一種抗白血病藥物的製作方法
2023-10-18 02:28:24 1
專利名稱：一種抗白血病藥物的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種抗白血病藥物，特別是採用表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)為主要原料的抗白血病藥物。
白血病的發病除遺傳因素之外，還與環境因素密切相關。我國每年新增白血病人4-5萬，白血病復發病人15萬以上。在急性早幼粒白血病治療方面，目前多採用全反式維甲酸(ATRA)作為分化誘導劑，可使大多數患者病情緩解。但維甲酸耐藥及維甲酸綜合症可導致患者短期復發，再使用ATRA治療則因耐藥產生而達不到治療效果。骨髓移植是治療慢性粒細胞白血病較理想的方法之一，但供體困難，加之異基因或自體移植都需經預處理殺滅惡性增殖的克隆後，才能植入新的幹/祖細胞，臨床上較多應用的幹擾素療法其療效也不甚滿意。1992年以來，我國學者將三氧化二砷(As2O3)用於治療急、慢性，耐藥性白血病臨床，獲得了很好的療效，在國際上引起很大反響。進一步的基礎研究表明，As2O3抗白血病的機制是，可顯著誘導白血病細胞的凋亡。然而As2O3為重金屬化合物，有極強細胞毒效應，在體內易蓄積且不易代謝，接受治療的病人存在強烈的毒性反應。
本發明的目的是提供一種抗白血病的作用、機制一致，但無蓄積、無毒性反應的抗白血病藥物。
本發明以茶葉中兒茶素單體-表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)為原料，按常規製劑工藝，製備成濃度範圍為50-500μg/ml的製劑，可以是口服藥，也可以是注射劑。更優選範圍為250-500μg/ml。
EGCG是茶中兒茶素最主要的一個單體，具有極強的供氫能力，其分子結構式如下 本發明為適合於治療白血病人的臨床藥物劑型，特別是注射劑，用以治療急性早幼粒白血病，慢性粒細胞白血病，維甲酸耐藥早幼粒細胞白血病。本發明可以是口服藥，也可以是注射劑。
本發明是一種白血病基因調控劑，具有顯著抑制急性早幼粒白血病細胞HL-60的生長，並可誘導其凋亡的作用，且無積蓄、無任何毒副作用，具有高效、低毒的抗急性、慢性、耐藥性的特點，是一種理想的白血病治療藥物。
實施例1.EGCG對白血病細胞生長影響的實驗將人急性早幼粒白血病NK4細胞，人急性早幼粒白血病HL-60細胞，慢性粒細胞白血病K562細胞，維甲酸耐藥早幼粒白血病MR-2細胞分別接種於RPMI-1640培養液中，於37℃含5％CO2的培養箱內培養傳代，接種於96孔培養板，接種時加不同濃度EGCG，每濃度平行4孔，48小時後MTT還原反應測定腫瘤生長抑制率，結果見表1。
表1 不同濃度EGCG對白血病細胞生長的影響(x±s)
從表1結果看到，EGCG對各種白血病細胞的生長都有較強的抑制作用，而且呈明顯的劑量-效應關係，即隨EGCG濃度的提高，對白血病細胞生長的抑制作用也逐步增強。
細胞凋亡是當前腫瘤學研究的一個熱點，尤其在篩選抗腫瘤的藥物時被廣泛運用。細胞凋亡有著獨特的生化和形態學特徵，通過對被EGCG作用後的各種白血病細胞的死亡形式進行了觀察，結果如下被250-500μg/ml濃度間EGCG作用後各種白血病細胞均出現細胞凋亡所特有的形態學特徵核皺摺，染色質凝集，裂解成碎片後形成由膜包繞的凋亡小體。
被250-500μg/ml濃度間EGCG作用後各種白血病細胞，在以核小體間DNA降解為標誌的凝膠電泳觀察中，均可見典型的DNA條帶，證實EGCG的誘導癌細胞凋亡作用。
流式細胞術是一種先進、精確的定量檢測凋亡細胞的方法。實驗觀察表明，EGCG在250-500μg/ml濃度範圍內，誘導人急性早幼粒白血病NK4細胞，人急性早幼粒白血病HL-60細胞，慢性粒細胞白血病K562細胞，維甲酸耐藥早幼粒白血病MR-2細胞凋亡率分別達到71.85％、75.63％、81.22％、69.12％。結果還表明，EGCG對癌細胞分化阻斷作用主要發生在細胞分化早期。
權利要求
1.一種抗白血病藥物，其特徵在於本發明以茶葉中兒茶素單體-表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)為原料，按常規製劑工藝，製備成濃度範圍為50-500μg/ml的製劑，可以是口服藥，也可以是注射劑。
2.根據權利要求1所述的藥物，其特徵在於更優選的濃度範圍為250-500μg/ml。
全文摘要
一種抗白血病藥物。本發明採用表沒食子兒荼素沒食子酸酯(EGCG)為主要原料的抗白血病藥物,按常規製劑工藝,製備成濃度範圍為50－500μg/ml的製劑。本發明為適合於治療白血病人的臨床藥物劑型,特別是注射劑,用以治療急性早幼粒白血病,慢性粒細胞白血病,維甲酸耐藥早幼粒細胞白血病;是一種白血病基因調控劑,具有顯著抑制急性早幼粒白血病細胞HL－60的生長,並可誘導其凋亡的作用,且無積蓄、無任何毒副作用,具有高效、低毒的抗急性、慢性、耐藥性的特點,是一種理想的白血病治療藥物。
文檔編號A61P35/00GK1377644SQ0110698
公開日2002年11月6日 申請日期2001年4月2日 優先權日2001年4月2日
發明者曹進, 趙燕, 劉箭衛 申請人:中南大學