一種用於預防和治療急性放射性肺炎的藥物的製作方法

2023-10-25 03:08:02

一種用於預防和治療急性放射性肺炎的藥物的製作方法
【專利摘要】本發明公開了一種用於預防和治療急性放射性肺炎的藥物，所述藥物的療效成分為原花青素，所述藥物為濃度為2.5-3.75mg/ml的原花青素溶液，所述原花青素溶液包括純度為95%～99%的原花青素和無菌生理鹽水，所述藥物服用方式為霧化吸入；本發明對急性放射性肺損傷具有很好的防治和治療效果，是一種較有發展前途的植物原料藥，即原花青素可用來預防和治療急性放射性肺炎，霧化吸入原花青素可有效實現肺靶向給藥，在直達作用部位的同時還避免產生首過效應，減少藥物用量，減輕或避免藥物不良反應，從而達到預防甚至治療急性放射性肺炎的目的。
【專利說明】一種用於預防和治療急性放射性肺炎的藥物
【技術領域】
[0001]本發明屬於生物藥學領域，具體涉及一種用於預防和治療急性放射性肺炎的藥物。
【背景技術】
[0002]放射性肺炎是肺癌、食管癌等胸部惡性腫瘤患者放療過程中部分肺組織接受一定劑量的電離輻射後由炎性因子介導的急性自發性免疫樣反應，是患者接受放射治療後出現的重要併發症。肺是輻射中度敏感器官，放射治療可使腫瘤附近的肺組織因受到的放射劑量超過其發生生物效應的閾值而產生不同程度的肺損傷。[0003]放射性肺炎隨著放療的持續進行，患者白細胞、紅細胞出現不同程度血液毒性，出現乏力、噁心、腹瀉、脫髮等現象，治療部位皮膚發紅、乾燥，逐漸形成色素沉著。在放療開始後I個月內出現急性放射性肺炎症狀；放射性肺炎晚期可出現咳嗽和肺功能減退等症狀，常因呼吸道感染而誘發，甚至導致死亡。放射性肺損傷嚴重限制了胸部腫瘤放療的劑量，從而直接影響了腫瘤局部控制率、患者的預後及放療後的生存質量，如何降低放射性肺損傷的發生率，是臨床上亟待解決的問題。
[0004]放射性肺損傷的發病機制至今尚沒有被完全認識。現在一般認為放射性肺炎是一種淋巴細胞性肺泡炎，是肺組織受射線照射後，由組織內多種細胞及細胞因子共同參與的作用結果。通過細胞內和細胞間的信息傳遞和信號放大，從而啟動一系列動態的病理生理過程。
[0005]如上所述，放射性肺炎是一種淋巴細胞性肺泡炎，肺泡是主要損傷部位，基本病變為肺充血、水腫、肺間質增厚、肺泡間隔內血管充血和增厚、肺泡腔萎陷變小，肺泡壁及腔內見中性粒細胞浸潤，毛細血管內皮腫脹，動脈壁透明變硬。後期肺組織由纖維結締組織所替代，肺泡腔逐漸萎縮閉合，細胞數目減少(參見曹珍山.大鼠胸部受到20GyY線胸放射後肺組織的形態計量學改變[J].中華放射醫學與防護雜誌.1996，16 (3).167.)。
[0006]目前認為放射性肺炎的發生與肺泡II型細胞的損傷和血管內皮細胞的損傷關係密切。肺放射損傷有四種靶細胞:肺泡巨噬細胞，成纖維細胞，內皮細胞，肺泡II型細胞。當肺II型細胞和內皮細胞受照射後誘導巨噬細胞釋放促纖維化因子TGF-β 1、H)GF，繼而通過一系列自分泌和旁分泌過程刺激成纖維細胞增生和合成細胞基質蛋白。TGF-βΙ由血小板、巨噬細胞、內皮細胞等產生，能趨化炎性細胞及單核巨細胞，合成釋放H)GF、TNF、IL-U IL-6等細胞因子，擴大生物效應；還能促進成纖維細胞趨化，產生膠原和纖維連接蛋白，抑制膠原降解。這些細胞因子相互制約，相互作用，構成複雜的肺內細胞因子網絡。其中，TGF-β I被認為在放射性損傷中發揮了十分重要的作用，是諸多參與放射性肺損傷因子中頗受關注的細胞因子，能夠將生物效應擴大，參與放射性肺損傷的發生與發展(參考 Franko AJ, Sharplin J, Chahary A, et al.1mmunohistochemical localizationof transforming growth factor beta and tumor necrosis factor alpha in thelungs of fibrosis-prone and ^non-fibrosing』 mice during the latent period andearly phase after irradiation [J].Radiat Res, 1997,147 (2):245-256.)。研究表明，發生放射性肺損傷患者的血清TGF-β含量也持續升高(參考Novakova-Jiresova A,Van Gameren MM , Coppes RP, et al.Transforming growth factor-beta plasmadynamics and post-1rradiation lung injury in lung cancer patients [J].RadiotherOncol, 2004, 71 (2):183-189.)，提示血清TGF-β可作為放射性肺損傷的預測因子，並且可通過降低血清TGF-β濃度來減輕肺組織的損傷。
[0007]目前治療放射性肺炎的方法有:腎上腺皮質激素、抗生素、吸氧和祛痰等對症治療。臨床上最常採用腎上腺皮質激素聯合抗生素治療急性放射性肺炎，雖有一定療效但大劑量應用激素毒副作用較大，如誘發二重感染、撤藥症候群、消化道出血、免疫抑制等，患者往往無法耐受。
[0008]原花青素是迄今為止人類從自然界中發現的最強有力的天然抗氧化劑之一，具有極強的抗氧化及清除自由基能力活性，以其高效、低毒、高生物利用度而著稱。原花青素清除自由基的能力是VE的50倍、VC的20倍，其作用機制主要是能夠與自由基交換一個氫原子或電子，與欲清除的自由基有近似的氧化還原電位，生成的自由基通過離域化而穩定。因此原花青素具有超強的延緩衰老和增強免疫力的作用，同時還具有細胞保護、抗動脈粥樣硬化、保護心腦血管系統、預防白內障、抗潰瘍、抗糖尿病、改善免疫抑制、治療視網膜病變、抗腫瘤、抗衰老等一系列優良的生物藥理學作用。近年來，也有相關採用原花青素在醫療用途的專利申請，例如，專利CN200510042958.8在製備和治療結腸炎藥物的新用途，專利CN200910154161.5在治療抗抑鬱藥的用途以及專利CN201210502442.7在製備治療糖尿病藥物中的應用，但目前尚未見有關原花青素用於治療急性放射性肺炎的研究報導。

【發明內容】

[0009]為克服上述現有技術的不足，本發明提供了一種副作用小、治癒率高的用於預防和治療急性放射性肺炎的藥物。
[0010]為解決以上技術問題，本發明採用以下技術方案:一種用於預防和治療急性放射性肺炎的藥物，所述藥物的療效成分為原花青素。
[0011]一種優化方案，所述藥物為濃度為2.5-3.75mg/ml的原花青素溶液。
[0012]進一步地，所述原花青素溶液包括原花青素和無菌生理鹽水。
[0013]進一步地,所述原花青素的純度為95%~99%。
[0014]進一步地，所述藥物的服用方式為霧化吸入。
[0015]本發明採用以上技術方案後，與現有技術相比，具有以下優點:經過大量動物實驗發現，原花青素能明顯改善小鼠放射性肺損傷時炎症細胞浸潤，對急性放射性肺損傷具有很好的防治和治療效果，是一種較有發展前途的植物原料藥，即原花青素可用來預防和治療急性放射性肺炎。
[0016]經過動物實驗發現，霧化吸入原花青素可有效實現肺靶向給藥，在直達作用部位的同時還避免產生首過效應，減少藥物用量，減輕或避免藥物不良反應，從而達到預防甚至治療急性放射性肺炎的目的。
[0017]下面結合附圖和實施例對本發明進行詳細說明。【專利附圖】

【附圖說明】
[0018]圖1是HE染色病理圖片，其中A為第4周空白對照組，B為第4周時的模型組，C為第8周時的模型組，D為第8周時原花青素組。
[0019]圖2是TGF-B的免疫組化結果，其中A為空白對照組，B為模型組，C為原花青素組，D為地塞米松聯合頭孢氨苄組。
[0020]圖3是IL-6的免疫組化結果，其中A為空白對照組，B為模型組，C為原花青素組，D為地塞米松聯合頭孢氨苄組。
【具體實施方式】
[0021]下列實施例中，原花青素為紅棕色粉末，購置於天津市尖峰天然產物有限公司，批號2000646，純度95%~99% ;下列實施例中採用活塞式壓縮機霧化器(PISTON COMPRESSORZEBULIZER CHU CHU TRAIN.MODEL 3008, Manufactured by San Up S.A, made in Argentina)及自製密閉玻璃裝置。
實施例[0022]1、實驗方法
1.1分組健康雄性SD大鼠64隻，體重(200±20)g，由濰坊醫學院動物研究中心提供，飼養於SPF級大鼠飼養室，受試前籠養7天以適應環境。於照射前I周將64隻SD雄性大鼠隨機分為空白對照組、模型組、原花青素(治療)組和地塞米松聯合頭孢氨苄西藥(陽性對照)組，每組均為16隻。
[0023]1.2藥物配製:準確稱取適量原花青素加入無菌生理鹽水中溶解，攪拌均勻，濃度為2.5-3.75mg/ml的原花青素溶液。現配現用，避光保存。原花青素組於照射後第I天開始經肺吸入原花青素。陽性對照藥物:地塞米松聯合頭孢氨苄，地塞米松購於鄭州市卓峰製藥有限公司，產品批號:13010326。頭孢氨苄購於山東淄博新達製藥有限公司，產品批號:131076。正常成人用量為5 mg/d，按50kg體重計算，大鼠用藥相當於5倍成人有效劑量，0.05mg/100 g,大鼠每100g體重給藥lml,同時給予頭孢氨節,正常成人用量為Ig / d ,按50kg體重計算，大鼠給藥相當於10倍成人有效劑量，即20mg / 100go按上述規格給予大鼠霧化吸入，空白對照組和模型組給予等量生理鹽水代替。
[0024]霧化步驟如下:霧化前，禁食12h，將大鼠置於密閉玻璃裝置內，精確稱取原花青素(0.075g/只)，迅速溶解到20ml無菌生理鹽水中，充分攪拌混勻，連接好霧化裝置，接通電源，打開壓縮機開關，觀察噴霧是否均勻，每日一次，待玻璃裝置中藥物完全散去，將大鼠放回。進行清潔前，先關閉壓縮機開關，後拔掉電源插頭，自然晾乾。。
[0025]1.3造模空白對照組佯裝照射，其餘各組大鼠進行急性放射性肺損傷造模。用戊巴比妥鈉0.12ml / 100g腹腔注射麻醉大鼠，使其平躺於照射臺上。調整照射野上至大鼠前肢兩腋窩中點連線，下至劍突水平，照射面積4.5cm*4cm,用6MV-X線全胸單次照射，300cGy/min,總劑量為20Gy，於濰坊市濰坊醫學院附屬醫院放療科進行，照射前加速器室用紫外線照射消毒，照射完畢將大鼠送回動物室，繼續常規飼養。
[0026]1.4取材分別於照射開始1、4、6、8周末，每組隨機取4隻大鼠腹腔注射2%戊巴比妥鈉0.12 ml / 100g，將大鼠麻醉後，作氣管插管，行支氣管肺泡灌洗。支氣管肺泡灌洗液(BALF, Bronchoalveolar lavage fluid,直接取自肺泡，能夠比較直接地反映肺實質的變化，因而是放射性肺損傷研究的重要手段之一)。檢測支氣管肺泡灌洗液中白細胞、TGF-β UIL-6的含量。經腹主動脈取血Iml和4ml，分別用作血常規和血清細胞因子檢測。後者4°C，4000r/min離心，取上清液，-20°C保存，用於檢測細胞因子。分別取右肺中葉置於甲醛溶液中，固定24h，常規石蠟包埋、切片，HE染色，光鏡觀察病理改變。用免疫組化法檢測肺組織TGF-β UIL-6的表達。TGF-β 1、IL_6的檢測按照ELISA檢測試劑盒說明書進行。選取右肺下葉組織，切取3塊組織大小為0.lcm*0.lcm*0.1cm，戊二醛固定，製成電鏡超薄切片，透視鏡觀察組織超微結構改變。
[0027]1.5統計學分析應用SPSS19.0統計分析軟體對實驗數據進行統計學處理。常規進行方差齊性檢驗、正態性檢驗。實驗結果以均數土標準差(? 土 s)表示，P < 0.05表示差異有統計學意義。
[0028]2、實驗結果
2.1 一般情況空白對照組:大鼠皮毛細密光滑，行為活躍，飲食如常，無呼吸急促。全胸照射I周后，大鼠開始出現拱背、豎毛和活動減少等症狀，其中，模型組:後頸背部毛髮稀疏出現掉毛現象，地塞米松聯合頭孢氨苄組發現拱背、豎毛及活動減少現象。照射後2-4周，原花青素組:皮毛細密和光滑程度較模型組有所改善，其餘各照射組均相繼出現胸背部脫毛現象，攝食及活動相對較少，在實驗觀察期間發生非取材死亡現象，解剖時發現雙肺充血、腫脹明顯，全 肺呈現暗紅色並有少量胸腔積液。
[0029]2.2肺組織外觀形態空白對照:肺組織呈粉紅色，表面紅潤、光滑。照射後4周發現，模型組:部分肺組織呈現暗紅色，與正常肺組織對比，整個肺臟可見明顯出血、充血水腫，胸腔可見淡黃色液體。原花青素組較地塞米松聯合頭孢氨苄組差異不大，較模型組改善明顯。
[0030]2.3血常規結果顯示:
模型組血液中白細胞、紅細胞計數明顯低於其它三組，而治療組差異不大。而BALF中白細胞計數顯著升高，紅細胞計數明顯低於其他三組，而治療組差異不大，見表1-4。
[0031]表1放射性損傷對不同時期大鼠血液中白細胞計數的影響(X109/L)(%，? 土S)
【權利要求】
1.一種用於預防和治療急性放射性肺炎的藥物，其特徵在於:所述藥物的療效成分為原花青素。
2.如權利要求1所述的一種用於預防和治療急性放射性肺炎的藥物，其特徵在於:所述藥物為濃度為2.5-3.75mg/ml的原花青素溶液。
3.如權利要求2所述的一種用於預防和治療急性放射性肺炎的藥物，其特徵在於:所述原花青素溶液包括原花青素和無菌生理鹽水。
4.如權利要求1，2或3所述之一的一種用於預防和治療急性放射性肺炎的藥物，其特徵在於:所述原花青素的純度為95%~99%。
5.如權利要求1所述的一種用於預防和治療急性放射性肺炎的藥物，其特徵在於:所述藥物的服用方式為 霧化吸入。
【文檔編號】A61K31/353GK103933028SQ201410146569
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2014年4月14日 優先權日:2014年4月14日
【發明者】張維芬, 馮佔芹, 黃雪萍, 鄭增娟 申請人:張維芬