使用seh抑制劑來治療神經性疼痛的製作方法
2023-10-11 04:05:59
使用seh抑制劑來治療神經性疼痛的製作方法
【專利摘要】本發明提供了用於治療、減輕、緩解和/或抑制神經性疼痛的方法，所述方法是通過向有需要的患者口服、靜脈內或鞘內施用有效量的可溶性環氧化物水解酶(「sEH」)的抑制劑來實現的。所治療的神經性疼痛選自由以下組成的組：帶狀皰疹後神經痛，三叉神經痛，局灶性周圍神經損傷，和痛性感覺缺失，由於中風或腫塊、脊髓損傷或多發性硬化引起的中樞性疼痛，和由於糖尿病、HIV或化療引起的周圍神經病變。
【專利說明】使用SEH抑制劑來治療神經性疼痛
[0001]相關申請的交叉引用
[0002]本申請要求2012年2月I日提交的美國臨時申請號61/593，811的優先權，所述美國臨時申請出於所有目的整體併入本文中。
[0003]關於在聯邦贊助的研究或開發下作出的對發明的權利的聲明
[0004]本發明是根據由環境健康科學研究所授予的批准號ES002710下通過政府支持來產生。政府享有本發明中的某些權利。
[0005]發明背景
[0006]疼痛一般分為傷害性疼痛和神經性疼痛。傷害性疼痛響應於組織損傷或潛在的組織損傷信號來源於神經途徑，並且包括炎症性疼痛。神經性疼痛往往與神經系統內的功能障礙有關。不幸的是，治療一種疼痛的藥物不一定治療其它疼痛。例如，抗炎症劑不能減輕被截肢者感受到的「幻肢」疼痛。
[0007]在哺乳動物中，炎症性疼痛主要由花生四烯酸(有時簡稱為「AA」)驅動。炎症性疼痛由於組織損傷，如切傷或細菌感染而發生，在所述組織損傷後，大量AA通過磷脂酶的作用而在損傷部位釋放。與這個事件同時發生的是環氧合酶-2 (C0X-2)的上調，所述環氧合酶-2是將所釋放的AA轉化為前列腺素的酶，所述前列腺素是有效的疼痛產生分子。所釋放的AA通過環氧合酶(「C0X」)、脂氧合酶(「L0X」)和細胞色素P450表氧化酶來代謝以分別產生前列腺素、白三烯和環氧二十碳三烯酸(「EET」)。這些材料可進一步代謝，例如它們可被轉化成生物活性醯胺和偶聯物。炎症性疼痛與AA的Cox-2代謝物的產生有很好的相關性，這些代謝物是前列腺素系列分子。因此，疼痛的完全減輕在抑制可誘導的Cox-2後發生，而疼痛的完全減輕往往歸因於一種關鍵調節劑PGE2的減少。
[0008]與此相反，在神經性疼痛中，幾乎沒有由花生四烯酸、環氧合酶和前列腺素介導的炎症過程的跡象。神經性疼痛是由顯示感覺症狀和體徵的周圍或中樞神經系統(或兩者)的病變引起的。根本原因包括感染、外傷、代謝異常、化療、手術、放射、神經毒素、遺傳神經退行性病變、神經壓迫和腫瘤浸潤。神經性疼痛的機制例如在Zhuo，MolecularPain(2007)3:14 ；Campbell 和 Meyer, Neuron(2006)52(I):77-92 ；Dworkin 等人,ArchNeurol (2003) 60:1524-34 中進行了描述。
[0009]最常被證明有效阻斷神經性疼痛的藥物製劑是三環類抗抑鬱藥(TCA)。然而，這些藥物在一些患者中完全無效，並且在其它患者中只是部分有效的。因此，神經性疼痛的治療是一種未滿足的和不斷增長的臨床需要。TCA具有本領域中眾所周知的許多缺點。然而，因為神經性疼痛是一種使人衰弱和難以治療的病狀，所以在缺乏具有較少有害作用的藥劑的情況下，TCA儘管有缺點，但是一直被使用。
[0010]所需要的是可以治療神經性疼痛的化合物。意外地，本發明滿足了這種和其它需要。
[0011]發明簡述
[0012]本發明提供了用於通過向有需要的患者施用可溶性環氧化物水解酶(「sEH」)的抑制劑來治療、減輕、緩解和/或抑制神經性疼痛的方法。
[0013]因此，在一個方面，本發明提供了用於緩解有需要的受試者的神經性疼痛的方法，所述方法包括對所述受試者施用有效量的可溶性環氧化物水解酶(「sEH」)的抑制劑，從而減輕所述受試者的所述神經性疼痛。
[0014]在一些實施方案中，神經性疼痛選自由以下組成的組:帶狀皰疹後神經痛，三叉神經痛，局灶性周圍神經損傷，和痛性感覺缺失，由於中風或腫塊、脊髓損傷或多發性硬化引起的中樞性疼痛，和由於糖尿病、HIV或化療引起的周圍神經病變。
[0015]在一些實施方案中，神經性疼痛是慢性的。在一些實施方案中，所述受試者正經歷神經性疼痛。
[0016]在一些實施方案中，所述藥劑是通過口服施用。在一些實施方案中，所述藥劑是靜脈內施用。在一些實施方案中，所述藥劑是鞘內施用。在一些實施方案中，所述藥劑被直接輸送到受損的神經。
[0017]在一些實施方案中，神經性疼痛是中樞神經性疼痛。在一些實施方案中,神經性疼痛是周圍神經性疼痛。
[0018]在一些實施方案中，受試者或患者是人。
[0019]附圖簡述
[0020]圖1顯示了作用於大鼠神經性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導I型糖尿病模型的UCl 153 (APAU)的劑量(0、l、3、10、30、100mg/kg(mpk))和時間依賴效應，其中低於基線的60%是疼痛狀態並且基線的100%是未檢測到疼痛增加。(結果是6隻大鼠的平均值。)
[0021]圖2顯示了在3小時後作用於大鼠神經性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導I型糖尿病模型的UC1153的劑量反應曲線(基線反應的％)，其中低於基線的60%是疼痛狀態並且基線的100%是未檢測到疼痛增加。(結果是6隻大鼠的平均值。)
[0022]圖3顯示了作用於大鼠神經性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導I型糖尿病模型大鼠神經性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導I型糖尿病模型的UC1153(10mpk)和塞來昔布(1mpk)的劑量和時間依賴，其中低於基線的60%是疼痛狀態並且基線的100%是未檢測到疼痛增加。(結果是6隻大鼠的平均值)。與1mpk塞來昔布相比，1mpk UC1153可以顯著減輕神經性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導I型糖尿病大鼠模型的疼痛反應。
[0023]圖4顯示了從針對人sEH的放射測定法(tDPPO)獲得的抑制劑的抑制常數(Ki)和IC5tl (上表)；下表顯示了來自針對大鼠SEH和人SEH的LC/MS-MS測定法(EET)的抑制劑的IC500
[0024]圖5顯示了大鼠的1mpk下的UC1153(APAU)的藥代動力學曲線。大鼠通過灌胃以UC1153治療。UC1153溶於富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。結果是6隻大鼠的平均值。
[0025]圖6顯示了大鼠的UC2383 (KLA)的藥代動力學曲線。大鼠通過灌胃以UC2383治療。UC2383溶於富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。結果是6隻大鼠的平均值。
[0026]圖7顯示了大鼠的UC2414(KLB)的藥代動力學曲線。大鼠通過灌胃以UC2414治療。UC2414溶於富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。結果是6隻大鼠的平均值。
[0027]圖8顯示了作用於大鼠神經性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導I型糖尿病模型的UC2414的劑量(Impk)和時間依賴效應，其中低於基線的60%是疼痛狀態並且基線的100%是未檢測到疼痛增加。大鼠通過灌胃以UC2414治療。UC2414溶於純PEG400。(結果是6隻大鼠的平均值)。
[0028]圖9顯示了作用於大鼠神經性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導I型糖尿病模型的UC2389的劑量(Impk)和時間依賴效應，其中低於基線的60%是疼痛狀態並且基線的100%是未檢測到疼痛增加。大鼠通過灌胃以UC2389治療。UC2389溶於純PEG400。(結果是6隻大鼠的平均值)
[0029]圖10示出了小鼠不同sEH抑制劑的藥代動力學曲線。小鼠通過灌胃用三種抑制劑盒治療。抑制劑溶於富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。結果是6隻小鼠的平均值。
[0030]圖11顯示了大鼠的UC2695 (KLC)和UC2383 (KLA)的藥代動力學曲線。大鼠通過灌胃用 UC2695 (KLC)和 UC2383 (KLA)治療。UC2695 (KLC)和 UC2383 (KLA)溶於富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。結果是6隻大鼠的平均值。
[0031]圖12顯示了作用於大鼠神經性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導I型糖尿病模型的UC2414、UC2372和UC 2389的劑量(Impk)和時間依賴效應，其中低於基線的60%是疼痛狀態並且基線的100%是未檢測到疼痛增加。大鼠通過灌胃用藥物治療。藥物溶於純PEG400。(結果是6隻大鼠的平均值。)
[0032]圖13示出來自使用14，15-EET作為人和大鼠sEH的底物的LC/MS-MS測定的抑制劑的IC5Q。
[0033]圖14顯示了作用於大鼠神經性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導I型糖尿病模型的UC2389的劑量(0.1mpk)和時間依賴效應，其中低於基線的60%是疼痛狀態並且基線的100%是未檢測到疼痛增加。大鼠通過灌胃用UC2389治療。UC2389溶於富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。(結果是6隻大鼠的平均值。)
[0034]圖15顯示了作用於大鼠神經性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導I型糖尿病模型的UC2696的劑量(0.1和0.3mpk)和時間依賴效應，其中低於基線的60%是疼痛狀態並且基線的100%是未檢測到疼痛增加。大鼠通過灌胃用UC2696治療。UC2696溶於富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。(結果是6隻大鼠的平均值。)
[0035]圖16顯示了作用於大鼠神經性疼痛的鏈脲佐菌素(STZ)誘導I型糖尿病模型的UC2391和UC2696的劑量(0.1mpk)和時間依賴效應，其中低於基線的60%是疼痛狀態並且基線的100%是未檢測到疼痛增加。大鼠通過灌胃用UC2391和2696治療。UC2391和2696溶於富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。(結果是6隻大鼠的平均值。)
[0036]發明詳述
[0037]1.概述
[0038]酶「可溶性環氧化物水解酶」(「sEH」)作用於使抗炎和鎮痛代謝物降解的花生四烯酸途徑的重要分支。順式-環氧二十碳三烯酸(「EET」)是通過細胞色素P450表氧化酶合成的生物介體,並通過sHl水解成相應的二元醇，這些二元醇是促炎症性的。EET和sEH的抑制劑(術語「sEH抑制劑」有時縮寫為「sEHI 」)以前已發現可用作抗炎症藥。
[0039]意外地，我們現在已經發現sEHI也可用於減輕神經性疼痛。我們使用了在用於神經性疼痛的眾所周知的模型中量化疼痛的行之有效的方法，以闡明抑制sEH，並因此增加EET和/或含有環氧官能團的其它分子的生理濃度對於疼痛感覺的效果。我們證明了 sEH抑制劑意外地通過以前鮮為人知的機制減少了患有神經性疼痛的所治療動物的疼痛感覺。sEH的抑制劑、EET和/或多不飽和脂肪酸像含有環氧官能團的分子和其前體，例如2-花生四烯酸甘油、環氧脂類的乙醇醯胺和/或它們的組合提供作為單獨的治療劑在治療、改善、緩解、減少和/或抑制神經性疼痛的獨特優勢。我們證明，sEH抑制劑是鎮痛藥並且在治療和控制神經性疼痛，包括慢性神經性疼痛，包括中樞和周圍神經性疼痛中具有廣泛的治療效果。
[0040]所使用的神經性疼痛模型通常被認為不涉及炎症過程。這是因為，化學和分子分析不顯示環氧合酶的上調，並且眾所周知的抗炎劑，如COX抑制劑不能有效地減少神經性疼痛。因為Sffi抑制劑非常有效地減少炎症和傷害性疼痛並且因為sEHI減少關鍵的疼痛產生前列腺素PGE2的釋放，我們推測sHl抑制劑將有效地減少神經性疼痛。
[0041]神經病變通過向動物注射細菌毒素(鏈脲佐菌素)來誘導，所述細菌毒素已知可殺死胰腺β細胞，從而防止胰島素的產生，所述胰島素是調節血糖水平的關鍵肽。其結果是，這些動物具有葡萄糖的較高血漿水平，並成為糖尿病，具有伴隨的神經性疼痛狀態。這種神經病變與由花生四烯酸釋放和前列腺素和其它炎症介體產生所驅動的炎症性疼痛狀態無關。然後，我們使用臨床相關疼痛定量方法來測量在誘導神經病變之前和之後這些動物的疼痛閾值，隨後使用sEH抑制劑來進行幹預。
[0042]I1.定義
[0043]單位、前綴和符號以它們的國際單位制(SI)公認的形式來表示。數字範圍包括定義該範圍的數字。除非另有指明，否則核酸從左至右以5』至3』方向書寫；胺基酸序列從左至右以氨基至羧基方向書寫。本文所提供的標題不是對本發明的各個方面或實施方案的限制，這些方面或實施方案可以通過參考整個說明書來獲得。因此，緊接在下文中定義的術語通過參考整個說明書中來更加全面地定義。未在本文中定義的術語具有本領域技術人員所理解的其普通含義。
[0044]「烷基」是指具有所指示的碳原子數目的直鏈或支鏈、飽和、脂族基團。烷基可以包括任意數目的碳原子，例如 Cl-2> C卜3' C卜4' C卜5' C^6-, C^7-, C卜8、C卜9、。卜10、C2_3、C2-4> ^2-5' C2-6->C3_4、C3_5、C3_6、C4_5、C4_6和C5_6。例如，C^6燒基包括，但不限於，甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戍基、異戍基、己基等。燒基也可以是指具有至多20個碳原子的燒基，例如，但不限於:庚基、羊基、壬基、癸基等。燒基可以是取代的或未取代的。
[0045]「烷氧基」指的是具有氧原子的烷基，所述氧原子將烷基連接到連接點:烷基-O-。作為烷基，烷氧基可具有任何合適數目的碳原子，例如(V6。烷氧基包括，例如，甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、2- 丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戍氧基、己氧基等。燒氧基可進一步被本文描述的各種取代基取代。燒氧基可以是取代的或者未取代的。
[0046]「齒素」是指氟、氯、溴和碘。
[0047]「滷代烷基」是指如上定義的烷基，其中一些或全部氫原子被替換成滷原子。作為烷基，滷代烷基可以具有任何合適數目的碳原子，例如Cm。例如，滷代烷基包括三氟甲基、氟甲基等。在一些實例中，術語「全氟」可以用來定義其中所有的氫被氟取代的化合物或基團。例如，全氟甲烷是指1，1，1-三氟甲基。
[0048]「滷代烷氧基」指的是其中一些或全部氫原子被滷原子取代的烷氧基。作為烷基，滷代烷氧基可具有任何合適數目的碳原子，例如CV6。烷氧基可以被1、2、3或更多個滷素取代。當所有的氫被滷素，例如氟取代時，所述化合物是全取代的，例如，全氟化的。滷代烷氧基包括，但不限於，三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基、全氟乙氧基等。
[0049]「雜烷基」指的是任何合適長度並且具有I至3個雜原子如N、0和S的烷基。另外的雜原子也可能是有用的，包括，但不限於，B、Al、Si和P。雜原子也可被氧化，例如，但不限於，-S(O)-和-S(O)2_。例如，雜烷基可包括醚、硫醚和烷基胺。雜烷基的雜原子部分可以取代烷基的氫以形成羥基、巰基或氨基。或者，雜原子部分可以是連接原子，或者插入於兩個碳原子之間。
[0050]「環烷基」是指包含3至12個環原子，或所指示的原子數目的飽和或部分不飽和、單環、稠合二環或橋連多環組件。環烷基可以包括任意數目的碳原子，例如C3_6、c4_6、c5_6、C3_8、C4_8、C5_8、C6_8、C3_9、C3_1(l、C3_n和C3_12。飽和單環環燒基環包括，例如，環丙基、環丁基、環戊基、環己基和環辛基。飽和的二環和多環環烷基環包括，例如，降冰片烷、[2.2.2] 二環辛烷、十氫化萘和金剛烷。環烷基也可以部分不飽和的，在環中具有一個或多個雙鍵或三鍵。部分不飽和的代表性的環烷基包括，但不限於，環丁烯、環戊烯、環己烯、環己二烯(1，3-和
I,4-異構體)、環庚烯、環庚二烯、環辛烯、環辛二烯(1，3-、1，4-和1，5-異構體)、降冰片烯及降冰片二烯。當環烷基是飽和的單環C3_8環烷基時，示例性基團包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基和環辛基。當環烷基是飽和的單環C3_6環烷基時，示例性基團包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基和環己基。環烷基可以是取代的或未取代的。
[0051]「亞環烷基」是指連接至少兩個其它基團的如上所定義的環烷基，即二價烴基。與亞環烷基相連的兩個基團可以連接到亞環烷基的相同的原子或不同的原子。代表性的亞環烷基包括，但不限於，環丙基、環丁基、環戊基、環己基、和環辛基。亞環烷基可以是取代的或未取代的。
[0052]「雜環烷基」是指具有3至12個環成員和I至4個雜原子N、0和S的飽和環系統。另外的雜原子也可以是有用的，包括，但不限於，B、Al、Si和P。雜原子也可被氧化，例如，但不限於，-S(O)-和-S(O)2_。雜環烷基可以包含任何數目的環原子，例如，3至6個、4至6個、5至6個、3至8個、4至8個、5至8個、6至8個、3至9個、3至10個、3至11個或3至12個環成員。任何合適數目的雜原子可以包括在雜環烷基中，如1、2、3或4個，或I至2個、I至3個、I至4個、2至3個、2至4個，或3至4個。雜環烷基可包括基團例如氮丙啶、氮雜環丁烷、吡咯烷、哌啶、氮雜環庚烷、氮雜環辛烷、奎寧環、吡唑烷、咪唑烷、哌嗪(1，2_、1，3-和1，4-異構體)、環氧乙烷、氧雜環丁烷、四氫呋喃、噁烷(四氫吡喃)、氧雜環庚烷、硫雜丙環、硫雜環丁烷、硫雜環戊烷(四氫噻吩)、噻烷(四氫噻喃)、噁唑烷、異噁唑烷、噻唑烷、異噻唑烷、二氧雜環戊烷、二硫戊環、嗎啉、硫代嗎啉、二噁烷或二噻烷。雜環烷基也可以稠合到芳族或非芳族環系統，以形成成員，包括但不限於，二氫吲哚。雜環烷基可以是未取代的或取代的。例如，雜環燒基可以被Cu燒基或氧代基(=O)等等取代。
[0053]雜環烷基可以通過環上的任意位置進行連接。例如，氮丙啶可為1-或2-氮丙啶、氮雜環丁烷可以是1-或2-氮雜環丁烷、吡咯烷可以是1-、2_或3-吡咯烷、哌啶可以是1-、
2-,3-或4-哌啶、吡唑烷可以是1-、2_、3-或4-吡唑烷、咪唑烷可以是1-、2_、3-或4-咪唑烷、哌嗪可以是1-、2_、3-或4-哌嗪、四氫呋喃可以是1-或2-四氫呋喃、噁唑烷可以是2_、
3-,4-或5-噁唑烷、異噁唑烷可以是2-、3-、4_或5-異噁唑烷、噻唑烷可以是2-、3_、4_或5-噻唑烷、異噻唑烷可以是2-、3-、4_或5-異噻唑烷，並且嗎啉可以是2-、3_或4-嗎啉。
[0054]當雜環烷基包括3-8個環成員和I至3個雜原子時，代表性成員包括，但不限於，吡咯烷、哌啶、四氫呋喃、噁烷、四氫噻吩、噻烷、吡唑烷、咪唑烷、哌嗪、噁唑烷、異噁唑烷、噻唑烷、異噻唑烷、嗎啉、硫代嗎啉、二噁烷和二噻烷。雜環烷基也可以形成具有5至6個環成員和I至2個雜原子的環，其中代表性的成員包括，但不限於，吡咯烷、哌啶、四氫呋喃、四氫噻吩、吡唑烷、咪唑烷、哌嗪、噁唑烷、異噁唑烷、噻唑烷、異噻唑烷和嗎啉。
[0055]「芳基」是指具有任何合適數量的環原子與任何合適數量的環的芳族環系統。芳基可以包括任意合適數目的環原子，例如，6個、7個、8個、9個、10個、11個、12個、13個、14個、15個或16個環原子，以及6至10個、6至12個，或6至14個環成員。芳基可以是單環、稠合以形成二環或三環基團，或由一個鍵連接以形成聯芳基。代表性芳基包括苯基、萘基和聯苯基。其它芳基包括苄基，其具有亞甲基連接基團。一些芳基具有6至12個環成員，如苯基、萘基或聯苯基。其它芳基具有6至10個環成員，例如苯基或萘基。一些其它芳基具有6個環成員，例如苯基。芳基可為取代的或未取代的。
[0056]「鹽」是指在本發明的方法中使用的化合物的酸或鹼式鹽。藥學上可接受的鹽的代表性例子是無機酸(鹽酸、氫溴酸、磷酸等)鹽，有機酸(乙酸、丙酸、穀氨酸，檸檬酸等)鹽，季銨(甲基碘，乙基碘等)鹽。應理解藥學上可接受的鹽是無毒的。合適的藥學上可接受的鹽的其它信息可以在Remington’s Pharmaceutical Sciences,第 17版，Mack PublishingCompany, Easton, Pa., 1985中找到,它通過引用併入本文。
[0057]本發明的酸性化合物的藥學上可接受的鹽是用鹼形成的鹽，即陽離子鹽諸如鹼金屬鹽和鹼土金屬鹽，如鈉、鋰、鉀、鈣、鎂以及銨鹽，如銨、三甲基銨、二乙基銨和三_(羥甲基)_甲基-銨鹽。
[0058]類似酸加成鹽，如無機酸、有機羧酸和有機磺酸，如鹽酸、甲磺酸、馬來酸的酸加成鹽也是可能的，只要鹼性基團如吡啶基構成結構的一部分。
[0059]所述化合物的中性形式可以通過用鹼或酸接觸所述鹽，並按照常規方式分離母體化合物來再生。化合物的母體形式在某些物理性質方面不同於各種鹽形式，例如在極性溶劑中的溶解度，但在其它方面，對於本發明目的，鹽等同於化合物的母體形式。
[0060]本發明的某些化合物具有不對稱碳原子(光學中心)或雙鍵；外消旋體、非對映體、幾何異構體和單獨的異構體均意欲包括在本發明的範圍內。
[0061]「水合物」是指複合到至少一個水分子的化合物。本發明的化合物可以與I至10個水分子複合。
[0062]「順式-環氧二十碳三烯酸」(「EET」)是通過細胞色素P450表氧化酶合成的生物介體。如下面進一步論述的，雖然使用未修飾的EET是最優選的，但是EET衍生物，如醯胺和酯(天然的和合成的)、EET類似物和EET光學異構體都可以在本發明的方法中使用，無論是在純的形式和這些形式的混合物。為了便於參考，如本文使用的術語「EET」指的是所有的這些形式，除非上下文另有要求。
[0063]「環氧化物水解酶」 ("EH ； 」EC 3.3.2.3)是在α β摺疊水解酶家族中的酶，其添加水到被稱為環氧化物的3員環醚。水添加到環氧化物產生相應的1，2-二醇(Hammock，B.D.等人，於 Comprehensive Toxicology:B1transformat1n (Elsevier, New York),第283-305 頁(1997) ；0esch, F.Xenob1tica 3:305-340(1972))。四個主要 EH 是已知的:白三烯環氧化物水解酶、膽固醇環氧化物水解酶、微粒體EH( 「mEH」)，和可溶性EH( "sEH",以前稱為胞漿EH)。白三烯作用於白三烯A4，而膽固醇EH使與膽固醇的5，6-環氧化物相關的化合物水合。微粒體環氧化物水解酶將單取代的、1，1-二取代的、順式-1，2-二取代的環氧化物和環狀系統上的環氧化物代謝成其相應的二醇。由於其廣泛的底物特異性，這種酶被認為在改善環氧化物的毒性中發揮顯著作用。解毒反應通常降低化合物的疏水性，從而得到更具極性，從而可分泌的物質。
[0064]「可溶性環氧化物水解酶」(「sffi」)是一種環氧化物水解酶，其在許多細胞類型中將EET轉化成稱為二羥基二十碳三烯酸(「DHET」)的二羥基衍生物。鼠科sEH的克隆和序列闡明於 Grant 等人，J.B1l.Chem.268(23):17628-17633(1993)。人 sEH 序列的克隆、序列和登錄號闡明於 Beetham 等人,Arch.B1chem.B1phys.305 (I): 197-201 (1993)。NCBI Entrez核苷酸登錄號L05779闡明編碼所述蛋白質的核酸序列，以及5』非翻譯區和3』非翻譯區。所述基因的進化和命名在Beetham等人，DNACell B1l.14 (I):61-71 (1995)論述。可溶性環氧化物水解酶代表示在齧齒動物與人類(Arand等人，FEBSLett.,338:251-256(1994))之間在超過90%同源性的單一高度保守的基因產物。可溶性EH與mEH只具有非常遠的關係，並且使不在循環系統上的廣泛環氧化物水合。與由π￡Η在潛在有毒的環氧化物的降解中發揮的作用相反，Sffi被認為在內源性化學介體的形成或降解中發揮作用。除非另外指明，否則如本文所用，術語「可溶的環氧化物水解酶」和「sEH」是指人的sHL
[0065]除非另外指明，否則如本文所用，術語「sEH抑制劑」(也簡稱為「sEHI」)或「sffi的抑制劑」指的是人sHl的抑制劑。優選地，所述抑制劑在所述抑制劑抑制sHl至少50 %的濃度下還不抑制微粒體環氧化物水解酶的活性超過25 %，並且更優選地在所述濃度下不抑制mEH超過10 %。為了便於參考，除非上下文另有要求，否則如本文所用，術語「 sEH抑制齊U」包括被代謝為sEH的活性抑制劑的前藥。為進一步方便參考，並且除上下文另有要求，否則本文提及一種化合物作為sEH的抑制劑包括提及保留作為sEH抑制劑的活性的所述化合物的衍生物(如所述化合物的酯)。
[0066]「生理條件」是指具有允許所感興趣的細胞的營養或生長的條件(如溫度、pH和滲透壓摩爾濃度)的細胞外環境。
[0067]「微RNA」 ( 「miRNA」)是指許多真核生物中的在轉錄後水平下負調節其互補mRNA的18-25個核苷酸長度的小的、非編碼RNA。參見例如Kurihara和Watanabe, Proc NatlAcad Sci USA 101 (34): 12753-12758 (2004)。微 RNA 在 20 世紀 90 年代早期首次在蛔蟲線蟲(C.elegans)中發現，並且目前在許多物種，包括人類中是已知的。如本文所用，它是指外源施用的miRNA，除非特別說明，或上下文另有要求。
[0068]術語「共同施用」是指在血液中同時存在兩種活性劑。被共同施用的活性製劑可以同時(即，同時)或順序輸送。
[0069]術語「患者」、「受試者」或「個體」可互換地指哺乳動物，例如，人類或非人類哺乳動物，包括靈長類動物(例如，猴、泛類人猿、猩猩)、家養哺乳動物(例如，貓科動物、犬科動物)、農業哺乳動物(例如，牛、羊、豬、馬)和實驗室哺乳動物或齧齒動物(例如，鼠屬、鼠科、兔形目、倉鼠)。
[0070]術語「減少」、「抑制」、「減輕」、「緩解」是指在神經性疼痛的症狀的可檢測的降低，如由受過訓練的臨床觀察者來確定。神經性疼痛的減少可以通過自我評估(例如，通過所述患者的報告)、通過採用在本領域中公知的疼痛測量試驗(例如，痛覺過敏和/或異常性疼痛的測試)和/或客觀地(例如，使用功能性磁共振成像或f-MRI)來測量。神經性疼痛減少的確定可以通過在治療前後進行患者狀況的比較來作出。
[0071]「治療有效量或劑量」或「治療足夠量或劑量」或「有效或足夠量或劑量」指的是產生針對其來施用的治療效果的劑量。精確劑量將取決於治療目的並且由本領域技術人員使用已知技術來確定(參見例如Lieberman, Pharmaceutical DosageForms (第 1-3 卷，1992) ；Lloyd, The Art, Science and Technology of PharmaceuticalCompounding(1999) ；Pickar, Dosage Calculat1ns (1999)；和 Remington:The Scienceand Practice of Pharmacy,第 20版，2003，Gennaro編，Lippincott, Williams&Wilkins)。在致敏細胞中，治療有效劑量通常可以比非致敏細胞的常規治療有效劑量低。
[0072]II1.減輕神經性疼痛的方法
[0073]本發明提供了緩解神經性疼痛的方法，通過向有需要的受試者施用治療有效量的sEH抑制劑，從而緩解神經性疼痛。
[0074]在一些實施方案中，正用she抑制劑治療的個人不是接受以下疾病的治療:動脈粥樣硬化、其它炎性病症，或需要抑制特別是在內皮細胞上的粘附分子表達的其它病狀。
[0075]A.sEH的抑制劑
[0076]在本發明的方法中有用的Sffi抑制劑包括任何合適的Sffi抑制劑。在一些實施方案中，sHl抑制劑可以是式I的化合物:
[0077]
(R1<XWR2
H H(I)
[0078]其中每個R1可獨立地為H、齒素、C^6燒基、Cp6燒氧基、CV6齒代燒基、C1^齒代燒氧基、-O-芳基、具有5-6個環成員和至少I個N雜原子和I個O雜原子作為環成員的雜環烷基、-OH、-NO2或-C (0) 0R3，其中至少I個R1不是H ;X可為-C (0)-或-S (0) 2_ ;R2可為C2_6烷基、C1^6滷代烷基、具有3-6個環成員的環烷基、具有5-6個環成員和至少2個N雜原子作為環成員並且被可為苄基或-C (0) -C1^6烷基的成員取代的CV6烷基-雜環烷基、任選地被OH取代的苯基，或具有5-6個環成員和至少I個N雜原子作為環成員並且任選地被滷素取代的Cch6烷基-雜芳基；R3可為H或C^6烷基；下標η可為I至5的整數；這樣使得當R1是
4-0CF3時，則R2可為C2_6烷基、C2_6滷代烷基、具有3-6個環成員的環烷基、具有5-6個環成員和至少2個N雜原子作為環成員並且被可為苄基或-C(O)-Ch烷基的成員取代的Cu烷基-雜環烷基、任選地被OH取代的苯基，或具有5-6個環成員和至少I個N雜原子作為環成員並且任選地被滷素取代的Cch6烷基-雜芳基；或其鹽和異構體。
[0079]在一些實施方案中，每個R1可為滷素、C2_6滷代烷基，或CV6滷代烷氧基。在其它實施方案中，每個 R1 可為 F、Cl、Br、1、CF3> CF2CF3^ CF (CF3) 2、CH (CF3) 2 或 0CF3。在一些其它實施方案中，每個R1可為C1、CF3*0CF3。在其它實施方案中，每個R1可為CF3，或0CF3。
[0080]在一些實施方案中，R2可為C2_6烷基、Ch6滷代烷基，或具有3-6個環成員的環烷基。在其它實施方案中，R2可為乙基、丙基、異丙基、丁基、仲-丁基、異-丁基、叔丁基、戊基、戊-2-基、戊-3-基、異戊基、新戊基、己基、CF3、CH2CF3、(CH2) 2CF3、環丙基、環丁基、環戊基或環己基。在一些其它實施方案中，R2可為異丙基、仲-丁基、(S)-仲-丁基、戊-3-基或環丙基。在其它實施方案中，R2可為異丙基或(S)-仲丁基。
[0081]在一些實施方案中，X可為-C(O)-。在其它實施方案中，X可為-S(O)2_。
[0082]在一些實施方案中，化合物可為下式任何一個:
[0083]
【權利要求】
1.一種緩解有需要的受試者的神經性疼痛的方法，所述方法包括向所述受試者施用治療有效量的式I化合物:
其中 每個R1獨立地選自由以下組成的組:H、滷素、C^6烷基、Cp6烷氧基、Cu滷代烷基、C^6滷代烷氧基、-O-芳基、具有5-6個環成員和至少I個N雜原子和I個O雜原子作為環成員的雜環烷基、-OH、-NO2和-C (O) 0R3，其中至少I個R1不是H ; X選自由_C (O)-和-S (O) 2-組成的組； R2選自由以下組成的組:C2_6烷基、CV6滷代烷基、具有3-6個環成員的環烷基、具有5-6個環成員和至少2個N雜原子作為環成員並且被選自由苄基和-C (O) -C1^6烷基組成的組的成員取代的C^6烷基-雜環烷基、任選地被OH取代的苯基，以及具有5-6個環成員和至少I個N雜原子作為環成員並且任選地被滷素取代的Cch6烷基-雜芳基； R3選自由H和CV6烷基組成的組； 下標η是I至5的整數； 這樣使得當R1是4-0CF3時，則R2選自由以下組成的組:C2_6烷基、C2_6滷代烷基、具有3-6個環成員的環烷基、具有5-6個環成員和至少2個N雜原子作為環成員並且被選自由苄基和-C (O) -C1^6烷基組成的組的成員取代的Cu烷基-雜環烷基、任選地被OH取代的苯基，以及具有5-6個環成員和至少I個N雜原子作為環成員並且任選地被滷素取代的^?烷基-雜芳基； 或其鹽和異構體，從而緩解所述受試者的所述神經性疼痛。
2.如權利要求1所述的方法，其中每個R1選自由以下組成的組:滷素、C2_6滷代烷基和C1-S滷代烷氧基。
3.如權利要求1所述的方法,其中每個R1選自由以下組成的組:F、Cl、Br、1、CF3>CF2CF3' CF (CF3) 2 > CH (CF3) 2 和 OCF3。
4.如權利要求1所述的方法，其中每個R1選自由以下組成的組:(:1、0&和0CF3。
5.如權利要求1所述的方法，其中每個R1選自由以下組成的組=CF3和0CF3。
6.如權利要求1所述的方法，其中R2選自由以下組成的組:C2_6烷基、C^6滷代烷基，和具有3-6個環成員的環烷基。
7.如權利要求1所述的方法，其中R2選自由以下組成的組:乙基、丙基、異丙基、丁基、仲-丁基、異-丁基、叔丁基、戍基、戍_2_基、戍-3_基、異-戍基、新戍基、己基、CF3、CH2CF3、(CH2) 2CF3、環丙基、環丁基、環戊基和環己基。
8.如權利要求1所述的方法，其中R2選自由以下組成的組:異丙基、仲-丁基、(S)_仲-丁基、戍-3-基和環丙基。
9.如權利要求1所述的方法，其中R2選自由以下組成的組:異丙基和(S)-仲-丁基。
10.如權利要求1所述的方法，其中X是-C(O)-。
11.如權利要求1所述的方法，其中X是-S(O) 2-。
12.如權利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Ia:
13.如權利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Ib:
14.如權利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Ic:
15.如權利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Id:
16.如權利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Ie:
17.如權利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式If:
18.如權利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Ig:
19.如權利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Ih:
20.如權利要求1所述的方法，其中所述化合物選自由以下組成的組: 1-(1-異丁醯基哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)脲、 (S)-1-(1-(2-甲基丁醯基)哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)脲、 1-(1-( 丁基磺醯基)哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)脲，和 (S)-1-(1-(2-甲基丁醯基)哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)脲。
21.如權利要求1所述的方法，其中所述化合物選自由以下組成的組: 1-(1-異丁醯基哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)脲、 (S)-1-(1-(2-甲基丁醯基)哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)脲，和 (S)-1-(1-(2-甲基丁醯基)哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)脲。
22.如權利要求1所述的方法，其中所述藥劑口服施用。
23.如權利要求1所述的方法，其中所述藥劑靜脈內施用。
24.如權利要求1所述的方法，其中所述藥劑鞘內施用。
25.如權利要求1所述的方法，其中所述神經性疼痛是中樞神經性疼痛。
26.如權利要求1所述的方法，其中所述神經性疼痛是周圍神經性疼痛。
27.如權利要求1所述的方法，其中所述神經性疼痛選自由以下組成的組:帶狀皰疹後神經痛，三叉神經痛，局灶性周圍神經損傷，和痛性感覺缺失，由於中風或腫塊、脊髓損傷或多發性硬化引起的中樞性疼痛，和由於糖尿病、HIV或化療引起的周圍神經病變。
28.如權利要求1所述的方法，其中所述受試者在施用時正經歷神經性疼痛。
【文檔編號】A61K31/17GK104136022SQ201380010112
【公開日】2014年11月5日 申請日期:2013年2月1日 優先權日:2012年2月1日
【發明者】B·D·哈莫克, K·S·李, B·因傑奧盧, K·華格納 申請人:加利福尼亞大學董事會