一種治療酒精性肝損傷的微生態固體製劑及其製備方法
2023-10-08 00:18:39 1
一種治療酒精性肝損傷的微生態固體製劑及其製備方法
【專利摘要】本發明公開了一種用於治療酒精性肝損傷的微生態固體製劑的製備方法，通過將長雙歧桿菌NQ-1501菌株製成菌粉，並將菌粉與輔料混合製成製劑，該製劑可以達到治療酒精性肝損傷且調整腸道菌群的效果，有效緩解酒精對人體的傷害。
【專利說明】一種治療酒精性肝損傷的微生態固體製劑及其製備方法
【技術領域】
[0001]本發明屬於生物製藥【技術領域】，具體涉及一種可以治療酒精性肝損傷且調節腸道菌群的微生態固體製劑及其製備方法。
【背景技術】
[0002]在世界範圍內，人均酒精消耗量呈上升趨勢，飲酒所導致的各種問題已成為較嚴重的公共衛生問題之一。據調查，長期酗酒者的死亡率比一般居民高1-3倍。在歐美等國家，酒精性肝病是中青年死亡的主要原因之一，美國每年死於酒精相關性疾病者達8.5萬人。肝臟是人體重要的器官之一，在代謝中有著極其重要的作用。當乙醇進人肝細胞後，經三種酶系途徑被氧化為乙醛。過量飲酒，大量乙醛對肝細胞有明顯的毒性作用，從而直接和間接導致肝損傷。
[0003]人的胃腸中布滿了數量達10萬億的細菌，是人體細胞的十倍，其中80%以上都是對人體有益的，這些有益菌會粘附在腸道黏膜上，為人體形成一道保護屏障，稱為菌膜屏障。而酒是一種刺激性的物質，它們會使腸道失去菌膜保護，腸內毒素以及有害菌就會侵蝕腸胃黏膜，引發各種胃腸疾病。
[0004]因此，過量飲酒會引起各種腸胃不適甚至病變，除了酒精對腸胃黏膜的刺激外，主要原因其實是腸胃菌群失衡。
[0005]國外對該方面的研究較早。1997年Adawi等利用羅伊氏乳桿菌R2LC、鼠李糖乳桿菌DSM6594、發酵乳桿菌8704:3、羅伊氏乳桿菌108、植物乳桿菌DSM9843+精氨酸餵食肝損傷的小鼠，結果發現植物乳桿菌DSM9843+精氨酸組會減少肝臟活性酶(總膽紅素、鹼性磷酸酶、丙氨酸轉氨酶、天冬氨酸氨基轉移酶)的釋放量。2009年，據俄羅斯北部一所醫科大學和美國路易斯維爾大學醫學院的研究報導，短期補充兩歧雙歧桿菌和植物乳桿菌8PA3 可以改善酗酒者的腸道健康。益生菌對酗酒者有潛在的健康效應，可能有助於改善肝臟酶的活性。
[0006]國內在國外研究的基礎上進一步深化。2005年北京佑安醫院人工肝治療培訓中心的段鍾平利用動物實驗證明了乳酸菌對酒精引起的胃黏膜和肝臟損傷的保護作用。2007年揚州大學的肖麗霞等利用動物實驗證實了乳酸菌的酒後保肝護肝作用。2008年揚州大學的王慧晶對篩選獲得 3 株(S.thermophilus GP1、E.faecium ST1、L.rhamnosus 綠杆)具有抗氧化活性的乳酸菌以急性酒精肝損傷小鼠進行驗證，乳酸菌表現出保護肝臟損傷的特徵。
[0007]目前在國內已有相關技術，CN201110432768.2，CN201210005581.9，以上的專利技術涉及一種液體飲品，其缺點是益生菌在液體中的存活時間較短。以上的專利技術使用的複合菌種增加生產成本，且效果一般。本發明會克服以上技術的缺點，不僅存活時間長而且在治療酒精性肝損傷的同時還可以調節腸道菌群。
【發明內容】
[0008]本發明目的是提供一種 可以治療酒精性肝損傷且調節腸道菌群的微生態固體製劑的製備方法，包括以下步驟:
[0009]⑴長雙歧桿菌NQ-1501在其發酵培養基中經厭氧培養，發酵溫度為40°C，最佳發酵時間為8h ；
[0010]其中發酵培養基配方為:1.2%乳糖，0.8%牛肉膏，0.4%檸檬酸三胺，0.4%乙酸鉀， 0.04%硫酸鎂，0.05%L-半胱氨酸鹽酸鹽，0.08%吐溫_80，水按所需培養基的量加入；
[0011 ] ⑵將所得發酵液15000g離心30分鐘，棄去上清液，得到溼菌泥，加入保護劑，攪拌均勻，傾注進凍幹機中凍幹，得到白色粉末狀菌粉；
[0012]其中保護劑的配方為:在300ml體系中加入20ml60%脫脂奶粉，5ml5%澱粉；
[0013]⑶將長雙歧桿菌NQ-1501菌粉與輔料澱粉按照1:9的比例混合，製成製劑。 [0014]在本發明的一個具體技術方案中，將長雙歧桿菌NQ-1501菌粉和輔料澱粉，按照 1:9的比例充分混合，用壓片機壓製成兩面扁平的片劑，平均片重0.4g，片劑Ig重，活菌數為200億左右，成年人的用量為I日2片，30日為I療程。
[0015]在本發明的一個具體技術方案中，將長雙歧桿菌NQ-1501菌粉和輔料澱粉，按照 1:9的比例充分混合，裝在以明膠為主要原料製成的圓筒狀膠殼中的膠囊中，膠囊體積為 0.48ml, I膠囊體積活菌數為200億左右，成年人的用量為I日2粒，30日為I療程。
[0016]在本發明的一個具體技術方案中，將長雙歧桿菌NQ-1501菌粉和輔料澱粉，按照 1:9的比例充分混合，製成的粉末狀散劑，裝在鋁塑袋中，每袋lg，活菌數為200億左右，成年人的用量為I日2g，30日為I療程。
[0017]本發明的另一個目的是提供一種可以治療酒精性肝損傷的微生態固體製劑，該製劑還可以調節腸道菌群。
[0018]本發明的另一個目的是提供了前述微生態固體製劑在製備治療酒精性肝損傷的藥物中的應用。
[0019]本發明的另一個目的是提供了長雙歧桿菌NQ-1501在製備酒精性肝損傷的藥物中的應用。
[0020]由於採用了上述製備方法，本發明的有益效果是:
[0021]1、長雙歧桿菌NQ-1501菌株性能優良，發酵用時短，凍幹穩定性較好，菌粉活菌數較多，且無毒、拮抗效果明顯，在治療酒精性肝損傷的同時調節腸道菌群，且效果明顯；
[0022]2、製備方法實用性強、操作簡單、周期短、步驟簡便合理，具有成本低、產率高、適宜規模化生產等優點。
【具體實施方式】
[0023]實施例1.長雙歧桿菌NQ-1501菌株菌粉的生產工藝
[0024]選取雙奇公司的長雙歧桿菌NQ-1501菌株作為製劑的唯一菌株。
[0025]長雙歧桿菌NQ-1501菌株的最佳發酵培養基:1.2%乳糖，0.8%牛肉膏，0.4%檸檬酸三胺，0.4%乙酸鉀，0.04%硫酸鎂，0.05%L-半胱氨酸鹽酸鹽，0.08%吐溫-80。
[0026]長雙歧桿菌NQ-1501在其發酵培養基中經厭氧培養，發酵溫度為40°C，最佳發酵時間為8h。將所得發酵液15000g離心30分鐘，棄去上清液，得到溼菌泥，加入保護劑，攪拌均勻，傾注進凍幹機中凍幹，得到白色粉末狀菌粉。保護劑的配方為:在300ml體系中加入 20ml60%脫脂奶粉，5ml5%澱粉。[0027]實施例2.治療酒精性肝損傷的微生態固體製劑的製作
[0028]將長雙歧桿菌NQ-1501菌粉和輔料澱粉，按照1:9的比例充分混合，製成片劑、膠
囊及散劑。
[0029]a、將長雙歧桿菌NQ-1501菌粉和輔料澱粉，按照1:9的比例充分混合，用壓片機壓製成兩面扁平的片劑，平均片重0.4g，片劑Ig重，活菌數為200億左右，成年人的用量為I 日2片，30日為I療程。
[0030]b、將長雙歧桿菌NQ-1501菌粉和輔料澱粉，按照1:9的比例充分混合，裝在以明膠為主要原料製成的圓筒狀膠殼中的膠囊中，膠囊體積為0.48ml, I膠囊體積活菌數為200億左右，成年人的用量為I日2粒，30日為I療程。
[0031]C、將長雙歧桿菌NQ-1501菌粉和輔料澱粉，按照1:9的比例充分混合，製成的粉末狀散劑，裝在鋁塑袋中，每袋lg，活菌數為200億左右，成年人的用量為I日2g，30日為I療程。
[0032]實施例3.治療酒精性肝損傷的微生態固體製劑的保肝護肝特性
[0033]一、實驗材料:
[0034]1.實驗製劑:
[0035]含長雙歧桿菌NQ-1501的治療酒精性肝損傷的微生態固體製劑，由內蒙古雙奇藥業股份有限公司提供。
[0036]2.實驗動物:
[0037]成年Wistar雄性小鼠，體重18±22克，由內蒙古大學動物實驗中心提供。
[0038]3.實驗用試劑盒:
[0039]甘油三酯(TG酶法)測試盒，血清中極低密度脂蛋白(VLDL) ELISA試劑盒。
[0040]二、實驗方法:
[0041]將小鼠隨機分為5組，即空白對照組、模型組、受試樣品組，受試樣品組又分為高 (90mg/kg.BW)、中(45mg/kg.Bff)、低(22.5mg/kg.Bff)劑量組，每組 10 只。每日經口灌胃給予受試樣品，空白對照組和模型組給予純淨水。將小鼠每周稱重兩次，按體重調整受試樣品量。模型組和各樣品組於實驗結束時一次灌胃給予50%的乙醇，空白對照組給予純淨水， 禁食16h。小鼠腹腔注射60mg/kg BW的戊巴比妥鈉溶液麻醉後摘眼球採血。根據《保健食品法律法規》中的相關規定，測定動物血清中的甘油三酯(TG)、血清極低密度脂蛋白(VLDL) 兩個指標，即可判斷產品是否對酒精性肝損傷具有保護作用。
[0042]三、結果與分析:
[0043]表1酒精性肝損傷的微生態固體製劑對小鼠肝臟功能指標的影響
[0044]
【權利要求】
1.一種微生態固體製劑在製備治療酒精性肝損傷的藥物中的應用，其特徵在於微生態固體製劑由如下方法配製:⑴長雙歧桿菌NQ-1501在其發酵培養基中經厭氧培養，發酵溫度為40°C，最佳發酵時間為8h ；其中發酵培養基配方為:1.2%乳糖，0.8%牛肉膏，0.4%檸檬酸三胺，0.4%乙酸鉀，0.04% 硫酸鎂，0.05%L-半胱氨酸鹽酸鹽，0.08%吐溫-80，水按所需培養基的量加入；⑵將所得發酵液15000g離心30分鐘，棄去上清液，得到溼菌泥，加入保護劑，攪拌均勻，傾注進凍幹機中凍幹，得到白色粉末狀菌粉；其中保護劑的配方為:在300ml體系中加入20ml60%脫脂奶粉，5ml5%澱粉；⑶將長雙歧桿菌NQ-1501菌粉與輔料澱粉按照1:9的比例混合，製成製劑。
2.根據權利要求1所述的微生態固體製劑的應用，其中所述製劑形式為片劑、膠囊或散劑。
3.權利要求1中所述的微生態固體製劑在製備治療酒精性肝損傷和調節腸道菌群的藥物中的應用。
4.長雙歧桿菌NQ-1501在 製備治療酒精性肝損傷的藥物中的應用。
【文檔編號】A61K35/74GK103599135SQ201310526031
【公開日】2014年2月26日 申請日期:2013年10月30日 優先權日:2013年10月30日
【發明者】劉彥民, 黃少磊, 李康寧, 程超, 王春穎, 馮謙, 李曉軍, 劉斌, 龔虹, 李雲旭, 馬曉紅, 邢會霞, 馬躍英 申請人:內蒙古雙奇藥業股份有限公司