-28、37、38、41-44、49-54或70中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的螺旋8中。72.根據實施方案70或71所述的嵌合多肽，其包含HSA結構域III中的一至五個胺基酸取代，其中所述一至十八個胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋8中。73.根據實施方案1_55、58、61、64、67或70中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環8中。74.根據實施方案1-22、27-28、37、38、41-44、49-54或73中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代在HSA結構域III的環8中。75.根據實施方案73或74所述的嵌合多肽，其包含HSA結構域III中的一至五個胺基酸取代，其中所述一至五個胺基酸取代在HSA結構域III的環8中。76.根據實施方案1_55、58、61、64、67、70或73中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環9中。77.根據實施方案1-22、27-28、41-44、49-54或76中任一項所述的嵌合多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代在HSA結構域III的環9中。78.根據實施方案76或77所述的嵌合多肽，其包含HSA結構域 III中的一至四個胺基酸取代，其中所述一至四個胺基酸取代在HSA結構域III的環9中。79.根據實施方案1-78中任一項所述的嵌合多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用丙氨酸置換胺基酸殘基。80.根據實施方案1-79中任一項所述的嵌合多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括保守性胺基酸取代。81.根據實施方案1-80中任一項所述的嵌合多肽，其中至少一個所述胺基酸取代
包括用另一種鹼性胺基酸置換一種鹼性胺基酸。82.根據實施方案1-81中任一項所述的嵌合多肽，其中至少一個所述胺基酸取代
包括用另一種酸性胺基酸對置換一種酸性胺基酸。83.根據實施方案1-83中任一項所述的嵌合多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用另一種中性胺基酸置換一種中性胺基酸。84.根據實施方案1-83中任一項所述的嵌合多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用下列組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸賴氨酸、精氨酸和組氨酸。85.根據實施方案1-84中任一項所述的嵌合多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用下列組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸天冬氨酸和穀氨酸。86.根據實施方案1-85中任一項所述的嵌合多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用下列組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸天冬醯胺、穀氨醯胺、絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸。87.根據實施方案1-86中任一項所述的嵌合多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用下列組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、蛋氨酸、半胱氨酸和甘氨酸。88.根據實施方案1-87中任一項所述的嵌合多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用下列組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸。89.根據實施方案1-88中任一項所述的嵌合多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用下列組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸半胱氨酸、絲氨酸和蘇氨酸。90.根據實施方案1-89中任一項所述的嵌合多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用下列組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸天冬醯胺、穀氨醯胺、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、天冬氨酸、穀氨酸。91.根據實施方案1-90中任一項所述的嵌合多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用下列組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸。
92.根據實施方案1-91中任一項所述的嵌合多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括非保守性取代。93.根據實施方案79所述的嵌合多肽，其中所有所述胺基酸取代包括用丙氨酸置
換胺基酸殘基。94.根據實施方案80所述的嵌合多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處的保守性胺基酸取代。95.根據實施方案81所述的嵌合多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處用另一種鹼性胺基酸置換一種鹼性胺基酸。96.根據實施方案83所述的嵌合多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每 一位置處用另一種酸性胺基酸置換一種酸性胺基酸。97.根據實施方案83所述的嵌合多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處用另一種中性胺基酸置換一種中性胺基酸。98.根據實施方案84所述的嵌合多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處用以下組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸賴氨酸、精氨酸和組氨酸。99.根據實施方案85所述的嵌合多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處用以下組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸天冬氨酸和穀氨酸。100.根據實施方案86所述的嵌合多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處用以下組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸天冬醯胺、穀氨醯胺、絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸。101.根據實施方案87所述的嵌合多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處用以下組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、蛋氨酸、半胱氨酸和甘氨酸。102.根據實施方案88所述的嵌合多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處用以下組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸。103.根據實施方案89所述的嵌合多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處用以下組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸半胱氨酸、絲氨酸和蘇氨酸。104.根據實施方案90所述的嵌合多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處用以下組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸天冬醯胺、穀氨醯胺、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、天冬氨酸、穀氨酸。105.根據實施方案91所述的嵌合多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處用以下組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸。106.根據實施方案92所述的嵌合多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處的非保守性取代。107.根據實施方案1-106中任一項所述的嵌合多肽，其中所述異源蛋白質包括抗體或其抗原結合片段。108.根據實施方案1-107中任一項所述的嵌合多肽，其中所述異源蛋白質包括治療蛋白質。109.根據實施方案1-108中任一項所述的嵌合多肽，其進一步包含IgG免疫球蛋白的恆定區。110.根據實施方案1-109中任一項所述的嵌合多肽，其中所述HSA部分以化學方
式綴合至異源蛋白質。111.根據實施方案1-109中任一項所述的嵌合多肽，其中所述HSA部分以重組方式綴合至異源蛋白質。112.根據實施方案111所述的嵌合多肽，其中使用編碼所述HSA部分與所述異源蛋白質兩者的重組載體生產嵌合多肽。113.根據實施方案111或112所述的嵌合多肽，其中在原核細胞或真核細胞中生產所述嵌合多肽。
114.根據實施方案113所述的嵌合多肽，其中所述真核細胞選自酵母細胞、鳥類細胞、昆蟲細胞或哺乳動物細胞。115.根據實施方案110-114中任一項所述的嵌合多肽，其中將所述HSA部分與所述異源蛋白質彼此直接綴合。116.根據實施方案110-114中任一項所述的嵌合多肽，其中將所述HSA部分與所述異源蛋白質經由接頭綴合。117.根據實施方案116所述的嵌合多肽，其中所述接頭包含一或多個Gly-Gly-Gly-Gly-Ser 重複。118.根據實施方案1-117中任一項所述的嵌合多肽，其中將所述HSA部分綴合至所述異源蛋白質的N-端胺基酸。119.根據實施方案1-117中任一項所述的嵌合多肽，其中將所述HSA部分綴合至所述異源蛋白質的C-端胺基酸。120.根據實施方案1-117中任一項所述的嵌合多肽，其中將所述HSA部分綴合至所述異源蛋白質的內部胺基酸。121.根據實施方案1-120中任一項所述的嵌合多肽，其中所述HSA部分進一步包含HSA結構域I的至少一部分；或HSA結構域II的至少一部分；或HSA結構域I的至少一部分和HSA結構域II的至少一部分。122.根據實施方案1-121中任一項所述的嵌合多肽，其中所述嵌合多肽基本上是純化的。123. 一種組合物，其包含根據實施方案1-122中任一項所述的嵌合多肽，以及藥學上可接受載體。124.根據實施方案123所述的組合物，其中所述組合物為無菌組合物。125.根據實施方案123或124所述的組合物，其中所述組合物為非致熱的。126. 一種治療需要其的受試者的方法，其包括對所述受試者施用根據實施方案1-122中任一項所述的嵌合多肽或根據實施方案123-125中任一項所述的組合物。127. 一種增加需要其的受試者中的蛋白質的血清半衰期的方法，其包括對所述受試者施用根據實施方案1-122中任一項所述的嵌合多肽。128.根據實施方案126或127所述的方法，其中對所述受試者施用包括全身施用所述嵌合多肽。129.根據實施方案126或127所述的方法，其中對所述受試者施用包括通過選自下列組成的組中的途徑施用所述嵌合多肽皮內、透皮、肌肉內、腹膜內、靜脈內、血管內、心包內、皮下、肺、鼻內、眼內、硬腦膜外、局部和口服。130.根據實施方案126或127所述的方法，其中對所述受試者施用包括通過靜脈內施用所述嵌合多肽。131. 一種核酸構建體,其包含編碼根據實施方案1-121中任一項所述的嵌合多肽的核苷酸序列。132. 一種人血清白蛋白(HSA)變體多肽，其包含HSA結構域III，或其新生兒Fe受體(FcRn)結合片段，其中所述變體多肽可與FcRn結合，且其中所述HSA結構域III包含一至十八個胺基酸取代以相對於缺乏所述取代的對照HSA多肽，增加所述變體多肽對FcRn的親和力。133.根據實施方案132所述的變體多肽，其中所述變體多肽以比所述對照多肽高的親和力與FcRn結合，且其中所述親和力在酸性pH下測得。 134.根據實施方案132或133所述的變體多肽，其中所述酸性pH介於5. O與6. O之間。135.根據實施方案134所述的變體多肽，其中所述酸性pH為5. 5±0. 2。136.根據實施方案132中任一項所述的變體多肽，其中所述變體多肽在酸性pH下以比所述對照多肽高的親和力與FcRn結合，但在中性pH下，所述變體多肽並沒有以比所述對照多肽高的親和力與FcRn結合。137.根據實施方案136所述的變體多肽，其中所述中性pH介於6. 9與7. 9之間。138.根據實施方案137所述的變體多肽，其中所述中性pH為7. 4±0. 2。139.根據實施方案132中任一項所述的變體多肽，其中所述變體多肽比所述對照HSA多肽具有較長的血清半衰期。140.根據實施方案132-139中任一項所述的變體多肽，其中所述HSA結構域III包含一至十個胺基酸取代。141.根據實施方案132-140中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在多個物種中保守的殘基。142.根據實施方案141所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在多個物種中保守的殘基。143.根據實施方案132-140中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在來自以下物種的血清白蛋白蛋白質中保守的殘基人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。144.根據實施方案143所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在來自以下物種的血清白蛋白蛋白質中保守的殘基人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。145.根據實施方案132-143中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自表5中所列出的那些。146.根據實施方案132-143中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進打編號殘基381、殘基383、殘基391、殘基401、殘基402、殘基407、殘基411、殘基413、殘基414、殘基415、殘基416、殘基424、殘基426、殘基434、殘基442、殘基445、殘基447、殘基450、殘基454、殘基455、殘基456、殘基457、殘基459、殘基463、殘基495、殘基506、殘基508、殘基509、殘基511、殘基512、殘基515、殘基516、殘基517、殘基519、殘基521、殘基523、殘基524、殘基525、殘基526、殘基527、殘基531、殘基535、殘基538、殘基539、殘基541、殘基557、殘基561、殘基566、殘基569。147.根據實施方案132-143中任一項所述的變體多肽，其中所述變體多肽包含在HSA結構域III中的選自由下列組成的組的位置處的胺基酸取代，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號(a)殘基383和413 ； (b)殘基401和523 ； (c)殘基407和447 ； (d)殘基 407 和 447 以及 539 ； (e)殘基 407 和 509 ； (f)殘基 407 和 526 ； (g)殘基 411和535 ； (h)殘基414和456 ；⑴殘基415和569 ； (j)殘基 426和526 ； (k)殘基442和450以及459 ； (I)殘基463和508 ； (m)殘基508和519以及525 ； (η)殘基509和527 ； (ο)殘基523和538 ； (P)殘基526和557 ;以及(q)殘基541和561。148.根據實施方案132-143或146中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自由下列組成的組V381N、V381Q、E383A、E383G、E383I、E383L、E383V、N391A、N391G、N391I、N391L、N391V、Y401D、Y401E、K402A、K402G、K402I、K402L、K402V、L407F、L407N、L407Q、L407W、L407Y、Y411Q、Y411N、K413C、K413S、K413T、K414S、K414T、V415C、V415S、V415T、Q416H、Q416P、V424A、V424G、V424I、V424L、V424N、V424Q、V426D、V426E、V426H、V426P、G434C、G434S、G434T、E442K、E442R、R445F、R445W、R445Y、P447S、P447T、E450D、E450E、S454C、S454M、S454T、V455N、V455Q、V456N、V456Q、L457F、L457W、L457Y、Q459K、Q459R、L463N、L463Q、E495D、T506F、T506W、T506Y、T508K、T508R、T508S、F509C、F509I、F509L、F509M、F509V、F509W、F509Y、A511F、A511W、A511Y、D512F、D512W、D512Y、T515C、T515H、T515N、T515P、T515Q、T515S、L516F、L516S、L516T、L516W、L516Y、S517C、S517F、S517M、S517T、S517W、S517Y、K519A、K519G、K519I、K519L、K519V、R521F、R521W、R521Y、I523A、I523D、I523E、I523F、I523G、15231、I523K、I523L、I523N、I523Q、I523R、I523V、I523W、I523Y、K524A、K524G、K524I、K524L、K524V、K525A、K525G、K525I、K525L、K525V、Q526C、Q526M、Q526S、Q526T、Q526Y、T527F、T527W、T527Y、E531A、E531G、E531I、E531L、E531V、H535D、H535E、H535P、K538F、K538W、K538Y、A539I、A539L、A539V、K541F、K541W、K541Y、K557A、K557G、K557I、K557L、K557V、A561F、A561W、A561Y、T566F、T566W、T566Y、A569H 和 A569P。149.根據實施方案132-143、146或148中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自由下列組成的組V381N、E383G、N391V、Y401E、K402A、L407N、L407Y、Y411Q、K414S、K413S、V415T、V415C、Q416P、V424I、V424Q、V426E、V426H、G434C、E442K、R445W、P447S、E450D、S454C、V455N、V456N、L457F、Q459R、L463N、E495D、T506Y、T508R、T508S、F509I、F509M、F509W、A511F、D512Y、T515P、T515Q、T515S、L516T、L516W、S517C、S517W、K519I、R521W、I523D、I523E、I523Q、I523K、I523G、I523R、I523Y、K524L、K524V、K525V、Q526T、Q526M、Q526Y、T527Y、E531I、H535N、H535P、K538Y、A539I、K541F、K557G、A561F、T566W 和 A569P。150.根據實施方案132-143或146中任一項所述的變體多肽，其中所述變體多肽包含HSA結構域III中的一個胺基酸取代，所述取代選自由下列組成的組V381N、E383G、N391V、Y401E、K402A、L409N、L407Y、Y411Q、K414S、K413S、V415T、V415C、Q416P、V424I、V424Q、V426E、V426H、G434C、E442K、R445W、P447S、E450D、S454C、V455N、V456N、L457F、Q459R、L463N、E495D、T506Y、T508R、T508S、F509I、F509M、F509W、A511F、D512Y、T515P、T515Q、T515S、L516T、L516W、S517C、S517W、K519I、R521W、I523D、I523E、I523Q、I523K、I523G、I523R、I523Y、K524L、K524V、K525V、Q526T、Q526M、Q526Y、T527Y、E531I、H535N、H535P、K538Y、A539I、K541F、K557G、A561F、T566W 和 A569P。151.根據實施方案149所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自由下列組成的組L407N、L407Y、V415T、V424I、V424Q、V426E、V426H、P447S、V455N、V456N、L463N、E495D、T506Y、T508R、F509M、F509W、A511F、D512Y、T515Q、L516T、L516W、S517W、R521W、I523D、I523E、I523G、I523K、I523R、K524L、Q526M、T527Y、H535P 和K557G。152.根據實施方案150所述的變體多肽，其中所述變體多肽包含HSA結構域III中的一個胺基酸取代，所述取代選自由下列組成的組L407N、L407Y、V415T、V424I、V424Q、 V426E、V426H、P447S、V455N、V456N、L463N、E495D、T506Y、T508R、F509M、F509W、A511F、D512Y、T515Q、L516T、L516W、S517W、R521W、I523D、I523E、I523G、I523K、I523R、K524L、Q526M、T527Y、H535P 和 K557G。153.根據實施方案132-143或146中任一項所述的變體多肽，其中所述變體多肽包含HSA結構域III中的胺基酸取代，所述取代選自由下列組成的組(a)E383G/K413S ；(b)Y401E/I523G, (c)L407N/P447S ； (d)L407N/P447S/A539I ；(e)L407N/F509M ； (f)L407Y/Q526T ； (g)Y411Q/H535N ； (h)K414S/V456N ； (i)V415T/A569P ； (j)V426H/Q526Y ； (k)E442K/E450D/Q459R ； (I)L463N/T508R ； (m)T508R/K519I/K525V ； (n)F509I/T527Y ； (o)I523Q/Κ538Υ ;(p)Q526M/K557G ;以及(q) K541F/A561F。154.根據實施方案132-143或146中任一項所述的變體多肽，其中所述變體多肽包含HSA結構域III中的胺基酸取代，所述取代選自由下列組成的組(a)L407N/P447S ；(b)L407N/P447S/A539I ； (c)L407N/F509M ； (d)Y411Q/H535N ； (e)K414S/V456N ； (f)V426H/Q526Y ； (g) L463N/T508R ； (h) F509I/T527Y ； (i) I523Q/K538Y ； (j) Q526M/K557G ;以及(k)K541F/A561F。155.根據實施方案132-143中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在來自人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬的血清白蛋白蛋白質中保守的殘基，但在雞血清白蛋白中不保守。156.根據實施方案155所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在來自人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬的血清白蛋白蛋白質中保守的殘基，但是在雞血清白蛋白中不保守。157.根據實施方案143所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所述至少一個胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA(SEQ ID NO :2)中的位置進行編號殘基383、殘基389、殘基391、殘基410、殘基417、殘基425、殘基442、殘基465、殘基467、殘基468，殘基486，殘基499，殘基502，殘基520，殘基532、殘基536，殘基543和殘基 571。158.根據實施方案157所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所述至少一個胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HS A中的位置進行編號殘基383、殘基391、殘基434、殘基442、殘基445和殘基450。159.根據實施方案158所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自由下列組成的組V381N、E383A、E383G、E383I、E383L、E383V、N391A、N391G、N391I、N391L、N391V、G434C、G434S、G434T、E442K、E442R、R445F、R445W、R445Y、E450D 和E450E。160.根據實施方案157所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所述至少一個胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基417、殘基442、殘基499和殘基502。161.根據實施方案155所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所述至少一個胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基380、殘基381、殘基384、殘基387、殘基396、殘基401、殘基404、殘基405、殘基406、殘基409、殘基419、殘基421、殘基422、殘基424、殘基428、殘基430、殘基431、殘基433、殘 基441、殘基457、殘基458、殘基463、殘基464、殘基466、殘基469、殘基470、殘基474、殘基475、殘基480、殘基481、殘基489、殘基491、殘基495、殘基500、殘基508、殘基510、殘基515、殘基516、殘基524、殘基525、殘基526、殘基528、殘基531、殘基535、殘基539、殘基
544、殘基547和殘基576。162.根據實施方案161所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所述至少一個胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基
381、殘基401、殘基424、殘基457、殘基463、殘基495、殘基508、殘基515、殘基516、殘基524、殘基525、殘基526、殘基531、殘基535和殘基539。163.根據實施方案162所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自由下列組成的組V381N、V381Q、Y401D、Y401E、V424N、V424Q、L457F、L457W、L457Y、L463N、L463Q、E495D、T508K、T508R、T508S、T515C、T515H、T515N、T515P、T515Q、T515S、L516F、L516S、L516T、L516W、L516Y、K524A、K524G、K524I、K524L、K524V、K525A、K525G、K525I、K525L、K525V、Q526C、Q526M、Q526S、Q526T、Q526Y、E531A、E531G、E531I、E531L、E531V、H535D、H535E、H535P、A539I,以及 A539L、A539V。164.根據實施方案157所述的變體多肽，其中所有所述胺基酸取代選自由下列組成的組的成員殘基383、殘基389、殘基391、殘基410、殘基417、殘基425、殘基442、殘基465、殘基467、殘基468、殘基486、殘基499、殘基502、殘基520、殘基532、殘基536、殘基543和殘基571。165.根據實施方案161所述的變體多肽，其中所有所述胺基酸取代選自由下列組成的組的成員殘基380、殘基381、殘基384、殘基387、殘基396、殘基401、殘基404、殘基405、殘基406、殘基409、殘基419、殘基421、殘基422、殘基424、殘基428、殘基430、殘基431、殘基433、殘基441、殘基457、殘基458、殘基463、殘基464、殘基466、殘基469、殘基470、殘基474、殘基475、殘基480、殘基481、殘基489、殘基491、殘基495、殘基500、殘基508、殘基510、殘基515、殘基516、殘基524、殘基525、殘基526、殘基528、殘基531、殘基535、殘基539、殘基544、殘基547和殘基576。166.根據實施方案157或161所述的變體多肽，其中所有所述胺基酸取代選自由下列組成的組的成員殘基380、殘基381、殘基384、殘基383、殘基387、殘基389、殘基391、殘基396、殘基401、殘基404、殘基405、殘基406、殘基409、殘基410、殘基417、殘基419、殘基421、殘基422、殘基424、殘基425、殘基428、殘基430、殘基431、殘基433、殘基441、殘基442、殘基457、殘基458、殘基463、殘基464、殘基465、殘基466、殘基467、殘基468、殘基469、殘基470、殘基474、殘基475、殘基480、殘基481、殘基486、殘基489、殘基491、殘基495、殘基499、殘基500、殘基502、殘基508、殘基510、殘基515、殘基516、殘基520、殘基524、殘基525、殘基526、殘基528、殘基531、殘基532、殘基535、殘基536、殘基539、殘基543、殘基544、殘基547、殘基571和殘基576。167.根據實施方案166所述的變體多肽，其中所有所述胺基酸取代選自由下列組成的組的成員殘基381、殘基383、殘基391、殘基401、殘基424、殘基442、殘基463、殘基495、殘基508、殘基515、殘基516、殘基524、殘基525、殘基526、殘基531、殘基535和殘基539。168.根據實施方案167所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述 胺基酸取代選自由下列組成的組V381N、V381Q、E383A、E383G、E383I、E383L、E383V、N391A、N391G、N391I、N391L、N391V、Y401D、Y401E、V424A、V424G、V424I、V424L、V424N、V424Q、E442K、E442R、L463N、L463Q、E495D、T506F、T506W、T506Y、T508K、T508R、T508S、T515C、T515H、T515N、T515P、T515Q、T515S、L516S、L516T、L516W、L516Y、K524A、K524G、K524I、K524L、K524V、K525A、K525G、K525I、K525L、K525V、Q526C、Q526M、Q526S、Q526T、Q526Y、E531A、E531G、E531I、E531L、E531V、H535D、H535E、H535P、A539I、A539L 和 A539V。169.根據實施方案132-166中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是表面可及殘基。170.根據實施方案169所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是表面可及殘基。171.根據實施方案132-166中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是表面可及殘基且在多個物種中是保守的殘基。172.根據實施方案171所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是表面可及殘基且在多個物種中是保守的殘基。173.根據實施方案171或172所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所述至少一個胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基383、殘基389、殘基391、殘基410、殘基417、殘基425、殘基442、殘基465、殘基467、殘基468、殘基486、殘基499、殘基502、殘基520、殘基532、殘基536、殘基543和殘基571。174.根據實施方案173所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所述至少一個胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號殘基383、殘基391和殘基442。175.根據實施方案174所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自由下列組成的組E383A、E383G、E383I、E383L、E383V、N391A、N391G、N391I、N391L、N391V 以及 E442K、E442R。176.根據實施方案132-172中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III包含與SEQ ID NO : I具有至少90%同一性的胺基酸序列。
177.根據實施方案176所述的變體多肽，其中所述HSA結構域III包含與SEQ IDNO 1具有至少95%同一性的胺基酸序列。178.根據實施方案169-177所述的變體多肽，其中HSA結構域III包含與SEQ IDNO 1具有至少98%同一性的胺基酸序列。179.根據實施方案132-178中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環2中。180.根據實施方案 132-150、155-157、161、164-166、169-173、176-179 中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的環2中。181.根據實施方案179或180所述的變體多肽，其包含HSA結構域III中的一至五個胺基酸取代，其中所述一至五個胺基酸取代在HSA結構域III的環2中。
182.根據實施方案132-179所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環3中。183.根據實施方案132-150、155-161、164-166-178或182中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代均在HSA結構域III的環3中。184.根據實施方案182或183所述的變體多肽，其包含HSA結構域III中的一至五個胺基酸取代，其中所述一至五個胺基酸取代在HSA結構域III的環3中。185.根據實施方案132-173或182中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環6中。186.根據實施方案 132-150、155-157、160-173、176-178 或 185 中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代在HSA結構域III的環6中。187.根據實施方案185或186所述的變體多肽，其包含HSA結構域III中的一至五個胺基酸取代，其中所述一至五個胺基酸取代在HSA結構域III的環6中。188.根據實施方案132-173、182或185中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋7中。189.根據實施方案 132-150、155-157、160-173、176-178 或 188 中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋7中。190.根據實施方案188或192所述的變體多肽，其包含HSA結構域III中的一至三個胺基酸取代，其中所述一至六個胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋7中。191.根據實施方案132-173、182、185或188中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環7中。192.根據實施方案 132-150、155-157、160-173、176-178 或 191 中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代在HSA結構域III的環7中。193.根據實施方案191或192所述的變體多肽，其包含HSA結構域III中的一至三個胺基酸取代，其中所述一至三個胺基酸取代在HSA結構域III的環7中。194.根據實施方案132-173、182、185、188或191中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋8中。195.根據實施方案 132-150、155-157、165-166、169-173、176-178 或 194 中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋8中。196.根據實施方案194或195所述的變體多肽，其包含HSA結構域III中的一至五個胺基酸取代，其中所述一至十八個胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋8中。197.根據實施方案132-173、182、185、188、191或194中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環8中。198.根據實施方案 132-150、155-157、165-166、169-173、176-178 或 197 中任一項所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代在HSA結構域III的環8中。 199.根據實施方案197或198所述的變體多肽，其包含HSA結構域III中的一至五個胺基酸取代，其中所述一至五個胺基酸取代在HSA結構域III的環8中。200.根據實施方案132-173、182、185或197所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環9中。201.根據實施方案 132-150、155、156、169-172、176-178 或 200 所述的變體多肽，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代在HSA結構域III的環9中。202.根據實施方案200或201所述的變體多肽，其包含HSA結構域III中的一至四個胺基酸取代，其中所述一至四個胺基酸取代在HSA結構域III的環9中。203.根據實施方案132-202中任一項所述的變體多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用丙氨酸置換胺基酸殘基。204.根據實施方案132-203中任一項所述的變體多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括保守性胺基酸取代。205.根據實施方案132-204中任一項所述的變體多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用另一種鹼性胺基酸置換一種鹼性胺基酸。206.根據實施方案132-205中任一項所述的變體多肽，其中至少一個所述胺基酸
取代包括用另一種酸性胺基酸置換一種酸性胺基酸。207.根據實施方案132-206中任一項所述的變體多肽，其中至少一個所述胺基酸
取代包括用另一種中性胺基酸置換一種中性胺基酸。208.根據實施方案132-207中任一項所述的變體多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用下列組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸賴氨酸、精氨酸和組氨酸。209.根據實施方案132-208中任一項所述的變體多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用下列組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸天冬氨酸和穀氨酸。210.根據實施方案132-209中任一項所述的變體多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用下列組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸天冬醯胺、穀氨醯胺、絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸。211.根據實施方案132-210中任一項所述的變體多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用下列組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、蛋氨酸、半胱氨酸和甘氨酸。212.根據實施方案132-211中任一項所述的變體多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用下列組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸。213.根據實施方案132-212中任一項所述的變體多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用下列組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸半胱氨酸、絲氨酸和蘇氨酸。214.根據實施方案132-213中任一項所述的變體多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用下列組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸天冬醯胺、穀氨醯胺、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、天冬氨酸、穀氨酸。215.根據實施方案132-214中任一項所述的變體多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括用下列組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸。216.根據實施方案132-215中任一項所述的變體多肽，其中至少一個所述胺基酸取代包括非保守性取代。217.根據實施方案203所述的變體多肽，其中所有所述胺基酸取代包括用丙氨酸
置換胺基酸殘基。 218.根據實施方案204所述的變體多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處的保守性胺基酸取代。219.根據實施方案205所述的變體多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在
每一位置處用另一種鹼性胺基酸置換一種鹼性胺基酸。220.根據實施方案206所述的變體多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在
每一位置處用另一種酸性胺基酸置換一種酸性胺基酸。221.根據實施方案207所述的變體多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在
每一位置處用另一種中性胺基酸置換一種中性胺基酸。222.根據實施方案208所述的變體多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處用以下組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸賴氨酸、精氨酸和組氨酸。223.根據實施方案209所述的變體多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處用以下組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸天冬氨酸和穀氨酸。224.根據實施方案210所述的變體多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處用以下組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸天冬醯胺、穀氨醯胺、絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸。225.根據實施方案211所述的變體多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處用以下組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、蛋氨酸、半胱氨酸和甘氨酸。226.根據實施方案212所述的變體多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處用以下組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸。227.根據實施方案213所述的變體多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處用以下組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸半胱氨酸、絲氨酸和蘇氨酸。228.根據實施方案214所述的變體多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處用以下組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸天冬醯胺、穀氨醯胺、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、天冬氨酸、穀氨酸。229.根據實施方案215所述的變體多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處用以下組中的另一種胺基酸置換一種胺基酸甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸。
230.根據實施方案216所述的變體多肽，其中所有所述胺基酸取代包括獨立地在每一位置處的非保守性取代。231.根據實施方案132-230中任一項所述的變體多肽，其中所述HSA部分進一步包含HSA結構域I的至少一部分；或HSA結構域II的至少一部分；或HSA結構域I的至少一部分和HSA結構域II的至少一部分。232.根據實施方案132-231中任一項所述的變體多肽，其中所述變體多肽是基本上純化的。233.根據實施方案132-232中任一項所述的變體多肽，其中所述變體多肽進一步包含靶標上表位的結合位點。234.根據實施方案233所述的變體多肽，其中所述結合位點拮抗所述靶標。235.根據實施方案233所述的變體多肽，其中所述結合位點激動所述靶標。
236. 一種組合物，其包含根據實施方案132-235中任一項所述的變體多肽，以及藥學上可接受載體。237.根據實施方案236所述的組合物，其中所述組合物為無菌組合物。238.根據實施方案236或237所述的組合物，其中所述組合物為非致熱的。239. 一種增加蛋白質的血清半衰期的方法，其包括將所述蛋白質與根據實施方案132-235中任一項所述的變體多肽綴合。240. 一種治療需要其的受試者的方法，其包括對所述受試者施用根據實施方案233-235中任一項所述的變體多肽。241. 一種核酸構建體，其包含編碼根據實施方案132-231中任一項所述的變體多肽的核苷酸序列。242. 一種核酸構建體，其包含(a)編碼人血清白蛋白(HSA)部分的核苷酸序列，所述HSA部分包含HSA結構域III或其FcRn結合片段，所述HSA結構域III包含一至十八個胺基酸取代，其可操作地連接至(b)編碼異源蛋白質的核苷酸序列，其中所述核酸構建體編碼嵌合多肽，所述嵌合多肽保留異源蛋白質的功能活性且可與FcRn結合，且其中所述嵌合多肽相對於其中所述HSA部分不包括所述胺基酸取代的對照嵌合多肽，具有增加的血清半衰期和/或對FcRn增加的親和力。243.根據實施方案242所述的核酸構建體，其中所述嵌合多肽以比所述對照嵌合多肽高的親和力與FcRn結合。244.根據實施方案242或243所述的核酸構建體，其中所述嵌合多肽以比所述對照嵌合多肽高的親和力與FcRn結合，且其中所述親和力在酸性pH下測得。245.根據實施方案244所述的核酸構建體，其中酸性pH介於5. O與6. O之間。246.根據實施方案245所述的核酸構建體，其中所述酸性pH為5. 5±0. 2。247.根據實施方案242-247中任一項所述的核酸構建體,其中所述嵌合多肽在酸性PH下以比所述對照嵌合多肽高的親和力與FcRn結合，但在中性pH下，所述嵌合多肽並沒有以比所述對照嵌合多肽高的親和力與FcRn結合。248.根據實施方案247所述的核酸構建體，其中所述中性pH介於6. 9與7. 9之間。249.根據實施方案248所述的核酸構建體，其中所述中性pH為7. 4±0. 2。
250.根據實施方案242中任一項所述的核酸構建體，其中(i)包含編碼人血清白蛋白(HSA)部分的核苷酸序列，所述HSA部分包含HSA結構域III，或其FcRn結合片段，所述HSA結構域III包含一至十個胺基酸取代。251.根據實施方案242-250中任一項所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在多個物種中保守的殘基。252.根據實施方案251所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是在多個物種中保守的殘基。253.根據實施方案242-250中任一項所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是在來自以下物種的血清白蛋白蛋白質中保守的殘基人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。
基酸取代是在來自以下物種的血清白蛋白蛋白質中保守的殘基人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。255.根據實施方案242-254中任一項所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自表5中所列出的那些。256.根據實施方案242-254中任一項所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在以下任何位置處，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進打編號殘基381、殘基383、殘基391、殘基401、殘基402、殘基407、殘基411、殘基413、殘基414、殘基415、殘基416、殘基424、殘基426、殘基434、殘基442、殘基445、殘基447、殘基450、殘基454、殘基455、殘基456、殘基457、殘基459、殘基463、殘基495、殘基506、殘基508、殘基509、殘基511、殘基512、殘基515、殘基516、殘基517、殘基519、殘基521、殘基523、殘基524、殘基525、殘基526、殘基527、殘基531、殘基535、殘基538、殘基539、殘基541、殘基557、殘基561、殘基566、殘基569。257.根據實施方案242-254中任一項所述的核酸構建體，其中核酸構建體包含在HSA結構域III中的選自由下列組成的組的位置處的胺基酸取代，對這些位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號(a)殘基383和413 ； (b)殘基401和523 ； (c)殘基407和447 ； (d)殘基 407 和 447 和 539 ； (e)殘基 407 和 509 ； (f)殘基 407 和 526 ； (g)殘基 411 和535 ； (h)殘基414和456 ；⑴殘基415和569 ； (j)殘基426和526 ； (k)殘基442和450和459 ； (I)殘基 463 和 508 ； (m)殘基 508 和 519 和 525 ； (η)殘基 509 和 527 ； (ο)殘基 523 和538 ； (P)殘基526和557 ;以及(q)殘基541和561。258.根據實施方案242-254或256中任一項所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自由下列組成的組V381N、V381Q、E383A、E383G、E383I、E383L、E383V、N391A、N391G、N391I、N391L、N391V、Y401D、Y401E、K402A、K402G、K402I、K402L、K402V、L407F、L407N、L407Q、L407W、L407Y、Y411Q、Y411N、K413C、K413S、K413T、K414S、K414T、V415C、V415S、V415T、Q416H、Q416P、V424A、V424G、V424I、V424L、V424N、V424Q、V426D、V426E、V426H、V426P、G434C、G434S、G434T、E442K、E442R、R445F、R445W、R445Y、P447S、P447T、E450D、E450E、S454C、S454M、S454T、V455N、V455Q、V456N、V456Q、L457F、L457W、L457Y、Q459K、Q459R、L463N、L463Q、E495D、T506F、T506W、T506Y、T508K、T508R、T508S、F509C、F509I、F509L、F509M、F509V、F509W、F509Y、A511F、A511W、A511Y、D512F、D512W、D512Y、T515C、T515H、T515N、T515P、T515Q、T515S、L516F、L516S、L516T、L516W、L516Y、S517C、S517F、S517M、S517T、S517W、S517Y、K519A、K519G、K519I、K519L、K519V、R521F、R521W、R521Y、I523A、I523D、I523E、I523F、I523G、15231、I523K、I523L、I523N、I523Q、I523R、I523V、I523W、I523Y、K524A、K524G、K524I、K524L、K524V、K525A、K525G、K525I、K525L、K525V、Q526C、Q526M、Q526S、Q526T、Q526Y、T527F、T527W、T527Y、E531A、E531G、E531I、E531L、E531V、H535D、H535E、H535P、K538F、K538W、K538Y、A539I、A539L、A539V、K541F、K541W、K541Y、K557A、K557G、K557I、K557L、K557V、A561F、A561W、A561Y、T566F、T566W、T566Y、A569H 和 A569P。259.根據實施方案242-254或256中任一項所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自由下列組成的組V381N、E383G、N391V、Y401E、K402A、L407N、L407Y、Y411Q、K414S、K413S、V415T、V415C、Q416P、V424I、V424Q、V426E、V426H、G434C、E442K、R445W、P447S、E450D、S454C、V455N、V456N、L457F、Q459R、L463N、E495D、T506Y、T508R、T508S、F509I、F509M、F509W、A511F、D512Y、T515P、T515Q、T515S、L516T、L516W、S517C、S517W、K519I、R521W、I523D、I523E、I523Q、I523K、I523G、I523R、I523Y、K524L、K524V、K525V、Q526T、Q526M、Q526Y、T527Y、E531I、H535N、H535P、K538Y、 A539I、K541F、K557G、A561F、T566W 和 A569P。260.根據實施方259所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自由下列組成的組L407N、L407Y、V415T、V424I、V424Q、V426E、V426H、P447S、V455N、V456N、L463N、E495D、T506Y、T508R、F509M、F509W、A511F、D512Y、T515Q、L516T、L516W、S517W、R521W、I523D、I523E、I523G、I523K、I523R、K524L、Q526M、T527Y、H535P 和K557G。260.根據實施方案242-254或256中任一項所述的核酸構建體，其中所述嵌合多肽包含HSA結構域III中的胺基酸取代，所述取代選自由下列組成的組(a)E383G/K413S ；(b)Y401E/I523G, (c)L407N/P447S ； (d)L407N/P447S/A539I ； (e)L407N/F509M ； (f)L407Y/Q526T ； (g)Y411Q/H535N ； (h)K414S/V456N ； (i)V415T/A569P ； (j)V426H/Q526Y ； (k)E442K/E450D/Q459R；(I)L463N/T508R ； (m)T508R/K519I/K525V ； (n)F509I/T527Y ； (ο)I523Q/Κ538Υ ； (p)Q526M/K557G ;以及(q) K541F/A561F。262.根據實施方案261所述的核酸構建體，其中所述嵌合多肽包含HSA結構域III中的胺基酸取代，所述取代選自由下列組成的組(a)L407N/P447S ;(b)L407N/P447S/A539I ； (c)L407N/F509M ； (d)Y411Q/H535N ； (e)K414S/V456N ； (f)V426H/Q526Y ； (g)L463N/T508R ； (h) F509I/T527Y ； (i) I523Q/K538Y ； (j) Q526M/K557G ；以及(k) K541F/A561F。263.根據實施方案242-254中任一項所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是表面可及殘基。264.根據實施方案263中任一項所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是表面可及殘基。265.根據實施方案242-250中任一項所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代是表面可及殘基且在多個物種中是保守的殘基。266.根據實施方案265中任一項所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的所有所述胺基酸取代是表面可及殘基且在多個物種中是保守的殘基。
267.根據實施方案242-266中任一項所述的核酸構建體，其中(i)包含與SEQ IDNO 1具有至少90%同一性的編碼HSA結構域III的核苷酸序列。268.根據實施方案267所述的核酸構建體，其中(i)包含與SEQID NO 1具有至少95%同一性的編碼HSA結構域III的核苷酸序列。269.根據實施方案268所述的核酸構建體，其中(i)包含與SEQID NO 1具有至少98%同一性的編碼HSA結構域III的核苷酸序列。270.根據實施方案242-269中任一項所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環2中。
271.根據實施方案242-270中任一項所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環3中。272.根據實施方案242-271中任一項所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環6中。273.根據實施方案242-272中任一項所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋7中。274.根據實施方案242-273中任一項所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環7中。275.根據實施方案242-273或272中任一項所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋8中。276.根據實施方案242-275中任一項所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環8中。277.根據實施方案242-276中任一項所述的核酸構建體，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在HSA結構域III的環9中。278.根據實施方案242-277中任一項所述的核酸構建體，其中(ii)包含編碼異源蛋白質的核苷酸序列，所述異源蛋白質包括抗體或其抗原結合片段。279.根據實施方案242-278中任一項所述的核酸構建體，其進一步包含編碼接頭的核苷酸序列。280.根據實施方案279所述的核酸構建體，其中所述核苷酸序列編碼包含一或多個 Gly-Gly-Gly-Gly-Ser 重複的接頭。281.根據實施方案242-280中任一項所述的核酸構建體，其中所述HSA部分進一步包含HSA結構域I的至少一部分；或HSA結構域II的至少一部分；或HSA結構域I的至少一部分和HSA結構域II的至少一部分。282. 一種包含複數個多肽的文庫，其中所述複數個多肽的每一個包含HSA結構域III，或其FcRn結合片段，且其中所述複數個多肽的每一個獨立地包含在所述HSA結構域III中的殘基的至少一個胺基酸取代，所述胺基酸取代在來自人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬的血清白蛋白蛋白質為保守的。283. 一種包含複數個多肽的文庫，其中所述複數個多肽的每一個包含HSA結構域III，或其FcRn結合片段，且其中所述複數個多肽的每一個獨立地包含在所述HSA結構域III中的殘基的至少一個胺基酸取代，所述胺基酸取代在來自人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬的血清白蛋白蛋白質為保守的，而在來自雞的血清白蛋白中不是保守的。284. 一種包含複數個多肽的文庫，其中所述複數個多肽的每一個包含HSA結構域III，或其FcRn結合片段，且其中所述複數個多肽的每一個獨立地包含在所述HSA結構域III中的殘基的至少一個胺基酸取代，所述胺基酸取代為表面可及殘基。285.根據實施方案284所述的文庫，其中所述表面可及殘基在HSA結構域III的環2中。286.根據實施方案284或285所述的文庫，其中所述表面可及殘基在HSA結構域III的環3中。287.根據實施方案284-286中任一項所述的文庫，其中所述表面可及殘基在HSA結構域III的環6中。
288.根據實施方案284-273中任一項所述的文庫，其中所述表面可及殘基在HSA結構域III的環7中。289.根據實施方案284-288中任一項所述的文庫，其中所述表面可及殘基在HSA結構域III的環8中。290.根據實施方案284-289中任一項所述的文庫，其中所述表面可及殘基在HSA結構域III的環9中。291. 一種包含複數個多肽的文庫，其中所述複數個多肽的每一個包含HSA結構域III，或其FcRn結合片段，且其中所述複數個多肽的每一個獨立地包含在所述HSA結構域III中的殘基的至少一個胺基酸取代，所述胺基酸取代(i)既為表面可及殘基且(ii)在來自人、豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬的血清白蛋白蛋白質中為保守的。292. 一種包含複數個多肽的文庫，其中所述複數個多肽的每一個包含HSA結構域III，或其FcRn結合片段，且其中所述複數個多肽的每一個獨立地包含在所述HSA結構域III中的殘基的至少一個胺基酸取代，所述胺基酸取代在來自除人以外的以下組中的兩個或兩個以上物種中的血清白蛋白蛋白質中為保守的豬、大鼠、小鼠、狗、兔、牛、雞、驢、蒙古沙鼠、羊、貓和馬。293.根據實施方案291或292所述的文庫，其中所述至少一個胺基酸取代在HSA結構域III的環2中。294.根據實施方案291-293中任一項所述的文庫，其中所述至少一個胺基酸取代在HSA結構域III的環3中。295.根據實施方案291-294中任一項所述的文庫，其中所述至少一個胺基酸取代在HSA結構域III的環6中。296.根據實施方案291-295中任一所述的文庫，其中所述至少一個胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋7中。297.根據實施方案291-296中任一項所述的文庫，其中所述至少一個胺基酸取代在HSA結構域III的環7中。298.根據實施方案291-297中任一項所述的文庫，其中所述至少一個胺基酸取代在HSA結構域III的螺旋8中。299.根據實施方案291-298中任一項所述的文庫，其中所述至少一個胺基酸取代在HSA結構域III的環8中。300.根據實施方案291-299中任一項所述的文庫，其中所述至少一個胺基酸取代在HSA結構域III的環9中。301.根據實施方案282-300中任一項所述的文庫，其中所述複數個多肽的每一個進一步包含HSA結構域I的至少一部分；或HSA結構域II的至少一部分；或HSA結構域I的至少一部分和HSA結構域II的至少一部分。302.根據實施方案282-301中任一項所述的文庫，其中所述文庫為展示文庫。303.根據實施方案302所述的文庫，其中展示文庫的類型選自由酵母、噬菌體和哺乳動物組成的組。304. 一種篩選根據實施方案282-303中任一項所述的文庫的方法，所述方法包括(a)選擇用於篩選的複數個多肽；(b)篩選對FcRn具有增加的親和力或具有增加的血 清半衰期的多肽；以及(c)測定對FcRn具有增加的親和力或具有增加的血清半衰期的多肽的序列。
8
具體實施例方式參考以下實施例可以更容易理解現在所述的本發明，所包括的這些實施例僅出於說明本發明的某些方面和實施方案的目的，並不旨在限制本發明。例如，本文公開的特定構建體和實驗設計代表示例性的驗證適當功能的工具和方法。同樣顯而易見的是，所公開的特定構建體和試驗計劃的任何一者可以在本公開的範疇內被替代。此外，應理解，除非特別指出，特定列出或描述的所用的具體設備和試劑、大小、製造商等不應認為限制本發明。進一步應理解，類似地發揮作用的其他設備和試劑可以很容易地被替代。8. I實施例I :人FcRn與人血清白蛋白(HSA)的結構域III結合的動力學和親和力分析此實施例使用表面等離子體共振法(SPR)測量HSA的結構域III對人FcRn的締合常數、解離常數和平衡親和力常數。結構域111(也縮寫為「Dili」)是跨越胺基酸殘基381-585的人血清白蛋白蛋白質的片段。結構域III的胺基酸序列以SEQ ID N0:1示出。全長成熟HSA的胺基酸序列以SEQ ID NO :2示出。自比赤酵母(Pichia Patoris)表達和純化結構域III以用於這些實驗中。8. I. I重組蛋白質表達和純化Geneart AG, Regensburg, Germany獲得編碼結構域III基因的重組質粒。使用限制酶EcoRI和Notl從供應商提供的載體切除結構域III基因並將其克隆至pPICZ- a -A比赤酵母表達載體中(Invitrogen,目錄號V195-20)。以製造商說明中描述的方式表達重組結構域III蛋白。將重組結構域III蛋白質分泌至介質中，且使其通過疏水相互作用色譜法在來自GE Healthcare的Hi Trap 丁基瓊脂糖快流柱上純化(目錄no. 17519701)。簡言之，首先將培養基的鹽度調整為I. 5M硫酸銨和50mM磷酸鈉，pH調整為7. O。過濾培養基並使其通過丁基瓊脂糖柱，接著使用PH7. O的低鹽磷酸鈉緩衝液洗脫所結合的結構域III。將純化的蛋白質部分通過具有保持在50°c下的循環水套的HydroxyaloxypsopylDextran(Sigma-Aldrich,目錄ηο·Η6258)柱而去脂化。如使用考馬斯亮藍染色通過4-12%SDS PAGE可見(圖1Α)，去脂化和未去脂化形式的純度都為99%。通過A280測定蛋白質濃度。通過近-UV-⑶和遠-UV-⑶測量確認純化的結構域III的適當摺疊，所述測量與先前公布的測量緊密相關(參見,例如Giancola等，International Journal ofBiologicalMacromolecules 20 (1997) 193-204)8.1.2動力學測量在25°C下於BIAcore TlOO儀器(Uppsala, Sweden)上測量平衡、締合和解離速率常數，並使用BIAcore TlOO求值軟體,版本I. I (BIAcore, Inc, Uppsala, Sweden)分析數據。使用標準胺偶聯(BIAcore Handbook，2002)，將結構域III的非去脂化和去脂化形式以偶聯密度分別為1016和1184RU共價固定在CM4(目錄號BR-1005-39)或CM5晶片(目錄號BR-1000-14)上。使用沒有蛋白質的同一個固定方案模擬偶聯其中一個流動細胞以用作空白。所有的注射都在pH 5. 5下的50mM磷酸鹽溶液和150mM NaCl緩衝液中進行，且在具有pH 7. 4的磷酸鹽緩衝液(PBS)的注射之間重新產生晶片表面。為在單一實驗中測量締合常數(km)、解離常數U和平衡解離常數(KD)，在固定結構域III蛋白質上以50yL/min的速度注射遞增濃度的人FcRn(39nM-40nM)(圖1B，左圖)。允許結合以達到平衡，且通過 同時將曲線的締合(4分鐘)相與解離(I分鐘)相擬合成I =Ilangmuir模型來獲得動力學常數k^^Pk。^。通過使用非線性回歸分析將平衡時的結合響應(Req)與分析物濃度的關係曲線擬合為穩態親和力模型來獲得Kd (圖1B)。結構域III的去脂和非去脂化形式顯示類似的結合傳感圖以及Req與Ligand濃度關係圖。FcRn與結構域III的相互作用顯示快速締合(km ^ 7e3)與解離(kff ^ 4e_2)動力學(表I)。結構域III對FcRn的Kd在5_8 μ M之間，其比全長HSA對FcRn的Kd大約7倍(例如，更大的解離常數)(表I)。Kd的不同主要歸因於結構域III相對於HSA，具有更快的Ktjff，而兩種分子的Km卻相當。源自Kra^PKtjff的Kd與通過實驗獲得的值接近一致，從而驗證了動力學測量。此外，具有可變羧基部分的兩種不同的傳感器晶片(CM4和CM5)具有類似的親和力。動力學常數與平衡常數在結構域III的去脂化和非去脂化形式之間是相當的，說明脂質分子不介導或促進FcRn與結構域III的結合。轟丄.該表提供與人血清白蛋白(HSA)的結構域III結合的人FcRn的源自SPR的動力學與平衡常數，以及與公布的全長HSA的動力學常數的比較(表格最下方)。
權利要求
1.一種包含人血清白蛋白(HSA)部分的多肽，所述HSA部分包含HSA結構域III或其新生兒Fe受體(FcRn)結合片段，其中所述HSA結構域III包含一至十八個胺基酸取代以相對於其中所述HSA部分不包括所述胺基酸取代的對照多肽增加所述多肽對FcRn的親和力和其血清半衰期中的一者或兩者。
2.根據權利要求I所述的多肽，其中所述多肽以比所述對照多肽高的親和力與FcRn結入口 o
3.根據權利要求I或2所述的多肽，其中所述多肽以比所述對照多肽高的親和力與FcRn結合，且其中所述親和力在酸性pH下測得。
4.根據權利要求1-3中任一項所述的多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自表5中所列的那些。
5.根據權利要求1-4中任一項所述的多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代在以下任何位置處，對所述位置相對於全長成熟HSA(SEQ ID NO:2)中的位置進打編號殘基381、殘基383、殘基391、殘基401、殘基402、殘基407、殘基411、殘基413、殘基414、殘基415、殘基416、殘基424、殘基426、殘基434、殘基442、殘基445、殘基447、殘基450、殘基454、殘基455、殘基456、殘基457、殘基459、殘基463、殘基495、殘基506、殘基508、殘基509、殘基511、殘基512、殘基515、殘基516、殘基517、殘基519、殘基521、殘基523、殘基524、殘基525、殘基526、殘基527、殘基531、殘基535、殘基538、殘基539、殘基541、殘基557、殘基561、殘基566、殘基569。
6.根據權利要求1-5中任一項所述的多肽，其中所述多肽包含在HSA結構域III中的選自由下列組成的組的位置處的胺基酸取代，對所述位置相對於全長成熟HSA中的位置進行編號(a)殘基383和413 ； (b)殘基401和523 ； (c)殘基407和447 ； (d)殘基407和447 和 539 ； (e)殘基 407 和 509 ； (f)殘基 407 和 526 ； (g)殘基 411 和 535 ； (h)殘基 414 和456 ；⑴殘基415和569 ； (j)殘基426和526 ； (k)殘基442和450和459 ； (I)殘基463和508 ； (m)殘基 508 和 519 和 525 ； (n)殘基 509 和 527 ； (o)殘基 523 和 538 ； (p)殘基 526 和557 ;以及(q)殘基541和561。
7.根據權利要求1-6中任一項所述的多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自由下列組成的組V381N、V381Q、E383A、E383G、E383I、E383L、E383V、N391A、N391G、N391I、N391L、N391V、Y401D、Y401E、K402A、K402G、K402I、K402L、K402V、L407F、L407N、L407Q、L407W、L407Y、Y411Q、Y411N、K413C、K413S、K413T、K414S、K414T、V415C、V415S、V415T、Q416H、Q416P、V424A、V424G、V424I、V424L、V424N、V424Q、V426D、V426E、V426H、V426P、G434C、G434S、G434T、E442K、E442R、R445F、R445W、R445Y、P447S、P447T、E450D、E450E、S454C、S454M、S454T、V455N、V455Q、V456N、V456Q、L457F、L457W、L457Y、Q459K、Q459R、L463N、L463Q、E495D、T506F、T506W、T506Y、T508K、T508R、T508S、F509C、F509I、F509L、F509M、F509V、F509W、F509Y、A511F、A511W、A511Y、D512F、D512W、D512Y、T515C、T515H、T515N、T515P、T515Q、T515S、L516F、L516S、L516T、L516W、L516Y、S517C、S517F、S517M、S517T、S517W、S517Y、K519A、K519G、K519I、K519L、K519V、R521F、R521W、R521Y、 I523A、 I523D、 I523E、 I523F、 I523G、 15231、 I523K、 I523L、 I523N、 I523Q、 I523R、I523V、I523W、I523Y、K524A、K524G、K524I、K524L、K524V、K525A、K525G、K525I、K525L、K525V、Q526C、Q526M、Q526S、Q526T、Q526Y、T527F、T527W、T527Y、E531A、E531G、E531I、E531L、E531V、H535D、H535E、H535P、K538F、K538W、K538Y、A539I、A539L、A539V、K541F、K541W、K541Y、K557A、K557G、K557I、K557L、K557V、A561F、A561W、A561Y、T566F、T566W、T566Y、A569H 和 A569P。
8.根據權利要求7所述的多肽，其中HSA結構域III中的至少一個所述胺基酸取代選自由下列組成的組L407N、L407Y、V415T、V424I、V424Q、V426E、V426H、P447S、V455N、V456N、L463N、E495D、T506Y、T508R、F509M、F509W、A511F、D512Y、T515Q、L516T、L516W、S517W、R521W、I523D、I523E、I523G、I523K、I523R、K524L、Q526M、T527Y、H535P 和 K557G。
9.根據權利要求1-8中任一項所述的多肽，其中所述多肽包含選自由下列組成的組的HSA結構域III中的胺基酸取代(a)L407N/P447S；(b)L407N/P447S/A539I；(c)L407N/F509M；(d)Y411Q/H535N；(e)K414S/V456N；(f)V426H/Q526Y；(g)L463N/T508R；(h)F509I/T527Y；(i)I523Q/K538Y；(j)Q526M/K557G ;和(k)K541F/A561F。
10.根據權利要求1-9中任一項所述的多肽，其包含異源蛋白質，其中所述多肽保留所述異源蛋白質的功能活性且可與FcRn結合。
11.根據權利要求10的多肽，其中所述異源蛋白質包括抗體或其抗原結合片段。
12.根據權利要求10或11的多肽，其中所述異源蛋白質包括治療蛋白質。
13.根據權利要求10-12中任一項所述的多肽，其中使所述異源蛋白質以化學方式或重組方式與所述HSA部分綴合。
14.根據權利要求1-9中任一項所述的多肽，其與非蛋白質物質綴合，其中所述多肽保留所述異源非蛋白質物質的功能活性且可與FcRn結合。
15.根據權利要求10-14所述的多肽，其中使所述異源蛋白質或所述非蛋白質物質與所述HSA部分的N-末端胺基酸、所述HSA部分的C-末端胺基酸或所述HSA部分的內部胺基酸綴合。
16.根據權利要求1-15中任一項所述的多肽，其中所述HSA部分進一步包含HSA結構域I的至少一部分；或HSA結構域II的至少一部分；或HSA結構域I的至少一部分和HSA結構域II的至少一部分。
17.—種組合物，其包含根據權利要求1-16中任一項所述的多肽，以及一種藥學上可接受的載體。
18.一種治療需要其的受試者的方法，包括對所述受試者施用根據權利要求1-16中任一項所述的多肽或根據權利要求17所述的組合物。
19.一種核酸構建體,其包含編碼根據權利要求1-16中任一項所述多肽的核苷酸序列。
20.一種增加蛋白質對FcRn的親和力和其血清半衰期中的一者或兩者的方法，包括使所述蛋白質與根據權利要求1-9或16中任一項所述的多肽綴合。
21.—種增加非蛋白質物質對FcRn的親和力和其血清半衰期中的一者或兩者的方法，包括使所述非蛋白質物質與根據權利要求1-9或16中任一項所述的多肽綴合。
全文摘要
本發明提供具有相比天然HSA改善的特性的人血清白蛋白(HSA)組合物。
文檔編號A61K38/38GK102781960SQ201180012375
公開日2012年11月14日 申請日期2011年2月15日 優先權日2010年2月16日
發明者C·喬德裡, C·高, X·姚 申請人:米迪繆尼有限公司