提高Atoh1表達的化合物的製作方法

2023-10-25 11:12:37

專利名稱：提高Atoh1表達的化合物的製作方法
技術領域：
本發明概括地提供化合物、藥物組合物、以及它們的使用方法，該方法包括在生物 細胞中導致Atohl基因(例如，Hathl)表達增加的方法。更具體地說，本發明涉及得益於 Atohl表達增加的疾病和/或疾患的治療。
背景技術：
最常見類型的聽力損失之一是由毛細胞損失造成的感音神經性耳聾，該毛細胞 是在耳蝸中負責將聲音轉導成電信號的感覺細胞。人類出生時內耳每個耳蝸只包含大約 15,000個毛細胞，然而這些細胞會由於各種遺傳或環境因素而損失，這種損失或受損的細 胞不能被替換。然而，轉錄因子Atohl的過度表達，可誘導耳蝸的感覺器官Corti器上的 表皮細胞分化成毛細胞(Zheng 和 Gao，Nat Neurosci 2000 ；3 580-586 ；Kawamoto 等人， J Neurosci2003 ；23 4395-4400 ；Gubbels 等人，Nature 2008 ；455 :537_541)。Atoh-I 的 表達也起著推動其他細胞，例如腸細胞，進入分化狀態的作用(Aragaki等人.，Biochem. Biophys. Res. Comm. 2008年4月；368 (4) :923_929)，並且Atoh-I的過度表達會降低結腸癌 細胞的增殖(Leow 等人，Ann N Y Acad Sci. 2005 年 11 月；1059 174-83)。發明概述本發明特徵在於本文所述的化合物，和包含這些化合物的組合物。例如，本發明特 徵在於包含了能夠增加細胞內Atohl表達的本文公開的一種或多種化合物，或其藥學上可 接受的鹽，和藥學上可接受的載體的藥物組合物。該組合物可配製用於施用於患者。因此， 本發明包含該藥物組合物，以及適用於保存在組織培養物中的細胞或組織的濃縮原液和組 合物，以及所述化合物和組合物的使用方法。如果該組合物是藥學上可接受的(即無毒的)，其可以包括藥學上可接受的載體， 諸如緩衝液(例如，磷酸鹽緩衝液)、胺基酸、脲、醇、抗壞血酸、磷脂、多肽、EDTA、氯化鈉(如 生理鹽水)、脂質體、甘露醇、山梨醇、水、甘油或其組合。也可包括防腐劑和染料。在一些具 體實施方案中，該組合物是無菌的。此處所述的化合物可用於改變保存在細胞培養物中細胞的特徵(例如，在體外)， 並且所述化合物和/或經處理的細胞可以施用於需要治療的患者。例如，治療患者的方法 可以按包含下列步驟的方法進行(a)選擇需要治療的患者，以及(b)將有效治療量的本文 所述的化合物(例如，製造用於施用的化合物)施用於該患者。藥物組合物可以全身施用 (如口服或腸胃外)。具體而言，可靜脈內、肌內、腹膜內、舌下、直腸、陰道、透皮、皮下或通 過吸入施用該組合物。當口服施用時，該組合物可配製成片劑(如，壓製片)、丸劑、糖漿、懸 浮液、乳液或膠囊。當腸胃外施用，該組合物可配製成錠劑、滴劑(如耳滴液)、溶液，灌腸劑、栓劑或噴霧劑。該組合物也可以使用導管或泵施用。所述組合物也可以局部施用(例如，向耳或需要細胞分化和/或Atohl表達的其 他部位)。為了向耳部施用，可通過注射入耳蝸的腔(luminae)，注射入內耳道聽覺神經幹 和/或注射入鼓階來施用藥物組合物。更加具體地，可通過鼓室內注射，應用於(即注射 入)外耳、中耳或內耳，通過耳圓窗注射，或通過耳蝸囊注射來施用藥物組合物。還可以使 用導管或泵將藥物組合物施用於患者(例如，局部地向中耳和/或內耳)。需要治療的患者可患有或有風險發展為，與聽覺毛細胞的損失有關的聽力障礙或 不平衡疾患。雖然本發明不限於通過任何特定機制起作用的化合物，可在治療有效地增加 了患者內耳(或其它靶組織(例如，腫瘤))中AtOhl基因在細胞中的表達，或有效地提高 患者內耳中具有聽覺毛細胞特徵的細胞數目之處使用該組合物。聽覺毛細胞可以是外部或 內部的聽覺毛細胞。需要治療的患者也可患有或有風險發展為癌症。癌症可能是胃腸癌(例如，食道 癌、膽囊癌、肝癌、胰腺癌、胃癌、小腸癌、大腸癌、結腸癌或直腸癌)。需要治療的患者也可患有或有風險發展為小腦顆粒神經元缺乏、關節病和/或骨 關節炎。在一個具體實施方案中，治療患有聽力障礙或不平衡疾患的患者的方法可以由包 括下述步驟的方法施行(a)任選地選擇需要治療的患者，(b)獲得能夠分化為聽覺毛細胞 的細胞群體，(c)將細胞群體在體外與有效量的本文所述的一種或多種化合物接觸足以使 得該群體中有分化的聽覺毛細胞特徵的細胞數目增加的時間，和(d)將細胞群體或其亞群 (subset)(例如，更高度分化的細胞亞群)施用於患者的耳部。能夠分化為聽覺毛細胞的細 胞群體可以包括幹細胞、誘導多能性幹細胞(IPS)、祖細胞、支持細胞、Deiters細胞、柱細 胞、內指狀細胞、頂蓋細胞(tectal cell)、Hensen細胞和生殖細胞。幹細胞可以是成體幹 細胞(例如，源於內耳、骨髓、間質、皮膚、脂肪、肝臟、肌肉或血液的幹細胞)、胚胎幹細胞或 從胎盤或臍帶獲得的幹細胞。如同幹細胞一樣，祖細胞可以來自內耳、骨髓、間質、皮膚、脂 肪、肝臟、肌肉或血液。施用細胞群體可以按下述步驟完成(a)將細胞注入耳蝸腔，注入內 耳中的聽覺神經幹，或注入鼓階，或(b)在耳蝸植入物內植入這些細胞。在使用細胞治療的 患者任何方法中，它們也可使用一種或多種本化合物治療，反之亦然。如前文所述，藥物組 合物可以全身或局部施用。本發明的其他方法包括增加體外細胞群體中具有聽覺毛細胞特徵的細胞數目的 方法。這些方法可以實施如下獲得能夠分化為聽覺毛細胞的細胞群體，將體外(例如， 在細胞培養物中)細胞群體與有效量的本文所述的一種或多種化合物接觸足以使得細胞 群體中具有聽覺毛細胞特徵的細胞數目增加的時間。能夠分化成毛細胞的細胞群體包括 選自由以下組成的組的細胞幹細胞、iPS細胞、內耳幹細胞、成體幹細胞、骨髓源幹細胞、 胚胎幹細胞、間質幹細胞、皮膚幹細胞、脂肪源性幹細胞、祖細胞、內耳祖細胞、支持細胞、 Deiters細胞、柱細胞、內指狀細胞、頂蓋細胞、Hensen細胞和生殖細胞。本發明還包括本文所述的化合物作為藥物的用途，和在製備用於治療或預防本文 所述疾患的藥物的用途。例如，該藥物可在用於治療或預防與毛細胞損失相關的聽力損失 或不平衡，或與不期望的細胞增殖相關的病症的方法中使用。另外，本發明包括所述化合物 在治療本文所述的疾患中的用途，所述疾患例如與聽覺細胞損失相關的聽力損失，或與不期望的細胞增殖相關的病症。該藥物可以是本文所述的任何形式，並可以單獨施用或與另 外的治療或活性劑結合使用。此外，本文還提供試劑盒(例如，包括上文描述的藥物組合物以及信息材料的試 劑盒，或包含本文所述的化合物以及信息材料的試劑盒)。試劑盒中的細胞可以按照上文描 述的方法製備，而且任一種試劑盒都可包含附加材料，例如適用於藥物組合物或細胞群體 施用的裝置，例如，適用於插入受治療者內耳的無菌靈活套管。此外，本發明所包括由本文所述的方法製備的細胞或細胞群體。本發明還包括使用本文所述的化合物中的一種或多種作為藥物，例如，可以用於 治療與聽覺毛細胞損失相關的聽力障礙或不平衡疾患，和/或與異常細胞增殖相關的病症 的藥物。本發明也包括本文所述的化合物中的一種或多種用於治療與聽覺毛細胞損失相 關的聽力障礙或不平衡疾患和/或異常細胞增殖相關的疾患的用途。定義本文使用的術語「異常增殖」定義為任何類型的細胞的任何不期望的過度增殖，其 中所述細胞沒有受到正常細胞周期發展的限制，並且其中所述增殖可導致腫瘤或任何癌症 的發展。本文使用的術語「治療」是指其中疾病或病症的一種或多種症狀被改善或其他有 益地改變的任何方法。正如本文所使用的，特定疾患的症狀的改善是指可以歸因於通過本 發明的組合物和方法的治療的，或與該治療相關的任何減輕，無論是永久或暫時的，持久或 短暫的。本文中所用的術語「有效量」和「有效治療」，是指本文所述的一種或多種化合物或 藥物組合物作用一段時間(包括急性或慢性地施用，以及周期性或連續性地施用)後，在其 施用狀況下有效產生預期效果或生理結果的量或濃度。本發明使用的一種或多種化合物或藥物組合物的有效量包括促進Atohl表達 增加的量；促進一個或多個細胞全部或部分分化以治療某種將得益於Atohl表達增加的 疾病的量，例如，阻止或延緩得益於Atohl表達增加的一種或多種疾病的發病、延緩得益於 Atohl表達增加的一種或多種疾病的進展、緩解得益於Atohl表達增加的一種或多種疾病 的影響，或普遍地改善被診斷為得益於Atohl表達增加的一種或多種疾病的患者的預後的 量，該疾病例如一種或多種本文所述的疾病。例如，在聽力衰退的治療中，能提高聽力至任 何程度或者阻滯聽力衰退的任何症狀的化合物將是治療有效的。例如在異常細胞增殖的治 療中，能減少細胞的增殖、減小腫瘤大小、降低轉移、降低血管向所述腫瘤增殖的化合物都 是治療有效的。化合物的治療有效量並不是要求治癒疾病，而是為疾病提供治療。在整個說明書中，術語「患者」是用於描述根據本發明的方法提供治療的動物、人 類或非人類。包括獸醫和非獸醫應用。該術語包括，但不局限於，鳥類，爬行類，兩棲類和 哺乳動物類，例如，人類、其他靈長類動物、豬、嚙齒類如小鼠和大鼠、兔、豚鼠、倉鼠、牛、馬、 貓、狗、綿羊和山羊。典型的患者包括人類、家畜和家養寵物，如貓和狗。術語「滷代」或「滷素」是指氟、氯、溴或碘的任何基團。—般而言，並且除非另有說明，否則取代基(基團)前綴名是通過以下衍生自母 體氫化物(i)將母體氫化物中的「烷(ane)」替換為後綴「基(yl)」、「二基(diyl)」、「三基(triyl)」、「四基(tetrayl)」等；或(ii)將母體氫化物中的「e」替換為後綴「基(yl) 」、「二基(diyl)」、「三基(triyl)」、「四基(tetrayl)」等。(在此，當指定具有自由價的原子時， 該原子的給定價數與母體氫化物中任何確定的價數一樣低)。本文全文也使用可接受約定 名稱(contracted names)，如金剛烷基、萘基、蒽基、菲基、呋喃基、吡啶基、異喹啉基、喹啉 基和哌啶基，以及通用名，如乙烯基、烯丙基、苯基和噻吩基。稠環、雙環、三環、多環的取代 基編號和命名遵守使用常規編號/編碼系統。術語「烷基」是指可以是直鏈或支鏈的，包含指定數目的碳原子的飽和烴鏈。例如， C1-C6烷基表示，該基團可能含有1到6(1和6包含在內)碳原子。任何原子都可以，例如， 被一個或多個取代基(例如，諸如描本文所述的任何Ra的定義中描述的那些)任選地取代。 烷基的例子包括，但不局限於甲基、乙基、正丙基、異丙基和叔丁基。術語「滷代烷基」是指其中至少有一個氫原子被滷代取代的烷基。在一些實施方 案中，多於一個氫原子(例如，2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14)被滷代取代。在一些 實施方案中，氫原子可以各自被相同的滷素取代(如氟)，或氫原子可以被不同滷素的組合 取代(如氟和氯)。「滷代烷基」還包括其中所有的氫都被滷代取代的烷基部分(有時本文 稱全滷代烷基，例如，全氟烷基，如三氟甲基)。任何原子可以，例如，由一個或多個取代基 (例如，像本文所述的任何Rb的定義中描述的那些)任選地取代。術語「芳烷基」是指其中烷基氫原子被芳基取代的烷基部分。烷基部分碳之一作 為芳烷基與其它部分的連接點。任何環或鏈原子可以，例如，由一個或多個取代基(例如， 像本文所述的任何Re的定義中描述的那些)任選地取代。「芳烷基」的非限制性實例，包括 苄基，2-苯乙基和3-苯丙基。術語「雜芳烷基」是指其中烷基氫原子由雜芳基取代的烷基部分。烷基碳之一作 為芳烷基與另一個部分的連接點。雜芳烷基包括其中烷基部分上多於一個氫原子由雜芳基 取代的基團。任何環或鏈原子可，例如，由一個或多個取代基(例如，像本文所述的任何Re 的定義中描述的那些)任選地取代。雜芳烷基可以包括，例如，2-吡啶基乙基。術語「烷氧基」和「滷代烷氧基」分別是指-0-烷基和-0-滷代烷基基團。術語「苯 氧基」是指-ο-苯基基團。術語「雜環基」指含有獨立地選自0、N或S的一個或多個(如1-4個)雜環原子的 完全飽和的單環、雙環、三環或其他多環系。雜原子或環碳原子是雜環基取代基與另一個部 分的連接點。任何原子可，例如，由一個或多個取代基(例如，像本文所述的任何化的定義 中描述的那些)任選地取代。雜環基可以包括，例如，四氫呋喃基、四氫吡喃基、哌啶基(哌 啶子基)、哌嗪基、嗎啉基(嗎啉代)、吡咯啉基和吡咯烷基。術語「環烷基」是指完全飽和的單環、雙環、三環或其他多環烴基。任何原子可以， 例如，由一個或多個取代基(例如，像本文所述的任何Re的定義中描述的那些)任選地取 代。一個環碳原子作為一個環烷基與另一個部分的連接點。環烷基部分可以包括，例如，環 丙基、丁烷基、環戊烷基、環己基，環庚基、金剛烷基和降冰片基(norbornyl)(雙環[2. 2. 1]
庚基)。術語「環烯基」是指部分不飽和的單環、雙環、三環或其他多環烴基。一個環碳(如飽和的或不飽和的)是環烯基取代基的連接點。任何原子可以，例如，由一個或多個取代基 (例如，像本文所述的任何Re的定義中描述的那些)任選地取代。環烯基部分可以包括，例如，環己烯基、環己二烯基或降冰片烯基。術語「芳基」是指芳族單環或雙環的烴環系統，其中任何環原子可以，例如，通過一 個或多個取代基(例如，像本文所述的任何Rd的定義中描述的那些)任選地取代。芳基部 分可以包括苯基和萘基。術語「雜芳基」指含有獨立地選自0、N或S(以及其一氧化物和二氧化物，例如， N—0_、S(0)、S02)的一個或多個(如1-6個)雜原子環原子的芳族單環或雙環烴基。任何 原子可以，例如，由一個或多個取代基(例如，像本文所述的任何Rd的定義中描述的那些) 任選地取代。雜芳基可以包括，吡啶基、噻吩基、呋喃基(呋喃基)、咪唑基、異喹啉基、喹啉 基和吡咯基。符號C(O)是指通過雙鍵與氧原子相連的碳原子。術語「氧代」是指雙鍵的氧，即 =0。術語「取代基」是指例如，烷基、滷代烷基、環烷基、芳烷基、雜芳烷基、雜環基、環烯 基、芳基或雜環基基團的任何原子上「取代」的基團。一般而言，當特定變量的定義包括氫 和非氫(滷代、烷基、芳基等)的可能性時，術語「非氫取代基」是統指該特別變量中的非氫 可能性。符號，如「被從1-5個Rd任選地取代的C6-Cltl芳基」(等等)，旨在包括未取代的 C6-C10芳基和被從1-5個Rd取代的C6-Cltl芳基。使用沒有修飾語「任選地取代」或「取代」 的取代基(基團)前綴名，如烷基，應被理解為特定的取代基是未被取代。然而，使用沒有 修飾語「任選地取代」或「取代」的「滷代烷基」，仍然被理解為其中至少一個氫原子被滷代 取代的烷基。為了闡述方便，還應理解，如果在本說明書(包括權利要求書)中，基團被定義為 「如同本文任何處所定義」(或類似的)，該特定基團的定義包括，本說明書中首次出現和最 廣泛通用的定義，以及任何地方描述的任何亞通用的(sub-generic)和具體的定義。本申請涉及2004年8月31日提交的美國臨時專利申請號60/605，746,2005年8 月30日提交的國際申請號PCT/US2005/030714、2004年11月15日提交的美國申請序列號 10/989，649、2007年12月12日提交的美國申請序列號11/953，797、2008年8月7日提交的 美國申請序列號12/187，543、2006年11月15日提交的美國臨時申請序列號60/859，041、 2007年11月14日提交的國際申請號PCT/US2007/084654、2008年9月18日提交的美國申 請序列號12/233.017、2008年11月24日提交的美國臨時申請序列號60/859，041，上述各 項全部內容通過參考弓I入本文。除非另外定義，否則本文使用的所有技術和科學術語具有與本發明所屬領域的技 術人員的通常理解相同的含義。本文描述了本發明使用的方法和材料；另外，也可使用本領 域熟知的適合的方法和材料。材料、方法和實例僅是示例性的，且無意限制。本文提及的所 有出版物、專利申請、專利、段落、資料庫條目和其他參考資料全部通過參考引入。一旦發生 衝突，以本說明書為準，包括定義。本發明的其他特徵和優點根據以下的詳細闡述和附圖、以及權利要求中，將是顯 然的。


圖1A-1H是酚類化合物或其衍生物的通用結構。圖1I-1K是特定的酚類化合物及其衍生物的結構。圖2A-2F是苯甲醯胺化合物或相關化合物的通用結構。圖2G-2I是特定苯甲醯胺化合物或相關化合物的結構。圖3A-3X是包含一個或多個雜環的化合物的通用結構。圖3Y-3ZZ是包含一個或多個雜環的特定化合物的結構。圖4A-4G是包含一個或多個苯環的化合物的通用結構。圖4H-4I是包含一個或多個苯環的特定化合物的結構。圖5A-5E是包含連接到五元雜環系統的醯胺基團的化合物的通用結構。圖5F和5G是包含連接到五元雜環系統的醯胺基團的特定化合物的結構。圖6A-60是包含稠合到另一個環系統的五元雜環系統的化合物的通用結構。圖6P-6V是包含一個五元雜環系統並與另一個環系統融合的特定化合物的結構。圖7A-7C是吡啶化合物的通用結構，而圖7D是嘧啶化合物的通用結構。圖7E-7F是特定的吡啶或嘧啶化合物的結構。圖8A和8B是苯胺化合物或苯胺衍生物的通用結構。圖8C是苯胺化合物或苯胺衍生物的特定結構的結構。圖9-116是顯示了在具有由Mathl增強子和最小啟動子控制的穩定表達螢光素酶基 因的HEK細胞中Mathl的表達(見實施例1)的線圖。圖中所示化合物編號對應圖1到圖8中 標出的化合物結構。採用在實施例1和實施例2中介紹的高通量篩選方法，測定Mathl活性。圖117A和117B是顯示進行優化高通量篩選的實驗結果的圖。圖118A和118B是顯示進行優化高通量篩選的重複實驗的散點圖。圖119是顯示Mathl活化的柱狀圖，該活化在暴露於所示化合物的細胞中，使用實 施例1和實施例2中描述的Mathl螢光素酶報告測定進行評估。圖1到圖8中提供這些化 合物的結構。這些化合物的初始Atohl活化結果可參見圖9-114。圖120A是顯示Mathl活化的柱狀圖，該活化在暴露於所示化合物的細胞中，使用 實施例1和實施例2中描述的Mathl螢光素酶報告測定進行評估。圖1到圖8中提供這些 化合物的結構。這些化合物的初始Atohl活性結果可參見圖9-114。圖120B顯示了圖117A中所示化合物的結構。圖120C顯示了在暴露於所示化合物的細胞中AtohlmRNA表達。圖121A和121B是未處理的細胞(A)和接觸了化合物(Cp)Cp. -0000540的細胞⑶ 的照片。陽性染色毛細胞特異性標記物Mathl-GFP和肌球蛋白7a的細胞群用箭頭表示。發明詳述此外，本發明提供涉及用於治療本文所述病症的患者的化合物和/或藥物組合物 的化合物和方法。雖然治療方法不局限於其中特定的潛在細胞事件發生的那些，但本化合 物和組合物可提高受治療者和/或細胞的Atohl基因的表達，從而導致細胞分化成為，例 如，聽覺毛細胞。Atoh-IAtohl蛋白同系物1 (Atohl或atonal)是編碼包含基本的螺旋-環-螺旋(bHLH)結構域的蛋白的原神經基因，該蛋白似乎在果蠅(Drosophila)神經系統發育中起決定細 胞命運的重要作用(Jarman等人，Cell，73 :1307_1321，1993)。Atohl是進化上保守的，是在 赤擬谷盜(Tribolium castenium，紅色麵粉甲蟲(red flour beetle))、紅鰭東方飩(Fugu rubripes，河豚魚(puffer fish))、雞(Cathl)、小鼠(Mathl)和人類(Hathl)中鑑別的同 源物(Ben-Arie等人，Hum. Mol. Gene.，5 1207-1216，1996)。這些同源物每個都包含長度相 同並且與Atohl bHLH結構域有高度序列同源性的bHLH結構域。例如，Hathl和Mathl基因 的長度幾乎相同。這些分子也有高度相似的核苷酸序列(86%同源性)和高度相似的bHLH 胺基酸序列(89% )。Cathl的bHLH結構域分別與Hathl和Mathl的bHLH結構域有97% 和95%的同源性。Cathl的bHLH與Atohl bHLH結構域有67%的同源性。相比之下，果蠅 的其他編碼蛋白的bHLH結構域只共享40% -50%的序列同源性。每個哺乳動物Atohl同源物起活化E box(CANNTG(SEQ ID NO 1))依賴性轉錄的 轉錄因子的功能(Arie 等人，Hum. Mol. Genet.，9 1207-1216，1996 ；Akazawa 等人，J. Biol. Chem.，270 :8730_8738，1995)，並且在神經組織和胃腸(GI)道中起決定細胞命運的重要正 調節子的功能。Zoghbi等人(美國公開號2004/0237127)描述了將上述編碼Atohl同源物的核酸 用於治療耳聾、骨關節炎和異常細胞增殖的用途。如本文所使用的，"Atohl「是指任何以及所有Atohl相關的核酸或蛋白序列，並 且包括分別與Atohl核酸或胺基酸序列直向同源或同源(homologous)的或與Atohl核酸 或胺基酸序列具有明顯序列相似性的任何序列，因此，術語「Atohl」包括其他哺乳動物同 源物，例如，人類、小鼠、大鼠等等。序列可以存在於任何動物中，包括哺乳動物(例如，人 類)。Atohl核酸和胺基酸序列的實例包括但不限於，Atohl (例如，分別為NM_001012432. 1 和 NP_001012434. 1)(黑猩猩(Pan troglodytes))、Hathl (例如，NM_005172. 1 和 NP_005163. 1)(智人(Homo sapiens) )、Mathl (例如，NM_007500. 4 和 ΝΡ_031526· 1) (小家鼠(Mus musculus))、Atohl (NM_001109238. 1 和 NP_001102708. 1)(褐鼠(Rattus norvegicus))、Atohl (XM_001102247. 1 和 ΧΡ_001102247· 1)(獼猴(Macaca mulatta))、 Atohl (ΝΜ_001098099. 1 和 ΝΡ_001091568· 1)(黃牛(Bos taurus))、Atohl (XM_544986. 2 和 XP_544986. 2)(家犬(Canis lupus familiaris))和Cathl (例如，U61149. 1 和AF467292. 1) (Gallus gallus)，以及所有能用來指代這些蛋白的其他同義詞，例如，atonahatonal同源 物l、Athl和螺旋-環-螺旋蛋白Hathl。而且，在動物中可存在多個同源序列或相似序列。 見，例如，GeneID :474(智人)、GeneID :11921 (小家鼠)、GeneID :461380 (黑猩猩)、GeneID 5OOl56 (褐鼠)、GeneID =7O4893 (稱猴)、GeneID =539I58 (黃牛)和 GeneID :487864(家 犬)。與人類Atohl 序列(參見 Genbank Acc. Nos. NM_005172. 1 和 NPJW5I63. 1)有顯 著序列相似性(即，整條序列相似性大於80 %，例如，至少是85 %、90 %、95 %、99 %或更高) 的任何序列都可以用於本方法。為了測定兩條核酸序列同源性的百分比，為最優比較的目 的，進行序列比對(按照最優比對的目的的需要，將缺口引入第一和第二胺基酸或核酸序 列之一或兩者，並且為了達到比較的目的可以棄去非同源序列)。比對為了比較目的比對 的參考序列的長度的至少80% (在一些實施方案中，參考序列長度的大約85%、90%、95% 或100%)。然後比較相應的核苷酸位置的核苷酸。當佔據第一條序列中的某個位置的核苷酸，與第二條序列相應位置的核苷酸相同時，認為該分子在該位置是相同的。兩條序列的 同源性百分比是所述序列共享的相同位置的數目的函數，為了得到兩條序列的最優比對， 還需要將缺口的數目和每個缺口的長度考慮進去。兩條序列的序列比較和同源性百分比的測定，可以用數學算法完成。例如，兩條氨 基酸序列間的同源性百分比可以用Needleman和Wunsch ((1970) J. Mol. Biol. 48 :444_453) 算法確定，該算法已經併入GCG軟體包的GAP程序中，使用Blossum 62評分矩陣，缺口罰分 12、缺口延伸罰分4，以及移碼缺口罰分5。化合物本發明提供能夠增加細胞中Atohl表達的化合物。在一些實施方案中，Atohl表 達的增加是顯著增加。在一些實施方案中，Atohl表達的增加可以是，例如，大約在基線 以上 1-10 %、11-20 %、21-30%、31-40%、41-50%、51-60%、61-70%、71-80%、81-90%、 91-100 %,101-200 201-300 301-400 401-500 501-1000 %,1001-10000 10001-100000%之間或更高。Atohl的增加也可以表示為成倍增加，例如，其中100%的增 長是一倍增長，1000%的增長是10倍增長等等。可選地或此外，Atohl表達的增加足以促進 細胞的分化，例如，非聽覺毛細胞(即，不是聽覺毛細胞的細胞，例如，祖細胞或幹細胞)分 化成為或趨於聽覺毛細胞。可用於本文所述的任何方法的化合物是酚類化合物(或它們的硫類似物，例如， 苯基硫醇)，或這些化合物衍生的化合物，如苯基醚(或硫醚)，例如，直鏈或環狀苯基醚。 例如，這些化合物可以用圖1A-1H中所示的那些結構一般表示，並且具體示例於圖1I-1K中 所示那些結構。任何酚類化合物(或硫類似物)，可以是中性或鹽的形式，例如，其鋰鹽、鈉 鹽、鉀鹽或鈣鹽。這些酚類化合物及衍生物(或它們的硫類似物)，由圖IA中的結構表示，其中R2、 R3> R4> R5和R6各自獨立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子且任選地 包含一個或多個N、0、S或F原子的部分；X為0(見圖1B)或S (見圖1C)；而且R1是H或包 含至多16個碳原子且任選地包含一個或多個N、0、S或F原子的部分。例如，包含至多16 個碳原子且任選地包含一個或多個為N、0、S或F原子的部分可以是烷氧基或三氟甲基。對於圖1D，在特定的實施方案中，R1和R2共同定義一個或多個環系統，每個環系統 包含至多16個碳原子且任選地包含一個或多個N、0、S或F原子。對於圖1E，在特定的實施方案中，R1是H ；即該化合物是酚類。對於圖1F-1H，在某些實施方案中，酚類衍生物是環醚衍生物。例如，可通過引入 羰基(見圖1F)和/或碳-碳雙鍵(見圖1G，其包含兩者)，使得分子的環醚部分變剛性。 在其它實施方案中，可通過在環醚系統上引入第二環系統，使得這些環醚衍生物變剛性。在 特定的實施方案中，圖IF的結構代表環醚衍生物，其中R8、R9、R1(1和R11各自獨立地為H、F、 Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子且任選地包括一個或多個N、0、S或F原子 的部分。在其他特定的實施方案中，圖IG的結構表示環醚衍生物，其中R12和R13各自獨立 地為H、F、Cl、Br、I、0H、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部 分。在其他特定實施方案，圖IH的結構表示環醚衍生物，其中R14和R15共同定義一個或多 個環系統，每個環系統包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分， R16> R17和R18各自獨立地為H、F、Cl、Br、I、0H、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分。本化合物是醯胺化合物和/或其相關化合物。這些化合物可以用圖2A-2F所示的 那些結構一般表示，並且具體示例於圖2G-2I中所示那些結構。任何所述醯胺或其相關化 合物可以是中性或鹽的形式。所述苯甲醯胺化合物和/或其衍生物可以用圖2A的結構表示，其中R2(1、R21、R22、R23 和R24各自獨立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多 個N、0、S或F原子的部分；並且R24和R26各自獨立地為H或包含至多16個碳原子和任選 地一個或多個N、0、S或F原子的部分。在圖2A的化合物中，R24和R25可以共同定義一個或多個環系統，每個環系統包含 至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子。這些化合物可以用圖2B中的結構 表示。例如，這些化合物可以有如圖2C和2D所示的結構，其中R27、R28、R29、R31和R32各自獨 立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或 F原子的部分；且R26是H或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的 部分。其他苯甲醯胺相關的化合物及其衍生物，由圖2E和2F中的結構描述，其中R33、 R34、R35> R36和R37各自獨立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子和任選 地一個或多個N、0、S或F原子的部分；R39、R40, R41和R42各自獨立地為H或包含至多16個 碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分。本化合物是或可以包括，一個或多個雜環系統，如3、4、5、6或7元環系統，該環系 統包括一個以上雜原子，如0、S、或N。例如，一個或多個環系統可以包括1、2、3、4或甚至 5個雜原子，如0、S或N。在許多實施方案中，環系統是芳族。例如，這些化合物可以用圖 3A-3X中所示的結構一般表示，並且具體示例於圖3Y-3ZZ中所示那些結構。是或包含一個 或多個環系統的任何所述的化合物，可以是中性或鹽的形式。是或者包括一個或多個雜環系統的化合物如圖3A的結構表示，其中R43和R44各自 獨立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S 或F原子的部分；並且X為0(圖3B)或S(圖3C)。是或包含一個或多個雜環系統的化合物如圖3D的結構表示，其中R45，R46和R48各 自獨立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、 S或F原子的部分；而且R47和R49各自獨立地為H、或包含至多16個碳原子和任選地一個 或多個N、0、S或F原子的部分。是或包含一個或多個雜環系統的化合物由圖3E的結構表示，其中R5(1、R51、R52和R53 各自獨立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、 0、S或F原子的部分；而且X為0 (圖3F)或S (圖3G)。是或包含一個或多個雜環系統的化合物由圖3H的結構表示，其中R55、R56和R57各自獨立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、 S或F原子的部分；而且R54是H、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F 原子的部分。例如，在具體實施方案中，R54和R55可以共同定義一個或多個環系統，每個環 系統包含至多16個碳原子和任選地一個或多個為N、0、S或F原子，如圖31所示。是或包含一個或多個雜環系統的化合物由圖3J的結構表示，其中R57、R59和R6tl各自獨立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、 S或F原子的部分；而且R58是H、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F 原子的部分。例如，在具體實施方案中，R58和R59可以共同定義一個或多個環系統，每個環 系統包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子，如圖3K所示。例如，在 具體實施方案中，R57及R6tl可以共同定義一個或多個環系統，每個環系統包含至多16個碳 原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子，如圖3L所示。例如，在具體實施方案中，R57和 R60與R58和R59可以共同每個定義一個或多個環系統，每個環系統包含至多16個碳原子和 任選地一個或多個N、0、S或F原子，如圖3M所示。是或包含一個或多個雜環系統的化合物由圖3N的結構表示，其中U62和R64各 自獨立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、 S或F原子的部分；而且R63是H、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F 原子的部分。例如，在具體實施方案中，R61和R62可以共同定義一個或多個環系統，每個環 系統包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子，如圖30所示。是或包含一個或多個雜環系統的化合物由圖3P中的結構表示，其中R65和R66各自 獨立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S 或F原子的部分；而且X為0 (圖3Q)或S (圖3R)。是或包含一個或多個雜環系統的化合物由圖3S中的結構表示。其中R67、R68和R69 各自獨立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、 0、S或F原子的部分；且X為0 (圖3T)或S (圖3U)。是或包含一個或多個雜環系統的化合物由圖3V中的結構表示，其中Rto、R71和R72 各自獨立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、 0、S或F原子的部分；且X為0 (圖3W)或S (圖3X)。可以在本文所述的任何方法中使用的本化合物，是或包含一個或多個苯環，如稠 合苯環系統，例如，是類黃酮、香豆素或其他類似系統的一部分的稠合苯環系統。例如，這種 化合物通常可以用圖4A-4G所示的結構表示，並且具體示例於圖4H和41中所示的那些結 構。是或包含一個或多個環系統的任何所述的化合物可以是中性或鹽的形式。是或包含一個或多個苯環系統的化合物由圖4A中的結構表示，其中R74、R75, R76, R77、R78和R79各自獨立地為H、F、Cl、Br、I、0H、CN、N02、或包含至多16個碳原子和任選地一 個或多個N、0、S或F原子的部分。例如，在具體實施方案中，R76和R77可以共同定義一個或 多個環系統，每個環系統包含至多16個碳原子和任選地一個或多個為N、0、S或F原子，如 圖4B所示。例如，圖4B中的化合物可以用圖4C和4D中的化合物表示，其中R81、R82、R83和 R84各自獨立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個 N、0、S或F原子的部分。例如，在其他具體實施方案中，其中R76和R77共同定義一個或多個 環系統，該化合物可以由圖4E-4G中的那些結構表示，其中R85、R86、R87和R88各自獨立地為 H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子 的部分；且R89是H或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分。在一些實施方案中，可用於本文所述的任何方法的化合物，包含結合到五元雜環 系統的醯胺基，例如，包含多於一個雜原子(如0、S或N)的雜環系統。例如，一個或多個環 系統可以包含1、2、3、4或甚至5個雜原子，如0、S或N。在許多實施方案中，環系統是芳族。例如，這種化合物通常可以圖5A-5E中所示的那些結構表示，並且具體示例於圖5F-5G中所 示的那些結構。是或包含一個或多個環系統的任何所述的化合物可以是中性或鹽的形式。在某些實施方案中，包含結合到五元雜環系統的醯胺基的化合物由圖5A中的結 構表示，其中R92> R93和R94各自獨立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原 子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分；且R9tl和R91各自獨立地為H、或包含至多 16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分；且X為0(圖5B)或S(圖5C)。 例如，在一些具體實施方案中，R9tl和R91可以共同定義一個或多個環系統，其中包含至多16 個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分(見圖5D)。在其他某些實施方案中，包含結合到五元雜環系統的醯胺基的化合物由圖5E中 的結構表示，其中R97和R98各自獨立地為!^、(1、81~、1、0!1、^而2、或包含至多16個碳原 子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分；而且R95、R96和R99各自獨立地為H、或包含 至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分。在一些實施方案中，可用於本文所述任何方法的化合物，包含融合到一個或多個 其他環系統的五元雜環系統，如，定義一個或多個4-、5-、6-、7_或8元環系統的環系統。例 如，這種化合物可以用圖6A-60所示的那些結構一般表示，並且具體示例於圖6P-6V中所示 那些結構。是或包含一個或多個環系統的任何所述的化合物，可以是中性或鹽的形式。在一些實施方案中，包含融合到一個或多個其他環系統的五元雜環系統的化合物 由圖 6A 表示，其中 R1(1。、R101 > R102> R103> R104 和 R105 各自獨立地為 H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2, 或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分；而且X為S (見圖6B) 或0(見圖6C)。在其它實施方案中，包含融合到一個或多個其他環系統的五元雜環系統的化合物 由圖 6D 表示，其中 R106、R107> R108> R109> Rno> R 111、Rll2、Rll3、Rl 14 禾口 尺115 各自獨立地為 H、F、Cl、 Br、I、0H、CN、N02、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分；且 X為S(見圖6E)或0(見圖6F)。在某些實施方案中，包含融合到一個或多個其他環系統的五元雜環系統的化合物 由圖 6G 表示，其中 R118、R119、R120> R121 > R123 各自獨立地為 H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含 至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分；且R123是H、或包含至多16 個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分。在某些實施方案中，包含融合到一個或多個其他環系統的五元雜環系統的化合物 由圖6H表示，其中R124、R125> R126和R127各自獨立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至 多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分；且R128和R129共同定義一個 或多個環，每個環包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子。例如，圖6H 中的化合物可用圖61表示，其中R13。、R131、R132和R128,各自獨立地為H、F、Cl、Br、I、0H、CN、 NO2、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分；且R129，是H、或 包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分。在其他某些實施方案中，包含融合到一個或多個其他環系統的五元雜環系統的化 合物由圖 6J 表示，其中 R134、R135、R136> R137> Ri40 和 R141 各自獨立地為 H、F、Cl、Br、I、OH、CN、 NO2、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分；且R139是H或包 含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分。例如，並參考圖6K，在具體的實施方案中，R140和R141共同定義一個或多個環，每個環包括包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子。在一些實施方案中，包含融合到一個或多個其他環系統的五元雜環系統的化合物 由圖 6L 表示，其中 R143、R144> R145> R146 和 R147 各自獨立地為 H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包 含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分；而且X為0(見圖6M)或 S(見圖6N)。在另外一些實施方案中，包含融合到一個或多個其他環的五元雜環系統的化合物由圖60表示，其中R149、R150、R151和R152各自獨立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至 多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分；且R153是H、或包含至多16個 碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的部分。在一些實施方案中，可用於本文所述的任何方法的化合物，是吡啶或嘧啶。例如， 這種化合物可以用圖7A-7D所示的結構一般表示，並且具體示例於圖7E和7D中所示那些 結構。為吡啶或嘧啶的任何所述化合物，可以是中性或鹽的形式，例如，其鹽酸鹽。在一些實施方案中，圖7A描述了吡啶化合物，其中R155、R156、R157、R159和R16tl各自獨 立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或 F原子的部分。在一些特定的實施方案中，Rire和R157(見圖7B)，或Rire和R157以及R159和 R160(見圖7C)共同定義一個或多個環，每個環包括包含至多16個碳原子和任選地一個或多 個N、0、S或F原子。在一些實施方案中，圖7D描述了嘧啶化合物，其中R161、R162、R163和R164各自獨立地 為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原 子的部分。在一些實施方案中，可用於本文所述的任何方法的化合物是苯胺或苯胺衍生物。 例如，這種化合物可以用圖8A和8B所示的那些結構一般表示，並且具體示例於圖8C中所 示那些結構。為吡啶或嘧啶的任何所述化合物，可以是中性或鹽的形式。在一些實施方案中，圖8A描述了苯胺化合物，其中R17tl、R171、R172、R173和R174各自獨 立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或 F原子的部分；且R175和R176各自獨立地為H、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個 N、0、S或F原子的部分。在一些實施方案中，圖8B描述了苯胺衍生化合物，其中R178、R179、R18tl和R181各自獨 立地為H、F、Cl、Br、I、OH、CN、NO2、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或 F原子的部分；且R177是H、或包含至多16個碳原子和任選地一個或多個N、0、S或F原子的 部分。在一些實施方案中，這些化合物可以具有圖6G中描述的式
權利要求
一種藥物組合物，其包含能夠增加細胞中Atoh1表達的化合物，或其藥學上可接受的鹽，和藥學上可接受的載體。
2.如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述化合物具有下式
3.如權利要求2所述的藥物組合物，其中R122是-Z-Ra。
4.如權利要求3所述的藥物組合物，其中Z是0。
5.如權利要求3所述的藥物組合物，其中Ra是C7-C11芳烷基，或包括6-11個原子的雜 芳烷基，其由1-5個Re任選地取代。
6.如權利要求3所述的藥物組合物，其中Ra是C7-C11芳烷基，其由1-5個Re任選地取代。
7.如權利要求6所述的藥物組合物，其中Ra是苄基或苯乙基，其中它們每個的苯基部 分由1-2個Re任選地取代。
8.如權利要求2所述的藥物組合物，其中R123是C6-Cltl芳基或包含5-10個原子的雜芳 基，它們每個由1-5個Rd任選地取代。
9.如權利要求2所述的藥物組合物，其中R123是C6-Cltl芳基，其由1-5個Rd任選地取代。
10.如權利要求9所述的藥物組合物，其中R123是苯基，其由1-2個Rd任選地取代。
11.如權利要求2所述的藥物組合物，其中R118、R119、R12Q和R121中的一個是滷代或NO2, 並且其他的是氫。
12.如權利要求2所述的藥物組合物，其中R122是-Z-Ra，其中Ra是C7-C11芳烷基、或包含6-11個原子的雜芳烷基，其由1-5個Re 任選地取代；並且R123是C6-Cltl芳基或包含5-10個原子的雜芳基，它們每個由1-5個Rd任選地取代。
13.如權利要求2所述的藥物組合物，其中R122是-Z-Ra，其中Z是0，並且Ra是C7-C11芳烷基，其由1-5個Re任選地取代；並且 R123是C6-Cltl芳基，其中由1-5個Rd任選地取代；並且 R118> RH9> R120和Rm中的每個獨立地選自H、滷代和NO2。
14.如權利要求2所述的藥物組合物，其中所述化合物是CP-0000540，或其藥學上可接受的鹽。
15.如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述化合物具有下式
16.如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述化合物具有下式
17.如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述化合物具有下式
18.如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述化合物具有下式
19.如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述化合物具有下式
20.如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述化合物具有下式
21.如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述化合物選自 4-(4-氯苯基)-1-(5!1-吡啶並[5，4-b]吲哚_4_基)-IH-吡唑-3-胺；(6-氯-1- (2-氯苄氧基)-2-苯基-IH-苯並[d]咪唑； 6-氯-1- (2-氯苄氧基)-2- (4-甲氧基苯基)-IH-苯並[d]咪唑； 6-氯-2- (4-甲氧基苯基)-1- (4-甲基苄氧基)-IH-苯並[d]咪唑； 6-氯-1-(3，5- 二甲基苄氧基)-2- (4-氧基苯基)-IH-苯並[d]咪唑； 6-氯-1- (4-甲氧基苄氧基)-2- (4-甲氧基苯基)-IH-苯並[d]咪唑；(1-(4-甲基苄氧基)-6-硝基-2-苯基-IH-苯並[d]咪唑； 4-(1Η-苯並[d]咪唑-2基)苯酚；(2，5_ 二氯-N-((l-甲基-IH-苯並[d]咪唑-2基)甲基)苯胺；(4-(2- (1-甲基-IH-苯並[d]咪唑-2-基)乙基)苯胺；(2-((2-甲氧基苯氧基)甲基)-IH-苯並[d]咪唑；(2- ((4-氟苯氧基)甲基)-1-甲基-IH-苯並[d]咪唑；(2-(苯硫基甲基)-IH-苯並[d]咪唑；(3-(6-甲基-IH-苯並[d]咪唑-2基)-2H-色烯-2-亞胺； 2_(鄰甲苯氧基甲基)-1Η-苯並[d]咪唑；(2-(4-甲氧基苯基)-1-苯乙基-IH-苯並[d]咪唑 N-(6-溴苯並[d]噻唑-2-基)噻吩-2-甲醯胺； N-(苯並[d]噻唑-2-基)-1-甲基-IH-吡唑-5-甲醯胺； 2_ (4-氟苄硫基)苯並[d]噻唑；(5-氯-N-甲基苯並M噻唑-2-胺； Ν-(2-(1Η-苯並M咪唑_2基)苯基)異丁醯胺；N-(6-乙醯氨基苯甲酸M噻唑-2-基)呋喃-2-甲醯胺； N-(6-氟苯並[d]噻唑-2-基)-3-甲氧基苯甲醯胺； 2-(苯並M噁唑-2-基硫代)-N- (2-氯苯基)乙醯胺； 5-氯-2-苯基苯並M噁唑； 5-甲基-2-間甲苯苯並[d]噁唑；(2- (4-異丁氧基苯基)-3-(萘-2-基)-2，3- 二氫喹唑啉-4 (IH)-酮；N- (2- (2- (4-氟苯基)-2-氧代乙硫基)-4-氧代喹唑啉-3 (4H)-基)苯甲醯胺；(2_ (4-氯苯基)-4-(4-甲氧基苯基)_1，4-二氫苯並[4，5]咪唑並[l，2_a]嘧啶；(2-(3-吡啶基)-4-(4-溴苯基)-1，4-二氫苯並[4，5]咪唑並[l，2_a]嘧啶；N-仲丁基-1，7，7-三甲基-9-氧代-8，9-二氫-7H-呋喃並[3,2-f]色烯-2-甲醯胺； N-(3-氨基甲醯基-5，6- 二氫-4H-環戊二烯並[b]噻吩-2-基)呋喃-2-甲醯胺；(3-氯-N-(5-氯吡啶-2-基)苯並[b]噻吩-2-甲醯胺；(3-氯-N-((四氫呋喃-2-基)甲基)苯並[b]噻吩-2-甲醯胺； N- (3- (5-氯-3-甲基苯並[b]噻吩-2-基)-IH-吡唑-5基)乙醯胺； 2_ (萘-2-基)-IH-吲哚； 2-(吡啶-2基)-IH-吲哚；N- (2-氯苯基)-2- (1H-吲哚-3基)-2-氧代乙醯胺； 2-間甲苯基喹啉；(2-(4-(2-甲氧基苯基)哌嗪-1-基)喹啉；·2-(1Η-苯並[d] [1,2,3]三唑-1-基)-N-(2，3-二氫-IH-茚-2-基)乙醯胺；·1-苯乙醇-IH-苯並[d][1,2,3]三唑； 7- (4-氟苄氧基)-2H-色烯-2-酮；N- (2,4- 二氯苯基)-8-甲氧基-2H-色烯-3-甲醯胺； N- (3-氯苯基)-8-甲基-3，4- 二氫-1 (2H)-碳硫代醯胺； 7-甲氧基-5-甲基-2-苯基-4H-色烯-4-酮；·2-(3，4-二甲基)喹喔啉；·4-溴-N-(5-氯吡啶-2-基)苯甲醯胺；·3_氨基_6，7，8，9-四氫-5H-芳庚並[e]噻吩並[2，3_b]吡啶_2_甲醯胺； (Z)-3-甲基-N' _(煙醯氧基)苯甲亞胺醯胺； N，N- 二乙基-6-甲氧基噻吩並[2，3-b]喹啉-2-甲醯胺； 6-(4-甲氧基苯基)-1，2，3，4_四氫-1，5-萘啶；·5-溴-N-(2-(苯硫基)乙基)煙醯胺；N-(6-甲基吡啶-2-基)-2，3-二氫苯並[b][l，4] 二噁烯-6-甲醯胺； 2-(4-甲基苄硫基)噁唑[4，5-b]吡啶； N- (2-甲氧基乙基)-5-對甲苯嘧啶-2-胺； 4-(5-(苯並[b]噻吩-2-基)嘧啶-2基)嗎啉；·4-(5- (4-氟苯基)嘧啶-2基)嗎啉； N- (4-溴-3-甲基)喹唑啉-4-胺； N-(4-甲氧基苯基)喹唑啉-4-胺； N- (3-甲氧基苯基)-9H-嘌呤-6-胺；N，N- 二乙基-1-間甲苯-IH-吡唑並[3,4-d]嘧啶-4-胺； (5-(4-溴苯基)呋喃-2-基)(嗎啉代)甲酮； (Z) -4-溴-N'-(呋喃-2-羰氧基)苯甲亞胺醯胺； N-(4-碘苯基)呋喃-2-甲醯胺；·5-(5-(2，4-二氟苯基)呋喃-2-基)-1-(甲磺醯)-IH-吡唑；·1-(3-氨基-5-(4-叔丁基苯基)噻吩-2-基)乙酮；N- (3-氰基-4，5，6，7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)-2-氟苯甲醯胺；N-(5-氯吡啶-2-基)噻吩-2-甲醯胺；N-(2-(4-氟苯氧基)乙基)噻吩-2-甲醯胺；·2，5-二甲基-N-苯基-1-(噻吩-2-基甲基)-IH-吡咯-3-甲醯胺；N-(3-氰基噻吩-2-基)-4_異丙氧基苯甲醯胺；·2-(4-甲氧基苯氧基)-N-(噻唑-2-基)乙醯胺；·4- (4-甲氧基苯基)-N- (3-甲基吡啶-2-基)噻唑-2-胺； 4_ (聯苯-4-基)噻唑-2-胺；·4- (4- (4-甲氧基苯基)噻唑-2基)-3-甲基異噁唑-5-胺； N- (2-甲氧基苯基)-4-苯基噻唑-2-胺；·1-(4-氨基_2-(間甲苯基氨基)噻唑-5基)-2-甲基丙烷-1-酮； 4-(4-氯苯基)-1-(5!1-嘧啶並[5，4-B]吲哚_4_基)-IH-吡唑-3-胺；2-(4-氯苯基)-6-乙基-5-甲基吡唑[1,5-a]嘧啶_7(4H)_酮； 5-甲氧基-2- (5-苯基-IH-吡唑-3-基)苯酚；(3-(4-溴苯基)-1-苯基-IH-吡唑-4-基)甲醇； ^(2，5-二氯苯基)-1_乙基-IH-吡唑-3-甲醯胺；4-氯-1-甲基-N-(2-氧代-2-苯乙基)-IH-吡唑-3-甲醯胺；N- (3- (5-叔丁基-2-甲基呋喃-3-基)-IH-吡唑-5基)苯甲醯胺； N-(5-甲基異噁唑-3-基)苯並[d][l，3]間二氧雜環戊烯-5-甲醯胺 (5-(4-溴苯基)異噁唑-3基)(嗎啉代)甲酮； N- (4-溴苯基)-5-異丙基異噁唑-3-甲醯胺；5-((4-氯-2-甲基苯氧基)甲基)-3-(批啶-4-基)-1，2，4_噁二唑； 5-(2-甲氧基苯基)-3-對甲苯基-1，2，4-噁二唑；5-(苯氧甲基)-3-(吡啶-2-基)-1，2，4-噁二唑；5-(2-氯-4-甲基苯基)-3-(卩比啶-3-基)-1，2，4-噁二唑；3-(2-氯苯基)-5-對甲苯基-1，2，4-噁二唑；5-(哌啶-1-基甲基)-3-對甲苯基-1，2，4-噁二唑； 5- (4-溴苯基)-3-(吡啶-3-基)-1，2，4-噁二唑； 5- (2-溴苯基)-3- (4-溴苯基)-1，2，4-噁二唑;5-(2-溴-5-甲氧基苯基)-3-(噻吩-2-基)-1，2，4-噁二唑；3-(2-氟苯基)-N-(3-(哌啶-1-基)丙基)_1，2，4-噁二唑-5-胺； 2- (2-氯苄氧基)-N- (4-氟苯基)胼硫代醯胺；2-(甲基氨基)-N-苯乙基苯甲醯胺；4-對叔丁基-N-((四氫呋喃-2-基)甲基)苯甲醯胺； 2-苯基-5-鄰甲苯基-1，3，4-噁二唑；4- (3- (4-氯苯基)-4，5- 二氫-IH-1,2,4-三唑-5-基)-N, N- 二甲基苯胺； 7-甲氧基-2-(4-甲氧基苯基)_1，IOb-二水合螺[苯並[e]吡唑並[1，5_C][1，3]噁 嗪_5，1'-環己烷]；6-氧代-2-(4- (3-(三氟甲基)苯氧基)苯基)-1，4，5，6-四氫吡啶_3_腈； 6-(4-甲氧基苯基)咪唑並[2，l-b]噻唑；2-(2-溴苯氧基)-N-(4H-1，2，4-三唑-3-基)乙醯胺；1-(二氫吲哚-1-基)-2-苯氧基乙酮；及2-(4_氯苯基)-6，7，8，9_四氫苯並[e]咪唑並[l，2_b][1,2,4]三嗪、或其藥學上可接 受的鹽。
22.如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述藥學上可接受的載體選自由緩衝液、氨 基酸、尿素、醇、抗壞血酸、磷脂、多肽、EDTA、氯化鈉、脂質體、甘露醇、山梨糖醇、水和甘油組 成的組。
23.一種治療受治者的方法，所述方法包括選擇需要治療的患者，並向所述受治療者施 用治療有效量的權利要求1所述的藥物組合物。
24.如權利要求23所述的方法，其中所述需要治療的患者患有，或有風險發展為與聽 覺毛細胞損失相關的聽力障礙或不平衡疾患的人，並且其中所述藥物組合物局部地施用於所述受治療者的內耳，並且增加所述患者內耳中的具有聽覺毛細胞特性的細胞的數量。
25.如權利要求24所述的方法，其中所述藥物組合物通過注射進入耳蝸腔中的一個或多個，進入到內耳道的聽覺神經幹，或進入鼓階來施用。
26.如權利要求24所述的方法，其中所述聽覺毛細胞是外聽覺毛細胞或內聽覺毛細胞。
27.如權利要求23所述的方法，其中所述需要治療的患者患有與異常細胞增殖相關的 疾患，並且其中所述治療局部施用於所述增殖細胞。
28.如權利要求27所述的方法，其中所述疾患是胃腸癌症。
29.如權利要求27所述的方法，其中所述疾患選自由食道癌、膽囊癌、肝癌、胰腺癌、胃 癌、小腸癌、大腸癌、結腸癌和直腸癌組成的組。
30.如權利要求23所述的方法，其中所述需要治療的患者患有，或有風險發展為小腦 顆粒神經元缺乏、關節病或骨關節炎。
31.一種治療患有與聽覺毛細胞損失相關的聽力障礙或者不平衡疾患的受治療者的方 法，所述方法包括選擇需要治療的受治療者；獲得能夠分化為聽覺毛細胞的細胞群體；將所述細胞群體與有效量的權利要求1所述的化合物的至少一種在體外接觸足以增 加所述群體中具有分化的聽覺毛細胞特性的細胞的數量的時間；將所述細胞群體或者其亞群施用於所述患者的耳部，由此治療所述受治療者。
32.如權利要求31所述的方法，其中所述能夠分化為聽覺細胞的細胞群體選自由幹細 胞、祖細胞、支持細胞、Deiters細胞、柱細胞、內指狀細胞、頂蓋細胞、Hensen細胞和生殖細 胞組成的組。
33.如權利要求32所述的方法，其中所述幹細胞是成體幹細胞。
34.如權利要求33所述的方法，其中所述成體幹細胞源自內耳、骨髓間質、皮膚、脂肪、 肝臟、肌肉或血液。
35.如權利要求32所述的方法，其中所述幹細胞是胚胎幹細胞或從胎盤或臍帶獲取的 幹細胞。
36.如權利要求32所述的方法，其中所述祖細胞源自內耳、骨髓、間質、皮膚、脂肪、肝 髒、肌肉或血液。
37.如權利要求31所述的方法，其中施用所述細胞群體包括(a)將所述細胞注射到所 述耳蝸腔、注射到所述內耳道中的聽覺神經幹、或注射進入所述鼓階；或者(b)將所述細胞 植入耳蝸植入物。
38.如權利要求31所述的方法，還包括向所述受治療者施用權利要求1所述的藥物組 合物。
39.如權利要求38所述的方法，其中將所述藥物組合物局部地施用於所述患者的耳部。
40.如權利要求39所述的方法，其中所述藥物組合物的施用是通過作用於所述耳蝸 腔、所述內耳道中的聽覺神經幹或所述鼓階，如果存在，作用於耳蝸植入物。
41.一種在體外增加細胞群體中具有所述聽覺毛細胞特徵的細胞的數量的方法，所述方法包括獲得能夠分化為聽覺毛細胞的細胞群體，用有效量的權利要求1所述的化合物中 的至少一種在體外與所述細胞群接觸足以增加所述細胞群體中具有所述聽覺毛細胞特性 的細胞的數量的時間。
42.如權利要求41所述的方法，其中所述能夠分化為毛細胞的細胞群體選自由幹細 胞、內耳幹細胞、成體幹細胞、源自骨髓的幹細胞、胚胎幹細胞、間質幹細胞、皮膚幹細胞、脂 肪源幹細胞、祖細胞、內耳祖細胞、支持細胞、Deiters細胞、柱細胞、內指狀細胞、頂蓋細胞、 Hensen細胞、和生殖細胞組成的組。
43.一種細胞群體，其由權利要求41所述的方法製備。
44.一種試劑盒，其包括權利要求41所述的方法製備的細胞群體。
45.一種試劑盒，其包括權利要求1所述的藥物組合物和信息材料。
46.如權利要求45所述的試劑盒，還包括適用於將所述藥物組合物施用於所述受治療 者的內耳的設備。
47.如權利要求46所述的試劑盒，其中所述裝置是靈活的套管或預裝的單劑量注射。
48.權利要求1-22中任一項所描述的化合物作為藥物的用途。
49.權利要求1-22中任一項所描述的化合物用於製備治療與聽覺毛細胞損失相關的 聽力障礙或不平衡疾患的藥物的用途。
50.權利要求1-22中任一項所描述的化合物用於製備治療與異常細胞增殖相關的疾 患的藥物的用途。
51.一種權利要求1-22中任一項所述的化合物，其用於治療與聽覺毛細胞損失相關的 聽力障礙或不平衡疾患。
52.一種權利要求1-22中任一項所述的化合物，其用於治療與異常細胞增殖相關的疾患。
全文摘要
本發明一般提供化合物、藥物組合物和其使用方法，其包括導致在生物細胞中Atoh1基因(如，Hath1)表達增加的方法。更具體地，本發明涉及將得益於Atoh1表達增加的疾病和/或疾患的治療，例如，與聽覺毛細胞損失有關的聽力障礙或不平衡疾患，或與異常細胞增殖有關的疾患。
文檔編號A61K31/341GK101990433SQ200980112358
公開日2011年3月23日 申請日期2009年2月9日 優先權日2008年2月7日
發明者喬桑俊, 喬立新, 凱薩琳·西布, 格雷戈裡·D·庫尼, 艾伯特·埃奇, 馬西·格裡克斯曼 申請人:麻薩諸塞眼科耳科診所;布裡格姆及婦女醫院股份有限公司