一種浙貝母總生物鹼粗提取物幹膏的製作方法

2023-12-05 15:32:36

專利名稱：一種浙貝母總生物鹼粗提取物幹膏的製作方法
技術領域：
本發明涉及中藥材有效成分提取技術領域，特別涉及一種浙貝母總生物鹼粗提取
物幹膏。
背景技術：
浙貝母為百合科貝母屬，浙貝母的乾燥鱗莖，為傳統常用中藥之一，被列為著名的「浙八味」之一，其味苦、性寒，有清熱潤肺、化痰止咳、散結消腫等功效。浙貝母的主要活性成分為生物鹼，含有浙貝甲素、浙貝乙素、原貝母鹼、浙貝母苷、異浙貝甲素等。浙貝母中的總生物鹼含量很低，僅含0. 12% -0. 25% (質量分數)，這給浙貝母的 總生物鹼提取帶來了特殊的困難。目前，對浙貝母總生物鹼提取物製備方法的文獻研究不多，且現有技術中提取工藝消耗溶劑量過大、提取效率低、成本過高、不適用於工業化大生產。

發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種浙貝母總生物鹼粗提取物幹膏，本發明使用逆流法提取浙貝母中的總生物鹼，其能夠更加充分地對總生物鹼成分進行提取，與現有技術方法相比具有節省溶劑、提取效率高、成本低等特點，適於工業化生產製備。本發明解決上述技術問題所採用的技術方案是一種浙貝母總生物鹼粗提取物幹膏，採用逆流提取法進行提取得到，所述逆流提取法依次包括以下步驟步驟(I):取浙貝母，粉碎後加入質量分數為65-85%的乙醇水溶液，30_60°C下逆流提取4-6h，過濾後合併收集濾液，濃縮，得濃縮液；步驟(2):所述濃縮液中加入質量分數為2%的鹽酸，充分攪拌，過濾，收集濾液，殘渣用質量分數為2%的鹽酸溶液洗滌兩次，合併上述濾液；步驟(3):採用質量分數5%的氫氧化鉀鹼化步驟(2)所得濾液，調PH值至
7.0-9. 0，所得溶液以乙酸乙酯萃取，萃取液減壓濃縮，得所述浙貝母總生物鹼提取物，所述浙貝母總生物鹼提取物在70°C真空乾燥，即得到所述浙貝母總生物鹼粗提取物幹膏。本文所述「減壓濃縮」為低溫真空濃縮，其溫度控制在1(T20°C。濃縮的程度是使所得最終的蔓越莓提取物的固形物含量控制在其重量的0. 49Tl%。在所述步驟(I)中，加入質量分數為75%乙醇水溶液，在40°C下逆流提取6小時。所述步驟(2)中，所述濃縮液中加入1/4倍生藥材量的質量分數為2%鹽酸。所述步驟(3)調PH值至8. O。本發明與現有技術相比，具有如下優點( I)本發明所採用逆流提取法，能夠更加充分地對生物鹼類成分進行提取，與現有技術方法相比具有節省溶劑、提取效率高、成本低等特點，適於工業化生產。


圖I是乙醇的質量百分數(％)與浸出液中總生物鹼質量(mg)的關係圖。圖2是接觸時間(h)與浸出液中總生物鹼質量(mg)的關係圖。圖3是溫度(V )與浸出液中總生物鹼質量(mg)的關係圖。圖4是本發明一種浙貝母總生物鹼粗提取物幹膏的製備方法使用的裝置的示意圖。
具體實施方式
一、提取工藝條件考察I、浸出條件實驗 (I)乙醇濃度對生物鹼類化合物浸出效果的影響工業生產中，由於原料中常含有一定的水分，乙醇經循環使用後亦含有一定水分，乙醇濃度對生物鹼類化合物的浸出存在很大的影響，故以不同濃度乙醇液對生物鹼類物質進行浸出實驗，以總生物鹼質量跟蹤分析。在乙醇濃度對從原料中浸出生物鹼類的影響實驗中，分別取5份原料，每份40. OOg,進行實驗，以不同濃度的乙醇水溶液各180. 00ml，浸提6h，比較所得總生物鹼質量；同時比較乙醇濃度對浸出後的固液分離及渣含量的影響，其結果如圖I所示。由圖I可知，相同條件下，浸出能力強弱依次為75% >80% >70% >85% >65%，因此，選擇75%乙醇水溶液作為浸出劑。(2)接觸時間對生物鹼類化合物浸出效果的影響分別取6份原料，每份40. OOg,各加入濃度為75%的乙醇水溶液180. OOml進行浸出，接觸時間分別為lh，2h，3h，4h，5h，6h，其浸出結果如圖2所示。由圖2可知，室溫下(26°C )，浸出時間為6h，浸出反應基本達到平衡；延長浸出時間，浸出率基本不變。(3)溫度對生物鹼類化合物浸出效果的影響分別取6份原料粉料，每份40. OOg,各加入180. OOml濃度為75 %的乙醇水溶液，在不同的溫度下浸出，浸出時間為2h，取樣檢測浸出液中總生物鹼質量，結果如圖3所示。由圖3可知，隨著浸出溫度的增加，生物鹼類的浸出率也相應的增加；在溫度達到40°C時，增加溫度，生物鹼類的浸出率增加趨於緩慢。2、四段逆流滲漉法(工藝簡圖見圖4)共安裝了 6根￠25. 4mmX IOOOmm玻璃括口管，做為四段逆流滲漉浸出實驗的浸出器(浸出柱)，其中四根運行，兩根做周轉用。每根柱中裝入150. OOg浙貝母原料粉碎料(簡稱原料，以下同)，用計量泵將浸出劑(65-85%乙醇水溶液)，以約5ml ^mirT1的流量打入第一根浸出柱中，乙醇水溶液以約Icm HiirT1速度滲漉，當第一柱流出450ml浸出液後，將第一柱與第二柱接通。計量泵打入的新浸出劑經第一柱，流出進入第二柱；與上相同，當第二柱流出450ml黑色浸出液後，將第二柱與第三柱接通。依此類推，等到第四根柱流出450ml流出液後，將第四根柱與第五根柱接通。同時，將計量泵出口管從第一柱上端移至第二柱上端與第二柱接通(第一柱從系統中撤出)。此時，新的浸出劑，經計量泵進第二柱，經三、四、五柱後，從第五柱流出，同樣取450ml浸出液；此後，新浸出劑進第三柱，從第六柱出浸出液。依此類推，不斷循環進行四段逆流滲漉浸出實驗至達到浸出平衡。本試驗中第九柱開始至第十二柱止，這四根柱流出的浸出液已近似平衡時的浸出液，故當新的浸出劑從從第九根柱進，經十、^ 、十二柱，而從第十二柱下流出450ml黑色浸出液後,停止浸出試驗。將九、十、十一、十二柱流出的浸出液取樣，送檢，測定總生物鹼質量。(注柱體均為循環使用，九，十，十一，十二僅代表標號，不具實際意義)3、四段逆流滲漉浸出試驗結果如上述的逆流法進行試驗。每份樣品為150. Og,以75%乙醇為浸出液，40°C下浸提6h，液固比為3。取九、十、十一、十二柱流出的浸出液進行測定，其結果如表I所示。表I四段逆流滲漉浸出試驗結果
浸出柱號浸出液體積浸出總生物鹼質量浸出總生物鹼質量平均值浸出率(平均值) _(m0_(HiM)_(ma)_(%)
94*^0 0351.75
10450.0353.38352.6394.03
11450.0353.25
12450.0_352.14_從表I可知，浙貝母中總生物鹼含量以0. 25%計，則四段逆流滲漉浸出法(以浸出液計)其浸出率達到94. 03% (以總生物鹼計)。實施例以下通過具體實施例，對本發明作進一步的詳細描述。實施例I :取浙貝母藥材150g，加入4. 5倍量質量分數為70%的乙醇溶液、30°C下逆流提取4h，過濾後合併收集濾液，濃縮,濃縮液加入1/4倍生藥材量質量分數為2%的鹽酸，充分攪拌,過濾，收集濾液,殘渣用質量分數為2%的鹽酸溶液洗滌兩次，合併上述濾液,濾液用用質量分數為5 %的NaOH溶液調pH值至7，所得溶液乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯層，萃取液減壓濃縮，得浙貝母總生物鹼提取物，所述浙貝母總生物鹼提取物在70°C真空乾燥，即得到所述浙貝母總生物鹼粗提取物幹膏790. 3mg。所述「減壓濃縮」為低溫真空濃縮，其溫度控制在15°C。濃縮的程度是使所得最終的蔓越莓提取物的固形物含量控制在其重量的0. 5%。實施例2:取浙貝母藥材150g，加入4. 5倍量質量分數為75%的乙醇溶液、40°C下逆流提取6h，過濾後合併收集濾液，濃縮,濃縮液加入1/4倍生藥材量質量分數為2%的鹽酸，充分攪拌,過濾，收集濾液,殘渣用質量分數為2%的鹽酸溶液洗滌兩次，合併上述濾液,濾液用用質量分數為5 %的NaOH溶液調pH值至8，所得溶液乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯層，萃取液減壓濃縮，得浙貝母總生物鹼提取物，所述浙貝母總生物鹼提取物在70°C真空乾燥，即得到所述浙貝母總生物鹼粗提取物幹膏784. 5mg。所述「減壓濃縮」為低溫真空濃縮，其溫度控制在10°C。濃縮的程度是使所得最終的蔓越莓提取物的固形物含量控制在其重量的0. 4%。實施例3
取浙貝母藥材150g，加入4. 5倍量質量分數為80%的乙醇溶液、50°C下逆流提取5h，過濾後合併收集濾液，濃縮,濃縮液加入1/4倍生藥材量質量分數為2%的鹽酸，充分攪拌,過濾，收集濾液,殘渣用質量分數為2%的鹽酸溶液洗滌兩次，合併上述濾液,濾液用用質量分數為5 %的NaOH溶液調pH值至9，所得溶液乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯層，萃取液減壓濃縮，得浙貝母總生物鹼提取物，所述浙貝母總生物鹼提取物在70°C真空乾燥，即得到所述浙貝母總生物鹼粗提取物幹膏792. 6mg。所述「減壓濃縮」為低溫真空濃縮，其溫度控制在20°C。濃縮的程度是使所得最終的蔓越莓提取物的固形物含量控制在其重量的1%。含量測定取實施例I 3中所得的浙貝母的總生物鹼提取物幹膏12mg，用氯仿定容至IOOmL作為總生物鹼提取物幹膏中總生物鹼含量測定用供試品溶液。
藥材中總生物鹼含量測定方法精密稱定浙貝母粉末(過4號篩)2g，用氨水ImL 潤溼15min後,加2OmL乙醚-氯仿-無水乙醇(體積比為25 : 8 : 2. 5),稱重,超聲處理40min,稱重,用提取溶劑補足重量,4000r mirT1離心,精密吸取上清液5mL,蒸乾,殘洛加氯仿溶解並定容至10mL，搖勻，作為浙貝母藥材中總生物鹼含量測定用供試品溶液。精密稱取浙貝甲素對照品5. 52mg,加氯仿溶解定容至50mL，作為對照品溶液。精密吸取總生物鹼提取物幹膏中總生物鹼含量測定用供試品溶液I. 5mL、浙貝母中總生物鹼含量測定用供試品溶液I. 5mL、對照品溶液lmL、2mL以及空白對照溶液氯仿，分別置於25mL容量瓶中，加入pH值為5. 0的鄰苯二甲酸氫鉀-氫氧化鈉緩衝液5mL及0. OOlmol L—1的溴麝香草酚藍試液2mL，氯仿定容至刻度，充分搖勻後移入分液漏鬥中，靜置40min，分取氯仿層移至預先放有0. 20g無水硫酸鈉(預先於105°C加熱Ih)的具塞錐形瓶中，密閉搖勻，取上清液在416nm處測定吸光度，根據標準曲線計算浙貝母藥材中總生物鹼含量為0. 25%，根據以下公式計算總生物鹼提取物幹膏中的總生物鹼含量
權利要求
1.一種浙貝母總生物鹼粗提取物幹膏，其特徵在於，採用逆流提取法進行提取得到，所述逆流提取法依次包括以下步驟 步驟(I):取浙貝母，粉碎後加入質量分數為65-85%的乙醇水溶液，30-60°C下逆流提取4-6h，過濾後合併收集濾液，濃縮，得濃縮液； 步驟(2):所述濃縮液中加入質量分數為2%的鹽酸，充分攪拌，過濾，收集濾液，殘渣用質量分數為2%的鹽酸溶液洗滌兩次，合併上述濾液； 步驟(3):採用質量分數5%的氫氧化鉀鹼化步驟(2)所得濾液，調PH值至7. 0-9. 0，所得溶液以乙酸乙酯萃取，萃取液減壓濃縮，得浙貝母總生物鹼提取物，所述浙貝母總生物鹼提取物在70°C真空乾燥，即得到所述浙貝母總生物鹼粗提取物幹膏。
2.如權利要求I所述的一種浙貝母總生物鹼粗提取物幹膏，其特徵在於，在所述步驟(I)中，加入質量分數為75%乙醇水溶液，在40°C下逆流提取6小時。
3.如權利要求I所述的一種浙貝母總生物鹼粗提取物幹膏，其特徵在於，所述步驟(2)中，所述濃縮液中加入1/4倍生藥材量的質量分數為2%鹽酸。
4.如權利要求I所述的一種浙貝母總生物鹼粗提取物幹膏，其特徵在於，所述步驟(3)調PH值至8. O。
5.如權利要求I所述的一種浙貝母總生物鹼粗提取物幹膏，其特徵在於，所述一種浙貝母總生物鹼粗提取物幹膏中總生物鹼含量為43. 6% ^44. 9%。
全文摘要
本發明公開了一種浙貝母總生物鹼粗提取物幹膏，採用逆流提取法進行提取得到，包括以下步驟步驟(1)取浙貝母，粉碎後加入65-85%的乙醇水溶液，30-60℃下逆流提取4-6h，過濾後合併收集濾液，濃縮，得濃縮液；步驟(2)所述濃縮液中加入鹽酸，充分攪拌，過濾，收集濾液，殘渣用鹽酸溶液洗滌兩次，合併上述濾液；步驟(3)採用質量分數5%的氫氧化鉀鹼化步驟(2)所得濾液，調pH值7.0-9.0，所得溶液以乙酸乙酯萃取，萃取液減壓濃縮，得所述浙貝母總生物鹼提取物。本發明採用逆流提取法，能夠更加充分地對生物鹼類成分進行提取，與現有技術方法相比具有節省溶劑、提取效率高、成本低等特點，適於工業化生產。
文檔編號A61P11/14GK102772638SQ20121028323
公開日2012年11月14日 申請日期2012年8月10日 優先權日2012年8月10日
發明者季進軍 申請人:寧波傑順生物科技有限公司